ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA VISIBLE

La espectroscopia
visible (UV/VIS)

ultravioleta-visible o espectrofotometra
es

una espectrofotometra.

una espectroscopia
Utiliza radiacin

de

emisin

ultravioletade

electromagntica(luz)

fotones y
de

las

regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro
electromagntico, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La
radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca
transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas.
La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales
de molculas, y adems, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia.
Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes
de soluciones de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos
altamente conjugados.
Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar
pequeas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en
aleaciones o la concentracin de cierto medicamento que puede llegar a ciertas
partes del cuerpo.
Una diferencia obvia entre ciertos compuestos es su color. As, la quinona es
amarilla; la clorofila es verde; los 2,4-derivados del dinitrofenilhidrazona de
aldehdos y de cetonas se extienden en color de amarillo brillante a de color rojo
oscuro, dependiendo de la conjugacin del enlace doble; y el aspirin es
descolorido.

Longitud de onda: se define como la distancia entre los picos adyacentes y

puede ser medida en metros, centmetros, o nanometros (

meters).

Frecuencia: es el nmero de ondas por ciclos usualmente sus unidades

estn dadas en Hertz que son ciclos por segundos (Hz).

La luminiscencia ocurre debido a la emisin de luz por una sustancia determinada

y esto ocurre cuando un electrn regresa a su estado inicial despus de haber
sido excitado y libera una energa como un fotn. Podemos encontrar tres tipos de
nombres para la espectroscopia de luminiscencia, para diferentes tcnicas:

Espectroscopia de fluorescencia molecular

Espectroscopia de fosforescencia molecular

Espectroscopia de quimiluminiscencia

El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorcin

de radiacin ultravioleta visible por una molcula, causando la promocin de
un electrn de un estado basal a un estado excitado, liberndose el exceso de
energa en forma de calor. La longitud de onda ( ) comprende entre 190 y 800 nm.
La luz visible o UV es absorbida por los electrones de valencia, stos son
promovidos a estados excitados (de energa mayor). Al absorber radiacin
electromagntica de una frecuencia correcta, ocurre una transicin desde uno de
estos orbitales a un orbital vaco. Las diferencias entre energas varan entre los
diversos orbitales. Algunos enlaces, como los dobles, provocan coloracin en las
molculas ya que absorben energa en el visible as como en el UV, como es el
caso del -caroteno.
Cuando un haz de radiacin UV-Vis atraviesa una disolucin conteniendo
un analito absorbente, la intensidad incidente del haz (Io) es atenuada hasta I.
Esta

fraccin

de

radiacin

que

ha

logrado

traspasar

la

muestra

es

denominada transmitancia (T) (T = I/Io). Por aspectos prcticos, se utilizar

la absorbancia (A) en lugar de la transmitancia (A = -logT), por estar
relacionada linealmente con la concentracin de la especie absorbente segn
la Ley de Beer-Lambert: A = lc ( : coeficiente de absortividad molar, l: camino
ptico, c: concentracin de la especie absorbente).

EL ESPECTRO ELECTROMAGNETICO
La espectroscopia estudia la interaccin entre la radiacin electromagntica y la
materia. En esta interaccin la radiacin electromagntica puede comportarse
como onda o como partcula, aunque no se ha observado ningn fenmeno fsico
en el que ambos comportamientos se den simultneamente.
Cuando se comporta como onda, est constituida por un campo elctrico y otro
magntico que oscilan perpendiculares y se propagan a la velocidad de la
luz c=300000km/s.

El espectro electromagntico clasifica las diferentes radiaciones electromagnticas

segn su longitud de onda o frecuencia. Las ondas de radio son las de mayor
longitud de onda y menor frecuencia, en el otro extremo encontramos los Rayos
gamma, siendo la radiacin de menor longitud de onda y mayor frecuencia.

Se define la longitud de onda , como la distancia entre dos mximos o mnimos

sucesivos. A esta distancia se la denomina ciclo.\\ Se define la frecuencia ", como
el nmero de ciclos que pasan por un punto del espacio en un segundo. La unidad
de frecuencia es ciclos/s o hercios.
La longitud de onda y la frecuencia estn relacionados entre s por la expresin:
=c(1)
-Siendo c la velocidad de la luz.
En su comportamiento corpuscular la radiacin electromagntica interacciona con
la materia en forma de partculas llamadas fotones, cuya energa viene dada por la
ecuacin de Planck.
E=h(2)
-Donde h=6,62621034Js es la constante de Planck.

TECNICAS ESPECTROSCOPICAS
Existen tres zonas del espectro electromagntico con especial inters en la
determinacin de compuestos qumicos:

La radiacin visible-ultravioleta posee una energa adecuada para producir

transiciones de electrones moleculares a niveles de energa superior. Es la
denominada espectroscopa UV, cuya utilidad se limita principalmente a la
determinacin de molculas con instauraciones.
La radiacin infrarroja produce transiciones entre niveles vibracionales de una
molcula. Los enlaces entre los tomos de una molcula no son rgidos, sino que
vibran en torno a una posicin de equilibrio y la radiacin infrarroja es capaz de
llevar estos enlaces a niveles de energa vibracional superiores. Es la denominada
espectroscopa infrarroja (IR).
Las ondas de radio poseen la energa adecuada para para hacer que los ncleos
atmicos, sometidos a un campo magntico, entren en resonancia. Esta tcnica se
denomina espectroscopa de resonancia magntica nuclear (RMN).
Tanto los niveles de energa vibracionales, electrnicos como de espn nuclear
estn cuantizados y las energas necesarias para promocionar el sistema desde
un nivel inferior a uno superior vienen dados por valores discretos, caractersiticos

de cada sistema. Una molcula absorber radiacin electromagntica si el

producto h coincide con la diferencia de energa entre el nivel inferior en el que se
encuentra y el superior al que promociona.
ESTRUCTURA DE UN ESPECTROFOTOMETRO
El

instrumento

que

permite

detectar

la

interaccin

entre

la

radiacin

electromagntica y la materia recibe el nombre de espectrofotmetro y su

estructura bsica puede observarse en el siguiente esquema.

El espectrofotmetro consta de una fuente de luz (bombilla) que produce luz

blanca. La primera rendija selecciona un rayo que contiene todas las frecuencias
emintidas. Este rayo pasa a travs de un prisma de vidrio que descompone la luz
blanca en sus diferentes frecuencias(del rojo al violeta). Una segunda rendija
selecciona una de las frecuencias (luz monocromtica) que incidir sobre la
cubeta que contiene la muestra. Al conjunto del prisma y segunda rendija se la
denomina monocromador. El rayo monocromtico que atraviesa la muestra incide
sobre el detector, que transfiere los datos a un sistema informtico donde se
genera el espectro. Si la frecuencia seleccionada en la segunda rendija no es
absorbida por la muestra se produce un punto de la lnea base del espectro.

Cuando la frecuencia de la radiacin es adecuada para producir una transicin

(vibracional, electrnica...) se observa un pico de absorcin en el espectro.
El anlisis del espectro permite determinar la estructura de la molcula que lo
produce.
ESPECTROS VIS-UV EN COMPUESTOS ORGANICOS.

Alcanos. Sus bandas de absorcin son debidas a transiciones de

enlaces C-C y C-H. Estas transiciones son de elevada energa y tienen
lugar a longitudes de onda inferiores a los 150 nm, no observables por tanto
en

espectrofotmetros

convencionales.

Esta

caracterstica

permite

utilizarlos como disolventes de la muestar a anlizar, ya que no interfieren

con sus seales.

Alquenos y alquinos. Presentan bandas de absorcin debidas a las

transiciones del triple enlace C-C. Esta transicin es de menor
energa que en el caso de los alcanos y aparece a longitudes de onda
mayores (alquenos:175 nm; alquinos: 170 nm). El doble y triple enlace son
los grupos cromforos de estas molculas.

teres, tioles, sulfuros, aminas: En este caso el grupo cromforo est

formado por el heterotomo (O,S,N) y los tomos que le enlazan. El
heterotomo presenta pares libres y la transicin que produce la absorcin
es n. Esta banda de absorcin aparece sobre 175-200 nm para
alcoholes, teres y aminas, desplazndose a 200-220 nm para los sulfuro.

Aldehdos, cetonas, cidos y derivados. El grupo cromforo de estos

compuestos es el carbonilo (C=O). Dado que el oxgeno posee pares libres,
la transicin de menor energa es la n, pero es una transicin
prohibida (max=15), al no existir solapamiento entre los orbitales
implicados. La siguiente transicin de menor energa es la ,
observable a max=188nm, con absortividad molar de 900.

ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO
Espectroscopia

infrarroja (Espectroscopia

IR)

es

la

rama

de

la espectroscopia que trata con la parte infrarroja del espectro electromagntico.

Esta cubre un conjunto de tcnicas, siendo la ms comn una forma
de espectroscopia de absorcin. As como otras tcnicas espectroscpicas, puede
usarse para identificar un compuesto e investigar la composicin de una muestra.
Esta se puede dividir segn el tipo de la radiacin que se analiza, en:

Espectroscopia del Infrarrojo cercano

Espectroscopia del infrarrojo medio

Espectroscopia del infrarrojo lejano

Los fotones de radiacin infrarroja son absorbidos por los enlaces de una molcula
pasando a niveles vibracionales superiores.

Cada tipo de enlace absorbe radiacin infrarroja a una frecuencia distinta, lo que
permite determinar qu tipo de grupos funcionales posee la molcula en estudio.
Los espectrofotmetros de infrarrojo trabajan en el infrarrojo medio y hacen un
barrido desde los 4000 cm1 hasta los 400 cm1

Tradicionalmente, en el eje x de los espectros de infrarrojo se emplea el nmero

de ondas (, lase "nu barra"') y se define como el inverso de la longitud de onda
en cm. =1. En el eje y se representa el porcentaje de radiacin transmitida
(transmitancia) que se representa por %T. A continuacin, se muestra la forma que
presenta el espectro de infrarrojos del hexano.

Las bandas representan zonas donde los enlaces de la molcula absorben

radiacin infrarroja. En las bandas la transmitancia es pequea y la absorbancia
grande.
Para que una molcula absorba radiacin infrarroja deben cumplirse dos
condiciones:

La frecuencia de la radiacin (fotn) debe ser la adecuada para permitir la

transicin entre estados vibracionales. Dicho de otro modo, la frecuencia de
la radiacin debe coincidir con la frecuencia natural del movimiento
vibracional.
Una molcula slo absorbe radiacin infrarroja cuando su momento dipolar
interacciona con el campo elctrico de la onda, variando en fase con este.
Como es lgico este acoplamiento slo es posible si las frecuencias de la
radiacin y la vibracin del enlace coinciden. Por ello, molculas apolares
no absorben en el infrarrojo y molculas poco polares dan lugar a
absorciones muy dbiles.
Regla de seleccin de la espectroscopa infrarroja: "slamente aquellos
enlaces cuya vibracin provoque un cambio en el momento dipolar de la
molcula absorben en el infrarrojo".

Adems, cuanto mayor sea la variacin del momento dipolar durante la

vibracin, ms intensa es la banda de absorcin en el espectro. Dan lugar a
bandas intensas la vibraciones de enlaces C=O, O-H, N-H y no son

observables vibraciones de tensin de enlaces triples en alquinos

simtricos o alquenos trans con cadenas iguales.

ESPECTRO DE COMPUESTOS ORGANICOS

ALCANOS:
Obsrvese que la banda de flexin asimtrica del metilo solapa con la de flexin
en tijera del CH2.
Espectro IR del Hexano

ALQUENO:
Espectro IR del 2-metil-2-penteno
El 2-metil-2-penteno es un alqueno trisustituido que presenta una banda de
absorcin fuerte entre 840-800 cm1 debida a la flexin C-H (oop).

CICLOALCANO:
La principal diferencia con los alcanos es la ausencia de la banda de tensin
simtrica del metilo.
Espectro IR del Ciclohexano

ALQUINOS:
Espectro IR del 1-hexino

AROMATICOS:
Espectro IR del orto-xileno
Los bencenos orto-disustituidos presentan una banda de flexin oop en el rango
770-735 cm-1

ALCOHOLES Y FENOLES:
Espectro IR del 2-metil-2-propanol

Los alcoholes terciarios tienen la banda C-O desplazada a frecuencias mayores

que los alcoholes primarios y secundarios.

ETERES:
Espectro IR del Metoxibenceno
El metoxibenceno presenta dos bandas a 1250 y 1040 cm -1

ALDEHIDO:
Espectro IR del Benzaldehdo
En este espectro pueden observarse con ms claridad las bandas de tensin del
enlace C-H carbonilo. Adems se sealan las bandas de absorcin del benceno.

CETONAS:
Espectro IR de la propanona

Efecto de la conjugacin en la banda de Tensin C=O

CIDOS CARBOXILICOS:
Espectro IR de cido actico

ESTERES:
Espectro IR de acetato de metilo

NITRILOS:
Tensin CN: banda muy fina a 2250 cm-1

ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNETICA

NUCLEAR (RMN)
La espectroscopa de resonancia magntica nuclear (RMN) es una tcnica
empleada principalmente en la elucidacin de estructuras moleculares, aunque
tambin se puede emplear con fines cuantitativos y en estudios cinticos y
termodinmicos.
Algunos

ncleos

atmicos

sometidos

un campo

magntico externo

absorben radiacin electromagntica en la regin de las frecuencias de radio

o radiofrecuencias. Como la frecuencia exacta de esta absorcin depende del
entorno de estos ncleos, se puede emplear para determinar la estructura de la
molcula en donde se encuentran stos.
Para que se pueda emplear la tcnica los ncleos deben tener un momento
magntico distinto de cero. Esta condicin no la cumplen los ncleos con nmero
msico y nmero atmico par (como el 12C,16O, 32S). Los ncleos ms importantes

en

qumica

orgnica

son: 1H, 13C, 31P, 19F

y 15N.

Otros

ncleos

importantes: 7Li, 11B, 27Al, 29Si, 77Se, 117Sn, 195Pt, 199Hg, 203Tl, 205Tl, 207Pb
Se prefieren los ncleos de nmero cuntico de espn nuclear igual a 1/2, ya que
carecen de un momento cuadrupolar elctrico que produce un ensanchamiento de
las seales de RMN. Tambin es mejor que el istopo sea abundante en la
naturaleza, ya que la intensidad de la seal depender de la concentracin de
esos ncleos activos. Por eso, uno de los ms tiles en la elucidacin de
estructuras es el 1H, dando lugar a la espectroscopia de resonancia magntica
nuclear de protn. Tambin es importante en qumica orgnica el 13C, aunque se
trata de un ncleo poco abundante y poco sensible.
La tcnica se ha empleado en qumica orgnica, qumica inorgnica y bioqumica.
La misma tecnologa tambin ha terminado por extenderse a otros campos, por
ejemplo en medicina, en donde se obtienen imgenes por resonancia magntica.
Al aplicar una radiacin electromagntica de frecuencia adecuada (ondas de radio)
se consigue promocionar los ncleos desde el nivel de energa inferior (mI=1/2) al
nivel de energa superior (mI=1/2). Cuando la radiacin electromagntica y la
precesin del ncleo entran en resonancia se produce la absorcin. Podemos
calcular la frecuencia de resonancia (frecuencia de Larmor) mediante la ecuacin
de Planck.
E=hL(1)
Sustituyendo la diferencia de energa por la ecuacin (1)
B0=hL(2)
Despejando la Frecuencia Larmor
L=2B0(3)
Como puede observarse en la ecuacin (3) la frecuencia a la que se produce la
transicin depende del campo magntico aplicado. El aumento en el campo
magntico produce un aumento en la diferencia de energa entre los niveles de

espn, por lo que se requiere una radiacin de frecuencia mayor para poducir la
transicin.

En resonancia Magntica se utilizan ncleos con momento angular de espn

distinto de cero, como pueden ser 1H y 13C. Sin embargo, las frecuencias de
resonancia no son iguales para todos los ncleos de hidrgeno o de carbono,
dependen del entorno qumico que rodea cada ncleo. Esto se debe a que los
electrones que rodean cada ncleo generan un campo magntico que se opone al
aplicado, se dice que los ncleos estn apantallados, siendo la constante de
apantallamiento.
Befectivo=B0B0=(1)B0(1)

Bef es el campo magntico neto que acta sobre el protn; B0 es el campo

magntico aplicado; es la constante de apantallamiento, independiente del
campo aplicado. Bajo esta nueva situacin, con los ncleos apantallados por la
densidad electrnica que los rodea, la frecuencia de resonancia pasa a ser

=2(1)B0(2).

EQUIPOS
RMN 500 de Agilent Technologies

Consola de tres canales Agilent 500 MHz DD2

Sonda Fra: 1H, 19F, 13C, 31P

RMN 500 de Agilent Technologies

Consola de tres canales Agilent 500 MHz DD2

Sonda One NMR

Sonda HFX

Sonda Nanosonda

RMN 400 de Agilent Technologies

Consola MR 400 de Agilent

Sonda One NMR

RMN 400 de Bruker

Consola de cinco canales Advance 400

ESPECTRO DE COMPUESTOS ORGANICOS

En el espectro de RMN del etanol se observan tres seales diferentes, debido a la

existencia de 3 tipos de hidrgenos con distinto entorno qumico. Los hidrgenos A
estn ms desapantallados que los C debido a la presencia del oxgeno (tomo
electronegativo que retira densidad electrnica). El entorno qumico del hidrgeno
B, unido directamente al oxgeno, tambin es diferente resonando a una
frecuencia distinta a los anteriores.

ESPECTROSCOPIA DE MASAS

La Espectrometra de masas es una tcnica analtica que permite estudiar

compuestos de naturaleza diversa: orgnica, inorgnica o biolgica (incluyendo
biopolmeros y macromolculas naturales o artificiales) y obtener informacin
cualitativa o cuantitativa. Mediante el anlisis por Espectrometra de masas es
posible obtener informacin de la masa molecular del compuesto analizado as
como obtener informacin estructural del mismo, o simplemente detectar su
presencia y/o cuantificar su concentracin. Para ello es necesario ionizar las
molculas, utilizando si fuera preciso una separacin cromatogrfica (UPLC, GC)
previa, y obtener los iones formados en fase gaseosa. Este proceso tiene lugar
en la fuente de ionizacin. Los iones generados son acelerados hacia un
analizador y separados en funcin de su relacin masa/carga (m/z) mediante la
aplicacin de campos elctricos, magnticos simplemente determinando el
tiempo de llegada a un detector. Los iones que llegan al detector producen una
seal elctrica que es procesada, ampliada y enviada a un ordenador. El registro
obtenido se denomina Espectro de masas y representa las abundancias inicas
obtenidas en funcin de la relacin masa/carga de los iones detectados.

Aplicaciones
Elucidacin estructural

y anlisis cuantitativo de compuestos orgnicos y

organometlicos, biopolmeros y macromolculas orgnicas. Determinacin de

masa exacta.

Equipos
Cromatgrafo de gases 6890N acoplado a espectrmetro de masas 5973
inert de Agilent Technologies

Rango de masas: hasta 800 Da

Fuentes de ionizacin: Impacto electrnico (EI) e Ionizacin Qumica (CI)

Espectrmetro de masas 5973 inert de Agilent Technologies con un sistema

de introduccin directa SIS Direct Insertion Probe

Rango de masas: hasta 800 Da

Fuente de ionizacin: Impacto electrnico (EI)

Espectrmetro de masas de tiempo de vuelo con ionizacin por desorcin

lser asisitida por matrices (MALDI-TOF) Bruker Autoflex.
Espectrmetro de masas de tiempo de vuelo (MS-TOF) Bruker Maxis Impact.
Posibilidad de acoplamiento con cromatgrafo de lquidos Waters Acquity
(UPLC-MS-TOF) y cromatgrafo de gases Bruker 450-GC (GC-MS-TOF).
Sonda de introduccin directa.

Fuentes de ionizacin: electrospray (ESI) e ionizacin qumica a presin

atmosfrica (APCI).

Espectrmetro de masas Jeol, The AccuTOF JMS-T100LC

Espectrmetro de masas, The MStation JMS-700

Espectrmetro de masas Jeol, SX 102 A

Cromatgrafo de gases - espectrmetro de masas Jeol GCMate II

Aplicaciones
Esta tcnica analtica es imprescindible para varias ramas de la industria qumica
como: petroqumica, farmacutica, cosmetolgica, de alimentos, entre otras. Entre
algunas aplicaciones podemos mencionar el anlisis de muestras de: productos
organometlicos, productos naturales, productos de sntesis, contaminantes
ambientales, productos del rea bioqumica, polmeros, biomolculas pequeas,
etc. Cabe mencionar que con el uso de la cromatografa de gases acoplada a
masas se pueden separar mezclas y elucidar cada uno de los componentes de
sta.

BIBLIOGRAFIA

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ISBN: 3-527-31240-4.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
QUIMICA ORGANICA
EVIDENCIA 3
ARTICULO CIENTIFICO

Dra. Lylia Graciela Miranda Velsquez

Alumna:
Gabriela Rojas Ruiz 1576155

San Nicols de los Garza, Nuevo Len

Fecha: 22 DE MAYO DEL 2015