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12/10/2013

Enfermedades de las musáceas:


aspectos generales con énfasis en
patógenos cuarentenarios.

Luis Pérez Vicente


Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal (INISAV)
Investigador Honorario Bioversity International

Curso de Capacitación sobre Diagnóstico y Manejo del Mal de Panamá de las


Musáceas (Fusarium oxysporum f. sp. cubense): Creando Capacidades para
la Prevención de la Entrada y Detección Temprana de la Raza 4 Tropical
Quevedo, Ecuador Diciembre 10-14, 2013

Principales limitantes a la producción en AL&C


Sistemas de producción Principales limitantes.
Cavendish intensivo tropical para Sigatoka negra , nematodos, marchitez bacteriana o
exportación moko (R. solanacearum); regulaciones ambientales y
de seguridad laboral; estreses abióticos (huracanes,
inundaciones/sequía)
Producción orgánica de Cavendish Sigatoka negra, nematodos; trips de los frutos; BSV
Cavendish en subtrópicos Mal de Panamá (Fusarium oxysporum sp. cubense);
estreses abióticos (temperaturas bajas)
Monocultivo de plátanos Sigatoka negra, nematodos, Cosmopolites sordidus,
Banana streak badnavirus (BSV), pudriciones del
pseudotallo y rizoma por Dickeya spp., pudrición
suave del rizoma por Pectobacterium carotovorum,
marchitez bacteriana o moko (R. solanacearum)
Cultivos mixtos de musáceas con Sigatoka negra, Mal de Panamá
cacao, cocoteros, forestales , café, etc.
Cultivos mixtos/ monocultivo de Sigatoka negra; Mal de Panamá; Marchitez
bananos y plátanos en pequeñas bacteriana o moko.
parcelas (para consumo del hogar o
mercado local)

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LAS MANCHAS TIPO SIGATOKA EN Musa spp.


ESPECIES DE Mycosphaerella ASOCIADAS a Musa spp.
Mycosphaerella musicola Leach ex Mulder (Sigatoka amarilla).
Pseudocercospora musae (Zimm). Deighton

Mycosphaerella fijiensis Morelet (Sigatoka negra / Raya negra).


Pseudocercospora fijiensis (Morelet) Deighton

Mycosphaerella eumusae (Mancha tipo Sigatoka eumusae) *


Pseudocercospora eumusae

Mycosphaerella musae Speg. (Peca de la hoja).


Stenella sp..

Mycosphaerella minima Stahel. (Peca de la hoja).

* No presente en América

Sigatoka amarilla - Mycosphaerella musicola


(Pseudocercospora musae)

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Sigatoka Mycosphaerella musicola


(Pseudocercospora musae)
I y II III

Foto L. Pérez-Vicente
IV V

Sigatoka Mycosphaerella musicola


(Pseudocercospora musae)

Foto Liberato et al. (2009)

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Característica de las epidemias y


factores de distribución e impacto.
En el Caribe y Centro América, un gran número de informes de primera
presencia en los años 30.
La epidemias en el Caribe y la mayoría de los países ocurrieron dos
años después de la entrada del patógeno.
Ausencia de regulaciones cuarentenarias. Los estudios con marcadores
moleculares han permitido establecer que la dispersión ha sido debida a
introducciones de material vegetativo infectado (Hayden, 2005).
Gran uniformidad genética debido a grandes superficies de cultivo de
los clones Gros Michel y Cavendish (AAA) susceptibles
Se inició el uso de fungicidas y las inversiones en equipos de aspersión
en la producción bananera

Sigatoka negra Mycosphaerella fijiensis


(Pseudocercospora fijiensis)

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Historia de la pandemia de Sigatoka negra


en América

Bo, 1996

Estados de evolución de los síntomas de Sigatoka negra


y efectos sobre la maduración

Foto: L. Perez Vicente


Foto L. Perez Vicente

Foto: L. Perez Vicente

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Morfología de M. fijiensis

M. fijiensis: ciclo de la enfermedad

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Impacto de Sigatoka negra en producción y maduración


(Ramsey, 1996)

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Matrix de correlaciones entre variables climáticas y el estado de


evolución de SN en bananos y plátanos. Empresa La Cuba
Ciego de Avila Province.
Estado de evolución (semanas)
Variable Gran enano (AAA) CEMSA 3/4 (AAB)
depend.
3 4 5 6 4 5 6 7
Ll 7 0.56** 0.61*** 0.74*** 0.41* 0.48** 0.60*** 0.58*** 0.55*
(mm) *
DLl 7 0.45** 0.48** 0.77*** 0.52** 0.39 * 0.64 *** 0.55** 0.54*
(min.)
LL 10 0.54** 0.80*** 0.71*** n.s. 0.59*** 0.74*** 0.62*** 0.40*
(mm) *
DLl 10 0.39 * 0.74*** 0.73*** n.s. 0.50** 0.74*** 0.57*** 0.38*
(min.)
LL14 0.64** 0.77*** 0.69*** n.s. 0.65*** 0.74*** 0.64*** 0.39*
(mm) *
DLl14 0.51** 0.75*** 0.73*** n.s. 0.58*** 0.72*** 0.62*** 0.38*
(min.)
H7 n.s. 0.72** 0.71** 0.53* 0.66* 0.54* 0.54* n.s.
(mm)
H 10 n.s. 0.79 ** 0.70 ** n.s. 0.81*** 0.55* n.s. n.s
(mm)
H14 n.s. 0.83 ** 0.68 * n.s. n.s. 0.81*** 0.55* n.s.
(mm)

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Relación entre la lluvia acumulada durante 14 días y la


velocidad de evolution de Sigatoka negra en diferentes
plantaciones de Cuba, Costa Rica y Ecuador
450 1200 2500 2000
El Colono, Costa Rica 2000 18 0 0
400
1000 ECV La Cuba,
350 2000 Ciego de Avila, 16 0 0
14 0 0
300 800 Cuba, 1995
Rainfall

250 15 0 0 12 0 0

Rainfall
600 10 0 0
200

SE
10 0 0 800
150 400

SE
600
100
200 500 400
50
200
0 0
0 0
1 6 11 16 21 26 31 36 41 46 51
47 50 1 4 7 10 13 16 19 22 25 28 31 34 37 50
w eeks
Weeks
Daily rainf all accumulat ed 14 days SE D a ily ra inf a ll a c um ula t e d 14 da ys SE

18 0 Primo Banano 700 250 2000


16 0 El Guayas, Ecuador, 1998 Probanano, El Oro, 1800
600
14 0 200 Ecuador, 2001- 2002 1600
500 1400
12 0
150 1200
Rainfall

Rainfall
10 0 400
1000
80 300 100 800
60 600
200
40 50 400
20 10 0 200

0 0 0 0

1 6 11 16 21 26 31 36 41 46 51 1 6 11 16 21 26 31 36 41 46 51 4 9 14
Weeks
Weeks
Daily accumulated rainfall SE Daily rainfall accumulated for 14 days SE

Manejo de Sigatoka negra con aviso bioclimáticos en dos


fincas plantadas de Gran enano; 1992 y 1993

14 cycles
YLS threshold

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Comparación del número de aplicaciones por avisos bioclimáticos y por


ciclos programados y costos de la protección contra Sigatoka negra en
diferentes plantaciones de bananos Cavendish en Cuba
PLANTACION APLICACIONES POR PROGRAMA APLICACIONES POR AVISOS
AÑ0 NUMERO DE COSTO AÑO NUMERO DE COSTO
CICLOS TOTAL/HA CICLOS TOTAL/HA

LA CUBA 1991 21 801.24


1992 23 619.66 1993 15 568.74
1994 13 303.29
1995 12 299.33
1996 12 269.52

LIMONCITO 1994 22 476.19 1995 13 246.48


1996 13 288.72

QUEMADO 1994 SN NO PRESENTE 1995 8 172.39


DE GUINES 1996 9 193.21

MENENDEZ 1994 18 412.09


1995 23 518.49

SOLA 1994 11 221.56


1995 12 282.78
1996 11 237.31

NUEVA PAZ 1994 23 599.66 1996 13 326.56

GUINES 1994 SN NO PRESENTE 1995 13 308.96


1996 10 (HURACÁN) 219.78

Grupos químicos utilizados en el manejo de Sigatoka negra:


lanzamiento al mercado, pérdida de sensibilidad, resistencia

Benzimidazoles

Aminas

DMI’s azoles

Estrobilurinas

Anilino-pyrimidinas

Pyrazole- carboxamides

1965 1970 1975 1980 1985 1990 1995 2000 2005


Lanzamiento Pérdida sensibilidad Resistencia

5 modos de acción Frecuencia de resistencia : 60% (3 de 5) Lag fase media: 9± 7 años

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Manejo integrado de Sigatoka negra

Saneamiento
Generalización cirugía, despuntes,
del control a deshoje temprano,
nivel regional Prácticas culturales que
Eliminación de
fuentes de potencien tasas altas de
inóculo (campos emergencia de hojas y creen
condiciones desfavorables a Tecnologías
abandonados)
la enfermedad de aplicación
Uso de clones y aspersión
resistentes.
Mejoramiento Monitoreo de la
Control químico. ¿Biocontrol? .
convencional y evolución y
Fungicidas y Otros métodos
transgénesis sistemas de aviso
monitoreo de alternativos al control
bioclimático
sensibilidad a químico
fungicidas

Mancha , tizón foliar y punta negra de los frutos


(Deightoniella torulosa)
Afecta hojas y frutos
L. Perez Vicente

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Punta negra de plátanos AAB y moteado


de frutos (D. torulosa)

L. Perez Vicente

Pudrición de la corona y antracnosis

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Punta de cigarro por Verticillium theobromae y


Trachysphaeria fructigena

Trachysphaeria fructigena

Eliminación de bellotas, brácteas, hojas


Manipulación
viejas y flores.
cuidadosa
Destrucción de residuos
Embolse temprano y uso de almohadillas
para separación de manos. Cosecha

Pre-cosecha

Manejo de enfermedades
de los frutos

Post-
cosecha
Lavado con agua corriente y cloro Inhibidores de maduración
Uso de fungicidas (benzimidazoles, Enfriar la fruta a 14 C en el
imidazoles, estrobilurinas, productos menor tiempo posible
orgánicos)
Atmosfera controlada

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Estructura de las poblaciones de


Fusarium oxysporum f.sp. cubense.
(Ploetz y Pegg, 2000)
Clones
Razas Gros Michel Bluggoe Cavendish

1 + - -
2 - + -
4 + + +

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No existen diferencias de síntomas de diferentes


“razas” de la marchitez por Fusarium

Marchitez o Mal de Panamá por Fusarium


oxysporum f. sp. cubense. Transmisión.
Ciclo adaptado de Hwang, (2002) • La principal vía de dispersión es
la semilla infectada
• El patógeno sobrevive en los
suelos como clamidosporas y en
residuos infectados por más de
20 años.
• Tiene un largo período de
latencia
• Las variedades susceptibles
plantadas en estos suelos
presentan invariablemente el
ataque de la enfermedad.
• Los suelos de mal drenaje
interno predisponen a la
infección aún en variedades con
resistencia.

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Factores de impacto
Síntomas similares a los de las demás razas y largo período de
latencia;
Pobre conocimiento y conciencia entre los productores del impacto
de la enfermedad, su ciclo infectivo y las tácticas de manejo; falta de
programas de vigilancia en muchos países a pesar de estar incluido
en listas de plagas reguladas.
Falta de acceso de los productores a semilla limpia certificada,
Desconocimiento de la estructura de las poblaciones de Foc a nivel
de países,
Posibilidades relativamente limitadas de medidas de control en áreas
infectadas, salvo el uso de clones con resistencia a Foc.
Insuficientes fondos para investigación y extensión sobre biocontrol y
manejo integrado de la enfermedad.

Foc RT4: preparación y prevención; impedir el ingreso


a LA&C de Foc RT4
Actividades de alerta en eventos científicos
– Acorbat 2004 , México; Acorbat 2010 Ecuador, Reunión de Grupos
de Interés sobre la raza 4 tropical de Foc en OIRSA, El Salvador,
Reuniónes de MUSALAC en David, Panamá y en Perú
Cursos de capacitación en identificación de la enfermedad y
diagnóstico:
– Costa Rica, Cuba, México, Ecuador, Venezuela, Colombia.
Documentos técnicos normativos:
– Programa de erradicación de un brote de Foc RT 4 en la
región del OIRSA
Desarrollo de sistemas diagnóstico moleculares

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Diagnostico por PCR (Dita et al., 2010, 2011)

Diagnostico por PCR (Pérez et al. 2013)

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Marchitez bacteriana (Moko)


Ralstonia solanacearum

L. Perez Vicente C.R .2009

Marchitez bacteriana (Moko)


Ralstonia solanacearum

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Características de aislamientos de R. solanacearum


asociados con la enfermedad del Moko (Jones, 2000)
Aislamiento/ Distribución Rango de hospederos y ecología
AAA/AAB/ABB: H
B (rápido marchitamiento) Centro y Sur América
Heliconia: M /Insectos: L-M/ Suelo: M
Costa Rica, Surinam, AAA/AAB/ABB: L-M
D (Distorsión)
Guyana Heliconia: L/Insectos: ND/ Suelo: L
AAA/AAB: L
H (Heliconia) Costa Rica
Heliconia: L/Insectos:H?/suelo: L?
AAA/AAB: L /ABB: ND
R (Colonias rojas) Costa Rica
Heliconia: ND/ Insectos:ND/ Suelo:ND
C. América, Sur del
SFR/ SFR-C (pequeña, fluida y AAA/ABB: H/ ABB: M-H
Caribe, Venezuela,
redondeada) Heliconia: ND/Insectos:H/ Suelo: ND
Colombia
Selva amazónica
AAA/AAB/ABB: H
A (Amazónico) (Brasil, Colombia,
Heliconia: ND/ Insectos: H/ Suelo: ND
Perú)
AAA: L/ AAB/ABB: L?
AFV (afluido avirulento) Honduras
Insectos: ND/ Suelo: ND
Patogénico en algunas especies de Musa, no
T (Tomate, raza 1, biovar 1) América patogénico en banano y Heliconia
Insectos: ND/ Suelo: H

Filotipos de R. solanacearum (Fegan y Prior, 2005)


Secuenciación de genes egl (endoglucanasas) y mutS (harp)
Filotipo 2 “Americanum”
Omnipresente
BV1, 2A y 2T
Papa Bv 1 americano
Bananos plátanos y
Moko SFR/A
heliconias
Moko H/B
Filotipo 1 “Asiáticum”
BV: 3, 4 y 5
Raza 3 papa

Filotipo 3 “Africano”
BDB BV: 1 y 2T
(Ralstonia spp.)

Diferentes cepas Los aislamientos relacionados


P. syzygii con el Moko pertenecen al
filotipo 2 sequevares III, IV y VI
(Fegan y Prior, 2005 , 2006)
Filotipo 4 “Tropical”
BV : 1, 2A y 2T

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Marchitez bacteriana (Matooke) por


Xanthomonas campestris pv. musacearum

Marchitez bacteriana (Matooke) por


Xanthomonas campestris pv. musacearum

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Marchitez bacteriana (Matooke) por


Xanthomonas campestris pv. musacearum

Dr. R.C. Ploetz

Dr. W. Tushemereirwe

Dr. W. Tushemereirwe
Transmisión por abejas

Marchitez bacteriana (Matooke) por


Xanthomonas campestris pv. musacearum

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Marchitez bacteriana (Matooke) por


Xanthomonas campestris pv. musacearum

Manejo de las marchiteces bacterianas


Exclusión y cuarentena evitar que ingrese a zonas libres.
Erradicación: la única medida efectiva cuando la enfermedad
aparece.
Limitación de accesos a áreas infectadas y regulación de
movimiento de aguas superficiales y drenajes
Prácticas culturales: se ha determinado que, sin suficientes
precauciones fitosanitarias, el 97 % de los casos de moko se deben
a esta causa (Wardlaw 1972).
Eliminación de las flores masculinas del raquis con horquetas para
evitar diseminación con insectos.
Desinfección herramientas y equipos
Uso de Tagetes patula y frijol de terciopelo (Moko)
Variedades resistentes transgénesis .

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Marchitez bacteriana (Matooke) por


Xanthomonas campestris pv. musacearum.
Síntomas en Ensete ventricosum

Síntomas en Ensete ventricosum


Dr. S. Eden -Green

Distribución global de la marchitez bacteriana por


Xanthomonas campestris pv. musacearum

Ensete
Etiopía
Ensete
Camerún Musa spp., Uganda,

Musa spp., Tanzania,


Musa spp.
El Congo

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(Teycheney, 2013)

(Teycheney, 2013)

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Mosaico o clorosis infecciosa por el


Cucumis mosaic cucumovirus (CMV)

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Banana streak badnavirus (BSV).


Variabilidad

La secuenciación del ADN viral ha permitido diferenciar secuencias que han


coevolucionado desde el origen de las musáceas en el genoma de Musa.
Algunas tienen suficientes diferencias en su genoma como para que se consideren
especies de virus diferentes:
BS Obino l’Ewai virus (BSOEV) * BS Cavendish virus (BSCavV)
BS Goldfinger virus (BSGFV) * BS Mysore virus (BSMysV) *
BS Imove virus (BSImV) * BS acuminata Viet Nam virus (BSAcVNV)
BS Uganda A virus (BSUgAV) BS Uganda I virus (BSUgIV),
BS Uganda J virus (BSUgJV) BS Uganda K virus (BSUgKV),
BS Uganda L virus (BSUgLV)
* = Presencia confirmada en Cuba (Javer et al., 2008)

Diversidad molecular y prevalencia de las especies de BSV


Global prevalence
BSOLV
20,1% BSGFV
3,6%
25,2% BSMYV

12,4% 38,7% BSIMV


Mixed Infections

BSGFV> BSOLV >Mixed infections >BSMYV


>BVSIMV

Análisis de Southern blot reveló falsos


positivos en genotipos híbridos
L 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213141 516171819 20

Southern Blot of Musa DNA.


Probe Im127: RT/RNaseH fragment
of BSIMV
L:1Kb;1-16 accessions ABB positives
to BSIMV in M-IC-PCR;17-18 :
uninfected ABB 19-20: Uninfected
Grand enano.

Position of Viral DNA

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Activación de BSV integrado


(Adaptado de Thomas, 2013)

Pa libres de virus
Plantas Salida Plantas infectadas de novo
AAAA c/s eBSV

No virus

Híbrido AAA con eBSV

EJ.:
• cultivo. de
tejidos
• hibridación Bb (PKW) con eBSV
• frío
• seca

Ensayos de detección de BSV


ANÁLISIS VENTAJAS DESVENTAJAS
Síntomas Fácil No confiable
ELISA Fácil Baja sensibilidad
Amplia diversidad serológica
Antisueros escazos
PCR Fácil Falsos positivos con BSV integrado
Mayor sensibilidad Diversidad genómica
Los primers degenerados no tienen
sensibilidad
IC-PCR (DNase) Fácil Amplia diversidad genómica
Mayor sensibilidad Los primers degenerados no tienen
Evita el BSV integrado sensibilidad

Miniprep/ISEM Evita el BSV integrado Consume mucho tiempo


Amplia especificidad Puede perder sensibilidad
Resultados inequívocos Se requiere ME y ultracentriífuga
RCA Evita el BSV integrado Consume tiempo
Non-specific amplification
Amplificaciones no específicas
Complicado por infecciones mixtas

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Banana bunchy top nanovirus

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Banana bunchy top nanovirus

Banana bunchy top nanovirus

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Banana bunchy top virus in Australia

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(Teycheney, 2013)

El áfido adquiere el virus en las primeras 4


horas de alimentación y lo transmite por 20 días

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Epidemiology of BBTV
Trabajos importantes de Magee (1920s – 1940s) y Allen
(1970s-1980s)

No hay hospedantes fuera de las Musaceae


Transmisión persistente por áfidos
Distancia de dispersión por áfidos (av. 15.2m, 99% < 86m)
Período latente de la enfermedad (3.7 hojas nuevas)
El plantón completo se infecta sistémicamente
Se desarrollaron simulaciones para modelar las epidemias
por Allen

Programa de Erradicación y Control en Australia


(Thomas, 2013)
Control basado en Cuarentena, legislación, inspección y
erradicación
El Programa de Control que incluye 4 semanas (4 hojas)
inspecciones, dirigido a reducción de las áreas afectadas y
los focos calientes

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¿Latencia?

Los áfidos del banano pueden


alimentarse alrededor del nivel del
suelo en el pseudotallo/cormo.

¿Se alimentan e infectan puntos


de crecimiento en dormancia que
se vuelven activos meses/años
después y solamente entonces
exhiben los síntomas de virus?

¿Infecciones prolongadas?

Método antiguo de erradicación

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¿Infecciones prolongadas?

Planta de banano 4
semanas después de
la inyección con
Glyphosato/
Imidacloprid en
invierno en el Sudeste
de Queensland

Verano – Transmisión 1 día después de la


inyección; tejido verde por 28 días
Invierno- Transmisión por 7 días después de la
inyección, tejido verde durante 57 days

Conclusions - BBTV
Sigue siendo una amenaza internacional

La exclusión es el mejor control

La erradicación requiere un esfuerzo intenso y soporte


legislativo

Las estrategias de erradicación y las técnicas para


realizarlas son aspectos críticos

La latencia puede causar problemas

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Mosaico de la bráctea del banano por el


Banana bract mosaic potyvirus (BBrMV)

Mosaico de la bráctea del banano por el Banana


bract mosaic potyvirus (BBrMV)

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Mosaico de la bráctea del banano por el


Banana bract mosaic potyvirus (BBrMV)

Distribución global del


Banana bract mosaic potyvirus (BBrMV).

CPC 2004; Jones et al., 2000

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12/10/2013

Mosaico de la bráctea del banano por el


Banana bract mosaic potyvirus (BBrMV).
Transmisión y control

• El BBrMV pertenece al grupo de los potyvirus


• La enfermedad ha causado pérdidas severas de rendimiento.
• Los estudios indican que lo transmite Rophalosiphum maydis de
forma no persistente.
• Se transmite a través de material de plantación enfermo.
• Hay antecedentes de su transmisión en vitroplantas y que se
encuentra presente en colecciones in vitro internacionales
• El control se refiere al uso de material libre del virus y la eliminación
de plantas enfermas.

Factores que determinan las EIE en plantas según


encuesta realizada de informes de ProMED.

Técnicas Cambios de poblaciones


Agrícolas de vectores 7%
9% Recombinaciones 2%
Perturbaciones
del hábitat 1%
Clima 25%
Introducciones
56%

(modificado de Anderson et al., 2004)

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Patógenos de musáceas transmitidos


en material de propagación
Fusarium oxysporum f. sp. cubense
Ralstonia solanacearum (Marchitez bacteriana o
Moko)
Dickeya paradisiaca
Xanthomonas campestris pv. musacearum
(Marchitez por Xanthomonas)
Cucumis mosaic cucumovirus (CMV)
Banana streak badnavirus (BSV)
Banana bunchy top nanovirus (BBTV)
Banana mild mosaic virus (BMMV)
Banana bract mosaic potyvirus (BBrMV).

Procedimiento completo para la producción de


vitroplantas certificadas libres de virus

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El germoplasma de banano no debe nunca ser movido entre regiones


como hijos, sino como vitroplantas provenientes de donantes
indexados libre de patógenos.

Gracias!

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