EL NCLEO CELULAR

Silvia Mrquez- Andrea Lassalle- Viviana Sabbatino- Gladys Glvez

INTRODUCCIN
El ncleo es la estructura ms destacada de la clula eucarionte, tanto por su morfologa como
por sus funciones. Su tamao es variable (5 a 10 mm) al igual que su ubicacin siendo en la
mayora de los tipos celulares central.
El ncleo tiene tres funciones primarias, todas ellas relacionadas con su contenido de ADN.
Ellas son:
1.

Almacenar la informacin gentica en el ADN.

2.

Recuperar la informacin almacenada en el ADN en la forma de ARN.

3. Ejecutar, dirigir y regular las actividades citoplasmticas, a travs del producto de la

expresin de los genes: las protenas.
En el ncleo se localizan los procesos a travs de lo cuales se llevan a cabo dichas funciones.
Estos procesos son:
1.

La duplicacin del ADN y su ensamblado con protenas (histonas) para formar la cromatina.

2. La transcripcin de los genes a ARN y el procesamiento de stos a sus formas maduras,

muchas de las cuales son transportadas al citoplasma para su traduccin y
3.

La regulacin de la expresin gentica.

ESTRUCTURA DEL NCLEO

(Fig. 10.1)

El ncleo est rodeado por la envoltura nuclear, una doble membrana interrumpida por
numerosos poros nucleares. Los poros actan como una compuerta selectiva a travs de la cual
ciertas protenas ingresan desde el citoplasma, como tambin permiten la salida de los
distintos ARN y sus protenas asociadas.
La envoltura nuclear es sostenida desde el exterior por una red de filamentos intermedios
dependientes del citoesqueleto, mientras que la lmina nuclear, la cual se localiza adyacente a
la superficie interna de la envoltura nuclear, provee soporte interno.

El ncleo tambin tiene un nucleoplasma, en el cual estn disueltos sus solutos y un esqueleto
filamentoso, la matriz nuclear la cual provee soporte a los cromosomasy a los grandes
complejos proteicos que intervienen en la replicacin y transcripcin del ADN.
Los cromosomas aparecen ocupando lugares especficos. Los genes que codifican productos
relacionados, aunque estn localizados en diferentes cromosomas, pueden estar ubicados
prximos en el ncleo interfsico. Por ejemplo, los cromosomas humanos 13, 14, 15, 21 y 22
poseen un gran nmero de genes que codifican para ARNr. Dichos cromosomas estn agrupados
de tal forma que los genes de los ARNr estn todos juntos y confinados en el nuclolo, el lugar
donde se sintetizan, procesan y ensamblan los ARNr. Esta separacin fsica asegura que los
ARNr puedan ser eficientemente ensamblados dentro de las subunidades ribosomales.
En el ncleo, los genes transcripcionalmente activos tienden a estar separados de los inactivos.
Los activos se encuentran ubicados centralmente, mientras que los silentes estn confinados
prximos a la envoltura nuclear.
Tan pronto como las clulas entran en mitosis o meiosis, los fragmentos de la matriz nuclear
dirigen la condensacin de los cromosomas, constituyndose en la parte central de los mismos.

Fig. 10.1 - Esquema de un ncleo interfsico

LA ENVOLTURA NUCLEAR
La envoltura est formada por dos membranas concntricas interrumpidas por poros nucleares
y por la lmina nuclear.

Fig. 10.2- Microfotografa electrnica de la envoltura nuclear

Las membranas delimitan un espacio de 10 a 50 nm, el espacio o cisterna
perinuclear. La membrana externa en contacto con el citoplasma tiene ribosomas adheridos,
que sintetizan las protenas que se vuelcan al espacio perinuclear. El espacio perinuclear se
continua con el REG.
La membrana interna posee protenas integrales que le son propias, que se unen a la lmina
nuclear y a los cromosomas.
La lmina nuclear, capa fibrosa de 10 a 15 nm en la que apoya la membrana interna, est
formada por protenas del tipo de los filamentos intermedios, polmeros de lamina o laminina
nuclear. Ellas se unen a las protenas integrales de membrana.
La fosforilacin de las laminas provoca el desensamble de la lmina nuclear causando la ruptura
de la envoltura al inicio de la divisin celular.
La lmina nuclear confiere estabilidad mecnica a la envoltura nuclear. Adems, al interactuar
con la cromatina participa en la determinacin de la organizacin tridimensional del ncleo
interfsico.
Si bien la formacin de la lmina no se requiere durante los pasos iniciales, la organizacin de la
envoltura es indispensable para el crecimiento posterior y el mantenimiento de su integridad.
Las laminas se incorporan luego que la cisterna perinuclear rodea al ADN y se inicia el
transporte entre el ncleo y el citoplasma. (Fig. 10.3)
La envoltura nuclear es un derivado del sistema de endomembranas, siendo esto evidente al
inicio de la divisin celular, cuando la envoltura se desorganiza y pasa a formar parte del
sistema de cisternas y vesculas del retculo endoplsmico.

La aparicin de la envoltura nuclear permiti que los eucariontes aislaran los procesos
genticos principales, como la autoduplicacin del ADN o la sntesis de ARN. Adems esto
posibilit que el ARNm se modifique dentro del ncleo antes de ser traducido en los ribosomas.
Estas modificaciones no ocurren en los procariontes, ya que a medida que la ARN polimerasa
sintetiza el ARN, simultneamente el extremo 5 se une al ribosoma y comienza la traduccin.

Fig. 10.3 - Mecanismo de formacin y desintegracin de la membrana nuclear

COMPLEJOS DE PORO NUCLEAR

La
envoltura
nuclear
presenta
poro nuclear (CPN) (Fig. 10.4).

estructuras

discoidales

llamadas complejos

de

El nmero de CPN es variable, incrementndose a medida que aumenta la actividad celular. En

una clula de mamfero hay entre 3000 a 4000 complejos de poro. Cada CPN es una estructura
macromolecular compleja constituida por un gran nmero de protenas de disposicin
octamrica. Est formado por:

Ocho columnas proteicas, que forman las paredes laterales del poro.

Un anillo externo, formado por ocho unidades proteicas.

Un anillo interno, tambin con estructura octamrica.
Protenas de anclaje que fijan cada columna al espacio perinuclear.
Protenas radiales que se proyectan desde las columnas hacia la luz del poro, a manera de
diafragma

 Protenas fibrilares fijas al anillo interno y externo. En la cara nuclear convergen para
formar una canastilla o cesta. A lo largo de estas fibrillas se ubicannucleoporinas que
intervienen en el transporte de sustancias a travs del poro.
Un poro central o abertura.

Fig. 10.4 - Esquema del complejo de poro nuclear

La luz de los CPN suele presentarse obturada por las protenas que circulan a travs del poro,
como por las carioportinas (Kap) que actan como eficientes transportadores en el trfico
ncleo/citoplasma.
Los CPN presentan uno o varios canales acuosos a travs de los cuales las pequeas molculas
solubles en agua difunden (transporte no regulado). Las molculas de mayor peso molecular son
transportadas en forma activa, por lo que requieren energa y molculas transportadoras.
Se importan dentro del ncleo:
Las protenas sintetizadas en el citoplasma necesarias para ensamblar los ribosomas.
Los factores de transcripcin requeridos en la activacin o inactivacin de los genes.
Los factores de empalme necesarios en el proceso de maduracin de los ribosomas.
Las molculas y macromolculas ensambladas y exportadas desde el ncleo al citoplasma
incluyen:

 Las subunidades ribosomales

ARNm
ARN de transferencia
Factores de transcripcin que son devueltos al citoplasma para ser reutilizados.
Los mecanismos implicados en el transporte a travs del poro son diferentes al transporte de
protenas en las membranas de otros organelos . Por ejemplo, las protenas nucleares son
transportadas a travs del poro manteniendo su conformacin plegada, por el contrario las
protenas que no se localizarn en el ncleo se despliegan durante el transporte.
Los complejos de poro nuclear hacen de la envoltura nuclear una barrera selectiva entre el
ncleo y el citoplasma. Estos complejos constituyen la principal va de comunicacin entre el
compartimiento nuclear y citoplasmtico de la clula ante el pesado trfico molecular. Aun
cuando las protenas pequeas y otras molculas viajan a travs de los canales perifricos, las
protenas de gran tamao deben poseer una etiqueta para ingresar por el canal central. Estas
protenas sintetizadas en el citoplasma contienen la seal de localizacin nuclear (nuclear signal
localization, NSL).
Tampoco los ARN pueden salir de ncleo por s mismos. Ellos salen a travs del complejo de
poro con una protena especial que posee una seal nuclear de exportacin (nuclear export
signal, NES). Ambas NSL y NES consisten en una secuencia corta de aminocidos, muchos de
los cuales tienden a estar ubicados centralmente dentro de las protena.
Observemos en la Fig. 10.4, como las proyecciones filamentosas desde la cara citoslica del
complejo pueden enlazar protenas, conducindolas dentro del poro central. Los filamentos
citoslicos, el poro central y la canasta nuclear se proyectan dentro del compartimiento
nuclear. Se cree que la canasta puede ser un rea importante de paso para la preparacin de
las ribonucleoprotenas (RNP) antes de ser exportadas.
Las molculas de mayor tamao requieren de una protena transbordadora o carioportina. La
superfamilia de carioportinas esta integrada por: importinas . exportinas y transportinas .

IMPORTACIN DE PROTENAS (Fig. 10.5)

Las importinas son heterodmeros, formados por dos subunidades, la subunidad-a se une a la
NSL de la protena nuclear permitiendo la unin con la subunidadad-b. Esta unin origina una
importina funcional que lleva unida a la protena nuclear a ser transportada.
El complejo importina funcional se pone en contacto con los filamentos citoslicos, donde
guiado por las nucleoporinas (Nup), llega al poro central. La translocacin de complejo
importina/carga es regulado por la pequea RanGTPasa [1] , que se une a la subunidad b de la
importina. Esta b-importina es la encargada de interactuar con el poro provocando su dilatacin
y posibilitando el ingreso de la protena nuclear. La translocacin de protenas es un proceso

activo. Cuando el complejo penetra al interior del ncleo, las subunidades de importina se
separan y la carga es liberada. La disociacin de las subunidades causa entonces un nuevo
cambio en su forma, dejando al descubierto la NES de cada subunidad. Otras protenas en el
poro central reconocen la NES y retornan las subunidades al citoplasma.

Fig. 10.5 - Modelo de mecanismo de importacin a travs del CPN

EXPORTACIN DE ARN
Los ARN maduros se asocian a protenas llamadas transportinas, las cuales actan como
transbordadores permitiendo el pasaje de ARN al citoplasma. En la fig. 10.6 se esquematiza
como el ARNm es llevado fuera del ncleo. Los ARNm maduros que presentan la poli A se
asocian con varias protenas, formando una partcula de ribonucleoprotena (RNP). Estas
partculas se mueven linealmente a travs de la canasta nuclear. Al igual que las importinas, las

RNP son recicladas hacia el ncleo. En el citoplasma, las CRBP ( del ingls, cytoplasmic RNAbinding proteins) reemplazan a las RNP para guiar a los ARNs a sus destinos citoslicos
correctos.

Fig. 10.6 - Modelo de mecanismo de exportacin de ARNm a travs del CPN

CROMOSOMAS Y CROMATINA
El ncleo contiene los cromosomas de la clula. Cada cromosoma consiste en una molcula nica
de ADN con una cantidad equivalente de protenas. Colectivamente, el ADN con sus protenas
asociadas se denomina cromatina. La mayor parte de las protenas de la cromatina consisten en
copias mltiples de cinco clases dehistonas.
Estas protenas bsicas son ricas en residuos de arginina y lisina cargados positivamente. Por
esta razn se unen estrechamente con los grupos fosfatos (cargados negativamente) del ADN.
La cromatina tambin contiene pequeas cantidades de una amplia variedad de protenas no
histnicas y RNP. La mayora de ellas son factores de transcripcin (por ej., el receptor
esteroide), siendo su asociacin con el ADN pasajera. Estos factores regulan que parte del
ADN ser transcripta en ARN.

NIVELES DE ORGANIZACIN DE LA CROMATINA

La observacin a travs del microscopio ptico de un ncleo interfsico, nos permite distinguir
dos tipos de cromatina. La eucromatina o cromatina laxa, de localizacin central, y la
heterocromatina o cromatina
densa,
en la periferia del ncleo
(Fig.10.7).
La heterocromatina representa aproximadamente el 10% del total de cromatina y es
considerada transcripcionalmente inactiva (Fig. 10.8).
La eucromatina se encontrara al menos en dos estados, la eucromatina accesible, que
representa alrededor del 10%, donde se encuentran los genes que se estn transcribiendo y
la eucromatina poco accesible, ms condensada (pero menos que la heterocromatina), donde
estn los genes que la clula no est transcribiendo.
Si el ncleo celular se incuba con nucleasas, enzimas que digieren el ADN, las secuencias que
primero se digieren son las que portan los genes expresados por la clula, lo que corrobora el
menor grado de condensacin de la eucromatina.

Fig. 10.7 - Microfotografa electrnica del ncleo de un hepatocito. a. eucromatina; b. RER

Fig. 10.8 - Microfotografa electrnica del ncleo de un linfocito. a. eucromatina; b.

heterocromatina, c. mitocondria

Fig. 10.9 - H1 y formacin de la fibra de 10 nm

Cuando el cromosoma en interfase se esparce artificialmente sobre agua, tiene la apariencia de
un collar de perlas. Las perlas son los nucleosomas, las unidades de enrollamiento de la
cromatina. (Fig. 10.10b)
Los nucleosomas estn formados por un centro o "core" de histonas. Dicho centro posee dos
copias de cada una de las siguientes histonas: H2A; H2B; H3 y H4
Alrededor del centro de histonas, 146 pares de bases del ADN se enrollan en dos vueltas. La
unin de las histonas al ADN no depende de una secuencia particular de nucletidos, sino de la
secuencia de aminocidos de la histona. Las histonas son unas de las molculas ms conservadas
durante el transcurso de la evolucin. La histona H4 en el ternero difiere de la H4 de la planta
de poroto en slo 2 residuos de aminocidos de una cadena de 102. Alrededor de 60 pares de
bases de ADN unen un nucleosoma con el prximo. Cada regin de unin es el ADN espaciador.
La quinta histona, la H1, conecta a los nucleosomas y acta como una banda de goma,

mantenindolos juntos dentro de una misma cuerda enrollada. Esta estructura se conoce
como fibra de 10nm, siendo el primer grado del empaquetamiento de la cromatina. (Fig. 10.9)
Los nucleosomas se organizan, a su vez, en fibras de 30nm (solenoide), girando a manera de
resorte alrededor de un eje virtual. Esta estructura es mantenida por la interaccin de las H1
de nucleosomas cercanos. (Fig. 10.10c)
En el siguiente nivel de empaquetamiento, las fibras de 30 nm se organizan en una serie
de bucles o asas superenrolladas (Fig. 10.10d; Fig. 10.11). Estos bucles se estabilizan gracias a
la interaccin con las protenas de la matriz nuclear o andamiaje nuclear (scaffold).

Fig. 10.10 - Modelo de empaquetamiento de la cromatina

Cada bucle de cromatina representa un dominio funcional o unidad de replicacin (Fig. 10.10e).
Estos dominios contienen alrededor de 100.000 pares de bases, extensin de ADN suficiente
para acomodar varios genes de tamao promedio. Algunos genes, sin embargo, pueden abarcar
varios dominios adyacentes de un cromosoma. Cada cromosoma puede tener cien o ms
dominios.Durante la profase, los cromosomas aparecen en forma ms condensada, alcanzando la
cromatina su mayor nivel de condensacin en metafase(Fig. 10.10f). La organizacin de los
cromosomas envuelve la fosforilacin de la H1 y otras protenas, lo cual causa el plegamiento y
empaquetamiento an ms compacto de la cromatina. El andamiaje o matriz nuclear se
convierte en el centro de la estructura del cromosoma, y como la compactacin contina, ste
se pliega modo de acorden.

Fig. 10.11- Empaquetamiento de la fibra de 30 nm

El grado de condensacin de los dominios de cromatina se mantiene principalmente debido a la
asociacin con la matriz nuclear y a protenas asociadas como la topoisomerasa II o girasa,
encargada de controlar el grado de superenrollamiento del ADN (Fig. 10.11). La unin entre la
cromatina y la matriz se da a nivel de zonas altamente conservadas, denominadas secuencias
SAR o MAR (scaffold associated regions/ matrix attachment regions). Las SAR son regiones
de varios cientos de pares de bases ricas en residuos de adenina y timina, abundantes en la
heterocromatina.
Con coloraciones especiales los cromosomas, revelan diferencias estructurales de importancia
funcional. Las bandas oscuras consisten en cromatina altamente condensada, mientras que las
bandas claras se corresponden con cromatina ms laxa.
El examen de la cromatina en bandas claras y oscuras revela que ambos tipos de cromatina
estn acomodados en bucles de distintos tamaos y que a su vez se proyectan desde el
andamiaje plegado. El andamiaje est muy plegado en la heterocromatina, y es ms lineal en las

bandas de eucromatina, formando bucles ms amplios. Las histonas de la eucromatina estn

fuertemente acetiladas. Estos cambios afectaran el grado de empaquetamiento de la
eucromatina, hacindola ms accesible para la transcripcin de sus genes.
Las caractersticas de la hetero y eucromatina son:

Tabla 10.1 - Caractersticas de la Cromatina

Tipo de cromatina

Estado fsico

Cambio qumico

Tipo de genes

Replicacin

Eucromatina

Laxa

Acetilada

Activos

Fase S temprana

Heterocromatina

condensada

Metilada

Silentes

Fase S tarda

Los cromosoma en metafase tambin poseen un revestimiento de RNP. Dicho revestimiento

deriva de los componentes del nuclolo. Estos cromosomas se constituyen en el vehculo para
dividir el material nucleolar entre las futuras clulas hijas. El empaquetamiento de la cromatina
permite confinar al ADN dentro del ncleo La molcula de ADN de un cromosoma humano
contiene 50 x 106 pares de nucletidos en el cromosoma ms pequeo (1.7 cm con la molcula
extendida) a 250 x 106 pares de nucletidos en el ms largo ( 8.5 cm). Midiendo extremo con
extremo el total de cromosomas de una clula humana diploide, el ADN se extiende ms de 2
metros. El empaquetamiento del ADN en forma de cromatina, no solamente le permite entrar
dentro de los lmites del ncleo, sino tambin lo protege del ataque de las nucleasas.

EL CROMOSOMA EUCARIOTA

(Fig. 10.12)

Cada cromosoma eucariota consiste en una molcula simple de ADN de alrededor de 150
millones de pares de nucletidos.
La molcula de ADN en el cromosoma eucariota es lineal, por lo tanto posee dos extremos (en
contraste con el cromosoma bacteriano que es circular).
La molcula de ADN de un cromosoma tpico eucariota contiene:
Un conjunto lineal de genes que codifican para ARN y protenas interrumpido por
Muchas secuencias de ADN no codificante.

El ADN no codificante incluye:

Secuencias de aproximadamente 170 nucletidos de ADN satlite, repetidas miles de veces,
que corresponden al centrmero.
Secuencias repetitivas en los extremos del cromosoma llamadas telmeros.
Mltiples
secuencias
sealizadoras
altamente
conservadas,
denominadas origen
de replicacin (ORI) , necesarias para que se realice la duplicacin del ADN en un tiempo
breve.

Fig. 10.12- Secuencias de un cromosoma eucariota estable en las diferentes etapas del ciclo
celular
El centrmero es una constriccin primaria localizada centralmente o hacia los extremos de
cada cromosoma.
El ADN centromrico como ya mencionamos es altamente repetitivo y se encuentra siempre
condensado siendo parte de la heterocromatina.

Fig. 10.13- Sntesis de telmeros por la telomerasa. a) La telomerasa se une al telomero; b) La

telomerasa alarga los extremos de la cadena 3`; c) La telomerasa avanza; d) La ADN
polimerasa sintetiza la cadena retrasada.
Los telmeros son cruciales en la vida de la clula. Ellos son necesarios para la duplicacin
completa del cromosoma, los protegen de las nucleasas, evitan que los extremos del cromosoma
se fusionen entre s y facilitan la interaccin del cromosoma con la envoltura nuclear.
Los telmeros de las clulas humanas contienen la secuencia 5'TTAGGG3, que se repite
aproximadamente 2000 veces.
5 '... ..TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG..... 3 '
3 '... ..AATCCC AATCCC AATCCC AATCCC A..... 5 '
La cadena rica en guanosina corre en direccin 5' a 3', extendindose 12 a 15 nucletidos ms
all de la cadena rica en citosina, formando un apndice en una de las cadena en cada extremo

del cromosoma. Este desnivel se mantiene de generacin en generacin por medio de una
enzima especial, la telomerasa, que agrega nuevas unidades al extremo 3' de la cadena rica en
guanosina (Fig. 11.13).
La telomerasa es una ribonucleoprotena, la cual provee un molde de AAUCCC que gua la
insercin de la secuencia TTAGGG. Entonces la telomerasa es una retrotranscriptasa, sintetiza
ADN a partir de un molde de ARN.
Las clulas con telomerasa activa pueden compensar el acortamiento de los telmeros durante
la duplicacin del ADN.
La telomerasa activa se encuentra solamente en:
Las clulas de la lnea germinal, incluyendo clulas troncales embrionarias
Eucariotas unicelulares
Clulas cancerosas

Los cromosomas se diferencian por la ubicacin del centrmero

Durante la mayor parte de la vida de la clula, los cromosomas son demasiado largos y tenues
para ser vistos bajo un microscopio.

Fig. 10.14- Microfotografa electrnica de un cromosoma metafsico

Antes de que una clula se divida, cada cromosoma se duplica (durante la fase S del ciclo
celular).

Al inicio de la divisin celular, los cromosomas duplicados se condensan en estructuras que

pueden teirse con facilidad (por ello denominadas cromosomas), pudindose observar bajo el
MO.
La condensacin es tal que el cromosoma es aproximadamente 10.000 veces ms corto que la
molcula de ADN que contiene (Fig. 10.14). A primera vista, los cromosomas duplicados se
mantienen juntos por el centrmero. Mientras estn juntos, es comn llamar a cada parte del
cromosoma duplicado, cromtida hermana.
Esto no debe confundirnos, cada una de las "cromtidas hermanas" es un cromosoma
completo. El cinetocoro es una estructura proteica discoidal que forma parte del centrmero y
ayuda a separar las cromtidas hermanas. Es el sitio de unin con los microtbulos del huso,
que contienen los motores de dinena que tiran a los cromosomas en la anafase. Adems
proveen una plataforma para ensamblar y movilizar las protenas que construyen el huso.
La posicin del centrmero, determina el largo de los brazos del cromosoma; en base a esto se
puede clasificar a los cromosomas en: (Fig. 10.15)
Metacntricos: el centrmero en posicin central determina brazos de igual longitud
Submetacntricos: un par de brazos es ms corto que el otro, pues el centrmero se
encuentra alejado del centro.
Acrocntricos: el centrmero se halla prximo a uno de los extremos, por lo tanto uno de los
brazos es casi inexistente.

Fig. 10.15- Tipos de cromosomas

Los cromosomas acrocntricos poseen una masa de cromatina llamada satlite, en el extremo
del brazo corto. El satlite se halla aislado del resto del cromosoma por la constriccin
secundaria. La zona aledaa al satlite de los cromosomas acrocntricos contribuye a formar el
nuclolo (Fig. 10.16)

El ms corto de los dos brazos del cromosoma se llama p; el ms largo es el brazo q.

Fig. 10.16- Partes de un cromosoma mittico.

Todas las especies tienen un nmero caracterstico de pares de cromosomas homlogos llamado
nmero diploide (2n). El nmero diploide del hombre es 46.
El cariotipo es una representacin grfica o fotogrfica de los cromosomas presentes en el
ncleo de una sola clula somtica de un individuo. Cada miembro del par de cromosomas
homlogos proviene de cada uno de los padres del individuo cuyas clulas examinamos.
El cariotipo de la mujer contiene 23 pares de cromosomas homlogos, 22 pares
son autosomas y el par restante, cromosomas sexuales, ambos " X".
El cariotipo del hombre contiene los mismos 22 pares de autosomas y 1 par de cromosomas
sexuales, un cromosoma sexual "X" y un cromosoma sexual "Y" (un gen en el cromosoma Y
designado SRY es el que pone en marcha el desarrollo de un varn, por lo tanto determina el
sexo).
El anlisis del cariotipo involucra la comparacin de cromosomas por su longitud, la ubicacin de
los centrmeros y la ubicacin y los tamaos de las bandas G.
Durante la mitosis, los 23 pares de cromosomas humanos se condensan y son visibles con un
microscopio ptico.
Preparacin de un Cariotipo: La preparacin de un cariotipo normalmente involucra bloquear
las clulas (glbulos blancos) durante la mitosis con colchicina y marcar los cromosomas
condensados con tincin Giemsa. La tincin marca las regiones de los cromosomas que son ricos
en pares de nucletidos entre A -T produciendo una banda oscura, la banda G. Luego de la

tincin, los cromosomas se fotografan, se recortan y se ordenan de acuerdo a su longitud. Los

de igual tamao se aparean segn la ubicacin de su centrmero.
Una error comn es suponer que cada banda representa un slo gen. En realidad las bandas ms
pequeas contienen ms de un milln de pares de nucletidos y potencialmente cientos de
genes. Por ejemplo, el tamao de una banda pequea es igual a toda la informacin gentica de
una bacteria.
El anlisis del cariotipo es una de muchas tcnicas que nos permiten investigar las miles de
enfermedades genticas que se pueden encontrar en los seres humanos.

Fig. 10.17 - Cariotipo femenino normal: Los autosomas se ordenan en grupos por tamao y
posicin del centrmero.

Fig. 10.18 - Mapa estndar (Idiograma) de patrones de bandeo del cromosoma 2. Los nmeros
corresponden a las regiones y bandas. A la derecha , idiograma del cariotipo humano masculino.

El nuclolo
En el nuclolo tiene lugar la formacin de subunidades ribosmicas, la sntesis y procesamiento
de ARNr y actualmente se considera que desempea un importante papel en la regulacin del
ciclo celular. [2]
El nuclolo es un aglomerado de fibras de cromatina de distintos cromosomas. En el hombre,
los pares 13,14, 15, 21 y 22, aportan sectores de cromatina que forman el nuclolo. Todos estos
cromosomas son acrocntricos y presentan constricciones secundarias denominadas
organizadores nucleolares (NOR), donde estn los genes que codifican ARNr (Fig. 10.19).

Fig. 10.19 - Esquema de nuclolo indicando los bucles de los 10 cromosomas con los genes para
el ARNr

Fig. 10.20 - Microfotografa electrnica del nuclolo. NE, Envoltura nuclear; NO. Organizador
nucleolar; PG, Zona granular; PF, Zona fibrilar.
El nuclolo aparece como una estructura simple carente de componente membranoso, en la que
diferenciamos dos regiones:
Una zona fibrilar central, formada por ADNribosmico y ARNr naciente

 Un zona granular perifrica donde los grnulos estn formados por las subunidades
ribosmicas en proceso de ensamblado (Fig. 10.20).
Los nuclolos, al igual que la envoltura nuclear desaparecen en la mitosis y se reorganizan
alrededor de los segmentos de ADNr, que como su nombre lo indica, codifica ARNr. Siendo el
ARNr el ms abundante dentro de los tipos de ARN, existen mltiples copias del gen que lo
codifica. El genoma humano presenta alrededor de 200 copias del gen para ARNr. Estos genes
que promedian los 10.000 nucletidos se localizan en tndem. Cada gen est separado por ADN
espaciador y presenta asociado una molcula de ARN polimerasa I. De cada enzima parten
perpendicularmente los ARNr nacientes, tomando la apariencia caracterstica de un rbol de
navidad. Cada gen produce un transcripto llamado ARNr 45S que ser luego procesado (Fig.
10.21)
El tamao del nuclelo vara entre clulas y en la misma clula segn su actividad, pues si bien
la velocidad de transcripcin puede acelerarse, el ensamblado de las subunidades ribosomales
requiere de un tiempo ms o menos constante; es por ello que en los nuclolos grandes
observamos mayor proporcin de componente granular.

Fig. 10.21 - Microfotografa electrnica de los genes nucleolares (ADNr) durante la transcripcin.
Observe como la longitud de los transcriptos primarios aumenta a medida que nos alejamos del punto de
inicio.

AUTOEVALUACIN
1)

La eucromatina se caracteriza por:

a-

ser transcripcionamente inactiva

b-

teirse debilmente

c-

presentarse altamente condensada

d-

formar parte de genes que no se expresan

2)

En el nuclolo se sintetizan:

a-

Precursores de ARNr

b-

ARNt

c-

Pre ARNm

d-

ARNm

3)

Los organizadores nucleolares aportan informacin para la sntesis de:

a-

ARNm

b-

ARNr

c-

ARNt

d-

Ribosomas

4)

La composicin qumica y funcin de las histonas son respectivamente:

a-

protenas bsicas y forman parte en la estructura de la cromatina

b-

protenas bsicas cuya nica funcin es regular la expresin de los genes

c-

son protenas cidas e intervienen en la estructura de la cromatina

d-

son protenas cidas e intervienen en la sntesis de ADN polimerasa.

5)

El andamiaje o matriz nuclear:

a-

est formado exclusivamente por lminas

b-

se asocia a la cromatina a nivel de las SAR/MAR del ADN

c-

est ms replegado en la eucromatina

d-

se desorganiza durante la divisin celular

6)

Presentan seal de localizacin nuclear:

a-

las hormonas esteroides

b-

todas las riboprotenas

c-

los factores de transcripcin

d-

todas las anteriores son correctas

7)

Los dominios funcionales de la cromatina:

a-

aparecen por empaquetamiento de la fibra de 10 nm

b-

dependen exclusivamente de la interaccin con la H1

c-

representan individualmente un gen

d-

funcionan como unidades de replicacin del cromosoma.

8)

El pasaje de molculas a travs de los CPN:

a-

no es regulado y requiere de etiquetas o seales en las molculas transportadas

b-

no es regulado para molculas pequeas y solubles que circulan por los canales perifricos

c-

siempre es regulado y no depende del tamao de la molcula a transportar

d-

requiere que todas las molculas a ser transportadas tengan una NSL

9)

Cul de las siguientes afirmaciones es FALSA con respecto a la telomerasa?

a-

es la enzima encargada de formar los telmeros

b-

es una ARN polimerasa

c-

se inactiva poco despus del nacimiento

d-

las clulas cancerosas conservan la telomerasa siempre activa

10) Un investigador inyecto un cultivo celular con suero anti-laminina, y observ:

a-

que la clulas no pudieron dividirse

b-

que las clulas luego de la mitosis no pudieron organizar su envoltura nuclear

c-

que los complejos laminina/antilamina se acumularon dentro del ncleo

d-

que la envoltura nuclear formada resulto frgil e inestable

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Funcin

El ncleo es la parte central de la clula y como tal, tiene

diversas funciones:

*En el ncleo se guardan los genes en forma de cromosomas (durante la mitosis) o

cromatina (durante la interfase)y se protegen de las fuerzas mecnicas que se producen
por el movimiento del citoesqueleto.
*Transporta los factores de regulacin y los genes a travs de los poros nucleares
*Produce mensajes (ARNm) que codifica protenas.
*Produce ribosomas en el nucleolo.Funciones nucleolo:
La funcin principal del nuclolo es la biosntesis de ribosomas desde sus componentes de
ADN para formar ARN ribosomal."El nucleolo es una mquina productora de
ribosomas cuyo destino final es el citosol" Est relacionado con la sntesis de
protenas.
Adems, investigaciones recientes, han descrito al nuclolo como el responsable del trfico
de pequeos segmentos de ARN. El nuclolo adems, interviene en la maduracin y el
transporte del ARN hasta su destino final en la clula.
Aunque el nuclolo desaparezca en divisin, algunos estudios actuales aseguran que regula
el ciclo celular. La estructura granular de los nucleolos solo puede ser observada con
microscopia electrnica.

En negro podemos observar claramente el nucleolo.

*Pero la principal funcin del ncleo celular es controlar la expresin gnica y mediar en
la replicacin del ADN durante el ciclo celular ya que es la sede de la replicacin
(duplicacin del ADN) y la transcripcin (sntesis de ARN), mientras que la traduccin
ocurre en el citoplasma. En las clulas procariotas todos esos procesos coinciden en el
mismo compartimento celular.

Compartimentalizacin celular

Se refiere a la capacidad de la envoltura nuclear que permite al ncleo controlar su

contenido y separarlo del resto del citoplasma cuando sea necesario. Esto es importante
para controlar procesos en cualquiera de los lados de la membrana nuclear. En algunos
casos, cuando se precisa restringir un proceso citoplasmtico, un participante clave se
retira al ncleo, donde interacta con otros factores de transcripcin para reprimir la
produccin de ciertas enzimas.
Un ejemplo de esta capacidad se da en el caso de la gluclisis, una ruta celular en la que se
utiliza la glucosa para producir energa. La hexoquinasa es la enzima responsable del
primer paso de la gluclisis, produciendo glucosa-6-fosfato a partir de la glucosa. A altas

concentraciones de fructosa-6-fosfato, una molcula que se forma posteriormente a partir

de la glucosa-6-fosfato, una protena reguladora retira la hexoquinasa al ncleo donde
forma un complejo con otras protenas nucleares que reprime la transcripcin de los genes
implicados en la gluclisis.

Una vez que la glucosa entra a la clula y es convertida a glucosa-6fosfato, queda "atrapada", puede ser utilizada slo en el metabolismo de
esa clula.

En otro ejemplo, para controlar qu genes se deben transcribir, la clula impide el acceso
fsico de algunosfactores de transcripcin responsables de regular la expresin gnica
hasta que son activados por otras rutas de sealizacin. Esto impide que se den incluso
pequeos niveles de expresin gnica inadecuada.En el caso de los genes controlados
por NF-B(el factor de transcripcin KAPPA B), que estn implicados en la mayor parte
de las respuestas inflamatorias.
A diferencia de otros factores de transcripcin, que generalmente se encuentran en el
ncleo, NF-kB se localiza de manera basal en el citoplasma en un estado inactivo y necesita
un estmulo especfico para traslocarse al compartimiento nuclear. Slo en las clulas B y
sus progenitoras se encuentra NF-kB constitutivamente en el ncleo.
El panorama actual muestra que este factor regula la transcripcin de una gran variedad de
genes, en particular aquellos involucrados en la respuesta inmune y control de la
proliferacin celular.
La compartimentalizacin permite a la clula impedir la traduccin de ARNm no ayustado.
El ARNm contiene intrones que se deben retirar antes de ser traducidos para producir
protenas funcionales. El ayuste se efecta en el interior del ncleo antes de que el ARNm
pueda acceder a los ribosomas para su traduccin. Sin el ncleo los ribosomas traduciran
ARNm recin transcrito y sin procesar, lo que producira protenas mal plegadas y
deformadas.

Procesamiento del pre-ARNm

Micrografa de una transcripcin gentica en curso de cido ribonucleico ribosomal que

ilustra el crecimiento de los transcritos primarios.

Implica en primer lugar la transcripcin, en la que el ADN se utiliza como molde para
producir ARN. En el caso de los genes que codifican protenas, el ARN generado por este
proceso es el ARN mensajero (ARNm), que posteriormente precisa ser traducido por los
ribosomas para formar una protena. Puesto que los ribosomas se localizan fuera del
ncleo, el ARNm sintetizado debe ser exportado.

Animacin proceso de transcripcin:

http://www.stolaf.edu/people/giannini/flashanimat/molgenetics/transcription.swf

Video transcripcin:
Puesto que el ncleo es el lugar donde se da la transcripcin, est dotado de un conjunto de
protenas que, o bien estn implicadas directamente en este proceso, o en su regulacin.
Entre stas encontramos lashelicasas, que desenrollan la molcula de ADN de doble
cadena para facilitar el acceso de la maquinaria de sntesis, la ARN polimerasa, que
sintetiza el ARN a partir del molde de ADN y la topoisomerasa, que vara la cantidad de
superenrollamiento del ADN, as como una amplia variedad de factores de transcripcin
que regulan la expresin gnica. La topoisomerasa se encarga de desdoblar, y la helicasa de
separar (rompiendo puentes de hidrgeno que unen a las bases nitrogenadas).

-EN CLULAS EUCARIOTAS

El ARN mensajero obtenido despus de la transcripcin se conoce como transcrito
primario o ARN precursor (pre-ARN), que en la mayora de los casos no se libera del
complejo de transcripcin en forma totalmente activa, sino que ha de sufrir modificaciones
antes de ejercer su funcin (procesamiento omaduracin del ARN). Entre esas
modificaciones se encuentran la eliminacin de fragmentos (splicing), la adicin de otros
no codificados en el ADN y la modificacin covalente de ciertas bases nitrogenadas.
Concretamente, el procesamiento del ARN en eucariotas comprende 6 diferentes fases:

Como podemos ver, las 3 primeras tienen lugar en el ncleo celular y las tres ltimas no:

1.
Adicin al extremo 5' de la estructura denominada caperuza o casquete (o CAP,
su nombre en ingls) que es un nucletido modificado de guanina, la 7-metilguanosina,
que se aade al extremo 5' de la cadena del ARNm transcrito primario (ubicado an en el
ncleo celular) mediante un enlace 5'-fosfato 5'-fosfato en lugar del habitual enlace 3',5'fosfodister. Esta caperuza es necesaria para el proceso normal de traduccin del ARN y
para mantener su estabilidad; esto es crtico para el reconocimiento y el acceso apropiado
del ribosoma.
2.
Poliadenilacin: es la adicin al extremo 3' de una cola poli-A, una secuencia
larga de poliadenilato, es decir, un tramo de RNA cuyas bases son todas adenina. Su
adicin est mediada por una secuencia o seal de poliadenilacin (AAUAAA), situada
unos 20-30 nucletidos antes del extremo 3' original. Esta cola protege al ARNm frente a

la degradacin, aumentando su vida media en el citosol, de modo que se puede sintetizar

mayor cantidad de protena.
3.
En la mayora de los casos, el ARN mensajero sufre la eliminacin de secuencias
internas, no codificantes, llamadas intrones. Esto no ocurre en clulas procariontes, ya que
estas no poseen intrones en su ADN. El proceso de retirada de los intrones y conexin o
empalme de los exones se llama ayuste, o corte y empalme (en ingls, splicing). Ciertas
enzimas parecen estar involucrados en editar el RNA antes de su exportacin fuera del
ncleo, intercambiando o eliminando nucletidos errneos.

4.
El ARN mensajero maduro es trasladado al citosol de la clula, en el caso de los
seres eucariontes, a travs de poros de la membrana nuclear.
5.
Una vez en el citoplasma, el ARNm se acoplan los ribosomas, que son la
maquinaria encargada de la sntesis proteica. En procariontes, la unin de los ribosomas
ocurre mientras la cadena de ARNm esta siendo sintetizada.
6.
Despus de cierta cantidad de tiempo el ARNm se degrada en sus nucletidos
componentes, generalmente con la ayuda de ribonucleasas.