Juan Diego Ramírez Castro

Julio Cesar Beltrán Ortiz

Universidad de la Amazonía
Facultad de Ciencias Básicas
Programa de Química
Laboratorio de Química orgánica I

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

JUAN DIEGO RAMIREZ CASTRO1--Juan.ramirez@udla.edu.co--, JULIO CESAR BELTRÁN -

-ju.beltran@udla.edu.co--ORTIZ2, LICETH NATALIA CUELLAR ÁLVAREZ3.
1&2Estudiantes en formación del programa de química de la universidad de la

Amazonía. 3docente de la universidad de la amazonia.

RESUMEN

Se llevaron a cabo técnicas cromatográficas para la separación de compuestos, una de ellas es la

cromatografía de capa delgada donde se utilizó una placa cromatográfica la cual contenía las

muestras a examinar que se envaso junto con hexano y luego se revelo su recorrido en cámara de

yodo y así se evaluó la polaridad de las muestras problemas y posteriormente se realizó la

cromatografía de columna, que consistió en una separación de colorantes en la fase estacionaria

donde actúo el gel de sílice como separador con la ayuda de etanol el cual hace la función de

eluyente en la fase móvil.

Palabras clave: fase estacionaria, fase móvil, técnicas cromatográficas.

ABSTRACT: Chromatographic techniques were carried out for the separation of compounds, one

of them is the thin layer chromatography where a chromatographic plate was used, which

contained the samples to be examined that were packaged together with hexane and then revealed

in iodine chamber. and thus, the polarity of the sample problems was evaluated and subsequently

the column chromatography was carried out, which consisted of a separation of dyes in the

stationary phase where the silica gel acts as a separator with the help of ethanol which acts as the

eluent in the mobile phase.

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Julio Cesar Beltrán Ortiz

Key words: stationary phase, mobile phase, chromatographic techniques.

INTRODUCCIÓN aislar un compuesto el grosor puede variar

entre 0,5-0,2mm. Esta capa es fijada a una

Las investigaciones acerca de determinadas
placa o lamina firme de vidrio, aluminio o
sustancias llevan consigo una seria de pasos
plástico que actúa como soporte” [1]. De esta
mediante los cuales se halla el compuesto de
manera la fase móvil o eluyente que es el
interés (analito), para ello se implementan
disolvente transita a través de la estacionaria
técnicas de tratamiento y separación de
haciendo un recorrido que se determina
compuestos contenidos en una muestra,
utilizando la cámara cromatografía, a las
aplicadas generalmente a mezclas, entre los
distancias recorridas por cada muestra en
cuales se encuentra el de nuestro interés. Para
relación con la distancia que recorrió el
separación de sustancias el método-técnica
disolvente se les denomina Rt, llamado “razón
más común es la cromatografía, que se puede
de frentes”, determinado dicha razón
implementar para la separación de sólidos,
podemos conocer cuál de las sustancias es más
gases y líquidos; cromatografía sólido-líquido,
polar. También, se utiliza “La cromatografía
cromatografía líquido-líquido, cromatografía
liquida en columna (CLC) es una variedad de
líquido-gas y cromatografía sólido-gas. De
la cromatografía en la que la fase móvil es
esta manera se hace utilidad de la técnica de
líquida y pasa a través de la fase estacionaria,
cromatografía en capa fina, “La técnica de
solida o liquida, que esta retenida en un
separación de TLC consta de un sistema de
recinto cilíndrico” [2], lo cual consiste en hacer
dos fases, una sólida (fase estacionaria) que se
pasar la fase móvil mediante la acción de la
aplica en forma de capa delgada, absorbente,
gravedad, por la fase estacionaria haciendo
usualmente de entre 0,10 a 0,25mm de grueso
que algunas sustancias sean arrastradas por
para fines analíticos y en los casos que se desea
dicho disolvente.

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MATERIALES Y REACTIVOS En cuanto a los reactivos se utilizaron los

siguientes: acetato de etilo, hexano, orto

Para el desarrollo de la practica de
toluidina, acetofenona, silica, algodón, violeta
laboratorio fue necesario hacer uso del
de cristal, naranja de metilo y trietilamina.
siguiente material: 1 cromatofolio de sílice

gel, 3 capilares 1 cámara de elución, 3 pipetas,

una bureta que se utilizó como columna

cromatográfica, 1 soporte universal, 4

Erlenmeyer, 1 beacker, placas con tinción,

lampara UV y 1 cámara de yodo.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN relación con la utilizadas en la práctica de

laboratorio, arrojando los resultados de la

 Cromatografía de Capa Delgada
siguiente manera: la muestra más polar es la

Orto toluidina con un Rf=0,82, la menos polar

El solvente recorrió una distancia total de 4,5 cm
fue la Acetofenona con un Rf=0,96 y por lo
Distancia Orto toluidina: 3,7 cm Solvente: 4,5 cm
tanto para la mezcla la polaridad de esta se
3,7
Rf= = 0.82 encuentra intermediada entre la polaridad de
4,5

las otras dos muestras con un Rf=0,89, de esto

Distancia Mezcla: 4 cm Solvente: 4,5 cm
se deduce que el eluyente es de muy alta
4,𝑜
Rf= = 0.89 polaridad para la separación. Es de tener en
4,5

cuenta que a la hora de hacer utilidad de dicha

Distancia Acetofenona: 4,3 cm Solvente: 4,5 cm
técnica cromatográfica, varios factores
4,3
Rf= = 0.96
4,5 influyen en la obtención de los resultados,

Mediante la técnica de cromatografía en capa como los siguientes: tipo de adsorbente,

fina, se determinó la muestra más polar en eluyente (el disolvente puede generar un

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mayor impacto en una sustancia química que sustancias se dieron de la siguiente manera,

en otra, esto hace que la transporte una primero se separó el acetato de etilo, luego el

distancia en un determinado tiempo, naranja de metilo y por último el violeta de

diferentes a la otra sustancia), así como las cristal, teniendo en cuenta que las especies

condiciones de la placa (el material de soporte individuales quedan retenidas en la fase

de la placa puede ser flexible sin generar estacionaria en función de las interacciones

cambios en la fase estacionaria), temperatura que tienen lugar tales como: adsorción

(afecta el valor de retención), vapor de superficial, solubilidad, carga, y el tiempo de

saturación, la placa puede ser de aluminio, retención depende de las características de

vidrio o plástico, espesor de la placa, entre cada sustancia; este es un tipo de

otros; además la existencia de los errores cromatografía en fase normal, pues la fase

sistemáticos influyen también en la obtención móvil es no polar y la fase estacionaria es polar

de buenos resultados. En cuanto a la (gel de sílice).

cromatografía en columna, las separaciones de

CONCLUSIÓN CUESTIONARIO

BIBLIOGRAFÍA  ¿Cómo se elige el eluyente para

cromatografía en capa fina?

[1] Guarnizo Franco, a., & Martinez Yepes, p.

(2006). Experimentos de Química Se busca un eluyente en base a la sustancia a

Orgánica (1st ed., p. 101). armenia: elizcom. identificar o purificar, tomando en cuenta la

polaridad de ella, si se tiene una sustancia

[2] Valcarcel Cases, M., & Gómes Hens, A.
polar se elegirá un eluyente polar para que
(1988). Técnicas analíticas de separación (86th
este la pueda correr con facilidad.
ed., p. 437). Barcelona: Editorial Reverté.

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 ¿Por qué se dice que la cromatografía  ¿Qué significa que una sustancia

en capa fina es un criterio parcial y tenga: Rf menor a 0?5, mayor a 0.5 e

no total de identificación? igual a0.5? Rf < 0.5.

Debido a que se llega a tener casos en los que el eluyente es de muy baja polaridad para la

dos muestras corren a la misma velocidad y separación, Rf = 0.5 el eluyente es el

distancia, estas siendo diferentes, por ende, adecuado para la separación y Rf > 0.5 el

no se podrían identificar correctamente por eluyente es de muy alta polaridad para la

ello es un criterio no total de identificación. separación.

 El valor del Rf ¿Depende del

eluyente?

Si porque el valor de Rf es calculado con

la distancia que el eluyente corre la sustancia.