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MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV.

2012, 8: 2

TCNICA DE NECROPSIA EN REPTILES


Martnez-Acevedo LS*
MVZ, Dipl. Med. FS., Esp. Anatomopatologa Veterinaria. Correo e:
sofimartz@yahoo.com.mx

Resumen
Se describen los procedimientos que se llevan a cabo, antes durante y posterior a un
examen de necropsia en reptiles, como parte integral del diagnstico veterinario en
este grupo de animales, reconocindolo como herramienta para una aproximacin
sistemtica al comportamiento de las enfermedades de los pacientes, til adems
para la aplicacin de medidas preventivas en coespecficos. Las tcnicas de
necropsia tienen algunas variaciones segn la especie y en este caso se detallan
tres grupos: lagartos y cocodrilos, serpientes y tortugas.
Palabras clave: necropsia, reptiles, lesiones, muestras, patologa.

Introduccin
El examen de necropsia, hace parte integral de un diagnstico clnico y
permite determinar la causa de enfermedad y muerte de un animal. Es un
complemento esencial para la prctica mdica veterinaria y debe estar
acompaado con la toma de muestras para anlisis de histopatologa,
microbiologa, parasitologa, virologa y toxicologa. La prctica de necropsia
en fauna silvestre permite reconocer el comportamiento de una enfermedad y
aplicar medidas preventivas y correctivas en los dems animales, as como
usar tratamientos adecuados; en poblaciones silvestres, permite
tambiidentificar factores que estn alterando la sobrevivencia y el hbitat de
los animales.
Como en otras especies, la necropsia en reptiles debe tener en cuenta las
diferencias anatmicas y biolgicas de las especies, para poder identificar
cambios y lesiones durante un examen post mortem [7]. Tambin es
importante, conocer los cuidados especiales que se deben tener durante su
realizacin, como por ejemplo en el caso de especies venenosas o sospecha
de enfermedades zoonticas [5, 6].
Para que la necropsia sea exitosa debe asegurarse la recoleccin de la
mayor cantidad de informacin clnica del cadver, realizar un anlisis
detallado, sistemtico y organizado de las lesiones macroscpicas y tomar
los muestreos complementarios para obtener un diagnstico acertado y
concluyente de acuerdo a los objetivos de la necropsia y las circunstancias
de la muerte. Los resultados obtenidos de la necropsia deben interpretarse
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en conjunto con la historia clnica, sintomatologa, aspectos nutricionales y


anlisis complementarios.
Las tcnicas de necropsia tienen algunas variaciones segn la especie y en
este caso se detallan tres grupos: lagartos y cocodrilos, serpientes y tortugas.

Procedimientos Previos a la Necropsia


Es importante llevar a cabo el examen de necropsia en un rea aislada,
alejada de animales enfermos u hospitalizados, que sea ventilada, iluminada
y con agua disponible, en la cual se pueda cumplir con las normas mnimas
de bioseguridad durante el proceso.

Manejo del Cadver


En algunos casos se requiere la eutanasia del animal y generalmente se
hace por motivos de bienestar animal. Se debe tener en cuenta el tamao del
animal y la especie para escoger el mtodo de eutanasia. Se recomienda la
sedacin o tranquilizacin antes del procedimiento, con Telazol o Ketamina
[7], requiriendo de 15 20 minutos para cumplir su efecto; posteriormente se
inyecta un barbitrico intravenoso, intracardiaco o intracelmico o anestesia
inhalada (Halotano o Isofluorano). [4, 5, 7] En animales pequeos (menores
de 40g), el mtodo empleado es la decapitacin; y aunque algunos autores
mencionan el congelacin, no se recomienda por ser doloroso, adems de
impedir el estudio histopatolgico posterior. Se debe tener presente, que en
reptiles normalmente el corazn puede seguir latiendo incluso horas despus
de haber aplicado la eutanasia [4, 7], adems, pueden mostrar movimientos
involuntarios de msculos esquelticos y contracciones cardiacas dando la
impresin de estar vivos [5]; por lo que no es fcil determinar cuando los
reptiles estn verdaderamente muertos.
Toda necropsia en especial la de reptiles, debe realizarse tan pronto sea
posible con el fin de evitar cambios autolticos o post-mortem. En reptiles la
descomposicin o autolisis se presenta con mayor rapidez, ya que la mayora
de animales en cautiverio se encuentran en alojamientos con suministros de
calor o acuarios que aceleran este proceso; adems algunas caractersticas
anatmicas como la piel gruesa o el caparazn favorecen la conservacin de
la temperatura. Si el cadver va a ser transportado, debe asegurarse que
est bajo ptimas condiciones de refrigeracin, en cuyo caso el cadver
puede conservarse hasta por 24 horas. [5, 7] Los cadveres nunca se deben
congelar, esto impide un anlisis histopatolgico por los artefactos generados
en los tejidos, como daos en la arquitectura y formacin de cristales de
hielo; adicionalmente, la congelacin destruye gran cantidad de
microorganismos como bacterias u hongos para su cultivo. [4, 5]
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Historia Clnica
La recopilacin de datos es indispensable para la realizacin de la necropsia.
Los datos suministrados en historia clnica son de vital importancia para
orientar el diagnstico macroscpico y la toma de muestras complementarias
[5]. Una historia clnica debe incluir datos como: nutricin, sintomatologa y
curso de la enfermedad, tratamientos suministrados, cambios en la dieta o
alojamiento, presencia de otros animales enfermos o muertos, historia de
traumas o accidentes y datos clinicopatolgicos realizados antes de la
muerte. [5, 7]

Elementos de Proteccin Personal


Un equipo bsico de proteccin personal incluye: overol, delantal, guantes de
ltex, mascarilla facial y botas de caucho. El equipo de proteccin debe ser
usado obligatoriamente con el fin de evitar la exposicin a enfermedades
potencialmente infecciosas o zoonticas. [5, 7]

Elementos de Trabajo
Los elementos necesarios para la realizacin de la necropsia de reptiles
varan segn la especie, el tamao del animal y su anatoma. Los elementos
bsicos son: tijeras curvas y rectas de diferentes tamaos, pinzas con y sin
garra, bistur o cuchillos dependiendo del tamao, tabla para cortar los tejidos
y segueta.
Para la toma de muestras complementarias, tubos con y sin anticoagulante
para muestras de sangre, frascos plsticos de boca ancha con formol
buferado al 10% para muestras de histopatologa, un equipo de diseccin
estril, bolsas estriles, hisopos con y sin medio de transporte para cultivos
microbiolgicos o muestras para virologa, laminas y laminillas para
extendidos, citologas o improntas.
Finalmente, un formato donde se consignen los hallazgos de necropsia, una
cmara fotogrfica y elementos para la identificacin de las muestras como
cinta de enmascarar y marcadores de tinta indeleble.

Examen de Necropsia
Examen Externo
Antes de iniciar el examen externo, se confirma la identificacin del animal y
se pesa. El examen externo permite identificar condiciones nutricionales y de
hidratacin. [5] Los ojos hundidos son indicadores de deshidratacin severa
o malas condiciones nutricionales. La condicin corporal se evala por medio
de la observacin de la masa muscular y prominencias de las estructuras
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esquelticas, especialmente las vrtebras, que en animales sanos no son


manifiestas a simple vista. [5] El grosor de la base de la cola de lagartos y
cocodrilos es un buen indicador del estado nutricional. [7]
En el examen externo se valora la piel, el caparazn en quelonios, cavidad
oral, ojos, odos, narinas y cloaca. Adems, una palpacin cuidadosa del
cadver permite encontrar traumas, masas o lesiones cutneas, tumefaccin
de articulaciones, fracturas u otras anormalidades. [5] En especies de
tortugas marinas, se debe tener apreciaciones especiales como la cantidad y
distribucin de la cobertura de epibiota, ya que este es un indicador de
dermatitis. [5] Si se observan ectoparsitos, estos se colectan e incluyen en
alcohol o formol. [7]

Examen Interno
En la clase REPTILIA, existe una diversidad de caractersticas anatmicas en
cada especie. Para desarrollar el procedimiento de tcnicas de diseccin y
examen interno, se determinan ciertas diferencias en cada una de las
principales especies, como son lagartos y cocodrilos, serpientes y tortugas.

Lagartos y Cocodrilos
Los lagartos y cocodrilos tienen grandes similitudes en su anatoma y el
procedimiento de necropsia en estos dos grupos se realiza de la misma
manera. Se debe tener especial precaucin con las especies de lagartos
venenosos, como los monstruos de Gila (Heloderma suspectum) y los
dragones barbados (Heloderma spp), que poseen glndulas sublinguales de
veneno que producen neurotoxinas. [2, 5, 6]
Para empezar la necropsia, el animal se pone en decubito dorsal y se hace
una incisin con bistur o con tijera por la lnea media ventral, desde la cloaca
cranealmente hacia el espacio intermandibular. [5] La piel se separa hacia
los lados dejando expuestos los msculos y el tejido subcutneo, en este
momento se deben tomar muestras de tejido muscular. En especies de
lagartos como los camaleones, por sus caractersticas anatmicas es mejor
realizar la diseccin en decbito lateral, removiendo la pared celmica y la
caja costal de un lado completo. [5, 7]
Los reptiles no tienen una cavidad torcica y abdominal separada por un
diafragma muscular como en otras especies, poseen una sola cavidad
denominada cavidad celmica. [4] La cavidad celmica de los lagartos, se
expone con el corte de los msculos y el tejido subcutneo, para las especies
de lagartos de mayor tamao y los cocodrilos, es necesario despus de
incidir la piel, realizar cortes de las uniones costocondrales a ambos lados
para retirar la caja costal. [5] Finalmente, se retira junto con el tejido
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subcutneo y muscular dejando expuesta la totalidad de la cavidad celmica.


Los cocodrilos tienen un seudodiafragma que separa la cavidad celmica en
dos, una parte craneal que aloja el corazn, hgado y pulmn y una parte
caudal donde estn las dems vsceras. [6]
En todas las especies de reptiles, una vez estn expuestos los rganos
internos de la cavidad celmica, se realiza un examen que incluya la
apariencia general de los rganos, posicin o mal posicin anatmica,
evidencias de fluidos libres en la cavidad, parsitos, celomitis, quistes,
abscesos, masas obvias o cualquier otra anormalidad. [4, 7] En la cavidad
celmica de los lagartos se encuentra el cuerpo graso, este es un indicador
del estado nutricional del animal, debe ser de tamao visible y cubrir una
buena parte de las vsceras, en animales sanos u obesos, si se presenta
alguna enfermedad o anorexia este se atrofia y no es tan evidente. [5, 6]
Despus de exponer la cavidad celmica, se procede a separar el tracto
orofarngeo, retirando la piel de la mandbula y cortando por las ramas
mandibulares, separando la lengua y examinando la cavidad oral, la glotis y
la faringe. [5] Los cambios en la cavidad oral pueden incluir gingivitis,
estomatitis, abscesos, neoplasias o traumas. En iguanas verdes, la punta de
la lengua tiene un color ms oscuro y no debe confundirse con una lesin. [4]
En cocodrilos la vlvula gular y la regin de la glotis son sitios comunes de
lesiones patolgicas y deben examinarse. [5] Los huesos de la cabeza y
mandbula, se examinan en busca de deformidades o tumefacciones
asociadas a deficiencias nutricionales, o hiperparatiroidismo en animales
juveniles o geritricos. [4] Otros tejidos importantes de la regin cervical son
el timo, la glndula tiroides y la glndula paratiroides, las cuales se
distribuyen caudal a la mandbula y craneal al corazn. [4, 5]
En lagartos, el timo es pareado y se localiza ventral y medial a la cartida
interna y a la vena yugular; en cocodrilos el timo es alargado y se extiende de
la base del corazn a lo largo del cuello, este no involuciona con la madurez
del animal. [4] La glndula tiroides en lagartos y cocodrilos puede ser simple,
bilobulada o pareada dependiendo de la especie y es de color rojo oscura [4,
5]; los lagartos pueden tener uno o dos pares de glndula paratiroides. En
iguanas verdes (Iguana iguana), la parte caudal se localiza en el origen de
las arterias cartidas interna y externa y las glndulas anteriores dejan las
ramas de la mandbula. Los cocodrilos pueden tener uno o dos pares de
glndulas paratiroides cerca de la arteria cartida comn. [5, 7] Una vez
ubicados estos rganos, se toman muestras realizando cortes del
parnquima que permitan su fijacin.
Posteriormente, se examina el sistema cardiovascular. Se corta el saco
pericrdico, que normalmente contiene escaso fluido transparente y se
buscan cambios de coloracin, tamao y forma del corazn o adherencias
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del pericardio. Los lagartos tienen el corazn tricameral y una aorta derecha
e izquierda. Los cocodrilos son los nicos reptiles que tienen el septum
interventricular completo convirtiendo el corazn en tetracameral, dos
aurculas y dos ventrculos con aorta derecha e izquierda. [4, 5, 7] Los
grandes vasos se examinan en busca de aterosclerosis o mineralizacin
distrfica, asociadas a patologas renales, hiperparatiroidismo, deficiencias
nutricionales e hipervitaminosis D3. [4] El corazn se retira, cortndolo desde
la base y se toman muestras para histopatologa.
Para el examen del hgado y el tracto gastrointestinal, se retira el paquete
completo de rganos, cortando con unas tijeras el tejido conectivo que los
adhiere a la carcasa. [5] El hgado se separa de los intestinos para su
examen, es el rgano ms grande y normalmente es color caf oscuro,
fuertemente pigmentado, si su color es caf claro o amarillento, se relaciona
con acumulacin de lpidos y si esta caf oscuro o negruzco se debe a
atrofia. [5] Con un bistur se cortan varias secciones con el fin de determinar
cambios en la consistencia o lesiones que profundicen el parnquima. La
vescula biliar esta ubicada adyacente al hgado. El pncreas se localiza en
la curvatura duodenal, y el bazo es una estructura ovoide, color rojo oscuro,
estrechamente asociado al pncreas y cerca al estmago. [5]
El tracto gastrointestinal de los lagartos y cocodrilos es simple y est
compuesto por estmago, intestino delgado, intestino grueso y finaliza en la
cloaca donde desemboca el colon por el coprodeum, mientras que el
urodeum colecta la orina y materiales reproductivos. [4] Es caracterstico el
pigmento negruzco en la serosa de la cavidad celmica de algunas especies
de lagartos. [5] El intestino delgado de los cocodrilos normalmente es de
paredes gruesas y musculares; su diferenciacin macroscpica con el
intestino grueso suele ser difcil, por lo tanto se deben tomar muestras de
varias secciones. Para el examen del tracto gastrointestinal, se sugiere cortar
con una tijera el mesenterio, facilitando la inspeccin de los rganos,
despus, abrir desde el estmago hasta el intestino grueso, examinando el
contenido gastrointestinal y la apariencia de la mucosa. Si se sospecha de
intoxicaciones, en este momento se toman muestras de contenido gstrico.
Para examinar el tracto respiratorio que se encuentra adherido a la carcasa
se corta con tijera, abriendo la faringe y la trquea, continuando la incisin
hasta el pulmn. La trquea en cocodrilos tiene anillos completos e
incompletos en lagartos. [2, 7] La trquea se bifurca en dos bronquios
extrapulmonares, que son extensos en cocodrilos adultos y deben
examinarse en busca de exudados o lesiones. Igualmente, se inciden los
pulmones en busca de exudados, ndulos, parsitos o cambios de la
arquitectura. [4, 5]
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Las glndulas adrenales y el tracto genitourinario se localizan en la parte


caudodorsal de la cavidad celmica. Los riones estn localizados
extremadamente caudal en la mayora de lagartos y se sitan hasta el
espacio retrocelmico debajo de la pelvis, requiriendo cortar la pelvis para su
examen y remocin; buscando cambios de coloracin, aumento de tamao o
depsitos de uratos que se presentan en animales con gota visceral por falla
renal. [4, 5] Los lagartos machos durante la etapa reproductiva, desarrollan
un segmento sexual en los riones, tomando una apariencia tumefacta, lo
que no debe confundirse con una lesin. [4, 5] Los cocodrilos y algunas
especies de lagartos, no poseen vejiga urinaria y los urteres se vacan
directamente en el urodeum. Sin embargo, se debe abrir y examinar el
contenido en busca de clculos.
El tracto genital esta compuesto por hemipenes y testculos en machos, as
como ovarios y oviductos en hembras. Los lagartos tienen hemipenes
pareados, que se localizan cercanos a la base de la cola y en algunas
especies se calcifican cuando alcanzan la madurez sexual [2], los testculos
bilaterales se localizan en la cavidad celmica craneal a los riones y se
encuentran suspendidos por el mesorquio. Las hembras tienen ovarios y
oviductos pareados y estn localizados craneales a los riones [2], en
lagartos hembras es un hallazgo frecuente la distocia por estasis folicular o
retencin de huevos, por lo cual el tracto reproductivo debe examinarse
cuidadosamente [4].
Las glndulas adrenales son pareadas y alargadas, en lagartos estn
ubicadas dentro del tejido conectivo mesentrico medial a las gnadas en
machos, y craneal a los riones en hembras. [5] Su coloracin normalmente
es amarillenta o caf plido. Las glndulas adrenales se muestrean en
conjunto con las gnadas. [5]
Despus de colectar todos los rganos de la cavidad celmica, se toman
muestras de msculo, hueso y nervios. La medula sea se obtiene de
preferencia tomando un corte completo del fmur. [5]
Para examinar el cerebro en lagartos y cocodrilos, se separa la cabeza del
resto del cuerpo cortando en la unin atlanto-occipital. Despus se retira la
piel que recubre el crneo con el fin de cortar directamente sobre el hueso;
en cocodrilos cuya piel de la cabeza est ntimamente adherida al crneo, la
piel no se separa y se realiza un solo corte involucrando las dos estructuras.
[5] El corte para extraer el cerebro se hace desde el foramen magno hacia la
lnea media dorsal del crneo entre los dos globos oculares, en lagartos y
cocodrilos pequeos se puede realizar con una tijera de cierra y en adultos
con el uso de una segueta [5], de esta manera el cerebro queda expuesto
para retirarlo. Posteriormente los ojos tambin se remueven. Si de acuerdo a
la historia clnica se requiere tomar muestras de medula espinal, esta puede
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ser obtenida realizando un corte de la columna vertebral cervical en animales


grandes y en especies de lagartos pequeos se toma un fragmento completo
de las vrtebras, se fija en formol para despus decalcificarlo y realizar su
estudio histopatolgico.

Serpientes
Como en caso de algunos los lagartos, antes de iniciar el examen
postmortem de una serpiente se deben tener precauciones especiales si se
trata de una especie venenosa ya que las glndulas del veneno, son
glndulas salivales modificadas que producen potentes componentes
enzimticos con capacidad para causar la muerte de una persona. [3, 5] En
estas especies se debe asegurar la cabeza con la boca cerrada, usando una
cinta adhesiva alrededor de la mandbula o insertando la cabeza en un
recipiente cilndrico de calibre grueso. Sin embargo, es preferible retirar la
cabeza del animal y ponerla en formol para desactivar el veneno y proceder a
la necropsia, despus se toman muestras del cerebro u otra muestra de la
cabeza, segn se requiera. La proteccin debe ser extrema y el manejo de
estas especies debe ser muy cuidadoso, por el riesgo de incidir las glndulas
del veneno. [5]
Para realizar el examen interno de una serpiente, esta se ubica en decbito
dorsal. Se incide por la lnea media ventral, desde la cloaca cranealmente
hasta el espacio intermandibular. En serpientes muy grandes, es necesario
incidir la piel por el borde lateral de las escamas ventrales. Una vez realizada
la incisin de la piel, esta se desplaza hacia los lados a lo largo de todo el
cuerpo del animal exponiendo el tejido subcutneo y muscular. En este
momento se toman muestras de tejido muscular. [5]
Para el examen de la cavidad oral se incide por la unin temporo-mandibular,
permitindo examinar la lengua, la glotis, el esfago proximal y la trquea. Se
observa en busca de erosiones, lceras, gingivitis o lesiones en los dientes y
se toman las muestras de cada uno de estos tejidos.
La cavidad celmica se examina despus de incidir por la lnea media
ventral, cortando el tejido subcutneo y muscular, se observan todos los
rganos in situ; las serpientes con buena condicin corporal tienen cuerpos
grasos en la cavidad celmica, que se extienden cranealmente por la regin
media del cuerpo. [5] Como en otras especies, el timo y la glndula tiroides
se encuentran localizados craneales al corazn, el timo en serpientes es un
rgano pareado con un lbulo craneal y otro caudal. La glndula tiroides en
serpientes es una glndula simple y tiene dos pares de glndulas
paratiroides; uno est localizado entre los lbulos posterior y anterior del timo
y el segundo par en la bifurcacin de la arteria cartida. En este momento se
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toman muestras de la tiroides y el timo, antes de continuar con la diseccin.


[5]
Las vsceras de la cavidad celmica se retiran en su totalidad, para realizar
un examen detallado y organizado de todos los rganos. Por medio de
traccin en sentido caudal desde la laringe, la trquea y el esfago se van
separando de la cavidad cortando el tejido conectivo y sosteniendo los
bordes de la trquea y el esfago con unas pinzas con garra. Todas las
vsceras se retiran hasta la cloaca y se ponen sobre la mesa de diseccin.
Se inicia con el corazn, que en serpientes es tricameral, compuesto por dos
aurculas y un ventrculo. Se hace una incisin en el vrtice del corazn y se
contina hacia las aurculas y vasos mayores, para visualizar la superficie del
endocardio y las vlvulas cardiacas. [5, 6]
Despus, se procede a examinar la trquea, los bronquios y el pulmn. La
trquea de las serpientes tienen anillos cartilaginosos incompletos [3, 7], esta
se abre con unas tijeras en direccin caudal hacia los pulmones, el pulmn
de las serpientes tiene una porcin caudal que termina en un gran saco
areo que se puede extender caudalmente por la cavidad celmica. [5, 7] En
muchas especies de serpientes el pulmn izquierdo es ms pequeo que el
derecho o est ausente, pero en las boas el pulmn izquierdo esta muy
desarrollado. [5] Se debe observar la luz traqueal y los pulmones en busca
de secreciones, ndulos o material extrao y se toman las muestras de cada
tejido contemplando diferentes reas del pulmn.
Se contina con el hgado, que es un rgano alargado y de color caf, este
tiene la vescula biliar localizada distalmente y est conectada con el
duodeno por un conducto biliar comn. [5, 7] El hgado se examina
buscando cambios de coloracin, tamao, forma, presencia de masas o
ndulos y se realizan cortes seriados para determinar cambios de
consistencia o coloracin del parnquima. El bazo es un rgano redondeado
y rojizo que se localiza distal al estmago, entre el tejido conectivo
mesentrico, para su muestreo se corta por la mitad con el fin de que el
formol penetre el parnquima. El pncreas es un rgano multilobulado, de
superficie lisa, color canela plido, localizado caudal al bazo y cerca al
duodeno. Algunas especies de serpientes tienen el bazo y el pncreas
fusionado, recibiendo el nombre de esplenopncreas. [4, 5] Para localizar el
bazo y el pncreas, se localiza primero la vescula biliar y buscar alrededor
de ella estos dos rganos.
El tracto gastrointestinal de las serpientes, es una estructura simple
compuesta por el estmago, intestino delgado e intestino grueso. Es difcil
distinguir las diferencias entre el intestino delgado y el grueso, y por esto se
deben tomar varias secciones del intestino para su estudio histopatolgico.
[5] Para examinar la mucosa del tracto gastrointestinal, se corta con una
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tijera el mesenterio y posteriormente se abre desde el estmago hasta el


intestino grueso. Se buscan cambios de coloracin, engrosamiento de las
paredes gastrointestinales o de los pliegues estomacales, as como parsitos
gastrointestinales.
Las serpientes no tienen vejiga urinaria y los riones son multilobulados, de
color caf oscuro localizados cranealmente a la cloaca, y los urteres se
conectan directamente con el urodeum. [4, 6, 7] Se examinan los riones, si
tienen cambio de coloracin o tamao, seccionando con el bistur, se
determinan cambios de consistencia o presencia de uratos. En serpientes
machos, al igual que en lagartos, el rin desarrolla un segmento sexual
durante la etapa reproductiva y no debe confundirse con una lesin. Las
glndulas adrenales de las serpientes son estructuras alargadas, delgadas,
de color caf amarillento, localizadas entre el tejido conectivo que soporta las
gnadas (mesorquio y mesovario) en machos y hembras [5], estas deben
colectarse junto con los riones. En los machos, los testculos son alargados
y se localizan entre el pncreas y el rin, en las hembras, los ovarios se
localizan cerca al pncreas; es importante examinar los oviductos en busca
de gravidez o presencia de huevos. [4]
En este momento solo falta realizar el muestreo de los tejidos que
permanecen en la carcasa, como la piel, msculos, columna vertebral y la
cabeza. Como las serpientes son susceptibles a osteoartritis y osteoartrosis
de la columna vertebral, se palpa la superficie ventral de las vertebras, en
busca de deformidades o irregularidades. Si se detectan anormalidades, se
recomienda tomar muestras de vertebras completas, las cuales se fijan en
formol y posteriormente se decalcifican para su evaluacin histopatolgica.
[5]
La cabeza se remueve por la unin atlantooccipital, en serpientes pequeas
con la cabeza de 2cm de longitud, se toma completa y se incluye en formol y
despus de estar fijada y decalcificada se realizan cortes de diferentes
secciones. En serpientes grandes o en las que se requiere un examen
detallado del sistema nervioso, para la remocin del cerebro, se empieza
cortando la piel y msculos que rodean el crneo, despus se contina con
unas tijeras o con una segueta, cortando desde el foramen magno por la
lnea media dorsal del crneo hasta el nivel de las orbitas oculares, se corta
el fragmento de crneo separado y queda expuesto el cerebro para ser
muestreado. [5]
Para el muestreo de la medula espinal, se pueden separar dos segmentos de
la columna vertebral exponiendo una seccin de la medula o se puede
realizar la extraccin por una laminectoma con una cierra pequea, este
mtodo requiere de mucho cuidado para no daar la porcin de la medula
que se va a extraer. [5]
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Finalmente se toman muestras de los ojos; las serpientes no tienen


parpados, en su lugar poseen unos lentes transparentes sobre cada ojo, que
son una modificacin de la epidermis y proveen proteccin a la superficie
expuesta del globo ocular [3], la retencin de estos lentes durante la ecdisis
se asocia a enfermedades corneales y panoftalmitis. [5, 4] Para la
determinacin de enfermedades oculares, conviene mantener la integridad
de los ojos durante el muestreo, se remueven los globos oculares completos
cortando la piel periorbital y disecando alrededor del globo.

Tortugas
Para el examen de rganos internos de la tortuga, esta se pone en decbito
dorsal. El plastrn se remueve cortando con un cuchillo o bistur la piel por
los bordes del plastrn y las adherencias al caparazn a ambos lados con
una segueta. En tortugas marinas, el borde marginal se corta fcilmente con
un cuchillo. [5] Las adherencias de los msculos pectorales y plvicos al
plastrn se cortan con un cuchillo, dejndolos adheridos al cuerpo. Una vez
retirado el plastrn, la piel del rea gular de la mandbula inferior se incide
medial y por los bordes de las ramas mandibulares, esta incisin se extiende
por la orofaringe para exponer la lengua, la glotis y la trquea proximal. Las
tortugas no tienen dientes y usan su pico crneo para la masticacin. [4] Se
examina la cavidad oral en busca de erosiones, cambios de coloracin,
placas y se toman las muestras correspondientes.
La trquea y el esfago se retiran en conjunto y se incluyen en el formol. La
trquea tiene anillos cartilaginosos completos y se bifurca en bronquios
principales que se continan con los pulmones. [4, 6] Para exponer la
cavidad celmica, se cortan las extremidades anteriores y posteriores,
desarticulndolas y cortando los msculos asociados. Se observan los
rganos in situ, y se procede a retirarlos de la cavidad, empezando por la
glndula tiroides y el timo. El timo en quelonios es pareado, de color blancoamarillento y se ubica adyacente a las arterias cartida y subclavia. La
glndula tiroides se localiza en la base de las aortas derecha e izquierda, y la
paratiroides es difcil de identificar; se localiza adyacente o entre los lbulos
del timo. [5]
Una vez muestreados los rganos linfoides ubicados cerca al corazn, se
procede a incidir el pericardio, separar y retirar el corazn. El corazn de las
tortugas es tricameral, compuesto por dos aurculas y un ventrculo, el vrtice
del ventrculo se encuentra adherido al pericardio por el gubernaculum
cordis. [5] Se hace una incisin del ventrculo y se incluye en formol.
El hgado en quelonios es grande y bilobulado, se adhiere al estomago por
tejido conectivo y tiene una vescula biliar que puede estar colapsada o muy
distendida. [5] El hgado se inspecciona en busca de cambios de coloracin,
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forma o tamao y se secciona con bistur en varios cortes buscando masas,


cambios de la consistencia, o lesiones que profundicen el parnquima. El
tracto gastrointestinal compuesto por estmago, intestino delgado, colon y los
rganos asociados (bazo y pncreas), se retiran en conjunto cortando desde
el tejido conectivo que adhiere el esfago, el estmago y el tracto
gastrointestinal al caparazn, hasta la cloaca. Se sugiere cortar el tejido
mesentrico con tijeras de punta roma, facilitando la inspeccin del tracto
gastrointestinal, abriendo desde el estmago hasta la cloaca, examinando la
mucosa y el contenido gastrointestinal. Finalmente, tomar las muestras de
cada rgano.
El pncreas se localiza cerca al esfnter pilrico y al duodeno, entre el tejido
conectivo mesentrico del tracto gastrointestinal. Como en otros reptiles, el
bazo y el pncreas estn estrechamente asociados. Cerca al colon distal y a
la cloaca y ventral al recto se localiza la vejiga urinaria, esta se retira para
examinarla por separado. [5]
Despus de retirar el hgado y el tracto gastrointestinal, quedan a la vista los
pulmones, las gnadas, los riones y las glndulas adrenales. Los pulmones
estan adheridos a la carcasa, se retiran tomando el borde libre de la trquea
con una pinza y cortando con tijeras el tejido conectivo que los adhiere al
caparazn. Una vez retirados los pulmones, se abren con unas tijeras para
evaluar su contenido, coloracin y realizar el muestreo. Las tortugas son muy
susceptibles a infecciones del tracto respiratorio, por lo tanto el examen del
pulmn debe ser cuidadoso; si se observan ndulos o espuma blanquecina,
tomar muestras para anlisis microbiolgico. [4]
Las gnadas, los riones y las glndulas adrenales se localizan caudales a
los pulmones. Las glndulas adrenales son aplanadas, de color amarillonaranjado y se localizan ventrales a los riones en la lnea media, en algunas
especies las adrenales se encuentran fusionadas. Los riones se localizan
en el espacio retrocelmico contra el plastrn y una membrana delgada los
separa de la cavidad celmica, estos se retiran de la carcasa y se evala su
aspecto general, coloracin, consistencia, presencia de uratos y se cortan en
varias secciones con bistur para su muestreo. [5] Todas las tortugas tienen
vejiga urinaria y los conductos genitourinarios se vacan en ella, a diferencia
de los dems reptiles que desembocan en el urodeum; la vejiga es delgada y
distensible y funciona como depsito de agua, la cual puede ser reabsorbida
as como en el colon y la cloaca. [4] La vejiga urinaria se examina en busca
de clculos renales. Las gnadas, testculos y vasos deferentes en el macho
y los ovarios y oviductos en hembras, se encuentran adheridos por tejidos de
soporte al celoma. Los machos a diferencia de otras especies de reptiles
tienen un slo hemipene erctil, de color oscuro que se localiza en el piso del
proctodeum; ste contiene un surco seminal por el cual se transporta el
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esperma. [4, 6] En hembras reproductivamente activas se pueden encontrar


numerosos folculos ovricos de diferentes tamaos. [5]
Para la extraccin del cerebro, la cabeza se corta por la unin atlantooccipital. En tortugas pequeas, con cabezas de menos de 2cm, la cabeza
se puede incluir en formol para su fijacin y posterior a esto se decalcifica y
secciona en varios cortes para su estudio histopatolgico. Esta tcnica
permite que en la evaluacin histopatolgica se examine adems el odo
medio y los ojos. [5] Los quelonios tienen odo externo funcional y los
abscesos aurales son comunes, por lo tanto deben examinarse con detalle.
[4] En animales grandes, el cerebro se puede extraer, realizando cortes con
segueta o con una cierra elctrica pequea. Para ello se debe cortar a travs
de los huesos dorsales del crneo, por la lnea media dorsal y realizar dos
cortes a cada lado sobre los globos oculares; se retiran estos dos fragmentos
del crneo y justo por la lnea media cubierto por la duramadre se encuentra
el cerebro. Este se toma completo y se incluye en formol.
Las vrtebras de los quelonios se incluyen en el caparazn despus de las
cervicales, desde la primera vertebra torcica caudalmente hasta la vertebra
coccgea. [1] Para la evaluacin de la medula espinal en animales
pequeos, se toman segmentos de las vertebras cervicales y se incluyen
directamente en formol, para su posterior decalcificacin y corte. En grandes
animales, se pueden extraer segmentos de medula espinal por medio de
laminectomia. [5] Finalmente se toman muestras de los ojos.

Toma de Muestras
Es importante tener en cuenta que para llegar a un diagnstico definitivo, se
debe tener un protocolo de muestreo organizado y sistemtico, con el fin de
recolectar todas las muestras necesarias y con las condiciones adecuadas
para los respectivos anlisis complementarios. Los anlisis complementarios
a un examen de necropsia corresponden a histopatologa, citologa,
microbiologa, toxicologa y parasitologa.

Citologa
Las muestras de citologas, son un apoyo durante la necropsia, por su fcil
realizacin y rpidos resultados, que pueden dar una idea de la patologa
presente antes de estar lista la histopatologa. Muchos agentes infecciosos
como Clamydias y hemoparsitos son fcilmente observados en
preparaciones citolgicas. [5]
Se deben tener en cuenta las caractersticas del tejido o fluido a muestrear,
para que la citologa se tome correctamente. La muestra debe quedar bien
distribuida en la lmina y se recomienda realizar por lo menos 3 lminas de
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cada muestra. Las muestras para citologa pueden ser fluidos corporales,
improntas de tejidos o raspados de piel.
Las lesiones con fluidos o material purulento, se colectan por medio de una
aspiracin con jeringa, esta se descarga sobre la lmina, se deja secar y se
procede a realizar coloraciones de rutina; los exudados se pueden tomar con
un hisopo y este se aplica sobre la lmina. Algunos microorganismos como
protozoos y larvas de nemtodos se observan fcilmente en muestras
hmedas y es recomendable aplicar solucin salina y cubrir la lamina con
una laminilla para llevarla al microscopio. [5]
Las improntas de tejidos se toman durante la necropsia, antes de poner el
tejido sobre la lmina debe secarse bien sobre un papel absorbente para
evitar los excesos de humedad; posteriormente si se realiza la impronta
sobre la lmina.
Los raspados de lesiones cutneas, se hacen con una cuchilla de bistur
dejando descargar el material sobre la lmina para su respectiva coloracin
de rutina.
Dependiendo de la enfermedad o el agente del cual se sospeche se usa la
coloracin apropiada. Si se busca un agente bacteriano se realiza coloracin
de gram, para micobacterias coloracin de ziehl neelsen, para hongos azul
de metileno o GMS (del Ingls gomori methamine silver). Para muestras
citolgicas coloracin de Wright-giemsa, y la lmina debe ser fijada con
metanol por 10 segundos antes de la tincin. Adems existen en el mercado
kits comerciales para las coloraciones especiales. [5]

Histopatologa
Los tejidos colectados en la necropsia deben fijarse en formol buferado al
10% por 24 horas. [5, 7] Estos sirven para histopatologa y algunas tcnicas
moleculares.
Para una buena fijacin de los tejidos, las muestras deben tener un grosor
entre 5 8mm y una relacin de 1/9 entre los tejidos y el formol. Si no se
cumple con estos parmetros, se corre el riesgo de una mala fijacin y
descomposicin o autolisis de los tejidos. Los tejidos muy pequeos
colectados durante la necropsia deben ser fijados contenidos en un casette
portatejidos para que no se pierdan a la hora de realizar el corte. Es
recomendable fijar los tejidos seos en un recipiente separado para su
posterior decalcificacin. [5] En casos de enfermedad neurolgica el cerebro
se fija completo para su posterior corte seriado.
Las muestras de tejidos con lesiones, se muestrean de manera que quede
tejido aparentemente normal y parte de la lesin para comparar la transicin
entre las lesiones.
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Toxicologa
Para el anlisis toxicolgico de muestras, estas se toman durante la
necropsia y se mantienen en refrigeracin o congeladas. Su tamao
aproximado de 200g y se depositan en bolsas estriles para su envo al
laboratorio. [5] Dependiendo del txico que se quiere buscar algunas de las
muestras recomendadas para anlisis toxicolgicos son: contenido
estomacal, hgado, rin y msculo esqueltico. [5]

Microbiologa
Las muestras para anlisis microbiolgico deben colectarse con estrictas
medidas de asepsia, con material estril y en bolsas estriles, evitando el
riesgo de contaminacin. Si la muestra es tomada en campo se puede usar
alcohol (etanol) por 5 minutos y un flameador para darle un grado de
esterilidad al instrumental de colecta; una vez flameado se deja enfriar para
evitar que al tomar la muestra el calor mate los microorganismos presentes
en el tejido. [5]
Igualmente se pueden usar hisopos para toma de muestras de fluidos o
secreciones corporales, caractersticas de infecciones bacterianas, para su
posterior anlisis microbiolgico.
Para el envo al laboratorio estas muestras se conservan refrigeradas y
deben enviarse para su procesamiento en un tiempo no mayor a 24 horas.

Parasitologa
El diagnstico de parasitologa incluye ectoparsitos como caros o
garrapatas y endoparsitos como nemtodos, tremtodos y cstodos. Para la
preservacin de ectoparsitos o endoparsitos, se colectan en etanol al 70%.
[5]

Diagnstico Molecular
El diagnstico molecular incluye tcnicas como PCR o hibridacin in situ, y
se emplea para microorganismos bacterianos, virales o micticos. A pesar de
su significado diagnstico, estas tcnicas aun no estn disponibles en
Colombia para el diagnstico de rutina de diversos agentes infecciosos en
reptiles y su utilizacin es limitada. Las muestras para estos anlisis deben
refrigerarse o congelarse entre -20C o -70C, o mantenerse en
contenedores con nitrgeno liquido, con objeto de preservar los patgenos
facilitando su posterior aislamiento. [5]

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Despus de la Necropsia
Al finalizar la necropsia se deben tener en cuenta las siguientes
consideraciones: realizar el almacenamiento de las muestras y revisar que
estn correctamente identificadas, rotuladas y conservadas para los anlisis
complementarios, lavar y desinfectar correctamente el material usado
durante la necropsia, as como la ropa y las instalaciones. El hipoclorito y las
soluciones a base de glutaraldehido, soluciones de clorhexidina o soluciones
yodadas son buenos desinfectantes. [5] Asegurarse que la carcasa del
animal y los tejidos sobrantes sean depositados en bolsas rojas para su
posterior recoleccin y manejo como residuo biolgico.
Finalmente, el informe de necropsia se realiza tan pronto sea posible con el
fin de no olvidar detalles importantes para el diagnstico final, este informe
debe ser detallado y organizado por sistemas, describiendo las lesiones
encontradas en cada rgano, as como los rganos en los que no se
observaron lesiones.

Referencias
1.

2.

3.

4.
5.

6.

7.

Fowler ME and Miller RE. Zoo and wild animal medicine. 5th edition. United
States of America: Saunders; 2003. Chapter 5, Raphael BL, Chelonians
(Turtles, tortoises); p. 48-58.
Fowler ME and Miller RE. Zoo and wild animal medicine. 5th edition. United
States of America: Saunders; 2003. Chapter 8, Schumacher J., Lacertilia
(lizards, skinks, geckos) and Amphisbaenids (worm lizards); p. 73-81.
Fowler ME and Miller RE. Zoo and wild animal medicine. 5th edition. United
States of America: Saunders; 2003. Chapter 9, Mitchell M, Ophidia (snakes); p.
2-91.
Hanley CS and Hernandez-Divers S. Practical Gross Pathology of Reptiles.
Seminars in Avian and Exotic Pet Medicine, 2003 april; Vol. 12 (2): 71-80.
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United States of America: Taylor & Francis Group; 2007. Chapter 4, Scott P.
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United States of America: Taylor & Francis Group; 2007. Chapter 1, Overview of
Reptile Biology, Anatomy, and Histology; p. 1-25.
Mader DR. Reptile medicine and surgery. Philadelphia (United States of
America): W.B. Saunders Company; 1996. Section IV: Special topics and
procedures, Chapter 25, Euthanasia and necropsy; p. 277-281.

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