PRÁCTICA Nº 3.

POLARIMETRÍA

PRESENTADO POR:

DIANA MARÍA MEJÍA CARDONA

CÓD. 800813935
JHON EDUARD OCAMPO
CÓD. 800821567

Trabajo presentado en la asignatura de:

LABORATORIO ANÁLISIS INSTRUMENTAL

DOCENTE:
YANED MILENA CORREA NAVARRO

MANIZALES
UNIVERSIDAD DE CALDAS
INGENIERIA DE ALIMENTOS
2013
 POLARIMETRÍA

OBJETIVOS.

 Identificar las partes básicas de un polarímetro y sus funciones.

 Realizar el análisis cuantitativo y cualitativo de sustancias

ópticamente activas.

 Construir curvas de calibración para determinar la concentración de

una sustancia pura en una solución problema.

 Determinar el efecto de la concentración y la temperatura n la

rotación especifica de una sustancia problema.
 RESUMEN.

Una sustancia ópticamente activa es aquella que hace girar el plano de

vibración de una luz polarizada; con las mediciones en polarimetría se
puede realizar análisis cualitativo y cuantitativo de estas sustancias para
su posterior identificación, por medio de la rotación específica.

Durante la elaboración de esta práctica se determinó el efecto de la

temperatura y la concentración en la rotación especifica de una muestra
problema por medio de la técnica de polarimetría, en la cual se determina
el ángulo de giro de una sustancia ópticamente activa.

El objetivo es aprender a manejar el polarímetro y observar

detalladamente como es el ángulo de giro y la rotación especifica de
diferentes muestras problema. Para este caso se utilizan diferentes
formas, donde en la sesión cualitativa se identifican las sustancias a una
temperatura ambiente y se busca conocer el efecto que tiene la
temperatura sobre estas sustancias. Para la sesión cuantitativa se busca
realizar una curva de calibración con el fin de conocer el efecto de la
concentración de la sustancia problema que se está analizando en el
polarímetro.
 PROCEDIMIENTO
Análisis Cualitativo:

1
Recibir instrucciones sobre el uso del equipo (Polarímetro)

2
Calibración del equipo con agua destilada

3
Medir el ángulo de giro B, de las sustancias puras y de las muestras problemas

4
Medir la temperatura a la cual se realizó el análisis

5
Apagar y dejar el equipo en orden

Variación de la Rotación Específica con la Temperatura

Recibir instrucciones sobre el uso del equipo y calibrarlo con agua destilada

2
Calentamiento de la muestra problema usando el baño termostático, para
medición del ángulo de giro a 15, 20, 25,30 y 35 ˚C

Apagar y dejar el equipo en orden

Análisis Cuantitativo:

1
Preparación de 5 soluciones de diferente concentración a partir de la solucion
madre de la solución patrón.

2
Purgamiento de la celda del polarímetro.

3
Llenado de la celda con la solución a medir (muestra problema y las soluciones
preparadas a partir de la solución patron).

4
Lectura del ángulo de giro para cada una de las muestras analizadas.

5
Apagado del equipo y organización de todo.
 CÁLCULOS Y RESULTADOS.

ANÁLISIS CUALITATIVO:

1. Medición del Ángulo de giro B para 2 muestras problema

Tabla 1. Resultados de la medición del Ángulo de giro B, de las Muestras

problema.

Ángulo de Giro (B) Temperatura αD Corregida a Posible

Sustancia Mediciones Mediana °C 20 °C Sustancia

15,5
P-SOA-4 15,55 15,5 24,5 77,5 D-Galactosa
15,5
3,85
P-SOA-9 3,85 3,85 24,5 19,25 D-Xilosa
3,8

αD Corregida a 20 °C: Usando la ley de Biot para hallar la rotación

específica a cada temperatura:

𝐵
∝=
𝐿𝐶
Donde:

B= Ángulo de giro.
α= Rotación específica de la sustancia.
L= Espesor de la capa de la solución (en decímetros).
C= Concentración de la solución (en g/ml).

Concentración MP:

20% = 0,2 𝑔/𝑚𝑙

𝐿 = 10𝑐𝑚 = 100𝑚𝑚 = 1𝑑𝑚

 Muestra 1 (P-SOA-4):
15.5
∝= = 77.5
1𝑑𝑚 ∗ 0.2𝑔/𝑚𝑙
  Muestra 2 (P-SOA-9):

3.85
∝= = 19.25
1𝑑𝑚 ∗ 0.2𝑔/𝑚𝑙

Anexo 1. Rotaciones Específicas de varios Carbohidratos.

Rotación Específica (Línea D, 20

Carbohidratos °C)
D-Gliceraldehído +135
L-Arabinosa +104.0
D-Xilosa +19.0
D-Ribosa -23.7
D-Glucosa +52.7
D-Manosa +14.2
D-Galactosa +81.5
D-Fructosa -92.0
Maltosa +138.5
Lactosa +52.5
Sacarosa +66.5
Almidón (solución en
CaCl2) +200.0

2. Variación de la Rotación Específica con la Temperatura (Muestra

P-SOA-4), identificada como D-Galactosa.

Tabla 2. Resultados de la medición del Ángulo de giro B, de la Muestra D-

galactosa a diferentes temperaturas.

Ángulo de Giro (B) Temperatura αD Corregida a

Sustancia 20 °C
1 2 3 Mediana °C
16,95 16,90 16,95 16,95 15 84,75
16,05 16,10 16,05 16,05 20 80,25
P-SOA-4 16,00 15,90 15,90 15,90 25 79,50
15,75 15,80 15,70 15,75 30 78,75
15,05 15,05 15,10 15,05 35 75,25
Muestra de cálculo para determinar la rotación especifica de la muestra a
diferentes temperaturas.

 A 15 °C:

16.95
∝= = 84,75
0.2𝑔
1𝑑𝑚 ∗
𝑚𝑙

Gráfica 1. Comportamiento de ángulo de giro (B), de la sustancia D-

galactosa con variación de la temperatura.

Ángulo de Giro Vs. Temperatura

17.50

17.00 y = -0,082x + 17,99

Ángulo de Giro (B)

R² = 0,9028
16.50

16.00

15.50

15.00

14.50
0 5 10 15 20 25 30 35 40
Temperatura (°C)
ANÁLISIS CUANTITATIVO:

 Preparación de Soluciones :

Se prepararon 5 disoluciones de 10 ml cada una con concentraciones

entre 0.01 𝑔⁄𝑚𝐿 𝑦 0.09 𝑔⁄𝑚𝐿 es decir desde 1 % ℎ𝑎𝑠𝑡𝑎 9 %, a partir de la
muestra patrón P-SOA-9 identificada como D-xilosa, en medio acuoso con
una concentración del 20 % (m⁄V)

Para esto se utilizó la igualdad:

𝑪 𝟏 𝑽𝟏 = 𝑪 𝟐 𝑽𝟐

Dónde:

𝑉2 = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 = 10 𝑚𝐿

𝑉1 = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝐶1 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑎. % 𝑚⁄𝑉 = 2 𝑔⁄𝑚𝐿

𝐶2 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛. % 𝑚⁄𝑉

Muestra de Cálculo:

𝑉2 = 10 𝑚𝐿 , 𝐶1 = 2 𝑔⁄𝑚𝐿 , 20 % , , 𝐶2 = 0.01 𝑔⁄𝑚𝐿 , 1%

𝑪 𝟏 𝑽𝟏 = 𝑪 𝟐 𝑽𝟐

𝐶2 𝑉2
𝑉1 =
𝐶1
(1 %)(5 𝑚𝐿)
𝑉1 =
20 %

𝑉1 = 1.25 𝑚𝐿
Tabla 3. Resultados de la medición del Ángulo de giro B, de las Muestras
patrón y la muestra problema.

Ángulo de Giro (B)

Concentración Volumen a tomar αD
Sustancia
% (ml) 1 2 3 Mediana

1 1,25 0,20 0,15 0,10 0,15 0,75

3 3,75 0,40 0,25 0,35 0,35 1,75
P-SOA-9 2,00
5 6,25 0,30 0,40 0,45 0,40
(D-xilosa)
7 8,75 0,80 0,80 0,70 0,80 4,00
9 11,25 1,30 1,45 1,30 1,30 6,50
MP
¿? ----- 0,60 0,60 0,55 0,60 3
P-SOA-9

 La rotación específica se determina de igual forma que en la tabla

1 y 2, con L = 1 dm y C = 20%.

Gráfica 2. Curva de calibración de D-xilosa, a temperatura ambiente.

Ángulo de Giro Vs. Concentración

1.4
1.2 y = 0.1375x - 0.0375
Ángulo de Giro (B)

R² = 0.9634
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 2 4 6 8 10
Concentración (%)

El coeficiente de correlación arrojado por la tendencia de las cinco

mediciones realizada fue igual a 0.9057; este coeficiente debería estar
mayor a 0.95, el cual aseguraría una relación más lineal entre la
concentración y el ángulo de giro.
Para efectos de obtener un coeficiente de correlación, más aceptable y
confiable, se eliminó de la curva el punto correspondiente a la
concentración del 5%; obteniendo entonces un coeficiente de 0.96.

Con la ecuación que nos presenta la gráfica se calculó la concentración

de la muestra problema.

𝑦 = Á𝑛𝑔𝑢𝑙𝑜 𝑑𝑒 𝐺𝑖𝑟𝑜 (𝐵)

𝑋 = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 (%)
𝑦 = Á𝑛𝑔𝑢𝑙𝑜 𝑑𝑒 𝐺𝑖𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑏𝑙𝑒𝑚𝑎 = 0.60

𝑦 = 0.1375 𝑋 − 0.0375

0.60 = 0.1375 𝑋 − 0.0375

0.60 + 0.0375
=𝑋
0.1375

Concentración de la muestra problema:

𝑋 = 4.6 % ó 0.046 𝑔/𝑚𝑙

ANÁLISIS DE RESULTADOS.

 Al encontrar la rotación específica de las muestras problemas en el

análisis cualitativo y compararlas con los datos de la referencia
bibliográfica, se pudo determinar que la muestra P-SOA-4 y P-
SOA-9 analizadas son D-Galactosa y D-Xilosa, respectivamente,
ya que la rotación específica de estas son 81.5 y 19.0 (Anexo 1) y
la encontrada en la práctica es de 77.5 y 19.25 respectivamente a
temperatura ambiente, los cuales son valores relativamente
cercanos a los datos bibliográficos, obteniendo los siguientes
porcentajes de error:
 El porcentaje de error en la identificación de la sustancia D-
Galactosa correspondería entonces al 4.90 %, y el porcentaje de
error de la sustancia D-Xilosa 1.31 %.

 En las Tablas 2 y 3, se puede observar el efecto de la temperatura

y la concentración en la rotación especifica. Como se puede
observar en la Tabla 2, la temperatura tiene una relación
inversamente proporcional con la rotación específica, ya que a
medida que aumenta la temperatura disminuye la rotación
específica (a 15 °C se tiene una α de 84.75 y a 20 °C una α de
80.25). Mientras en la Tabla 3 se puede observar que hay una
relación directamente proporcional entre la Concentración y la
rotación específica, ya que a medida que aumenta una la otra
también aumenta (a una concentración de 0.01g/ml se tiene un α
de 0.75 y a 0.03 g/ml una α de 1.75).
Lo expuesto anteriormente también se puede inferir de igual forma
observando las gráficas correspondientes a cada tabla (gráfica 1 y
2).

 La relación entre el ángulo de giro y la concentración es lineal, por

lo que el valor del contenido de la muestra problema P-SOA-9 se
pudo hallar por medio de la ecuación de la línea recta dando como
resultado 0.046 g/ml, después de realizar una curva de calibración.

 En la cuantificación de muestras problemas es importante conocer

primero su ángulo de giro, para establecer las concentraciones con
las que se realizaran la curva de calibración, que servirá
posteriormente para la identificación de esta.

Si se desconoce el ángulo de giro de la sustancia problema, y se

realiza la curva de calibración sin tener en cuenta este parámetro,
para la preparación de los patrones; al momento de la identificación
podría evidenciarse un error de extrapolación, es decir que el
ángulo de giro B de la sustancia problema , no se encuentre dentro
de los datos graficados, obteniendo entonces un porcentaje de
error amplio y un resultado poco confiable, en cuanto a la
identificación de sustancias por curva de calibración.
 CONCLUSIONES.

 Al momento de comenzar la práctica es necesario realizar la

calibración al equipo para en caso de existir una descalibración se
deba corregir las lecturas posteriores y así poder obtener buenos
resultados, en este caso no fue necesaria la corrección de datos
debida a este factor.

 La adecuada formulación, preparación e identificación de las

soluciones patrones son de vital importancia pues su concentración
es un factor importante en la medida del ángulo de giro.

 Se ha demostrado que la temperatura y la concentración son muy

importantes al momento de analizar una sustancia ópticamente
activa ya que estos parámetros afectan la rotación de la sustancia
a analizar, además de estos dos parámetros es importante
mencionar que la rotación también es afectada por la longitud de
onda de la fuente de luz que se utiliza.

 Los resultados obtenidos en la presente práctica, permitieron

comprobar que la concentración tiene una relación directamente
proporcional con el ángulo de giro B, de una sustancia ópticamente
activa, como lo afirma la ley de Biot; por lo que la determinación
cuantitativa realizada, puede ser confiable para posteriores
investigaciones.

 Las mediciones de la rotación óptica pueden emplearse para

determinar la concentración y/o la pureza de una sustancia, o
simplemente para detectar la presencia de una sustancia química
ópticamente activa en una mezcla.

 La polarimetría es empleada en control de calidad, control de

procesos e investigación.

 La temperatura a la cual se encuentra la sustancia, el tiempo

transcurrido, la presencia o ausencia de catalizadores, retardan o
aceleran la inversión de la sacarosa en sus carbohidratos más
simples.
 PREGUNTAS.

1. ¿En un polarímetro como se obtiene la luz polarizada?

Un haz de luz ordinaria está formado por ondas electromagnéticas que

oscilan en una cantidad infinita de lados y las direcciones forman ángulo
recto con la dirección de propagación de la luz. Sin embargo, cuando un
haz de luz ordinaria pasa por un dispositivo llamado polarizador, sólo lo
atraviesan las ondas luminosas que oscilan en un plano, de ahí el nombre
de luz polarizada en un plano. Las ondas luminosas en los demás planos
son detenidas.

2. ¿Para qué se utilizan los dispositivos de media sombra?

Se utilizan para graduar exactamente el ángulo de rotación de la

sustancia ópticamente activa. Es el ángulo entre los planos de luz
polarizada por las mitades del polarizador pero el ángulo debe ser lo
suficientemente grande para que permita pasar bastante luz para una
visibilidad efectiva. Los dispositivos de media sombra son usados para
realizar enfocar y ubicar la el espacio en el que se debe tomar la medida
del ángulo de giro.

3. ¿Qué son mezclas racémicas y mutarrotación?

Las mezclas racémicas son aquellas en el cual sus productos son

originarios de una serie de reacciones químicas, donde su actividad óptica
se encuentra en una forma igual tanto en el levógiro como dextrógiro en
una misma proporción.

La mutarrotación es un proceso de isomerización que ocurre en

monosacáridos referido a la rotación que sufre el carbono anomérico al
pasar de un confiométro a otro. Este puede pasar de un enlace de
carbono beta y viceversa.

4. Consultar en que consiste la Escala Internacional del Azúcar.

La escala internacional de azúcar ICUMSA, fija las bases de los métodos

polarimétricos permitiendo la determinación de las relaciones entre las
rotaciones ópticas causadas por soluciones acuosas de una muestra y la
causada por una solución de sacarosa pura de una concentración
predefinida
 5. Consultar una determinación analítica en la que se utilice la
polarimetría como técnica instrumental.

La polarimetría es utilizada en la Industria Alimenticia, como método para

determinación de concentración en soluciones, especialmente en la
Industria azucarera. En esta industria se emplea para:

Determinar la pureza del azúcar comercial (sacarosa), o la cantidad de

sacarosa contenida en una muestra; conociendo el poder rotatorio
específico de la sacarosa, en solución acuosa, con luz de sodio y a
temperatura ambiente.

Utilizando la ley de Biot para soluciones, se puede calcular el poder

rotatorio específico de una muestra, a una determinada longitud de onda y
temperatura:

α = [α]. L .C

α = ángulo de rotación

[α]: rotación óptica específica (0.ml.dm-1.g-1)

L: longitud del tubo (dm)

C: concentración de la muestra (g/ml)

 BIBLIOGRAFÍA.

 Polarimetría 1[En línea]. [Disponible

en].http://www.altillo.com/examenes/uba/farmaciaybioquim/fisica/fisi
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 Douglas A. Skoog, F. James Holler, Stanle R. Crouch. (2008).

Principios de análisis instrumental. Editorial Edamsa Impresiones
S.A. Sexta edición. ISBN 978-970-686-829-9. México.

 DURÁN C. LUIS ALEJANDRO, 2006. Diagnóstico metrológico para

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sacarímetros polarimétricos en uso graduados de acuerdo a la
escala de azúcar ICUMSA. Evaluado según la recomendación
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Guatemala. Universidad de San Carlos de Guatemala. Facultad de
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 QUÍMICA ORGÁNICA.APUNTES DE ESTEREOQUÍMICA.

CECILIO MÁRQUEZ SALAMANCA. [En línea].
[Disponibleen].http://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/7018/9/LIB
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