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DE
CAPACITACIN Y ACTUALIZACIN
LABCARE. COLOMBIA
2010
Introduccin
El Uroanlisis es el examen de laboratorio ms utilizado pero a su vez el menos
estandarizado, al que se le dedica menor tiempo en su procesamiento y sobre el que
no se realiza Garanta de Calidad. Sin embargo, hoy en da se reconoce que el
anlisis cuidadoso del examen fsico, del qumico y de los componentes del sedimento
puede proporcionar informacin temprana sobre el estado metablico, endocrino,
integridad anatmica del rin y la existencia y grado de la lesin renal; por ello se
puede definir como "Biopsia Renal Indolora".
Dos caractersticas nicas explican la importancia de practicar el Uroanlisis: es una
muestra fcilmente disponible de recolectar adems de que proporciona informacin
rpida y segura sobre muchas de las funciones metablicas del organismo.
La seleccin del personal que labora en el laboratorio, el Aseguramiento de la
Calidad, la preparacin cuidadosa del paciente, la obtencin y el manejo escrupuloso
de las muestras, as como la limpieza del material y la supervisin del adecuado
funcionamiento del instrumental, son los primeros pasos que garantizan resultados
vlidos, que son frecuentemente obviados. Es importante resaltar, que la orina es un
producto biolgico y puede afectarse por el ejercicio, algunos medicamentos, adems
del tipo de alimentacin.
El examen de la orina cualitativo/semicuantitativo con tiras reactivas y el microscpico
(sedimento) son los ms populares y ensayos bsicos del laboratorio clnico. Sin
embargo, la exactitud y la precisin de las pruebas no han sido tan fiable como el de
la Qumica Clnica o la Hematologa, debido fundamentalmente, a la inestabilidad de
la muestra de orina y a los procedimiento de anlisis subjetivos. Aunque se han hecho
avances significativos en la metodologa, sensibilidad y especificidad de las pruebas
qumicas, al examen del sedimento le falta, en ocasiones, estandarizacin, control de
calidad adecuado y automatizacin.
El valor del examen microscpico depende de dos factores fundamentales: el anlisis
de una muestra adecuada y del entrenamiento del profesional que realiza el estudio.
En 1926, Addis desarroll un procedimiento para cuantificar los elementos formes en
el anlisis microscpico en muestras de orinas recolectadas durante 12 horas. Sin
embargo, en la actualidad este mtodo no es recomendable, por que muestras que
Fiabilidad de la muestra
Mtodo de eleccin en pacientes mayores de 3 aos.
Fiable para el seguimiento rutinario. La negatividad de la
muestra estudiada descarta infeccin, pero la positividad no
la confirma
No se debe emplear si se precisa utilizar antibioticoterapia
inmediata
Miccin voluntaria
Bolsa adhesiva
Cateterismo transuretral
Puncin suprapbica (PSP)
Complicaciones
Hematuria macroscpica (0,6%)
Miccin reciente (< 1 h)
Perforacin intestinal
Peritonitis (excepcional)
Hematomas de la pared abdominal
Bacteriemia anaerobia
Muy fiable
Contraindicaciones
Deshidratacin
Distensin abdominal
Anomalas mal definidas del TU
Diatsis hemorrgica urinario
Identificacin de la muestra
En pacientes hospitalizados antes de obtener la muestra es indispensable identificarlo
teniendo en cuenta el nmero de cama, de habitacin o de historia clnica y confirmar
personalmente con el paciente mismo (si esto es posible) sus nombres y apellidos.
Las muestras de orina deben ser etiquetadas y rotuladas con la informacin siguiente:
Nombre completo del paciente
Nmero de historia clnica.
Adems, deben acompaarse de una solicitud mdica, la cual debe contener los
datos adicionales de identificacin del paciente tales como:
Gnero
Edad
Tipo de paciente (hospitalizado o ambulatorio)
Fecha
Hora de la recoleccin
Tipo de muestra
Medicamentos
Posible diagnstico
Evaluacin de la muestra
Antes de proceder a cualquier prueba, es preciso evaluar en la muestra de orina su
aceptabilidad. Las diversas consideraciones incluyen: etiquetado apropiado, una
muestra ptima para la prueba solicitada y una buena conservacin.
Cada laboratorio debe tener y hacer cumplir unas normas escritas para la aceptacin
o rechazo de las muestras. En una muestra apropiadamente etiquetada debe constar
el nombre completo del paciente, la fecha y el momento de la recoleccin.
Adicionalmente cada institucin tendr sus criterios.
EXAMEN FSICO
Comprende: volumen, aspecto, color, olor, densidad urinaria y espuma.
Volumen
El volumen de la orina no hace parte del Uroanlisis, sin embargo, es indispensable
en aquellos exmenes que se realizan en orina de 12 y 24 horas (orina minutada) los
cuales pueden resultar til para el diagnstico clnico. El volumen diario en un adulto
sano es aproximadamente de 800 a 1500 mL y oscila entre 600 a 2000 mL. La orina
nocturna no supera en general los 400 mL. Los nios de corta edad eliminan una
cantidad de orina por kilogramo de peso 3 a 4 veces superior a la de los adultos.
Durante la gestacin la variacin diurna normal, se invierte originando nicturia y orina
diluida.
Un volumen superior a 2000 mL en 24 horas recibe el nombre de poliuria. La
disminucin del volumen urinario se denomina oliguria y corresponde a una excrecin
menor de 500 mL al da. La anuria es la virtual suspensin completa de la formacin
de orina o volmenes inferiores a 100 mL/ da.
Aspecto
La orina normal, limpia y reciente es usualmente transparente pero puede modificarse
debido a la presencia de cristales provenientes de la dieta o metabolismos
intermediarios, mucoprotenas, protenas, bilirrubina o grmenes infectantes. La tabla
1 muestra algunos cambios que puede exhibir la orina.
Tabla 2. Cambios en el aspecto de la orina
Cambio
Color y transparencia
Incoloro
Turbia
Causas
Muy diluida debido a la incapacidad para concentrar la orina (lactantes,
diabetes inspida, ADH inadecuada con algunos diurticos), ingestin
aumentada de lquidos
Con frecuencia por precipitacin de fosfatos en orina alcalina.
Presencia de carbonatos, uratos, cido rico.
Leucocitos dispersos y en acmulo (piocitos), bacterias, levaduras,
cristales, clculos
Ahumada
Lechosa
Opalescente
Color
El color de la orina normalmente es amarillo, sin embargo, puede exhibir una amplia
gama de colores. Puede variar de amarillo plido a mbar oscuro segn la
concentracin de los pigmentos urocrmicos (sulfuro que contiene sustancias de
naturaleza desconocida producto de la oxidacin del urocromgeno incoloro) y en
menor cuanta, la urobilina (producto de degradacin de la hemoglobina) y la
uroeritrina. Se considera que la excrecin de urocromo es proporcional al
metabolismo basal y aumenta durante la fiebre, tirotoxicosis y la caquexia. El
pigmento rosado (uroeritrina) puede depositarse en los cristales de cido rico o en
los uratos (en sedimento como polvo de ladrillo) que no debe confundirse con los
hemates. Cuanto ms pigmento tenga mayor ser la intensidad del color. An dentro
de la normalidad el color puede variar dependiendo de la ingesta de lquidos,
alimentos o medicamentos. Cuando se abandona la muestra a temperatura ambiente,
suele adquirir un color ms profundo como consecuencia del viraje de cromgenos
incoloros a compuestos coloreados. Las orinas patolgicas presentan diferentes
coloraciones, frecuentemente debidas a sangre, pigmentos biliares o metabolitos
producidos por desrdenes metablicos.
Algunas de las sustancias que pueden influir en el color de las orinas se resumen en
la tabla 3
Tabla 3. Causas de modificaciones del color de la orina
Color
Incolora o
amarillo
claro
Nublado
Patolgicas
Alimentos o medicamentos
Abundante ingesta de lquidos
diludos
Diabetes inspida
Fosfatria,
piuria,
hiperoxaluria
quiluria,
lipiduria,
Frijoles
Levodopa, metronidazol,
nitrofurantona, algunos agentes
antimalaria
Castao
Negroparduzco
Levodopa, metildopa,
metronidazol, imipenem, fenoles
Azulverdoso
Naranja
Roja
Amarillo
verdoso
Pigmentos biliares
Orina concentrada por hipermetabolismo
(fiebre o hipertiroidismo), poca ingesta o
prdidas excesivas de agua (deshidratacin).
Urobilina en exceso por trastornos en el
hgado o en la vescula biliar (sin color hasta
que se expone a la luz).
Bilirrubinuria debida a trastornos del hgado o
de la vescula biliar
Fenotiazinas, fenazopiridina
(Pyridium)
Remolachas, caramelos,ruibarbo
y algunos que contienen tintura
de fucsina
Fenolftalena, rifampicina,
teofilina
Fenindiona anticoagulante similar
a la cumarina (Hedulin)
Olor
Normalmente, la orina tiene un olor caracterstico sui generis y se describe como
urinoide, debido a la presencia de cidos orgnicos voltiles o ser ms fuerte en
muestras concentradas sin que esto implique infeccin ; puede modificarse como
consecuencia de frmacos, alimentos, por la presencia de bacterias, metabolitos tales
como la acetona, amonaco o elevaciones de compuestos caractersticos de diversos
errores innatos metablicos. Algunos cambios fisiolgicos y patolgicos en el olor de
la orina se describen en la tabla 4.
Ingestin de multivitamnicos
Esprragos
Penetrante, amoniacal.
Orina en descomposicin.
Patolgicos
Acidosis urmica.
Fenilcetonuria.
A esprragos
Insuficiencia heptica.
Fecal.
Ftido
Urinoide
10
Espuma
La orina normal promueve una ligera cantidad de espuma al ser agitada levemente.
Cuando es abundante y permanente, indica existencia de sustancias tensoactivas que
actan como detergentes y disminuyen la tensin superficial (bilirrubina y protenas).
La coloracin amarilla suele indicar la presencia de pigmentos biliares, no obstante,
tambin puede ser debida a la ingesta de fenilazodiaminpiridina (Pyridium). Si existe
albmina incrementada la orina ser incolora y con espuma abundante.
PESO ESPECFICO
Los mtodos empleados para determinar el peso especfico son: densidad urinaria,
refractometra, tiras reactivas y osmolaridad.
Densidad urinaria (gravedad especfica)
Relacin masa / volumen (peso de la orina al del agua destilada por debajo de las
condiciones estndares). Refleja el peso de los solutos en la orina. En la actualidad la
metodologa ms utilizada para evaluar la densidad urinaria es el empleo de tiras
reactivas. El principio en el cual se fundamenta es el cambio de pK de algunos
polielectrolitos en relacin con la concentracin inica de la orina. Estos
polielectrolitos contienen grupos cidos que se disgregan de acuerdo con la
concentracin inica. Al aumentar los iones aumentan los H+ y estos se disocian, lo
cual modificar el pH del indicador, que mide el cambio. A mayor acidez ms
densidad. Las orinas que presenten un pH de 6,5 se les debe realizar correccin de
la densidad para lo cual es pertinente sumar 0,005 a la densidad obtenida. Los
valores usuales de la densidad estn influenciados por la edad y la ingesta de
lquidos. La tabla 5 resume las cifras de referencia de la densidad relacionados con la
edad y con la hidratacin de los pacientes
Tabla 5. Valores de referencia de la densidad urinaria, relacionados con la edad
y con la hidratacin de los pacientes
1,012
Lactantes
1,001-1,035
1,016-1,022
1,010-1,020
11
EXAMEN QUMICO
El examen qumico se practica mediante la utilizacin de qumica seca (tiras reactivas)
para lo cual debe observarse cuidado especial en su uso. Deben ser almacenadas
con un desecante en el recipiente original, mbar, bien cerrado, a temperatura
ambiente en un sitio fresco (no refrigerar), no usarlas despus de la fecha de
caducidad, no utilizarlas si estn decoloradas, no cortarlas y cerrar bien el frasco
inmediatamente despus de extraerlas.
La tcnica a seguir incluye: mezclar bien la muestra (no agitarla), equilibrada con la
temperatura ambiente, introducirla por completo en forma breve, eliminar el exceso de
orina al extraer la tira de la muestra, colocndola en contacto por el borde con una
superficie limpia y plana, comparando la reaccin con los patrones del fabricante;
realizarse bajo luz edecuada, en tiempo especificado y relacionar los hallazgos
qumicos unos con otros, adems, con los exmenes fsicos y microscpicos del
Uroanlisis, finalmente practicar pruebas confirmatorias cuando est indicado.
Muchos estudios se han realizado para determinar si una marca comercial causa
menos errores que otra, siendo los resultados no concluyentes. Sin embargo, han
mostrado que la mayor variabilidad reside en el cuidado del bacterilogo en las
interpretaciones de las reacciones practicadas por comparacin de patrones. Esta
subjetividad, junto con la discriminacin visual entre los colores, se ha corregido
mediante el desarrollo de la automatizacin para la lectura de las tiras reactivas. Los
instrumentos diseados para este fin, miden la luz reflejada de una tira reactiva que se
ha introducido de una forma manual en orina y luego colocada en el autoanalizador.
La reflectancia de la luz de las tiras disminuye en proporcin a la intensidad del color
producido por la concentracin de la sustancia en estudio. Por lo tanto, el instrumento
compara la cantidad de reflexin de la luz con las concentraciones conocidas de los
analitos y los reporta. La automatizacin no mejora la metodologa qumica de las
tiras, solo su reproducibilidad y la objetividad del resultado.
El incremento del nmero de muestras para analizar en el mismo tiempo disponible a
nivel laboral y la pobre calidad de las muestras resultado de largos tiempos entre la
recoleccin y el anlisis impide obtener precisin, confiabilidad y reproducibilidad en la
realizacin del Uroanlisis.
Esta situacin ha impulsado nuevos enfoques y replanteamientos en las tcnicas a seguir
para mejorar la evaluacin, mediante las pruebas qumicas, de los elementos relevantes
del sedimento en forma directa o por parmetros asociados. De estos planteamientos
nace el concepto del Tamiz de tiras reactivas (Tabla 6)
12
UROANLISIS
Screening
qumico
negativo
Tira reactiva
Screening
qumico
positivo
Orina
turbia.
Sntomas
clnicos
No exmenes
complementarios
Anlisis
microscpico
y/o cultivos
Anlisis
microscpico
y/o cultivos
Leucocitos
Sangre
Fundamento
Falsos positivos
Falsos negativos
densidad.
glucosa.
protena.
cido oxlico.
Gentamicina.
Tetraciclina.
Cefalexina.
Cefalotina.
densidad.
cido ascrbico.
nitritos.
protenas.
pH < 5.
Captopril.
Agentes oxidantes.
Hipoclorito.
Peroxidasa vegetal.
Enzimas bacterianas.
Contaminacin menstrual
13
Protena
Nitritos
Densidad.
pH
Compuestos de amonio
cuaternario.
Detergentes.
Cefalotina.
concentraciones de
sal.
cido ascrbico
Orina no retenida en
vejiga durante 4 horas
Abstencin de nitratos
Antibioticoterapia.
Bacterias Gram (+).
Levaduras.
Estudios realizados por Winkel y col. (1974), Catertt y col (1981), Kutter y col (1982),
entre otros, concluyen que leucocitos, eritrocitos, bacterias, cilindros, junto a la
observacin macroscpica de una orina recin emitida, pueden evaluarse
indirectamente mediante el empleo de pruebas de qumica seca (Tabla 8 ).
detectables
directa
Leucocitos
Leucocitos
Eritrocitos
Sangre
_____
Protena
Indirectamente
Leucocitos lisados.
Cilindros leucocitarios.
Trychomonas.
Eritrocitos lisados.
Hemoglobina libre.
Mioglobina.
Cilindros eritocitarios.
Cilindros de hemoglobina.
Cilindros de mioglobina.
Cilindros granulosos
Cilindros creos
14
Nitritos
Bacterias
15
EXAMEN MICROSCPICO
El examen microscpico constituye una parte vital del anlisis de orina de rutina. Es
herramienta diagnstica valiosa para la deteccin y evaluacin de trastornos renales y
del tracto urinario, as como de las enfermedades sistmicas. El valor del examen
microscpico depende de dos factores fundamentales: del examen de una muestra
adecuada y del entrenamiento del profesional que lo realiza.
La importancia del anlisis del sedimento no es materia en discusin. Su realizacin,
sin embargo, exige estandarizacin, la cual comprende volumen inicial y final en la
centrifugacin, volumen de la gota a examinar, tamao de la capa e igualdad en los
campos visuales de un microscopio a otro.
Manuales
Porta y cubreobjetos
Cmara de recuento de Neubauer
Sistema recomendado por el CLSI antes NCCLS
Celda de Lectura Rpida de Precisin (Quick-Read)
Sistema MD Kova
Semiautomatizados o automatizados
Instrumentacin diversa.
Porta y cubreobjetos
16
Clculo
FCR
28,38 (N/1000)2
Siendo
Nomograma
Este nomograma consta de tres escalas: (A) radio de rotacin, (B) revoluciones por
minuto y (C) fuerza centrfuga relativa. Se traza una recta entre dos puntos conocidos
(radio, RCF o RPM) en dos de las columnas. El tercer valor corresponde a la
interseccin de la recta con la tercera columna.
17
Ejemplo
Para encontrar la fuerza relativa centrifugacin a una distancia radial de 10 cm desde
el centro de rotacin al funcionamiento cuando la centrfuga opera a una velocidad de
3000 rpm, se debe colocar una regla en la carta y hacer coincidir los 10 cm del punto
de la escala del radio giratorio con el nmero de revoluciones de 3000 en el punto la
escala de velocidad (B). la fuerza centrfuga relativa (Escala , en este caso, 1000x
gravedad. Similarmente, si el rcf deseado es conocido, la velocidad necesaria para un
determinado radio de rotacin puede ser valorada mediante la conexin de los dos
puntos conocidos y la lectura de la interseccin de la regla con la velocidad de la
escala.
B
C
18
19
Donde
N de clulas contadas
Factor de dilucin
Profundidad de la cmara
Constante: 0,1 mm
Ejemplo
Suponga que realiz un recuento en los 25 cuadrados del cuadrado central de la
cmara y observ 20 leucocitos y emple una dilucin 1:200. Cuntos leucocitos
hay?
Remplazando en la formula:
20 x 200 = 40.000 leucocitos /mm3
0,1 x 1
20
Protocolo
Ejemplo
Usando 15 mL de orina:
Dimetro del campo de alto poder: 0,35 mm.
rea del campo de alto poder: 0,096 mm2 ( D2/4).
rea del cubreobjetos (22 mm x 22 mm) = 484 mm2
o 484/0,096 = 5040 campos de AP.
Desechar el sobrenadante y dejar en el tubo 0,25 mL. de sedimento.
Resuspender la orina y medir 20 L (0,02 mL) de sedimento.
Colocar la orina en el portaobjetos y cubrir con el cubreobjetos
o 5040 campos de AP 1,2 mL de orina 4000 c AP / mL
Clculos
(recuento / campo de Ap ) x 4000 conteo / mL.
Ejemplo
(10 leucocitos / c AP ) x 4000 c AP /mL 40000 leucocitos / mL.
21
63 mm2
rea total
1 mm2
rea
0,111 mm2
Volumen
6,3 L.
Volumen total
0,1L.
Volumen
0,011 L.
Protocolo
22
Para muestras con volumen inferior a 12 mL. centrifugar slo 6 mL. y multiplicar el
nmero de clulas obtenido por dos antes de hacer los clculos. En la cmara cada
campo de AP equivale a 1 crculo. El valor de cada crculo equivale 0,0111L.
Ejemplo
23
X 1000L
0,011L
X 1L = 27,27
1000L
3 - 5/ L
Hemates
0 - 2/ L
Sistema MD KOVA
Procedimiento normalizado con las ventajas que ofrece la orina centrifugada, las
cuales permiten obtener recuentos celulares con excelentes resultados, si se compara
con otros mtodos. Utiliza tubos de centrfuga graduados, pipetas y portaobjetos
desechables. El recuento se realiza con una cmara desechable y un volumen
constante. Esta tcnica soluciona el inconveniente de los mtodos no estandarizados
utilizados de rutina en donde el vertido del sobrenadante no permite obtener un
volumen constante de sedimento; adems, las diferencias entre profesionales al
ejecutarlo, hacen que la cantidad para resuspender sea extremadamente variable. Por
ello, la variacin del material celular cambiar por el volumen dejado para la
resuspensin.
Componentes del sistema Kova
El sistema est constituido fundamentalmente por tres elementos: lminas (cada una
con diez cmaras individuales marcadas para el montaje de diez muestras); tubos de
centrfuga graduados para 12 mL de volumen y pipetas desechables que permiten
retener 1 mL de muestra despus de la decantacin. Existen otros accesorios tales
como, gradilla para diez tubos, colorante de Sternheimer-Malbin y controles (KOVATROL) de tres niveles (normal, bajo y alto), los cuales deben ser tratados como una
muestra.
24
6,6 L.
Profundidad
0,1 mm.
Dimensiones
Volumen cuadro
0,9 L.
0,33
Protocolo
Inserte una pipeta del sistema KOVA dentro del tubo Kova
Jornada de Capacitacin y Actualizacin
LABCARE Colombia.
25
Empujar la pipeta al fondo del tubo hasta que se asiente firmemente (en la
graduacin de 1 mL).
Decantar el sobrenadante. La pipeta permite retener 1 mL de la muestra para
resuspender el sedimento.
Adicionar 1 gota del colorante de Sternheimer-Malbin, que facilita la
visualizacin de los elementos formes. Resuspender el sedimento hasta
obtener una mezcla homognea.
Transferir una pequea cantidad de muestra en la cmara, apretando la pera
de la pipeta. La muestra ingresar por capilaridad a la cmara.
Retirar el exceso de espcimen con material absorbente.
Realizar la lectura microscpica empleando el objetivo de 10x para cilindros y
de 40x para los otros elementos formes.
Reportar los resultados como clulas / L empleando las tablas anexas
incluidas en el inserto del producto.
Clculo
Para clulas/L
# elementos contados x Factor
# cuadritos observados
mL de orina
total
mL de
sedimento
Volmen
cuadrado
pequeo
uL de orina total
en el cuadro
pequeo
N de clulas
Reporte
/ uL
Factor
12
0,0111
0,1332
1/ uL
7,5
10
0,0111
0,0111
1/ uL
9,0
10
0,5
0,0111
0,222
1/ uL
4,5
1/ uL
90,0
26
Ejemplo
Si 12 mL de orina total estn contenidos en 1 mL de sedimento, cuantos uL de orina
total hay en 0,0111 ul de sedimento que hay en un cuadro pequeo
mL de orina total x volumen en cuadrado pequeo (L)
mL de sedimento
Normal
Lmite
Patolgico
Leucocitos
0 - 4 /L
4 - 6 /L
> 6 /L
Eritrocitos
0 - 2 /L
2 - 3 /L
> 3 /L
Clulas/ L
10 mL
1
2
2
3
4
5
5
6
7
27
8
8
9
10
11
11
12
13
14
15
15
16
17
18
18
19
20
21
21
Clulas/ L
12 mL
8
9
11
12
14
15
17
18
20
21
23
24
26
28
29
31
32
34
35
37
38
46
28
54
61
69
77
92
107
Clculo alternativo
Determinar el promedio de clulas por cuadrcula pequea y luego utilizar los
siguientes factores multiplicadores para calcular las clulas/ L.
Para el clculo de las clulas / L con el sistema Kova utilizando 10 cuadrculas:
Para muestras no centrifugadas o homogenizadas, multiplicar el promedio de
las clulas obtenido por cada cuadrcula por 90.
Utilizando 10 mL y 1 mL de sedimento, multiplicar el promedio de las clulas
obtenido por cada cuadrcula por 9.
Utilizando 10 mL y 0,5 mL de sedimento, multiplicar el promedio de las clulas
obtenido por cada cuadrcula por 4,5.
Para 12 mL de orina y 1 mL de sedimento (sistema Kova), multiplicar el promedio de
las clulas por cuadrcula x 7,5.
Ejemplo de clculo utilizando 12 mL de orina y 1 mL de sedimento
Crculos
Clulas totales
Promedio
de clulas
Multiplicar por
factor (7,5)
Leucocitos
10
0,5
0,5 x 7,5
3,8
Eritrocitos
10
14
1,4
1,4 x 7,5
10,5
Clulas
Clulas /L
29
Clculos
Total de clulas
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
25
30
40
50
Clulas/ L
3
5
8
10
13
15
18
20
23
25
28
30
33
35
38
40
43
45
48
50
63
75
100
126
Clulas/ mL
2 500
5 000
7 500
10 000
12 500
15 000
17 500
20 000
22 500
25 000
27 500
30 000
32 500
35 000
37 500
40 000
42 500
45 000
47 500
50 000
62 500
75 000
100 000
125 500
Clulas/ L
9
18
27
36
45
54
63
72
81
90
180
225
270
315
Clulas/mL
9 000
18 000
27 000
36 000
45 000
54 000
63 000
72 000
81 000
90 000
180 000
225 000
270 000
315 000
30
360 000
450 000
540 000
630 000
720 000
810 000
900 000
1 350 000
1 800 000
2 250 000
Clculo alternativo
Clulas/ L
Clulas/ mL
Mtodos automatizados
Existen dos sistemas para automatizar la microscopa basados en diferentes
tecnologas:
Anlisis de imgenes tomadas por una videocmara y lmpara strobe, que
detiene el movimiento del fluido para detectar los elementos presentes y a
continuacin realiza comparacin clasificndolos en doce categoras. Se
requiere revisin para clulas epiteliales y cilindros patolgicos.
Un sistema basado en el principio de citometra de flujo, en donde se procesa
orina no centrifugada.
Dismorfismos
Los eritrocitos pueden experimentar alteraciones morfolgicas permanentes e
irreversibles, lo cual se conoce con el nombre de dismorfismo y surgen en el
sedimento de pacientes con afecciones renales glomerulares (Fairley y Birch 1982).
Los hemates dismrficos experimentan las ms variadas deformaciones en el rin
tales como formacin de vesculas, defecto y ruptura de la membrana en uno o varios
puntos que permiten la salida del contenido celular el cual queda incluido en una
especie de burbuja; en ocasiones autnticos agujeros celulares que dan lugar a restos
de membranas arrugadas, divertculos, trozos de hemates que recuerdan los
poiquilocitos, clulas en rodete como dianocitos, hemates planos con bordes
festoneados, hasta formas totalmente amorfas (grnulos), si bien los ms frecuentes
son los hemates en forma de donut. El cambio continuo de pH y de la osmolalidad
en el sistema tubular es considerado responsable de las modificaciones en la forma
Jornada de Capacitacin y Actualizacin
LABCARE Colombia.
31
Interpretacin
Eumorfos
Normales
Estramonio
Lixiviados
Dismorfos
Formacin de vesculas
Defecto de membrana
Agujeros
Grnulos
Espolones
MICROSCOPA
El examen microscpico de rutina del sedimento urinario requiere del uso de
microscopios de campo brillante de alta calidad.
Existen tres mtodos de mejoramiento para la identificacin de elementos formes del
sedimento: microscopa de luz polarizada, microscopa de contraste de fase y
coloraciones especiales.
Jornada de Capacitacin y Actualizacin
LABCARE Colombia.
32
33
MTODOS DE TINCIN
34
Coloracin de eosina
Cuando el sedimento contiene eritrocitos abundantes, muchas veces se puede
dificultar la identificacin de otros elementos formes tales como las clulas micticas,
gotas de grasa o incluso burbujas de aire. Para solucionar esta situacin se aade
una gota de solucin de eosina al 0.5% en agua destilada al sedimento. Luego de
agitar bien, se colocan 50 L (0.05 mL) entre el porta y cubreobjeto y se examina
inmediatamente al microscopio. Los eritrocitos se tien de color rosa, a diferencia de
los hongos y la grasa libre. Las clulas del epitelio, leucocitos y cilindros se colorean
de un color rojizo.
Coloracin de Hansel
La mayora de los leucocitos detectados en la orina son polimorfonucleares, sin
embargo, es de creciente inters la diferenciacin de stos. La eosinofilia es un
35
Tincin de Wright
Para la identificacin de eosinfilos se puede utilizar tambin la coloracin de Wright,
similar a la utilizada para el frotis sanguneo.
La tincin de Wright es una coloracin metacromtica en la cual el colorante sufre una
transformacin cromtica al entrar en contacto con el tejido a colorear, debido al
estado de agregacin que puede ser modificado por los componentes tisulares. Los
reactivos son azul de metileno policromtico y eosina.
Coloracin de azul de metileno de Lffler
Esta coloracin permite diferenciar mejor las clulas tubulares, que a menudo son
ligeramente ms grandes que los leucocitos, (< 15 m de dimetro) con citoplasma
granular y ncleo grande, redondeado, generalmente excntrico, con forma de
vescula (relacin ncleo/citoplasma 1:1) planas, cbicas o cilndricas.
Metodologa
Aadir 2 gotas de la siguiente solucin al sedimento:
Solucin etanlica de azul de metileno
KOH al 0,01%
30,0 mL
100,0 mL
36
Coloracin de Sternheimer-Malbin
Cuando en un sedimento se observa 10% de clulas de Sternheimer-Malbin y un
nmero de leucocitos superior a lo normal puede intuirse la presencia de pielonefritis e
inclusive un 100% de estas clulas pueden observarse en pielonefritis activa. Sin
embargo, no es patognomnica de esta condicin, por que se observa tambin en
procesos inflamatorios de la va urinaria descendente. La desaparicin de estas
clulas con la antibioticoterapia se utiliza como criterio de respuesta al tratamiento.
Las clulas de Sternheimer-Malbin (nombre que recuerda a los impulsadores del
mtodo de coloracin y de Schilling en honor a su descubridor), son
polimorfonucleares en cuyo interior se observa movimiento molecular de Brown
(browniano), siempre cursan con densidades urinarias hipotnicas, lo cual favorece la
disminucin de la viscosidad citoplasmtica. A stos grandes leucocitos se les llaman
clulas centelleantes debido a que el movimiento de los grnulos dentro del
citoplasma produce un aspecto centelleante.
La coloracin de Sternheimer-Malbin permite visualizar al microscopio los leucocitos
urinarios con un patrn tintorial diferente:
Leucocitos vitales, con un ligero engrosamiento globuloso, de color azul plido, y
movimiento vibrtil de los grnulos del citoplasma celular.
Leucocitos desvitalizados, pequeos, con un ncleo claro y prpura.
Para la coloracin se requieren las siguientes soluciones:
Solucin I
Violeta de genciana
Etanol al 95%
Oxalato de amonio
Agua destilada
Solucin II
3,0 g
20,0 mL
0,8 g
80,0 mL
Safranina O
Etanol al 95%
Agua destilada
0,25 g
10,0 mL
100,0 mL
37
Coloracin de Gram
Para investigar el diagnstico, pronstico y seguimiento de una infeccin urinaria se
han ideado muchos mtodos. En 1957 Kass. E.M y col. estandarizaron la tcnica
utilizando orina sin centrifugar y coloracin de Gram.
Interpretacin
Ms de una bacteria x c. corresponde a un urocultivo > 105 colonias / mL
Sin embargo, Robins, D.G y col 1975, describieron un mtodo alternativo utilizando
orina centrifugada.
Interpretacin
Bacterias.
Leucocitos > 5 x c AP.
Cilindros leucocitarios.
38
Sedimento
Causa y significado
Cilindros
Eritrocitarios
Leucocitario
Grasos
Anchos
Hialinos
Cristales
Sulfamidas
Medicamentos utilizados.
Medios de
contraste
Cistina,
tirosina,
leucina
39
Clulas
Leucocitos en Indica con firmeza una infeccin renal, pero no es concluyente.
acmulos
Leucocitarios o
cilindros mixtos Definitivamente muestran infeccin de origen renal.
de epitelio y
leucocitos
Clulas
abundantes
Cantidad
importante
de clulas
Ligero
aumento de
clulas
Indica clculo uretral, clculo renal o cistitis aguda o crnica, uretritis, prostatitis.
Bacterias
Trichomonas
Habitualmente contaminacin.
pH
Color
Solubilidad
cido rico
cido
Amarillo-caf
Alcali
Uratos amorfos
cido
Amarillo-ladrillo/ caf
Alcali caliente
Oxalato de calcio
cido/ neutro
Incoloro
HCl diluido
Fosfatos amorfos
Alcalino / neutro
Blanco / incoloro
Fosfato de calcio
Alcalino / neutro
Incoloro
Fosfatos triples
Alcalino
Incoloro
Biurato de amonio
Alcalino
Amarillo- caf
40
Carbonato de calcio
Alcalino
Incoloro
pH
Color
Solubilidad
Cistena
cido
Incoloro
Colesterol
cido
Incoloro
Cloroformo
Leucina
cido/ neutro
Amarillo
Alcali caliente
Tirosina
cido / neutro
Incoloro-amarillo
Alcali o color
Bilirrubina
cido
Amarillo
Sulfonamida
cido / neutro
Verde
Acetona
Medios de contraste
radiolgicos
cido
Incoloro
Na(OH) 10 %
Ampicilina
cido / neutro
Incoloro
En refrigeracin forma
agregados
41
Fue omitido o transpuesto algn nmero o leyenda mientras se copiaba al reporte de Uroanlisis, a la
carta de control de calidad, o a los registros de resultados de laboratorio, de mantenimiento, reparacin
y solucin de problemas?
Fueron registrados los resultados en la muestra de control correspondiente?
Fueron registrados los resultados en la prueba correspondiente ?
ERRORES EN LOS REACTIVOS
(referente al instructivo o procedimientos escritos)
Fue reconstituida y mezclada adecuadamente la muestra control?
Estaban los reactivos, y la muestra control a la temperatura correcta?
Estaban los reactivos, controles o calibradores dentro de la fecha de caducidad cuando se usaron?
ERRORES DE LOS PROCEDIMIENTOS
(Referente al manual de operaciones del instrumento y/o a los
procedimientos escritos).
Fue usada la tira reactiva apropiada?
Existe posibilidad de que la muestra estuviera diluida?
Registros previos
Revisar problemas anteriores y sus soluciones puede ayudar a resolver los
problemas actuales.
Dirigirse a los registros de mantenimiento, reparacin y solucin de problemas, y a
la carta de control de calidad para registrar problemas previos que generen
resultados fuera de lugar o fuera de los lmites de los valores control.
Manual de procedimientos
Debe existir un manual que contenga todos los mtodos practicados en la seccin de
Uroanlisis, el cual debe incluir: las tcnicas de recoleccin, conservacin, transporte
y manejo de las muestras, metodologa (principio y nombre de las pruebas),
preparacin de los reactivos, controles y estndares, clculos, precauciones,
42
Protenas
cido ascrbico.
Bilirrubina
cido sulfosaliclico
Otras pruebas
Ictotest
43
Cuerpos cetnicos.
Azcares reductores
Cristales
Acetest
Benedit
Clinitest
Cromatografa
Solubilidad
Calor
Reactivos (varios)
44
Unidades utilizadas
Las cantidades y unidades son cruciales en los informes de los resultados. Las
mediciones de laboratorio, utilizan principalmente cinco cantidades que no son
derivadas (el tiempo, la longitud, la masa, la cantidad de sustancia y el nmero de
entidades). Todas las dems cantidades utilizadas comnmente en la nomenclatura
del laboratorio, se derivan de las cinco cantidades base.
Las primeras propuestas para la presentacin normalizada de los datos de laboratorio,
segn el Sistema Internacional de Unidades, fueron realizadas en 1967. Este sistema
es definido por los signatarios de la Convencin Diplomtica del Metro. Incluye la
unidad por excelencia referente a la cantidad de materia: el mol, que es recomendado
por la Comisin de Qumica Clnica (Commission of Clinical Chemistry: CCC) (ahora
Divisin), de la Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada (IUPAC: International
Union of Pure and Applied Chemistry), el Comit de Expertos sobre Cantidades y
Unidades de la Federacin Internacional de Qumica Clnica (Committee of Experts on
Quantities and Units of the International Federation of Clinical Chemistry) y de la
Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC: Internacional Federation of
Clinical Chemistry) hoy, Federacin Internacional de Qumica Clnica y Medicina del
Laboratorio (International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine)
con apoyo del Comit (ahora Consejo) Internacional de Estandarizacin en
Hematologa (ICSH: International Committee for Standardization in Hematology) y de
la Asociacin Mundial de Sociedades de Patologa Anatmica y Medicina de
Laboratorios (WASP: Word Association of Societies of Pathology and Laboratory
Medicine).
45
Gnero
Valor numrico.
Unidad.
Aspecto
Transparente
Color
Amarillo
Olor
S.G.
pH
5 6
Densidad
1,001-1,035
Protenas
Negativa o huellas
Glucosa
Negativa
Negativos
46
Sangre
Negativa
Bilirrubina
Negativa
Urobilingeno
Hasta 1 UE/dL
Nitritos
Negativos
Leucocitos (esterasas)
Negativos
Clulas tubulares
0 - 1xc AP.
Leucocitos
0 - 5 xc AP.
Hemates
0 - 2 xc AP.
Cristales
Cilindros hialinos
0 - 1 xc BP.
47
Confidencialidad
En casos muy especiales, especficamente cuando pueda haber inters por parte
de personas ajenas al laboratorio en ciertos resultados, se justificar el uso de
cdigos en lugar del nombre del paciente, su direccin o algn otro medio de
identificacin. Debido a que es probable que esta prctica introduzca errores, debe
reservarse para situaciones muy especiales y entonces requiere de un cuidado
especial.
48
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