Aplicación de

Macroinvertebrados y Diatomeas

como Bioindicadores en el Estudio

de la calidad de las Aguas

Módulo II

Master en Ingeniería del Agua

Grupo TAR
 ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN

2. SELECCIÓN DE ESTACIONES DE MUESTREO

2.1 INTRODUCCIÓN
2.2 SEGUIMIENTO DE LA EVOLUCIÓN DE UN RÍO
2.3 ELECCIÓN DE LAS ESTACIONES
2.4 NÚMERO DE ESTACIONES
2.4.1 MUESTREO DE UN RÍO
2.4.2 MUESTREO DE UN LAGO O EMBALSE
2.5 FRECUENCIA DEL MUESTREO

3. SELECCIÓN DE LOS PUNTOS DE MUESTREO EN CADA ESTACIÓN

3.1 IBGN
3.2 BMWP´
3.3 IBD

4. METODOLOGÍA DEL MUESTREO

4.1 ÍNDICE BIOLÓGICO GENERAL NORMALIZADO (IBGN). AFNOR 1992.
4.2 BMWP ´ (BIOLOGICAL MONITORING WORKING PARTY)
4.3 ÍNDICE BIOLÓGICO DIATÓMICO (IBD). AFNOR

5. TRATAMIENTO DE MUESTRAS.
5.1. IBGN Y BMWP ´
5.2. IBD

6. IDENTIFICACIÓN DE LOS TAXONES DE MACROINVERTEBRADOS Y

DIATOMEAS.
6.1. MACROINVERTEBRADOS.
6.1.1. IBGN.
6.1.2. BMWP´
6.2. DIATOMEAS.
6.2.1. IBD

7. BIBLIOGRAFIA.
8. ANEXOS.
 1. INTRODUCCIÓN

Siguiendo las líneas marcadas por la Directiva 2000/60/CE, se hacen

necesarios la inclusión de parámetros biológicos que certifiquen la calidad
ecológica de un río.

Estos índices biológicos están referidos a poblaciones de

macroinvertebrados bentónicos y de diatomeas (algas pardas), que constituyen
los bioindicadores más representativos de la calidad de las aguas.

Los índices que vamos a tratar son índices de calidad normalizados por
AFNOR, referidos a guías de diversidad francesas. Estos índices son:

· Índice Biológico Diatómico (IBD) NF. T 90-354

· Índice Biológico General Normalizado (IBGN) NF. T 90-350

Así mismo se ha considerado un segundo índice para macroinvertebrados,

basado en la norma francesa, pero adaptado para España que es el Biological
Monitoring Working Party (BMWP’). Este índice es menos restrictivo que el IBGN,
pero nos da una buena aproximación sobre el estado ecológico de un río.

El presente documento está basado en el trabajo realizado por el equipo

del Grupo TAR para la Fundación PRODTI y la Consejería de Obras Públicas en
el Estudio de la Determinación de la Diversidad Ecológica en los Ríos Andaluces,
y ha sido procesado como texto de estudio para el Módulo II del Master
universitario en Ingeniería del Agua.
 2. SELECCIÓN DE ESTACIONES DE MUESTREO

2.1. INTRODUCCIÓN

Cada uno de los aspectos de la evolución de un río que se mencionan a

continuación, han de estar simplificados en una rigurosa elección del emplazamiento
de las estaciones de muestreo, su número y el periodo de muestreo.

El propósito de un análisis de agua es el de evaluar las propiedades de una

matriz (en este caso agua natural superficial o subterránea, agua residual doméstica
o industrial, agua tratada), cuyos resultados deben ser de alta calidad y fiabilidad y
adecuados al propósito para el cual fueron solicitados, ya que en base a esta
información se toman importantes decisiones en materia de legislación, medidas de
mitigación, control y protección del medio ambiente, las cuales están regidas por
normas y regulaciones de carácter oficial.

Las muestras recolectadas para los análisis deben ser relevantes y

verdaderamente representativas, por lo tanto es el aspecto más crítico de un
programa de monitoreo.

El objetivo de un muestreo de agua es obtener una parte representativa del

universo en consideración a la cual se le analizarán los diferentes parámetros de
acuerdo al interés. Para lograr este objetivo es necesario que la muestra conserve
las concentraciones de todos sus componentes y que no se presenten cambios
significativos en su composición antes del análisis. El muestreo es por lo tanto el
aspecto más crítico de un programa de mediciones.

La recolección, preservación y almacenamiento de las muestras son

críticos para los resultados de calidad del agua. Es por esto, que un programa de
muestreo debe ser planeado para satisfacer los objetivos de estudio. El número de
muestras y la localización de los sitios de muestreo deben ser determinados
previamente y cumplir con los requerimientos necesarios para establecer los
estándares de calidad o límites permitidos. La exactitud y fiabilidad de los resultados
se basan en la representatividad de la muestra.

2.2. SEGUIMIENTO DE LA EVOLUCIÓN DE UN RÍO.

El seguimiento de la evolución de la calidad de un río se hará tanto

TEMPORAL como ESPACIAL.

TEMPORAL: seguimiento a lo largo del tiempo en ciclos de un año y

búsqueda de las causas de la evolución que podrá ser:

Natural: inducidos por los ciclos estacionales de hidrología,

especies, desarrollo de la vegetación, temperatura,…

Humana: provocando modificación de las características del

medio.

Mixta: ciertas causas naturales pueden acelerar la alteración de

la calidad del medio en el periodo de estío.

ESPACIAL: seguimiento a lo largo del curso de agua. La búsqueda de

las causas de la evolución podrá ser:

Natural: suponen una modificación de hábitat debidos a

cambios geofísicos, edafológicos,...

Humana: suponen una modificación de hábitat debido a

poblaciones, actividades industriales, agrícolas,...

Mixta
 2.3. ELECCIÓN DE LAS ESTACIONES

Para definir la calidad de un curso de agua, hay que establecer un estado de

referencia dentro de una escala tipológica y así poder establecer las sensibilidades y
potencialidades propias de una cuenca.

Los criterios básicos para selección de las zonas a monitorear en cursos

hídricos superficiales depende de que se priorice su extensión territorial, cuenca,
ríos, tramos de los mismos o lagos.

Definido el tema precedente pueden luego implementarse las fases de

selección de las estaciones de monitoreo de calidad de agua en tres niveles:

1. La macrocolocación, que determina los tramos del río que son

representativos del nivel de calidad de toda la cuenca.

2. La microcolocación, que implica la ubicación dentro del tramo

precedente de la estación de muestreo.

3. Identificación del o los puntos de toma que deben ser

representativos del área (ejemplo: de toda la sección transversal del tramo del
río o de la columna de agua del lago en cuestión).

Esta última fase implica que la colecta de la muestra se efectúe en una zona
homogénea en cuanto a la distribución espacial del poluente, o contaminante, en
cuestión; la selección final puede ser simple si no hay descargas puntuales en el
área, pero en caso de estar cerca del vuelco de un efluente debe muestrearse aguas
abajo de la zona de mezcla. Existen formulaciones que estiman para el caso de ríos
y lagos la extensión de la misma, a partir de la cual puede asumirse que sólo
acontece un nivel de variación menor al 10 % en el nivel de concentración del
poluente.
 La relevancia ambiental de un tramo de río puede determinarse según la
cantidad de tributarios que va recibiendo en su transcurso hacia la desembocadura,
las descargas puntuales y distribuidas que recibe, flujo másico de determinados
poluentes, etc. Estas cantidades se dividen por la mitad para llegar al centroide por
cuenca, subcuenca y así sucesivamente si se ve la necesidad de seguir
subdividiendo la zona para evaluar el efecto de determinada descarga puntual,
aunque esto implica mayores gastos si se implementa una red demasiado amplia.

Pueden darse dos tipos de estaciones regularmente empleadas: fijas y

transitorias; convendrá utilizar una u otra según el tipo de estudio ambiental e
información requerida para cumplimentar los mismos.

Los criterios de diseño de la red implican la localización de las estaciones y

puntos de toma representativos para el estudio de calidad en una cuenca; la
selección del número de muestras (N) para cada parámetro de interés para el
estudio y una frecuencia (F) adecuada al objetivo priorizado en el proyecto en
cuestión (ejemplo: detección de infracciones o de tendencias de calidad de agua)

La elección de las estaciones está en función del objeto de estudio y han de

tener unas propiedades esenciales determinadas:

Representativa: se elegirá la estación en una longitud determinada del

curso de agua que no presente variaciones significativas en los índices, de tal
manera que los parámetros en la muestra tengan el mismo valor que en el
cuerpo de agua, en el lugar y tiempo de muestreo. Para ello, el cuerpo de
agua debe estar mezclado totalmente en el lugar de muestreo. Se hará un
inventario de los distintos hábitats disponibles (pareja o par sustrato/
velocidad) y sus poblaciones representativas.

Comparativa: son una pareja de estaciones situadas desde un lado a

otro del foco de perturbación sobre el medio a evaluar. Las dos estaciones
deberán ser idénticas para el hábitat muestreado de forma que se diferencien
únicamente por el impacto de la perturbación. Se recomienda cartografiar las
estaciones indicando la posición y dimensión de los hábitats muestreados.

Informativa: corresponde a un lugar aislado de un segmento de un

curso de agua que constituye un accidente ecológico y que no va a ser
representativo. El valor obtenido en este tipo de estación es extrapolable.

Así procederemos del siguiente modo:

1. Seleccionar: un tramo del río que no haya estado

recientemente inundado. Se recomienda muestrear las zonas más
centrales y los márgenes de más de 0,2 m de profundidad.

2. Dividir: el tramo de río a estudiar en tantas áreas como

hábitats distintos:

· zona de fuerte corriente y sustrato duro

· zona léntica y sustrato duro

· entre la vegetación acuática emergida de los

márgenes del río

· entre los macrófitos sumergidos o macroalgas

· arena, grava o barro

Es muy importante seleccionar un tramo de río que posea todos

los tipos de sustratos para poder recolectar la máxima biodiversidad.

Otros requisitos del sitio de muestreo a tenerse en cuenta son:

Accesibilidad: la persona encargada de recolectar las muestras

normalmente tiene que transportar una carga apreciable de equipo de
 muestreo, además de las muestras; por lo tanto, se debe seleccionar un lugar
accesible bajo todas las condiciones meteorológicas, vías de acceso,
puentes, etc.

Distancia hasta el Laboratorio: el tiempo requerido para el transporte

de las muestras regirá el límite de las determinaciones y la fiabilidad de los
resultados. En términos prácticos, tiempos de transporte mayores de 24 horas
entre el sitio y el laboratorio hace reconsiderar la estación o buscar un
laboratorio más cercano; si no es posible, tener en cuenta esta circunstancia
en la interpretación de los resultados.

Seguridad: la recolección de muestras en ríos o lagos puede ser

peligrosa, particularmente bajo malas condiciones de tiempo y crecientes
altas; al considerar un lugar se debe dar la debida importancia a este aspecto.
Si no hay alternativa, se deben tomar siempre todas las precauciones y
proveerse de los equipos necesarios de seguridad.

2.4. NÚMERO DE ESTACIONES

Está en función del objeto de estudio; un sólo sitio de muestreo

generalmente no es suficiente para definir la calidad del agua. Por lo tanto, la
selección de las estaciones, la frecuencia y el número de muestras depende
básicamente de los objetivos y alcances del estudio, así como de los usos del agua.

Cuando los efectos en la calidad de un tributario son de interés, se debe

muestrear aguas arriba y aguas abajo de la confluencia y aproximadamente 60 m
aguas arriba de la desembocadura del tributario, donde no haya mezcla por reflujo
de la corriente receptora.
 Para evaluar el efecto de las descargas de desechos industriales, domésticos,
agropecuarios, etc., se deben tomar muestras aguas arriba de la descarga y aguas
abajo donde la mezcla vertical y horizontal sea completa.

2.4.1. Muestreo de un río

Para estudiar el efecto de un impacto, se elegirá una estación río arriba

(estación de referencia) y dos río abajo; es decir, una inmediatamente antes del
impacto, otra cercana a la perturbación y la última más alejada para verificar la
capacidad de recuperación del medio.

Definiremos como estaciones de referencia aquellas donde la presión

humana y el impacto producido sobre el medio natural sean nulos o el mínimo
posible.

Los descriptores de la presión antropogénica que se genera en la cuenca son

variables conservativas (poco oscilantes en el tiempo) y que influyen directamente
en la calidad de los tramos de ríos donde confluyen sus aguas; de esta manera,
analizando el grado de humanización y presión antrópica sobre la subcuenca en
cada estación, podremos discriminar aquellas poco perturbadas o sin perturbar.

A veces es necesario conocer el caudal de la corriente, con el fin de calcular

la carga de los parámetros medidos. Por ello, cuando existen estaciones de medida
del caudal, los sitios de muestreo se deben ubicar en dichas estaciones o cerca de
ellas.

2.4.2. Muestreo de un lago o embalse

Se debe contar con datos sobre las características tales como volumen, área
superficial, profundidad media, tiempo de renovación, así como las características
térmicas, batimétricas, hidráulicas y ecológicas.
 Para el muestreo de un lago o embalse, la selección de los sitios de muestreo
depende del propósito que se tenga. Cuando el objetivo es conocer la potabilidad, se
deben tomar muestras de todos los afluentes y del espejo de agua en los sitios
cercanos a las posibles fuentes de contaminación. Se debe evitar tomar muestras en
las márgenes, superficie o fondo, pues la calidad no es uniforme en estos sitios.

2.5. FRECUENCIA DEL MUESTREO

El programa de muestreo puede estipular tiempos de muestreo al azar, pero

deben estar distribuidos más o menos uniformemente a través del año. Si se conoce
el tiempo de mayor variabilidad o pico de la calidad del agua (época de invierno o
verano), es conveniente incrementar la frecuencia en tales épocas o desviar hacía
ellos más esfuerzos en el monitoreo.

Los lagos naturales y artificiales muestran variaciones de composición según

la localización horizontal y la profundidad (estratificación); en tales casos se deben
examinar las muestras separadamente antes de integrarlas.
 3. SELECCIÓN DE LOS PUNTOS DE MUESTREO EN CADA
ESTACIÓN.

3.1. IBGN

Tomaremos como ejemplo de la aplicación de este método un estudio

realizado en el río Hueznar, en la Sierra Norte de la Provincia de Sevilla, Andalucía,
España, donde se tomaron como referencia siete estaciones diferentes para el
estudio y, dentro de cada estación, ocho puntos de muestreo.

Para la elección de estas estaciones no se han seguido criterios cuantitativos,

sino cualitativos que permitan encontrar las causas de posibles variaciones de los
parámetros a estudiar.

El sentido de estos ocho puntos es la representatividad de ocho hábitats

distintos. Esta elección nos permitirá apreciar la evolución de la biomasa y detectar
los cambios impuestos de los hábitats a los macroinvertebrados y una visión
generalizada de los distintos grupos existentes en la estación. Hay pues una relación
directa entre la riqueza taxonómica y la riqueza del hábitat. Es imprescindible
distinguir estos ocho hábitats o al menos las facies léntica y lótica. Generalmente los
sistemas lóticos son más sensibles que los lénticos. La evidencia de perturbaciones
es facilitada en situaciones extremas, como con déficits de agua, temperaturas
extremas, etc. Cada hábitat viene establecido por la velocidad de corriente, la altura
del agua y la naturaleza del sustrato.

Figura 3.1. Arriba se observa típica facie lótica Figura 3.2 Tipica facie lentica
 El IBGN nos indica cómo efectuar una correcta elección de estos puntos. Así
pues, se buscarán ocho parcelas de 1/20 m2. Se efectúan ocho combinaciones
distintas de sustrato/velocidad (S-V). Cada hábitat está caracterizado por una pareja
distinta de sustrato-velocidad. Si no existen ocho tipos distintos de sustratos, se
debe tomar unos de ellos dos veces pero en puntos con distinta corriente o
velocidad. Si el terreno es monótono, hay que hacer un muestreo en ocho puntos
distintos intentando recoger todo el sustrato significativo. Si existen ocho sustratos
distintos y uno de ellos presenta puntos con distinta corriente, se debe tomar la
muestra en aquel que sea más significativo (el que tenga mayor superficie en
general dentro de la estación). Con la velocidad se actuará igual: una falta de ciertos
hábitats puede solucionarse muestreando los sustratos por separado dentro de la
misma parcela. Por ejemplo, en ausencia de hábitat léntico en un cauce de montaña
se muestreará primero la superficie superior mientras que la superficie inferior y el
sustrato subyacente será objeto de un segundo muestreo. Sin embargo, la
experiencia en nuestros ríos andaluces objetos de este estudio, por ejemplo el
Huéznar, nos indica que los distintos tipos de habitats están bien representados.

Figura 3.3. Zona con corriente media.

Figura 3.4. Zona con corriente rápida Figura 3.5. Zona con corriente baja
 Puede ser útil marcar cada punto elegido con una bandera. Este método nos
dará una buena visión del conjunto de la estación y de la elección de los hábitats
más representativos. Además, en el mapa de la estación se marcarán siempre los
ocho puntos elegidos. También es aconsejable la anotación de cualquier
característica reseñable de cada punto en una ficha identificativa, como la
accesibilidad, presencia de elementos externos al río, etc.

Efectuando combinaciones definidas en la tabla 3.1. Así obtendremos

nuestros ocho puntos. Las velocidades superficiales son evaluadas para cada
hábitat mediante un caudalímetro o, si la diferencia es acusada, mediante simple
observación. La categoría de los sustratos están clasificados en el orden de
sucesión figurante ordenado en la tabla (de 9 a 0). Esta sucesión recomienda
muestrear prioritariamente los hábitats más hospitalarios para la fauna. En estos
estarán presentes los macroinvertebrados más selectivos en cuanto a su hábitat.
Estos nos elevarán nuestro índice. En presencia de una perturbación más o menos
acusada estos organismos desaparecerán. Sin embargo aquellos invertebrados que
estén adaptados a situaciones estresantes o contaminantes permanecerán. Así
pues, habrá que empezar siempre que se pueda por los hábitats de más “calidad”.
Cuando esto no sea posible se irán eligiendo sucesivamente en orden descendente
en la tabla de S-V.

Figura 3.6. Briofitas Figura 3.7. Plantas flotantes o spermafitas.

Figura 3.8. Partículas de arena con diámetro menor de 2´5.

Velocidad superficial V (cm/s) Alta ³150 Media Baja Nula V<5

Sustrato 150>v ³75 75>v³25 25>v³ 5

Briofitas (musgo o 9
verdina)

Spermafitas 8
sumergidas

Elementos orgánicos 7
gruesos (ramajos,
raices)

Sedimentos 6
minerales de gran
tamaño (piedras,
guijarros)

250 >Æ£ 25 mm

Gravas gruesas 25 5
>Æ£ 2´5 mm

Spermafitas 4
emergentes del
estrato base

Sedimentos finos. 3
Limo, cieno y fango
Æ£ 0´1 mm

Arenas y limos ƣ 2
2´5 mm

Superficies naturales 1
o artificiales (rocas,
paredes, losas,
suelos). Bloque Æ>
2´5 mm

Algas o a falta, 0
margas y arcillas.

Tabla 3.1. Según el IBGN esta tabla representa los diferentes sustratos que nos podemos encontrar en un río frente a
distintas velocidades del agua. Hay un orden preferente de muestreo del sustrato según la numeración de la tabla del
9 al 0. Efectuaremos ocho combinaciones distintas de sustrato-velocidad que nos encontremos en nuestro río a
muestrear. Así obtendremos nuestros ocho puntos de muestro en cada estación a analizar.
 3.2. BMWP´.

Este índice de macroinvertebrados, al contrario que el IBGN, no especifica las

zonas de muestreos. En un principio se podrán escoger dentro de una estación
tantos puntos como hábitats distintos haya. Esto nos dará una representatividad más
o menos adecuada de la estación completa, aunque para facilidad del trabajo se
recomienda establecer pocos puntos, pero que sean representativos de la totalidad
de los hábitats.

3.3. IBD.

Se eligirá un punto donde las condiciones de crecimiento de las diatomeas

sean óptimas, es decir, una zona no muy profunda, con una adecuada iluminación, y
que sea aireada a través de una corriente más o menos fuerte. Generalmente estas
condiciones en los ríos de la Sierra Norte de Sevilla son fáciles de encontrar, ya que
hay muchas rocas superficiales dentro de la corriente donde crecerán
adecuadamente estos microorganismos. Con una muestra por estación bastará,
aunque en condiciones especiales se podrán muestrear varias zonas, escogiendo
distintos hábitats, en orden decreciente de agresividad del medio.

Figura 3.9. Encontraremos las diatomeas sobre las rocas en zonas de corriente y
con iluminación como en la foto de adjunta.

Para poder muestrear en zonas muy profundas se tomarán muestras de agua

o incluso se pueden poner sustratos artificiales a una cierta altura.
 4. METODOLOGÍA DEL MUESTREO

Una vez determinados los puntos de muestreo en el apartado anterior, en

base a variables de sustrato, velocidad y hábitat, procederemos a efectuar el
muestreo en sí.

Para ello, nos basaremos en las especificaciones de índices biológicos que

tratan de determinar la calidad ambiental de una determinada zona en base a la
tolerancia ambiental de los organismos que aparecen en circunstancias de estrés
ambiental.

El método de muestro empleado para los macroinvertebrados viene

especificado en la norma francesa NT 90-350 y el material empleado corresponde a
la norma internacional ISO 7828:1985, Métodos de muestreo biológico. Guía para el
muestro manual con red de macroinvertebrados bentónicos. Para la toma de
muestras de diatomeas, se seguirá la norma francesa NF. T 90-354.

Para que la toma de muestras sea objetiva, representativa y a su vez repetible

en el tiempo, se han de establecer una serie de pautas o pasos a seguir así como el
uso de unos materiales de campo cuyas medidas estén normalizadas. Es decir, se
trata de definir un protocolo de actuación válido para toda la zona que se desee
muestrear tanto en metodología como en el tiempo.

4.1. ÍNDICE BIOLÓGICO GENERAL NORMALIZADO (IBGN). AFNOR

1992.

Este método deriva del índice IBG (Índice Biológico Normalizado, norma
AFNOR experimental N T 90-350, Octubre 1985).
 Permite la evaluación de la calidad general de un curso de agua mediante el
análisis de la macrofauna béntica, la cual está considerada como indicador (o
expresión sintética) de esta calidad general. También permite la evaluación del
efecto de una perturbación en el medio receptor cuando es aplicado
comparativamente río arriba y río abajo de un vertido o de alguna otra perturbación.

Los individuos son seleccionados y determinados hasta el nivel de familia, a

excepción de aquellos grupos faunísticos débilmente representados o donde la
identificación es delicada.

Las características que deben recogerse en cada estación de muestreo:

o la fecha.

o la localización geográfica exacta (coordenadas UTM).

o la altitud.

o la anchura del lecho mojado en el momento del muestreo.

o la naturaleza del sustrato y la velocidad de corriente

correspondiente a las 8 muestras efectuadas sobre la estación y el
hábitat dominante.

o la lista de taxones muestreados y eventualmente sus

abundancias relativas.

o la variedad taxonómica de la toma de muestra (åt).

o el grupo faunístico indicador (valor de GI).

· Metodología de muestreo.

1.- Indicar el muestreo de cada punto, indicando en la bolsa:

§ río

§ estación nº
 § punto.

2.- El muestreo se debe realizar siempre a contracorriente, es decir,

debemos empezar a muestrear por el punto más bajo de la estación de muestreo
e ir subiendo, para evitar así mover el punto siguiente y perder muestras de
macroinvertebrados que pueden ser arrastrados por la corriente al pisar nosotros
el terreno. De cada punto, se debe anotar:

§ tipo de sustrato.

§ velocidad de corriente aproximada.

3.- Las muestras son tomadas con la ayuda de una malla de 500 mm. de
diámetro, de tipo Surber (facies lóticas); o en aguas turbias (facies lénticas) por
tracción de 50 cm. o en su defecto por movimiento de vaivén sobre una superficie
equivalente. Si la superficie estuviera compuesta por rocas, se procedería a la
extracción y recolección de las mismas depositándolas en cubetas para su
posterior retirada de los organismos a estudiar.

4.- Se procede al tamizado de las muestras punto por punto por medio del
tamiz de 500 micras de malla, extrayendo los diferentes organismos si es que no
se ha realizado en el campo. De este modo se van separando las muestras
manualmente ayudándonos con pinzas u otro tipo de utensilios adecuados a tal
efecto.

5.- Una vez obtenida y separadas las muestras se conservan con formol al
6-10% y se dispensan en viales para facilitar la posterior separación de los
organismos en el laboratorio. Es importante el hecho de rotular perfectamente
cada vial indicando el punto de muestreo, la estación a la que pertenece y, si
fuese necesario, el cauce que estamos estudiando, así como algún que otro
aspecto que consideremos de importancia en ese momento.
 6.- Una vez separados y ordenados los organismos se procede a su
identificación y recuento mediante claves (guías identificadoras) y con ayuda de
una lupa binocular y de un microscopio óptico.

Figura 4.4. , 4.5. y 4.6. Tamizado con la malla surber en distintas zonas de un rio.

· Material.

En lo que se refiere al IBGN, se pueden usar una malla tipo “Surber” de

medidas normalizadas para ambientes de sustrato-velocidad de características
lóticas, o una malla tipo “Haveneau” para ambientes de características lénticas.

Figura 4.7.Malla tipo Haveneau (zonas lenticas y profundas).

 Figura 4.8. Malla tipo Surber (zonas loticas).

En nuestro caso usaremos la primera: la malla tipo Surber, (ver figur

a), dado que nuestro método ha demostrado ser válido usando la misma tanto
para ambientes lóticos como para ambientes lénticos.

Figura 4.9. Malla surber. Figura 4.10. Malla surber.

Igualmente precisamos para realizar el trabajo cubetas de plástico,

preferentemente anchas y con asa para su mejor manejo a la hora de tamizar la
muestra, así como otros elementos, (si procediera su uso), tales como guantes de
látex, pinzas, bandejas tamizadoras con una luz de malla igual a la utilizada en la
malla Surber, es decir, un diámetro de 500 micras para mantener así constante el
tamaño de poro y viales donde depositar la muestra a analizar una vez obtenida esta
última. Los viales pueden ser de plástico, pvc, u otro material semejante y con
paredes lisas para evitar la acumulación de muestra en las mismas. Su capacidad
será acorde al volumen de muestra a tratar, oscilando esta entre 50-100 ml de
capacidad.

También precisaremos formaldehído al 6% para la conservación de las

muestras y su posterior análisis en laboratorio.
 o Ventajas y límites de la metodología.

Este método perfecciona al índice predecesor IBG: cambia el orden de los

sustratos de la toma de muestra dando una prioridad a los sustratos más
hospitalarios para la fauna macroinvertebrada; desplazamiento de ciertos taxones de
la tabla estándar de determinación del índice desde el sentido de una mayor
tolerancia a la polución; aumentando el número de clases de variedad taxonómica y
del número de taxones a considerar; ciertos taxones no se tienen en cuenta si son
representados por menos de 10 individuos. Esta mejora contribuye a una mayor
sensibilidad del método y, a nivel práctico, las ventajas de este método residen en la
facilidad de cálculo del índice y la simplicidad de las determinaciones taxonómicas.

En tal caso, el IBG puede ser aplicado a todos los tipos de medios, excepto
en los medios muy profundos, debido a la dificultad de la toma de muestra.

Los macroinvertebrados son aquí considerados como expresiones sintéticas

de la calidad general de los cursos de agua. En cambio, esta técnica no permite
separar de la calidad general del agua la parte debida a las condiciones físicas
naturales de un curso de agua y la parte debida a las perturbaciones. Esta incógnita
se elimina una vez realizada diferentes campañas que permitan conocer datos
históricos sobre la fauna acuática existente en el río como hemos así constatado a lo
largo de las diferentes campañas en las que se ha validado el método para cauces
fluviales andaluces.
 4.2. BMWP´ ( BIOLOGICAL MONITORING WORKING PARTY ).

La zona geográfica empleada en su estudio inicialmente fueron las islas

británicas. Dicho método permite estimar la calidad de un agua para el estudio de la
fauna béntica, en función de la tolerancia frente a la polución orgánica, los individuos
son identificados hasta nivel de familia, a cada cual le afecta un valor según su
tolerancia a la polución: un valor elevado refleja una tolerancia fiable frente a la
polución y viceversa.

El índice es calculado como la suma de valores correspondientes a las

distintas familias presentes en la toma de muestra.

· Metodología de muestreo.

1.- Sobre una estación determinada por las características físicas

homogéneas, la toma de muestra se hace removiendo el sustrato con el pie, río
arriba y con una red de toma de muestra estándar.

2.- La operación debe efectuarse cubriendo todos los hábitats más

importantes durante tres minutos, con un minuto de toma de muestra en los
lugares donde no pueden ser muestreados según la metodología precedente.

3.- Las características físicas del medio deben ser anotadas.

4.- No se especifica el número de puntos de muestreo por estación.

5.- Una vez obtenida las muestras se conservan con formol al 6-10%. Para
facilitar la separación de los macroinvertebrados de la muestra.

6.- Se procede al tamizado de las muestras, si es que no se ha realizado

en el campo, y se va separando manualmente, bolsa a bolsa, ayudándonos con
unas pinzas y una mesa de luz.
 7.- Una vez separados los organismos se procede a su identificación y
recuento mediante claves (guías identificadoras) y con ayuda de una lupa
binocular y de un microscopio óptico.

· Material.

Para la toma de muestras es necesario disponer de una draga-malla de 500

micras, (tipo Surber), badeadoras, pinzas, bolsas, tamices ( uno de ellos debe ser de
500 micras). En el laboratorio serán necesarios una mesa de luz, unas cubetas,
pinzas finas, recipientes para separar los organismos, lupa binocular, microscopio
óptico, guías identificadoras de macroinvertebrados y formaldehído al 6%.

· Ventajas y límites del método.

Facilita la determinación de macroinvertebrados. Cálculo fácil de un índice y

obtención de una expresión sintética de la calidad del agua fácilmente asimilable por
todas las personas. La escala BMWP varía en función de la talla y de la diversidad
específica de las muestras, lo que hace que se obtenga sobre una misma estación
los diferentes valores de esta escala según el esfuerzo de toma de muestra
realizado por el operario.

Podríamos considerar que la libertad a la hora de elegir el número de puntos

a muestrear en cada estación sería un límite del método, ya que podrían existir
variaciones según el operario que realice el muestreo. No obstante, se intentará
siempre escoger un número de puntos suficiente para representar los distintos
hábitats de la estación que se muestree.

4.3. ÍNDICE BIOLÓGICO DIATÓMICO (IBD). AFNOR.

Para la confección de este índice, usamos un grupo de microalgas que

son las diatomeas, pertenecientes al grupo de las crisofíceas. Su uso en este índice
se basa en la tolerancia que poseen ante distintos contaminantes y su respuesta
ante ellos, de tal modo que las poblaciones varían en el espacio y en el tiempo
variando ecológicamente frente a esos contaminantes. Es por ello que este grupo
de algas es usado como organismos bioindicadores.

· Metodología de muestreo.

Dependiendo del tipo de cauce en el que se vaya a muestrear, se tomarán las

muestras en columna de agua o sobre un sustrato. De tal modo que si el cauce es
grande y profundo, se toman muestras de agua, bien en superficie o bien en
profundidad, en un vial adecuado a la capacidad requerida, de tal modo que para el
tratamiento posterior precisaremos de 5 ml de muestra.

En cambio si se trata de muestrear una zona con un cauce pequeño, se toma

la muestra de una zona del río con buena oxigenación y corriente, preferiblemente
de la orilla, procediéndose al raspado de la capa de materia orgánica y sedimento
que está adherida al mismo, introduciendo la muestra en un vial con un poco de
agua del cauce, procediéndose a su tratamiento posterior en laboratorio.

Es de importancia el rotular correctamente la muestra en cuestión, el punto de

muestreo, la estación y si fuese necesario el cauce fluvial que se esté estudiando,
así como otras consideraciones de interés, tales como la fecha, hora de recogida y
autor del muestreo.

Figura 4.1. Cocconeis Figura 4.2. Cyclotella Figura 4.3. Cymbella

 5. TRATAMIENTO DE MUESTRAS

Una vez obtenidas las muestras de cada punto de muestreo,

procederemos al tratamiento adecuado de éstas. Debido a la fragilidad de
macroinvertebrados y diatomeas, este procedimiento debe ser realizado con gran
delicadeza ya que de ello depende la correcta identificación de los individuos
capturados. A continuación se detallan los pasos a seguir para un óptimo procesado
de las muestras.

5.1. IBGN Y BMWP´

Material necesario:

· Pinzas de relojero · Líquido conservante (formaldehído

al 6% o alcohol 70º + glicerina al
· Bandeja de fondo blanco (30 x
10%)
20 x 5 aprox.)
· Frasco lavador
· Bandeja clasificadora

Para comenzar la separación de las muestras se debe elegir un lugar bien

iluminado debido al pequeño tamaño de muchos de los macroinvertebrados.

Comenzamos vertiendo el contenido de los viales en la bandeja de fondo

blanco. El color de esta bandeja nos facilitará la localización de los organismos ya
que la tonalidad predominante de éstos es oscura, debido a la necesidad de pasar
inadvertidos frente a sus depredadores en su ambiente natural. Lavamos los viales
para evitar que los macroinvertebrados se queden adheridos a las paredes.

Con las pinzas iremos removiendo los pequeños granos de arena con el fin de
dejar al descubierto aquellos individuos que tienden a refugiarse en el sedimento.
Los ejemplares que extraigamos los iremos colocando, con mucho cuidado de no
partirlos con las pinzas, en los distintos pocillos de la bandeja clasificadora, los
cuales estarán rellenos de líquido conservante (formaldehído 6% o alcohol 75º),
reuniendo a los individuos morfológicamente más parecidos en un mismo pocillo,
realizando así una primera clasificación visual de los organismos. Esto nos facilitará
luego la identificación de los distintos taxones. Este procedimiento se repetirá con
todas las muestras que compongan cada punto de muestreo, indicando en cada
pocillo la procedencia de los individuos que contengan. Se utilizará un pocillo distinto
por cada punto de muestreo y grupo morfológico. Una vez se hayan obtenido todos
los macroinvertebrados se procederá a su identificación con ayuda de una lupa y las
correspondientes guías de identificación.

Figura 5.1. Búsqueda de ejemplares en bandejas de tonalidad clara para una mejor visualización.

5.2. IBD

En este caso se hace mucho más necesario el correcto tratamiento de las

muestras ya que la extrema fragilidad del caparazón silíceo de las diatomeas junto
con el tamaño microscópico de éstas nos obliga a extremar el cuidado de los
procesos de manipulación. Una mala preparación puede provocar que las diatomeas
se partan en pedazos que imposibilitarían su posterior identificación, o bien que
restos orgánicos mal digeridos interfieran, de forma que oculten diatomeas o
distorsionen las preparaciones.

Para el tratamiento de las muestras se necesitará el siguiente material:

 · H2O2 (110-130 Vol.) · Estufa de secado
· Ácido clorhídrico · Portaobjetos y
cubreobjetos
· Tubos de ensayo
· Resina NAPHRAX
· Pipetas de 2 y 5 ml
· Ultra centrífuga

El procedimiento a realizar sería el descrito a continuación:

1. Agitar la muestra

2. Tomar 2 ml de muestra (no tomarlo del fondo para evitar impurezas) e

introducirlo en un tubo de ensayo.

3. Añadir 8 ml de peróxido de hidrógeno para destruir la materia orgánica.

4. Dejar reposar 12 horas para digerir toda la materia orgánica.

5. Si fuera necesario, añadir ácido clorhídrico para eliminar el carbonato cálcico,

antes o después del tratamiento con peróxido de hidrógeno.

6. Transcurridas las 12 horas se procede a sedimentarlas mediante

centrifugación a 1500 vueltas/minuto durante 5 minutos. Una vez sedimentado se
procede al lavado.

7. Se retira el peróxido de hidrógeno (sobrenadante), se añade agua destilada y

se centrifuga a 1500 vueltas/minuto, durante 2 minutos. Este procedimiento se repite
tres veces, cambiando el agua destilada cada vez que se centrifuga.

8. Una vez limpias todas las muestras se retira todo el sobrenadante, se toma
todo el sedimento y se reparten en dos cubreobjetos y se dejan que se sequen
encima de la estufa a una temperatura no superior a 40ºC.

9. Una vez secas, se añade una gota de resina naphrax en el portaobjetos sobre
el cual se colocará el cubre con la muestra, con mucho cuidado de repartirlo por toda
la superficie del cubreobjetos y de no formar burbujas entre el cubre y el porta.

10. Dejar secar durante al menos 48 horas antes de su visualización al

microscopio.
 6. IDENTIFICACIÓN DE LOS TAXONES DE
MACROINVERTEBRADOS Y DIATOMEAS

Una vez realizado el tratamiento de las muestras, procedemos a la

identificación de los organismos indicadores de calidad. Para ello vamos a estudiar
dos tipos de organismos diferentes: los macroinvertebrados y las diatomeas.

6.1. MACROINVERTEBRADOS:

Son los organismos más frecuentemente utilizados como indicadores de

calidad de agua por varias razones:

§ Son organismos con escasa capacidad de movimiento, por lo

que se pueden ver directamente afectados por los vertidos.

§ Poseen un ciclo de vida largo en comparación con otros

organismos, por lo que se pueden realizar estudios durante largos periodos.

§ Poseen un espectro ecológico muy amplio (grupo muy

heterogéneo).

§ También tienen un tamaño óptimo.

Son organismos que no tienen espina dorsal y que son visibles sin usar
microscopio. El estudio de macroinvertebrados es el más utilizado debido a la
variedad y abundancia de las comunidades que lo forman, la facilidad de recogida
de muestras y la diversidad de tolerancias que presentan a las variaciones de las
condiciones del agua.

Los índices bióticos (aquellos que ordenan las especies de

macroinvertebrados según la tolerancia a la contaminación orgánica) que vamos a
aplicar son los siguientes:

·IBGN (Índice Biológico Global Normalizado)

·BMWP’ (Biological Monitoring Working Party)

 6.1.1. IBGN

Es un índice francés, norma AFNOR, Diciembre 1992. Deriva del IBG (Índice
Biológico Normalizado), que es norma AFNOR experimental N T 90-350, de
Octubre 1985.

Dicho índice permite evaluar la calidad general del curso del agua mediante
análisis de la macrofauna béntica, la cual está considerada como indicador de la
calidad general. También se puede evaluar el efecto de una perturbación cuando
es aplicado comparativamente río arriba y río debajo de un vertido o de cualquier
otra perturbación.

La unidad taxonómica utilizada para la determinación es la familia, a

excepción de aquellos grupos faunísticos débilmente representados o donde la
identificación es delicada.

Para determinar el índice utilizaremos una tabla cruzada (ANEXO 9.3) donde
se confronta el número total de taxones encontrados (t), situado en la abscisa y el
primer grupo faunístico indicador de la tabla (G.I), situado en la ordenada. Cada
taxón será representado únicamente si el número de individuos encontrados es
mayor o igual que tres o mayor o igual que diez (para ciertos taxones).

La determinación del grupo indicador la realizaremos siguiendo la tabla de

arriba abajo y pararemos en la primera presencia significativa de un taxón (“n”
mayor que tres o “n” mayor que diez) de la lista de indicadores de calidad, siendo
“n” el número de individuos de cada taxón .Así, el valor del IBGN resultará de la
combinación del grupo faunístico indicador y de la variedad de taxones
encontrados de la macrofauna béntica ( ver tabla en ANEXO 9.3).
 Existen 138 taxones (ver tabla indicadora de taxones de IBGN en ANEXO
9.2) susceptibles de participar en la variedad total y 38 grupos de individuos que
pueden actuar como grupos indicadores.

Los valores del IBGN van desde 0 (muy mala calidad) a 20 (muy buena
calidad).En la tabla siguiente, podemos observar el valor del IBGN asociado a la
calidad del agua y al color asignado en cada caso:

IBGN >17 calidad excelente

16 > IBGN > 13 calidad buena

12> IBGN > 9 pasable

8 > IBGN > 5 mediocre

IBGN < 4 mala

Tabla 6.1. Código de colores y calidades de las aguas analizadas según el valor del IBGN.

El color azul indica que las aguas son muy limpias; el verde, aguas no
alteradas sensiblemente; el amarillo, es indicativo de signos de contaminación; el
naranja, aguas contaminadas y el rojo supone aguas muy contaminadas.

Un ejemplo de aplicación del IBGN, remitiéndonos a la tabla, sería el

siguiente: si el primer taxón representativo es Perlidae, tendremos como grupo
indicador el 9. Si el número de individuos encontrados de este grupo es 35, vemos
en la tabla cruzada que nos corresponde un valor de IBGN de 18.

También podemos calcularlo mediante la relación siguiente:

IBGN= GI + (clase variedad – 1), con IBGN menor o igual a 20.

 6.1.2. BMWP’

Este índice es una aplicación del BMWP, que es un índice británico revisado
por Helawell en 1978. Fue ajustado por Alba-Tercedor y Sánchez Ortega en 1988 y
adoptado en el VI Congreso Español de Limnología (Granada 1991) para su
aplicación a la Península Ibérica, debido a su fácil utilización.

Tiene como finalidad estimar la calidad del agua para el estudio de la fauna
béntica, en función de la tolerancia frente a la polución orgánica.

Dicho índice no está acotado por arriba. El autor asigna a cada grupo
faunístico una puntuación en función de su exigencia en cuanto a la calidad del
agua. El valor que se asigna está comprendido entre uno y diez. Las familias más
exigentes (algunos Plecópteros, Efemerópteros, Tricópteros,…) tienen una
puntuación de diez, mientras que los menos exigentes (clase Oligochaeta, por
ejemplo) tienen una puntuación de uno. Esto significa que les corresponde un valor
de diez a familias que no toleran la contaminación y les corresponde un valor de uno
a familias que viven en aguas muy contaminadas.

El valor del índice biótico se calcula sumando las puntuaciones de los

distintos grupos faunísticos encontrados en cada punto de muestreo. Cuanto más
elevado es el valor del índice biótico, la calidad del agua es mayor y si corresponde
un valor más bajo del índice, la calidad del agua será menor. El valor rara vez
supera la puntuación de 200, aún en las zonas mejor conservadas y carentes de
contaminación.

En el índice BMWP´, que es la aplicación del BMWP a los ríos ibéricos, se

incluyen algunas familias que no se encuentran en la fauna británica. Además,
cambian algunas puntuaciones de familias que sí están en ambos lugares.
Generalmente, los valores de BMWP´ suelen ser mayores, aunque ambos tienen
fuertes correlaciones. En el caso de BMWP´, asigna los valores de cinco clases de
calidad. La clase I indica mejor calidad de agua y la V indica una calidad de agua
más deficiente.
 VALOR CLASE CALIDAD Y CALIDAD DEL AGUA
BMWP´
BMWP´>150 Clase I(a).Aguas muy limpias.
101<BMWP´<120 Clase I(b).Aguas no contaminadas o no
alteradas sensiblemente.
61<BMWP´<100 Clase II. Son evidentes algunos efectos de
contaminación.
36<BMWP´<60 Clase III. Aguas contaminadas.
16<BMWP´<35 Clase IV. Aguas muy contaminadas.
BMWP´<15 Clase V. Aguas fuertemente contaminadas.

Tabla 6.2. Código de colores y calidad de las aguas según el valor del BMWP´

Los valores intermedios entre las clases (cinco puntos por abajo y por arriba
del límite marcado entre dos clases), se considera transición entre ambas y se
dibujan con trazos alternos de los dos colores.

En la siguiente tabla, relacionamos los dos índices bióticos antes

mencionados, IBGN y BMWP´, y su significado con respecto a la calidad del agua.

IBGN BMWP’ SIGNIFICADO

Aguas muy limpias

>150
≥ 17
Aguas no contaminadas o no
101-120
alteradas de modo sensible
Son evidentes algunos efectos de
16-13 61-100
contaminación

12-9 36-60 Aguas contaminadas

8-5 16--35 Aguas muy contaminadas

≤4 <15 Aguas fuertemente contaminadas

Tabla 6.3. Correlacion de los valores del IBGN y del BMWP´

La diferencia principal entre ambos índices es que el primero tiene en cuenta

ocho puntos de muestreo, mientras que el segundo no especifica el número de
tomas de muestra por estación. Así, tiene poco en cuenta las características físico-
químicas del medio y existen mayor número de especies indicadoras de calidad de
agua, basta con la existencia de un solo individuo por especie (ver tabla indicadora
de taxones de BMWP´en ANEXO 9.4).

6.2. DIATOMEAS:

Son el siguiente grupo de organismos que vamos a estudiar como indicadores

de calidad. Las algas, en general, se utilizan como indicadores de calidad de agua
gracias a la sensibilidad a los cambios del medio en que viven, por tanto se
convierten en un referente del estado ecológico de cualquier sistema acuático.

Una de las características más importantes de las algas es su capacidad

depuradora del medio ambiente, ya que a través de la fotosíntesis incorporan
oxígeno, contribuyendo de esta manera a la oxidación de la materia orgánica, por un
lado y, por otro, a aumentar el oxígeno disuelto en agua, el cual será utilizado por
otras comunidades u organismos que componen la flora y fauna del medio acuático
donde viven.

Se considera que cuanto mayor es la diversidad de especies existentes en el

medio, las aguas son de mejor calidad.

El énfasis del estudio está centrado en el grupo de algas diatomeas, que son
algas unicelulares, pardas, capaces de colonizar los sistemas acuáticos, muy
sensibles a la polución (especialmente al nitrógeno y fósforo). Son capaces de
colonizar cualquier tipo de sustrato; son muy resistentes a la acción de los
elementos, incluso a altas temperaturas. Se pueden encontrar en forma libre o
formando colonias. Son estrictamente autótrofas y constituyen el grupo más
importante del fitoplancton, debido a que contribuyen con cerca del 90% de la
productividad de los sistemas.
 Tienen la particularidad de que permanecen en el tiempo, pues sus paredes
silíceas no se degradan. Se las encuentra en todos los ambientes y son las algas
más utilizadas en todo el mundo para el biomonitoreo de ambientes actuales y
fósiles.

A través de distintos estudios realizados, se sabe que los cambios en las

comunidades algales “delatan” el inicio de contaminación que pueda existir en un
sistema acuático, lo cual se refleja en las modificaciones de la estructura poblacional
y en la proliferación de especies asociadas a determinados aportes. Las respuestas
de estos organismos frente a los cambios de las condiciones del medio los
convierten en finos sensores de la calidad del agua y en referentes del estado
ecológico del medio ambiente.

Estas algas poseen una membrana celular constituída fundamentalmente por

pectina, fuertemente impregnada de sílice, de modo que resiste la acción de los
ácidos y bases fuertes. A este caparazón silíceo en forma de estuche de dos valvas
se le da el nombre de frústulo o teca. Éste se encuentra formado por dos partes, que
se unen como las piezas de una caja: son las semitecas. Existe una semiteca
superior, llamada epiteca y una inferior, llamada hipoteca. Tanto epiteca como
hipoteca constan de porciones perfectamente delimitadas. La región superior de la
epiteca y la inferior de la hipoteca se denominan valvas y, según corresponda, se
nombran epivalva e hipovalva. Los bordes de las semitecas reciben el nombre de
pleuras, existiendo epipleura e hipopleura. En base a lo anterior y a la región del
frústulo que se esté observando de un ejemplar, será la denominación que reciba la
vista; si se observa epivalva o hipovalva, será vista valvar y si se observa epipleura o
hipopleura, será vista pleural. Los frústulos de diatomeas presentan una serie de
ornamentaciones, así como la estructura externa, que también presenta una serie de
elementos tales como espinas, salientes, etc., que sirven de unión entre las distintas
células. También, aquellas diatomeas que presentan simetría bilateral poseen una
estructura central, denominada rafe.
 Según la simetría, podemos diferenciar entre aquellas que poseen simetría
radial (Orden Biddulphiaes o Centrales) y las que poseen simetría bilateral (Orden
Bacillariales o Pennales).

A continuación, mostramos una imagen de una diatomea, en la que se

pueden diferenciar las distintas partes (diatomea perteneciente al género
Achnanthes):

Figura 6.1. Estructura de una diatomea.

El índice que vamos a utilizar para la determinación de las algas diatomeas es

el IBD.

6.2.1. IBD

Es el Índice Biológico Diatómico. Es un índice francés, norma AFNOR N F. T

90-354.

El principio de este índice es el mismo que para los índices bióticos, también
influye la cantidad relativa de los taxones. Viene referido para todos los ecosistemas
de agua dulce, porque las diatomeas se caracterizan por estar presentes en todas
partes y, sobre todo, en todo tipo de sustratos.
 Además posee la ventaja de que la toma de muestras es un proceso fácil y
son muestras pequeñas (no necesitan mucho espacio). Así la determinación
sistemática necesita de una buena experiencia por parte del técnico que lo realice.

La determinación de este método presenta una serie de ventajas:

§ Las diatomeas son organismos sensibles a la

eutrofización, a la polución orgánica y mineral y la estimación del
método es fiable para un rango de polución bajo, donde los otros
métodos son menos fiables. Además, los índices diatómicos están
basados en datos cuantitativos y la estimación es más acertada y más
sensible que los métodos estrictamente cualitativos.

§ Las diatomeas reaccionan de manera muy rápida a las

modificaciones de la calidad del agua y pueden detectar las poluciones
producidas de una manera discontinua. Son indicadores de calidad a
corto plazo porque las poblaciones de diatomeas se reconstituyen
rápidamente después de la desaparición de la polución.

§ La estructura de las distintas poblaciones de diatomeas

está determinada por las características químicas del agua,
independientemente de las características morfodinámicas.

§ Determinación de las diatomeas:

Éste método tiene como finalidad la identificación de las diatomeas a nivel

de especie (frente al índice IDG, Índice Diatómico Genérico, que lleva a cabo la
determinación a nivel de género únicamente).

Una vez realizada la preparación de las muestras en el laboratorio,

procederemos al contaje. Realizaremos el barrido de la preparación con el
microscopio de contraste de fase, utilizando el objetivo de 100x (es conveniente el
uso de objetivo con micrométrico, ya que la identificación es a nivel de especie y
necesitamos que posea medida), añadiendo previamente una gota de aceite de
inmersión en el portaobjetos. A medida que vamos realizando el barrido, vamos
realizando la identificación simultáneamente, remitiéndonos a la guía de diversidad.
 Si el número de diatomeas contadas es menor que 400 después de ver toda
la preparación, es necesario hacer una nueva preparación a partir del agua de
origen, con el fin de completar el contaje. Para evitar este problema, la preparación
se hace doble.

§ Cálculo del IBD:

Para realizar este cálculo, vamos a seguir una serie de pautas:

§ Cálculo del porcentaje de la abundancia (representada

por “A”) de los taxones que aparecen y de los taxones asociados.

§ Eliminación de los taxones que aparecen pero que

presentan “A” menor que los valores que indica la norma. Todos los
taxones que aparecen presentan “A” menor que 7,5% (es decir, tres
diatomeas de 400), todos éstos son eliminados sistemáticamente. Se
considera que el efecto producido por más de tres individuos de un
taxón asociado es más peligroso que si considerásemos que fuese en
realidad una contaminación de la muestra.

§ Cálculo de probabilidad de presencia de un taxón de los

que aparece es significativo de la población. Son los que se estudian
para determinar la calidad del agua, utilizando la siguiente fórmula:

F (i) = å Ax* Px (i)*Vx / å Ax*Vx

Ax es la abundancia del taxón “x” que aparece en porcentaje.

Px (i) es la probabilidad de presencia del taxón “x” de la clase de
calidad “i”.
Vx es el valor ecológico del taxón “x”.
“n” es el nombre de los taxones que aparecen.

Existen siete valores de F (i), porque el IBD define siete clases

de calidad de agua.

§ Cálculo de “B”, que corresponde al valor del IBD y que

constituye un valor intermedio.
 B = 1*F(1)+2*F(2)+3*F(3)+ 4*F(4)+5*F(5)+6*F(6)+7*F(7)

§ Cálculo del IBD sobre 20

IBD/20 = 4.75 * IBD - 8.5

IBD >17 calidad excelente

16 > IBD > 13 calidad buena

12 > IBD > 9 pasable

8 > IBD > 5 mediocre

IBD < 4 mala calidad

Tabla 6.4. Código de colores y calidad del agua analizada según el valor del IBD.
 7. BIBLIOGRAFÍA

Guide méthodologique pour la mise en oeuvre de l´indice biologique

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JUNTA DE ANDALUCÍA: Cuaderno de itinerarios de Parque Natural Sierra

Norte de Sevilla, Sevilla. Consejería de medioambiente.

JUNTA DE ANDALUCÍA: Guía Práctica Parque Natural Sierra Norte (mapa),

Empresa Pública de Turismo.
 8. ANEXOS

8.1. TABLAS CLASIFICATORIAS DE FAMILIAS EN BASE A DIVERSOS

FACTORES ECOLÓGICOS

CLASE OLIGOQUETOS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN Observaciones

-Predadores
Invertebrados
Sustrato Limnófilos -Fitófagos Frecuente en
del Seston o
Naididae variado aguas
(reófilos) restos -Raspa los Seston
Macrófito subterráneas
orgánicos
-Come los Seston
Tierras
blandas, Microflora, Frecuente en
Tubificadae arenas Limnófilos sedimentos Detritívoro aguas
fangosas y orgánicos subterráneas
limos
-Macrófitos
-Restos Humus Frecuente en
vegetales
Enchitraeidae Limnófilos Restos Detritívoro aguas
-Orillas de orgánicos subterráneas
los cursos
de agua
Sedimentos
toscos de Limos Frecuente en
Lumbriculidae tierras Reófilos Detritívoro aguas
blandas. Restos
orgánicos subterráneas
Macrófitas
-Suelos
humedos
- Humus
-Macrófitos Frecuente en
Lumbricidae Limnófilos - Restos Detritívoro aguas
-Orillas de vegetales subterráneas
lagos y toscos
cursos de
agua

CLASE AQUETOS
 FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Glossiphonidae
Lagos, estanques
g. hemiclepsis (corrientes de Limnófilos Pescado Succionan sangre
agua)

Lagos, corrientes
Artrópodos,
g. Helobdella de agua, Limnófilos Succionan sangre
Gasterópodos
vegetación
Sustrato duro,
g. Glossiphonia Limnófilos Gasterópodos Succionan sangre
lagos
Hirudidae Mamífero
Lagos, estanques Limnófilos Succionan sangre
g. Hirudo (parásitos)

Riberas (lagos y Reófilos Invertebrados

Erpobdellidae Predador
estanques) Limnófilos acuáticos

ORDEN PLECÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Glossiphonidae Lagos,
estanques
g. hemiclepsis Limnófilos Pescado Succionan sangre
(corrientes
de agua)
Sustratos
Capniidae blandos, Reófilos Restos vegetales Fitófagos
restos
Sustrato
g. Glossiphonia Limnófilos Gasterópodos Succionan sangre
duro, lagos
Hirudidae Lagos, Mamífero
Limnófilos Succionan sangre
g. Hirudo estanques (parásitos)
Riberas Reófilos Invertebrados
Erpobdellidae (lagos y Predador
Limnófilos acuáticos
estanques)
 CLASE GASTERÓPODOS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Sustrato
duro Fitófagos, raspan el
Viviparidae Limnófilos Macrófitos, restos
sustrato
Potamón
Macrófitos
Bythinellidae Reófilos Micrófitos Raspan el sustrato
Crenon

Fitófagos, raspan y
Hydrobiidae Macrófitos Limnófilos Restos vegetales
filtran

Sustrato
Ancylidae duro, Reófilos Micrófitos Raspan el sustrato
macrófitos
Ferrisiidae Macrófitos,li
Limnófilos Micrófitos, restos Raspan el sustrato
Acroloxidae mos, fango
Macrófitos
Fitófagos, raspan el
Planorbidae (sustrato Limnófilos Macrófitos
sustrato
duro)

Macrofitos
Fitófagos, raspan el
Physidae (sustrato Limnófilos Macrófitos
sustrato
duro)

Macrófitos
Fitófagos, raspan el
Lymnaieidae (sustrato Limnófilos Macrófitos
sustrato
duro)
ORDEN EFEMERÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Restos orgánicos y
Ephemeridae Arenas, gravas Reófilos Colectores
vegetales

Cienos, limos, Restos orgánicos y

Polymitarcidae Limnófilos Colectores
gravas, potamon vegetales

Bloques, Restos orgánicos y

Heptageniidae Reófilos Colectores
empedrados perifiton

Limos
Restos orgánicos
Caenidae recubriendo las Reófilos y limnófilos Detritívoros
finos
piedras
Algas
microscópicas,
baetidae Empedrados Reófilos Colectores
restos orgánicos
finos, larvas
Lagos, aguas Algas microscópicas
Leptphlebiidae Reófilos Detritívoros
lentas, potamon y restos orgánicos

CLASE CRUSTÁCEOS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Gammaridae Variado Reófilos Restos orgánicos Detritívoro

Sustratos
Limnadiidae Limnófilos Invertebrados Predador
blandos
 ORDEN PLECÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Musgo Restos
Limnófilos,
Taeniopterygidae vegetación vegetales,algas Fitófagos
Reófilos
acuática, gravas unicelulares

Empedrados,
Nemouridae Reófilos Restos vegetales Fitófagos
musgos

Tierras blandas,
Capniidae Reófilos Restos vegetales Fitófagos
restos

Chloroperlidae Sustratos duros Reófilos Invertebrados Predador

Perlodidae Sustratos duros Reófilos Invertebrados Predador

ORDEN ODONATAS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Insectos,
Arena o
Gomphidae Limnófilos pequeños Predador
fango
crustáceos

Insectos,
Aeschnidae Restos Limnófilos pequeños Predador
vegetales crustáceos

Insectos,
Platycnemididae Vegetación Limnófilos pequeños Predador
(ribera) crustáceos
ORDEN COLEÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Vegetación,
Organismos
Dysticidae limos, Limnófilos Predador
acuáticos
musgos
Vegetales
Hydrophilidae Vegetación Limnófilos (omnívoro), org. Predador
acuáticos

Empedra-
Hydraenidae Limnófilos perifiton Fitófagos
dos, musgos

Madera,
Dryopidae arena Limnófilos Restos vegetales Colector
fangosa
Madera,
musgos Perifiton, restos
Elmidae Reófilos Fitófagos
sobre vegetales
piedras

ORDEN PLANIPENNES

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Esponjas de Esponjas,
Osmylidae agua dulce, Limnófilos chironomidae, Predador
musgo invertebrados

ORDEN MEGALÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Arenas finas, Chironomidae,

Sialidae Limnófilos predador
limos oligoquetos
 ORDEN TRICÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Sustrato
Glossosomati-dae duro,capas Reófilos Micrófitos (restos) Fitófagos
superiores
Algas
Algas
Hydroptilidae filamento- Limnófilos Fitófagos
filamentosas
sas, piedras

Restos finos,
Sustrato
Hydropsichidae Reófilos algas Detritívoro
duro
microscópicas

Sustrato Algas (finos restos

Philopotamidae Reófilos Detritívoro
duro orgánicos9
Polycentropo- Sustrato dur,
Reófilos Invertebrados Predador
tamidae ramas
Sustrato
duro,
Psychomyiidae Reófilos Micrófitos Fitófagos
madera
sumergida

Sustrato
Ecnomidae duro, Limnófilos - Fitófagos
vegetación

Invertebrados y
Phryganeidae Macrófitos Limnófilos Predador
macrófitos
Raices,
Beraeidae musgos, Limnófilos algas Fitófagos
detritus
Arena,
limnephilidae Reófilos vegetales Fitófagos
crenon

ORDEN HIMENÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Agriotypidae Tricópteros Indiferente según Según sus Colector

sus huéspedes huéspedes
 ORDEN DÍPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Sedimentos
de madera
Tipulidae Limnófilos Restos vegetales Colector
cubiertos
de agua

Sustrato
Athericidae duro, Reófilos Invertebrados Colector
macrófitos

Sediment
Oligoquetos,
Limoniidae os de Reófilos Colector
Inverebrados
madera

Oligoquetos,
Anthomyidae Macrófitos Reófilos chironomidae, Colector
invertebrados
Fondos
limosos,
Restos finos,
Culicidae aguas Limnófilos Colector
microflora
estancada
s
Sustrato
Flora microscópica,
Simuliidae duro, Reófilos Colector
restos finos
macrófitos

Sustrato
Limnófilos ó Microinvertebrados,
Chironomidae duro, Colector
Reófilos algas, restos finos
macrófitos

Arena,
Ceratopogonidae Limnófilos Restos orgánicos Detritívoro
gravas
Sustrato
Simuliidae,
Empididae duro, Reófilos Colector
invertebrados
macrofitos

Arena,
Tabanidae Reófilos Invertebrados Colector
gravas
ORDEN HETERÓPTEROS

FAMILIAS BIOTOPO CORRIENTE ALIMENTO NUTRICIÓN

Macrofitos,
Corixidae Limnófilos Algas, restos Predador
potamon
Macrófitos,
Naucoridae aguas Limnófilos Invertebrados predador
estancadas

Aguas
Notonectidae Limnófilos Invertebrados Predador
estancadas

Aguas poco
Invertebrados,
Nepidae profundas Limnófilos Predador
pequeños peces
estancadas
Vegetación
Mesoveliidae Limnófilos Invertebrados predador
de ribera
 8.2. TABLAS DE TAXONES INDICADORES DE IBGN.

Lista de los 138 taxones utilizados para la determinación del IBGN

INSECTES HÉTÉROPTÈRES Rhagionidae

Aphelocheiridae Scatophagidae
PLÉCOPTÈRES Corixidae Sciomyzidae MOLLUSQUES
Capniidae Gerridae Simuliidae
Chloroperlidae Hebridae Stratiomyidae BIVALVES
Leuctridae Hydrometridae Syrphidae Corbiculidae
Nemouridae Naucoridae Tabanidae Dreissenidae
Perlidae Nepidae Thaumaleidae Sphaeriidae
Perlodidae Notonectidae Tipulidae Unionidae
Taeniopterygidae Mesoveliidae
Pleidae ODONATES GASTÉROPODES
TRICHOPTÈRES Vélildae Aeschnidae Ancylidae
Beraeidae Calopterygidae Bithyiridae
Brachycentridae COLÉOPTÈRES Coenagrionidae Bythinellidae
Ecnomidae Curculionidae Cordulegasteridae Hydrobiidae
Glossosomatidae Donaciidae Corduffidae Limnaeidae
Goeridae Dryopidae Gomphidae Neritidae
Helicopsychidae Dytiscidae Lestidae Physidae
Hydropsychidae Eubriidae Libellutidae Planorbidae
Hydroptilidae Elmidae Platycnemididae Valvatidae
Lepidostomatidae Gyrinidae Viviparidae
Leptoceridae Haliplidae MÉGALOPTÈRES
Limnephilidae Helodidae Sialidae VERS
Molannidae Helophoridae
Odontoceridae Hydraenidae PLANIPENNES ACHÈTES
Philopotamidae Hydrochidae Osmylidae Erpobdellidae
Phryganeidae Hydrophilidae Sysyridae Glossiphonfidae
Polycentropodidae Hydroscaphidae Hirudidae..
Psychomyidae Hygrobiidae HYMÉNOPTÈRES Piscicolidae
Rhyacophilidae Limnebiidae TRICLADES
Sericostomatidae Spercheidae LÉPIDOPTÈRES Dendrocoelidae
Thremmatidae Pyralidae Dugesitdae
DIPTÈRES Planaffidae
ÉPHÉMÉROPTÈRES Anthomyidae CRUSTACÉS
Baetidae Athericidae OLIGOCHÈTES
Caenidae Blephariceridae BRANCHIOPODES
Ephemerellidae Ceratopogonidae NÉMATHELMINTHES
Epherneridae Chaoboridae AMPHIPODES
Heptageniidae Chironomidae Gammaridae HYDRACARIENS
Leptophlebiidae Culicidae
Oligoneuriidae Dixidae ISOPODES HYDROZOAIRES
Polymitarcidae Dolichopodidae Asellidae
Potamanthidae Empididae SPONGIAIRES
Prosopistomatidae Ephydridae DÉCAPODES
Siphlonuridae Limoniidae Astacidae BRYOZOAIRES
Psychodidae Atyidae
Ptychopteridae Grapsidae NÉMERTIENS
Cambaridae
 8.3. TABLA TAXONÓMICA CRUZADA

Valores de IBGN según la naturaleza y la variedad taxonómica de la

macrofauna

Clase de variedad 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1
St
Taxones > 49 44 40 36 32 28 24 20 16 12 9 6 3
2
GI 50 45 41 37 33 29 25 21 17 13 10 7 4 1
Chloroperlidae
Perlidae.....
9 20 20 20 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10 9
Perlodidae
Taeniopterygidae
Capniidae
Brachycentridae
8 20 20 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10 9 8
Odontoceridae
Philopotamidae
Leuctridae
Glossosomatidae
Beraeidae...... 7 20 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10 9 8 7
Goeridae
Leptophlebiidae
Nemouridae
Lepidostomatidae
6 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6
Sericostomatidae
Epherneridae
Hydroptilidae
Heptagenildae
5 18 17 16 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5
PofymiTARcidae
Potamanthidae
Leptoceridae
Polycentropodidae
4 17 16 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4
Psychomyidae
Rhyacophilidae
Limnephilidae 1)
Hydrapsychidae
3 16 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3
Ephemerellidae1)
Aphelocheiridae
Baetidae 1)
Caenidae 1)
Elmidae 1) 2 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2
Gammaridae 1)
Mollusques
Chironomidae 1)
Asellidae 1)
1 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1
Achètes
Oligochètes
1) Taxones representados para menos de 10 individuos – Los otros para
menos de 10 individuos.
2) St <=> Sumatorio de t
8.4. TABLA DE TAXONES INDICADORES DEL BMWP´

Determinación de índice BMWP´

Famillias Valor
Siphlonuridae, Heptageniidae, Leptophlebiidae,
Ephemeridae, Potamanthidae, Taeniopterygidae,
Leuctridae, Capniidae, Perlolidae, Perlidae, Chloroperlidae,
Aphelocheiridae, Phryganeidae, Molannidae, Beraeidae, 10
Odontoceridae, Leptoceridae, Goeridae,
Lepidostomatidae, Brachycentridae, Sericostomatidae,
Athericidae, Blephariceridae.
Astacidae, Lestidae, Calopterygidae, Gomphidae,
Cordulegasteridae, Aeshnidae, Corduliidae, Libellulidae, 8
Philopotamidae, Psychomyiidae, Glossomatidae, Agriidae.
Nemouridae, Rhyacophilidae, Polycentropidae,
Limnephilidae, Ephemerellidae. 7

Neritidae, Viviparidae, Ancylidae, Unionidae, Corophiidae,

Gammaridae, Platycnemidae, Coenagriidae, Hydroptilidae. 6
Planariidae, Dendrocoelidae, Clambidae, Dryopidae,
Elmidae, Hydropsychidae, Tipulidae, Simuliidae,
5
Oligoneuriidae, Helophoridae, Hydrochidae, Hydraenidae,
Dugesidae.
Piscicolidae, Baetidae, Sialidae, Caenidae, Haliplidae,
Tabanidae, Stranomyidae, Empididae, Dolichopodidae,
Dixidae, Chrysomelidae, Curculionidae, Ceratopogonidae, 4
Anthomyidae, Limoniidae, Psychodidae, Hidracarina.
Valvatidae, Hydrobiidae, Lymnaeidae, Physidae,
Planorbidae, Sphaeriidae, Glossiphoniidae, Hirudididae,
Erpobdellidae, Asellidae,
Helodidae,Hydrophilidae,Hygrobudae, Dytiscinidae, 3
Gyrinidae, Mesovelidae, Hydrometridae, Gerridae,
Nepidae, Naucoridae, Pleidae, Notonectidae, Corixidae,
Ostracoda.
Chironomidae, Culicidae, Muscidae, Thaumaleidae,
2
Ephydridae.
Oligochaeta. 1
8.5. ESQUEMA DE LAS ESTACIONES DEL RIVERA DEL HUEZNAR

3 2
4

5
7m

7 8

Estación n°6
 2

4
3

5
7

Estación n°6