La Adecuación al uso de los

métodos analíticos
Una Guía de Laboratorio para Validación de Métodos y Temas
Relacionados

● Arrona Tizcareño Diana Guadalupe

● Díaz Vera Susana
● Espejel Deloiza Diego René
● Martínez Cos Isaid Otoniel

1
¿Qué es validar un método?
Es básicamente el proceso para definir
un requisito analítico, y la confirmación
de que cuenta con capacidades
consistentes con las aplicaciones
requeridas. Inherente a esto está la
necesidad de evaluar el desempeño del
método

2
Características de desempeño evaluadas habitualmente
durante la validación del método
● Selectividad
● Límite de detección (LOD) y límite de cuantificación (LOQ)
● Intervalo de trabajo
● Sensibilidad analítica
● Veracidad
Sesgo, recuperación
● Precisión
Repetibilidad, precisión intermedia y reproducibilidad
● Incertidumbre de medida
● Robustez

3
2.2 ¿Cuál es la diferencia entre validación y
verificación?

4
3-¿Por que es necesario validar un método?

5
3.1- Importancia de la medición analítica
Existen en el mundo un sin fin de pruebas y actividades que requieren de la
aprobación analítica para su uso como por ejemplo:

● Asistencia sanitaria
● Control de calidad en los alimentos
● Control de calidad del agua potable
● Análisis de aleaciones metálicas
● Análisis forense

En general muchos aspectos de la vida cotidiana se apoyan de alguna manera en

el trabajo analítico.
6
3.1- Importancia de la medición analítica
En general muchas de estas labores desarrolladas por la química analitica
generan costos elevados, sin embargo, siempre se requiere de tener medidas
correctas que demuestren resultados correctos, pues al no ser así puede acarrear
consecuencias graves que implican desde penalizaciones legales hasta la
ejecución según las legislaciones aplicadas a cada nación. Por ejemplo el
reportes que aseguren la calidad para el consumo de alimentos que consumimos
o de algún fármaco entre otros.

7
3.2-El deber profesional del químico analítico
Los resultados de un análisis siempre deben generar confianza a los clientes que
acudan a estos, por lo cual los laboratorios encargados deben de poder generar
ese grado de confianza demostrando las capacidades técnicas del laboratorio.
Además de que se debe de contar con la capacidad de poder presentar un
informe de tal manera que sea digerible para el cliente, y que cumpla con “la
adecuación de uso” en otras palabras que pueda responder el la parte analitica
del problema solicitado.

8
3.2-El deber profesional del químico analítico
Un resultado analitico apto, siempre va citado con su respectiva incertidumbre
para un determinado nivel de confianza, la cual debe ser de fácil compresión, la
cual se obtiene durante la validación del método.

Otro punto importante es la toma de muestras, a pesar de tener un método

analitico “bondados” y rutinario, los analisis de muestras, pueden complicar a
este. Por lo cual está dentro de las responsabilidades del laboratorio encargado
brindar asesoramiento al cliente sobre la toma de muestras.

9
3.2-El deber profesional del químico analítico
Un estudio de validación del método proporciona beneficios adicionales al
laboratorio que lo realiza. Proporciona un conocimiento sólido y experiencia en
los detalles prácticos para llevar a cabo el método, incluyendo el conocimiento de
las etapas críticas del proceso. La validación da al laboratorio y sus empleados
una mayor confianza en sus propios resultados.

10
3.3-Desarrollo de métodos
El trabajo de validación está precedido por uno o varios métodos además de uno
o varios miembros del personal. Dichos métodos tienen la posibilidad de ser
adaptados a diferentes condiciones de trabajo según las necesidades para
nuevas aplicaciones. Por otro lado, un quimico analitico puede esbozar nuevas
ideas a partir de su conocimiento y experiencia para generar un método
adecuado. Sin embargo esto no garantiza que la validación funcione de manera
adecuada.

11
¿Cuándo debe validarse o verificarse un
método?

12
Validación de un método
*Un método se debe validar cuando se
es necesario demostrar que sus
características son adecuadas para el
uso que se le está dando.
*Debe validarse cuando sea necesario
demostrar la equivalencia de ciertos
resultados obtenidos por ambos
métodos.

13
 Validación de un método
Donde el laboratorio debe validar:
*Métodos no Normalizados
*Métodos diseñados/desarrollados por
el laboratorio
*Métodos normalizados usados fuera
de su ámbito de aplicación
*Ampliaciones o modificaciones de
métodos ya normalizados.

14
Verificación de un método
Para verificar un método tomando
como ejemplo los métodos
normalizados sean ISO o ASTM no se
necesita validar el método utilizado por
el laboratorio, pero el laboratorio debe
verificar el desempeño del método
como lo detalla la norma ISO/IEC
17025 en el apartado 5.4.2.

15
Verificación de un método
ISO/IEC 17025 en el apartado 5.4.2: …El
laboratorio debe confirmar que puede operar
adecuadamente los métodos normalizados
antes de introducir los ensayos o
calibraciones.

16
Verificación de un método
También es necesaria la verificación cuando
hay cambios importantes, como el uso de un
equipo
nuevo (pero similar), traslado de equipos,
etc.
Contrario a los laboratorios clínicos los
ensayos se realizan con procedimientos
más comerciales que fueron validados con
anterioridad por los fabricantes y deben de
ser verificados por el usuario al final.
17
Verificación de un método
ISO 15189: los procedimientos de
examen usados sin
modificaciones deben estar
sujetos a una verificación
independiente antes de ser
usados como métodos de rutina.

18
¿Cómo debe validarse un método?
Anexo A. Protocolo para la documentación de un
método

Este formato está basado en la norma ISO 78-2 [83],

pero contiene algunos consejos adicionales sobre
calibración, control de calidad y control de documentos.
El Anexo A es, únicamente, orientativo y debería
adaptarse a cualquier requerimiento especial.
•A.1.1 Actualización y resumen de la revisión: está
concebida para hacer posible realizar cambios mínimos
en el texto, emplee como registro de que así se ha
hecho.

19
Anexo A. Protocolo para la documentación de un
método A.1.2 Actualizaciones: Cualquier modificación por escrito
del texto del método debería ser aceptada siempre y
cuando las modificaciones se registren.
A.3 Título: En el título se indicarán los tipos de muestra a
los que se aplica el método de prueba, el analito o la
característica a determinar, así como el principio en el que
se basa dicha determinación.
A.4 Precauciones: Debe prestarse atención a cualquier
riesgo y describir las precauciones detalladas para evitarlo.

20
Anexo A. Protocolo para la documentación de un
método
A.5 Alcance: permite al usuario observar
rápidamente si el método puede ser apropiado para la
aplicación deseada o si existe alguna limitación.
A.6 Referencias (normativas): proporcionará una lista
de aquellos documentos que son necesarios para la
aplicación del método.
A.7 Definiciones: cualquier definición de los términos
usados en el texto, que pueda ser necesaria para la
comprensión completa del mismo.

21
Anexo A. Protocolo para la documentación de un
método
A.8 Principio: el principio en el que se basan las técnicas
analíticas empleadas.
A.9 Reacciones: reacciones esenciales, siempre que se
consideran necesarias para la comprensión del texto o de los
cálculos.
A.10 Reactivos y materiales: Detalle de los reactivos y materiales
requeridos para el proceso analítico.

22
5.1.2 Resultados interlaboratorios
-”estudios colaborativos” o “estudios cooperativos”

-Para el desarrollo de métodos con un alcance amplio, a

partir de un método normalizado disponible

-Métodos publicados validados por esta vía proporcionan

gran robustez.

-repetibilidad, reproducibilidad y límites de precisión

23
5.1.3 A partir de datos individuales del
laboratorio
-Cuando el método ha sido desarrollado para usarlo por un solo laboratorio

-Los métodos validados por un solo laboratorio serán aceptables con fines
regulatorios dependiendo de las directrices que cubre el área de medición
afectada.

24
5.2 Extensión de los estudios de validación
-Decisión sobre las características de desempeño que deben ser investigadas
para validar el método y, en algunos casos, el grado de detalle para una
característica particular.

25
5.3 Plan e informe de validación

-Los trabajos de validación como la información de sus

resultados se realizarán atendiendo a un procedimiento
documentado.

-Las Entidades Nacionales de Acreditación pueden

establecer requisitos mínimos para esta documentación.

- Un modelo sencillo combinando el plan y el informe de

validación puede incluir:
título, planificación, características de desempeño y
resumen
26
5.4 Herramientas de validación

27
5.4.1 Blancos
-Permite evaluar cuánta señal de medida es atribuible al analito y cuánta a otras
causas.

Blancos de reactivos

Blancos de muestra

28
5.4.2 Muestras de rutina
- Evaluación del sesgo de medida que proporciona información sobre precisión,
interferencias, etc., que pueden aparecer durante el trabajo diario.

29
5.4.3 Soluciones/material fortificado
-Son materiales o soluciones en los que el analito(s) ha sido adicionado a valores
conocidos.

-La fortificación con una cantidad conocida de analito permite incrementar la

respuesta del analito medido, calculando los valores en términos de cantidad
añadida

30
5.4.4 Materiales pre-adicionados
-Materiales en los que el analito de interés puede ser básicamente extraño, pero
ha sido incorporado en algún momento anterior al muestreo.

31
5.4.5 Patrones de medida
-Todo aquello en lo cual ha sido caracterizado un
parámetro o propiedad particular y que puede
emplearse como referencia metrológica.

-Material de referencia
-Material de referencia certificado

32
5.4.6 Estadística
- Esencial para agrupar los datos obtenidos y realizar un análisis objetivo de las
diferencias entre conjuntos de datos .

-Ayuda para la evaluación de la precisión, sesgo, rango lineal, LOD, LOQ e

incertidumbre de medida.

33
5.5 Requisitos de validación
-Los requisitos de cómo realizar la validación de un método pueden estar
recogidos en guías sectoriales

-Esto permite asegurar que tanto la terminología como la estadística empleada se

interpretan y aplican de manera consistente

34
Referencia

Guía Eurochem, La Adecuación al Uso de los Métodos Analíticos, Una

Guía de Laboratorio para Validación de Métodos y Temas Relacionados,
Segunda Edición Inglesa, Primera Edición Española.

35