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FACULTAD DE INGENIERÍA
DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS
1. OBJETIVO
2. PROCEDIMIENTOS
COLIFORMES TOTALES
a. Prueba Presuntiva
1. Mezclar muy bien el alimento y realizar tres diluciones de igual forma
que para el recuento en placa.
2. Pipetear 1mL de cada uno de las diluciones en tubos que contengan
10mL de Bilis Verde Brillante Lactosa con tubo Durham, utilizando tres
tubos por dilución (Figura 1).
3. Mezclar suavemente e incubar por 24-48 horas a 35ºC ± 2ºC.
4. Leer los tubos: positivos, los que presentan gas y turbidez; negativos, los
que no presentan estos parámetros o presentan solamente uno de los
dos.
b. Prueba Confirmativa
5. Sembrar por estría una asada de los tubos positivos en agar EMB
6. Incubar as placas invertidas a 35ºC ± 2ºC. por 24 horas
7. Anotar los tubos positivos que dieron positivo la prueba confirmatoria
(colonias fermentadoras de la lactosa).
8. Buscar en la Tabla 1, que se usa cuando se siembra por triplicado 1mL
de muestra en cada una de las diluciones. El NMP se expresa por mL o
g.
COLIFORMES FECALES
3. RESULTADOS E INTERPRETACIÓN.
4. BIBLIOGRAFÍA
5. PARA INVESTIGAR
2
10 ml 10
Gramo
s
1ml 1ml
90 ml
Agua
pepto 9 ml 9 ml
na A.Pep APep
10-2 10-3
10-1
1 1
1 ml ml
ml
Incu
bar
3
TABLA 1. TABLA DE NMP CUANDO SE USAN 9 TUBOS PARA MUESTRAS
DILUIDAS