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Determinacin de protenas

Mtodo de Bradford
Para la determinacin de protenas se usar el mtodo de Bradford, que se
fundamenta en la formacin de un complejo entre el reactivo azul de
coomasie y las protenas en solucin, causando un cambio en mximo de
absorcin a 595 nm.
Para su preparacin se disolver 100 mg del reactivo azul de coomasie en
50 mL de alcohol al 95% y se aadir 100 mL de cido ortofosfrico al 85%
y se completar con agua bidestilada c.s.p. 1 L. Se dejar en reposo por 24
horas en un frasco ambar para su posterior filtracin.
Para la realizacin de la curva estndar se utiliz como patrn soluciones de
albmina bovina a diferentes concentraciones: 2,5, 10, 12.5, 20 y 25 ug/mL;
se tomar 10 uL de cada una y se mezclaron con 1 mL del reactivo de
Bradford, se dejar en reposo por 2 min y se leer por espectrofotometra a
595 nm

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