FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

• La mitocondria es consecuencia de la evolución.

• Se produjo cuando bacterias aeróbicas adoptaron
una residencia simbiótica dentro de una célula
huésped anaeróbica primitiva
• Posee DNA (mtDNA)
• Doble membrana: la membrana externa, rodea a
la organela; la interna, presenta invaginaciones
(crestas) que proporciona una gran superficie
• La membrana externa es permeable a
pequeñas moléculas (PM < 5000 Da) e iones.
Presencia de canales transmembrana
• La membrana interna es impermeable a la
mayoría de moléculas e iones (H+, O2-, etc)

• La membrana interna posee transportadores

de metabolitos esenciales (ADP, ATP, ácidos
carboxílicos, Ca2+, aminoácidos, etc.)

La membrana interna aloja a las proteínas pertenecientes a los componentes de la

cadena respiratoria y el complejo enzimático responsable de la síntesis de ATP
(ATP sintasa)
Fosforilación Oxidativa
 Es una vía metabólica que utiliza la energía liberada por el
catabolismo oxidativo de nutrientes para producir energía
química en la forma de ATP (adenosin trifosfato).
 Aunque las diversas formas de vida utilizan una gran variedad de
nutrientes, casi todas realizan la fosforilación oxidativa para
producir ATP, la molécula maestra que provee de energía a los
organismos vivos para su funcionamiento.
 Esta ruta es tan ubicua debido a que es una forma altamente
eficaz de liberación de energía, en comparación con los procesos
alternativos de fermentación, como la glucólisis anaeróbica.
 Durante la fosforilación oxidativa, los electrones son transferidos
en una serie de donadores y receptores de electrones,
organizados de acuerdo a su potencial de oxido-reducción.
 Estas reacciones liberan energía, la cual es utilizada para producir
ATP.
 En las células eucariotas, esta serie de reacciones redox son
llevadas a cabo por una serie de complejos proteicos
localizados en la membrana interna de las mitocondrias
 En las células procariotas, estas proteínas se encuentran
ubicadas en la cara interna de la membrana plasmática de
la célula.
 Estos grupos relacionados de enzimas son llamados Cadena
de Transporte de Electrones.
• En eucariotas, están involucrados cinco complejos de proteínas
• En procariotas se presentan muchas enzimas diferentes, utilizando una
variedad de donantes y aceptores de electrones.
 El flujo de electrones a través de la cadena de transporte de
electrones, desde donantes de electrones como NADH a
aceptores de electrones tales como oxígeno, es un proceso
exergónico, libera energía, mientras que la síntesis de ATP
es un proceso endergónico, el cual requiere de energía.
 Fosforilación oxidativa
Síntesis de ATP acoplada al flujo de electrones

• Cuando se suspenden mitocondrias en una solución

amortiguadora, que contiene un sustrato oxidable, ADP y
Pi, ocurren 3 procesos:
(1) se oxida el sustrato
(2) se consume O2 (hay respiración)
(3) se sintetiza ATP

• Si el dador de electrones es el NADH, las mitocondrias

sintetizan 3 ATP por cada par de electrones pasados al O2

• Si el dador es succinato, se sintetizan 2 ATP

• El consumo de O2 y la síntesis de ATP son dependientes de
la presencia de un sustrato oxidable y de ADP y Pi
Cadena Transportadora de Electrones

 En la membrana interna de la mitocondria se encuentran

diferentes transportadores de electrones.
 Aunque algunos de ellos también transportan protones, la
gran mayoría transporta exclusivamente electrones.
 Para su estudio se pueden dividir en 2 grupos:
 Las proteínas complejas: flavoproteínas, hemoproteínas o
citocromos, ferro-sulfo-proteínas y cupro-proteínas;
 La Ubiquinona o Coenzima Q, un cofactor no unido a proteína.
 Estos componentes no se encuentran aislados en la
membrana, se asocian formando complejos funcionales en
los cuales se basa en la actualidad la descripción del
funcionamiento de la cadena transportadora de electrones.
 Antes de entrar en el estudio de los complejos, se
describirán primero los componentes por separado.
 Flavoproteínas
 Son 2:
 La NADH Deshidrogenasa, que tiene como grupo prostético al
FMN (Flavina-mononucleótido)
 La Succínico Deshidrogenasa, que tiene como grupo
prostético al FAD (Flavina-adenina-dinucleótido).
 Ambas flavinas se unen a la enzima de forma covalente.
 La segunda enzima no es otra que la succínico deshidrogenasa
enzima que cataliza la sexta reacción del ciclo de Krebs. Este
hecho marca la integración biológica que existe entre el ciclo
de los ácido tricarboxílicos por un lado, y la cadena
transportadora de electrones, por otro.
 Las flavinas transportan 2 hidrógenos, y los cofactores de
nicotinamida, un hidruro, es decir, un hidrógeno más un
electrón.
 Las flavinas pueden ceder, en un primer paso, un hidrógeno,
formándose un compuesto intermedio en forma de radical.
Citocromos
 Las hemoproteínas que se encuentran en la membrana interna
de la mitocondria y que pertenecen a la cadena transportadora
de electrones, llamadas citocromos, son 7: citocromos a, a3,
b560, b562, b566, c y c1.
 Esta forma de denominar a los citocromos por letras se debe a
la característica que presenta cada uno de absorber
determinadas longitudes de onda en el espectro visible en las
bandas alfa, beta y gamma
 Todos tienen en común la forma en que transportan los
electrones: el hierro central del anillo hemo de los citocromos
transporta un solo electrón, pasando de su forma oxidada
hierro(III) (férrica Fe3+), a su forma reducida hierro(II) (ferrosa
Fe2+)
Citocromo c
 Todos los citocromos son proteínas integrales de membrana,
excepto el citocromo c. El citocromo c es el más conocido,
pues por sus propiedades fue fácil de aislar. Resulta soluble en
solventes acuosos y es una proteína periférica que se localiza
en el lado externo de la membrana interna de la mitocondria. Su
peso molecular es pequeño (13 kDa), y su cadena proteica
tiene 104 residuos de aminoácidos
Ferro-Sulfo-Proteinas
 No se conoce mucho acerca de este grupo de transportadores
electrónicos.
 Tienen pesos moleculares muy diferentes.
 Se diferencian también por el tipo de centros ferro-sulfurados,
(Fe-S) que poseen.
 El [2Fe-2S], compuesto por 2 átomos de Fe y 2 átomos de S y el
[4Fe-4S], compuesto por 4 átomos de Fe y 4 átomos de S, son los
más frecuentes.
 Se encuentran presentes en los complejos I, II y III.
 El transporte de electrones se efectúa en uno de los hierros de
estos centros, donde éste pasa de la forma oxidada hierro(III)
(férrica Fe3+), a su forma reducida hierro(II) (ferrosa Fe2+)
 Estos centros ferro-sulfurados se encuentran unidos a residuos
de cisteína de la proteína.
 En la mayoría de los complejos, estas proteínas intervienen
como los transportadores finales de electrones
Cupro-proteínas

 Intervienen en el transporte de electrones del

complejo IV .
 En este caso, el núcleo de cobre cambia su
estado de oxidación de Cu2+ a Cu+ al ocurrir el
transporte de electrones dentro de ese
complejo.
 Hay uno asociado al cit a y otro al cit a3.
Ubiquinona
 Es el único componente no proteico de la cadena transportadora de
electrones.
 Presenta un anillo de quinol o quinal, de acuerdo con su estado de
oxidación. Unida a este anillo se encuentra una cadena isoprenoide,
que caracteriza a las diferentes ubiquinonas existentes.
 La de mayor distribución en la naturaleza es la que tiene 10 isoprenos,
por lo que se le conoce con la abreviatura de Q10.
 Este compuesto transporta 2 hidrógenos, pero en sus reacciones puede
captarlos o cederlos de uno en uno. Cuando esto sucede se configura un
compuesto intermedio en forma de radical, semiubiquinona.
 Esta característica posibilita el transporte de electrones entre los
primeros cofactores que transportan 2 protones y 2 electrones, y los
citocromos que transportan un solo electrón.
 La CoQ capta los hidrógenos que provienen de las flavoproteína tanto
de los complejos I y II, como los de otras flavoproteínas.
Complejos de la cadena respiratoria

 Si aislamos la membrana interna de la mitocondria y

luego la tratamos con detergentes suaves o por
ultrasonido, se va a fraccionar en grandes complejos
lipo-proteicos.
 Los lípidos participantes en estos complejos son los
propios lípidos dela membrana mitocondrial que
quedan unidos a las proteínas. Estas, en su mayoría,
son insolubles en agua pero muy afines por
compuestos apolares.
 Pueden aislarse cinco grandes complejos
funcionales, relacionados con la cadena respiratoria,
4 de ellos transportan electrones, el quinto es el
responsable de la síntesis de ATP: es el complejo
de la ATP sintasa.
Complejos de la cadena respiratoria

 Los cuatro complejos que funcionan en el

transporte de electrones son:
a) Complejo I: NADH - CoQ reductasa.
b) Complejo II: Succínico - CoQ reductasa,
succínico deshidrogenasa
c) Complejo III: CoQH2- citocromo c reductasa.
d) Complejo IV: Citocromo c oxidasa.
 Debe tomarse en cuenta que algunas delas
propiedades de estos 4 complejos se modifican
cuando ellos se encuentran aislados.
Complejos de la cadena respiratoria

 De las aproximadamente 60 proteínas diferentes que

forman parte de los complejos, sólo 6 están codificadas en
el ADN mitocondrial, el resto se encuentra codificado en el
genoma nuclear.
 Formando parte de estos complejos se encuentran las
flavoproteínas, citocromos, proteínas Fe-S y
cuproproteínas mencionadas anteriormente.
 En general, la función de estos complejos es el transporte
electrónico con la formación final de H2O y de un gradiente
electroquímico de protones.
 La energía contenida en este gradiente se utiliza por la ATP
Sintasa para la acumulación de energía química, como
producto final de la fosforilación oxidativa.
 Quimiósmosis
 La energía liberada por la cadena de transporte de
electrones es utilizada para transportar protones a través
de la membrana interna mitocondrial, en un proceso
llamado quimiósmosis. Esto genera un gradiente de pH y
un potencial eléctrico a través de la membrana.
 La generación de esta energía potencial es aprovechada
permitiendo que los protones fluyan de regreso a la
membrana a favor del gradiente, a través de la enzima
ATP sintasa.
 La enzima utiliza esta energía para generar ATP
 Esta reacción es llevada a cabo por el flujo de protones,
que provoca la rotación de una parte de la enzima.
Teoría Quimiosmótica

 El flujo de H+ a favor de su gradiente

electroquímico proporciona la energía
libre para la síntesis de ATP. Las
concentraciones de H+ en las 2 fases
acuosas (EIM y M) separadas por la
membrana interna, constituyen la
fuerza responsable (fuerza protón-
motriz) de la formación de ATP a partir
de ADP y de Pi, por acción de la F1-
ATPasa de la membrana mitocondrial
 Quimiósmosis
 Las concentraciones de H+ en las 2 fases acuosas (EIM y
M) separadas por la membrana interna, constituyen la
fuerza responsable (fuerza proto-motriz) de la formación
de ATP.
 Entre 36 y 38 ATPs son obtenidos por la glucólisis y la
fosforilación oxidativa, de los 10 NADH, 2 succinatos y 4
fosforilaciones a nivel del sustrato, producidos a través de
la conversión de una molécula de glucosa en CO2 y H2O.
 Aunque la fosforilación oxidativa es una parte vital del
metabolismo, al mismo tiempo produce especies
reactivas de oxígeno (como superóxido y peróxido de
hidrógeno), lo que puede provocar estrés oxidativo, daño
y envejecimiento tisular.
Variación de la energía libre
debida al bombeo de protones
 NADH-Ubiquinona oxidorreductasa
(complejo I)
 La NADH- ubiquinona oxidorreductasa, también conocida
como NADH deshidrogenasa, o complejo I, es el primer eslabón
en la cadena de transporte de electrones. El complejo I es una
enzima de gran tamaño, teniendo en mamíferos el complejo I
de 46 subunidades y una masa molecular de 1 000 kilodaltones
(kD).
 La estructura es conocida en detalle solo en bacterias
 En la mayoría de los organismos el complejo se asemeja a una
bota con una estructura en forma de bola que sobresale de la
membrana hacia la matriz mitocondrial.
 Los genes que codifican las proteínas individuales están
contenidas tanto en el núcleo celular como en el genoma
mitocondrial, como suele ser el caso de la mayoría de las
enzimas presentes en las mitocondrias.
Complejo I NADH deshidrogenasa

 Punto de entrada de los

electrones del NADH
 •Enzima enorme (880 kD).
34 cadenas polipeptídicas,
codificadas tanto por
genoma mitocondrial
como genoma nuclear
 •Estructura en forma de L:
-Brazo horizontal anclado
en la membrana interna
 -Brazo vertical en la matriz
mitocondrial
 NADH- ubiquinona oxidorreductasa
(complejo I)
• Esta enzima cataliza la oxidación del NADH, el cual pierde dos
electrones, y la subsiguiente reducción de la coenzima Q10 o
Ubiquinona (representada como Q, abajo en la ecuación), una
quinona liposoluble presente en la membrana mitocondrial:

 La cadena de transporte de electrones, comienza

por la unión de la molécula de NADH al complejo I y
la donación de dos electrones.
 Los electrones ingresan al complejo I a través de
un grupo prostético unido al flavín mononucleótido
(FMN). El agregado de electrones al FMN lo convierte
en su forma reducida, FMNH2.
 Los electrones son luego transferidos a través de
una serie de centros hierro-azufre: el segundo tipo
de grupo prostético presente en el complejo.
 A medida que los electrones pasan a través del Complejo I, 4
protones son bombeados desde la matriz al espacio inter-
membrana.
 La manera exacta como esto ocurre no es del todo clara
 Finalmente, los electrones son transferidos de la cadena de
centros hierro-azufre a la molécula de ubiquinona en la
membrana.
 La reducción de ubiquinona también contribuye con la
generación del gradiente de protones, ya que dos protones son
tomados de la matriz mientras es reducida a ubiquinol (QH2).
La enzima succinato-Q oxidoreductasa, también
conocida como complejo II o succinato
deshidrogenasa, es el segundo punto de entrada
en la cadena de transporte de electrones.
Es inusual debido a que esta enzima es la única que
forma parte de los procesos del ciclo de Krebs y de
la cadena de transporte de electrones.
El complejo II consiste en cuatro subunidades de
proteínas y contiene unidos como cofactores al
FAD (Flavin-adenina dinucleótido), centros hierro-
azufre, y un grupo hemo que no participa en la
transferencia de electrones hacia la coenzima Q.
Oxida el succinato a fumarato y reduce la
ubiquinona.
Debido a que esta reacción libera menos energía que
la oxidación de NADH, el complejo II no transporta
electrones a través de la membrana y no
contribuye al gradiente de protones.
 También conocida como flavoproteína de transporte de electrones
deshidrogenasa [Electron Transfer Flavoprotein (ETF)-Q oxidorreductasa],
es el tercer punto de entrada a la cadena de transporte de electrones.
 Es una enzima que acepta electrones de la flavoproteína de transporte de
electrones en la matriz mitocondrial, y utiliza estos electrones para
reducir ubiquinona.
 Esta enzima contiene una flavina y un centro [4Fe–4S], pero, a diferencia
de otros complejos respiratorios, se une a la superficie de la membrana y
no atraviesa la bicapa lipídica.


 En mamíferos, esta ruta metabólica es importante en la b-oxidación de
acidos grasos y el catabolismo de aminoácidos y colinas, al aceptar
electrones de múltiples acetil-CoA deshidrogenasas.
 En plantas, la oxidorreductasa ETF-Q también es importante en la
respuesta que permite la supervivencia por extensos periodos de
oscuridad
 Q-citocromo c oxidorreductasa
(complejo III)
 La CoQ-citocromo C oxidoreductasa es también conocida como
citocromo C reductasa, complejo del citocromo bc1, o simplemente
complejo III.
 En mamíferos, esta enzima es un dímero. Cada monómero del complejo
contiene once subunidades de proteínas, un centro hierro-azufre [2Fe-
2S] y tres citocromos: un citocromo C1 y dos citocromos b.
 Un citocromo es un tipo de proteína de transferencia de electrones que
contiene al menos un grupo hemo. Los átomos de hierro dentro del
grupo hemo del complejo III alternan entre sus estados de oxidación
reducido (+2) y oxidado (+3) mientras los electrones son transferidos a
través de la proteína.
 La reacción catalizada por el complejo III es la oxidación de una molécula
de ubiquinol y la reducción de dos moléculas de citocromo C, una hemo-
proteína libremente asociada con la mitocondria.
 A diferencia de la coenzima Q, que transporta dos electrones, el
citocromo C transporta solo uno.
CoQ-citocromo C oxidoreductasa

 Transferencia de electrones en dos pasos

 Luego de cada paso, la CoQ (en la parte superior de la
figura) abandona la enzima.
Complejo III (1)
 Debido a que solo uno de los electrones puede ser transferido a la
vez desde el donante QH2 al aceptor citocromo C, el mecanismo
de reacción del complejo III se da en dos pasos, llamados ciclo Q.
 En el primer paso, la enzima se une a tres sustratos, primero,
QH2, el cual es luego oxidado, siendo un electrón transferido al
segundo sustrato (a través de una cadena), el citocromo C. Los
dos protones liberados de QH2 pasan al espacio intermembranal.
 El tercer sustrato es la Q, la cual acepta el segundo electrón de
QH2 y es reducida a Q.-, el cual es un radical libre de
ubisemiquinona. Los primeros dos sustratos son liberados, pero
este intermediario de ubisemiquinona permanece unido.
Complejo III (2)
 En el segundo paso, una segunda molécula de QH2 es unida
y de nuevo pasa su primer electrón al aceptor citocromo c.
El segundo electrón es transferido a la ubisemiquinona
unida, reduciéndola a QH2 mientras gana dos protones de
la matriz mitocondrial. Este QH2 es luego liberado de la
enzima.
 Como la coenzima Q es reducida a ubiquinol en el lado
interno de la membrana y oxidado a ubiquinona en el
externo, hay una transferencia neta de electrones a través
de la membrana, añadidos al gradiente de protones.
 El mecanismo más bien complejo de dos pasos por el cual
sucede esto es importante, ya que incrementa la eficiencia
de la transferencia de protones.
 Citocromo c oxidasa
(complejo IV)
 Es el complejo proteico final en la cadena de transporte de electrones.
 En mamíferos esta enzima posee una estructura extremadamente
compleja y contiene trece subunidades, dos grupos hemo, así como
varios iones metálicos: tres átomos de cobre, uno de magnesio y uno
de zinc.
 Cataliza la reacción final en la cadena de transporte de electrones y los
transfiere al oxígeno, mientras bombea protones a través de la
membrana.
 El aceptor de electrones final es el oxígeno, llamado también aceptor
terminal de electrones, el cual es reducido a agua en este paso. Tanto el
bombeo directo de protones y la consumición de protones de la matriz
en la reducción de oxígeno contribuyen al gradiente de protones.
 La reacción catalizada es la oxidación de citocromo c y la reducción de
oxígeno:
 Complejo IV
Citocromo Oxidasa
En la estructura de la Citocromo c Oxidasa bovina
se encuentran:
-11 subunidades proteicas: 3 codificadas por
el genoma mitocondrial (I,II,III)
-2 grupos hemo de tipo a:
• Hemo a
• Hemo a3
Con propiedades redox distintas
(diferente entorno)
-2 centros de cobre:
• CuA/ CuA. Dos iones cobre conectados
mediante dos residuos de Cys. Son los
aceptores de los electrones del
Citocromo c reducido
• CuB. Cu coordinado por 3 residuos de
His. Junto con el Cit a3 forman el grupo
activo donde el O2 se reduce a H2O
 Componentes de la Cadena de Transporte de Electrones Mitocondrial
Número de Grupo(s)
Complejo Enzimático Masa (kDa) subunidades prostético(s) E°’(V)
I NADH Deshidrogenasa 850 42 (14) FMN, -0.30
Fe-S -0.25
II Succinato Deshidrogenasa 140 5 FAD, 0.0
Fe-S -0.26
III Ubiquinona Citocromo c 250 11 Fe-S +0.28
Oxidoreductasa Citocromo b -0.05
Citocromo c1 +0.22
Citocromo c* 13 1 Heme +0.23
IV Citocromo Oxidasa 160 13 (3-4) Citocromo a +0.21
CuA, +0.24
Citocromo a3 +0.39
CuB +0.34

El número de subunidades en el equivalente procariótico entre paréntesis

* El Citocromo c no forma parte de ningún complejo enzimático; se mueve
entre los complejos III y IV como una proteína libremente soluble
 Flavoproteína de
NADH Deshidrogenasa, Transporte de
FMN, Centros Fe-S electrones, FAD.
Centros Fe-S

Citocromo bc1, Citocromo aa3,

Hemos b (2), Centro Hemos a (2),
Rieske Fe-S, Cit c1 Iones Cu

Succinato Sn-Glicerofosfato
deshidrogenasa, FAD, deshidrogenasa, FAD,
Centros Fe-S, Hemo b Centros Fe-S
ATP sintasa (complejo V)
Es la enzima final del proceso de la fosforilación oxidativa.
Esta enzima se encuentra en todas las formas de vida y funciona
de la misma manera tanto en procariotas como en eucariotas.
Esta enzima usa la energía almacenada en un gradiente de
protones a través de la membrana para llevar a cabo la síntesis de
ATP a partir de ADP y fosfato (Pi).
Las estimaciones del número de protones necesarios para
sintetizar una molécula de ATP oscilan entre tres y cuatro, y algunos
investigadores sugieren que las células pueden variar esta
proporción, para ajustarse a diferentes condiciones.
ATP Sintasa (Complejo V)

 Esta reacción de fosforilación es un equilibrio, que

puede ser cambiado alterando la fuerza protón
motriz.
 En ausencia de una fuerza protón motriz, la
reacción de la ATP sintasa se desplazará hacia la
izquierda, hidrolizando ATP y bombeando protones
fuera de la matriz a través de la membrana.
 Sin embargo, cuando la fuerza protón motriz es
alta, la reacción es forzada a desplazarse en la
dirección opuesta; de izquierda a derecha,
permitiendo el flujo de protones en el sentido de su
gradiente de concentración produciendo ATP a
partir de ADP.
La ATP sintasa es un complejo masivo de proteínas con forma de hongo.
El complejo de enzimas en mamíferos contiene 16 subunidades y posee
una masa de ~ 600 kDa.
La porción embebida en la membrana es llamada FO y contiene un anillo
de subunidades c y el canal de protones.
El pedúnculo y la parte superior esférica es llamada F1 y es el sitio donde
ocurre la síntesis de ATP.
La porción esférica del extremo de F1 contiene seis proteínas de dos tipos
diferentes (3 subunidades α y 3 subunidades β), mientras que el
"pedúnculo" consiste solo de una proteína: la subunidad γ, con un extremo
extendiéndose en la esfera de subunidades α y β.
Ambas subunidades, α y β se unen a nucleótidos, pero solo la subunidad
β cataliza la síntesis de ATP.
Alcanzando por la base una porción de F1 e introduciéndose en la
membrana se encuentra una larga subunidad en forma de bastón que ancla
las subunidades α y β en la base de la enzima.
A medida que los protones atraviesan la membrana a través del canal en
la base de la ATP sintasa, FO entra en rotación.
F1 Unidad Catalítica (ATP
Sintasa)

F0 Unidad bombeadora
de H+
El ATP que se genera en el
proceso de la fosforilación
oxidativa está en el lado de la
matriz mitocondrial. No puede
atravesar la membrana interna
mitocondrial, al igual que el ADP
y la molécula de fosfato
inorgánico (Pi).
Es necesario un sistema de
transporte de membrana
SISTEMAS MITOCONDRIALES DE
TRANSPORTE
 La mitocondria posee dos membranas:
 EXTERNA: bastante permeable a un gran número de
iones y moléculas pequeñas.
 INTERNA: impermeable a la mayoría de las
moléculas. Pero deben producirse numerosos
intercambios entre citosol y matriz mitocondrial.
Este intercambio esta mediado por una serie de
proteínas transportadoras de membrana:
 NADH citosólico producido por la glicolisis:
 Lanzadera glicerol-3-fosfato
 Lanzadera malato-aspartato,
 •Transporte ATP/ADP:
 ATP/ADP translocasa
 Fosfato translocasa

 •otros transportadores:
 Transportador de compuestos dicarboxilicos
 Transportador de compuestos tricarboxilicos

 Transportador de piruvato
 FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

• La fosforilación oxidativa se refiere a la síntesis química

de ATP impulsada por el proceso exergónico de
transferencia de electrones desde el NADH-FAD al O2

• Ocurre en la mitocondria
• La fosforilación oxidativa comienza con la entrada de e- en la cadena
respiratoria
• Los e- pasan a través de una serie de transportadores incluidos en la membrana
interna mitocondrial
• Los transportadores electrónicos mitocondriales funcionan dentro de complejos
proteicos ordenados en serie
• La cadena de transporte de e- es un proceso exergónico, que libera energía
suficiente para la síntesis de ATP
• Existe una translocación de H+ desde la matriz hacia el EIM (fuerza protomotriz)
• Síntesis de ATP por ATP sintasa
Inhibidores
 Existen varios reactivos que inhiben la fosforilación
oxidativa.
 Aunque estas toxinas inhiben sólo una enzima en la
cadena de transporte de electrones, la inhibición de
cualquier paso detiene el resto del proceso:
 Oligomicina inhibe la ATP sintasa, los protones no
pueden ser devueltos a la mitocondria. Como resultado, las
bombas de protones son incapaces de operar, y el
gradiente se torna demasiado fuerte como para ser
superado. NADH deja de ser oxidado y el ciclo del ácido
cítrico deja de operar porque la concentración de NAD+ cae
por debajo de la concentración que estas enzimas pueden
utilizar.
 El Cianuro y el monóxido de carbono Inhiben la
cadena de transporte de electrones uniéndose más
fuertemente que el oxígeno a los centros Fe-Cu en la
citocromo c oxidasa, evitando la reducción del oxígeno.
Inhibidores de la Cadena Respiratoria
Inhibidores (2)
 Existen varios reactivos que inhiben la fosforilación
oxidativa.
 Rotenona, Amital. Impiden la transferencia de electrones
del complejo I a la ubiquinona al bloquear los sitios de unión
a la ubiquinona.
 Antimicina A, Actúa bloqueando la transferencia de
electrones entre el citocromo b y el citocromo c1. En
presencia de esta substancia, el citocromo bH puede ser reducido
pero no oxidado, y consecuentemente, el citocromo c permanece
oxidado, al igual que los citocromos a y a3 del Complejo IV.
 2, 4-dinitrofenol, este ionóforo desacopla el bombeo de
electrones de la ATP sintasa debido a que transporta electrones a
través de la membrana mitocondrial interna.
 Malonato y oxaloacetato, Inhibidores competitivos de la
succinato dehidrogenasa (complejo II)
 Atractilósido, inhibe el transportador que introduce ADP a la
mitocondria
Respirasomas
 El modelo original sobre como los complejos de la cadena
respiratoria están organizados se basaba en la libre difusión de
ellos en la membrana mitocondrial.
 Sin embargo, datos recientes sugieren que los complejos podrían
formar estructuras de alto orden llamadas supercomplejos o
"respirasomas”.
 Estas asociaciones podrían permitir la canalización de sustratos
entre varios complejos de enzimas, aumentando su tasa y, por lo
tanto, su eficiencia en la transferencia de electrones.
 Dentro de los supercomplejos presentes en mamíferos, algunos
componentes están presentes en mayor cantidad que otros, con
una tasa entre complejos I / II / III / IV y ATP sintasa de ~ 1:1:3:7:4.
 Sin embargo, el debate sobre la hipótesis de estos
supercomplejos aún no está resuelta, ya que algunos datos no
parecen ajustarse a este modelo.
 Cadena de transporte de electrones
en procariotas
 En contraste con la similitud general en cuanto a estructura
y función de la cadena de transporte de electrones en
eucariotas, las bacterias y archaea poseen una gran
variedad de enzimas de transferencia de electrones. Estas
utilizan un conjunto igualmente amplio de sustratos.
 Al igual que en los eucariotas, la cadena de transporte de
electrones de los procariotas utiliza la energía liberada de la
oxidación de un sustrato para bombear iones a través de la
membrana y generar un gradiente electroquímico.
 La fosforilación oxidativa en bacterias, E. coli, ha sido
estudiada en profundidad, mientras que los sistemas de
archaea han sido poco estudiados.
 Cadena de transporte de electrones
en procariotas
 La principal diferencia entre la fosforilación oxidativa en
procariotas y eucariotas es que tanto bacterias como
archaea utilizan una gran variedad de donantes y aceptores
de electrones.
 Esto permite a los procariotas desarrollarse en una amplia
variedad de condiciones ambientales. En E. coli, por
ejemplo, la fosforilación oxidativa puede ser llevada a cabo
por un gran número de pares de agentes reductores y
oxidantes, los cuales son listados a continuación.
 El potencial medio de un componente químico mide cuanta
energía es liberada cuanto este es oxidado o reducido,
teniendo los agentes reductores un potencial negativo y los
agentes oxidante un potencial positivo.