CICLO DEL ACIDO CÍTRICO (Ciclo de Krebs)

Este ciclo recibe su nombre en honor a su descubridor, Sir Hans Krebs, en 1937.
La historia comienza a principios de la década de los ´30s con el descubrimiento de que al
agregar succinato, fumarato y malato a músculos machacados, se incrementaba la
velocidad del consumo de oxígeno. El oxalacetato se incorporó a la lista de ácidos
dicarboxílicos cuando se descubrió que se podía formar en condiciones aeróbicas a partir
del piruvato.
Carl Martius y Franz Knoop mostraron que el ácido cítrico es convertido en α –
cetoglutarato por medio del isocitrato, además el α – cetoglutarato puede ser oxidado a
succinato. La formación de citrato era la pieza faltante en este rompecabezas metabólico. El
descubrimiento que resolvió este rompecabezas y unificó el metabolismo se llevó a cabo en
1937 por Sir Hans Krebs y W.A. Jhonson; ellos demostraron que el citrato es derivado del
piruvato y del oxalacetato completando lo que se conoce como Ciclo del Ácido Cítrico.

FUNCIONES DEL CICLO DEL ACIDO CÍTRICO

Es la ruta oxidativa principal por la cual todos los nutrientes son catabolizados en los
organismos y tejidos aeróbicos.
El citrato atraviesa la membrana mitocondrial convirtiéndose en acetil – CoA.
Es una importante fuente de metabolitos intermedios que son utilizados en rutas
anabólicas que llevan a la síntesis de un gran número de biomoléculas.
El oxalacetato es utilizado en la gluconeogénesis: se convierte a malato o aspartato
para ser transportado fuera de la mitocondria.
El α – cetoglutarato y oxalacetato son utilizados para la síntesis de aminoácidos.

Aunque en algunos tejidos hay vías especiales para el metabolismo aerobio de los
carbohidratos, en casi todos los tejidos de los animales el metabolismo aerobio es igual al
anaerobio hasta la etapa de piruvato. En un medio aerobio el piruvato es oxidado a CO 2 y
agua en lugar de ser reducido a lactato como sucede en la glucólisis. El piruvato ingresa a
las mitocondrias y es sometido a las reacciones del ciclo de Krebs o ciclo del ácido cítrico o
de los ácidos tricarboxílicos. Las enzimas se localizan en las mitocondrias.

El ácido pirúvico es transformado en Acetil CoA por acción de un complejo

multienzimático mitocondrial: la PIRUVATO DESHIDROGENASA, interviene NAD como
coenzima y se libera CO2. Por cada molécula de glucosa se producen dos de piruvato. Las
moléculas de piruvato son descarboxiladas conduciendo a la formación de 2 moléculas de
acetil CoA y 2 de CO2.
ETAPAS:

1. SÍNTESIS DEL ACIDO CÍTRICO.

El ác. cítrico se sintetiza a partir del ácido oxalacético y el acetil CoA procedente del ác.
pirúvico. Esta síntesis es catalizada por una enzima condensadora: Citrato sintetasa.

2. ISOMERIZACIÓN A ÁCIDO ISOCÍTRICO.

Enzima: Aconitasa. Esta reacción se realiza en 2 tiempos; se produce un derivado
intermedio que posee un doble enlace: el ácido cis – aconítico.

3. DESHIDROGENACION Y DESCARBOXILACION DEL ÁC. ISOCÍTRICO.

Enzima: Isocítricodeshidrogenasa (NAD). El ác. isocítrico es deshidrogenado dando ác.
oxalsuccínico en presencia de iones Mg++ ó Mn++ . El ác. oxalsuccínico sufre una
descarboxilación dando lugar al ác. α– cetoglutárico.
4. DESCARBOXILACION OXIDATIVA DEL ÁC. α–CETOGLUTÁRICO.
Enzima: α–cetoglutarato deshidrogenasa. Es un complejo multienzimático que requiere
de dos coenzimas: NAD y CoA–SH. Se forma Succinil CoA.

5. DESACILACIÓN DEL SUCCINIL CoA. Esta reacción se lleva a cabo de tres

maneras diferentes:
A) Enzima: Succinil tioquinasa. El succinil CoA pierde el CoA. La enzima cataliza la
ruptura del enlace tioéster con recuperación de la energía liberada, bajo la forma de
GTP formado a partir del GDP y Pi. Se forma ácido succínico + GTP + CoA.
B) Enzima: Succinil CoA – aceto acetil transferasa. Cataliza la transferencia del CoA del
succinil CoA sobre el ácido acetilacético, formándose ácido succínico + acetoacetil
CoA.
C) Enzima: Succinil CoA hidrolasa. Provoca la ruptura hidrolítica del enlace tioéster,
formándose ácido succínico + CoA.

6. DESHIDROGENACION DEL ACIDO SUCCINICO.

Enzima: Succinato deshidrogenasa (FAD). Cataliza la deshidrogenación reversible del
ác. succínico para producir ácido fumárico.

7. HIDRATACIÓN DEL ÁCIDO FUMÁRICO.

Enzima: Fumarasa. Fija en forma reversible una molécula de agua en el doble enlace
del ác. fumárico, formándose ácido málico.

8. DESHIDROGENACIÓN DEL Ác. MÁLICO A Ác. OXALACÉTICO.

Enzima: Málico deshidrogenasa (NAD). Se forma ácido oxalacético.

2
3
BALANCE ENERGÉTICO DEL CICLO DE KREBS:
Sobre las 8 reacciones del ciclo, consideradas a partir del ác. pirúvico; 6 de ellas producen
energía en medio aerobio, de las cuales 5 lo hacen por reoxidación de los coenzimas de
deshidrogenación a razón de 3 ATP por cada NADH 2 y 2 ATP por cada FADH2. En síntesis
se tiene el siguiente balance:

METABOLISMO DE GLUCÓGENO

Como ya se ha establecido, el hígado sirve como reservorio primario de

carbohidratos al convertir la glucosa de la dieta en el polisacárido glucógeno. Este proceso
biosintético se denomina GLUCOGÉNESIS. Una vez producido el glucógeno es una
fuente disponible de glucosa mediante un proceso de degradación, la GLUCOGENÓLISIS.
El almacenamiento de glucógeno tiene lugar en la mayoría de los tejidos, especialmente en
el muscular; aquí sirve como un proveedor de carbohidratos para el metabolismo y la
producción de ATP, y de esta manera las células musculares se aseguran un suministro
continuo de energía.
El glucógeno es un homopolisacárido que consiste enteramente en sub-unidades
de glucosa, unidas unas con otras mediante enlaces α–1,4 glucosídicos; sin embargo, este
polisacárido se distingue por su naturaleza altamente ramificada. Las cadenas están
conectadas por uniones α–1,6 glucosídicas en los puntos de ramificación, produciéndose un
patrón arboriforme.

GLUCOGÉNESIS
La glucogénesis en el hígado puede ocurrir a partir de la glucosa sanguínea o de
cualquier sustancia capaz de producir piruvato como el glicerol, lactato sanguíneo
(proveniente del músculo) y aminoácidos glucogénicos. La insulina y el cortisol facilitan la
glucogénesis.

ETAPAS DE LA GLUCOGÉNESIS.-
4
1. FOSFORILACIÓN DE LA GLUCOSA.
Enzimas: hexoquinasa y glucoquinasa
Se forma glucosa 6 – P. El fosforilo es aportado por el ATP.

2. FORMACIÓN DE GLUCOSA 1–P.

Enzima: fosfoglucomutasa. Rx. irreversible. Esta reacción necesita la presencia de Mg++
y una pequeña fracción de glucosa 1,6 – difosfato.

3. BIOSÍNTESIS DE GLUCÓGENO.
Enzima: UDPG – pirofosforilasa. La glucosa 1 – fosfato es convertida en UDP – glucosa
(uridin difosfoglucosa). Esta reacción requiere UTP (uridin trifosfato) para formar UDPG
con pérdida de pirofosfato.
Glucosa 1 – P + UTP  UDPG + Pirofosfato

La síntesis de glucógeno a partir de UDPG es catalizada por una glucógeno sintetasa

(UDPG – glucógeno glucosil transferasa). El UDPG cede la glucosa a un fragmento de
glucógeno preformado o primer (primer: moléculas de glucógeno informadoras o
indicadoras preexistentes)
UDPG + Glucógeno(n glucosa)  UDP + Glucógeno(n + 1 glucosa)

Etapas de la Glucogénesis

Estructura del glucógeno

5
 En el hígado se han aislado partículas que contienen glucógeno y glucógeno sintetasa;
esta enzima solo puede catalizar la unión de glucosas mediante enlaces α– 1,4. Para la
formación de las ramificaciones es necesaria la presencia de una enzima ramificante: la
oligo – 1,4 a 1,6 glucano transferasa (amilo – 1,4 – 1,6 transglucosidasa). Esta enzima
separa pequeños fragmentos de glucosa de la cadena y los transporta a otros lugares de la
molécula situándolos en posición α–1,6, creándose de este modo las ramificaciones.
La glucógeno sintetasa existe bajo dos formas que son interconvertibles:
 ACTIVA, llamada también DEFOSFOSINTETASA
 INACTIVA, llamada también FOSFOSINTETASA

Se puede pasar de la forma inactiva a la activa por acción de otra enzima: glucógeno
sintetasa Fosfatasa que libera el ácido fosfórico. Se puede pasar de la forma activa a la
inactiva mediante una fosforilación de la enzima por parte del ATP, reacción que es
catalizada por una proteína quinasa activada por el AMP cíclico; éste se sintetiza en el
músculo y en el hígado por fijación de la adrenalina o del glucagón sobre la membrana
celular.
La Fosfatasa que activa la glucógeno sintetasa es estimulada por una cantidad
elevada de glucosa en la sangre y es inhibida por el glucógeno. Son dos las hormonas que
activan la Fosfatasa, y por lo tanto la glucógeno sintetasa en el hígado: insulina y cortisol.

6
GLUCOGENÓLISIS.-
La glucogenólisis ocurre principalmente por fosforólisis o inserción de fosfato
inorgánico de las uniones α–1,4 glucosídicas. El glucógeno se va degradando según sea la
necesidad de glucosa para el organismo. Esta degradación se puede realizar por dos vías:
a) En el hígado: es la vía principal, en la que el glucógeno se va transformando en
glucosa que pasa a la sangre; y
b) En el músculo: en la que el glucógeno se degrada hasta ácido pirúvico.

ETAPAS DE LA GLUCOGENÓLISIS.-
1. FOSFORÓLISIS DEL GLUCÓGENO.
El glucógeno sufre una serie de cortes en su molécula, a nivel de los restos de glucosa
que no son hidrolíticos sino fosforolíticos; formándose glucosa – 1 fosfato. Esta
reacción es catalizada por la enzima glucógeno fosforilasa, que no afecta los enlaces α–
1,6 (punto de origen de las ramificaciones). La ruptura de estos enlaces es hidrolítica y
catalizada por la enzima amilo – 1,6 glucosidasa, llamada también enzima
desramificante.

2. FORMACIÓN DE GLUCOSA 6–P.

Enzima: fosfoglucomutasa. La glucosa 1 – fosfato formada se transforma en glucosa 6
– fosfato. Es una reacción reversible. En el músculo, la glucosa 6 – fosfato sigue la vía
de la glucólisis.

3. LIBERACIÓN DE LA GLUCOSA.
En el hígado la glucosa 6 – fosfato es hidrolizada por la glucosa 6 – fosfatasa a glucosa
y ácido fosfórico, que pasan a la sangre. Esta reacción es irreversible ya que en la
fosforilación de la glucosa interviene ATP. La enzima es inhibida por la glucosa y gracias
a esta inhibición se obtiene una regulación de la liberación de glucosa en sangre.

Etapas de la Glucogenólisis

GLUCONEOGÉNESIS.-
Una función esencial del hígado es el control del nivel de glucosa de la sangre
sistémica. Cuando es necesario, el hígado no sólo moviliza la glucosa a partir del

7
glucógeno, sino que también posee la capacidad de sintetizarla. La biosíntesis de glucosa a
partir de compuestos no glucídicos se denomina gluconeogénesis.
Algunos tejidos, como el cerebro, los eritrocitos, el riñón, la córnea del ojo y el músculo,
cuando el individuo realiza actividad extenuante, requieren de un aporte continuo de
glucosa, obteniéndola a partir del glucógeno proveniente del hígado, el cual solo puede
satisfacer estas necesidades durante 10 a 18 horas como máximo, lo que tarda en agotarse
el glucógeno almacenado en el hígado. Posteriormente comienza la formación de glucosa a
partir de sustratos diferentes al glucógeno. La gluconeogénesis es un proceso clave pues
permite a los organismos superiores obtener glucosa en estados metabólicos como el
ayuno. Tiene lugar casi exclusivamente en el hígado, 10% se lleva a cabo en los riñones.

La gluconeogénesis presenta 4 únicas etapas enzimáticas:

1) carboxilación del piruvato a oxalacetato y 2) su ulterior descarboxilación a PEP,
3) hidrólisis de fructosa 1,6 – difosfato a fructosa 6 – fosfato, y
4) hidrólisis de glucosa 6 – fosfato a glucosa.
La gluconeogénesis y la glucólisis son vías metabólicas opuestas. La vía gluconeogénica
comparte varias de sus etapas con la glucólisis. Sin embargo, hay 4 enzimas únicas:
piruvato carboxilasa, fosfoenolpiruvato carboxiquinasa, fructosa 1,6 – difosfatasa y
glucosa 6 – Fosfatasa que participan sólo en la gluconeogénesis.
Siete son las enzimas compartidas con la glucólisis: fosfohexosaisomerasa,
aldolasa, Fosfogliceraldehido deshidrogenasa, fosfofructoquinasa,
fosfogliceroquinasa, fosfogliceromutasa y enolasa. Las enzimas glucolíticas se
encuentran generalmente en todos los tejidos; las enzimas únicas están sólo en los órganos
gluconeogénicos.
Numerosas sustancias pueden participar como precursores para la producción de
glucosa: piruvato, lactato, compuestos intermediarios del ciclo de Krebs, aminoácidos
glucoformadores, glicerol, glutamato, aspartato y propionil CoA. Por ejemplo, el proceso de
gluconeogénesis a partir de lactato, involucra la siguiente reacción:

2 Lactato + 4 ATP + 2 GTP  Glucosa + 4 ADP + 2 GDP + 6 Pi

Por lo tanto, se requiere el equivalente de 6 moléculas de ATP para producir una de glucosa
a partir de 2 de lactato.

Gluconeogénesis

8
9
10
 Ilustración de la relación entre gluconeogénesis y glucólisis (vías opuestas)

Las reacciones de la gluconeogénesis se hallan bajo el control de una hormona de

la corteza suprarrenal: el cortisol, y también de una hormona pancreática: el glucagón.

El consumo excesivo de etanol es un gran inhibidor de la gluconeogénesis en el

hígado y puede ocasionar disminución de glucosa en la sangre. Si se administra etanol a
individuos después de esfuerzo físico intenso, el nivel de glucosa en la sangre puede
descender hasta el 30 ó 40% de su concentración normal; la hipoglicemia daña la función
cerebral en lo referente a la regulación de la temperatura, ésto se normaliza mediante la
administración de glucosa.

GLICEMIA
El nivel de glucosa en la sangre (glicemia) debe mantenerse dentro de los límites de 70 a
110 mg/100 mL. Los niveles superiores al intervalo normal se denominan
hiperglucémicos; los inferiores son hipoglucémicos. Los siguientes son factores que
afectan este delicado equilibrio:

1. Almacenamiento: como glucógeno (Glucogénesis vs. Glucogenólisis).

2. Suministro: azúcares de la dieta y glucogénesis.
3. Utilización: metabolismo.
4. Conversión: en grasas u otros carbohidratos.

La regulación de la glicemia es el resultado de la participación de hormonas como

insulina, glucagón, epinefrina y glucocorticoides. La insulina se requiere para disminuir la
glucosa sanguínea estimulando el transporte de glucosa por las células de los tejidos
muscular y adiposo. El glucagón sirve para elevar la glicemia. La somatostatina
(hormona segregada por las células delta (δ) de los islotes de Langerhans) inhibe la
11
liberación de glucagón e insulina. Estas tres hormonas funcionan para mantener los niveles
de glicemia dentro de los límites normales (70 – 110 mg%). De este modo, las fluctuaciones
resultantes de la dieta, el ayuno y el ejercicio están en cierto sentido “amortiguados” por
este sistema de hormonas. Las hormonas cortico suprarrenales disminuyen la utilización
de la glucosa.

La insulina y el glucagón son esenciales para el control homeostático del nivel de

glucosa sanguínea. Normalmente experimentamos un aumento de la glicemia poco
después de cada comida, una hiperglicemia postprandial. Entonces las células beta (β)
de los islotes de Langerhans perciben los niveles elevados de glucosa circulante y liberan
insulina, disminuyendo de esta manera el nivel de glicemia. La hipoglucemia en cambio,
produce liberación de glucagón y movilización de la glucosa del hígado. El glucagón
estimula los procesos de glucogenólisis y gluconeogénesis en la célula hepática. También
es estimulado el transporte de aminoácidos glucogénicos a fin de proveer los carbonos
necesarios para la gluconeogénesis.

La homeostasis de la glucosa depende de la relación Insulina:Glucagón (I/G).

Algunos investigadores han propuesto la existencia de un control recíproco de insulina y
glucagón a nivel de las células β y α. No obstante, el concepto de una comunicación
intercelular por la cual el nivel de glucagón afecta la liberación de insulina es objeto de
controversias. Las acciones relativas de ambas hormonas sobre el control homeostático de
los niveles de glucosa sanguínea pueden ilustrarse del siguiente modo:

Hiper
glicemia
Aumenta señala liberación

GLUCAGÓN INSULINA

Señala liberación disminuye

Hipo
glicemia

12
Mag. Q.F. Margarita L. Geng Olaechea

13