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Ejercicio4 PDF
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Tincin de microorganismos
Biol 3725L
Repaso de diluciones
1 ml
0.1 ml 1 ml 1 ml
1 ml
9 ml 99 ml 9 .9ml 9 ml 9 ml
1 / 10 1 / 100 0.1/ 10
1/10 1/10
10-1 10-3 1/ 100 10-6 10-7
10-5
1 ml 1 ml 0.1 ml
1 ml
Espiroquetas
Coco
Bacilo
Morfologa y agrupacin de bacterias:
Tincin
La tincin es una de las tcnicas ms utilizadas en los
laboratorios de microbiologa para clasificar microorganismos.
(-) (-)
(+) (-)
(-)
(-)
(-)
(-)
(-) (-)
methylene blue (-)
(-)
(-)
(-) (-)
Tincin diferencial: permite detectar tipos distintos de clulas
Azul-Violeta Rojo
Pasos de la
Tincin Gram
Cristal violeta (1
minuto)
Lavar con agua (Streptococcus sp.)
Yodo (1 minuto) (Escherichia coli)
Lavar con agua
Alcohol etlico al
95% (20 segundos) Desventajas de tcnicas de
Lavar con agua tincin:
Safranina (1 minuto)
Lavar con agua requieren fijar la muestra
Secar con bibolous con calor: (clulas mueren)
paper
Gram+= azul-violeta, calor + qumicos pueden
Gram = rojo distorsionar la forma original
de las clulas
Tincin Gram
Tinte primario- Cristal Violeta (CV), tie la bacteria
color violeta.
Gram +
Reaccin se basa en la
diferencia en la composicin
qumica de la pared bacteriana.
Gram -
Su pared celular contiene una
capa fina de peptidoglicano
Pared celular procariota
enlace , 1-4
G M G M G M G M
3 4
M G M G M G M G M
G = N-acetil glucosamina tetrapptido (4 amino cidos)
M = N-acetil cido murmico (murena)
Pared celular procariota
G M G M G M G M
M G M G M G M G M
G M G M G M G M G M G M G M G M
M G M G M G M G M M G M G M G M G M
G M G M G M G M
M G M G M G M G M
Tincin Gram
Fundamento
Membrana externa de las Gram
es soluble en solventes orgnicos como el alcohol
la capa de peptidoglicano es demasiado delgada como para
retener el complejo cristal violeta/yodo que se form
por lo que va perdindose el color azul-violeta.
cpsula
Tincin de Cpsulas
Tinte primario- Cristal Violeta 1%- tie todo el frotis color oscuro
Cryptococccus laurentii
Tincin de Cpsulas
Tincin simple-negativa
La tincin se logra mediante una mezcla del tinte y el cultivo
de bacteria.
En condiciones
ambientales favorables,
ocurre germinacin, lo cual
forma la clula vegetativa
(bacteria).
Formacin de esporas como
mtodo de sobrevivencia
Endosporas
La esporognesis y la germinacin no son medios de
reproduccin, son mecanismos de supervivencia de
la clula.
La composicin qumica de la bacteria la hace
resistente a:
Calor extremo o excesivo
Congelacin
Radiacin
Desecacin
Agentes qumicos
Tincin de Esporas
Tinte primario- Verde Malaquita, requiere calor para la
penetracin de este tinte.
Bacillus cereus
Espora (color
verde)
Clula vegetativa (color rojo)
Tincin cido-Resistente
Las familias Mycobacteriae
y Nocardiaceae son cido
resistente.
Mycobacterium tuberculosis
Observar laminillas!!!
Tincin de flagelos
Tipo de tincin en la que se pueden visualizar el (los) flagelo(s).
Utiliza 2 tintes:
cido tnico (agente mordante: engruesa los flagelos)
Rosalina (colorante que los define)
Mobiluncus spp.
Resumen resultados de tinciones
Cul es el fundamento?