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Cuenta de Eritrocitos Investigacion
Cuenta de Eritrocitos Investigacion
OBJETIVO
Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milímetro cúbico de sangre, interpretar
el resultado, así como adiestrarse en el manejo de la cámara de Neubauer y la pipeta de
Thoma
FUNDAMENTO
Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y
precisos, y los métodos manuales.
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:
Dilución de la sangre
Muestreo de la sangre diluida en un volumen
Recuento de células en ese volumen
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas
microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la
densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la
relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes,
entre ellas la que utiliza la cámara de Neubauer
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, en una
proporción exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeña
colocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se
encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación se obtiene el número
total.
Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara de
recuento, una pipeta diluidora y un microscopio.
MATERIAL
Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja)
Equipo para venopuncion (Tubo lila)
Boquilla roja
Tubo de plástico
Tubos de ensayo
Papel parafin
Cámara de Neubauer
Cubrehematimetro
Microscopio
Gasas
SUSTANCIAS
Alcohol al 70%
Sangre venosa
Liquido de Hayem
PROCEDIMIENTO
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica
punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta
3. Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una
dilución de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilución será 1/100. Limpiar la punta
con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede
absorber con gasa el excedente
8. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera
las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se
consideran los que estén en los límites inferior y derecho.
OBSERVACIONES
Cámara de Neubauer, 10x
El rayado de la cámara de Neubauer cubierta de miles de eritrocitos, que destacan por su forma
redonda y gran cantidad.
En el análisis hecho, el número de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10 000
daba como resultado 4 910 000/mm3, lo que indica un índice normal pues el paciente era
una mujer de 11 años de edad.
VALORES DE REFERENCIA
(Millones de células/mm3)
Hombres:………………………………..4 500 000-5 500 000
Mujeres:…………………………...…….4 000 000-5 000 000
Niños (4 años):……….........................4 200 000-5 200 000
Lactantes (1-6 meses):....…………….3 800 000-5 200 000
Recién nacidos:………………………..5 000 000-6 000 000
CONCLUSIÓN
Los eritrocitos o glóbulos rojos son células de color amarillento, con la forma de un disco
bicóncavo, sin núcleo y contienen un pigmento llamado hemoglobina que les otorga su
característico color.
Estos se forman constantemente en la medula ósea, en el cráneo, las costillas, las
vértebras y el esternón, en un proceso conocido como eritropoyesis. Viven
aproximadamente 120 días y al envejecer son destruidos por las células
reticuloendoteliales del hígado, la medula ósea y el bazo.
La falta de núcleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin consumir nada de él.
La pipeta de Thoma para glóbulos rojos está constituida por dos porciones capilares y un
bulbo central. El tubo capilar inferior está dividido en 10 partes iguales con marcas de 0.5
y 1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plástico roja para favorecer la mezcla de
sangre con el líquido y en el capilar superior hay una marca de 101.
El líquido de dilución no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles, sino
que también permita identificarlos y que destruya otros elementos celulares que no son de
interés en este momento. En general se puede usar cualquier solución isotónica como
diluyente y pueden ser:
Soluciones de Gower
Soluciones de Dace
Solución salina de NaCl al 0.9%
Liquido de Hayem, el cual está formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y
agua destilada para un litro. Este último es el más usado.
Es muy importante observar que en la cámara de Neubauer las áreas de recuento de
eritrocitos y linfocitos son diferentes.
Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos
blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul.
Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadro central con el
condensador bajo y luz débil.
Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo
marcado en color rojo, contando las células en cada cuadro, en barrido o fila.