Interpretacin de los resultados de los

anlisis
de micotoxinas en alimentos y piensos
Simposium Biovet 2007

INTRODUCCIN

Micotoxinas
Las micotoxinas son metabolitos secundarios producidos por
los hongos presentes en el alimento.

La produccin de micotoxinas depende de factores como la

especie y cepa de hongo, especie vegetal, humedad y
temperatura y presencia de plagas.

La produccin de micotoxinas produce una prdida de

calidad en el alimento.

Micotoxinas
Su incidencia vara segn el rea geogrfica y la poca del
ao.

Son txicas: producen micotoxicosis y disminucin de la

productividad.

Su reduccin en los alimentos es posible mediante la

aplicacin de Anlisis de Puntos Crticos.

Toxicidad de las micotoxinas

Los principales factores que influyen sobre la toxicidad de las
micotoxinas son:

La biodisponibilidad y toxicidad de la micotoxina.

Los efectos combinados entre ellas.

La cantidad de micotoxina ingerida diariamente.

La continuidad o intermitencia de ingestin del alimento

contaminado.

El peso, estado fisiolgico y de salud del animal.

La edad del animal.

Micotoxicosis
Micotoxicosis (1962, Forgacs y Carl): intoxicacin del
husped como consecuencia de la entrada al cuerpo de una
sustancia txica de origen fngico.

En algunos casos presentan una sintomatologa evidente. La

micotoxicosis subclnica provoca una disminucin de la
productividad.

La susceptibilidad a la micotoxicosis depende de la especie,

edad, sexo y concomitancia con otras patologas.

Micotoxicosis
Las micotoxicosis causan:

ASPECTOS NUTRICIONALES

ASPECTOS SANITARIOS

Reduccin del consumo

de alimento.

Aparicin de micotoxicosis
propias de cada micotoxina.

Reduccin de la absorcin
de nutrientes.

Inmunosupresin: aparicin
de otras patologas.

CLASES DE MICOTOXINAS Y
MECANISMO DE ACCIN

Micotoxinas
Gran nmero de micotoxinas descritas.

Diferente peso molecular y de estructura variada:

complejidad para establecer una clasificacin.

Permanecen asociadas al hongo

productor o al sustrato.
Muchas de ellas son estables frente al
procesamiento (qumico, fsico).

Persistencia en
la cadena
alimentaria

Clasificacin segn patologa

Hepatotoxinas: esporidesmina, aflatoxinas,luteoskirina,cicloclorotina, rubratoxinas,
sterigmatocistina.
Nefrotoxinas: ocratoxina, citrinina.
Neurotoxinas: penitrem A, patulina, fumonisinas, citreoviridina.
Toxinas del tracto intestinal: tricoteceno, T-2 toxina, deoxinivalenol (Don, Vomitoxina),
HT2 toxina, fusarenona.
Esteroidales; estrognicas (Zearalenona),
anlogos de la vitamina D.
Sndrome hemorrgico y circulatorio: Alcaloides del ergot, aflatoxinas.

Clasificacin segn estructura qumica

Estructura qumica
La estructura qumica determina

1. El mecanismo de accin de la micotoxina.

2. El mtodo de eliminacin de la micotoxina.

Estructura qumica y mecanismo de accin

Mecanismo de accin: interaccin bioqumica a travs de la
cual una sustancia provoca un efecto biolgico.

Para que tenga lugar el efecto biolgico, es necesaria la

interaccin de la micotoxina con un receptor.

Efecto
biolgico

Estructura qumica y mecanismo de accin

Para que tenga lugar la interaccin, es necesario que existan
grupos qumicos que puedan llegar a interactuar, es decir, se
requiere que la estructura qumica de ambas molculas en el
sitio de unin sea complementaria.

MODELO LLAVE-CERRADURA

Estructura qumica y mecanismo de accin

HIPTESIS

Micotoxinas con una estructura qumica comn es posible

que interaccionen con los mismos receptores y por lo tanto
que tengan un efecto biolgico similar.

Estructura qumica y mecanismo de accin

En la prctica...
T2 toxina, HT2 toxina, deoxinivalenol, nivalenol...
...presentan un grupo sesquiterpeno en la estructura...

y todos ellos tienen un efecto necrosante por contacto sobre las mucosas

Estructura qumica y mecanismo de accin

En la prctica...
Aflatoxinas B1, B2, G1, G2, sterigmatocistina...
...presentan un grupo cumrico en la estructura...

Aflatoxina B1

y todas ellas tienen un efecto hemorrgico, similar a los principios

activos con actividad anticoagulante que se utilizan en humanos y que
tambin presentan una estructura cumarina (warfarina, acenocumarol).

ANLISIS DE MICOTOXINAS EN LA
PRODUCCIN DE PIENSOS

Toma de decisiones en la compra de materia prima

Rechazo
Muestreo

Adquisicin de
materia prima
(a poder ser
certificadas)

Primera inspeccin:
% Humedad > 14%
Granos rotos
Mal estado

Concentracin por encima de las

especificaciones. Rechazo.
Concentracin aceptable.
Valorar la aplicacin
detoxificantes (ej.
captadores).

Anlisis de
micotoxinas
Toma de
decisiones

Adopcin de
medidas para el
correcto manejo
y conservacin.

Tcnicas analticas ms comunes

Cromatografa en Capa Fina (TLC).
Cromatografa Lquida (HPLC).
Cromatografa de gases-Espectrometra de masas
(GC-MS).
Inmunoensayo(ELISA).

Concentraciones mximas permitidas

Cada vez ms pases legislan sobre las concentraciones mximas
permitidas en piensos y materias primas para alimentacin animal.
Las concentraciones mximas se establecen en funcin de:
toxicidad de la micotoxina

sensibilidad de la especie animal y la edad

carga fngica caracterstica del material vegetal

disponibilidad y lmites de deteccin del mtodo analtico

La concentracin mxima permitida para cada micotoxina vara en

funcin del pas.

Constituyen el punto de referencia a la hora de admitir o

descartar las materias primas.

Concentraciones mximas permitidas

FAO, 2003

Concentraciones mximas permitidas

Micotoxina
Aflatoxina B1
Fumonisina B1+B2
Ocratoxina A
Deoxinivalenol
Zearalenona

ppb=g/Kg
Concentracin mxima UE
5 ppb-50 ppb
(obligacin)
5000-60000 ppb
(recomendacin)
50-250 ppb
(recomendacin)
900-12000 ppb
(recomendacin)
100-3000 ppb
(recomendacin)

Otras legislaciones
T-2 Toxin+HT2+Nivalenol+Diacetoxiscirpenol

HT2 Toxina
Aflatoxin B1+B2+G1+G2

T2 Toxina

2000 ppb
100 ppb
10-20 ppb
1000 ppb

(Hungria)
(Canad)
(Chile, Colombia)
(Canad)

El lmite mximo legislado depende la especie de destino y edad y de la materia

prima o pienso.

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

Interpretacin de los resultados

A la vista de los resultados de los anlisis de laboratorio, se
realiza la toma de decisiones en funcin de:

La concentracin de cada micotoxina (efecto individual).

La concentracin de todas las micotoxinas analizadas en su

conjunto (efectos combinados) y sus posibles efectos.

Los posibles sesgos del anlisis.

La presencia de micotoxinas no analizadas.

EFECTOS COMBINADOS

Efectos combinados
Micotoxina A
dentro de los lmites
Micotoxina C
dentro de los lmites

Micotoxina B
dentro de los lmites

Ausencia de
micotoxicosis?

Efectos combinados
Existen ms posibilidades de encontrar efectos combinados en
micotoxinas:

De estructura molecular similar.

Sintetizadas por la misma especie de hongos.

Sintetizadas por la misma familia de hongos.

Efectos combinados
La aparicin de efectos combinados depende de
La concetracin de cada micotoxina.

La sensibilidad de los animales (especie, edad, estado sanitario).

Efectos combinados

Sinergismo
Efectos asociativos
entre micotoxinas

Aditividad
Antagonismo

Efecto aditivo
El efecto combinado de las micotoxinas A y B es igual a la suma de los
efectos individuales.

Efecto aditivo

Aflatoxinas + Deoxinivalenol

Aves: Afectacin del peso de proventrculo, aumento de la enzima lactato

deshidrogenasa (DHL) (indicadora de dao tisular).

Aflatoxinas + cido Ciclopiaznico

Aves: disminucin del crecimiento.

Cerdos: reduccin de la ingesta de alimento y de la ganancia de peso,
inflamacin y necrosis del tracto gastrointestinal.

Aflatoxinas + Diacetoxiscirpenol

Cerdos: Disminucin del peso vivo y del crecimiento, hepatotoxicidad,

afectacin de los parmetros serolgicos (aumento de gamma glutamil
transferasa y fosfatasa alcalina, aumento de la hemoglobina, disminucin de
la capacidad de transportar hierro.)

Efecto aditivo

Aflatoxinas + Moniliformina

Aves: Disminucin de la ganancia de peso vivo y del ndice de eficiencia.

Aumento del peso relativa del corazn y afectacin de los parmetros
bioqumicos indicativos de nefrotoxicidad y hepatotoxicidad.

Fumonisina B1 + Diacetoxiscirpenol

Pavos: Reduccin del peso vivo, hepatotoxicidad.

Fumonisina B1 + T-2 toxina

Aves: disminucin de la ganancia de peso vivo y del ndice de eficiencia,

hepato y nefrotoxicidad.

Efecto aditivo

Deoxinivalenol + Moliniformina

Pavos: aumento de peso de rin y corazn. Dao tisular en miocardio.

Citrinina + ocratoxina A

Cerdos: Ambas son nefrotxicas y su concomitancia afecta el transporte tisular

de varias molculas y la sntesis de protenas.
cido fusrico + T-2 toxina
Aves: Disminucin del consumo de alimento y de la ganancia de peso. Nefro y
cardiotoxicidad.

Ocratoxina A + T-2 toxina

Aves: Reduccin del peso vivo, aumento de peso relativo de rin, hgado,
proventrculo y molleja. Nefro y hepatotoxicidad.

Efecto sinrgico
El efecto combinado de las micotoxinas A y B es superior a la suma de los
efectos individuales.

Efecto sinrgico

Aflatoxinas + Ocratoxina A

Aves: Disminucin del peso vivo y incremento de la mortalidad. Afectacin del

hgado y nefropata severa.

Aflatoxinas + Toxina T-2

Muy importante por su prevalencia.

Aves: una disminucin del peso corporal, incremento de los pesos

relativos de rin, molleja y corazn y disminucin del volumen corpuscular
medio y de los niveles de potasio sanguneo.

Efecto sinrgico
Deoxinivalenol + Fumonisina B1
Cerdos: marcada disminucin del peso corporal.

Deoxinivalenol + Zearalenona
Cerdos: aumento de malformaciones en lechones recin nacidos.

Efecto antagnico
El efecto combinado de las micotoxinas A y B es inferior a la suma de los
efectos individuales (aunque es peor que el efecto de cada micotoxina
por separado).

Efecto antagnico

Citrinina + ocratoxina A

Aves: la presencia conjunta minimiza los efectos txicos de las micotoxinas

por separado (disminucin del crecimiento y disminucin del consumo de
agua).

Aflatoxinas + diacetoxiscirpenol

Aves: la presencia conjunta minimiza los efectos txicos de las micotoxinas

por separado (disminucin del crecimiento y disminucin del consumo de
alimento).

SESGOS DEL MTODO ANALTICO

Sesgos del mtodo analtico

1. Muestreo poco representativo
Dificultad en obtener una muestra representativa, por el gran tamao del
lote o por el tipo de almacenaje de las materias primas.
2. Mtodo de anlisis no validado
Es necesario considerar alguno que haya sido evaluado por una asociacin
analtica de prestigio internacional ej.International Organization for
Standardization (ISO).
3. Estndares de referencia de baja calidad
Dificultad para conseguir estndares en algunos pases.
% de recuperacin por disolucin de estndares slidos, <100%.
Inestabilidad de la solucin estndar.

Sesgos del mtodo analtico

4. Procedimiento de extraccin de la muestra.
4.1. Influencia del mtodo de extraccin:

Ensayo de recuperacin de aflatoxina B1 con diferentes solventes

(contaminacin natural, resultados en ppb)
FAO, 1994

Sesgos del mtodo analtico

4. Procedimiento de extraccin de la muestra.
4.1. Influencia del tiempo de extraccin:

Efecto del tiempo y del sistema de extraccin para aflatoxina B1

(Contaminacin natural, resultados en ppb) extractante metanol-agua
80:20
FAO, 1994

Sesgos del mtodo analtico

5. Concentracin en la muestra fuera de los lmites de deteccin.
Los lmites dependen del mtodo analtico escogido.

6. Interferencias con otros componentes de la muestra.

TLC: falsos positivos si las muestra contiene ciertos pigmentos naturales.
TLC: falsos positivos de aflatoxina B1 si la muestra contiene etoxiquin.
ELISA: falsos negativos para aflatoxinas en muestras de sorgo.

Sesgos del mtodo analtico

5. Errores en la cuantificacin.
Exactitud: cantidad recuperada de la micotoxina que se est
analizando desde la extraccin hasta la cuantificacin. Se verifica
realizando ensayos con una cantidad certificada de la micotoxina a
cuantificar.
Precisin: qu resultados se deben esperar cuando se analiza una
misma muestra en diferentes ocasiones.

PRESENCIA DE MICOTOXINAS NO
ANALIZADAS

Micotoxinas no analizadas
En la materia prima pueden estar presentes micotoxinas de las que no
se realizan anlisis:

1. MICOTOXINAS BIEN CONOCIDAS

De las que no se realizan anlisis rutinarios debido a motivos
econmicos, ausencia o no disponibilidad de mtodos estandarizados,
presencia poco probable, etc.
2. MICOTOXINAS POCO CONOCIDAS
Micotoxinas cuya incidencia y efectos son poco conocidos.
HAY MS DE 300 MICOTOXINAS DESCRITAS

Micotoxinas poco conocidas

Stachybotrotoxicosis
Stachybotrys chartarum
Producida por Satratoxina H, un tricoteceno 5 veces ms
txico que la toxina T2.

Descrita en caballos y en humanos.

SNTOMAS MS FREQUENTES

Irritacin y ulceracin de la boca, nariz, esfago, labios; leucopenia y

agranulocitosis; fiebre; diarrea; muerte.

Satratoxina H

Presenta un grupo sesquiterpeno

en la estructura...
... y efecto necrosante.

Micotoxinas poco conocidas

Micotoxicosis por Alternaria
Alternaria spp.
Toxinas secretadas por Alternaria spp.:
alternariol, alternariol metil ter, altenueno y cido
tenuaznico.

Descrita en cerdos, rumiantes, avicultura, humanos.

SNTOMAS MS FREQUENTES
Fotosensibilidad, mortalidad en embrionaria, lesiones en esfago, hepato y
nefrotoxicidad, diarrea, postracin, disminucin del crecimiento, hemorragias
petequiales en msculo y hgado, muerte.

Alternariol

Alternariol y alternariol metil ter

presentan estructuras cumarnicas....

... y provocan hemorragias.

Micotoxinas poco conocidas

Otros ejemplos:
Gliotoxina (P. terlikowskii, Trichoderma viride): fotosensibilidad, prdida
de peso.
Islandotoxina (P. islandicum): Hemorragias, hepatotoxicidad.
Maltorizina (A. oryzae): parlisis muscular, hepatotoxicidad.
Quetomina(Chetomium cochliodes): toxicidad general.
Rugulosina (P. rugulosum): cirrosis, nefritis.
Slaframina (Rhizoctonia leguminicola): salivacin excesiva.

CONCLUSIN

Conclusin
Para evitar la aparicin de micotoxicosis es imprescindible:
APPCC en la produccin y compra de insumos
y en el manejo de las materias primas.

Correcta interpretacin
de los anlisis de laboratorio.

Incorporacin de un
captador de micotoxinas.

MUCHAS GRACIAS
Simposium Biovet 2007