Narváez Aguilar Pedro Iván. Gpo.

1453
16/11/2018
Articulo: Inhibición de la replicación del virus de inmunodeficiencia humana por
extractos de taninos de Pinus Caribea Morelet.

Los taninos vegetales son considerados compuestos polifenólicos que están

presentes en diferentes partes de la planta, particularmente en la corteza de
numerosos árboles, donde se pueden obtener gran cantidad de estos. De acuerdo
con su estructura ellos pueden ser clasificados como hidrosolubles (galotaninos,
elagitninos), complejos oligoméricos y taninos condensados.
Hace algunos años los taninos se consideraron compuestos con actividad biológica
dudosa, y sin beneficios farmacológicos de relevancia reportados, ya que parte
importante de su estructura aún era desconocida para la ciencia. La definición de la
misma hizo posible el estudio y prescripción de nuevas propiedades para estos
compuestos, así como la posibilidad de su uso en humanos.
Indiscutiblemente, la actividad antiviral contra el virus herpes simple tipo 1 y 2 y mas
recientemente sobre el virus de inmunodeficiencia humana (VIH – 1)8-13
constituyen unos de los más importantes reportes acerca de la actividad biológica
de estos compuestos, asociada esta con la estructura química.
Métodos.
Obtención de los extractos. Se tomaron 150 g de 3 muestras de la especie forestal
denominada Pinus Caribea Morelet var. Las cuales se colectaron en febrero del
2001 en Viñales y se aserraron en la palma, Pinar de Rio; a partir de la corteza del
tronco de los árboles, se maceraron y sometieron a extracción acuosa a régimen de
contra corriente por 45 minutos de 90 a 95 ºC.
Los extractos se enfriaron a temperatura ambiente a temperatura ambiente y se
filtraron a través del papel Whatman No. 1. Uno de ellos se liofilizó a razón de 3, 2
g del extracto seco, el otro se dializó sobre una membrana semipermeable de
celulosa contra 2 L de agua, durante 72 horas sin agitación, con cambios cada 24
horas. Después de la liofilización se obtuvo 2 8 g del extracto seco.
Ensayo de actividad antiviral.
Las células se prepararon por 3 horas con las concentraciones subtóxicas de los
extractos y con 1 y 5 micro moles de azido timidina (AZT), droga con una potente
actividad antiviral reconocida. Después del periodo de pretratamiento se lavaron con
solución de fosfato tamponad (PBS) y se infectaron con la cepa VIH – 1 IIIB a una
MOI de 0.1 y 0.001 durante 1 hora a 37ºC. Posteriormente se lavaron una vez más
de la misma forma y se cultivaron en placas de cultivo de 96 pozos, fondo plano,
con el medio de cultivo mencionado anteriormente que además contenía las
concentraciones de las fracciones seleccionadas (50, 25, 10, 1 y 0.5
microgramo/mL). Se utilizaron células controles sin droga y con AZT. Las placas se
incubaron a 37ºC en atmosfera húmeda con 5% de CO2.
Las células MT4 se infectaron con la cepa VIH – 1 IIIB a una alta multiplicidad de
infección (MOI), el sobrenadante se cosechó, se tituló por el método de dilución
hasta el punto final en placas de 96 pozos15 y se almacenó a -85ºC hasta su uso
en el ensayo de actividad antiviral.

Resultados
Por el sistema de purificación aplicado se obtuvieron 6 fracciones, la composición
de cada una y el resultado del ensayo de citotoxicidad se muestran en la tabla 1.

TABLA 1. Composición y toxicidad de las diferentes fracciones

Fracción Toxicidad Composición

63 % de taninos condensados de
01 100 mg/mL origen
floroglucinólicos y no taninos
>84 % d1e taninos condensados de
origen
02 100 mg/mL floroglucinólicos y no taninos en
menor
concentración
03 >200 mg/mL Taninos menos polares
04 100 mg/mL Taninos de mayor polaridad
Altamente Fenoles simples de bajo peso
05
tóxico molecular
06 150 mg/mL 86 % de taninos

El presente estudio indica que el extracto dializado de la corteza de Pinus Caribea

Morelet var. Caribea contiene actividad anti VIH – 1 y aunque los hechos
experimentales indican que la misma pude ser atribuida a los taninos de alta masa
molecular, los cuales poseen una actividad trópica con proteínas y ácidos nucleicos,
21 son necesarias más investigaciones para identificar la estructura activa del
compuesto y el posible mecanismo de acción antiviral.