I.

INTRODUCCIN

Las protenas son principios inmediatos orgnicos constituidos por largas

cadenas de aminocidos, los cuales se unen entre s mediante enlaces
peptdico. La existencia del enlace peptdico, de aminocidos azufrados, puede
ponerse de manifiesto en el laboratorio mediante una serie de reacciones
coloreadas especficas, que sirve para la identificacin de protenas.

II.

MARCO TERICO

Las protenas son macromolculas compuestas por unidades de alfa aminocidos

que se unen entre s mediante enlaces petdicos y que alcanzan un peso molecular
igual o superior a 5000 D.
El enlace peptdico, caracterstico de estos compuestos, resulta de la reaccin del
grupo carboxilo de un aminocido con el grupo amino del otro aminocido, lo cual da
lugar a un enlace covalente de tipo carbamida .

REACION XANTOPROTEICA:
La reaccin xantoproteica es un mtodo que se puede utilizar para determinar la
cantidad de protena soluble en una solucin, empleando ntrico concentrado pero en
nuestro caso en el laboratorio utilizamos H2SO4 . La prueba da resultado positivo en
aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos aromticos, especialmente
en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali, se
torna color amarillo oscuro.
El REACCION DE BIURET:
Es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos
con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida.
Est hecho de KOH y sulfato cprico (CuSO4).El reactivo, de color azul, cambia a
violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de
cadena corta.
Objetivos:

Reconocer la presencia de algunos aminocidos en las protenas.

Conocer algunas propiedades de las protenas.
Conocer reaccin xantoproteica y de biuret.
Aprender cmo reacciona la albumina ante las sustancias respectivas.

III.

MATERIALES Y MTODOS

III.1. Materiales
Muestra

Clara de huevo

Materiales de vidrio

Tubos de ensayo

Gradilla

Varillas de vidrio

Mechero

Vasos de precipitados

Pipetas

Reactivos

Acido ntrico concentrado

Hidrxido de

sodio

III.2. Mtodos

Usamos el mtodo experimental en el cual implica la observacin, manipulacin,

registro de las variables (dependiente, independiente e intervinientes) que afectan un
objeto de estudio. A continuacin con este mtodo es indispensable usar el mtodo
analtico en el cual se fundamenta en la aplicacin del mtodo cientfico, sus
caractersticas son la exactitud, precisin, sensibilidad, limite de deteccin, intervalo
dinmico, selectividad, seguridad

IV.

DESCRIPCIN DE LA PRCTICA

REACCIN XANTOPROTEICA

1.
Colocar en el tubo de ensayo de 2 a 3 ml de solucin problema en este
caso clara de huevo
2.
Aadir 1 ml de HNO3 concentrado.
3.
Calentar al bao mara a 100 c
4.
Enfriarlo
5.
Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%.
6.
se torna color amarillo oscuro esto debido a la presencia de una
sustancia alcalina ( existe grupos aromticos)
Segn las guas qumicas es una reaccin cualitativa, ms no cuantitativa. Por ende
determina la presencia o no de protenas. Para cuantificar se usa otra reaccin, como
la de Biuret, y se hace un anlisis espectro fotomtrico.
REACCIN DE BIURET
1.
2.
3.
4.

Coger un tubo de ensayo y poner unos 3 ml de albmina de huevo.

Aadir 2ml de solucin de hidrxido sdico al 20%.
A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.
Aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica esto debido a
la presencia de enlaces peptdico (- CO- NH -) que se destruye al
liberarse los aminocidos.

El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa

cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio no
participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga
lugar.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico que permite
determinar la concentracin de protenas de una muestra mediante espectroscopa
ultravioleta-visible a una longitud de onda de 560 nm (para detectar el in Cu2+).
REACCIN DE LOS AMINOCIDOS AZUFRADOS (CISTENA Y METIONINA)

1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 ml de albmina de huevo (clara de

huevo).
2. se aade 2 ml de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. luego se aade 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%.
4. Calentar el tubo hasta ebullicin.
5. se forma un precipitado de color negruzco lo cual nos indica que se ha
formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo
que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin.
Clculos:
Para todas las reacciones se ha preparado Hidrxido de sodio a 20 % esto a
partir de Hidrxido de sodio a 40 %, en una disolucin:
Numero de moles (inicio) = numero de moles ( final )
Por lo tanto molaridad x volumen ( inicio) = molaridad x volumen ( final)
La preparacin de sulfato cprico al 1 % fue de la siguiente manera;
Se toma 9.9 g de sulfato cprico con 0.1g de agua destilada
Se combina y agita ambas sustancias y luego se forma la disolucin
deseada
La preparacin del acetato de plomo al 5 % fue:
Se toma 0.5 ml de acetato concentrado con 9.5 ml de agua destilada
Se agita las sustancias y se obtiene la disolucin

V.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

Resultados y Discusiones
1. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?
En forma rpida ya que cambia sus propiedades por efecto de un agente
externo, se coagula como una cido, una base o una sal como en este caso el
acido HNO.
2. Cul de los 3
desnaturalizacin?

agentes

utilizados

tiene

mayor

poder

de

Con el acido sulfrico se tiene mayor poder de desnaturalizacin ya que tiene

mayor prdida de estructura nativa por ser ste un acido fuerte.
3.

Cmo podramos saber si una sustancia desconocida es una protena?

Si es un lquido, primero se agregan cidos (como el cido actico) para
desnaturalizar la protena (de ser as, se formarn grumos que pueden o no
precipitarse al fondo). Despus, a ese precipitado se le agrega el reactivo de
biuret, que cambia a violeta en presencia de protenas, y a rosa cuando se
combina con poli pptidos de cadena corta.

4. Qu coloracin da la reaccin del biuret?

Provoca una coloracin rosa - violcea.
5. Una protena coagulada podra dar la reaccin del biuret?
Claro que si, el reactivo reacciona con cualquier protena liquida o solida. Por
ejemplo cuando haces una cuantificacin de protenas en suero o cuando
haces una prueba cualitativa en huevos, carnes, papas, etc.
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos
cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de
composicin desconocida.
6. Si se realiza la reaccin del biuret sobre un aminocido como la glicina?
Es positiva o negativa?
Si analizamos slo UN AMINOCIDO, la reaccin debera dar negativa, ya que
no hay ningn enlace peptdico (es slo 1 aminocido! El enlace peptdico se
da entre 2 aminocidos).

VI.

CONCLUSIONES

Las protenas estn constituidas por aminocidos, por los cuales los
mtodos se basan en el reconocimiento de aminocidos.
Este proceso nos sirve para reconocer si existe protenas o no en
ciertos tipos de sustancias en una solucin.
Segn los resultados, ninguna sustancia muestra la misma
composicin que la solucin original.
Las protenas son sensibles con las sales metlicas pesadas,
formando precipitados.

VII.

BIBLIOGRAFA

http://html.rincondelvago.com/biologia_41.html
http://www.joseacortes.com/practicas/protidos.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna
- Qumica General Oswaldo Jauregui Machicao