Denicin

- BPLs
PRINCIPIOS BASICOS QUE SE DESARROLLAN
PARA ASEGURAR QUE LOS ESTUDIOS SE
CONDUCEN CON UNA BUENA PLANEACIN,
CON LA EJECUCIN APROPIADA Y CON
DOCUMENTACIN COMPLETA

Denicin - BPLs
CONJUNTO DE NORMAS Y ACTIVIDADES RELACIONADAS
ENTRE SI, DESTINADAS A GARANTIZAR QUE LOS RESULTADOS
ANALITICOS
PRODUCIDOS
CUMPLEN
CON
LAS
CARACTERISTICAS DE:
ExacEtud
Trazabilidad
Seguridad
Precisin
Documentacin

OBJETIVO DE LAS BPLs

Asegurar la calidad y la seguridad de

los datos.

DATOS CRUDOS
(RAW DATA)
Cualquier registro, o copias que son resultado
de las observaciones iniciales y acEvidades del
laboratorio que son necesarias para la
reconstruccin y evaluacin del reporte del
estudio

DATOS CRUDOS
(RAW DATA)

Los datos crudos incluyen fotograYas,

microms o microchas, medios magnEcos y
datos de instrumentos automaEzados.

PREGUNTA
Si usted obEene una fotocopia de los
datos crudos, la cual usted rma y fecha
como vericacin, Podr ser sta
considerada copia exacta de los datos
crudos?

PREGUNTA
Considerara usted como datos
crudos, una impresin con
informacin obtenida de transcribir a
la computadora los datos de las
hojas de trabajo de laboratorio?

PREGUNTA
Por qu cree que algunas personas
escriben los datos crudos en hojas
sueltas, en lugar de registrarlo
directamente en la hoja de datos o
en bitcora indicada en el
procedimiento?

PREGUNTA
Las BPLSs requieren que todos
los datos crudos sean registrados
en libretas empastadas?

PREGUNTA

Complete la siguiente frase: If a raw data is

transferred to a computer data base, neither
the electronically stored data nor its paper
print out _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ for the
original.

EQUIPO E INSTRUMENTOS

Propsito: Determinar si el equipo Eene el

diseo y capacidad adecuada, se opera y se le
da mantenimiento de manera que se asegure
la validez de los resultados.

EQUIPO E INSTRUMENTOS
Diseo del equipo: el equipo usado en la
generacin de datos y para el control
ambiental de las instalaciones, debe tener un
diseo y capacidad adecuada para funcionar
de acuerdo a los requerimientos, y estar
instalado y ubicado para una adecuada
operacin,
inspeccin,
limpieza
y
mantenimiento.

EQUIPO E INSTRUMENTOS
Mantenimiento y calibracin de equipo.
El
equipo
debe
ser
adecuadamente
inspeccionado, limpiado y mantenido, los
instrumentos empleados en la generacin de
datos deben ser adecuadamente vericados,
calibrados y/o estandarizados.
Para las acEvidades anteriores deben exisEr
procedimientos escritos a un detalle suciente
para su ejecucin.

EQUIPO E INSTRUMENTOS
Los procedimientos tambin deben indicar las
acciones a tomar cuando en caso de falla, y la
persona responsable que debe realizar cada
operacin.
Deben mantenerse registros escritos para la
inspeccin, mantenimiento, vericacin, calibracin
o estandarizacin, los registros deben documentar la
falla encontrada, como y cuando se detect el
problema y la accin tomada.

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Propsito: determinar que la planta asegure la
calidad de los reacEvos al momento de
recibirlos y en su uso subsecuente.

PREGUNTA
La FDA ha establecido guas respecto a
la frecuencia de calibracin de balanzas?
Con base en qu se puede establecer la
frecuencia?

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Deben estar eEquetadas, indicando la
idenEdad,
htulo
o
concentracin,
requerimientos de almacenamiento y fecha de
expiracin.
Soluciones que presenten deterioro o fuera de
la fecha de uso no deben ser uElizadas.

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Todos los reacEvos y qumicos, incluyendo los
solventes y los materiales usados en las pruebas,
deben de cumplir con una calidad apropiada, (por
ejemplo el grado: HPLC)
Los reacEvos deben adquirirse de fabricantes o
distribuidores con buena reputacin y deben ser
acompaados de su cerEcado de anlisis. En
algunos casos se debe de establecer previamente
una lista de proveedores precalicados.

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Preparacin de reacEvos en el laboratorio.
La responsabilidad para sta tarea debe de estar
claramente especicada en la descripcin de puesto de la
persona o puesto encargado de sta tarea.
Deben emplearse procedimientos escritos que estn de
acuerdo con farmacopeas u otros estndares. Se deben
guardar los registros de la preparacin y la
estandarizacin (normalizacin) de las soluciones
volumtricas

REACTIVOS Y SOLUCIONES
La eEqueta de los reacEvos debe especicar
claramente:
El contenido, el fabricante, la fecha de recepcin, y
cuando aplique: la concentracin, factor de
normalidad, fecha de expiracin y condiciones de
almacenamiento. Las eEquetas de los reacEvos
preparados en el laboratorio deben especicar la
fecha de preparacin y nombre de la persona que lo
prepar (iniciales)

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Para soluciones volumtricas preparadas por
dilucin:

Nombre del fabricante original del reacEvo.

Fecha de preparacin.
Fecha de estandarizacin o normalizacin.
Factor de dilucin.
Nombre de la persona que la prepar.

NOM 059 PROY-NOM-059-SSA1-2004

9.8.11 Los reac2vos deben prepararse de acuerdo
con la FEUM y suplementos vigentes. En caso de
que en sta no aparezca la informacin, podr
recurrirse a farmacopeas de otros pases cuyos
procedimientos de anlisis se realicen conforme a
especicaciones de organismos especializados u
otra
bibliograGa
cienHca
reconocida
internacionalmente.

NOM 059 PROY-NOM-059-SSA1-2004

9.8.12 La e2queta de los reac2vos debe
indicar como mnimo: nombre, fecha de
preparacin, nombre de quien lo prepar,
referencia de su registro, concentracin,
factor de valoracin, caducidad, condiciones
de almacenamiento, fecha de revaloracin y
fecha de recepcin (cuando se compren
preparados).

PREGUNTA
D un ejemplo del clculo del factor de
Normalidad.

REACTIVOS Y SOLUCIONES
En la transportacin y Subdivisin de reacEvos:
Los reacEvos no deben de moverse
innecesariamente de una unidad a otra.
Siempre que sea posible stos deben
transportarse en su contenedor original.
Cuando se requiere subdividir el reacEvo, una
limpieza escrupulosa y contendores con
idenEcacin completa deben ser usados.

ReacEvos y soluciones
Inspeccin
Todos los contenedores de reacEvos deben
inspeccionarse para asegurarse que el sello est
intacto, antes de enviarse al cuarto o central de
almacenamiento o laboratorio.
Estas inspecciones deben de ser registradas en la
eEqueta del reacEvo, anotando la fecha y las iniciales
de la persona que realiz la inspeccin

ReacEvos y soluciones
Inspeccin
Agua desElada y agua deionizada.
El agua debe ser considerada como un reacEvo.
Deben de tomarse precauciones para evitar
contaminacin durante su suministro, almacenamiento
o distribucin.

REACTIVOS Y SOLUCIONES
Almacenamiento.
Los stocks de reacEvos deben ser almacenados en un
rea condiciones de almacenamiento apropiadas. El
almacn debe contar con botellas limpias, viales,
cucharas o esptulas, embudos y eEquetas, segn se
requiera para el dispensado de reacEvos de su
contenedor original a uno de pequeo volumen. Se
debe contar con equipo de seguridad especial, para
la transferencia de grandes volmenes de lquidos
corrosivos.

PREGUNTA
Qu informacin debe contener la
eEqueta de un reacEvo?

PREGUNTA
La primera tarea que debe realizar al
llegar a nuevo trabajo, es asignar
fecha de caducidad a los reacEvos y
soluciones, Con base en qu
establecera la fecha de caducidad?

PREGUNTA
Mencione la informacin que debe contener la
eEqueta de idenEcacin de soluciones
preparadas en el laboratorio.

Sustancias de referencia
Las sustancias de referencias ociales,
preparaciones de referencias, y materiales de
referencias secundarios, y materiales no
ociales preparados en el laboratorio como
estndares de trabajo son necesarias para las
pruebas y calibraciones, validacin o vericacin
de una muestra o equipo, instrumentos u otros
aparatos.

Sustancias de referencia
Registro y eEquetado:
IdenEcar con un nmero nico, ya sea que sean recin
recibidos o preparados en el laboratorio. (Estndares de trabajo
o sustancias de referencia secundarias).
Un nuevo nmero de idenEcacin debe ser asignado para cada
nuevo lote.
El nmero de idenEcacin debe estar indicado en cada vial.
El nmero de idenEcacin debe anotarse en el registro
analEco, cada vez que la sustancia de referencia es usada.

Sustancias de referencia
Registro central.
Los detalles referentes a todos los materiales requeridos son
recopilados en un registro central, el cual puede ser una
bitcora, un card le, o una base de datos.
Informacin que debe contener el registro central:

Nmero de idenEcacin de la sustancia de referencia.

Descripcin precisa del material.
Fabricante Distribuidor.
Fecha de recepcin.
Lote o cdigo de idenEcacin.

Sustancias de referencia
Aplicacin o prueba en la se usar la sustancia de
referencia: por ejemplo como estndar para
idenEcacin en IR, como impureza de referencia en
una prueba de CCF, etc.
Localizacin de almacenaje y condiciones de
almacenaje.
Deben de especicarse las funciones de la persona
responsable de las sustancias de referencia, entre la
que est mantener actualizado el registro central.

Sustancias de referencia.
Archivo de informacin.
Adems del registro central, debe mantenerse un
archivo con los cerEcados de anlisis de cada
estndar.
Para estndares de trabajo preparados en el
laboratorio, el archivo debe incluir los resultados de
todas las pruebas y vericaciones usadas para la
generacin del estndar de trabajo, rmado por el
analista responsable y el supervisor.

Sustancias de referencia
Todos los materiales de referencia deben ser
inspeccionados a intervalos regulares para asegurar
que no han sufrido algn Epo de deterioro y que las
condiciones de almacenamiento son las apropiadas
para el material en cuesEn.
Los resultados de estas inspecciones deben ser
registrados, y rmados por el qumico responsable.

PREGUNTA
Usted requiere para su anlisis un
estndar de Pentoxilina, el cual
desafortunadamente
no
esta
disponible por el momento, Qu
hara para cubrir sta necesidad?

PREGUNTA
Calcular la concentracin en mg/mL de la siguiente
solucin de referencia. Pesar aproximadamente con
exacEtud 20.0 mg de Ketoprolato sustancia de
referencia previamente secada a 120C durante 2 h,
transferir la canEdad de sustancia pesada a un
matraz volumtrico de 100 mL, disolver, llevar a
volumen con metanol y mezclar. Transferir una
alcuota de 5 mL de la solucin anterior a un matraz
volumtrico de 50 mL, llevar a volumen con metanol
y mezclar. Peso real del estndar: 20.10 mg. Pureza
en base seca: 99.2 %.

Operacin de las Instalaciones de Prueba

Propsito: Determinar si la planta o
instalaciones han establecido y son seguidos
los PNOs, necesarios para llevar a cabo las
operaciones en la forma establecida, para
asegurar la calidad y la integridad de los datos.

Operacin de las Instalaciones de Prueba

Procedimientos normalizados de operacin
La planta debe contar con PNOs para las
operaciones del laboratorio, que aseguren la
calidad y la integridad de los datos generados.
Todas las desviaciones a los PNOs deben ser
documentadas y autorizadas por la autoridad
correspondiente.

Procedimientos normalizados de operacin

Cada laboratorio debe tener disponibles

manuales y procedimientos de las operaciones
que se realizan en el laboratorio.
Mantener un registro histrico de todos los
procedimientos y todas las revisiones.

Procedimientos de operacin
Las autoridades sanitarias estn menos
interesada en el esElo y el formato del PNO,
pero Si estn interesada en la forma en que se
est siguiendo el procedimiento.

PREGUNTA
Cmo realizara la cancelacin de un
dato incorrecto?, Escriba un ejemplo.

PREGUNTA
Mencione las 5 C s que deben cumplir
los PNOs.

PREGUNTA
En que lugar deben localizarse
preferentemente los PNOs?

PREGUNTA
Donde debe quedar escrito el
procedimiento de mantenimiento de
los HPLCs, que lleva a cabo el
fabricante del equipo?

PREGUNTA
Los terceros autorizados a los
que usted manda a realizar
alguna determinacin, estn
obligados a cumplir con las
Buenas prcEcas de laboratorio?

PREGUNTA
Un inspector de la FDA esta a
punto de tomar una fotograYa de
una prcEca objetable.
Legalmente puede el inspector
tomar la foto?

PREGUNTA
Un laboratorio japons el cual Eene la
prcEca de estampar en los datos crudos
un sello ocial, (el cual es nico para
cada empleado), en lugar de rmarlos, se
est preparando para exportar a los
Estados Unidos,
Debe el laboratorio dejar sta prcEca?

INVESTIGACIN DE RESULTADOS FUERA DE

ESPECIFICACIONES

Denicin: Resultados que no cumplen

con las especicaciones.
La denicin no incluye el No
cumplimiento de los lmites internos
pero la losoYa Eene que ser similar.

RESULTADO CUESTIONABLE O ATPICO

Denicin: Resultados que se encuentra
dentro de especicaciones pero esta
fuera de la tendencia histrica del
producto.

PREGUNTA
Por qu los resultados fuera de tendencia
deben invesEgarse si no estn fuera de
especicaciones?

Resultado Aberrante (Outlier)

Resultado
extremo
el
cual
es
signicaEvamente diferente de las dems
observaciones del mismo anlisis o de los
resultados histricos del producto.

INVESTIGACIN
Todos los resultados fuera de especicaciones
o ahpicos deben ser invesEgados con la
nalidad de conrmar o no el resultado.
En caso de conrmarse el resultado fuera de
especicaciones, se procede a generar una
No conformidad o desviacin

PREGUNTA
InvesEgacin AnalEca: De qu manera
procede en productos con mlEples
componentes en donde uno de ellos presenta
un resultado OOS ?

Control de cambios
NOM 059
15.1 Debe exisEr un sistema de control de cambios
para la evaluacin y documentacin de los cambios
que impactan a la fabricacin y a la calidad del
producto. Los cambios no planeados pueden
considerarse como desviaciones o no conformidades.
15.2 Debe integrarse un comit tcnico por
representantes de las reas involucradas para cada
cambio que evale y apruebe el cambio propuesto.

Control de cambios
NOM 059
15.3 Debe exisEr un procedimiento que incluya
idenEcacin, documentacin, revisin y aprobacin
de los cambios en: insumos, especicaciones,
procedimientos, mtodos de anlisis, procesos de
fabricacin, instalaciones, equipos, sistemas crEcos y
sistemas de cmputo.
15.4 Los cambios deben ser aprobados por el
responsable de la Unidad de Calidad, asegurando su
seguimiento y cierre.

NOM 073: ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS

9.18. Cuando se cambie el mtodo anal2co durante
el estudio de estabilidad, se debe demostrar que los
dos mtodos son equivalentes mediante el proceso
de validacin.

PREGUNTA
Usted va a someter un control de Cambios
para cambiar el ensayo de un mtodo
microbiolgico a un mtodo HPLC, Qu
soporte documental debe anexar para realizar
el cambio?

Consecuencias regulatorias del NO

cumplimiento de las BPL
Rechazo de los estudios someEdos a las autoridades.
Solicitud de la repeEcin del estudio.
Inhabilitacin para completar el estudio.
Fallas para alcanzar el registro del producto y
licencia.
Prdida de clientes y credibilidad de la compaa.
ReEro de la licencia del producto
ReEro de producto del mercado.

Fallas frecuentes

Muestreos no representaEvos.
IdenEcacin incorrecta de muestras.
No seguir los procedimientos.
Lectura incorrecta de datos de los instrumentos.
Registro incorrecto de datos.
Estandarizacin incorrecta de soluciones
Transcripcin erronea de datos.
Introduccin incorrecta de datos en la PC.
Clculos errneos.

 "If experimental work is conducted in compliance

with GLP, with or without the aid of computer, it
should be possible for an inspector, maybe four or
ve years hence, to look at the records of the work
and determine easily why, how and by whom the
work was done, who was in control (the Study
Director), what equipment was used, the results
obtained, any problems that were encountered and
how they were overcome."

EJERCICIO

64

Buenas prcEcas en anlisis volumtrico

Realizar por triplicado la estandarizacin
(Normalizacin) de las soluciones.
Usar material limpio e ntegro.
Calcular previamente el volumen que se va a
consumir, para determinar cul es la
capacidad de la bureta ms adecuada.
(El volumen consumido debe estar entre el 50 y
80 % de la capacidad de la bureta)

Buenas prcEcas en anlisis volumtrico

Realizar una determinacin en blanco para la
correccin del volumen consumido por la muestra.
Titular el blanco antes de las muestras.
Preparar las muestras por duplicado.
En el caso de medio no acuoso, debido a que el
Etulante se dilata o se contrae con la temperatura,
ms signicaEvamente que el agua, es necesario
corregir la concentracin del Etulante.

PREGUNTA
La determinacin de agua por Karl Fischer es
una prueba crEca ya que la estabilidad de
muchos medicamentos, depende de la
canEdad que se encuentre en el producto,
enliste las Buenas PrcEcas de laboratorio que
establecera para obtener resultados
conables.

VALORACIN DE MUESTRAS
PREGUNTA
2.-Determinacin de pureza en Epinefrina materia prima.
Pesar aproximadamente con exacEtud 300 mg de Epinefrina
materia prima, transferir a un matraz erlenmeyer de 250 mL,
disolver en 50 mL de cido acEco, agregar 5 gotas de
indicador cristal violeta, Etular con solucin de HClO4 0.1 N.
Preparar por duplicado y realizar una determinacin en
blanco.
Indicar si cumple o no el lmite de especicacin de 97.0 % a
103.0 % (en base seca). Datos.: Peso de M1: 300.45 mg, Peso
de M2: 299.12 mg, Normalidad del HClO4 = 0.0998 N, % de
Prdida al secado = 1.16 %, Volumen de la muestra 1 = 16.25
mL, Volumen de la muestra 2 = 16.03 mL, Volumen del blanco
= 0.06 mL y PM de la Epinefrina: 187.5.

PREGUNTA

PREGUNTA
Sabiendo que el htulo de la solucin de HCl O.1 N es
de 18.75 mg de Epinefrina por mL, indique como
quedara la frmula para el ejercicio anterior
empleando el htulo y el factor de normalidad

PREGUNTA

BPLs en el anlisis espectrofotomtrico

Escoger una longitud de onda en el espectro
que sea el mximo.
Si existen varias longitudes de onda cercanas a
la respuesta de la longitud de onda de mximo
absorcin seleccionar aquella en donde exista
una meseta.
La respuesta de la muestra y la solucin de
referencia debe encontrarse entre 0.2 y 0.8.

BPLs en el anlisis espectrofotomtrico

Enjuagar la celda varias veces con la solucin
que se va leer.
Establecer un orden de lectura en los
procedimientos.

BPLs en el anlisis espectrofotomtrico

Orden de lectura.

Adecuabilidad del sistema

Es una parte integral de
varios procedimientos
analEcos.
Nos permite conrmar
que el mtodo se esta
desempeando
adecuadamente, es una
herramienta de
diagnsEco.

Adecuabilidad del sistema

Nos permite determinar si el mtodo analEco
se esta desempeando de acuerdo a los
parmetros de validacin y si es aceptable
para su uso.

Adecuabilidad del sistema

Parmetros de adecuabilidad del sistema (CNQFB)

RepeEbilidad (sextuplicado)
Resolucin
Coleo
Nmero de platos tericos
Factor de capacidad
Tiempo de retencin

ADECUABILIDAD DEL SISTEMA

La adecuabilidad del sistema es especca para
cada mtodo
A pesar que la adecuabilidad del sistema puede
realizarse durante el anlisis, generalmente es
realizado Antes de proceder con el anlisis de
las muestras

79

ESTABLECIMIENTO DE LOS PARMETROS DE ADECUABILIDAD

DEL SISTEMA

Los parmetros de adecuabilidad del sistema

iniciales deben revisarse conforme se va
ganando ms experiencia con el mtodo

80

MTODOS PARA IMPUREZAS

La resolucin del par ms crEco debe determinarse
(Picos con la menor resolucin)
Todos los factores que son crEcos para el mtodo
deben ser idenEcados e incluidos en la
adecuabilidad del sistema.
Si no se cumple la adecuabilidad del sistema los
factores crEcos deben ser ajustados.

81

ADECUABILIDAD DEL SISTEMA

No consiste nicamente de Pruebas y

lmites, sino tambin la metodologa para
realizar los ajustes para opEmizar el sistema
cuando el sistema original no cumple con los
parmetros.

82

MTODOS PARA ANALIZAR CANTIDAD BAJAS

DE IMPUREZAS
Preparar una solucin de sensibilidad: Sirve para
demostrar que se Eene una adecuada relacin
Seal/ruido.
Determinar tambin la reproduciblidad de las
rplicas de inyecciones.
83

ADECUABILIDAD DEL SISTEMA A LARGO PLAZO

Cualquier sustancia de referencia que se
requiera para determinar la adecuabilidad del
sistema se debe asegurar contar con suciente
canEdad de ella, por ejemplo una impureza
puricada.
En ocasiones no es fcil contar a largo plazo con
las impurezas.
84

Criterios de aceptacin
Manual del CNQFB.
Para cada inyeccin se recomienda reportar:
K> 2
R > 2
T<2
C. V. < 2.0%
Nmero de platos tericos (N)
Retencin relaEva (Rr)

ESTABLECIMIENTO DE LMITES
Valores recomendados por la gua de la FDA
ValidaEon of Cromatographic methods
Son una referencia para establecer
la adecuabilidad del sistema inicial

86

Resolucin
La resolucin es la grado de separacin de dos sustancias que
eluyen en el mismo sistema cromatogrco.
Ya que la resolucin es el primer criterio para la especicidad
y la robustez del mtodo, sirve como un riguroso parmetro
de adecuabilidad del sistema.
La resolucin debe establecerse entre el par crEco.
Si no hay un par crEco para establecer resolucin, debe
establecerse una ventana de Eempo en la cual el pico de
inters debe eluir.
El criterio mnimo de resolucin debe ser que exista
resolucin a nivel de lnea base entre los picos. Se recomienda
como mnimo 1.5.

Simetra del pico (Coleo o Tailing)

Es especialmente importante reportarlo en
pruebas de impurezas, si el coleo es muy alto
podra enmascarar otras impurezas.
Cuando el coleo se incrementa, la integracin
se vuele menos conable y la precisin puede
verse compromeEda.

SensiEvidad de deteccin
Conrmar que el procedimiento cromatogrco es
capaz de cuanEcar a niveles bajos el compuesto
de inters.
A menos que se especique otra cosa, este
corresponde al 0.05 % de la concentracin del 100 %
del principio acEvo o al 0.1 % de la concentracin de
la muestra en productos terminados.
La relacin seal:ruido del pico al nivel del lmite de
0.05 % o 0.1 % no debe ser menor de 10.

Coeciente de variacin
(CV, RSD, o DER)
Datos de 5 rplicas deben emplearse para
calcular el coeciente de variacin, si el CV
requerido por el mtodo es < 2.0 %.
Datos de 6 rplicas deben emplearse si el CV
solicitado por el mtodo es mayor a 2.0%.

Casos especiales

Cuado la especicacin es muy cerrada.

Ejemplo: 99.0 % - 101.0 % un CV de 2.0 % no sera
adecuado.
Emplear el criterio recomendado por la Farmacopea
britnica (BP), de 1/3 el rango de la especicacin
en este caso..
Rango: 2 X 1/3 = 0.7 % de CV

Confrontacin de estndares (Estndar

Check)
Cuntos soluciones de referencia deben
prepararse en un anlisis espectrofotomtrico
o cromatogrco?

Confrontacin de estndares (Estndar

Check)
Si se emplean dos estndares, calcular la
confrontacin de estndares:

Dependiendo del mtodo el % de confrontacin debe

encontrarse entre: 98.0 102.0 % o 97.0 103.0 %

PREGUNTA
D un ejemplo de la determinacin de la
confrontacin de estndares.

PREGUNTA

Buenas prcEcas de cromatograYa

Vericar que la lnea base se mantenga estable antes de
iniciar a inyectar.
Patrn de inyeccin: Inyectar Blanco de solvente de dilucin
para vericar la ausencia de carry over, o idenEcar
material sucio; Si algn pico llegar a aparecer no debe
interferir con la cuanEcacin.
Confrontacin de estndares: En el caso de que no cumpla
preparar una tercera solucin de referencia y confrontar
contra las otras dos soluciones de referencia para
determinar el par de estndares que coinciden y reportar la
confrontacin.

Buenas prcEcas de cromatograYa

Descartar las inyecciones iniciales (Prime injecEons) de la
corrida necesarias hasta que obtener concordancia en la
respuesta de 3 inyecciones seguidas.
Adecuabilidad del sistema inicial: (visual): Orden de elusin de
los picos, concordancia con el Eempo de retencin reportado
en el mtodo, concordancia con el cromatograma.
Denir si el estndar 1 o 2 ser el que se usar para
monitorear la corrida y cada cuntas inyecciones o Eempo se
intercalar un estndar
Duplicado o sencillo?
Denir si el clculo se realizar con BrackeEng o con el
promedio de todos los estndares.

Buenas prcEcas de cromatograYa

Manejo de casos en donde una o ms
injecciones de estndar no se encuentran
dentro del CV < 2.0 %.
Reinicio del sistema cromatogrco despus
de un problema con la adecuabilidad del
sistema.
Aprobacin/Descarte de una parte de la
corrida.

Buenas prcEcas de cromatograYa

Antes de dejar corriendo el equipo vericar que se

cumpla la adecuabilidad del sistema y que la
cromatograYa de al menos una inyeccin de
muestra sea la adecuada.
Establecer frecuencia de inyeccin de cada una de
las soluciones. (Patrn de inyeccin).
Cuando aplique establecer el nmero de lotes
seguidos que se pueden inyectar.

Buenas prcEcas de cromatograYa

Establecer coeciente de variacin para
impurezas.
Modicaciones aceptables para cumplir la
adecuabilidad del sistema: modicacin de
hasta un 10 % en la composicin de la fase
mvil, +/- 0.5 de pH y +/- 10 % de la fuerza
inica.
Coincidencia de los Eempos de retencin +/-
2.0 %.

Buenas prcEcas de cromatograYa

Secuencia de operaciones de cromatograYa
para detectar oportunamente algn problema
con la adecuabilidad del sistema
Dejar estabilizar la columna, preparar
soluciones de referencia, inyectar soluciones
de referencia, preparar muestras e inyectar
muestras, inyectar soluciones de referencia

Buenas PracEcas de Laboratorio en

HPLC
Los sistemas de cromatograYa de lquidos se
consideran como un conjunto de partes o
mdulos.

Columna

Bomba

Detector

Inyector

Registrador