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UNIVERSIDAD NACIONAL DE

INGENIERIA
FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL
ESCUELA DE HIGIENE Y SEGURIDAD

Manual de prácticas de Biología

PROFESOR

JOSE FERNANDO CHAPILLIQUEN ALBAN


RECOMENDACIONES GENERALES
El laboratorio es el lugar de trabajo para la experimentación y por lo tanto, se
requieren condiciones fundamentales como: disciplina, orden y limpieza; ya que
con frecuencia se trabaja con microorganismos o productos que los contienen y
que son capaces de producir enfermedades. En otras ocasiones, se utilizan
reactivos corrosivos que pueden causar daño a la piel o a su ropa, por tales
motivos la disciplina, el orden y la limpieza ofrecen mayores posibilidades de
éxito en la experimentación.

Por lo que es necesario cumplir con ciertos requisitos particulares:

1. Leer cuidadosamente el procedimiento a seguir y analizar cada uno de


los pasos, antes de iniciar la práctica.
2. Usar un mandil (bata) de laboratorio durante el desarrollo de la práctica.
3. Poseer el manual de prácticas.
4. Llevar una franela por equipo para secar inmediatamente cualquier
salpicadura de sustancias que se derramen.
5. Cerciorarse de tener el material completo para la experimentación, en
caso de material biológico perecedero, llevarlo el día que se va a llevar a
cabo la práctica, previa indicación del profesor de practica.
6. Antes de usar los materiales y aparatos, deben limpiarse y secarse con
cuidado. Al finalizar la práctica, deben entregarse limpios, secos y
ordenados.
7. Llevar en forma individual un cuaderno pequeño de hojas blancas para
las anotaciones durante el desarrollo de la práctica, una caja de colores
para iluminar las observaciones, ya que lo observado es a color y no en
blanco y negro.
8. Abstenerse de ingerir alimentos, bebidas y fumar dentro del laboratorio;
chuparse los dedos o morderse las uñas.
9. No jugar con el instrumental y aparatos usados en el laboratorio, por que
ciertos instrumentos no están esterilizados y los aparatos (como el
microscopio) son instrumentos delicados y de precisión.
10. No conversar en voz alta, porque cualquier distracción ocasionará
accidentes.
11. Si no sabes utilizar algún aparato o instrumento, consulta con el profesor
de practica o el asistente.
PRACTICA No. 1
CONOCIMIENTO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

Objetivo. Identificar las partes y funcionamiento del microscopio óptico compuesto.

Introducción
Algunos seres vivos pueden observarse a simple vista. Sin embargo, existen
organismos tan pequeños (al rededor de 0.1 mm) que a simple vista no los percibimos,
por lo que se recurre a instrumentos ópticos como la lupa o el microscopio ya sea para
organismos pequeños de menos de 0.1 mm o partes de organismos; y además, ayuda
a superar esta limitación.
El microscopio compuesto es un aparato de observación de cuerpos
transparentes. El ojo humano tiene una capacidad de resolución relativamente alta,
pero objetos y organismos pequeños no son visibles a simple vista. Los microscopios
tienen un poder de resolución mucho más alto que el ojo humano, y el poder de
resolución es: la propiedad que se tiene para poder ver dos puntos muy juntos con
toda claridad.
El microscopio es una de las herramientas más valiosas que nos permite
descifrar parte de los misterios de la vida en general. Es un instrumento delicado.
Mediante la práctica de montaje, enfoque y observación, es posible determinar las
características cualitativas y cuantitativas de estructuras muy pequeñas y
transparentes con el fin de penetrar al micro mundo que era casi inexistente hasta
antes de su invención.
Como los microscopios son instrumentos ópticos, es necesario obtener el
aumento total de la combinación del aumento del ocular y el aumento del objetivo, y se
obtiene de la siguiente manera: el ocular tiene un determinado aumento, que
generalmente es de 10 aumentos o de 10X, los objetivos tienen diferente poder de
resolución que puede ser: 4X, 10X, 40X y 100X, el resultado final de número de
aumentos se da multiplicando el aumento del ocular por el aumento del objetivo que se
está utilizando; ejemplo: ocular 10X y el objetivo es de 40X, el resultado será 400
aumentos o 400X.

Material.
Portaobjetos (5 por grupo) Gotero
Cubreobjetos (5 por grupo) Papel filtro
Microscopio compuesto Agua estancada
Gotero Preparación fija

Desarrollo.
Antes de iniciar la práctica, el profesor de practica dará a conocer a los
alumnos las partes que conforman un microscopio óptico compuesto, mencionando la
parte mecánica y de soporte, la parte óptica y la de iluminación. También, indicara
el uso de cada una de las partes así como su cuidado y transporte.
1. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de agua estancada, cubre
con el cubreobjetos y observa al microscopio, retira el exceso de agua con el papel
filtro.
2. Observa primero con el objetivo de menor aumento (10X) y por último con el
mediano aumento (40X). Para observar correctamente, debes tener la muestra a una
distancia de aproximadamente de 1 cm o 1.5 del objetivo, enciende la fuente de luz del
microscopio procurando que la muestra quede centrada en el rayo de luz que pasa por
la platina. Posteriormente ve acercando lentamente la platina hacia el objetivo con el
tornillo macrométrico, siempre observando a través de los oculares hasta que la
imagen sea clara, y finalmente con el tornillo micrométrico se enfoca más finamente y
aclarando mejor la imagen de lo observado. En caso de no poder enfocar pide la
ayuda de tu profesor
3. Repite las operaciones con la muestra fija, cuando realices el cambio de
objetivo no cambies la iluminación en forma inmediata, hasta que primero observes
con la iluminación inicial.
4. Escribe las partes del microscopio al final de las líneas del esquema
siguiente. Anota las observaciones realizadas durante el desarrollo de la práctica.

Cuestionario.
1. ¿Define que es el poder de resolución?
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2. ¿De cuántos sistemas consta el microscopio que utilizaste?


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3. ¿Cuántos tipos de microscopios existen?, menciónalos.


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4. ¿Porqué el cambio de un objetivo a otro provoca una modificación en la


imagen observada? ¿Muestra el campo de observación del microscopio un
área mayor o menor?, ¿por qué?
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5. ¿Cómo y porqué varía la luminosidad del campo al cambiar el objetivo?


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6. ¿Cómo se determina la cantidad de aumentos que observas en el


microscopio?
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PRACTICA No. 2

CELULAS: VEGETALES, ANIMALES y MICROORGANISMOS ACUATICOS

Objetivo. Distinguir las principales estructuras que diferencian las células vegetales de
las células animales y conocer algunos tipos de organismos microscópicos.

Introducción. La célula es un elemento básico de la materia viva; se caracteriza por


tener funciones de nutrición, respiración, crecimiento, reproducción y relación con el
medio. La necesidad de adaptación ha producido una diferencia morfológica y
funcional entre células animales y células vegetales.

Las principales diferencias entre las células son de tipo morfológico. Los vegetales
presentan cloroplastos, organelos citoplasmáticos en donde se lleva a cabo la
fotosíntesis, la pared celular que le da forma y rigidez a la célula vegetal, está formada
por un polisacárido llamado celulosa, también, contienen una vacuola muy grande que
en ocasiones ocupa casi todo el contenido celular, la membrana celular tiene la
función de barrera osmótica. Las células animales no presentan cloroplastos ni
cápsula de secreción (pared celular) y en caso de tenerla no está constituida por
celulosa como las células vegetales.

Material Sustancias Material Biológico


Porta objetos (5 unidades) Azul de metileno Una cebolla
cubreobjetos (5 unidades) Lugol Una hoja de Geranio
Microscopio Solución salina Agua estancada
Mechero de bunsen alcohol desinfectante
Un bisturí o navaja nueva Insectos muertos
Pinza, lancetas descartables Papa (una por grupo)
Algodón frejol (4 por grupo)

OBSERVACIÓN DE CELULA VEGETAL.-

Célula de Cebolla

PROCEDIMIENTO.

1. Desprende una de las catafilas de la cebolla.


2. De la cara interna de la catafila y con la ayuda de una pinza desprende una
membrana delgada (epidermis) y corta un pequeño fragmento (0,5 cm por lado). El
fragmento cortado debe ser transparente.
3. Coloca el fragmento sobre un portaobjeto limpio completamente extendido y agrega
un gota de agua, lugol o azul de metileno.
4. Coloca un cubre objeto sobre el material y sin aplicar presión, elimina
cuidadosamente el exceso de liquido con la ayuda de un papel de filtro.
5. Examina al microscopio a menor y mediano aumento
6. Dibuja todo lo que se observa: núcleo, pared celular, citoplasma otros)
OBSERVACION: MORFOLOGIA CELULAR.-

Célula de Geranio

1. Con una navaja nueva o bisturí obtener finos cortes de la epidermis de la hoja de
geranio y coloca sobre un portaobjetos uno por el haz y el otro por el envés y añade
una gota de agua, coloca el cubreobjetos sobre la muestra.
3. Observa al microscopio la muestra vegetal, primero con el objetivo de 10X y
después con objetivo de 40X. Localiza los cloroplastos, que son organelos de color
verde y la pared celular.
4. Retira el cubreobjetos y coloca una solución salina saturada sobre la muestra,
espera unos tres minutos y observa con el objetivo de 10X como el citoplasma se
contrae por la perdida de agua, la membrana celular se separa de la pared celular,
realiza tus dibujos y observaciones.

OBSERVACIÓN DE CELULA ANIMAL.-

Célula de la mucosa Bucal

PROCEDIMIENTO

a) Realiza un hisopo con el palillo y algodón (también, se puede realizar con sólo
el palillo), introdúcelo a tu boca en la parte interna de la mejilla, talla
suavemente la mucosa de la mejilla.
b) En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota pequeña de agua, realiza un
frotis con el hisopo de la muestra y la gota de agua (esto se logra, frotando el
hisopo o palillo sobre la gota de agua extendiéndola).
c) La muestra pásala varias veces por la flama del mechero sin que se caliente
demasiado hasta que se evapore el agua, este proceso es para que las células
epiteliales se adhieran al vidrio del portaobjetos, una vez seca la muestra
agrega una o dos gotas de azul de metileno, evita que el azul de metileno se
evapore, si así ocurre agrega otra gota más de azul de metileno.
d) Deja la muestra con el azul de metileno durante 3 o 4 minutos, lava el exceso
de colorante evitando que se escurra la muestra (el agua no debe tocar la
muestra), pon una gota de agua o glicerina sobre la muestra y coloca el
cubreobjetos.
e) Coloca la preparación en el microscopio, enfoca con el objetivo de 10X o 20X e
identifica las células animales que ahí aparecen. Cambia al objetivo de mayor
aumento.
f) Observa las células animales y compáralas con las células vegetales, examina
las semejanzas y diferencias de sus estructuras y partes que las componen.
g) Dibuja con detalle una de las células animales y señala la membrana celular, el
citoplasma y el núcleo.

Células Sanguíneas

PROCEDIMIENTO

a) Limpia con un algodón humedecido de alcohol la yema del dedo de la mano


b) Realiza una punción con una lanceta estéril y obtenga una gota de sangre
c) Realiza un frotis extendiendo la gota de sangre con el borde de otro portaobjeto
formando un ángulo de 45°
d) Secar la muestra por 5 minutos al calor o fijar la lamina con alcohol acetona.
e) Colorea la muestra con el colorante Giemsa por 15 a 20 minutos. Luego se
lava y secar la muestra
f) Coloca una gota de aceite de inmersión en la muestra y procede a observar
con el objetivo de 100X
g) Identifica y dibuja los tipos de células y la forma de los núcleos

OBSERVACION DE ORGANISMOS UNICELULARES

Descripción de especies; Paramecium, Stilonichyia, Euglena, Vorticella,


Diatomeas u otras especies microscópicas acuaticas

PROCEDIMIENTO

a) En el centro de una lámina portaobjeto coloca con un gotero una gota de agua
de acequia o de rio que tenga detritus orgánicos o algas.
b) Coloca una laminilla cubre objeto sobre la muestra y observa al microscopio
con menor y mediano aumento
c) Observa y diferencia los tipos de microorganismos
d) Dibuja, todos los organismos móviles

Cuestionario.
1. ¿Cuál es la diferencia fundamental entre una célula animal y una célula
vegetal?
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2. ¿Cuál es la diferencia entre una membrana celular y una pared celular?
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3. Explica ¿por qué decimos que la membrana celular es permeable?

4. Cuantas clases de células sanguíneas se conocen en la sangre humana?

Observaciones
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Dibujos.

Blgo. Fernando Chapilliquen Alban


Profesor del curso