Protocolo de La Práctica de Laboratorio de Bioquímica

Universidad Nacional Abierta y a Distancia
Vicerrectoría Académica y de Investigación

Protocolo de la práctica de laboratorio de bioquímica
1. Descripción general del curso
Escuela o Unidad Escuela de Ciencias Básicas, Tecnología e Ingeniería

Académica
Nivel de formación Profesional
Campo de Formación Formación disciplinar
Nombre del curso Bioquímica
Código del curso 201103
Tipo de curso Metodológico Habilitable Si No x
Número de créditos 3
2. Descripción de la actividad
Laboratorio X Laboratorio remoto Simulador

físico
Tipo de Experiencias
Trabajos de Software
práctica profesionales
campo especializado
dirigidas
Otro Cuál
Número de
Tipo de actividad: Individual X Colaborativa X
semanas
Momento de la Intermedia,
Inicial X Final
evaluación: unidad:
Peso evaluativo de la actividad
Entorno donde se realiza:
(si lo tiene): 125
Fecha de inicio de la actividad: Fecha de cierre de la actividad:
27/04/2018 16-01 12/05/2018 16-01
Temáticas que aborda componente práctico: Practicas: Procedimiento A
Realizar Para La Reacción De Ninhidrina, Reacción De Biuret, Reaccion
Xantoproteica, Reaccion De Millon, Reaccion De Sakaguchi, Reacción De
Aminoácidos Azufrados, Grupos Sh, Reactivo De Benedict, Reacción De Fehling,
Reacción De Molisch, Prueba De Tollens, Reacción De Almidones Con Lugol (Yoduro
Potásico), Determinación De Solubilidad En Lípidos, Saponificación y reacción con el
Sudán III.
Actividades a desarrollar
1 Contenido
2 INTRODUCCIÓN ................................................................................................................ 6
3 PRE INFORME DE LABORATORIO .................................................................................. 7
3.1 Portada.......................................................................................................................... 7
3.2 El Índice General........................................................................................................... 7
3.3 Introducción................................................................................................................... 8
3.4 Revisión bibliográfica .................................................................................................... 8
3.5 Materiales y Métodos .................................................................................................... 8
3.6 Plan de Trabajo ............................................................................................................. 8
3.7 Nomenclatura ................................................................................................................ 8
3.8 Referencias ................................................................................................................... 8
3.9 Anexo ............................................................................................................................ 9
4 INFORME DE LABORATORIO ........................................................................................... 9
4.1 Portada.......................................................................................................................... 9
4.2 Resumen ....................................................................................................................... 9
4.3 El Índice General........................................................................................................... 9
4.4 Introducción................................................................................................................... 9
4.5 Revisión bibliográfica .................................................................................................... 9
4.6 Materiales y Métodos .................................................................................................. 10
4.7 Resultados .................................................................................................................. 10
4.8 Discusión..................................................................................................................... 10
4.9 Conclusiones............................................................................................................... 10
4.10 Recomendaciones ................................................................................................... 10
4.11 Revisión bibliográfica ............................................................................................... 10
4.12 Referencias .............................................................................................................. 11
4.13 Anexo ....................................................................................................................... 11
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO .............................................. 11
5.1 NORMAS PERSONALES ........................................................................................... 11
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS ............................ 12
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN ................................... 13
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA ..................................................................................... 13
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS......................................................................... 13
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS. ............................ 14
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO ........................................................................... 18
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA ............................................................................. 19
6.3 REACCIÓN DE BIURET ............................................................................................. 20
6.4 REACCION XANTOPROTEICA. ................................................................................. 21
6.5 REACCION DE MILLON ............................................................................................. 22
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI ..................................................................................... 22
6.7 PREGUNTAS: ............................................................................................................. 25
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS ............................................................. 25
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES ........................................................................... 27
7.2 REACCIÓN DE BIURET ............................................................................................. 29
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS .......................................................... 30
7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS: MÉTODO DE
BRADFORD.......................................................................................................................... 31
7.5 PREGUNTAS: ............................................................................................................. 34
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS ..................................................... 34
8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. .......................................................................... 38
8.2 PRUEBA DE BENEDICT ............................................................................................ 39
8.3 REACCIÓN DE FEHLING ........................................................................................... 40
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH .......................................................................................... 41
8.5 PRUEBA DE TOLLENS .............................................................................................. 42
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO) ................................................................................ 43
8.7 PREGUNTAS .............................................................................................................. 44
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS.......................................... 45
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. .......................................................................... 46
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS ....................................................................................... 46
SAPONIFICACIÓN ........................................................................................................... 47
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III ................................................................................. 48
9.4 PREGUNTAS: ............................................................................................................. 49
10 BIBLIOGRAFÍA................................................................. ¡Error! Marcador no definido.
Tablas
Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos. ................................................................................ 14

Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema de una
sola letra, impuesto en genética molecular. ............................................................................. 15
Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos. .................................................... 16
Tabla 4 Materiales y reactivos. ................................................................................................. 18
Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina. ............................................. 19
Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret. .............................. 20
Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica. ........................................... 21
Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón. ................................................... 22
Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi. ............................................ 23
Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes técnicas. .................. 24
Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos. ......................................................................... 26
Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos. .......................................................................... 27
Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret. ................................................. 29
Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH. ................................................... 30
Tabla 15 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta. ............... 33
Tabla 16 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta ................ 33
Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos. ...................................... 36
Tabla 18 Materiales y reactivos. ............................................................................................... 38
Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azúcares reductores) ......................... 39
Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azúcares reductores) ........................ 40
Tabla 21 Reacción de Molisch. ................................................................................................ 41
Tabla 22 Prueba De Tollens. .................................................................................................... 42
Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico). ................................................ 44
Tabla 24 Clasificación de lípidos. ............................................................................................. 45
Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos. .......................................................................... 46
Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos. ................................................................... 46
Tabla 27 Ensayo de Saponificación. ........................................................................................ 47
Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudán III. ........................................................................... 48
Ilustraciones
Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos. ............................................................................ 35
Ilustración 2 Molécula de glucosa. ........................................................................................... 38
2 INTRODUCCIÓN
La guía de prácticas de laboratorio introduce al estudiante en los procedimientos

experimentales más ampliamente usados en bioquímica. Incluye análisis de
macromoléculas como carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. El
estudiante también se familiarizará de las instalaciones y los equipos usados en las
prácticas de bioquímica. Es de gran importancia la lectura y compresión del documento
con anterioridad a la asistencia de las prácticas, además del desarrollo de las consultas
que permitan entender cada procedimiento.
Los objetivos de las prácticas del curso de bioquímica son:
1. Que el estudiante sea capaz de comprender e integrar los conceptos teóricos con
la actividad práctica incluyendo una adecuada manipulación de las técnicas de
laboratorio, desde la actividad procedimental hasta la entrega de resultados o informe
final.
2. Que el estudiante adquiera una preparación en Bioquímica que le permita

comprender la transversalidad que tiene la actividad práctica, tanto en otros cursos
del programa de estudio como en las actividades profesionales que él desempeñará,
así mismo que le permitan desarrollar una actitud de pensamiento crítico y de
liderazgo en el trabajo que se de en el grupo.
3. Que el estudiante realice las a actividades las practicas, teniendo en cuenta las
normas de seguridad y las indicaciones que del docente responsable de la práctica
considere.
4. Que el estudiante adquiera los elementos formativos que incluye: lectura previa de
esta guía, planeación de la actividad, asistencia a las prácticas, resolución de
problemas con la metodología empleada, interpretación de resultados y presentación
de resultados en el informe de laboratorio.
La bioquímica es una rama de la ciencia encargada de descifrar los mecanismos
esenciales de los seres vivos, con una fase teórica y una fase práctica, la primera se
da a través de los distintos referentes bibliográficos y el segundo se apoya en el
desarrollo de la guía de prácticas de laboratorio del curso de bioquímica.
El desarrollo del trabajo práctico se apoya en una serie de pasos que van describiendo
el progreso de una técnica a través de mediciones, cálculos, observaciones cualitativas
y cuantitativas de los procedimientos planteados en la guía. La práctica de laboratorio
integra, en el estudiante la habilidad de trabajar en el laboratorio, utilizando las
técnicas más habituales de un laboratorio bioquímico y aprendiendo a interpretar los
resultados experimentales.
3 PRE INFORME DE LABORATORIO
En la redacción de los preinformes se deben conjugar los verbos en tiempo presente

atemporal y en tiempo futuro cuando se indiquen las acciones que se van a realizar.
Esta elaboración es individual.
Ejemplo La centrifuga gira a 1600 revoluciones por minuto.
La estructura de los preinformes es la siguiente:
3.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos escritos, en el
entorno de gestión encuentra un manual de normas APA. La portada contiene el
nombre la universidad, la escuela a que pertenece el nombre de los integrantes del
grupo con los datos necesarios para su identificación.
3.2 El Índice General
Presenta toda la información del contenido, incluyendo el índice general, el índice de
tablas, el índice de figuras y el índice de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
3.3 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales características de las
técnicas, así como, descripción de objetivos generales y específicos que da lugar al
trabajo experimental. Esta es una sección realizada, redactando las ideas de los
autores o sea ustedes.
3.4 Revisión bibliográfica
Consiste en presentar y describir un tema de acuerdo con las temáticas propuestas
por la guía del componente práctico. Se toman los principales aspectos teóricos de
acuerdo a la metodología que se platea para desarrollar en la guía. Tenga presenta
que hay que dar los créditos respectivos a los autores consultados y las ideas
resultantes son redactadas por el estudiante.
3.5 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las precauciones
a tener, así como describir la información relávate que permita el buen desarrollo de
la práctica.
3.6 Plan de Trabajo
Primero que todo identifique quien es el docente encargado de la práctica, describa

los principales datos personales, así como la identificación de la fecha lugar de la
práctica. Tenga presente las normas de bioseguridad y como debe asistir al desarrollo
del componente práctico (Uso de pantalón jean, zapato cerrado, bata blanca, guantes
etc.). Define aquí que elementos debe tener en cuenta para el desarrollo de la práctica
de acuerdo a las indicaciones que haga el docente de la práctica y la descripción que
se de en la guía.
3.7 Nomenclatura
La Nomenclatura deberá ser presentada en tablas, que presenten ordenadamente
sustancias químicas o unidades, identificadas con símbolos, abreviaturas.
3.8 Referencias
Es un conjunto de datos precisos y detallados con los que un autor facilita la remisión
a fuentes documentales, o a sus partes, y a sus características editoriales. Por lo
general y de acuerdo con la normas para trabajos escritos, la información básica a
ofrecer es Autor(es). /Año de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o
editor./Edición./Ciudad y/o país de publicación en caso necesario, /Casa editora.
/Páginas o volúmenes. / (Mención de serie)
Esta información se detalla el final del documento y su descripción es de acuerdo a las
normas para trabajos escritos.
3.9 Anexo
En éstos se deben colocar toda aquella información referente a fichas de seguridad,
reactivos, equipos y otra información que se considere relévate.
4 INFORME DE LABORATORIO
En la redacción de los informes se deben conjugar los verbos en tiempo pasado. Esta
actividad es grupal.
La estructura de los informes es la siguiente:
4.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos escritos, en el
entorno de gestión se encuentra un manual de normas APA. La portada contiene el
nombre la universidad, la escuela a que pertenece el nombre de los integrantes del
grupo con los datos necesarios para su identificación
4.2 Resumen
Indicar una breve reseña de lo hecho durante la práctica y los objetivos, principales
resultados y las conclusiones del trabajo realizado.
4.3 El Índice General
El contenido, incluyendo el índice general, el índice de tablas, el índice de figuras y el
índice de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
4.4 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales características de las
técnicas, así como, descripción de objetivos generales y específicos que da lugar al
trabajo experimental. Esta es una sección realizada, redactando las ideas de los
autores o sea ustedes.
por la guía del componente práctico. Se toma los principales aspectos teóricos de
acuerdo a la metodología que de platea para desarrollar en la guía. Tenga presenta
4.6 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las precauciones
a tener, así como describiendo la información relávate que permita el buen desarrollo
de la práctica.
4.7 Resultados
Presentar la información sobre el desarrollo de las prácticas de forma estructurada,
completa y ordenada de la actividad experimental. Presentando gráficos, tablas,
cálculos y demás notas que describa la ejecución de la práctica.
4.8 Discusión
La discusión contendrá un análisis crítico de los resultados obtenidos de la actividad
práctica y los conceptos teóricos.
4.9 Conclusiones
Derivan de los resultados y la discusión del trabajo.
4.10 Recomendaciones
El trabajo realizado debería mostrar nuevos caminos para otras experiencias
de laboratorio similares. En esta sección se enumerarán claramente las
actividades que podrían realizarse para proyectar la información obtenida en la
investigación.
general y de acuerdo con la normas para trabajos escritos la información básica a
ofrecer es Autor(es)./Año de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o
editor./Edición./Ciudad y/o país de publicación en caso necesario,/Casa editora.
/Páginas o volúmenes./ (Mención de serie )
Esta información se detalla el final del documento.
por la guía del componente práctico. Se toman los principales aspectos teóricos de
acuerdo a la metodología que se platea para desarrollar en la guía. Tenga presenta
4.12 Referencias
general y de acuerdo con la normas para trabajos escritos la información básica a
ofrecer es Autor(es)./Año de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o
editor./Edición./Ciudad y/o país de publicación en caso necesario,/Casa editora.
/Páginas o volúmenes./ (Mención de serie )
Esta información se detalla el final del documento.
4.13 Anexo
En éstos se deben colocar toda aquella información referente a fichas de seguridad,
reactiva y equipos esta otra información que se considere relévate.
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO
Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

Se entiende la práctica de laboratorio, como la estrategia pedagógica que facilita la
consolidación del aprendizaje y el desarrollo de competencias disciplinares. La práctica
de laboratorio puede desarrollarse en una sesión o en varias sesiones de acuerdo a
las indicaciones que se den en la programación de cada periodo académico.
En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica, prácticas

experimentales: en donde se aprenden a manipular equipos, reactivos químicos,
conformándose pequeños grupos de trabajo para el desarrollo de la actividad. Para
llevar a cabo las prácticas de laboratorio se requiere que el estudiante tenga un
conocimiento teórico básico sobre el tema y lea detenidamente la guía de laboratorio.
5.1 NORMAS PERSONALES
La vestimenta deberá ser apropiada y cómoda, que facilite la movilidad para la

actividad que se desarrolla en los laboratorios. Debe cubrir áreas considerables de la
piel con pantalones (jeans), blusas con mangas, la bata y guantes.
Use calzado cerrado que cubra completamente el pie. El alumno debe portar en todo
momento Bata blanca de Laboratorio.
Nunca ingerir alimentos, beber o masticar chicle dentro del laboratorio, igualmente
evitar tocar partes del rostro y llevar las manos a la boca o introducir lapiceros u otros
en boca nariz y oídos.
Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al entrar a las

instalaciones del laboratorio se recomienda que se haga cuando esté presente el
docente encargado de la práctica, así como no ausentarse antes de terminar la
práctica.
El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la práctica;

cualquier tipo de acción social como cortejar, charlas ajenas a la práctica e igual que
las bromas pueden causar pérdida de tiempo y posibles incidentes de alta gravedad.
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS
Cuando se tiene que hacer una reacción química se debe escoger el recipiente
adecuado a la cantidad que se va a usar. Los ensayos se hacen en tubos de ensayo o
en placas de gotas, nunca en vasos, matraces, etc.
No usar recipientes alimenticios para contener productos químicos e igualmente
cualquier recipiente que se utilice para la recepción productos es necesario rotular,
brindando la mayor información sobre la sustancia contenida.
De los materiales de laboratorio No utilice vidrio agrietado, el material de vidrio en
mal estado aumenta el riesgo de accidente. No deben utilizarse para pipetear
jeringuillas provistas de aguja hipodérmica o aspirar con la boca pipetas de vidrio.
Compruebe la temperatura de los materiales antes de cogerlos directamente con las
manos.
Si cuenta con sistemas de extracción y renovación mecánica de aire activados,

manténgalos siempre en funcionamiento. Utilizar las campanas extractoras siempre
que sean posible.
Para detectar el olor de una sustancia, no se debe colocar la cara directamente sobre
el recipiente: utilizando la mano abierta como pantalla, es posible hacer llega una
pequeña cantidad de vapor hasta la nariz. Los frascos deben cerrarse inmediatamente
después de su uso.
Al momento de trabajar con ácido, para diluirlos vierta el ácido sobre el agua, nunca
al contrario.
No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados.
Nunca debe sacar sustancias químicas del laboratorio sin autorización.
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN
Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se utilizará un

recipiente adecuado.
Se debe mantener perfectamente limpio y seco el lugar dónde se encuentre situado
cualquier instrumento con contactos eléctricos. Leer las instrucciones de uso de los
instrumentos.
Debe revisarse el material de vidrio para comprobar posibles fisuras, especialmente
antes de su uso a vacío o presión.
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA
En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y salir de forma
ordenada siguiendo en todo momento las instrucciones que haya impartido el
Profesor. Localizar al iniciar la sesión de prácticas los diferentes equipos de emergencia
en el correspondiente laboratorio: Duchas y lavaojos, Botiquín, Absorbente para
derrames, Alarma de emergencia, Salida de emergencia y Recipiente para el vidrio
roto.
Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales utilizados

limpios y en buenas condiciones. Por último esperar las indicaciones para retirarse de
las instalaciones del laboratorio.
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.
Se hará la discusión sobre las normas de seguridad antes descriptas y las que
encuentran en el Reglamentación y Normas de Bioseguridad en los Laboratorios de la
UNAD y Otras Disposiciones.
Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o dibuje los

pictogramas y describa en el informe de laboratorio que significan con que elementos
de seguridad se cuenta. (Duchas, extintores, cámaras extractoras, etc.)
Preguntas
a) Escriba el nombre del reactivo y la formula química de los productos
usados en la práctica.
Ejemplo, Nitrato de plata (AgNO3)
c) Escriba una propiedad física de la sustancia.
Ejemplo, Son cristales blancos Densidad: (20/4): 4,352
d) Mencione posibles riesgos que representa la sustancia para la salud.
En contacto con la piel y ojos puede provocar irritación y quemaduras. Por
ingestión puede causar irritaciones en las mucosas de la boca, garganta, esófago y
tracto intestinal.
e) Indique cual es el equipo o la vestimenta de seguridad necesaria
para manipular la sustancia.
Usar equipo respiratorio adecuado. Utilizar guantes y gafas apropiadas. Utilizar
ropa de trabajo adecuada (bata de laboratorio) y lavarse las manos y la
cara antes y al finalizar el trabajo.
f) Resuma la información obtenida en el área de reactividad del símbolo
de diamante
En cuanto a la salud (rombo azul), el número 2 indica que es un reactivo peligroso.
En cuanto a inflamalidad (rombo rojo), el número 0 indica que no es inflamable. En
cuanto a la reactividad (rombo amarillo), el número 0 indica que es estable. En
cuanto a algún riesgo específico (rombo blanco), no presenta alguno.
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.
Referente teórico de aminoácidos
Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH 2) y un grupo
carboxilo (-COOH).
Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales basadas en las propiedades
de sus grupos R, en especial de su polaridad, o tendencia a interaccionar como el agua
a pH biológico (cerca del pH 7.0). La polaridad de los grupos R varía enormemente
desde totalmente apolar o hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o
hidrofílico (soluble en agua).
Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos.
Grupos R Propiedades de los aminoácidos
Apolares alifáticos Los grupos R de esta clase de aminoácidos son apolares e

hidrofóbicos.
Las cadenas laterales de la alanina, valina, leucina e isoleucina
tienden a agruparse entre sí en las proteínas, estabilizando las
estructuras proteicas a través de interacciones hidrofóbicas.
Otros aminoácidos que conforman este grupo son: glicina,

metionina y prolina.
Aromáticos Fenilalanina, Tirosina y Triptófano, con sus cadenas laterales

aromáticas, son relativamente apolares (hidrofóbicos). Todos ellos
pueden participar de interacciones hidrofóbicas.
Polares sin carga Los grupos R de estos aminoácidos son más solubles en agua, que
los aminoácidos apolares, debido a que contienen grupos
funcionales que forman puentes de hidrógeno con el agua.
Incluye este grupo la serina, treonina, cisteína, asparagina y

glutamina.
Cargados Estos aminoácidos pueden tener el grupo R cargado positivamente

(básicos) o negativamente (ácidos), siendo más hidrofílicos que
los demás aminoácidos.
Los aminoácidos en los que los grupos R tienen una carga neta
positiva significativa a pH 7.0 Lisina, arginina e histidina
Con una carga neta negativa a pH 7.0 son: aspartamo y el

glutamato.
La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las características particulares de los AA y de su clasificación, en

función de ésta podemos agrupar a los 20 aminoácidos, en diversas categorías así mismo, la nomenclatura puede hacerse
utilizando un código de tres letras o de una, tal como se observa en la siguiente tabla:
Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema de una sola letra,
impuesto en genética molecular.
Nomenclatura
Una Tres Nombre

Clasificación
letra letras
A Ala Alanina
G Gly Glicina
I Ile Isoleucina Ae
Apolares alifáticos
L Leu Leucina Ae
V Val Valina
F Phe Fenilalanina Ae
Apolares aromáticos
W Trp Triptófano Ae
C Cys Cisteina
Apolares con azufre
M Met Metionina Ae
N Asn Asparagina
Q Gln Glutamina Polares alifáticos y sin

S Ser Serina carga
T Thr Treonina Ae
Y Tyr Tirosina Polar aromático y sin

carga
R Arg Arginina
H His Histidina Ae
Polar con carga positiva
K Lys Lisina
D Asp Ac. Aspártico o Aspartato

Polar con carga negativa
E Glu Ac. Glutamico o Glutamato
P Pro Prolina Iminoacido

Ae = Aminoácido esencial
Tomado de: Manual de Prácticas de Laboratorio de bioquímica, Universidad Nacional Autónoma de México
Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos.

Prueba bioquímica Descripción de la reacción química entre los aminoácidos y
los reactivos.
Reacción con la El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos

ninhidrina coloreados con la ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría
(Hidrato de de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario,
tricetohidrindeno) amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la
asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral.
Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino
libres presentes en péptidos y proteínas
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico

frente a las sales de Mercurio a pH ácido, formando
Reacción de Millón
complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la
tirosina y las proteínas que la contienen.
Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos

reaccionan con ácido nítrico concentrado formando
Reacción
nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual
Xantoprotéica
esta reacción permite reconocer la presencia de Tirosina,
Fenilalanina y Triptófano.
El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la

Arginina reacciona con soluciones de alfa naftol en
Reacción de Sakaguchi
presencia de Bromo en medio alcalino formando
complejos coloreados rosados o rojos.
La presencia de anillos aromáticos fenólicos o

nitrogenados en la cadena lateral de los Aminoácidos se
puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico
Reacción de Ehrlich y nitrito de Sodio por formación de sales de Diazonio
fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la
presencia de Tirosina e Histidina libres o formando
péptidos y proteínas.
El anillo indólico presente en la cadena lateral de los alfa-

Reacción de aminoácidos libres o haciendo parte de péptidos y
Adamkiewick o proteínas se puede reconocer mediante reacción con el
Hopkins Cole ácido glioxílico a pH ácido, puesto que forma complejos de
coloración violeta o
Los Aminoácidos azufrados como Metionina, Cisteína y

Cistina se reconocen por la formación de precipitados de
Reacción con acetato Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se
de Plomo alcalino forman cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio
alcalino.
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
Tabla 4 Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantida
d
Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Gradilla 2
Sulfato cúprico Pinza para tubos 2

(CuSO)
Ácido Pipetas Pauster con bulbo 4

acético(CH3COOH)
Cloruro de sodio Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5

(NaCl)
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4

(NaOH)
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol
Hipoclorito de sodio
Reactivo de Hopkins-
Cole
Ácido sulfúrico
(H2SO)
Reactivo de Millón
Aminoácidos:
Glicina, tirosina,
triptófano,
fenilalanina y
arginina
Fenol
Albumina de huevo
Procedimiento
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la

ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es
primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene
un grupo amido en la cadena lateral.
Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y
proteínas. Precauciones la ninhidrina es toxica.
Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.

Tub Reacti Cada tubo
Cantidad Procedimiento
os vo
con 1.5 mL de ninhidr Preparar los tubos de Agregar 2 ml de

1
Glicina1% ina ensayo. solución de
ninhidrina (0.3%)
con 1.5 mL de ninhidr 
2
Albúmina1% ina
Agregue a cada tubo de
con 1.5 mL de ninhidr ensayo 1.5mL de la
3
Tirosina 1% ina solución correspondiente.
con 1.5 mL de ninhidr 

4
Glicina 1% ina
2 ml de solución (0.3%) de
con 1.5 mL de ninhidr ninhidrina a cada tubo. 1.5 ml de solución
5
Triptófano 1% ina respectiva

Tubos de ensayo en un +
baño de agua hirviente por Baño de agua
con 1.5 mL de ninhidr unos 10 minutos. hirviente por 10
6
Leucina al 1% ina  minutos.
Observar y tomar apuntes

de los cambios.
6.3 REACCIÓN DE BIURET
Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que
se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los
aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un
medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo
de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de
proteínas.
Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret.
Tub Cada tubo

Cantidad Reactivo Procedimiento
os
con 5 ml
de NaOH 2,5N
Preparar los tubos de 1 ml de
solución
1 + ensayo.
de NaOH 2,5N
Leucina al sulfato cúprico 
1% +
Agregue a cada tubo
NaOH 2,5N 3 gotas de solución
con 1.5 de ensayo agregue 1
de sulfato cúprico al
mL de ml de
2 + 1%
Albúmina
NaOH 2,5N de la
1% sulfato cúprico
solución
con 1.5 NaOH 2,5N correspondiente.
mL de
3 + 
Tirosina
1% sulfato cúprico Agregue 3 gotas de
solución de sulfato
con 1.5 NaOH 2,5N cúprico al 1% a cada
mL de 5ml de solución
4 + tubo de ensayo.
Glicina respectiva
1% sulfato cúprico 
Agite cada tubo de

NaOH 2,5N
con 1.5 ensayo
5
mL de +

Triptófano sulfato cúprico Observar y tomar
1% apuntes de los
cambios.
6.4 REACCION XANTOPROTEICA.

Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido nítrico
concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta
reacción permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptófano.
Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica.

Tub Reacti Cada tubo
Cantidad Procedimiento
os vo
HNO3 Agregue, 0,5 ml de

con 1.5 ml HNO3
de solución + Preparar los tubos de
1 ensayo. +
de Triptófano NaOH
1% 
Agregue, 0,5 ml de HNO3

HNO3
concentrado en cada tubo,
con 1.5 mL + en la campana de
2 de extracción.
Albúmina1% NaOH

1.5 ml de solución
Retire los tubos del baño y respectiva
HNO3 déjelos enfriar.
+
con 1.5 mL + 
3 de Metionina Baño de agua
1% NaOH Agregue lentamente 1 ml hirviente por 10
de Amoniaco (NH4OH) minutos.
concentrado en la
+
campana de extracción o
HNO3
con 1.5 mL 1.5 mL. de NaOH al 40%, Agregue 1 ml de
de + Amoniaco (NH4OH) ó
4 
Fenilalanina 1.5 mL de NaOH al
NaOH
1% Observar y tomar apuntes 40%.
de los cambios.
+
observe el cambio de
color
6.5 REACCION DE MILLON
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio

a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina
y las proteínas que la contienen.
Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón.

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
Reactivo de Agregue 15 gotas del Reactivo de

con 1.5 ml Millón Millón
de solución Preparar los tubos de ensayo.
1
de Tirosina + +
1% 
sulfato cúprico
agregue 15 gotas del Reactivo de Millón
Reactivo de a cada tubo de ensayo
con 1.5 mL Millón

2 de
+
Albúmina1% Agregue 3 gotas de solución de sulfato
sulfato cúprico cúprico al 1% a cada tubo de ensayo.
Reactivo de 
Millón 1.5 ml de solución respectiva
con 1.5 mL
Retire con cuidado los tubos de ensayo
3 de Leucina +
+ del baño de María y colóquelos en la
1%
gradilla.
sulfato cúprico Baño de agua hirviente por 10
 minutos
Observar y tomar apuntes de los +

cambios.
Dejar enfriar.
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI

El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con
soluciones de alfanaftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando
complejos coloreados rosados o rojos
Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi.
Hidróxido de Sodio Enfríe en baño de hielo por 10

(NaOH minutos.
Preparar los tubos de ensayo.
con 5 mL de + +

1 solución de
alfa-naftol 1 ml de Hidróxido de Sodio (NaOH) al
Arginina 1% Enfríe en baño de hielo por 10 minutos. 5%
+
 +
hipoclorito de Sodio
1 ml de Hidróxido de Sodio (NaOH) al 5% a Dejar enfriar 10 minutos.
Hidróxido de Sodio cada tubo de ensayo.
(NaOH +

+ 2 gotas de alfa-naftol al 1%.
con 1.5 mL de Dejar enfriar 10 minutos.
2 +
Albúmina1% alfa-naftol

+ 2 gotas de hipoclorito de Sodio al
Agregue con un gotero, 2 gotas de alfa-naftol 10%.
hipoclorito de Sodio al 1% a cada tubo de ensayo.
Hidróxido de Sodio 
(NaOH
Agregue 2 gotas de hipoclorito de Sodio al
con 1.5 mL de + 10% a cada tubo.
3 proteína de
alfa-naftol 
trigo 1%.
+ Observar y tomar apuntes de los cambios.
5 ml de solución respectiva
Hidróxido de Sodio
(NaOH
+
con 1.5 mL de
4
Leucina alfa-naftol
Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes técnicas.
NINHIDRINA
(-) incolora (+) Violeta o (+) Rojo o

amarillo claro amarillo
No es proteína, fuerte
proteína ni polipéptido o Hidroxiprolina
aminoácido aminoácido o prolina
BIURET
(-) Azul o (+) Violeta

amarillo Proteínas y
aminoácidos polipéptidos
XANTOPROTÉICA
COAGULACIÓN
(+) Amarillo, (-) No coagula (+) Coagula

(-) Incoloro naranja o
Histonas, Albúminas o
verde
Otros protaminas o globulinas
Tirosina,
aminoácidos polipéptidos
fenilalanina o
triptófano
ADAMKIEWICK o HOPKINS
COLE SULFATO DE AMONIO
(+) Azul o (-) Incoloro (+) Precipita (-) No

violeta Globulinas Precipita
Tirosina o
Triptófano Fenilalanina Albúminas
MILLÓN
(+) Rojo (-) Incoloro
Grupo SH Tirosina Fenilalanina

SAKAGUCHI
(+) Negro o
(-) Incolora gris
(+) Rojo
Otros Cisteína,
Arginina
aminoácidos cistina,
metionina
Tomada:
6.7 PREGUNTAS:
Escriba la reacción para cada una de las pruebas realizadas.

Proponga de acuerdo a la pruebas una clasificación de los aminoácidos utilizados y
relacione la importancia de la aplicación de algunas de estas pruebas aplicadas a
otras áreas del conocimiento como: microbiología, química de alimentos entre otras.
Para el siguiente pentapéptido, diga cuales pruebas y porque serán positivas. (ALA-
VAL-GLY-GLU-LYS)
Defina los siguientes términos: aminoácidos, proteínas, análisis cualitativo,
cuantitativo.
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS
Referente teórico de proteínas y aminoácidos.

Las proteínas son uno de los principales componentes de todas nuestras células. Los
aminoácidos (compuestos orgánicos) son los ladrillos de construcción de la proteínas.
Los aminoácidos se agrupan de acuerdo con su comportamiento químico. La síntesis
de las proteínas ocurre mediante la unión entre sí de las cadenas de aminoácidos. Los
distintos aminoácidos imparten diferentes comportamientos químicos en la estructura
de las proteínas. Debido a la presencia de diferentes aminoácidos en las uniones
peptídicas las proteínas reaccionan con una variedad de compuestos formando
productos coloreados.
Los aminoácidos tiene tres tipos de reacciones químicas importantes: (1) reacciones
debido a la presencia del grupo carboxilo (COO- ), (2) reacciones debidas al grupo
amino (NH), y (3) reacciones debido al grupo R.
Las reacciones debidas al grupo carboxilo y al grupo amino son generales y se dan
para todos los aminoácidos. Las reacciones del radical R son reacciones específicas;
por ejemplo, cisteína da una reacción para azufre, triptófano da ciertas reacciones de
color debido a que su molécula contiene el grupo indol, tirosina da otras reacciones
de color debido a su grupo fenólico, etc.
Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos de esas

proteínas y son importantes tanto para la detección como para el dopaje de
aminoácidos y proteínas. Existen también reacciones generales porque sirven para
caracterizar grupos comunes a todas las proteínas como grupos amino o uniones
Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos.

Método Descripción Desventajas
Biuret Gornell AG, C. J. Bardawill, and M. M. El método se usa para

DAVID. Determination of serum proteins soluciones que tienen de
by means of the biuret. reaction. J. 0.5 a 10 mg proteína/ml.
BioZ. Chem. 177: 751-766, 1949
Se basa en la reacción de sales de Cu+2

Es un método poco
con moléculas que contienen más de dos
sensible. Es útil cuando se
enlaces peptídicos en un medio alcalino;
quiere analizar grandes
el cobre es reducido a Cu+ formando
lotes de proteína.
complejos color púrpura que tienen un
máximo de absorción a 540 nm.
Lowry Lowry, OH, NJ Rosbrough, AL Farr, and

RJ Randall. J. Biol. Chem. 193: 265.
1951
Este es un método muy
sensible, por lo que
Resulta de la reacción de Biuret sobre permite trabajar con
los enlaces peptídicos, además de la soluciones muy diluidas de
reducción del reactivo de proteínas (0.02 - 0.5 mg
fosfomolibdato-fosfotungstato (Folin- proteína/ ml)
Ciocalteu) por las proteínas pretratadas
con cobre en medio alcalino, dando una
coloración azul, determinado a 650 nm.
El Cu+ y los grupos R de la tirosina,
triptofano y cisteína reaccionan con el
reactivo de Folin, produciendo un
producto inestable que es reducido a
azul de molibdeno/tungsteno.
Bradfor Bradford, M. M. (1976) Anal. Biochem. Muestra interferencias con

d 72, 248 detergentes
Basado en el Azul Brillante de Coomasie

G-250 cambia de rojo a azul, al unirse a
residuos aromáticos y arginina en las
proteínas.
La reacción entre el colorante y la

proteína es muy rápida
(aproximadamente 2 min), y el completo
proteína-colorante permanece disperso
en solución por un tiempo relativamente
largo.
Rango de detección: 0.5-10 mg

proteína/ml.
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES
Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos.

Reactivos Materiales Cantida
d
Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Gradilla 2
Sulfato cúprico (CuSO) Pinza para tubos 2
Ácido acético(CH3COOH) Pipetas Pauster con bulbo 4

Cloruro de sodio (NaCl) Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4

(NaOH)
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol Vidrios reloj grandes
Hipoclorito de sodio Probeta 100 ml
Reactivo de Hopkins- Balón aforado de 25 ml

Cole
Ácido sulfúrico (H2SO) Agitador de vidrio
Reactivo de Millón Balanza analítica
Aminoácidos: Glicina, Espectrofotómetro

tirosina, triptófano,
fenilalanina y arginina
Fenol Micropipeta 10 μL
Albumina de huevo Micropipeta 20- 200 μL
Agua destilada Micropipeta 20- 200 μL
Ácido fosfórico Micropipeta 200-1000 μL
Etanol 1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para

micropipeta
1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para

micropipeta
1 caja con puntas de 1000 μL (azules) para

micropipeta.
Agitador vórtex múltiple para tubos
7.2 REACCIÓN DE BIURET
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para
su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos
y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace
peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo de Biuret
lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con
los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad
de color depende de la concentración de proteínas.
Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret.

Tub Cada tubo
o
CuSO4 al Preparar los tubos de

con 3 mL de 1% ensayo.
4 a 5 gotas de
solución de
1 +  solución de CuSO4
Albúmina de
al 1%
huevo 1% hidróxido Añadir de 4 a 5 gotas
sódico de solución de CuSO4al +
1%
con 3 mL de CuSO4 al 2 ml hidróxido
solución de 1%  sódico
aminoácidos
2 + Añadir 2 ml de solución
Tirosina,
de hidróxido sódico al
Triptófano o hidróxido
20%.
Fenilalanina. sódico

con 3 mL de CuSO4 al
3
Leche 1% 1%
+ Agitar para que se
mezcle.
hidróxido
sódico 
CuSO4 al Observar y tomar

1% apuntes de los
con 3 mL de
cambios.
4 Aceite de +
cocina
hidróxido con 3 mL de
sódico solución respectiva
CuSO4 al +
1%
con 3 mL de Agitar y observar
5 + color violeta, azul o
Glucosa
hidróxido amarillo.
sódico
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS
Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de

plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los
aminoácidos, el cual al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el
sulfuro de plomo.
Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH .

Tubo Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
hidróxido Preparar los tubos de 2 ml hidróxido

sódico ensayo. sódico
con 3 mL de
solución de +  +
1
Albúmina de acetato de Añadir 2 ml de solución de solución de
huevo 1% plomo hidróxido sódico al 20%. acetato de
plomo al 5%
hidróxido  +
con 3 mL de sódico
solución de Añadir 10 gotas de
aminoácidos + solución de acetato de
2 plomo al 5%
Tirosina, acetato de
Triptófano o plomo 
Fenilalanina.
Calentar el tubo hasta
ebullición.
hidróxido
sódico 
con 3 mL de
con 3 mL de + Observar y tomar apuntes solución
3 de los cambios.
Leche 1% acetato de respectiva
plomo  +
Calentar el
hidróxido El precipitado de color tubo hasta
sódico negruzco indica que se ha ebullición.
con 3 mL de formado sulfuro de

+
4 Aceite de Plomo, utilizándose el
cocina acetato de
azufre de los aminoácidos
plomo
hidróxido
sódico
con 3 mL de +
5
Glucosa acetato de
plomo
7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS: MÉTODO DE

BRADFORD.
Práctica sugerida de acuerdo a la disposición de los recursos.

INTRODUCCION
Existen varios métodos para determinar la concentración de proteínas de una muestra,

tales como la determinación de la absorbancia a 280 nm, o mediante la formación de
derivados coloreados de las proteínas, base de los métodos de BIURET o de LOWRY.
En estos casos se forma un complejo coloreado de cobre con el enlace peptídico; en
el método de Lowry, además del complejo anterior también se forma un derivado de
las tirosinas que contribuye a la absorbancia total.
El método de Bradford se basa en el empleo de emplea un colorante hidrofóbico cuyas

disoluciones acuosas en presencia de ácido fosfórico tienen un color pardo y que, al
encontrarse en el entorno hidrofóbico del interior de una proteína, origina un color
azul intenso que se puede medir fácilmente. Este método depende, pues de la
interacción relativamente inespecífica entre un colorante hidrofóbico y las proteínas,
por lo que es relativamente sensible a la presencia de contaminantes tales como restos
de detergente y líquidos orgánicos como el metanol.
La determinación de proteínas por el método de Bradford consiste en la cuantificación

de la unión de un colorante, el Azul de Coomassie G-250, a la proteína, comparando
esta unión con la de diferentes cantidades de una proteína estándar (Albúmina de
Suero Bovino (BSA)). La cuantificación se hace midiendo la absorbancia en un
espectrofotómetro, a 595 nm, y graficando la absorbancia vs la concentración de
proteínas, obteniendo una curva de calibración de la proteína estándar. Con esta curva
de calibración, se puede interpolar la concentración de proteínas en una muestra al
medir su absorbancia a 595 nm.
1- Reactivo de Bradford
Azul de coomasie G-250 5 mg
Etanol 2.5 ml
Ácido fosfórico 5 ml
Agua Hasta 50 ml
Mezclar en el orden indicado, disolver con agitación y a continuación filtrar
2-Patrón de albúmina. Disolver 10 mg de albúmina bovina en 10 ml de agua destilada,

con lo que tenemos una disolución madre con una concentración de 1 mg/ml.
1-Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta 60 µg; de

tal manera que el volumen final en cada tubo sea de 300 µl.
Mezclar para ello el volumen adecuado de la disolución madre de albúmina bovina de
un 1 mg/ml y el correspondiente volumen necesario de agua, de acuerdo con la
siguiente tabla.
METODO
1-Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta 60 µg; de

tal manera que el volumen final en cada tubo sea de 300 µl. Mezclar para ello el
volumen adecuado de la disolución madre de albúmina bovina de un 1 mg/ml y el
correspondiente volumen necesario de agua, de acuerdo con la siguiente tabla.
Tabla 15 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0

hasta.
µg (prot) 0 10 20 30 40 50 60
µl (alb) 0 10 20 30 40 50 60
µl (agua) 300 290 280 270 260 250 240
µl total 300 300 300 300 300 300 300
2-Preparación de tres diluciones de la muestra problema:
Hacer una dilución 1:20 de la leche comercial; a continuación realizar las diferentes
diluciones de acuerdo con la siguiente tabla.
Tabla 16 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0
hasta
Leche diluida A B C
V. leche (µl) 20 25 30
V. agua (µl) 280 275 270
V. total 300 300 300
Finalmente añadir 3 ml del reactivo de Bradford a todos los tubos; tanto a las
diluciones que contienen la albúmina como a las que contienen la leche diluida. Agitar
los tubos y a continuación proceder a la lectura de la absorbancia a 595 nm en el
colorimetro.
RESULTADOS
1- Elaboración de la recta patrón. Para ello representar en el papel milimetrado
adjunto la absorbancia de cada uno de los tubos que contenían albúmina bovina frente
a la cantidad de proteínas correspondiente. Si se dispone de una calculadora con
capacidad para hacer rectas de regresión, compruebe el coeficiente de correlación de
la recta obtenida. En cualquier caso determine la pendiente de la recta.
2- Para las tres diluciones del problema, interpolar la absorbancia obtenidas sobre la
recta representada para saber la cantidad de proteínas presentes en cada una de ellas.
Alternativamente, haga el cálculo mediante la pendiente de la recta.
3- Teniendo en cuenta los volúmenes de muestra usados en cada caso y teniendo en

cuenta la dilución realizada, calcúlese la concentración de proteínas en la muestra
analizada. Dar el resultado en gramos de proteínapor 100 ml de leche.
7.5 PREGUNTAS:
¿Cuáles son los principales métodos colorimétricos usados en la determinación de

proteínas?
¿Cuál es la reacción de un alfa-aminoácido y ninhidrina?
¿Cuál es la reacción con el reactivo de Biuret?
¿Qué proteínas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo? 2. ¿Cuál de los tres

agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización? 3. ¿Cómo podríamos saber
que una sustancia desconocida es una proteína? 4. ¿Qué coloración da la reacción del
Biuret? 5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret? 6. Si se realiza
la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva o negativa?
¿Por qué?
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
Referente teórico.
Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre

la superficie terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia
orgánica existente. En ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares,
sacáridos o glúcidos. Todos son términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a
que poseen la composición Cn (H2O)n. Estas moléculas usualmente contienen
carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los carbohidratos se
clasifican como monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño
y la complejidad de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola
molécula de azúcar. Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido,
y cuando dos o más se unen se produce un polisacárido.
En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista energético,
ya que muchos órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro y los glóbulos
rojos, obtienen su energía principalmente de la glucosa. Pero sus funciones no se
restringen a ser únicamente fuente de energía, sino que también pueden desarrollar
funciones estructurales, de reconocimiento celular y adhesión. Estructuralmente, un
hidrato de carbono típico es una cadena hidrocarbonada con varios grupos alcohol y
un carbono más oxidado, en forma de grupo carbonilo. Este grupo oxidado puede
situarse en el extremo de la cadena (aldehído), o adyacente, en posición 2 (cetonas)
Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos.
Todos los monosacáridos y los disacáridos con enlace mono-carbonilo, cuando se

encuentran en solución a pH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros
compuestos. Esta capacidad reside en las características del grupo carbonilo (C
anomérico en formas cicladas) libre. Esta propiedad, y por tanto, la presencia de un
azúcar reductor, se ponen de manifiesto mediante las reacciones de:
Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos.
Ensayo Descripción del ensayo
Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de

carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan
con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se convierten
en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
Fehling -Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O
-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua
(Detecta la presencia de azúcares reductores) Los azúcares

reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu 2+ de
color azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar
se oxida a grupo carboxilo. En medio fuertemente básico, como es en
este caso el NaOH, el ión Cu2+ formaría Cu (OH)2 insoluble, por eso
se añade tartrato sódico potásico en el Fehling B (el reactivo de
Fehling consta de dos componentes: Fehling A y Fehling B) que actúa
como estabilizador al formar un complejo con el Cu 2+.
NaO +Cal
H or
+R
CuSO  Cu(OH)2  Cu2O (rojo

2 (azul) ladrillo)
Reacción
Benedict (Detecta la presencia de azúcares reductores) Se basa en la reducción

de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción
de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico)
utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
-Sulfato cúprico.
-Citrato de sodio.
-Carbonato anhidro de sodio
Barfoed Ácido acético
Acetato cúprico
(Detecta la presencia de monosacáridos) El reactivo de Barfoed es

débilmente ácido y es reducido solamente por monosacáridos,
formándose como producto de reacción óxido cuproso.
En medio ácido, tan sólo los monosacáridos son capaces de reducir el

Cu2+ a Cu+. El Cu+ así producido reduce al ácido fosfomolíbdico a un
complejo de intenso color azul oscuro.
Ioduro Los polisacáridos sin ramificar forman complejos característicos

cuando reaccionan con yodo. Los ramificados también lo hacen, pero
los complejos formados tienen menos intensidad de color.
Seliwanof Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de

f la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con
resorcinol formando así complejos coloreados.
Bial El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma
complejos de coloración sólo con las pentosas.
Lugol El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro,
permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la
formación de una coloración azul violeta intensa y el glicógeno y las
dextrinas por formación de coloración roja.
Rotación óptica
Es una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar

el grado de pureza de los mismos, particularmente monosacáridos, ocasionada por la
presencia de centros asimétricos o quirales en la estructura molecular, los cuales
desvían el plano de luz polarizada. Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos
pues la presentan todas aquellas sustancias denominadas óptimamente activas, por
tener en su estructura centros quirales.
Para la medición de la rotación óptica los factores importantes a tener en cuenta son:
La longitud de onda de luz polarizada, la cantidad de material óptimamente activo, y
la naturaleza del solvente cuando se usa. Los cambios en la temperatura ocasionan
solo pequeñas variaciones en las medidas de la rotación.
Los datos de rotación óptica se representan como |α] = rotación específica o | M] =

Rotación molecular, donde:
|α| = α/LC
α: Rotación observada en grados angulares
L: Longitud en decímetros del paso de luz polarizada a través de la muestra
C: Concentración en gramos por mililitro.
M: Peso molecular
| M | = M x | α |/100 cuando el plano de luz polarizada se desvía en el sentido de las

manecillas del reloj se antepone un signo positivo al número de grados que fue rotado
el plano de luz.
El plano de luz polarizada hacia la derecha se llaman dextrógiros o dextro rotatorios,
y esa característica se indica anteponiendo el signo (+) al nombre del compuesto. Los
compuestos que desvían el plano de luz polarizada hacia la izquierda se llaman
levógiros o levo rotatorios, y esa característica se indica anteponiendo el signo (-) al
nombre del compuesto.
O H O H Los prefijos D y L no tienen nada que ver con el carácter

C C dextro/levo rotatorio de la molécula, sino que indican la
H – C – OH HO – C – H posición del OH del penúltimo carbono en la
HO – C – H H – C – OH representación de Fischer. Para indicar su poder
H – C – OH HO – C – H rotatorio hay que utilizar los signos (+) y (-). Da la
H – C – OH HO – C – H casualidad de que el D-gliceraldehído es dextrógiro (D-
CH2OH CH2OH (+)-gliceraldehído) y de que el L-gliceraldehído es
D-glucose L-glucose
levógiro (L-(-)-gliceraldehído), pero pueden existir
compuestos que pertenecen a la serie D y que son
levógiros, como la D-(-)-fructosa.
Ilustración 2 Molécula de glucosa.
8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 18 Materiales y reactivos.

Reactivos Materiales Cantidad
Reactivo de Benedict Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
Reactivo Fehling A y reactivo Gradilla 2

Fehling B
Lugol Pinza para tubos 2
Glucosa Pipetas Pauster con bulbo 4
sacarosa Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
almidón Estufa 1
Fructosa Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Fehling A y B Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
α-naftol Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
8.2 PRUEBA DE BENEDICT
Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato

sódico) utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azúcares reductores)

Tubo Cada tubo
s
con 3 ml de
reactivo de
1 Glucosa al
Benedict Preparar los tubos de Agregue a cada tubo
1%
ensayo. de ensayo 2
con 3 mL de
reactivo de  ml de reactivo de
2 sacarosa al
Benedict Benedict
1%
con 3 mL Agregue a cada tubo de +
reactivo de
3 de almidón ensayo 2
Benedict Baño de agua hirviente
al 1%
ml de reactivo de Benedict. por
con 3 mL
 10 minutos.
de jugo de reactivo de
4
cebolla al Benedict Tubos de ensayo en un
1% baño de agua hirviente por
unos 10 minutos.
con 3 mL de
reactivo de
5 Fructosa al 
Benedict
1%
Agite cada tubo de ensayo

con 3 mL reactivo de Observar y tomar apuntes
6
de agua Benedict de los cambios. Positiva 3 ml de solución
aparece un precipitado respectiva
rojizo, verde o amarillo.
8.3 REACCIÓN DE FEHLING
Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de
color azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo
carboxilo.
Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azúcares reductores)
con 3 mL de Reactivo Fehling A

1
Glucosa al 1% Reactivo Fehling B Preparar los tubos de ensayo. Añadir reactivo Fehling A y
reactivo Fehling B
con 3 Ml de Reactivo Fehling A 
2 +
sacarosa al 1% Reactivo Fehling B Añadir 1 ml del reactivo Fehling A
y 1 ml del Baño de agua hirviente por
3  10 minutos.
almidón al 1% Reactivo Fehling B
Tubos de ensayo en un baño de
con 3 mL de Reactivo Fehling A agua hirviente por unos 10
4 jugo de cebolla minutos.
al 1% Reactivo Fehling B
con 3 mL de Reactivo Fehling A 
5
Fructosa al 1% Reactivo Fehling B Baño de agua hirviente por
10 minutos.

6 Observar y tomar apuntes de los
Lactosa al 1% Reactivo Fehling B cambios.
Reactivo Fehling A: disolver 7 g CuSO4 · 5 H2O en 100 ml de agua destilada.

Reactivo Fehling B: 35 g de tartrato de sodio y potasio + 12 g NaOH en 100 ml de
agua destilada
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción
de Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato. Se
basa en la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de
carbono. En dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces
glucosídicos de la muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o
hidroximetilfurfural (en las hexosas). Estos furfurales se condensan con el alfa naftol
del reactivo de Molisch (reacción de Molisch) dando un producto coloreado.
Tabla 21 Reacción de Molisch.

reactivo de Molisch
con 3 mLde de
1 + Preparar los tubos de ensayo. reactivo de Molisch
Glucosa al 1%
H2SO4  +
reactivo de Molisch Agregue dos gotas de reactivo de Incline el tubo y deposite 1

con 3 mL de Molisch mL de H2SO4
2 +
Sacarosa al 1%

H2SO4
Mezcle bien No mezcle
con 3 mL de
3 reactivo de Molisch
Galactosa al 1% 
+ Incline el tubo y deposite 1 mL de
H2SO4 concentrado deslizándolo
H2SO4 lentamente por la pared del tubo.
reactivo de Molisch 
con 3 mL de Ribosa
4 + No mezcle. Sólo coloque el tubo en
1%
posición vertical y observe la
H2SO4
formación del anillo rojo violeta que
reactivo de Molisch aparece en la zona de contacto de los
con 3 mL de dos líquido
5 + 3 ml de solución respectiva
Fructosa al 1%
H2SO4 +
reactivo de Molisch coloque el tubo en posición

con 3 mL de vertical y observe la
6 + formación del anillo rojo
maltosa al 1%
violeta
H2SO4
8.5 PRUEBA DE TOLLENS

En primer lugar, hemos de limpiar el tubo de ensayo donde se realizará el
experimento, hirviendo en éste NaOH al 10%. Entonces, se añaden 3 gotas de la
muestra problema (o bien 50 mg de sólido), y 2,5 ml de reactivo de Tollens recién
preparado. Agitar el tubo y dejarlo estar durante 10 minutos. Si al cabo de éste tiempo
no se observa reacción, se calienta el tubo en un baño de agua caliente.
Tabla 22 Prueba De Tollens.
NaOH al 5%
con 3 mL de solución
1 + Preparar los tubos de ensayo. dos gotas de solución de
Glucosa al 1%
AgNO3 al 5%  α-naftol
NaOH al 5% añadir 2 gotas de una disolución de +

2 + NaOH al 5% 1 mL de H2SO4
de Sacarosa al 1%
AgNO3 al 5% 
NaOH al 5% ml de disolución acuosa de AgNO 3 al

con 3 mL de solución 5%
3 +
de Galactosa al 1%

AgNO3 al 5%
NaOH al 5% Agitar el tubo y añadir
4 + gota a gota y con agitación NH4OH
de Lactosa 1%
2N, hasta que se consiga disolver el
AgNO3 al 5% precipitado de AgOH
NaOH al 5% 
5 + No mezcle. Sólo coloque el tubo en
de Fructosa al 1%
posición vertical y observe la
AgNO3 al 5%
formación del anillo rojo violeta que
NaOH al 5% aparece en la zona de contacto de los 3 ml de solución respectiva
con 3 mL de solución dos líquido
6 +
de maltosa al 1%
AgNO3 al 5%
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de
poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo
de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de

estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las
moléculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es
de estructura ramificada, con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más
cortas y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.
8.7 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de
poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo
de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de

estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las
moléculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es
de estructura ramificada, con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más
cortas y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.
Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico).
con 3 ml de solución
1 lugol
Glucosa al 1%
Preparar los tubos de Agregar 5 gotas de lugol
con 3 mL de solución ensayo.
2 lugol
sacarosa al 1%

3 lugol Agregar 5 gotas de lugol
almidón al 1%

4 lugol
jugo de cebolla al 1% Observar y tomar apuntes
de los cambios.
5 de almidón de papa al lugol
1%
6 con 3 mL de agua lugol

Observar y tomar apuntes de los
cambios.
8.8 PREGUNTAS
Explique por qué el monosacárido gliceraldehido da negativa la prueba Molish.
¿Cuáles son las aplicaciones prácticas de las pruebas estudiadas?
Defina los siguientes términos: carbono anomérico, centro quiral, levorrotatorio.
Dibuje los monosacáridos glucosa, galactosa, ribosa y fructosa, clasifíquelos según el

número de átomos de carbono y la función principal
Efectué un enlace hemiacetálico y uno hemicetálico, escriba las diferencias entre

ambos enlaces.
Escriba las funciones: aldehídica, cetónica, alcohólica, ácida, colóquelas en orden de

reactividad y explique el porqué de ese orden.
Explique en qué consiste la hidrólisis ácida de disacáridos.

Defina los siguientes términos: azúcar reductor y azúcar no reductor, cite ejemplos.
Efectué un enlace glucosídico.
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS
Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente
por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más
bajas que los dos primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo
de sustancias muy heterogéneas con características químicas diversas, pero con
algunas propiedades físicas comunes, que podrían resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej:
hexano), benceno, acetona y alcoholes.
De acuerdo a la estructura química los lípidos se clasifican en dos grupos, de acuerdo

al contenido en su composición ácidos grasos (Lípidos saponificables) o no lo posean
(Lípidos insaponificables).
La saponificación consiste en una hidrólisis alcalina de la preparación lipídica (con

KOH o NaOH). Los lípidos derivados de ácidos grasos (ácidos monocarboxílicos de
cadena larga) dan lugar a sales alcalinas (jabones) y alcohol, que son fácilmente
extraíbles en medio acuoso.
Tabla 24 Clasificación de lípidos.

Lípidos saponificables Simples Acilglicéridos
Céridos
Complejos Fosfolípidos
Glucolípidos
Lípidos insaponificables Terpenos
Esteroides
Prostaglandinas
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantidad
Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
Agua destilada Gradilla 2
Hexano Pinza para tubos 2
Acetato de etilo Pipetas Pauster con bulbo 4
Etanol Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
NaOH Estufa 1
KOH Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Sudán III Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS

Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen
en pequeñísimas gotitas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es
transitoria, puede sepárese en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en
una capa que por su menor densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las
grasas con solubles en los llamados disolventes orgánicos como el éter, benceno,
xilol, cloroformo, etc.
Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos.
con 3 ml de Aceite 4 mL de agua Preparar los tubos de ensayo. 4 mL de hexano

1
vegetal destilada
con 3 ml de Aceite 
2 4 mL de hexano
vegetal
4 mL de hexano
Agite los tubos.
deje reposar unos minutos 3 ml de Aceite vegetal
+
Observar y tomar apuntes de los Agite los tubos
cambios.
+
Dejar en reposo.

cambios.
SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con bases fuertes,
NaOH o KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben el nombre de jabones.
Esta reacción se denomina de saponificación. Son saponificables los ácidos grasos o
los lípidos que poseen ácidos grasos en su estructura.
Tabla 27 Ensayo de Saponificación.

3 mL de 3 mL de NaOH Agregar manteca en un tubo de

1 ensayo.
aceite vegetal (1 N) Preparar los tubos de ensayo.
3 mL de Agregar 3 mL solución de NaOH

2 3 mL de KOH
aceite vegetal
(1 N).
Agitar.
Baño de agua hirviente por 3 ml de la solución de NaOH (1

N).
10 minutos.
 +
Dejar enfriar. Baño de agua hirviente por
 10 minutos.
Observar y tomar apuntes de los Observar y tomar apuntes de los

cambios. cambios.
Si posible repetir el mismo procedimiento con

KOH
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas,
porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo,
cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudán III.
con 3 ml de 3 ml de Aceite vegetal

1 Aceite Sudan III
vegetal Preparar los tubos de ensayo.
con 3 mL de 
2 Aceite Tinta roja Agregar 3mL de aceite vegetal.
vegetal

Agregar 8 gotas de Sudan III
8 gotas de Sudan III

cambios.
cambios.
9.4 PREGUNTAS:
¿Qué son los jabones? ¿Cómo se pueden obtener los jabones?

¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?
Indica lo que ocurre con las mezcla aceite – sudan III y aceite-tinta y explica a qué se
debe la diferencia entre ambos resultados.
¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?
¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las diferencias
observadas entre ambas emulsiones?
¿Qué ocurre con la emulsión cuando se le añade detergente?
Entorno para su El componente se realiza en los diferentes centros en

desarrollo: donde se hace la programación de acuerdo con
Productos a
Informe de laboratorio: informe de resultados, tabla de datos
entregar por el
cuantificados y el análisis de la misma, etc.)
estudiante:
Tipo de No se entrega ningún
Individual X Colaborativo X
producto: producto
Individual:
Colaborativo
El Grupos entrega el informe de laboratorios con :
La portada, introducción desde donde plantea los objetivos, muestra resultado, concluye y
reporta la bibliografía en normas APA.
Contesta cuestionarios
Resolución de los ejercicios
Entrega informe a tiempo
Aporta información adicional.
Incluye gráficos y fotografías
Elabora las conclusiones con “dificultades y propuestas de mejora”.
3. Lineamientos generales del trabajo colaborativo para el desarrollo del
componente práctico
Planeación
de Leer la guía del componente práctico, asistir a la fecha programada
actividades por la universidad en cada centro. Establecer el grupo de trabajo
para el para el componente práctico. Participar en la construcción del
desarrollo documento a entregar como informe de la actividad.
del trabajo
colaborativo
Roles a
desarrollar
por el Los integrantes del grupo realizan el desarrollo de las prácticas,
estudiante toman los datos y participan en la construcción del documento
dentro del final.
grupo
colaborativo
Roles y
responsabilid
ades para la Los estudiantes del grupo colaborativo entregan un producto final
producción llamado informe de laboratorio. Para este propósito es necesario la
de participación de sus integrantes, tanto en el trabajo del laboratorio
entregables como en el análisis de la información posterior a esta actividad.
por los
estudiantes
Uso de
Para referenciar los documentos debe hacer uso de la Norma APA.
referencias
En el acuerdo 029 del 13 de diciembre de 2013, artículo 99, se
considera como faltas que atentan contra el orden académico, entre
otras, las siguientes: literal e) “El plagiar, es decir, presentar como
de su propia autoría la totalidad o parte de una obra, trabajo,
documento o invención realizado por otra persona. Implica también
Políticas de
el uso de citas o referencias faltas, o proponer citad donde no haya
plagio
coincidencia entre ella y la referencia” y liberal f) “El reproducir, o
copiar con fines de lucro, materiales educativos o resultados de
productos de investigación, que cuentan con derechos intelectuales
reservados para la Universidad.
Las sanciones académicas a las que se enfrentará el estudiante son
las siguientes:
a) En los casos de fraude académico demostrado en el trabajo
académico o evaluación respectiva, la calificación que se
impondrá será de cero punto cero (0.0) sin perjuicio de la
sanción disciplinaria correspondiente.
b) En los casos relacionados con plagio demostrado en el trabajo
académico cualquiera sea su naturaleza, la calificación que se
impondrá será de cero punto cero (0.0), sin perjuicio de la
sanción disciplinaria correspondiente
4. Formato de Rubrica de evaluación
Formato rúbrica de evaluación

Tipo de Actividad Actividad
X X
actividad: individual colaborativa
Momento de la Intermedia,
Inicial X Final
evaluación unidad
Niveles de desempeño de la actividad individual
Aspectos
Valoración Puntaje
evaluados Valoración alta Valoración baja
media
El estudiante viste
ropa adecuada y lleva No viste
el pelo recogido. adecuadamente y
Cumple estrictamente no cumplen con
Presentació
las normas de ninguna de las
n en el 25
laboratorio. Bata normas básicas de
laboratorio
blanca y zapatos laboratorio.
cerrados
(25) (0) (0)
El estudiante, asiste El estudiante El Estudiante no
25
puntualmente, trae al trae al trae guía, ni
laboratorio el guía de laboratorio el elementos
la práctica, los cálculos guía, más no necesarios para la
necesarios ya hace una realización de la
planteados y la lectura previa práctica de
Preparació
información básica de la misma y laboratorio.
n previa de
necesaria y los le faltan los
la práctica
elementos que elementos
docentes exigió. exigidos para la
práctica.
(25) (12) (0)
No lleva el pre
informe al
Desarrolla de forma Desarrolla parte
laboratorio o lo
correcta todas las del pre informe
lleva pero no
Pre informe exigencias del pre pero alguna no 20
cumple con lo
informe es correcta.
solicitado en la
guía.
(20) (12) (0)
Niveles de desempeño de la actividad colaborativa
Aspectos
Valoración Puntaje
evaluados Valoración alta Valoración baja
media
El grupo realiza
la práctica,
presenta
El equipo No realiza
Desempeño dificultades en la
El grupo realiza la la práctica. No sabe
del alumno realización de las
práctica sin dificultades. aplicar los
en base a actividades.
Aplican los conocimientos conocimientos
conocimient Desconoce parte
adquiridos. Presenta adquiridos. Presenta 30
os de las prácticas y
seguridad en sus dificultades en la
demostrado no presenta
acciones. realización de los
s dificultades en la
cálculos.
realización de las
actividades y los
cálculos.
(30 X puntos) (12 X puntos) (0 X puntos)
El equipo El Grupos entrega el
El grupo
realiza la informe de laboratorios
presenta un El grupo no presenta
práctica con con :
informa parcial informe de 25
mucha - revisa bibliografía
de la práctica de laboratorio.
dificultad. - realiza la portada,
laboratorio.
No sabe introducción desde
aplicar los donde plantea los
conocimient objetivos, muestra
os resultado, concluye y
adquiridos. reporta la bibliografía en
Presenta normas APA.
dificultades - contesta cuestionarios
en la - resolvió los ejercicios
realización - entrega informe a
de los tiempo
cálculos. - Aporta información
adicional.
- Aporta fotografías
- Elabora las
conclusiones con
“dificultades y
propuestas de mejora”.
(15 puntos) (0 puntos)
(25 puntos)
Calificación final 125

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Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Vicerrectoría Académica y de Investigación

1. Descripción general del curso

Escuela o Unidad Escuela de Ciencias Básicas, Tecnología e Ingeniería

Laboratorio X Laboratorio remoto Simulador

Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos. ................................................................................ 14

La guía de prácticas de laboratorio introduce al estudiante en los procedimientos

Los objetivos de las prácticas del curso de bioquímica son:

2. Que el estudiante adquiera una preparación en Bioquímica que le permita

3 PRE INFORME DE LABORATORIO

En la redacción de los preinformes se deben conjugar los verbos en tiempo presente

La estructura de los preinformes es la siguiente:

Primero que todo identifique quien es el docente encargado de la práctica, describa

5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO

Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica, prácticas

5.1 NORMAS PERSONALES

La vestimenta deberá ser apropiada y cómoda, que facilite la movilidad para la

Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al entrar a las

El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la práctica;

5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS

Si cuenta con sistemas de extracción y renovación mecánica de aire activados,

Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se utilizará un

5.4 NORMAS DE EMERGENCIA

Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales utilizados

5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.

Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o dibuje los

6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.

Referente teórico de aminoácidos

Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos.

Grupos R Propiedades de los aminoácidos

Apolares alifáticos Los grupos R de esta clase de aminoácidos son apolares e

Otros aminoácidos que conforman este grupo son: glicina,

Aromáticos Fenilalanina, Tirosina y Triptófano, con sus cadenas laterales

Incluye este grupo la serina, treonina, cisteína, asparagina y

Cargados Estos aminoácidos pueden tener el grupo R cargado positivamente

Con una carga neta negativa a pH 7.0 son: aspartamo y el

La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las características particulares de los AA y de su clasificación, en

Una Tres Nombre

Q Gln Glutamina Polares alifáticos y sin

Y Tyr Tirosina Polar aromático y sin

D Asp Ac. Aspártico o Aspartato

P Pro Prolina Iminoacido

Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos.

Reacción con la El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos

El anillo fenólico tiene un comportamiento característico

Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos

El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la

La presencia de anillos aromáticos fenólicos o

El anillo indólico presente en la cadena lateral de los alfa-

Los Aminoácidos azufrados como Metionina, Cisteína y

Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15

Sulfato cúprico Pinza para tubos 2

Ácido Pipetas Pauster con bulbo 4

Cloruro de sodio Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5

Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1

Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4

Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4

6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA

El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la

Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.

con 1.5 mL de ninhidr Preparar los tubos de Agregar 2 ml de

con 1.5 mL de ninhidr 

Observar y tomar apuntes