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Toxicologa.

2015/16

28/2/2016

TOXICOLOGA

TEMA 1. Toxicologa
Origen y evolucin histrica. Txico. Concepto y divisin de la toxicologa.
Aspectos clnicos, ambientales, alimentarios, econmicos y forenses de la
Toxicologa. Concepto toxicidad y tolerancia. Relacin dosis-respuesta.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez


Antonio Juan Garca Fernndez

BIBLIOGRAFA
RECOMENDADA
Repetto, M y Repetto, G. 2009. Toxicologa
Fundamental. 4 edicin. Daz de Santos, Madrid.

Klaassen, C.D.; Watkins III, J.B. 2005.


Fundamentos de Toxicologa de Casarett y
Doull. McGraw-Hill-Interamericana, Madrid.

Camen, A. y Repetto, M. 2006. Toxicologa


Alimentaria. Ed. Diaz de Santos. Madrid.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

TOXICOLOGA
Ciencia que estudia los txicos o venenos

TXICO
Sustancia qumica, biolgica o fenmeno fsico que
puesta en contacto con un organismo es capaz de producir
algn efecto nocivo (orgnico, gentico, molecular,
funcional, celular o bioqumico) sobre l o sobre los
equilibrios dinmicos que sustentan la vida de ese
organismo, como consecuencia de lo cual se menoscaba
su salud pudiendo provocar incluso la muerte.
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Sola dosis facit venenum (S. XVI)


SUSTANCIA

DL50 (mg/kg)

Zearalenona

> 20.000

Etanol

10.000

Cloruro sdico

4.000

Fenobarbital sdico 150


Theophrastus
Phillippus Aureolus
Bombastus von
Hohenheim
(1493-1541)
Paracelso

Picrotoxina

Estricnina

Tetrodotoxina

0.1

2,3,7,8-TCDD

0.001

Toxina botulnica

0.00001

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M.J.
Buenaventura

ORFILA

Padre de la
Toxicologa Moderna
4
(1787-1853)

TOXICOLOGA GENERAL
Sustancias Qumicas. Panorama General
Se conocen ms de 8 millones de productos qumicos
100,000 son de uso comn
(farmacuticos, plaguicidas, etc.)
1,000 nuevos productos entran al mercado
cada ao
Se generan entre 300 y 400 millones de toneladas de
desechos peligrosos por ao
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TOXICOLOGA GENERAL
Sustancias Qumicas. Panorama General
100,000
4,000
2,000
59
1,600
800
50
1,200

Sustancias primarias
Relativamente bien investigadas
toxicolgicamente
Sospecha de ser carcingenos
Confirmacin carcinognica en humanos
Evaluacin teratognica y fetotxica
Teratgenos en animales
Teratgenos en humanos
Frecuentemente asociadas con accidentes
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CLASIFICACIN DE LA TOXICOLOGA
1) Los fundamentos bsicos que la sostienen
Toxicologa General
2) Los efectos y la respuesta orgnica al insulto txico
Toxicologa Sistmica
3) Los compuestos implicados en casos de intoxicacin
Toxicologa Sistemtica
4) Los campos de aplicacin
Toxicologa Especial
5) Recopilacin de datos e informacin toxicolgica
desde el punto de vista regulador
Toxicologa Reguladora
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Toxicologa General
] Los conceptos bsicos de la disciplina
] Las fases de la accin txica
(exposicin, toxicocintica y toxicodinamia)
] Las generalidades sobre los efectos
] Los mtodos de diagnstico, anlisis y tratamiento
] La evaluacin de la toxicidad (Toxicologa experimental)
] El estudio de los txicos y procesos especiales:
carcinognesis, teratognesis y mutagnesis.
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Toxicologa Sistemtica
- Los metales y los compuestos inorgnicos
- Los plaguicidas
- Los solventes orgnicos
- Los compuestos txicos de origen vegetal
- Toxinas de origen mictico
- Zootoxinas
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Toxicologa Sistmica
] Toxicologa del sistema nervioso. NEUROTOXICOLOGA
] Toxicologa del hgado. HEPATOTOXICOLOGA
] Toxicologa de los riones. NEFROTOXICOLOGA
] Toxicologa de la sangre. HEMATOTOXICOLOGA
] Toxicologa de la piel. DERMOTOXICOLOGA
] Toxicologa del sistema inmune. INMUNOTOXICOLOGA
] Toxicologa del corazn. CARDIOTOXICOLOGA
]Toxicologa del comportamiento.
] Toxicologa del sistema reproductor (masculino y femenino)
] etc.
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LA TOXICOLOGA EN EL CONTEXTO DE LA CIENCIA


BOTNICA
QUMICA
BIOLOGA

PATOLOGA
INMUNOLOGA

FISIOLOGA

ZOOLOGA
FARMACOLOGA
GENTICA
MEDICINA LEGAL

TOXICOLOGA
ANALTICA

EXPERIMENTAL

GENERAL

CLNICA
AMBIENTAL
ECOTOXICOLOGA
JUDICIAL
NUTRICIONAL
FARMACUTICA
OCUPACIONAL

TOXICOLOGA REGULADORA
ESTABLECIMIENTO DEL RIESGO
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Clasificacin de las sustancias


txicas
1. Por su naturaleza qumica
2. Por su mecanismo y lugar de accin
3. Por sus propiedades analticas

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Clasificacin de las sustancias txicas


1. Por su naturaleza qumica
a. Inorgnicas

Metales: plomo, mercurio, etc.


Metaloides: arsnico
No metales: fsforo, azufre, etc.
Sales inorgnicas: ClNa, KClO3, ...
cidos y lcalis.

b. Orgnicas
Hidrocarburos
Hidrocarburos halogenados
Alcoholes
Alcoholes halogenados
Aldehidos y cetonas
cidos orgnicos
steres de cidos orgnicos

Fenoles
Aminas y amidas
Compuestos azufrados
Alcaloides
Compuestos nitro
Proteinas
Glucsidos

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Clasificacin de las sustancias txicas


2. Por su mecanismo y lugar de accin
A) Txicos de accin local o por contacto
Sobre piel, mucosas, rbol respiratorio: cidos, lcalis, xido ntrico,
cloroformo, etc.

B) Txicos de accin o de toxicidad sistmica.


A nivel respiratorio:

- Impiden la oxigenacin alveolar: ANTU.


- Impiden el transporte de O2 a los tejidos: nitritos.
- Impiden el consumo tisular de O2: cianuros.

A nivel de S.N.C.: Cloruro sdico, estricnina, insecticidas.


A nivel de aparato digestivo: irritantes, urea, herbicidas.
Txicos hepatotropos: aflatoxinas, rubratoxinas.
Txicos renales: ocratoxinas, etilenglicol.
Provocan cojeras o anomalas seas: fluorosis, seleniosis.
A nivel de piel y mucosas: talio, PCBs
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Clasificacin De Las Sustancias Txicas


3. Por Sus Propiedades Analticas
Txicos gaseosos y voltiles
Txicos extractivos

En medio cido
En medio alcalino
Metales y metaloides
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Toxicidad. Relacin dosis-respuesta.

A)

TOXICIDAD RELATIVA

(A es ms txico que B)

Relacin dosis-respuesta

B)

Tolerancia

TOXICIDAD COMO CUALIDAD DE NOCIVIDAD


TOXICIDAD INMEDIATA/RETARDADA
TOXICIDAD AGUDA/SUBCRNICA/CRNICA
TOXICIDAD REVERSIBLE/IRREVERSIBLE
TOXICIDAD LOCAL/SISTMICA

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TOLERANCIA
Estado de disminucin de la sensibilidad al efecto txico esperado de una
sustancia como resultado de una exposicin previa a ella o a otra de estructura
qumica similar

Mecanismos:
1- Reduccin de la cantidad de agente txico que alcanza el lugar
donde se produce el efecto (tolerancia farmacocintica)
2- Disminucin de la respuesta de un tejido al txico

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RESPUESTA POBLACIONAL A UN TXICO


Muchos

Nmero de
individuos

Individuos
resistentes

Mayora de los
individuos
Efecto medio

Individuos
sensibles

Efecto
Mximo

Efecto
mnimo

pocos
Ligera

Respuesta a la MISMA dosis


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Poblacin Tpica

Identifica poblacin con respuesta normal

Extrema
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La Toxicogenmica
ofrece la posibilidad de
identificar y proteger
subpoblaciones
predispuestas a
padecer intoxicaciones
ind Iden
ivi tific
d
ar
d uo
se ifere s co
ns
n
ibi nte
qu
l
m idad
ica

Menos
sensible

Ms
sensible
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FACTORES QUE MODIFICAN LA TOXICIDAD DE LAS SUSTANCIAS


INTENSIDAD DE LA ACCIN TXICA

CAPACIDAD DE ATRAVESAR
BARRERAS BIOLGICAS

DOSIS/CONC.
BIODISPONIBLE

SENSIBILIDAD DEL
RECEPTOR

MEDIO AMBIENTE

INDIVIDUO

Condiciones climticas y
meteorolgicas

Especie

Dosis

Tamao del individuo

Propiedades fsicas

Actividad lumnica
Temperatura ambiental
Presin atmosfrica

SUSTANCIA TXICA

Edad

Propiedades qumicas

Sexo

Intensidad y frecuencia
de la exposicin

Estado general de salud


Idiosincrasia individual
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ACCIN TXICA
FASE DE
EXPOSICIN

FASE
TOXICOCINTICA

Absorcin

Dosis

RIESGO
(Dosis)

desintegrada, Txico
disuelta o
dispersa

FASE
TOXICODINAMIA

libre

Distribucin

Interaccin

Metabolismo

Txico-

Acumulacin

-organismo

Efecto
nocivo

Eliminacin

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EFECTOS TXICOS
LOCALES: Ej. quemadura por cido clorhdrico
SISTMICOS: Ej. accin del plomo sobre el SNC
REVERSIBLES: Ej. inhibicin de d-ALAD por el plomo
IRREVERSIBLES: Ej. inhibicin de AChE por organofosforados

INMEDIATOS: Ej. convulsiones por estricnina


DIFERIDOS: Ej. neoplasias por carcingenos
MORFOLGICOS: Ej. necrosis heptica por tetracloruro de carbono
FUNCIONALES: Ej. parlisis flcida por toxina botulnica
BIOQUMICOS: Ej. inhibicin de AChE por carbamatos
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GLOSARIO DE TRMINOS
TOXICOLGICOS (Repetto*)

Absorcin
Activacin metablica
Acumulacin
Agudo
Agente alquilante
Antdoto
Antimetabolito
Apoptosis
Biodisponibilidad
Carcingeno
Cocarcingeno
Concentracin
Concentracin Efectiva
Concentracin Letal
Concentracin Letal Mnima
Concentracin Media
Ponderada en el Tiempo

Efecto Crtico
Desintoxicacin
Destoxicacin
Diana biolgica
Dosis
Dosis efectiva
Dosis Letal Media
Dosis Letal Mnima
Dosis Mxima Tolerable
Dosis Txica
Efecto latente
Efecto poblacional
Efecto retardado
Efecto sistmico
Efecto subagudo
Efecto subclnico

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Efecto subcrnico
Epigentico
Exposicin
Hormesis
Intoxicacin
In vitro e in vivo
Margen de exposicin
Mxima concentracin
admisible
Muestra
Mutagnesis
NOEL
Peligro
Poblacin en riesgo

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*Toxicologa Fundamental

GLOSARIO DE TRMINOS
TOXICOLGICOS (Repetto*)

Polimorfismo (gentico)
Poblacin
Receptor Riesgo
Riesgo adicional
Riesgo admisible
Seguridad
Seguridad qumica
Sndrome
Sistmico
Techo, valor lmite umbral
Toxicidad
Toxicidad aguda
Toxicidad crnica
Toxicidad subcrnica

Toxicometra
Toxicovigilancia
Toxificacin
Toxina
Tumor
Valores gua
Veneno
Vida media
Xenobitico
ndices biolgicos de
exposicin (IBE)
Ingesta Diaria Admisible
ndice de Calidad
Ambiental

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*Toxicologa Fundamental

TOXICOLOGA

TEMA 2. Toxicocintica I
Exposicin a txicos: Cronologa de la exposicin: aguda, subcrnica y crnica. Vas
de entrada. Absorcin de sustancias txicas. Distribucin orgnica de txicos.

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Fases de la accin
txica

Dosis

Fase de Exposicin

Desintegracin de la forma presentada


Disolucin del principio activo

Principio activo disponible para absorcin

Fase de Toxicocintica Absorcin

Retencin
Metabolismo
Eliminacin

Distribucin

Principio activo disponible para accin

Disponibilidad
biolgica

Fase de Toxicodinamia Interaccin del txico con el receptor

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Efecto

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Exposicin
Puesta en contacto del txico con el organismo.

Condicionado por: Intensidad y grado de dicha


exposicin
Ambientales
Factores
Del organismo
De la sustancia
AGUDA, SUBCRNICA Y CRNICA
Principio activo disponible para la absorcin
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Clasificacin de las
intoxicaciones
Segn el tipo del exposicin
Aguda: aparicin de un cuadro clnico patolgico
dentro de las primeras 24 hrs. despus del
contacto con un agente.
Crnica: es la consecuente por repetidas
exposiciones (recidivantes). Suele presentar
cuadros clnicos difusos, pocos claros.
Agudas sobre crnicas: exposicin aguda sobre
una base de exposicin crnica al mismo
agente.
Desconocidas

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Cintica toxicolgica (Toxicocintica)


Aquellos procesos que sufre una sustancia con
capacidad txica desde que se pone en contacto
con el organismo hasta que es eliminada (o en su
caso, acumulada)

Absorcin

Distribucin

Metabolizacin

Eliminacin
(Acumulacin)

Principio activo disponible para la accin


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Vas de entrada
Intravascular
Inhalatoria: Alvolos Tracto superior
Mucosa: Sublingual

Vaginal

Nasal

Ocular

Intraperitoneal
Rectal
Intramuscular
Subcutnea
Oral
Drmica

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FORMAS DE EXPOSICIN
Ambientales
Profesionales
Por error en

Accidentales

Medicamentosas

Producto, frasco
Frmula o componente
Dosis (de adulto a nio)

Por interaccin
Por intolerancia: barbitricos,
procana, penicilina, sulfamidas,
fenotiazinas.

Alimentarias

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Ambientales

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Profesionales
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Profesionales

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FORMAS DE EXPOSICIN
Alimento txico

ALIMENTARIAS

Pescado, vegetales.

Envase

Plomo, plstico

Bitica

Intoxicacin : botulismo,
aflatoxinas.
Toxiinfeccin: estafilococos,
Salmonella spp., E. coli.

Abitica

Aditivos

Plaguicidas
Hormonas
Diversos
Autorizados
Fraudulentos
Accidentales

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FORMAS DE EXPOSICIN
Homicidios
Suicidios abortos
Toxicofilias, dependencia
VOLUNTARIAS

Alcohol,
Cannabis, opio,
anfetaminas,
LSD, solventes.

Doping
Afrodisiacos. Yohimbina, alucingenos, euforizantes
Envenenamientos de animales
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EXPOSICIN
Exposicin = Concentracin x cantidad de contacto

E = C x CR x EFD
PC
n
n
n

n
n

x 1
AT

E = Exposicin (mg/kg peso corporal/da)


C = concentracin del compuesto qumico (mg/L)
CR = cantidad de contacto (o de materia contaminada (aire, agua,
alimento) por da
FED = Frecuencia de Exposicin y Duracin, (cuanto tiempo y cada
cuanto tiempo (DE = das/aos o FE = aos)
PC = peso corporal (kg)
AT = tiempo medio (das)
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DETERMINACIN DEL GRADO DE EXPOSICIN


EJEMPLO: Determinar la exposicin oral a tricloroetano en agua de consumo
Premisas:
-CR x EFD= 2 L/d de agua
-C = 1 ug/L Tricloroetano
-Absorcin completa
-PC= peso corporal medio de un adulto () 70 kg
-AT = 1 da

E = C x CR x EFD
PC

x 1
AT

Exposicin
1 ug/L x 2 L/da/adulto ()
= 2 ug/da/70 kg
= 0.0286 ug/kg
de peso/da
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Absorcin Paso de la sustancia desde el exterior


hacia los fluidos biolgicos (sangre, linfa, LCR)
Exterior
Membrana: PIEL
MUCOSA
Fluido intersticial

Respiratoria
Digestiva
Ocular

Membrana CAPILAR
PLASMA
Membrana CAPILAR
Fluido intersticial
Membrana CELULAR
Fluido intracelular

Procesos de trnsito

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Formas de paso a travs


de membranas biolgicas
Forma

Mecanismo

Filtracin

Gradiente de
Presin concentracin

Paso por poros

Dependiente

Dilucin

--

Dependiente

Portador

--

Dependiente

Portador + ATP

--

Independiente

Difusin
Transporte
T. Facilitado
T. Activo

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Paso a travs de membranas


biolgicas
pH
pH alto

..
.
..
..
. CIDOS
..
..
.
..
..
.
..
..
.
BASES ..
..
.
..
..
.
..
..
.
..
LUZ
..
.
GASTROINTESTINAL

bajo

pKa: pH de una solucin en la que hay


igual cantidad de sustancia ionizada
que sin ionizar

Sustancia
LIPOSOLUBLE

Sustancia
HIDROSOLUBLE

NO Ionizada
Sustancia
LIPOSOLUBLE

Ionizada

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Sustancia
HIDROSOLUBLE
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Condiciones para el paso de sustancias


1- Pequeo radio atmico o molecular
2- Coeficiente de particin lpido/agua de la forma no
ionizada

Aceite de
oliva

Cp = [D.O.] / [H2O]

Liposolubles
Apolares

Heptano
n-Octanol
Hidrosoluble
s
Polares

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Ionizadas

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Absorcin por las vas respiratorias


Gase
s

Lquidos
voltiles

Sol. y Lq. finamente


dispersos

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Inhalacin de partculas
Tamao

laringe

partculas

Nasofarngea

> 5 m

traquea

Bronquio
primario
Bronquio
secundario

1-5

m Traqueobronquial

Bronquiolo
alveolo

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< 1 m alveolos
Absorcin: capilares
Macrfagos (pinocitosis)
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Retenidos

Absorcin digestiva

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Absorcin gastrointestinal
pH
bajo

Ploro
Estmago
pH 1-3.5

BASES

Duodeno
pH 5-6

Yeyuno

Intestino
Grueso
pH 7-8

pH
..
.
alto
..
.. CIDOS
.
..
..
.
..
..
.
..
..
.
..
..
.
..
..
LUZ
.

GASTROINTESTINAL
Ileon
pH 8

NO Ionizada
Ionizada

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Factores que determinan la


absorcin digestiva
La naturaleza del contenido digestivo
El pH del estmago
El estado de llenado del aparato digestivo
La motilidad intestinal
Las caractersticas fsico-qumicas de la
sustancia
etc.

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Absorcin a travs de la piel


PIEL INTACTA:
- Liposolubles
- Hidrosolubles en vehculo
oleoso

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PIEL DAADA:
- Todas

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Absorcin cutnea
Txicos que pueden absorberse por piel
y causar intoxicacin aguda:
Organofosforados
Anilinas
Derivados halogenados de los
hidrocarburos.
Derivados nitrados del benceno
Sales de talio
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Cintica toxicolgica (Toxicocintica)


Aquellos procesos que sufre una sustancia con
capacidad txica desde que se pone en contacto
con el organismo hasta que es eliminada (o en su
caso, acumulada)

Absorcin

Distribucin

Principio activo disponible para la accin


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Distribucin

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Formas de distribucin
- Disueltos en agua plasmtica
- Unidos a protenas que se unen a iones y molculas pequeas
- Molculas apolares o liposolubles se unen a lipoprotenas y
- Plomo se transporta fijado al estroma de los hemates
- Las protenas plasmticas y las tisulares fijan la mayora de Xb por
absorcin mediante enlaces estables pero reversibles, de carcter inico,
enlaces de hidrgeno, ion/dipolo, fuerzas de Van der Waals.
- Otras protenas especficas: ceruloplasmina (Cu), transferrina (Fe),
metalotionena (Cd, Zn, Pt, etc), niquelplasmina (macroglobulina).
- Lpidos intra y extracelulares (TG, PL, Esteroides) retienen o transportan
xenobiticos por disolucin, conforme a su coeficiente de reparto, e
intervencin de enlaces no inicos y fuerzas de Van der Waals.

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Clculo del reparto de un xenobitico


entre fluidos y tejidos
CDT* = [tejido] / [sangre]

Depende de:

- lipo/hidrosolubilidad
- peso molecular
- estado de agregacin

* Coeficiente de distribucin tisular

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Acumulacin selectiva de
los txicos
Organoclorados y
solventes polares

Tejido
nervioso y adiposo

Plomo y flor

Huesos

Arsnico

Uas y pelo

Mercurio

Rin
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EJEMPLOS DE FIJACIN EN SITIOS


DE ELECCIN
Melanina de ojo Compuestos policclicos
aromticos
Huesos y dientes Algunos metales y aniones
orgnicos: ej. Plomo,
fluoruros, estroncio y
uranio.
Tetraciclina
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58

EJEMPLOS DE FIJACIN EN SITIOS


DE ELECCIN
Barrera hematoenceflica
Organofosforados y
organoclorados

Cloroformo
Mercurio

Monoxido de carbono
Tetraetilo de plomo
Organomercuriales

Arsnico
Tetracloruro
de carbono

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EJEMPLOS DE FIJACIN EN SITIOS


DE ELECCIN
Placenta

Grasas

DDT
Tricloroetileno
Plomo
Cadmio

Insecticidas
organoclorados
Bifenilos policlorados
(BPC)

Alcohol
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(Lic. Veterinaria)
TOXICOLOGA

TEMA 3. Toxicocintica II.


Caractersticas generales y fases de la biotransformacin.
Biotoxicacin. Reacciones de biotransformacin. Eliminacin de los
txicos. Modelos cinticos.

Antonio Juan Garca Fernndez


Dr. Antonio J. Garca Fernndez

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Cintica toxicolgica (Toxicocintica)


Aquellos procesos que sufre una sustancia con
capacidad txica desde que se pone en contacto con
el organismo hasta que es eliminada (o en su caso,
acumulada)

Absorcin

Distribucin

Metabolizacin

Principio activo disponible para la accin


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Qu persigue la metabolizacin?
El organismo la utiliza con fines energticos o plsticos
Si la molcula no es til intenta eliminarla
Si la molcula es nociva intenta inactivarla y eliminarla
Para eliminarla (por va renal) la molcula ha de ser
hidrosoluble

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Toxicologa. 2015/16

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Metabolismo o
biotransformacin de
sustancias txicas
Toda la serie de modificaciones que una sustancia
sufre desde que ingresa en el organismo y que
tienden a disminuir su toxicidad y facilitar su
eliminacin. DESTOXICACIN.
BIOACTIVACIN
DESTOXICACIN

BIOTOXICACIN
SNTESIS LETAL

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

64

Ejemplos de biotoxicacin
Sust. original Metabolito
Aflatoxina B1
heptico
Amigdalina
celular
Tetracl. de C.
heptica
Cicasina

Efecto
Hgado

Cncer

Mandelonitrilo

Flora intest.

Hipoxia

Triclorometano

Hgado

Necrosis

Metilazoximetanol

Etanol
generales
Fluoracetato
generales
Metanol

Lugar

Aflatox. 23-xido

Flora intest.

Tumor heptico

Acetaldehdo

Varios rganos

Efectos

Fluorocitrato

Varios rganos

Efectos

Formaldehdo

Hgado, retina

Tox. ocular y general

Paratin
Paraoxn
Hgado
Parlisis
neuromuscular
Alcal. Pirrolizid. Deriv. Pirrlicos
Hgado
Necrosis
heptica
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

CH3-CH2O

CH3-CH2O

CH3-CH2O
O
PARATIN

NO
2

O
P

CH3-CH2O
O
PARAOXN

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

65

NO
2

66

22

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Toxicidad de los organofosforados (DL50


(mg/kg), oral en rata)

Forma Tiono

Forma Oxo

Paratin
3.5

5.0

Paraoxn

Pyrazotin
4.0

36.0

Pyrazoxn

Fenitrotin
120

1250

Sumioxn

Sulfotepp
2.0

5.0

Tepp

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Akton

146

67

Clorfenvinfs

10-40

Qu reacciones utiliza el organismo


para la metabolizacin?
REACCIONES DE FASE I (DE DEGRADACIN)
REACCIONES DE HIDRLISIS
REACCIONES DE OXIDACIN

MICROSOMALES
NO MICROSOMALES

REACCIONES DE REDUCCIN

MICROSOMALES
NO MICROSOMALES

REACCIONES DE FASE II (DE CONJUGACIN)


CONJUGACIN CON CIDO GLUCURNICO
CONJUGACIN CON AMINOCIDOS
CONJUGACIN CON CIDO SULFRICO
CONJUGACIN CON CIDO ACTICO
METILACIN
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

68

REACCIONES DE
HIDRLISIS
R C C O R

H2 O

R C C OH + HO R

Esterasa

Hidrlisis de steres
Hidrlisis de amidas
R C C N R
O

H2 O

R C C OH + H2N R

Amidasa

Otras: glucosidasas
y glucoronidasas.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

69

23

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

OXIDACIN
Hepatocito (R.E.)
SUSTRATOS:
Alcoholes
Aldehdos
cidos orgnicos
Comp. Cadenas hidrocarbonadas ramificadas
Aminas orgnicas
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

70

OXIDACIONES MICROSOMALES
Oxidacin aliftica de cadenas laterales
Hidroxilacin aromtica
Epoxidacin
Desaminacin oxidativa
N, O, S - dealquilacin
Dealquilacin de metaloalcanos
N - oxidacin
N - hidroxilacin
Sulfoxidacin
Desulfuracin
Deshalogenacin oxidativa
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

71

OXIDACIONES NO MICROSOMALES

Mono y diamino oxidacin


Deshidrogenacin de alcoholes
Deshidrogenacin de aldehidos

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

72

24

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

REDUCCIONES MICROSOMALES

Nitrorreduccin
Azorreduccin
Deshalogenacin reductora

REDUCCIONES NO MICROSOMALES

Reduccin de aldehidos
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

73

REACCIONES DE CONJUGACIN
Introduccin en la molcula de un grupo cido
fuerte para aumentar su hidrosolubilidad y su
eliminacin renal.
Excepcin: acetilacin y metilacin

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

74

REACCIONES DE CONJUGACIN
Con cido glucurnico
Con aminocidos
Con cido sulfrico
Con cido actico
Metilacin

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

75

25

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Cintica toxicolgica (Toxicocintica)


Aquellos procesos que sufre una sustancia con
capacidad txica desde que se pone en contacto con
el organismo hasta que es eliminada (o en su caso,
acumulada)

Absorcin

Distribucin

Metabolizacin

Eliminacin
(Acumulacin)

Principio activo disponible para la accin


Dr. Antonio J. Garca Fernndez

76

Eliminacin de las sustancias


txicas
- Filtracin glomerular
pasiva
- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular activa

Eliminacin renal
Eliminacin biliar
Eliminacin pulmonar
Eliminacin por leche

Eliminacin por las heces


Eliminacin por sudor, saliva, lgrimas y pelo
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

77

Rin: constitucin y estructura

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

78

26

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Eliminacin renal

- Filtracin glomerular pasiva


- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular activa
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

79

Variaciones cinticas segn pH


urinario
Eliminacin Velocidad
urinaria de metabolizacin

pH orina

Para compuestos cidos

Para compuestos bsicos

ALTO
BAJO
ALTO
BAJO

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

80

Eliminacin de las sustancias


txicas
- Filtracin glomerular
pasiva
- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular activa

Eliminacin renal
Eliminacin biliar
Eliminacin pulmonar
Eliminacin por leche

Eliminacin por las heces

TODAS !!!
Contra gradiente
Sulfo o Glucurono-Conj.

Eliminacin por sudor, saliva, lgrimas y pelo


Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

81

27

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Eliminacin de las sustancias


txicas
- Filtracin glomerular
pasiva
- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular activa

Eliminacin renal
Eliminacin biliar

Gaseosas a T corporal

Eliminacin pulmonar

Equilibrio Lquido-Gas

Eliminacin por leche

Lquidos voltiles

Eliminacin por las heces

DIFUSIN SIMPLE !!!

Eliminacin por sudor, saliva, lgrimas y pelo


Dr. Antonio J. Garca Fernndez

82

Eliminacin de las sustancias


txicas
- Filtracin glomerular
pasiva
- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular activa

Eliminacin renal
Eliminacin biliar

Compuestos bsicos

Eliminacin pulmonar

Compuestos liposolubles

Eliminacin por leche

Semejantes al calcio

Eliminacin por las heces

DIFUSIN SIMPLE !!!

Eliminacin por sudor, saliva, lgrimas y pelo


Dr. Antonio J. Garca Fernndez

83

Eliminacin de las sustancias


txicas
- Filtracin glomerular
pasiva
- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular
activa
No absorbidos

Eliminacin renal
Eliminacin biliar
Eliminacin pulmonar

Eliminados por bilis

Eliminacin por leche

Eliminados por saliva y


secreciones

Eliminacin por las heces

Eliminados por va
respiratoria
Eliminacin por sudor, saliva, lgrimas y pelo
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

84

28

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Eliminacin de las sustancias


txicas
- Filtracin glomerular
pasiva
- Difusin tubular pasiva
- Secrecin tubular activa

Eliminacin renal
Eliminacin biliar
Eliminacin pulmonar
Eliminacin por leche

Eliminacin por las heces


Eliminacin por sudor, saliva, lgrimas y pelo
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

85

MODELOS TOXICOCINTICOS
Modelo monocompartimental:
Un solo compartimiento
No afinidad por tejido
Distribucin instantnea por todo
Modelo multicompartimentales:
Distribucin no homognea y lenta
Concentracin en tejidos
Un compartimiento central y uno o ms
compartimentos perifricos.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

86

MODELOS TOXICOCINTICOS
Compartimentos (criterios):
- El riego sanguneo
- Las caractersticas fsico-qumicas de los
tejidos
Plasma y hemates
rganos bien irrigados
Tejidos poco irrigados
Tejidos con irrigacin mnima
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

87

29

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

MODELOS TOXICOCINTICOS
En la prctica:
Sangre
Vsceras muy irrigados
Tejido adiposo
Hueso, pelos y uas

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

88

MODELOS TOXICOCINTICOS
BICOMPARTIMENTAL
CENTRAL

PERIFRICO

Digestivo

Adiposo

Pulmonar

Muscular

Renal

Cutneo

Encfalo
Corazn
Glndulas secrecin interna
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

89

Parmetros necesarios en el estudio


toxicocintico
Parmetros fisiolgicos: peso y volumen corporal,
volumen del compartimiento, volumen y flujo sanguneo,
ritmo respiratorio.
Parmetros fsico-qumicos: coeficiente de particin
del xenobitico en tejido/sangre y aire/sangre,
constantes de absorcin, distribucin y eliminacin y
constantes de biotransformacin

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

90

30

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

TOXICOLOGA (Veterinaria)

TEMA 4. Toxicodinamia.
Definicin. Interaccin txico-biomolcula. Mecanismos de
accin txica.

Dr. Antonio Juan Garca Fernndez


Dr. Antonio J. Garca Fernndez

91

INTERACCIN TXICO-MOLCULA BIOLGICA


Absorcin

Exposicin

Reaccin con
compuestos de
bajo peso molecular

Formacin de
metabolitos
no reactivos

Distribucin

Reaccin con
compuestos de
alto peso
molecular

Distribucin

Formacin de
metabolitos
reactivos

Interferencia
con receptores
Eliminacin

Efecto

Efecto
gentico

Efecto
txico
general
Efecto
carcingeno

funcional
Dr. Antonio
J. Garca Fernndez

Efecto
inmungeno

Efecto
teratgeno

92

Importancia del estudio


del mecanismo de accin
1.

Proponer un tratamiento adecuado en


casos de intoxicacin.

2.

Estudiar el desarrollo y uso de un


antdoto.

3.

Aplicar pruebas diagnsticas.

4.

Comprender las alteraciones


producidas a nivel bioqumico.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

93

31

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

TOXICODINAMIA
Estudia la interaccin entre las molculas del txico
y las molculas efectoras (receptores) del organismo
gracias a la cual se produce la accin txica

Mecanismos de accin
Inespecficos
Accin sobre estructura celular
- Destruccin total de la clula
- Alteracin de membrana celular
- Alteracin de organelas

Especficos
Accin sobre la funcin celular
- Modificaciones en permeabilidad
- Modificaciones enzimticas: induccin,
activacin, inhibicin.

- Modificaciones reproduccin celular:


genotoxicidad, mutagnesis, carcinog.,
teratognesis
Dr. Antonio J. Garca
Fernndez
94

Mecanismos de accin
Interferencia con sistemas enzimticos
Bloqueo de transporte de oxgeno por Hb
Interferencia con funciones generales de la clula
Interferencia con sistema ADN-ARN
Reacciones de hipersensibilizacin
Irritacin qumica directa de tejidos
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
Toxicidad tisular

95

Mecanismos de accin I
Interferencia con sistemas enzimticos

Inhibicin irreversible: Ej. AChE-OP


Inhibicin reversible: Antimetabolitos
Desacoplamiento de reacciones bioqumicas
Secuestro de metales esenciales
Bloqueo del suministro de oxgeno
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

96

32

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

INTERFERENCIA CON SISTEMAS ENZIMTICOS


INHIBICIN IRREVERSIBLE. OPs-AChE
INHIBICIN REVERSIBLE.
Antimetabolitos: qumicamente parecidos a sustratos de enzimas y compiten
con ellos por la unin (Ej. fluoroacetato compite con acetato en el C. krebs).

DESACOPLAMIENTO DE REACCIONES BIOQUMICAS.


Desacopladores (interfieren sntesis de ATP)
combustin

generacin de E

combustibles y oxgeno.

(Ej. cloro, nitrofenoles, herbicidas bipiridlicos, etc)

SECUESTRO METALES ESENCIALES.


Secuestro de metales o minerales que son cofactores de enzimas. Ej. BAL,
ditiocarbamatos, EDTA.

BLOQUEO SUMINISTRO OXGENO.


Antonio J. Garca Fernndez
Unin al Fe en la cadena deDr.citocromos
funcin reductora

asfixia97BQ

BLOQUEO DEL TRANSPORTE DE


OXGENO
Carboxihemoglobina

CO-Hb

Metahemoglobina

Nitratos, cloratos, aminas aromticas, etc.

Sulfohemoglobina

Compuestos azufrados

Procesos hemolticos

Cobre, tensioactivos, etc.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

98

INTERFERENCIAS EN FUNCIONES
GENERALES DE LA CLULA
Accin anestsica. Solventes orgnicos apolares (ter,
ciclopropano, halotano, etc.)
- Actividad espontnea celular
- Transporte de oxgeno
- Utilizacin de nutrientes
Interferencia en la neurotransmisin. Estricnina,
nicotina, toxina botulnica, tetrodotoxina, saxitoxina,
atropina, etc.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

99

33

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

INTERFERENCIAS CON ADN-ARN


(SNTESIS PROTENAS)
Duplicacin del ADN
Transcripcin del ADN al ARN-m
Traduccin de informacin del ARN-m
Sntesis de proteinas y cidos nuclicos
Aspectos importantes:
Accin citosttica (inhibicin divisin celular. Ej. epxidos)
Accin inmunodepresora (Depresin reacciones de defensa)
Accin mutgena (Alteracin en propiedades genticas. Ej.
alquilantes)
Accin carcingena (Divisin activa no armnica. Ej. cadmio,
hidrocarburos
policclicos,
aminas aromticas, etc.) 100
Dr. Antonio
J. Garca Fernndez

REACCIONES DE
HIPERSENSIBILIZACIN
Incremento de la susceptibilidad del ente biolgico a un txico.
No son caractersticas de una sustancia determinada
Formacin de anticuerpos especficos contra el txico que
funciona como antgeno.
Los rganos principalmente afectados: piel y vas respiratorias.
Algunas de las reacciones necesitan la accin directa de la luz
(reacciones fotoalrgicas, de fotosensibilizacin y fototxicas)
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

101

IRRITACIN QUMICA DIRECTA


Es la respuesta al efecto provocado tras la puesta en
contacto por primera vez de una sustancia irritativa o
custica con la piel o mucosas.
Ejemplos: cido ntrico, sulfrico, clorhdrico, etc.

TOXICIDAD TISULAR
Reaccin al txico que se manifiesta en el tejido con
formacin de grandes vacuolas, acumulacin de grasa y
necrosis. En hgado y rin.
Ej: Cloroformo, tetracloruro
deFernndez
carbono, etc
Dr. Antonio J. Garca

Antonio Juan Garca Fernndez

102

34

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

MODIFICACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA


- Se manifiestan con modificaciones metablicas y/o del estado de salud
- Especialmente importantes en el catabolismo de frmacos
- Incremento de potencialidad de carcingenos.

ACTIVIDADES ENZIMTICAS REGULABLES:


- Activacin:

velocidad de reaccin

- Induccin:

nmero de molculas de enzima

- Disminucin: inhibicin, destruccin o cambios desfavorables en el medio

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

103

A. Disminucin de actividad por:


1. Destruccin (pH, temperatura, reaccin, etc.)
2. Inhibicin, por:
- Estereoismeros
- Elementos tiolprivos
- Compuestos metalprivos

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

104

B. Aumento de actividad
1. Actividad de protoenzimas.
- Hidrlisis (proteasas, fosfatasas, fosfolipasas)
- Fosforilacin (fosforilasas, quinasas)
2. Activacin alostrica.
- Cambio conformacional por:
Iones metlicos
Grupos tioles
Radiaciones
- De protenas reguladoras.
(Ca-calmodulina)
- Por mediadores.
Ca++, AMP-c, GMP-c, Prot-G sobre:
quinasas, fosfolipasas, etc.
3. Induccin enzimtica
4. Optimizacin del medio
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

105

35

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Ejemplos de productos qumicos cuyo


mecanismo es la inhibicin enzimtica
y tipo de dao que producen:
PRODUCTO
QUMICO

ENZIMA
INHIBIDA

FUNCIN
ALTERADA

CNH

Citocromo oxidasa

Respiracin celular

Organofosforados
Carbamatos

Acetilcolinesterasa

Transmisin sinptica
colinrgica

Plomo

Hemosintetasa
ALA-deshidratasa

Arsnico

Piruvato
deshidrogenasa
Dr.
Antonio J. Garca Fernndez

Sntesis hemtica

Catabolismo oxidativo
106

Inhibicin enzimtica. Utilidad prctica


de su conocimiento.
Para el diagnstico:
Cuando las alteraciones enzimticas
son muy bien conocidas; pueden ser
utilizadas como marcador biolgico
en la fase subclnica.
Ej. Intoxicacin por plomo
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

107

Inhibicin enzimtica. Utilidad prctica


de su conocimiento.
Para el tratamiento:
Cuando la inhibicin enzimtica es
altamente especfica y gran parte de
los efectos txicos se derivan de ese
tipo de lesin molecular, es posible
tratar y revertir esas alteraciones,
desapareciendo los efectos clnicos.
Ej. Intoxicacin por organofosforados
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

108

36

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

TEMA 5
Mutagnesis
Carcinognesis
Teratognesis

Dr. Antonio Juan Garca


Fernndez
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

109

CARCINGENO
Un carcingeno se define como
aquel agente con capacidad de
inducir la produccin de tumores.

Aunque carcingeno etimolgicamente indica


el aumento de la formacin de carcinomas, en
la actualidad incluye cualquier compuesto que
origine un tumor maligno o metastatizante o
benigno, no metastatizante .
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

110

Cundo existe el fenmeno de


carcinognesis?
Se considera que existen fenmenos de carcinognesis
cuando se da alguna/s de las siguientes situaciones:
A. Un aumento de la incidencia del mismo tipo de
tumores respecto a la poblacin no expuesta.
B. La aparicin de tumores con anterioridad a la
poblacin no expuesta.
C. El desarrollo de tumores de diferente tipo a los
aparecidos en la poblacin no expuesta.
D. Un aumento de la multiplicidad de tumores con
respecto a la poblacin no expuesta.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

111

37

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

CARCINOGNESIS QUMICA (HISTORIA)


1759- John Hill: asociacin entre inhalacin de tabaco y cncer
oronasal.
1775- Sir Percival Pott: deshollinadores con cncer de escroto
1895- Rehn en Alemania: -naftilamina y
otras aminas aromticas como productoras
de cncer de vejiga en trabajadores de
tintes.
1895- La exposicin a Ni origina cncer de
pulmn.
1902- Radiacin X
1902- Rudolph Virchow (1821-1902) Cncer
producido por irritacin crnica
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Rudolph Virchow
(1821-1902)

112

CARCINOGNESIS QUMICA (HISTORIA)


1915- Yamagiwa and Ichikawa: primer
experimento de carcinognesis
qumica; reproducen tumores de piel en
oreja de conejo con aplicacin de holln.

1930- Kennaway y Hieger: aislan a partir de 2


toneladas de holln 7 gr de polvo fluorescente:
identificado como benzo[a]pireno
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

113

CARCINOGNESIS QUMICA (HISTORIA)


1941- Peyton Rous: Carcinognesis en
2 pasos:
Iniciacin y promocin
Virus oncognicos: sarcoma de Rous
Premio Nobel en 1966

1940s - James y Elizabeth Miller:


Relacionan por primera vez la activacin
metablica, la formacin de aductos en
el ADN y el cncer.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

114

38

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

CARCINOGNESIS EN 2 PASOS
CARCINGENO

1.- CONVERSIN TUMORAL

activacin metablica
Intermediarios
electroflicos

INICIACIN

reparacin ADN
Unin al ADN
formacin aductos

Clula normal
apoptosis

Clula transformada

2.- DESARROLLO
NEOPLSICO

Proliferacin celular
PROMOCIN
CLON PRENEOPLSICO

PROGRESIN

NEOPLASMA MALIGNO
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Molcula diana

115

ADN?

- Carcingenos.....Sustancias electroflicas que


reaccionan covalentemente con el ADN.
- Muchos carcingenos son tambin mutgenos.
- Defectos en mecanismos de reparacin del ADN
predisponen al cncer.
- Muchas anormalidades cromosmicas hereditarias
predisponen al cncer.
- Muchos cnceres llevan aparejadas anormalidades
cromosmicas.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

116

AGENTES CARCINOGNICOS
Agentes qumicos (genotxicos y epigenticos)
Agentes fsicos (radiaciones; UV y rayos X)
Agentes biolgicos
Virus: Epstein-Barr; HIV; Sarcoma de Rous; etc...
Bacterias: Helycobacter pylori
Parsitos: Schistosoma mansoni

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

117

39

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Clases de carcingeno qumico


Cuando un agente carcinognico acta en la fase de
conversin tumoral, o de iniciacin, se denomina genotxico y
tiene como diana de accin el material gentico en el que
produce un dao capaz de alterar la expresin de determinados
genes que originan la transformacin en una clula tumoral o
neoplsica.
Cuando un agente carcinognico acta en la fase de desarrollo
neoplsico, se denomina epigentico y no tiene como diana el
material gentico de la clula, sino alguno de los procesos que
facilitan su proliferacin y progresin a tejidos adyacentes.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

118

DIFERENCIAS ENTRE GENOTXICOS


Y EPIGENTICOS
Genotxicos

Epigenticos

Son qumicamente reactivos No precisan transformacin


o requieren de activacin
metablica
metablica para producir
Requieren exposicin prolonintermediarios reactivos.
gada y dosis repetidas.
Reaccionan covalentemente Los daos producidos son recon macromolculas de la
versibles.
clula como el ADN, ARN
Tienen umbral txico
y protenas.
Producen daos irreversi La respuesta est ligada a su
bles tras una exposicin
interaccin con receptores cenica.
lulares que activan mecanismos
de divisin del ADN
Son agentes mutagnicos
tanto en tests bacterianos
como de clulas de mamfero.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
119

Agentes Genotxicos
Carcingenos
Genotxicos
mutgenos
Pro-carcingenos
carcingenos directos
(no precisan modificacin)

La mayoria de frmacos
antitumorales

tienen que ser modificados


por enzimas celulares

benzoantraceno
Benzo[a]pireno

beta-propiolactona
Agentes alquilantes

dimetilbenzoantraceno
aflatoxina B1
aminas aromticas y tintes azoicos
120

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

40

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Pro-carcingenos
Epoxidacin en dos pasos
12

11

10

Epxido
hidrolasa

P450 1A1

8
7

HO

OH

Benzo[a]pireno
(B[a]P)

() B[a]P-trans-7,8-diol

P450 1A1

FORMACIN ADUCTOS
CON ADN

HO
OH

B[a]P-trans-7,8-diol9,10-epoxido

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

121

Pro-carcingenos
Aflatoxina B1

CYP450

O
O

OCH3

OCH3

Aflatoxin B1-2,3-epoxido

Aflatoxin B 1
Aminas aromticas
H2N

NH 2

NAT
H3 C

Benzidina
O

C
CH3
OH
N-hidroxi diacetilbenzidina
N

N+

H3 C

H
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
N-Acetil benzidina ion nitrenio

122

Carcingenos Epigenticos
Son aquellas molculas que aun causando efectos carcinognicos no han
demostrado ninguna evidencia de ser reactivos de DNA.
1.- Son activadores de la replicacin celular, facilitando la sntesis de DNA y
la mitosis.
2.- Su capacidad carcinognica se desarrolla por administracin o exposicin
continuada de los mismos y a dosis elevadas.
3.- No producen carcinognesis transplacentaria
Categora y clase
No reactivos del DNA
Promotores
organoclorados
Modificadores hormonales
Agentes citotxicos
Agentes immunosupresores
Estado slido
Sin clasificacin
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
Miscelnea

Antonio Juan Garca Fernndez

ejemplos
plaguidas
estrgenos, amitrol
acido nitrilotriactico
ciclosporina A
plsticos, asbestos
etanol, dioxano

123

41

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

CARCINGENOS EPIGENTICOS
Hormonas estrognicas
CH3 OH
C

CH

H2C

HO

HO

etinil-estradiol

H3C

CH3

OH

CH2

dietilestilbestrol (DES)
OMe

Cl

OH

H3C CH

MeO

C CH
3
H

HO

OMe
clorotrianiseno

dienestrol
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

124

CARCINGENOS EPIGENTICOS
Dioxinas y PCBs
Cl

Cl

Cl

Cl

Cl

Cl

2,3,7,8 tetraclorodibenzodioxina
(TCDD)

Cl

Cl

2,3,7,8 tetraclorodibenzofurano
(TCDF)

Miscelnea
H 3C
HO

OCO(CH2)12CH3
OCOCH3
CH3
CH3

etanol

H 3C

=
O

CH2OH

Dr. Antonio
J. Garca Fernndez
Tetradecanoilforbol
acetato

125

CONVERSIN TUMORAL (INICIACIN)


Consiste en la transformacin de una clula somtica en una clula
neoplsica con capacidad de proliferacin.
Est constituida por la secuencia de tres procesos consecutivos:

1.- Activacin metablica


2.- Interaccin con los componentes celulares.
3.- Fijacin del dao producido por el carcingeno.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

126

42

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Conversin tumoral (iniciacin)


A).- Activacin metablica:
Consiste en la transformacin (si fuera preciso) del agente
original (a veces inocuo) en la molcula responsable de la accin
carcinognica.
Muchos de los intermediarios carcinognicos son metabolitos en
fase I (reacciones de oxidacin) del compuesto parental.
Slo un porcentaje bajo de compuestos (sobre todo agentes
quimioterpicos e intermediarios industriales: dioxinas, no
necesitan ser activados metablicamente para desarrollar su
accin carcinognica.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

127

Conversin neoplsica (iniciacin)


2.- Interaccin con los componentes celulares.
rotura de cadena sencilla
dimerizaciones

unin entre cadenas


rotura de cadena doble

- Carcingenos actan como sustancias


reactivas electroflicas que
interaccionan covalentemente con
zonas neutroflicas de cidos nuclicos,
protenas u otras macromolculas.
- Interposicin del carcingeno entre
pares de bases del ADN.

desaminaciones
lugares absicos

- Carcingenos aaden radicales


alquilo a las bases de los cidos
nuclicos.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez


formacin de aductos

128

Conversin neoplsica (iniciacin)


3.- Fijacin del dao producido por el carcingeno.
Una clula cuyo material gentico o cuyas protenas han sido modificadas por un
agente cancergeno, puede sufrir dos procesos:
A) puede ser reparada por los mecanismos de reparacin celular o por los
mecanismos de recambio intracelular.
B) si por el contrario, la clula afectada por el compuesto carcinognico se
encuentra en la fase S de su ciclo celular (sntesis de ADN) o replicacin,
el dao puede quedar fijado de una manera estable, originndose

mutaciones puntuales
transiciones o transversiones
adiciones o delecciones de pares de bases
reordenamientos cromosmicos, o combinaciones de todos estos en
funcin de lo insidioso que sea el agente txico o su dosis)
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

129

43

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Clasificacin de los
carcingenos qumicos
- Carcingenos primarios. No necesitan activacin. Sustancias
reactivas electroflicas que reaccionan con zonas nucleoflicas.
- Carcingenos secundarios, procarcingenos. Necesitan
activacin. Se transforman en reactivos electroflicos que reaccionan
con los neutroflicos
- Cocarcingenos, sin actividad pero que potencian la accin de los
carcingenos de cualquiera de los dos grupos anteriores

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

130

Mutagenicidad vs. carcinogenicidad


Todos los mutgenos son sospechosos de ser
carcinognicos pero en algunos de ellos la
carcinogenicidad no es detectable.
Algunos carcingenos no son mutagnicos y pertenecen
al grupo de los epigenticos.
La evaluacin de la carcinogenicidad en humanos es
difcil y requiere la combinacin de varios tests.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

131

Centro Internacional de Investigacin del Cncer (IACR)


Grupo 1. Se incluyen aqu las sustancias de las que se tienen pruebas
suficientes de carcinogenicidad en humanos.
Grupo 2A. Esta categora se usa cuando existen pruebas limitadas de la
carcinogenicidad en humanos y pruebas suficientes de la carcinogenicidad
en experimentacin animal.
Grupo 2B. Esta categora incluye agentes, mezclas o condiciones de
exposicin para las que existen pruebas limitadas de carcinogenicidad en
humanos y pruebas insuficientes de carcinogenicidad en experimentacin
animal.
Grupo 3. Esta categora es usada ampliamente para aquellos agentes,
mezclas o condiciones de exposicin para las que existen pruebas
inadecuadas de carcinogenicidad en humanos e inadecuadas o limitadas en
animales.
Grupo 4. En esta categora se incluyen los agentes o mezclas para los que
existen pruebas que sugieren ausencia de carcinogenicidad en humanos y
en experimentacin animal.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

132

44

Toxicologa. 2015/16

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Asociacin de Higienistas Industriales del Gobierno


Americano (ACGIH).
1.- La exposicin a los compuestos cancergenos debe ser
mnima.
2.- Los trabajadores expuestos a los cancergenos A1 sin TLV
(Valores Lmite Umbral) deben ser equipados adecuadamente para
eliminar lo mximo posible toda exposicin a estos compuestos.
3.- Para los cancergenos tipo A1 con TLV y para los de tipo A2 la
exposicin de los trabajadores por cualquier va de penetracin
debe ser cuidadosamente controlada a niveles por debajo del valor
del TLV.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

133

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

134

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

135

Antonio Juan Garca Fernndez

45

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

TERATOLOGA
Ciencia que estudia las causas que originan alteraciones
estructurales y/o funcionales durante el desarrollo
prenatal, as como del estudio de dichas alteraciones.

CONCEPTOS
Malformacin congnita: Alteraciones morfolgicas en el neonato
Anomalas: Defectos morfolgicos menores, sin alteracin funcional
Monstruosidades: Defectos estructurales que ponen en peligro la
supervivencia del individuo
Teratgeno: Agente fsico o qumicos, intrnseco o extrnseco, que
incrementa la incidencia de anormalidades estructurales y/o
funcionales en los recin nacidos, tras su administracin a los
padres, a la madre durante la gestacin, o al organismo en
desarrollo.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
136

CONCEPTOS
Toxicologa del desarrollo: Estudio de las respuestas aberrantes a
agentes ambientales o drogas, subsiguientes a la exposicin en
cualquier perodo desde la concepcin hasta el perodo postnatal
Embrioletalidad: Muerte del embrin debido a lesiones
incompatibles con la supervivencia del concepto. Termina con la
reabsorcin, aborto espontneo o con un nacido muerto.
Embriotoxicidad: Estado provocado por lesiones persistentes que
provocan retraso o disminucin del desarrollo en sistemas
orgnicos especficos.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

137

Principios generales de la
Teratologa
Preimplantacin
Organognesis

Factores genticos

Perodo fetal

Periodos crticos
Mecanismos de iniciacin
Consecuencias del desarrollo anormal
Acceso al embrin y al feto

Muerte

Relacin dosis-respuesta

Malformacin
Retraso en crecimiento
Desorden funcional

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

Riesgo
teratognico
138

46

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Dosis

% daos camada

B.

C.

% daos camada

A.

% daos camada

Relacin Dosis-Respuesta
MODELOS

Dosis
Malformaciones

Dosis

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Retraso crecimiento
Embrioletalidad
139

Principios a tener en cuenta en el estudio


teratolgico
1. Cambios drsticos y continuos en la fisiologa y bioqumica
durante la gestacin.
2. Hay dos genomas completamente separados y distintos que
coexisten.
3. Existen dos suministros de sangre distintos y separados con una
nica interfase, el trofoblasto.
4. Crecimiento rpido y selectivo de tipos celulares especficos en
el concepto en estados particulares de la gestacin.
5. Interacciones entre la madre, el embrin/feto y la placenta.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

140

Cambios fisiolgicos en hembras gestantes


1. Absorcin gastrointestinal. Descenso de la motilidad gstrica.
2. Absorcin subcutnea. Inestabilidad vasomotora: absorcin errtica.
3. Volumen sanguneo materno. Incremento 20 %: vol. mayor para la distribucin.
4. Protenas plasmticas. Incrementadas selectivamente.
5. Redistribucin del flujo sanguneo. Flujo sanguneo al tero, incrementado
70-80 %.
6. Metabolismo de nutrientes. Consumidor de carbohidratos (madre) convertido en
consumidor de cidos grasos.
7. Metabolismo de xenobiticos. Produccin de metabolitos selectivamente
incrementada o disminuida a productos activos o inactivos.
8. Funcin renal. Filtracin glomerular renal aumentada.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

141

47

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Mecanismos responsables del dao


molecular inicial de la teratognesis
Mutaciones
Alteracin en cromosomas
Interferencia mittica
Alteracin en la integridad o funcin del c. nuclico
Carencia de precursores y sustratos
Fuentes de energa alteradas
Cambios en la membrana
Desequilibrio osmolar
Inhibicin o activacin enzimticas
Interaccin
con un receptor especfico
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

142

La manifestacin teratognica producida por un teratgeno


depender de una serie de factores maternos, fetales o del
propio agente:
- La fase del desarrollo en la que se encuentre el embrin
- La dosis, ruta de administracin y tiempo de exposicin
- La capacidad del agente de atravesar la placenta
- La capacidad de la madre para destoxicarlo y eliminar sus
metabolitos
- La fase del ciclo celular en que se encuentre la clula afectada
- El tiempo de vida medio del agente
- La capacidad del embrin para destoxicarlo.
- La capacidad de las clulas daadas o de las contiguas para reparar
las lesiones.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

143

TEMA 6
TOXICOLOGA
EXPERIMENTAL
Principios generales para los estudios de
toxicidad. Ensayos de toxicidad: aguda, crnica y remota.
Toxicidad "in vitro". Transformacin "probit" en toxicometra
y clculo de la DL y DL50.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

144

48

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Objeto
Reproducir en el laboratorio, por
procedimientos experimentales, procesos de
naturaleza txica, recogiendo de ellos los
datos necesarios para llegar a ciertas
conclusiones.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

145

ENSAYOS TOXICOLGICOS
Generales:

Especiales:

Toxicidad aguda
Toxicidad subcrnica
Toxicidad crnica

Reproduccin
Fertilidad
Induccin de mutaciones
Efectos cancergenos
Teratogenicidad
Sensibilidad cutnea, ocular, etc.
Hemlisis
Comportamiento
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

146

ENSAYOS TOXICOLGICOS
Protocolo de ensayo
La especie animal a utilizar.
El nmero total y de grupos (lotes) de animales.
Las vas de administracin a emplear.
El tiempo de duracin del ensayo.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

147

49

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Especie animal a utilizar


Animales pequeos: rata, ratn, hmster, cobayo, conejo y perro.
Pueden usarse aves, peces, gatos y monos.
Dos especies: roedor y no roedor.
Sexo? mitad de animales de cada sexo.
Animales sanos, gran estabilidad gentica y alimentacin adecuada.
Consanguneos?
Estriles?
Lotes homogneos (control de celos)
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

148

Tiempo de duracin del ensayo


Periodos cortos: Toxicidad Aguda.
Periodos medios: Toxicidad Subaguda o Subcrnica.
Periodos largos: Toxicidad Crnica y Diferida

ENSAYOS DE TOXICIDAD AGUDA


DL-50 (Dosis Letal-50) o CL-50 (Concentracin Letal-50): dosis o
concentracin, respectivamente, que causan la muerte al 50 % de los
animales a los que ha sido administrado.
Dosis o concentracin letal: dosis capaz de provocar la muerte.
Dosis o concentracin mnima txica: mnima cantidad de una
sustancia que es capaz de producir algn efecto txico.
Dosis o concentracin mxima txica: la dosis o concentracin ms
alta que produce efectos txicos sin llegar a producir la muerte.
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

149

ENSAYOS ESPECIALES DE TOXICIDAD AGUDA


Ensayos de toxicidad aguda drmica

Ensayo de irritacin primaria


Ensayo de sensibilizacin cutnea
Ensayo de fotosensibilidad y fotoalergia
Ensayo de toxicidad sistmica a travs de piel
Ensayo de toxicidad o irritacin ocular

ENSAYOS DE TOXICIDAD SUBCRNICA Y CRNICA


Dosis mxima tolerada (MTD)
Dosis mnima txica

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

150

50

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

ENSAYOS DE MUTAGNESIS
A. Ensayos in vitro.

Cultivos bacterianos
Cultivos con levaduras
Cultivos con clulas de mamferos

Cultivos bacterianos:

S. typhimurium

Cultivos con levaduras: Saccharomyces cerevisiae


Schizosaccharomyces pombe
Cultivos con clulas de mamferos: Clulas ovricas de hmster chino (CHO)
Clulas de linfoma de ratn (L5178Y)
Fibroblastos diploides de la especie humana
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

151

ENSAYOS DE MUTAGNESIS
B. Ensayos in vivo.

Ensayo del dominante letal


Ensayo por medio de hospedador
Citogentica in vivo

Ensayo del dominante letal

ndice mutagnico (I.M.) =

Citogentica in vivo

Muertes fetales prematuras x 100


Implantaciones fetales

Mdula sea: efectos sobre la mitosis.


Linfocitos: lesiones antes de la sntesis de ADN.
Fibroblastos de la piel: efectos a largo plazo.
Gametocitos: efectos sobre la meiosis.
Cultivos celulares de lquido amnitico: lesiones de la
progenie en desarrollo
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

152

ENSAYO DE TERATOGNESIS
Animales a emplear: ratones, ratas y conejos

Nmero de animales: 10 hembras por grupo

100 fetos

Dosis del producto a ensayar: D. alta: inicialmente txica


D. baja: sin efectos ponderables para la madre
D. intermedia:
Protocolo: Producir gestacin.
Confirmar la gestacin.
Administrar la o las sustancias a ensayar.
Establecer el efecto teratognico

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

153

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28/2/2016

ENSAYO DE REPRODUCCIN

FERTILIDAD
GESTACIN
DESCENDENCIA

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154

FERTILIDAD

Alteracin en el funcionamiento de las gnadas.


Alteracin en el ciclo del estro.
Alteracin del comportamiento en el
apareamiento.
Alteracin en el ndice de concepcin.
Alteracin en los primeros estadios de la
gestacin: implantacin del vulo fecundado

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

155

GESTACIN

Desarrollo del feto.


Mayor o menor grado de normalidad,
incluyendo efectos teratgenos y
mutgenos.
Mortalidad intrauterina.

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156

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28/2/2016

DESCENDENCIA
Efectos sobre la madre:
Lactacin.
Aceptacin de la progenie.

Efectos sobre la progenie:


Crecimiento.
Desarrollo.
Maduracin sexual.
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157

ENSAYO DE REPRODUCCIN

Estudio de los animales expuestos a la


sustancia desde el momento de la
concepcin hasta que producen su propia
descendencia.
Estudio de la progenie durante su
crecimiento y desarrollo.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

158

OECD TG-401 (Acute Oral Toxicity):


Abolido en 2002. Test de la DL50
Alternativas:
TG-420. No requiere la muerte de los animales.
TG-423. El n de muertes no es mayor de 3.
TG-425. El n de muertes no es mayor de 3.

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159

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Efectos sobre
sistemas biticos

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28/2/2016

Efectos sobre la
salud

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Dr. Antonio J. Garca Fernndez

182

PROMOVER ENSAYOS SIN


ANIMALES I
1. Evitar la repeticin innecesaria de experimentos in vivo e in
vitro
Disponibilidad de informacin, intercambio, flexibilidad,
estrategias integradas
2. Modelos matemticos de prediccin
Cintica ambiental de compuestos qumicos, Toxicocintica,
QSAR
3. Mejoras en el diseo de estudios animales
Reduccin nmero de animales, Refinamiento (minimizar el
dolor y sufrimiento)
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

183

61

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

PROMOVER ENSAYOS SIN


ANIMALES II
4. Uso de organismos inferiores no protegidos
Bacterias, hongos, protozoos, algas, plantas, etc
5. Vertebrados en etapas iniciales de desarrollo
Peces, anfibios, reptiles, pjaros, mamferos, etc
6. Mtodos in vitro
rganos, explantes, cultivos primarios, lneas celulares, sistemas
libres de clulas, etc
7. Otros
Estudios en humanos (voluntarios, epidemiolgicos, etc). Nuevos
184
modelos enseanza Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Qu entendemos por mtodo


alternativo?
mtodos o tcnicas que de alguna manera
pudieran reemplazar a los animales en
los experimentos, disminuir el nmero
de animales utilizados en cada ensayo, o
simplemente mejorar los procedimientos
ya existentes a fin de disminuir el estrs
y evitar sufrimientos a los animales
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

(Balls, 1983)

185

Ventajas de los mtodos in vitro


Control directo sobre las condiciones de los ensayos
Conservacin de recursos
Ausencia de respuestas compensatorias de tipo hormonal
o metablicas
Las poblaciones celulares pueden ser especficas
Reducido espacio para mantener las muestras
Posibilidad de experimentar al mismo tiempo con varios
compuestos y dosis
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

186

62

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Inconvenientes de los mtodos in


vitro
Viabilidad y actividad funcional normalmente limitada
Incapacidad para detectar toxicidad retardada o crnica
Necesitan validacin de los mtodos para correlacionar los
resultados con aquellos obtenidos in vivo.
Efectos inespecficos en clulas en cultivo
Costosa infraestructura, reactivos caros y personal especializado

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

187

Tipos de ensayo (I)


lFarmacolgicos:
Screening funcional y toxicolgico
Transporte celular
NUEVAS MOLCULAS:
Toxicidad
etapa preclnica
Mecanismos de accin
Muerte celular
Vacunas, antineoplsicos, antibiticos, drogas,

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

188

Tipos de ensayo (II)


lToxicolgicos
Contaminantes
Plaguicidas
Aditivos alimentarios
Medicamentos
Cosmticos

Nuevas molculas
Nuevos contaminantes
Efectos a bajas dosis

lInmunolgicos
Caracterizacin de antgenos bacterianos y virales
Evaluacin de la idoneidad antgenos para preparar
vacunas
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

189

63

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Otros tests reemplazados y cancelados

TG 402. Acute dermal toxicity


TG 403. Acute inhalation toxicity (08/09/2009)
TG 404. Acute dermal irritation/corrosion (24/04/2002)
TG 405. Acute eye irritation/corrosion (24/04/2002)
TG 406. Skin sensitisation (17/07/1992)
TG 407. Repeated dose 28-day oral toxicity study in rodents.
(16/10/2008)
TG 408. Repeated dose 90-day oral toxicity study in rodents.
(21/09/1998)
TG 409. Subchronic oral toxicity Non rodent: 90-day study.
TG 412. Subacute inhalation toxicity: 28-day study. (08/09/2009)
TG 413. Subchronic inhalation toxicity: 90-day study. (08/09/2009)
TG 414. Teratogenicity (Prenatal Development Toxicity Study
(22/01/2001)
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
190

Otros tests reemplazados y cancelados


TG 416. Two-Generation Reproduction Toxicity Study. (22/01/2001)
TG 417. Toxicokinetics (23/07/2010)
TG 418. Delayed neurotoxicity of OP substances following acute
exposure. (27/07/1995)
TG 419. Delayed neurotoxicity of OP substances: 28-day repeated
dose study. (27/07/1995)
TG 420. Acute Oral Toxicity. Fixed Dose Method. (08/02/2002)
TG 423. Acute Oral Toxicity. Acute Toxic Class Method. (08/02/2002)
TG 425. Acute Oral Toxicity. Up-and-Down Procedure. (16/10/2008)
TG 429. Skin sensitisation: Local Lymph Node Assay. (23/07/2010)
TG 451. Carcinogenicity Studies. (08/09/2009)
TG 452. Chronic Toxicity Studies. (08/09/2009)
TG 453. Combined Chronic Toxicity/Carcinogenicity Studies.
(08/09/2009)
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

191

Otros tests reemplazados y cancelados

TG 471. Bacterial Reverse Mutation Test (21/07/1997)


TG 472. Genetic Toxicology: Escherichia coli, Reverse Mutation Assay.
TG 473. In vitro Mammalian Chromosome Aberration Test (21/07/1997)
TG 474. Mammalian Erythrocyte Micronucleus Test. (21/07/1997)
TG 475. Mammalian Bone Marrow Chromosome Aberration Test
(21/07/1997)
TG 476. In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test. (21/07/1997)
TG 477. Genetic Toxicology: Sex-linked Recessive Lethal Test in
Drosophila melanogaster.
TG 478. Genetic Toxicology: Rodent Dominant Lethal Test.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

192

64

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Otros tests reemplazados y cancelados


TG 479. Genetic Toxicology: In vitro Sister Chromatid Exchange
Assay in Mammalian Cells.
TG 480. Genetic Toxicology: Saccharomyces cerevisiae Gene
Mutation Assay.
TG 481. Genetic Toxicology: Saccharomyces cerevisiae, Mitotic
Recombination Assay
TG 482. Genetic Toxicology: DNA damage adn repair unscheduled
DNA synthesis in mammalian cells in vitro.
TG 483. Mammalian Spermatogonial Chromosome Aberration Test.
(21/07/1997)
TG 484. Genetic Toxicology: Mouse Spot Test.
TG 485. Genetic Toxicology: Mouse Heritable Translocation Assay.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

193

TEMA 7
BASES PARA LA EVALUACIN DEL RIESGO
TOXICOLGICO Y ECOTOXICOLGICO:
REACH. DIANAS TOXICOLGICAS.
ADMINISTRACIN DEL RIESGO. ENSAYOS
TOXICOLGICOS. MTODOS OFICIALES

Antonio Juan Garca Fernndez

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

194

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

195

Antonio Juan Garca Fernndez

65

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

RIESGO: Probabilidad de que un contaminante entre en contacto con algn receptor


con consecuencias adversas para la salud de las personas o el medio ambiente.
SALUD HUMANA
Y ANIMAL

SALUD AMBIENTAL
PROTECCIN
RIESGOS

PRESENCIA
CONTACTO
INTERACCIN

CUNTO?

EFECTO

EXPOSICIN
TOXICOCINTICA
EVALUAR

TOXICODINAMIA
196

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Fases en la administracin del riesgo

EVALUACIN DEL
RIESGO
Trabajadores
Consumidores
Poblacin en general
IDENTIFICACIN
DEL PELIGRO
EVALUACIN DE
EFECTOS

EVALUACIN DE
LA EXPOSICIN
CARACTERIZACIN
DEL RIESGO

Estimacin
de la DosisRespuesta

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

197

EVALUACIN DEL RIESGO: ELEMENTOS LIMITANTES

1. Los nuevos compuestos qumicos.


2. Los compuestos qumicos ya existentes.
3. La evaluacin del riesgo.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

198

66

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Directivas y regulaciones en la Unin Europea


Sustancias qumicas nuevas (Directiva 67/548/EC)
Sustancias qumicas ya existentes (Regulacin 793/93/EC)
Plaguicidas (Directiva 91/414/EC)
Biocidas (Directiva 98/8/EC)
Medicinas humanas (Directiva 2001/83/EC)
Medicamentos veterinarios (Directiva 2001/82/EC)
Aditivos en piensos (Directiva 2001/79/EC)
Aditivos alimentarios (Directiva 89/107/EC)
Cosmticos (SCP 803/90)
Material de embalaje (Directiva EC CS/PM/1025).
199

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Representacin del rbol de decisin en la evaluacin del riesgo

NO

1. Compuestos
qumicos
nuevos

PEC/PNEC > 1

No necesidad de
intervencin

ms informacin?

NO

S
1-10 Tm/ao

10-100 Tm/ao

Nuevos ensayos
en el siguiente
nivel

100-1000 Tm/ao

Nuevos ensayos a
realizar
inmediatamente

> 1000 Tm/ao

Introduccin
medidas
reduccin riesgo

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

200

Informacin bsica a incluir en el dossier sobre una


sustancia qumica nueva
1- Identificacin del producto: nombre qumico, frmula,
mtodos de anlisis, etc.
2- Cantidad, funciones y aplicaciones.
3- Medidas de precaucin y de emergencia
4- Propiedades fsicas
5- Propiedades qumicas
6- Propiedades toxicolgicas
7- Propiedades ecotoxicolgicas
8- Mtodos para restar peligrosidad
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

201

67

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

6- Propiedades toxicolgicas

a. Ensayo de toxicidad aguda por dos vas


b. Ensayo de irritacin drmica
c. Ensayo de sensibilizacin
d. Ensayo de toxicidad subaguda
e. Ensayos de toxicidad genotxica (dos ensayos)

202

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

7- Propiedades ecotoxicolgicas

a. Ensayo de toxicidad aguda sobre algas, peces y daphnias


b. Ensayo de inhibicin bacteriana
c. Ensayo de biodegradabilidad rpida
d. Ensayo de hidrlisis

203

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

DATOS DISPONIBLES EN IUCLID (ECB)

INFORMACIN SOBRE ECOTOXICIDAD

DISPONIBLE (%)

LC50 en peces

68

EC50 en Daphnia

55

EC50 en algas

46

EC50 en microorganismos

57

NOEC en peces

14

NOEC en Daphnia

18

LC50 en plantas

32
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

204

68

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

DATOS DISPONIBLES EN IUCLID (ECB)

INFORMACIN SOBRE TOXICIDAD

DISPONIBLE (%)

LD50 oral, en ratas

77

LD50 inhalatoria en ratas

51

LD50 drmica en ratas o conejos

53

Toxicidad a dosis repetidas

58

Genotoxicidad (in vitro)

67

Genotoxicidad (in vivo)

38

Toxicidad reproductiva

26

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

205

Listas de prioridad de sustancias ya existentes (factores)

- Los efectos de la sustancia sobre el hombre y sobre el


medio ambiente.
- La exposicin del hombre o del medio ambiente a la
sustancia.
- La carencia de datos sobre los efectos de la sustancia sobre
el hombre y sobre el medio ambiente.
- Los trabajos llevados a cabo en otros foros.
- Otra legislacin comunitaria y/o programas relacionados
con sustancias peligrosas.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

206

La nueva poltica en materia de


productos qumicos: OBJETIVOS
Desarrollo sostenible
Proteccin de salud humana y medio ambiente
Innovacin y competitividad de la industria qumica de la
UE
Incrementar la transparencia
Integracin internacional
Promover ensayos sin animales
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

207

69

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

Fases en la administracin del riesgo


IDENTIFICACIN DEL
RIESGO
EVALUACIN DE LA
EXPOSICIN

EVALUACIN DE
EFECTOS
CARACTERIZACIN DEL
RIESGO

CLASIFICACIN DEL
RIESGO

ANLISIS BENEFICIO/
RIESGO

REDUCCIN DEL
RIESGO

MONITORIZACIN

208

Dr. Antonio
J. Garca
Fernndez
QUMICA
Y BIOLGICA

Dianas ambientales

Los ecosistemas terrestres


Los ecosistemas acuticos
Los ecosistemas de sedimentos
La fauna predadora (terrestre y acutica)
Los microorganismos

Dianas para el ser humano (grupos de riesgo)


Los individuos expuestos en el ambiente de trabajo.
Los consumidores directos de los productos.
Los individuos expuestos indirectamente va medio ambiente

209

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Representacin posible de distribucin de una sustancia qumica entre


compartimentos ambientales
deposicin

deposicin

Aire

volatilizacin
Suelos agrcolas

pastos
aplicacin

lixiviacin

aplicacin

dilucin
Aguas
superficiales

Planta de
tratamiento de
aguas
residuales

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

Aguas
subterrneas
210

70

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

ANLISIS DE RIESGO TOXICOLGIGO PARA LA SALUD HUMANA


Tipo de peligro

INVESTIGACIN

Magnitud del peligro

EVALUACIN DEL
RIESGO

Investigacin
toxicolgica

Identificacin del
peligro

Estudios de campo:
- Exposiciones
- Efectos txicos

Evaluacin de la
exposicin

Metodologa de
extrapolacin:
- De alta a baja dosis
- Interespecies

Evaluacin dosisrespuesta

Probabilidad del peligro

ADMINISTRACIN
DEL RIESGO
Diseo de opciones
reguladoras

Evaluacin de las
opciones reguladoras

Decisiones
Acciones

Caracterizacin del
riesgo
Dr. Antonio
J. Garca Fernndez

211

DIANAS AMBIENTALES DE LAS SUSTANCIAS QUMICAS

Los ecosistemas terrestres


Los ecosistemas acuticos
Los ecosistemas de sedimentos
La fauna predadora, tanto terrestre como acutica, a travs
de lombrices y de peces, respectivamente.
Los microorganismos.

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

212

PELIGRO

Potencial de un evento, secuencia de eventos o


combinacin de circunstancias, que pueden producir
consecuencias adversas con potencial para daar la
salud humana y/o el ambiente.
RIESGO

Probabilidad de que un efecto especfico ocurra


dentro de un determinado perodo de tiempo
especfico o bajo ciertas circunstancias con
capacidad para determinar una consecuencia; y la
probabilidad de que ocurra esa consecuencia
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

213

71

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

1. Identificacin de peligros

Identificar las fuentes posibles de peligro


Txicos, inflamables y explosivos
Interacciones potenciales con actividades y usos circundantes
Identificar relacin fuente-va-receptor
Estimar la probabilidad y frecuencia de que ocurra cada peligro

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

214

2. Estimacin del riesgo y evaluacin


Riesgo = naturaleza del peligro + probabilidad + frecuencia

Cul es la naturaleza del peligro?


De qu forma llegar el peligro a ser riesgo?
Cules son las consecuencias?
Cules son los riesgos?

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

215

Principios de la aceptabilidad del riesgo


ALARP
as low as reasonably practicable
tan bajo como razonablemente factible
Riesgo intolerable
Regin ALARP alta
Regin ALARP baja
Riesgo aceptable

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

216

72

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

EVALUACIN DEL RIESGO PARA LOS ECOSISTEMAS TERRESTRES

La evaluacin del peligro: Juzga los efectos adversos que una


sustancia qumica es capaz de
provocar
Identificar el peligro (propiedades intrnsecas del Q)
EXPOSICIN
La evaluacin del riesgo Evala efectos potenciales sobre
ecosistemas.

Nivel exposicin esperado vs toxicidad

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

217

EFECTOS ADVERSOS GENERALES SOBRE EL MEDIO AMBIENTE


TERRESTRE

Efectos sobre las funciones de la tierra (sustrato y sostn de


plantas e invertebrados)
Efectos sobre la produccin de la biomasa
Efectos sobre la tierra, invertebrados terrestres y foliares
Efectos sobre vertebrados terrestres expuestos a alimentos,
tierra, aire o agua contaminados
Acumulacin de txicos en alimentos (cadena alimentaria)

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

218

ENSAYOS ECOTOXICOLGICOS EN
EVALUACIN DEL RIESGO EN ECOSISTEMAS
TERRESTRES
Para vertebrados terrestres
- Ensayo de toxicidad aviar aguda oral
- Ensayo de toxicidad aviar a corto plazo en la dieta
- Ensayo de reproduccin aviar
Para abejas
- Ensayo de toxicidad aguda para abejas
- Ensayo de alimentacin de la progenie de abejas
- Ensayos de nivel superior. Ensayos ms refinados
Para otros artrpodos
- Ensayos estndar con Aphidius rhopalosiphi y Typhlodromus pyri.
- Ensayos de nivel superior.
- Ensayos de laboratorio ampliados.
- Estudio de residuos
- Ensayos de semi-campo
219
Dr. Antonio J. Garca Fernndez
- Ensayos de campo

Antonio Juan Garca Fernndez

73

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

ENSAYOS ECOTOXICOLGICOS EN EVALUACIN DEL RIESGO


EN ECOSISTEMAS TERRESTRES
Para organismos de tierra
- Efectos agudos sobre lombrices de tierra
- Efectos subletales sobre lombrices de tierra
- Estudios de campo con lombrices de tierra
- Nitrificacin y mineralizacin del carbn del suelo
- Ensayos sobre otros macro-organismos no diana de la tierra
- Ensayo de reproduccin Collembola o ensayo sobre
caros Hypoaspis aculeifer
- Ensayos de nivel superior. Pueden elegirse entre:
- Ampliar los ensayos anteriores
- Estudios de campo a gran escala
- Ecosistemas terrestres modelo

Collembola

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

220
Hypoaspis aculeifer

ENSAYOS ECOTOXICOLGICOS EN EVALUACIN DEL RIESGO


EN ECOSISTEMAS TERRESTRES
Para plantas no diana
Se consideran plantas no diana a aquellas no cultivadas localizadas
fuera del rea de tratamiento.
Nivel 1: Recopilacin de informacin
Nivel 2: Bioensayos en plantas terrestres

Nivel 3: Estudios de campo y semi-campo

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

221

ENSAYOS ECOTOXICOLGICOS EN EVALUACIN DEL RIESGO


EN ECOSISTEMAS ACUTICOS
Ensayos de toxicidad con peces
- Ensayo de toxicidad aguda: trucha arco
iris (Oncorhynchus mykiss) y una especie
de agua clida.
- Ensayos de toxicidad crnica (a largo
plazo): miden efectos subletales. El estudio
dura 28 das e incluye datos sobre
supervivencia, crecimiento y
comportamiento.
- Estudio de bioconcentracin en peces
Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

222

74

Toxicologa. 2015/16

28/2/2016

ENSAYOS ECOTOXICOLGICOS EN EVALUACIN DEL RIESGO


EN ECOSISTEMAS ACUTICOS
Ensayos con invertebrados acuticos
(incluye organismos en sedimentos)

- Ensayos con Daphnia magna.


- Estudios con especies invertebradas adicionales: moluscos e
insectos
- Datos disponibles sobre invertebrados estuarinos y/o marinos
- Ensayos con invertebrados que viven en sedimentos

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

223

ENSAYOS ECOTOXICOLGICOS EN EVALUACIN DEL RIESGO


EN ECOSISTEMAS ACUTICOS
Estudios con plantas acuticas (algas y macrofitos)
- Ensayos con algas: Siempre un ensayo con alga verde. Para
herbicidas un ensayo adicional con otra especie (diatomeas o algas
verde-azuladas).
- Ensayos con macrofitos acuticos: Debe ensayarse en el caso de
herbicidas. Los ensayos se deben realizar con Lemma sp.
Requerimientos de estudio para formulaciones
- Ensayos de toxicidad aguda con productos formulados.
- Ensayos de microcosmos y mesocosmos.
- Ensayos de toxicidad crnica
formulados.
Dr. Antonio J.con
Garcaproductos
Fernndez

224

MTODOS PARA LA DETERMINACIN DE LA ECOTOXICIDAD

TOXICIDAD AGUDA EN PECES


TOXICIDAD AGUDA EN Daphnia
ENSAYO DE INHIBICIN DE ALGAS
DETERMINACIN DE LA BIODEGRADABILIDAD FCIL
TOXICIDAD PARA GUSANOS DE TIERRA: Ensayo con suelo
artificial

Dr. Antonio J. Garca Fernndez

Antonio Juan Garca Fernndez

225

75