A.

Utilizando varias matrices de filtración en gel, determínese el orden relativo de elución

de estas proteínas: aldolasa, aprotinina, conalbúmina, ferritina, glucosa-
6Pdeshidrogenasa.

Muestra 1: Aldolasa, aprotinina, conalbúmina ( Superdex 75 ) –Sale primero la

conalbúmina.
Muestra 2: Aldolasa, aprotinina, conalbúmina ( Superdex 200 ) – Sale primero la
Aldosa, despues la conalbúmina y por último la aprotinina.

Muestra 3: Aldolasa, aprotinina, conalbúmina ( Superosa 6 ) – En el caso de esta matriz

podemos comprobar que sale primero la Aldosa, seguida rápidamente de la
conalbúmina y más lento la aprotinina.

Muestra 4: Aldolasa, aprotinina, conalbúmina ( 2’5’ ADP-Sephoarose 4B ) – En este

caso solo sale la canalbúmina.
Muestra 5: Aprotinina, ferritina, glucosa-6Pdeshidrogenasa ( Superdex 75 ) – No
encontramos en ningún lado la ferritina y observamos que sale primero la glucosa-
6Pdeshidrogenasa seguidamente de la aprotinina.

a) ¿Cómo es la carga eléctrica de la ovalbúmina y la aldolasa en el tampón borato? La

ovalbúmina tiene la carga complementaria al gel de relleno de la columna, el gel es un relleno
de características anionicas.

b) ¿Qué resina de intercambio iónico podría usarse para que ambas se retengan (>15 mℓ) en
la columna y se separen de la ribonucleasa A? DEAE-celulose.
B. Observa la separación de una mezcla de tiroglobulina, glutatión reductasa y anhidrasa
carbónica, empleando Sephacryl 100 y 300 (matrices de exclusión molecular o
filtración en gel), y deduce: ¿Cuál de ellas tiene mayor tamaño molecular?
Sephacryl 100: Tiene mayor peso molecular la tiroglobulina. Sephacryl 300: Tiene
mayor peso molecular la tiroglobulina. ¿Es su masa molecular superior o inferior a
200 kDa? Sephacryl 100: Es inferior. Sephacryl 300: Sigue siendo igual porque sale
primero la misma que en el de 100.