EFECTO SALTING-IN Y SALTIN-OUT

Efecto de las sales sobre la solubilidad de las proteínas

En la química orgánica es muy común separar un líquido orgánico de una
mezcla con agua añadiendo sal. Las sales modifican la estructura del agua e
influyen también en la conformación de las proteínas mediante interacciones
electrostáticas. Esto hace que, en función de la fuerza iónica, las sales puedan
solubilizar o precipitar a las proteínas. Cuando a un sistema proteico se le
adicionan sales neutras en concentraciones menores a 1.0 M, las proteínas
incrementan su solubilidad, esto se conoce como salting in. A concentraciones
mayores que 1.0 M, tienden a precipitar esto se conoce como salting out.
Por ejemplo, si el líquido orgánico y el agua son completamente miscibles, la
adición de sal al sistema puede producir una separación en dos capas líquidas:
una rica en el líquido orgánico y otra en agua. Un ejemplo es la separación de
la mezcla agua-metanol añadiendo carbonato de potasio; sin embargo puede
ocurrir también la precipitación de la sal adicional por la adición de alcohol a
una solución saturada.
SALTING-IN
El salting in es el fenómeno por el cual la concentración de sal aumenta la
solubilidad de la proteína. Hasta cierto punto, la adición de más contraiones (es
decir, el aumento de la fuerza iónica, I) ayuda a disolver una proteína. Esta
técnica se conoce como salting in.
Debido a que las proteínas de diferentes responden de manera diferente a la
misma concentración de sal, tanto salting in y salting-out se pueden usar para
purificar proteínas.
El efecto salting in se da cuando se le adiciona a un sistema proteica
concentraciones menores a 1.0 M de sales neutras. Los cationes y aniones de
estas sales reaccionan con los grupos ionizables de las proteínas y de esta
manera evita que se establezcan interacciones entre las cadenas laterales o
extremos terminales cargados de las proteínas.
Es conocido también como solubilización por salado, es decir, la sal ayuda a
mejorar la solubilidad del soluto en el solvente.
Ejemplo:
La adición de cloruro de sodio en la elaboración de embutido cárnicos, tiene su
efecto sobre las proteínas de la carne; se basa en que la actiomisina es una
proteína insoluble en agua, pero relativamente soluble en soluciones de alta
fuerza iónica. El efecto salting in es Los iones salinos tienen la capacidad de
hidratación y provocan un aumento de la cantidad de agua retenida por la
proteína, aumentando a si la capa de solvatación.

SALTING-OUT
Por el contrario, el efecto “salting-out” es llamado precipitación por salado, que
quiere decir que un exceso de sal ocasiona la pérdida del comportamiento ideal
de la solución y a la competencia de los iones por el agua para solvatarse. Estos
procesos son comúnmente usados en la solubilización y precipitación de
proteínas, También conocido como cristalización antidisolvente, la
cristalización de la precipitación, o ahogando, es un método de separación
de proteínas basado en el principio de que las proteínas son menos solubles en
altas concentraciones de sal. Es la manera más común de precipitar proteínas.
La concentración de sal necesaria para que la proteína se precipite de
la solución es diferente para cada proteína. Este proceso también se utiliza para
concentrar soluciones diluidas de proteínas. La diálisis puede ser usada para
remover la sal si es necesario.
Hay aminoácidos hidrofóbicos y aminoácidos hidrofílicos en las moléculas de
las proteínas. Después del plegamiento de las proteínas en solución acuosa, los
aminoácidos hidrofóbicos forman generalmente las áreas protegidas, mientras
que aminoácidos hidrofílicos interactúan con las moléculas de solvatación y
permiten que las proteínas formen enlaces de hidrógeno con las moléculas de
agua circundantes. Si una cantidad suficiente de la superficie de la proteína es
hidrofílico, la proteína puede ser disuelta en agua.
Cuando la concentración de sal es mayor, algunas de las moléculas de agua son
atraídas por los iones de sal, lo que disminuye el número de moléculas de agua
disponibles para interactuar con la parte de carga de la proteína. Como resultado
de la creciente demanda de las moléculas del disolvente, las interacciones
proteína-proteína son más fuertes que las interacciones disolvente-soluto, las
moléculas de proteínas se coagulan, formando las interacciones
hidrofóbicas entre sí. Este proceso se conoce como la salting out.
La capacidad de las sales neutras para influir en la solubilidad de las proteínas
está en función de la concentración y del número de cargas eléctricas existentes
en los cationes y los aniones aportados por la sal, lo que se conoce como fuerza
iónica. Los cationes y aniones de estas sales reaccionan con los grupos
ionizables de las proteínas y de esta manera evita que se establezcan
interacciones entre las cadenas laterales o extremos terminales cargados de las
proteínas.
La solubilización e insolubilización por salado, son procedimientos importantes
para la separación de mezclas de proteínas, ya que las diferentes proteínas
varían en su respuesta frente a la concentración de sales neutras. Las proteínas
precipitadas por salado retienen su conformación nativa y pueden disolverse de
nuevo, normalmente sin experimentar desnaturalización. El sulfato amónico es
el preferido para precipitar las proteínas por salado, debido a su gran solubilidad
en agua, lo que permite alcanzar fuerzas iónicas muy elevadas.