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Facultad de Ciencias Exactas y Tecnologa

Universidad Nacional de Tucumn


boratorio de Medios e Interfases (LAMEIN)
Departamento de Bioingeniera

Equipo de Electrospinning

Tesis de grado para optar el ttulo de Ingeniero Biomdico

Autor: Luis Marcelo Masino


Tutor: Carmelo Jos Felice

2012

Masino, Luis Marcelo

Equipo de Electrospinning

Agradecimientos

A la Facultad de Ciencias Exactas y tecnologa de


Tucumn, por ensearme los conocimientos
necesarios para afrontar los retos de la vida laboral.

A mi director el Dr. Carmelo Felice, por confiar


en m a la hora de darme este proyecto, y por
el apoyo brindado durante el mismo.
A mi novia Mara Ana, el amor es lo que nos
impulsa a seguir superndonos, gracias por
estar siempre a mi lado y crecer junto a m.
A mi madre, por creer en m, y brindarme su
apoyo incondicional en todo momento.
A mi padre, por regalarme 16 aos de su vida,
y guiarme con su ejemplo.
A mi hermana, Karina, por brindarme su cario
siempre, y ayudarme en los momentos difciles.
A mi hermano, Diego, por acercarse a m y
brindarme sus concejos.
A mi to Juan Carlos, por su ayuda y
colaboracin durante todo el proyecto, y siempre
que lo necesito.
A mi ta Maruja y to Ernesto, por acordarse
siempre de m y ayudarme cuando lo
necesito.

A mis sobrinos, Agustn, Camila y Santiago,


nunca olviden que con dedicacin y
persistencia se pueden lograr todos los
objetivos pese a todos los obstculos.

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A mis amigos, Javier, Nicols, Cesar, Matas,


Sebastin, Alejandro, Leo y Mariano, porque
disfrutamos cada momento de la vida y
crecemos juntos, y porque sin amigos no hay
alegra que dure.
A mis amigos y compaeros de la facultad,
Jorgelina, Paula, Eugenia y Federico, por todos
los aos compartidos de estudio, y haber hecho
que sean muchos ms fciles de soportar.

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Masino, Luis Marcelo

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INDICE

Agradecimientos....1
ndice.....3
Resumen..5
Introduccin 1....6
Electrospinning 1.1..6
Ingeniera de Tejido 1.2..8
Tecnologia para fabricacin de scaffolds 1.3....11
Descripcin de la tcnica de electrospinning 2.....18
Modelizacin del proceso de electrospinning 2.1.22
Aplicaciones biomedicas del electrospinning 3....24
Diseo y fabricacin de la maquina de electrospinning 4...27
Diseo del sistema en AUTOCAD 3D 4.1..28
Fabricacin y/o Descripcin de los diferentes Mdulos 4.2....30
Colector rotativo 4.2.1...30
Aguja, tubo de conexin y jeringa 4.2.2.46
Generador de alta tension 4.2.3..47
Bomba de infusin 4.2.4...49
Caja protectora 4.2.5.50
Materiales fungibles 4.2.6.50
Mtodo de produccin de scaffold 5....52
Sustancias aptas para trabajar con electrospinning 5.1..52
Parmetros del proceso de electrospinning 5.2....57
Anlisis de seguridad elctrica 6...60
Prueba de rigidez dielctrica del aire en continua 6.1.60
Anlisis de proteccin contra los riesgos de choque elctrico 6.263
Pruebas realizadas 6.2.1..64
Resultados obtenidos 6.2.2..66
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Puesta en marcha del equipo 7......................................................................67


Experiencia N1 7.1.1...67
Resultados obtenidos 7.1.2.....68
Experiencia N7.2.1..71
Resultados obtenidos 7.2.2.73
Resultados y conclusiones 8..76
Perspectivas futuras 9.....78
Referencias 10....80
Referencias bibliogrficas 10.1..80
Pginas web consultadas 10.2...81

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RESUMEN

En este proyecto se describe el diseo, desarrollo y evaluacin de un sistema para la


fabricacin de scaffolds mediante la tcnica de electrospinning, para ser utilizado en
investigacin en el laboratorio de Ingeniera en Tejido de la Facultad de Ciencias Exactas y
Tecnologa de Tucumn.
El equipo se diseo de manera tal que cumpla con todos los requisitos que necesita el proceso
de electrospinning, velocidad del recoleccin de fibras 0 1000 Rpm, distancias y materiales
necesarios para evitar rupturas dielctricas, rango de tensin de funcionamiento 0 30 kv,
dimensiones de caja protectora.
En la etapa de construccin se realizo, fundicin de aluminio, toreado de las piezas que
componen el colector rotativo y ensamblaje total del equipo.
Terminada estas etapas se evalu, rigidez dielctrica del aire en la cmara, resistencia elctrica
de la tierra de proteccin, corriente de fuga a tierra, corriente de fuga a tierra a travs del
envoltorio y prueba de resistencia del aislamiento.
Se realizaron 19 pruebas de electrospinning variando sistemticamente las variables en juego,
se puedo obtener fibras del polmero Alcohol polivinilico (PVA), donde los rangos utilizados
para la prueba fueron: tensin entre la aguja y el colector 20kv, distancia de eyeccin 10 cm ,
concentracin de la disolucin polimrica 8 % y velocidad de infusin de 8ml/h.
.

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CAPTULO 1:
INTRODUCCIN
En este captulo se realizara una breve descripcin del proceso de electrospinning, una
introduccin a la ingeniera en tejido y se explicaran brevemente algunas tcnicas para la
fabricacin de scaffolds

1.1

Electrospinning

El trmino electrospinning, tambin conocido como electro-hilado, es un trmino reciente. Se


uso por primera vez en el ao 1994, pero la idea cientfica original data de los aos 30. En el
ao 1937 fue patentada la tcnica de electrospinning [Formhals et al,1937] por el cientfico
Anton Formhals, en donde describe un dispositivo experimental para la produccin de hilados
de polmero usando un campo electroesttico.
El proceso llamado electrospinning utiliza un alto voltaje para crear un campo electroesttico
fuerte, con el fin de atraer partculas elctricamente cargadas de una solucin o fluido
polimrico desde un cono inyector hacia una superficie donde se solidifica formando micro y
nanofibras.
A lo largo de los ltimos 20 aos, pero ms significativamente en los ltimos aos se han
dedicado ms esfuerzos al electrospinning. Esta tendencia se podra explicar gracias al
inters actual en las microfibras y nanofibras que se pueden obtener por este proceso. En el
campo de la ingeniera en tejido , las aplicaciones potenciales de las nanofibras son enormes y
prometedoras: matrices para regeneracin y/o reparacin de tejidos y rganos (injertos
vasculares, nervios, piel, cartlago, huesos, msculos cardacos, crneas, expansin y
diferenciacin de clulas madres), vectores para liberacin de principios activos, dispositivos
biomdicos biodegradables implantables, instrumentacin y diagnstico mdico, tejidos de
proteccin contra agentes infecciosos y medioambientales, aplicaciones dentales y cosmticas
Se han conseguido producir fibras finas por electrospinning a partir de ms de cincuenta
polmeros, entre disoluciones y polmeros fundidos. Esta cifra muestra el potencial que este
proceso est generando.
(Figura 1)
Distribucin de las
publicaciones
con
trabajos
sobre
electrospinning segn sus pases de origen
(1994)

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En electrospinning solo se utilizan polmeros porque estos son los nicos que tienen las
propiedades fsicas y qumicas requeridas para formar fibras que sean resistentes, elsticas y
duraderas.
Los polmeros son dielctricos, que en presencia de un campo elctrico puede considerarse
como un arreglo de dipolos elctricos microscpicos compuestos por cargas positivas y
negativas cuyos centros no coinciden perfectamente, y que tampoco se trata de cargas libres,
las cuales no contribuyen al proceso de conduccin. Ms an, se mantienen en su lugar por
accin de las fuerzas atmicas y moleculares, y solo pueden cambiar su posicin ligeramente
en respuesta a fuertes campos elctricos externos. Son llamadas cargas ligadas, en
contraposicin a cargas libres que determinan la conductividad en otro material conductor.
Las cargas ligadas pueden ser tratadas como cualquier otra fuente de campo electroesttico.
Muchos tipos de polmeros, naturales y sintticos, se utilizan en aplicaciones en el campo
biomdico pero la mayora son producidos industrialmente a gran escala. Entre el poli (cloruro
de vinilo) (PVC), el poliestireno (PS), el PE y el polipropileno (PP) ya suman ms del 85% del
mercado de los polmeros en el campo de los biomateriales. Los polmeros especiales suponen
un 2%, de los cuales la mayora son biodegradables (ejemplo: poli (cido gliclico), poli (cido
lctico), PCL y PEO). Todos ellos se emplean a menudo en la ingeniera de tejido debido a la
aprobacin de biocompatibilidad de la Food and Drug Administration (FDA) y su capacidad para
ser metabolizados en agua y dixido de carbono.
En este trabajo se utilizo para corroborar el buen funcionamiento del sistema diseado el
polmero alcohol polivinilico (PVA), el cual es una resina sinttica representada por la frmula
(CH2-CHOH)n, el peso molecular medio oscila entre 500 y 5000. Se prepara a partir de la
hidrlisis de un 85 a un 89 % de Polivinil Acetato, y es fcilmente soluble en agua tibia.

Anton Formhals , Artificiald Thread and Method of Producing Same , U.S. Patent 2187306, July 28, 1937.

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1.2 INGENIERIA EN TEJIDO

Hacia el final del siglo XX ha surgido una nueva disciplina, la Ingeniera de Tejidos, cuya
definicin ms aceptada es la de Langer y Vacanti, dos investigadores pioneros en este campo,
que la definieron como la aplicacin de principios y mtodos de la ingeniera y las ciencias
biolgicas para el entendimiento de las complejas relaciones entre la estructura y la funcin de
los tejidos, que permitan el desarrollo de sustitutos para restaurar, mejorar o mantener la
funcin de dichos tejidos.
La Ingeniera de Tejidos se nutre con los conocimientos de otras disciplinas como la medicina,
la biologa, la qumica, la ingeniera, la fsica, la ciencia de los materiales. As, mediante los
fundamentales aportes del trabajo interdisciplinario, est ofreciendo novedosas estrategias de
implementacin de sustitutos biolgicos en distintas especialidades de la medicina. Los
importantes avances cientficos en el campo de los biomateriales, las clulas stem, los factores
de crecimiento y diferenciacin, y el conocimiento del microambiente tisular, han generado la
posibilidad de fabricar tejidos en el laboratorio mediante la combinacin de matrices
extracelulares "scaffolds", clulas, y molculas biolgicamente activas.
El desarrollo de sustitutos titulares necesita dos ingredientes fundamentales: las clulas y los
biomateriales, entendiendo adems que estos pilares estn ntimamente interrelacionados a
travs de complejas interacciones clula-clula, clula-scaffolds, a lo cual se agrega la accin
de factores solubles, tanto de origen local como sistmico, que tambin participan en estas
interacciones. Uno de los grandes desafos que enfrenta la Ingeniera de Tejidos es la
necesidad de lograr que los sustitutos tengan la funcionalidad suficiente como para que sean
capaces de cumplir su funcin, as como la estabilidad biomecnica como para que puedan
insertarse en el medio ambiente donde sern trasplantados.
El origen de las clulas, su aislamiento, la posibilidad de cultivarlas y su trasplante abren un
abanico de variadas opciones. Podran plantearse varias posibilidades: las clulas implantadas
reparan el dao por s mismas; las clulas implantadas inducen a las clulas sanas residentes
a reparar el dao; o bien las clulas implantadas secretan o estimulan la secrecin de factores
de crecimiento que son los responsables de producir la reparacin.
Las clulas a usar pueden provenir de distintas fuentes: lneas celulares establecidas (clulas
genticamente transformadas), clulas stem (clulas indiferenciadas con gran capacidad de
divisin en cultivo y que pueden dar origen a distintos tipos de clulas especializadas), o
clulas primarias, (las obtenidas a partir de la disgregacin enzimtica o mecnica de rganos
o tejidos). Tambin pueden clasificarse segn el individuo que les da origen, como clulas
autlogas (las clulas a usar se extraen del mismo paciente en el que se implantarn), clulas
homlogas o alogeneicas (clulas de otro individuo de la misma especie), o clulas heterlogas
o xenogeneicas (clulas de un individuo de otra especie). Indudablemente las propiedades
inmunognicas de las clulas son un punto crtico relacionado a la posibilidad de rechazo de
las clulas implantadas. La eleccin del tipo de clula a usar en cualquier desarrollo de
Ingeniera de Tejidos depende del objetivo que se persiga.
Por otro lado, no es de menor importancia la eleccin de los biomateriales, las clulas son
frecuentemente implantadas o sembradas en una estructura artificial capaz de soportar la
formacin de un tejido tridimensional. Estas estructuras, llamadas andamios (scaffolds en
ingls), son crticas, tanto en su comportamiento in vitro como in vivo, dado que deben ser
capaces de recapitular el medio ambiente existente in vivo y permitir a las clulas ejercer su
influencia sobre dicho microambiente.

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En teora, los materiales a usar deben permitir una o ms de las siguientes funciones:

adhesin y migracin celular


difusin de nutrientes vitales y de productos expresados por las clulas
vascularizacin
soporte de funciones mecnicas y biolgicas en situaciones particulares

Durante los aos 60 y 70, tuvo lugar la primera generacin de biomateriales. En este perodo
de tiempo, la meta era obtener materiales cuyas propiedades fsicas se adaptaran lo mejor
posible a las del tejido a reemplazar, y que reaccionaran mnimamente con el tejido
circundante, es decir, materiales inertes. A partir de los aos 80, surge una segunda
generacin de biomateriales. Esta vez, el objetivo era crear materiales que indujeran una
reaccin controlada por parte del tejido vivo, es decir, materiales bioactivos como los vidrios
bioactivos de silicio y la hidroxiapatita. Durante esta segunda generacin, tambin tienen lugar
los materiales bioabsorbibles, como los polmeros biodegradables principalmente.
Actualmente nos encontramos en la tercera generacin de biomateriales. Los materiales
diseados en esta generacin, buscan interactuar con el tejido de forma especfica, mediante
estmulos a nivel celular y molecular, y combinan las propiedades de bioabsorbabilidad y
bioactividad dentro del mismo material. Por lo que cada vez, los criterios se van acercando ms
a lo que sera el biomaterial ideal. La ingeniera de tejidos es una de la reas con ms potencial
dentro de la medicina regenerativa.
La gran mayora de los andamios desarrollados para aplicaciones en el campo de la Ingeniera
de Tejidos est constituida por estructuras elaboradas a partir de materiales polimricos.
Los polmeros sintticos bioabsorbibles con capacidad de degradarse gracias a reacciones de
hidrlisis en condiciones fisiolgicas dentro del cuerpo, y eliminarse completamente por vas
metablicas son los materiales ms atractivos para la elaboracin de andamios en Ingeniera
de Tejidos. Los andamios elaborados a partir de este tipo de polmeros ofrecen la posibilidad
de crear tejidos completamente naturales dejando de lado los problemas de infeccin y
formacin de tejido fibroso, asociados a los implantes permanentes.
Los soportes constituidos por nanofibras pueden fabricarse con geometras que permitan
rellenar defectos anatmicos y su arquitectura puede disearse para obtener las propiedades
mecnicas necesarias para soportar el crecimiento, proliferacin, diferenciacin y movilidad
celular. Una propiedad inherente de las nanofibras es su alta capacidad de imitar la matriz
extracelular de los tejidos y rganos; un complejo compuesto formado por protenas fibrosas,
protenas solubles y otras molculas bioactivas que permiten la adhesin y el crecimiento
celular. Sin embargo, los estudios de las interacciones clula-nanofibra, la elucidacin y el
entendimiento completo de la influencia de las nanofibras en las rutas bioqumicas y los
mecanismos de las seales que regulan el comportamiento celular requieren de mayor
investigacin.

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(Figura 2) Esquema ilustrativo de una de las tendencias en ingeniera de tejidos

A pesar de que actualmente existen diferentes polmeros biodegradables para el desarrollo de


estos andamios, el PLA, el PGA y sus copolmeros, continan siendo los ms populares y de
mayor uso.

Polmeros sintticos biodegradables, utilizados en ingeniera de tejidos

Se desarrollaron diversas tcnicas de procesamiento de materiales para el diseo y


construccin de estructura y dispositivos dentro de la nanoescala. De esta forma existen
numerosos proceso de produccin de fibras polimricas, tales como: el halado, la separacin
de fases, la sntesis por copiado, el auto-ensamblaje, impresin 3D, el electrospinning . Este
ltimo constituye la tcnica propuesta en este trabajo, y supone la sustitucin de las fuerzas
mecnicas que generaban la extrusin del fluido viscoso, generalmente una solucin polimrica
o polmero fundido, por una fuerza electrosttica, para dar origen a fibras polimricas.
Referencias

Blanco RI. Ingeniera de tejidos. www.eis.uva.es/~macromol/curso0506/medicina/ingenieria_de_tejidos.htm. Fecha de acceso: 15/11/2012.


R.Lanza, R. Langer, J. Vacanti , Principles of Tissue Engineering, third edition 2007

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1.3 TECNOLOGIAS PARA LA PRODUCCION DE SCAFFOLDS

Existen diversas tcnicas, tecnologas y sistemas para la fabricacin de scaffolds. Algunas de


estas sern mencionadas e explicadas a continuacin, de manera que podamos tener
conocimiento de la diversidad que trae aparejada la fabricacin de scaffolds.

Gel Casting
Stereolitografa
Solid Ground Curing
Sintetizado laser Selectivo
Escritura Directa
Solid Freeform fabrication
Electrospinning

1. GEL CASTING: Este mtodo consiste en disolver el polmero en un solvente


orgnico como la acetona. La solucin polimrica es colocada en un molde hasta
alcanzar consistencia de gel. Seguidamente el gel es procesado mediante diferentes
concentraciones de acetona, etanol y agua para as obtener una estructura
microporosa.

(Figura 3) Fabricacin de estructuras porosas por espuma con gas / lixiviacin de partculas:
partculas de sal efervescente se dispersan en el polmero gel , fundido en un molde de tefln para la
evaporacin del disolvente, se sumerge en agua para espuma con gas / lixiviacin de sal, y se liofiliz

2. STEREOLITOGRAFIA: Esta utiliza biomateriales fotopolimerizables, se emplea un


laser ultra violeta focalizado que barre la superficie de un lquido fotopolimerizable.
Cuando el laser impacta sobre la superficie, el material polimeriza justo debajo de la
superficie, la capa slida que se forma se sumerge y se crea la siguiente capa
polimerizada. El proceso se repite hasta obtener el scaffold diseado.(Figura 4)
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(Figura 4) Esquema de fotopolimerizacion

La fotopolimerizacion es un proceso que define como la exposicin de monmeros o


mezcla de monmeros, a luz artificial o natural, con o sin un catalizador. Donde el
endurecimiento se produce por una reaccin donde los monmeros , se agrupan
qumicamente entre s, produciendo polmeros.
La polimerizacin fotoiniciada tiene dos pasos (Figura 5) :
La absorcin de luz para excitar un fotoiniciador (ej:RR+) , los fotoiniciadores
contienen cromforos (tomo o conjunto de atmos responsable del color de una
sustancia)
2- La resultante reaccin fotoqumica del compuesto excitado con los mnomeros.
1-

(Figura 5) Reaccin de polimerizacin

3- SOLID GROUND CURING: Este es un sistema muy similar al utilizado para la


fabricacin de dispositivos semiconductores.
En este proceso se utiliza una resina sensible a la luz, se va endureciendo por capas
como el proceso de stereolitografia. Sin embargo, en contraste con este otro proceso, el
solid graund curing es considerado un proceso de produccin de alto rendimiento. Esto
es logrado por medio de ir endureciendo una capa de resina a la vez, lo que permite
grades volmenes de produccin. La desventaja de este proceso q es muy difcil
obtener materiales biocompatibles, esto se debe al uso de dicha resina la sule ser
toxica, se estn investigando el uso de resinas biocompatibles.

Pasos de la produccin
1- Creacin de cada capa, la superficie de trabajo es rociada con una
resina fotosensible.

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2- Para cada capa, se produce una foto-mscara usando la tcnica de


impresin ionogrfica.

3- Despus, esta es ubicada arriba de la superficie de trabajo y con una


lmpara de rayos ultra violeta se endurece la resina expuesta.

4- Luego de que la capa est seca, una aspiradora recoge toda la resina
que no se endureci para reciclarla, dejando las partes endurecidas
intactas. Esta capa se pasa debajo de la lmpara de rayos UV para
endurecerla por completo y solidificar las partculas.

5- La cera remplaza las cavidades que dejo la aspiradora despus de


haber succionado la resina liquida. La cera se endurece enfrindola
para proporcionar soporte continuo a la pieza mientras es fabricada.
Con esto no es necesario agregarle soporte extra.
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6- En el paso final antes de pasar a la capa siguiente, se comprime la


cera y la resina para dejar la superficie lisa.

7- Despus de que todas las capas han sido completadas, se remueve


la cera y se le pude dar el acabado que se desee.

4- SINTERIZADO LASER SELECTIVO: El proceso consiste en un lser que va


dibujando sobre una superficie de material en polvo. El suministro de este material se
realiza por un rodillo, desde un recipiente adyacente a la plataforma donde se fabrica el
modelo. El rodillo deposita el polvo comprimiendo levemente el mismo al depositarlo. El
modelo se va construyendo sobre una superficie elevadora, que a cada pasada baja
una cantidad equivalente al grueso de la capa depositada.
El lser sinteriza el material que ilumina. De esta manera se repite el proceso hasta
alcanzar el diseo 3D ( Figura 6).
Para acelerar el proceso, el conjunto se mantiene precalentado a una temperatura
ligeramente inferior a la de fusin del material. Asimismo, la atmsfera interior es de
nitrgeno, para evitar riesgos de explosin por polvo.
Cuando el modelo se ha fabricado, se eleva la superficie y se retira el exceso de polvo.
De ser necesario se puede realizar un acabado superficial. Se debe respetar el tiempo
necesario para el enfriamiento de la pieza, que puede ser significativo.
Con este sistema se obtuvieron implantes seos biocompatibles. La desventaja que
posee que no se puede agregar biomolculas activas por el exceso de temperatura.

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5-

(Figura 6) Esquema sintetizado laser selectivo

ESCRITURA DIRECTA (basado en extrusin) : Estos dispositivos extruyen tiras,


filamentos e/o imprimen puntos de material polimrico en 3D, se debe realizar el diseo
en un software y el dispositivo va formando la estructura deseada ( Figura 7). La
desventaja de este dispositivo es que una vez que se ha iniciado el proceso no se
puede detener, lo que implica que no se pueden realizar cambios en sobre la marcha y
pueden obstruirse canales.
Los scaffolds 3D que se obtienen con ese sistema se encuentran altamente conectados.
La resolucin es todava micromtrica.

(Figura 7) Equipo de extrusin

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(Figura 8) Cultivo de medula sea en scaffolds 3D (Aplicacin de scaffolds obtenidos por


extrusin)

(Figura 9) Scaffolds 3D fabricado por extrusin, se puede observar la alta conexin q


posee

6- SOLID FREEFORM FABRICATION (la impresin 3D): Este mtodo es el ms


revolucionario hasta la fecha permite realizar la fabricacin de una estructura 3D
mediante un ordenador que lee los datos de un dibujo y estable las sucesivas capas del
material este puede ser polvo o liquido, de este modo se acumulan una serie de
secciones transversales, se unen o fusionan automticamente para crear la forma fina,
formando as el dibujo realizado. La principal ventaja de esta tcnica es la capacidad
para crear estructuras de cualquier caracterstica y geometra.
En el futuro esta tecnologa debe permitir adems de fabricar scaffolds, agregar las
clulas y sustancias bioactivas.
La figura 10 describe los pasos a seguir en el proceso de fabricado de scaffolds, desde
el diseo del scaffold en una pc, hasta su fabricacin.

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(Figura 10) Proceso de fabricacin de sacaffolds

(Figura 11) Equipo comercial para la fabricacin de scaffolds 3D y ejemplo de escaffolds obtenidos con dicha
tecnologa.

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7- ELECTROSPINNING: Para la produccin de scaffolds esta tcnica tiene ciertas


ventajas en comparacin a la tcnicas descriptas anteriormente, es simple de realizar,
menor costo y la ms importante es que con el electrospinning se pueden obtener
escaffolds compuestos por fibras del orden de los nano metros, caracterstica que las
otras tcnicas no logran.
En el siguiente captulo se describir en profundidad la tcnica de electrospinning.

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CAPTULO 2:
DESCRIPCION DE LA TECNICA DE
ELECTROSPININNG
En este captulo se realizara una descripcin profunda de la tcnica de electrospinning.

La tcnica de electrospinning que se describir a continuacin, se utilizara en este proyecto


solo con fines de aplicacin cientfica.
Una de las configuraciones para electrospinning ms comunes es la que se muestra en la
siguiente figura:

(Figura 12) sistema bsico de electrospinnig

Un campo electrosttico lo suficientemente elevado, es aplicado entre dos polos opuestos,


conformados por una aguja o sistema de inyeccin y una placa metlica o colector, el cual
puede ser esttica o rotativa (a potencial 0), donde se depositan las fibras nanomtricas
formando un tejido con textura, color, y densidad caractersticas.

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(Figura 13) Diferencia entre colector esttico y dinmico

La disolucin del polmero previamente preparada, se carga en una jeringa de inyecciones que,
mediante un tubo de plstico inerte, se conecta a una aguja. Una bomba de infusin o
perfusin unida al mbolo de la jeringuilla genera una presin y un flujo constante que a travs
del tubo se trasmite a la disolucin del polmero en la aguja. Por el efecto de la polarizacin y la
carga originadas por el campo elctrico, la solucin es arrojada en forma de jet hacia una
superficie conductora conectado con tierra (por lo general una pantalla metlica) a una
distancia entre los 5 y 30cm del cono o aguja. Durante la creacin del jet, el solvente
gradualmente se evapora, y el producto obtenido se deposita en forma de manta de fibra notejida compuesta de nano fibras con dimetros entre 50 nm y 10 m.
En el flujo electro-hidrodinmico del jet, las cargas son inducidas en el fluido a travs de la
distancia de separacin de los electrodos (punta de aguja y colector metlico), rompindose la
tensin superficial a travs del campo elctrico y descomponindose en dos fuerzas
electrostticas una tangencial (t) y otra normal (n), formando el cono de Taylor. La figura 14
muestra la distribucin de las cargas a travs del jet.

(Figura 14) Dist. De cargas a travs del jet

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(Figura 15) Fotografa del Cono de Taylor

A medida que el jet adquiere una aceleracin significativa, su dimetro disminuye en magnitud;
finalmente el jet se solidifica convirtindose en una fibra de medidas nanomtricas y
presentndose una corriente del orden de micro Amperios sobre el jet.
La corriente que circula por el haz de polmeros (jet), proporciona informacin sobre la
densidad superficial de carga. Esta densidad es un parmetro importante para determinar la
estabilidad del jet.
La gota lquida est sujeta el extremo de la aguja por su tensin superficial, hasta que la
repulsin mutua de las cargas en la superficie de la misma es ms fuerte, lo que provoca una
fuerza en sentido contrario a la contraccin de la gota. La superficie de la gota sufre
progresivamente el efecto de esta fuerza hasta que comienza a alargarse y a formar un cono
inverso, llamado cono de Taylor. El proceso de elongacin llega a un lmite en el que la
concentracin de la carga es tan elevada que sobrepasa a la tensin superficial y da lugar a un
haz en la punta del cono. El haz recorre varias trayectorias inestables durante las cuales se
alarga, reduce su dimetro y pierde todo el disolvente (o se solidifica).

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2.1 Modelizacin del proceso de electrospinning


Es necesario profundizar en la dinmica de fluidos a fin de controlar la calidad, geometra y
produccin en masa de las nanofibras. La parte compleja del proceso es la cuantificacin del
proceso de transformacin de un fluido (que sale de una aguja) en fibras de dimetros que
estn unos cuantos rdenes de magnitud por debajo del dimetro de la aguja. El recorrido del
haz una vez la gota de fluido sobrepasa la tensin superficial se divide en tres partes:
Iniciacin del haz y extensin del haz a lo largo de una lnea recta.

Aumento de las oscilaciones y elongacin del haz (puede ser simultneo a la divisin y /
o ramificacin).

Solidificacin del haz (haces si se divide) en nanofibras.

Formacin inicial del haz polimrico


En los aos 60 Taylor desarroll los principios del electrospinning, estudiando como haces de
diferentes polmeros emergen de tubos conductores cuando se les aplica un campo
electrosttico. Mostr la formacin progresiva de un cono con punta elongada de la que salen
haces cuando la estabilidad en la superficie del cono es mxima.
Tambin estudi el equilibrio del cono en un campo elctrico y concluy que el ngulo de
equilibrio del cono es = 49,3 (posteriormente verificado experimentalmente).
Taylor mostr que el voltaje crtico (ec. 1) necesario para la iniciacin del haz en el que se
establece la mxima estabilidad del fluido es:

Vc en kV, H es la distancia entre los electrodos, L es la longitud del tubo capilar, R es el radio
del tubo y es la tensin superficial del fluido (unidades: H, L y R en cm; en DyN / cm).
El potencial mnimo para el electrospraying de una gota hemisfrica conductora colgando en el
aire (ec. 2) fue calculado por Hendricks como:

r es el radio del haz. La distorsin de la gota es mayor en ambientes no conductores como en el


vaco que resultan con V menores.

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Elongacin del haz:


Aunque no se entienda completamente, se sabe que el fluido sufre inestabilidades durante la
elongacin del haz.
La figura 16 es una imagen de alta velocidad del haz. Cuando el haz electrificado de fluido se
acelera y se adelgaza, las fuerzas radiales de repulsin provocan que el haz se divida en ms
haces pequeos. Este fenmeno se llama splaying. Por esta razn, el dimetro final de las
fibras parece que depende del nmero de haces producidos. (Foto extrada del trabajo
realizado por: P. Martnez, P Marn Diseo y estudio de una mquina de Electrospinning, Dpto. de
Ingeniera Qumica de la UPC.)

(Figura 16) Imagen de alta velocidad del electrospinning

Sin embargo, recientemente se ha demostrado que la reduccin del dimetro del haz es debida
a una oscilacin o inestabilidad asimtrica que causa curvaturas y estiramientos del haz a altas
frecuencias.
Adicionalmente, mientras el haz hace su recorrido hasta el colector puede ser que se divida o
se ramifican.
Baumgarten se fij en que en viscosidades ms elevadas la gota cambiaba de forma
hemisfrica a cnica.
Realizo los clculos haciendo una aproximacin por lneas equipotenciales y dio la frmula (ec.
3) para calcular el radio de la gota esfrica (haz) como

es la permitivitat del fluido (en C / V m), m0 es el caudal (g / s) en el momento en que se


calcula , k un parmetro adimensional relacionado con la corriente elctrica, es la
conductividad elctrica (A / V cm) y la densidad (g/cm3).
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CAPTULO 3:
APLICACINES BIOMEDICAS DEL
ELECTROSPININNG
Existen mltiples y recientes aplicaciones de las fibras de electrospinning en
diversos campos cientficos. En los ltimos aos se han realizado numerosas
patentes, la mayora estadounidenses, que demuestran su utilidad.
El campo de la medicina es en el que ms se extiende la aplicacin de las fibras de
electrospinning. El motivo es que la mayora de los tejidos y rganos humanos como los
huesos, el colgeno, el cartlago o la piel estn estructurados jerrquicamente en redes
nanofibrosas.
Esta rea de aplicaciones de las fibras para electrospinning tiene un gran potencial y es la que
est actualmente ms fomentada y extendida. A continuacin se muestran diferentes tipos.

Prtesis mdicas:

Es la aplicacin, actualmente ms extendida, ya que se pueden utilizar para un gran nmero de


prtesis de tejido blando, como venas, vascular, mama, etc. [1], [2], [3]
Adicionalmente las fibras para electrospinning se pueden usar como films que recubran las
prtesis de tejido rgido que actan como interfaz y que pueden evitar o prevenir que la prtesis
falle.

Patrn orientado para el crecimiento del tejido humano :

Otro campo que destaca es el de los biomateriales, es el diseo de refuerzos ptimos que sean
capaces de imitar las estructuras y funciones biolgicas de la matriz extra-celular.
Generalmente las fibras de dimetros menores que el tamao de las clulas humanas han sido
mejores para la adhesin de las clulas. Por tanto, es necesario desarrollar estructuras fibrosas
para la adhesin y la proliferacin de las clulas. A lo largo de los ltimos aos se ha dedicado
una mayor investigacin para generar refuerzos a partir de polmeros sintticos biocompatibles
y/o biodegradables. [4]

Proteccin de heridas:

Las heridas o quemaduras en la piel se pueden tratar con capas polimricas de nanofibras.
Tambin se han diseado dispositivos hemostticos con caractersticas particulares. El
recubrimiento de las heridas con capas se podra aplicar directamente creando un campo
elctrico local. De esta manera se impulsa el crecimiento de la piel y se evita la formacin de
cicatrices. Una de las limitaciones de este mtodo recae en que, como es lgico, el hueso y la
piel no pueden ser tratados con el mismo tipo de fibra, ya que segn su procedencia polimrica,
en unos casos ser efectiva y en otros no. La investigacin en este campo evoluciona con
rapidez y se espera que pronto forme parte de una nueva tcnica mdica consolidada. [5]
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Administracin de medicamentos:

Cuando se suministran frmacos a los seres vivos, stos se distribuyen en el organismo segn
sus propiedades fsicas, tales como la solubilidad, coeficiente de particin y carga. En
consecuencia, los frmacos pueden alcanzar gran variedad de tejidos y rganos, tanto los que
necesitan el frmaco como otros que no lo necesitan.
Adems, en muchos de ellos, puede que se encuentren fuera de su intervalo teraputico, que
sean inactivos, o que su accin sea indeseada o nociva, y por tanto, con efectos secundarios
negativos.
Actualmente, la administracin de frmacos se realiza asocindolos a otras sustancias que
mejoran su funcionamiento. En la mayora de las modernas formulaciones de frmacos, se
incluyen sustancias de naturaleza polimrica. Existen dos mtodos generales para optimizar la
accin de los frmacos:

Liberacin controlada, que trata de eliminar o reducir los efectos secundarios


produciendo una concentracin teraputica del frmaco que sea ptima para el
organismo. En la mayora de ocasiones, se trata de aproximarse a una cintica de
liberacin de orden cero en la que no se produzcan cambios en la concentracin del
frmaco en el organismo.
Liberacin dirigida, que trata de llevarlo hacia lugares especficos, asegurando que el
frmaco es liberado en el lugar requerido, y al mismo tiempo mantiene el frmaco
inactivo en cualquier otro lugar del organismo.

La administracin de medicamentos se puede disear para resultar en diferentes tipos de


respuesta. Por ejemplo, se puede predeterminar la velocidad de administracin, el momento de
activacin, si se quiere una administracin por impulsos o constante, etc. Normalmente el
cuerpo humano absorbe mejor los medicamentos si stos son
pequeos y si la capa de recubrimiento es fina. El criterio que rige la administracin de
medicamentos es que cuanto mayor sea la superficie del medicamento y de la estructura que lo
soporte, mayor ser la velocidad de disolucin.
La administracin de medicamentos en cuya formulacin se empleen nanofibras se puede
enfocar desde diferentes puntos de vista:

Las partculas de medicamento se incorporan a la superficie de las nanofibras que


sirven de matriz.
Tanto el medicamento como la matriz se encuentran en la forma de nanofibras y el
producto resultante est formado por los dos tipos de fibras entrelazados.
La mezcla del medicamento y del soporte en un solo tipo de fibras que contiene los dos
componentes.
La matriz se dispone por medio de electrospinning en formas tubulares y las partculas
del medicamento se encapsulan.

Es importante destacar que estamos ante una investigacin que an se halla en su primera
etapa, es poco el conocimiento de este tipo de mtodos y si finalmente da buen resultado, no
ser hasta dentro de algunos aos su aplicacin en pacientes. [6]

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Referencias:
[1] Angelo G. Scopelianos, Piezoelectric biomedical device, U.S. Patent 5522876, July 4, 1996.
[2] The University Of Akron, Nanofiber structures for supporting biological materials, U.S. Patent
EP1888331A4, July 8, 2009.
[3] M. Stenoien, W. Drasler, R. Scott, M. Jenson, Silicone composite vascular graft, U.S. Patent

5866217, Feb 2, 1999


[4] Quynh P., Upma S., Mikos A., Electrospinning of Polymeric Nanofibers for Tissue Engineering
Applications, May 2006
[5] Z-M Huang, Y.-Z. Zhang, M. Kotaki, S. Ramakrishna, A review on polymer nanofibers by

electrospinning and their applications in nanocomposites April 2003


[6] W. Gamboa, O. Mantilla, V. Castillo, Produccin de micro y nano fibras a partir de la tcnica de
electrospininng para uso farmacolgico, Fundacin Cardiovascular de Colombia , Grupo de
Bioingenieria, 2007

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CAPTULO 4:
DISEO Y FABRICACION
DE LA MAQUINA DE
ELECTROSPINNING
En este captulo se detallan los aspectos constructivos del sistema de electrospinning. Se
incluyen los mtodos de fabricacin de las piezas mecnicas, circuitos electrnicos usados y
eleccin de los componentes que componen el sistema que utiliza para realizar electrospinning.

Un sistema de electrospinning consta bsicamente de la siguiente partes:

Colector de fibras
Aguja, tubo de conexin y jeringa
Generador de alta tensin
Bomba de infusin
Caja protectora
Materiales fungibles

(Figura 17) Sistema bsico de electrospinning

Tambin debe tenerse en cuenta que se precisa de un sistema ptico, un microscopio, que nos
permita visualizar y medir las fibras obtenidas.
Existe un sistema de electrospinning en Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnologa de
Materiales, INTEMA, Mar del Plata, Argentina. Realice una visita a dicho lugar con el fin tener
una reunin con el Dr. Gustavo Abraham responsable del Laboratorio de Polmeros
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Biomdicos. En dicha entrevista pude adquirir informacin y conocer su equipo, en este


laboratorio se realizan lneas de investigacin tales como :

Sistemas polimricos para ingeniera de tejidos: preparacin de matrices con alta


porosidad
Desarrollo de tcnicas de procesamiento y caracterizacin de matrices porosas
Nanofibras polimricas y compuestas con aplicaciones en ingeniera de tejidos y textiles
funcionales

Lo que refiere una amplia experiencia en la fabricacin de scaffolds con el mtodo de


electrospinning,
Con esta gran ayuda pude tomar las mejores decisiones en el diseo de la maquina a fabricar
Para el funcionamiento de un sistema de electrospinning solo hace falta un generador de alta
tensin, un colector metlico y una bomba de infusin, no es necesario un colector rotativo, ni
caja de proteccin.
En este proyecto se piensa que no se debe proceder al experimento sin ningn tipo de barrera
aislante, ya que se utilizan voltajes de hasta 30kV.
En base a lo expuesto, se realizo primero el diseo de los diferentes componentes y del
sistema en general en al programa de diseo AUTOCAD 3D

4.1 Diseo del sistema en AUTOCAD 3D


Se muestra a continuacin los grficos que se realizaron en el programa de diseo. Los cuales
fueron realizados para poder tener una dimensin de las piezas que componen el equipo.
En la figura 18 se observa el diseo de colector rotativo con sus componente y dimensiones
correspondientes, la figura 19 muestra el chasis del equipo con el soporte para la aguja y el
colector rotativo, por ltimo la figura 20 muestra el equipo completo con las dimensiones del
mismo.

(Figura 18) Diseo del Colector Rotativo

(Figura 19) Diseo de chasis, soporte para


el colector y Aguja

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(Figura 20) Diseo completo de la mquina de electrospining

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4.2

Fabricacin y/o Descripcin de los diferentes Mdulos

Las tareas de fabricacin se realizaron en el taller Masino, de soldaduras de aluminio y


metalmecnica, propiedad de Juan Carlos Masino en Monteagudo 1031 de San Miguel de
Tucumn.
A continuacin se describir la fabricacin de las parte del Colector Rotativo. La figura 21
muestra un despiece general del sistema

(Figura 21) colector rotativo

4.2.1 Colector rotativo


Componentes del colector (figura 21)
1
2
3
4
5
6
7
8
9

Cilindro
Tapas del cilindro
Soportes
Eje
Poleas
Rulemanes
Motor
Control de velocidad
Tacometro
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Cilindro
Para el cilindro se utilizo un cao de acero inoxidable de instalaciones sanitarias sin costuras el
cual tuvo que ser cortado y torneado en las dimensiones 20cm de largo y 10cm de dimetro

(Figura 22) Cilindro Colector

Proceso de fabricacin de la piezas


Todas la demas piezas a excepcin de los rulemanes fueron fabricadas con aluminio. El
proceso de fabricacin de las piezas tiene varias etapas las cuales se pueden clasificar de la
siguiente manera:

Preparacin de moldes
Fundicin del aluminio
Torneado de la piezas

Preparacin de los moldes


Para poder fabricar las piezas lo primero que hay que hacer es preparar los moldes (Figura 23)
donde se va a verter el aluminio fundido y de esa manera poder obtener la pieza.

(Figura 23) Moldes de piezas

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Fundicin del aluminio


Una vez que se tiene los moldes se puede empezar la etapa de fundicin

(Figura 24) Material recolectado para


fundir, este fue recolectado de chatarra
que se encontraba en el taller donde se
realizo la fundicin

(Figura 25) Maquina necesaria para


fundicin (fragua)

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(Figura 26) Proceso de fundicin

Una vez realizada la fundicin del materia (figura 26) se coloca en los moldes y se realiza el
enfriamiento (Figura 27) para obtener las piezas en un estado bruto.

(Figura 27) Enfriamiento de la pieza


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Torneado de las piezas


Obtenido el material en bruto se comienza el proceso de torneado de la piezas. La precisin de
las medidas geomtricas dependen del error de diseo especificado. En el dimetro de las
tapas de cilindro se acepta un error de 0.1mm, en el dimetro del eje un error de 0.1mm,
dimetro de soportes para colocar rulemanes un error de 0.1mm.
Para tornear los soportes se tuvo que fabricar una herramienta, ya que estos no pueden ser
trabajados sin la misma. (Figura 30)

Etapa de torneado
1. Tapas del cilindro

Tapa de cilindro

(Figura 28) Torneado tapa de cilindro

(Figura 29) Pieza terminada

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2. Soporte

(Figura 30) Herramienta para poder tornear los soportes

(Figura 31) Antes de tornear los soportes

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Soporte

Herramienta para tornear


soportes

(Figura 32) Torneado de soportes

(Figura 33) Fin de torneado de los soportes

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3. Eje

Eje

(Figura 34) Torneado de eje

Eje

(Figura 35) Eje terminado

Una vez terminado el proceso de fabricacin de las piezas se puede ensamblar el colector
rotativo completo. (Figura 36)

(Figura 36) Colector Rotativo terminado

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Motor
El colector tiene que moverse de manera rotativa, para esto necesitamos un motor y un control
de velocidad.
El motor usado es un C2162-60006 hp, el cual fue obtenido de una impresora en desuso.
Caractersticas:

Tensin de alimentacin: 12 V
Corriente : 2,5 Amp
Torque: 18,4 N/cm
Velocidad sin carga :1950 Rpm
Potencia max : 34,2 W

(Figura 37) Motor C2162-60006 hp

Para realizar el proceso de electrospinning el colector debe poder variar su velocidad desde
unos 300-1000 Rpm, eligiendo una velocidad dentro de este rango es muy probable que el
proceso tenga resultados satisfactorios, siempre teniendo en cuanta que el xito del proceso no
solo depende de la velocidad del colector ms adelante se vern detallamente cada variable a
tener en cuenta para obtener buenos resultados.
Como podemos observar la mxima velocidad del motor es 1950 Rpm, por lo que se necesita
hacer una reduccin de velocidad, esto se logro mediante el clculo de las poleas, para esto
usamos la relacin entre poleas y velocidades.
V1*D1=V2*D2= i (relacin de velocidad) Donde :

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Entonces teniendo que V1= 1950 Rpm , V2=1000 Rpm y adoptando D2= 500 mm, obtengo
que la polea conductora tiene que tener un dimetro de 256 mm

(Figura 38) Poleas fabricadas

Control de velocidad
Para controlar la velocidad del cilindro y obtener el rango necesario, requerido por el proceso,
se utiliza un control de velocidad por modulacin de ancho de pulso (PWM, siglas en ingls de
pulse-width modulation ).
La modulacin por ancho de pulsos de una seal o fuente de energa es una tcnica en la que
se modifica el ciclo de trabajo de una seal peridica, ya sea para transmitir informacin a
travs de un canal de comunicaciones o para controlar la cantidad de energa que se enva a
una carga.
El ciclo de trabajo de una seal peridica es el ancho relativo de su parte positiva en relacin
con el perodo. Expresado matemticamente:

D es el ciclo de trabajo
es el tiempo en que la funcin es positiva (ancho del pulso)
T es el perodo de la funcin

Esta es una tcnica utilizada para regular la velocidad de giro de los motores elctricos de
induccin o asncronos. Mantiene el par motor constante y no supone un desaprovechamiento
de la energa elctrica. Se utiliza tanto en corriente continua como en alterna, como su nombre
lo indica, al controlar: un momento alto (encendido o alimentado) y un momento bajo (apagado

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o desconectado), controlado normalmente por relevadores (baja frecuencia) o MOSFET o


tiristores (alta frecuencia).
El circuito utilizado es el siguiente:

(Figura 39) Circuito PWM

El circuito (Figura 39) se basa en un integrado NE555 el cual genera el tren de impulsos
necesario para controlar el transistor, el cual acciona por pulsos el motor de continua. El diodo
en paralelo con el motor impide que, cuando se quita la corriente, el transistor se queme. Los
componentes entre los terminales 2, 6 y 7 del integrado regulan la frecuencia de oscilacin del
circuito y, por ende, la velocidad del motor. El transistor, con un buen disipador de calor, puede
manejar hasta 75W de potencia.

B B

(Figura 40) A) Diseo de plaqueta PWM , B) Plaqueta terminada

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Tacmetro
Para poder determinar la cantidad de revoluciones que gira el cilindro, se utiliza un
microcontrolador PIC 16F84A.
El sistema para poder obtener las revoluciones del cilindro est compuesto por:

Microcontrolador PIC 16F84A


Generador de pulsos optoelectronico
Visualizacin de datos con display LCD de 2 lneas por 16 caracteres

Microcontrolador PIC 16F84A


El PIC 16F84A es el corazn del circuito; es el encargado de contar los pulsos a travs de la
terminal RA4/TOCK1. El PIC 16F84A cuenta el numero de pulsos y los convierte a formato
ASCII para enviarlos a travs del puerto B al display LCD (Figura 44) . La figura siguiente ilustra
sistema mnimo.

(Figura 41) Conexin bsica de un PIC 16F84A

Generador de pulsos optoelectronicos


El generador de pulsos est compuesto por un LED infrarrojo y un fototransistor
A

(Figura 42) A) configuracion optoacoplador, B) optoacoplado utilizado

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Disco dentado

Optoacoplador

(Figura 43) Sistema generador de pulsos

Como podemos observar de la figura 42, cuando incide la luz a la base del fototransistor, este
se encuentra en saturacin y aparece un voltaje de 0 VCC en la terminal RA4 TOCK/IN del PIC
16F84A. Cuando la luz es interrumpida el transistor se halla en corte y se aplica un voltaje de 5
VCC en la terminal TOCK/IN del PIC. De tal forma que cuando el disco dentado (Figura 43)
colocado en el eje de giro del cilindro se interrumpen o permite el paso de la luz, se generan los
cambios de voltaje de 0 a 5 VCC. Estos son los pulsos que cuanta el microcontrolador, y de
esta forma de termina la velocidad de giro del cilindro.

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Visualizacin de datos con display LCD de 16X2


Los datos obtenidos por el PIC 16F84A son procesados y enviados a travs del puerto B para
ser exhibidos en el display de cristal liquido de 2 lineas por 16 caracteres cada una. La
siguiente figura ilustra la forma como se conecta el PIC 16F84A con el display LCD.

(Figura 44) Simulacin del tacmetro

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En la siguiente figura se muestra la circuitera del sistema utilizado para realizar el


conteo de pulsos.

(Figura 45) Sistema terminado, Visualizacin de la velocidad

El Display muestra al operario la velocidad del cilindro en revoluciones por segundo, como se
observa en la siguiente figura.

(Figura 46) Mensaje del Display

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4.2.2 Aguja, tubo de conexin y jeringa


La bomba de infusin empuja a la jeringa que contiene la disolucin polimrica. Mediante un
tubo flexible se conecta a una aguja que constituye el polo positivo del sistema.
Habitualmente se utilizan jeringas de plstico, comunes de las empleadas en medicina. Pueden
ser de diferentes tamaos 5ml, 10ml, 20ml, 60ml y 100ml, en funcin del experimento se
analiza la conveniencia del tamao de la jeringa. En nuestro diseo, se utiliz una jeringa 60ml,
el tubo de goma es de silicona.
La principal caracterstica que debe tener la aguja para ser usada en electrospinning, es ser
Punta Roma, ya que permite la formacin correcta de la gota para realizar el proceso.
En este proyecto se adquiri en sigma aldrich (1) la aguja, dimetro de 18G y 51 mm de
longitud

(Figura 47) Aguja utilizada

(Figura 49) Jeringa, aguja y tubo de conexin

(1) www.sigmaaldrich.com

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4.2.3 Generador de alta tensin:


Generadores de alta tensin hay varios. La serie ES de generadores de alta tensin de la firma
Gamma High Voltage nos ofrece un amplio rango de valores para poder elegir.

(Figura 50) Listado de generadores tiles

La fuente seleccionada debe trabajar entre 10kV y 30kV, con una corriente de 166uA. Estos
son valores suficientes para ensayos de electrospining segn la bibliografa. [5]
El modelo elegido para formar parte del sistema de fabricacin de scaffolds es ES30P-5W/DAM
cuyas caractersticas son:

Tensin de salida: 0-30 kilo voltios DC


Corriente de salida: 166 micro Amperes
Potencia: 5 watts
Medidor analgico de tensin de salida
Medidor analgico de corriente de salida
Tensin de entrada: 90-240 voltios AC; 50-60Hz
Regulacin: 0.05% para +/- 10% carga de lnea
Ripple: 0.1%
Tamao: 12.7 alto x 20.32 ancho x 25.4 profundidad
Peso: 4.95 Kgr

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(Figura 51) Generador elegido

Realizar trabajos con una fuente de alta tensin implica tener ciertos cuidados, estos nos
permita trabajar de manera ms segura y minimizar los riesgos de recibir una descargas
elctrica, que puede poner en riesgo la vida del operador.
Pasamos a citar algunas concejos bsicos de seguridad a tener en cuenta [13], [14]

Reconozca su lugar de trabajo: dnde se localizan y cmo se accionan los interruptores


de energa y los extintores.
Aprenda primeros auxilios.
Consulte los manuales antes de manejar equipos elctricos.
Sujete firmemente la clavija (no el cable) al desenchufarlos equipos elctricos. Tirar del
cable puede daar el cable, la clavija o el tomacorriente y resultar en choques elctricos
o incendios.
Desenchufe los equipos, electrodomsticos y cables de extensin cuando no se
encuentren en uso, antes de inspeccionarlos, limpiarlos o arreglarlos.
Reconozca los indicios de sobrecarga en los circuitos, incluyendo el parpadeo u
oscurecimiento de las luces, fusibles quemados, tomacorrientes o cables de extensin
calientes al tacto y disyuntores que se disparan.
Verifique la existencia de una puesta a tierra efectiva en su instalacin.
Nunca manipule dispositivos o circuitos energizados (verifique que estn abiertos o
desconectados).Compruebe la desconexin (por ejemplo empleando un voltmetro).
Si necesita trabajar sobre circuitos energizados, siempre emplee herramientas de
mango aislado.
Si tiene cabello largo, use una banda para mantenerlo recogido
No use cadenas, anillos, corbata o cualquier prenda suelta mientras est trabajando en
una mquina.
Verifique si las piezas estn fijadas correctamente en las mquinas antes de ponerlas
en funcionamiento.
Mantenga el piso alrededor de las mquinas libre de grasa, aceite, piezas y
herramientas de trabajo.
Desconectar la herramienta al observar alguna irregularidad, como: Chispas o arcos
elctricos, sensacin de descarga elctrica, calentamiento anormal de la herramienta.
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Usar correctamente los equipos de proteccin personal que requiera el trabajo, (gafas,
guantes, etc.).

4.2.4 Bomba de infusin


La bomba de infusin es la que se encarga de empujar la solucin polimrica hacia la aguja
con una velocidad determinada para obtener la fibra requerida, ya que a diferente velocidad, la
fibra vara su dimetro. La bomba se caracteriza por un desplazamiento muy lento del mbolo
ya que un flujo muy pequeo permitir que la solucin caiga gota a gota.
El diseo es el siguiente:
La bomba de infusin tiene un mbolo que empuja a la jeringa que contiene la solucin
polimrica, segn la velocidad que se haya programado en la mquina. La caracterstica
exigible a la bomba es que esa velocidad sea muy lenta y constante de manera que el flujo de
disolucin que llegue a la jeringa sea idntico a todo lo largo del experimento.
Caractersticas:

Nombre: Aitecs
Modelo: sp-125
Velocidad de infusin: 0.1 ml/h 99.9 ml/h, con pasos de 0.1 ml/h
Jeringas: 5ml, 10ml, 20ml, 60ml y 100ml
Batera recargable duracin 3hs
Conexin a lnea de 220 v , 50 Hz
Fcil manejo

(Figura 52) Bomba de infusin utilizada

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4.2.5 Caja protectora


Durante el funcionamiento de la mquina de electrospinning se aplica un voltaje muy elevado,
por precaucin, debemos aislar de alguna manera ese montaje, y evitar el contacto directo con
el personal cuando la mquina est en marcha. Como sistema de aislamiento se diseo una
caja de metacrilato de dimensiones x cm dotada de una puerta frontal. Se escogi como
material el PMMA debido a que posee las siguientes caractersticas:

Mayor transparencia que la del cristal.


Pesa menos de la mitad que el vidrio.
Superficie tan dura como la del aluminio.
Entre 10 y 20 veces ms resistente al impacto que el cristal.
Es el plstico ms resistente a la intemperie que existe.
Margen continuado de temperaturas desde -90 0C hasta +85 0C.

Todas estas caractersticas son favorables ya que se podr trabajar y a la vez controlar
visualmente el experimento, aunque a veces a simple vista cueste de ver como se producen las
nanofibras, ya que su tamao es muy pequeo.
El peso es muy importante, nos conviene una mquina ligera por si hay que desplazarla a otro
lugar.
Se le dot de una puerta frontal para poder cerrar el aparato cuando hay tensin elctrica y,
una vez desconectado el suministro elctrico, acceder al interior y recoger las fibras obtenidas
en el ensayo.

4.2.6 Materiales fungibles

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4.3 Equipo terminado

( Figura 53) Equipo de electrospinning terminado

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CAPTULO 5:
METODO DE PRODUCCION DE
SCAFFOLDS
En este captulo se citaran las sustancias aptas para trabajar con electrospinning, a
continuacin se describir el polmero utilizado para realizar las pruebas y por ltimo se
explicaran los parmetros involucrados en la proceso de produccin de scaffolds.

5.1 Sustancias aptas para trabajar con electrospinning


A continuacin presentaremos una lista de los polmeros con sus respectivos solventes, que
pueden usarse para la fabricacin de scaffolds por electrospinning.

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Para realizar la prueba del sistema utilizamos Alcohol Polinilico (PVA). El cual se encuentra en
la lista anterior marcado con un recuadro de color.
ALCOHOL POLIVINILICO :

(Figura 54) Formula PVA

El alcohol polivinlico es una resina sinttica representada por la frmula (CH2-CHOH)n, donde
el peso molecular medio oscila entre 500 y 5000. Se prepara a partir de la
hidrlisis de un 85 a un 89 % de Polivinil Acetato.
Presenta diversos grados de polimerizacin: alta viscosidad (peso molecular medio,
200.000), viscosidad media (PM, 130.000), baja viscosidad (PM, 30.000)
Es una sustancia que sufre degradacin lenta a 100C y rpida a 200C (se
descompone en cidos fuertes). Incompatible con la mayora de las sales inorgnicas,
especialmente con sulfatos y fosfatos.
A diferencia de muchos polmeros vinlicos, el PVA no es preparado por la polimerizacin del
correspondiente monmero. Dado que el alcohol vinlico es inestable con respecto a la
isomerizacin a acetaldehdo su polmero debe prepararse por mtodos indirectos. El
monmero, alcohol vinlico, existe casi exclusivamente en la forma tautomricas, el
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acetaldehdo. El PVA se prepara por alcohlisis (se emplean tambin los trminos menos
exactos hidrlisis y saponificacin) parcial o total de acetato de polivinilo para eliminar los
grupos acetato.

Caractersticas Fisico-Quimicas
Aspecto: Sustancia granulosa o purulenta de color blanca o blanca- cremosa e
inodora.
Olor: Suave
Solubilidad: Fcilmente soluble en agua. Se solubiliza muy rpidamente en agua
caliente.
PH ( 4% en H2O ) 5,0 - 8,0

Caractersticas de seguridad

Descripcin de la emergencia: PRECAUCIN! PUEDE FORMAR


CONCENTRACIONES
COMBUSTIBLES DEL POLVO EN AIRE. POLVO DEL FASTIDIO.
Grado de la salud: 1 -Leve.
Grado de la inflamabilidad: 1 - Leve
Grado de la reactividad: 1 - leve
Grado del contacto: 1 - Leve
El laboratorio protector equipa: ANTEOJOS; CAPA DEL LABORATORIO;
EXTINGUIDOR DE LA
CLASE B.
Cdigo de color del almacenaje: Rojo (inflamable).

Efectos de salud potenciales.


Inhalacin: El polvo se puede formar bajo ciertas condiciones del uso. Convite
como polvo del fastidio.
Cuando estn calentados sobre 200C, los humos que irritan los ojos olfatean,
garganta sern desarrollados. Los sntomas pueden incluir los rasgones en los
ojos con picar, rojez, dolor ardiente en garganta y la nariz.
Ingestin: No esperado ser un peligro para la salud va la ingestin.
Contacto de la piel: No esperado ser un peligro para la salud de la exposicin
de piel.
Contacto visual: Irritacin mecnica solamente.
Exposicin crnica: Ningunos datos humanos. Los estudios animales
demostraron una gota en nmero de la hemoglobina y del erythrocyte (clula de
sangre roja) con la inhibicin completa eventual de la coagulacin. Hay la
posibilidad de carcinogenicity segn lo visto en algunos estudios animales.
Provocacin de condiciones preexistentes: Ninguna informacin encontrada.
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Medidas de los primeros auxilios.


Inhalacin: Quitar al aire fresco. Conseguir la atencin mdica para cualquier
dificultad de respiracin.
Ingestin: No esperado requerir medidas de los primeros auxilios.
Contacto de la piel: Lavar la piel con jabn y agua. Conseguir el consejo
mdico si la irritacin se convierte.
Contacto visual: Limpiar los ojos con agua. Conseguir el consejo mdico si la
irritacin se convierte.

(Figura 55) Alcohol polinilico comprado en sigma aldrich

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5.2. Parmetros del proceso de electrospinning


La transformacin de una disolucin polimrica en un conjunto de nanofibras mediante
electrospinning es un proceso gobernado por una amplia variedad de parmetros que se
enumeran a continuacin:

Propiedades de la disolucin: Viscosidad, concentracin, elasticidad, conductividad y


tensin superficial

Variables de control: Presin hidrosttica en el tubo capilar, potencial elctrico en la


punta del capilar, velocidad de flujo aplicado, distancia entre la punta y el colector.

Parmetros ambientales: Temperatura de la disolucin o del polmero disuelto,


humedad, velocidad del aire en la cmara de electrospinning

Una vez funciona el proceso electrospinning con una disolucin o polmero disuelto, hay tres
principales puntos de inters en las fibras producidas:

Los dimetros de las fibras, que sean consistentes y controlables.

La superficie de la fibra, que no presente defectos (o al menos stos sean


controlables).

Si es factible conseguir nanofibras aisladas, es decir que no se produzca


aglomeraciones que interfieran en el estudio de dichas fibras.

La literatura publicada sobre las investigaciones hechas hasta la actualidad muestra que estos
requerimientos no son realistas y que no se han obtenido fibras que los cumplan los tres.
Una de las principales variables cuantificables del proceso electrospinning es el dimetro de las
fibras. Esta variable depende en su mayor parte del tamao del haz y de la concentracin de
polmero que ste contenga. Segn los fundamentos fsicos publicados sobre el
electrospinning, no hay un consenso total del proceso que el haz sufre en el recorrido entre la
punta y el colector. Puede ser o no, que el haz se divida en ms haces y que estos resulten en
diferentes dimetros de fibras. En el caso de que no haya esta particin, la viscosidad se
convierte en una de las variables ms determinantes para el dimetro de las fibras.
Cuando los polmeros se disuelven, la viscosidad de la disolucin es proporcional a la
concentracin de polmero. Por tanto, cuanto ms alta sea la concentracin, mayor ser el
dimetro de las fibras resultantes. El voltaje tambin es un parmetro respecto al cual el
dimetro de las fibras es directamente proporcional, debido a que generalmente hay ms
disolucin en el haz.
Las fibras producidas por electrospinning, a menudo, presentan defectos como son los poros y
las aglomeraciones (ver figuras siguientes). La literatura indica que la concentracin de
polmero afecta la formacin de aglomeraciones de tal manera que cuanto ms concentrada en
polmero sea la disolucin para electrospinning, menos aglomeraciones presentarn las fibras.
Algunas investigaciones han desarrollado ideas de los parmetros de los cuales depende la
formacin de aglomeraciones.
Algunos investigadores atribuyen el hecho de que no se formen aglomeraciones a la baja
tensin superficial. Otros relacionan la baja concentracin superficial en la concentracin de
polmero. Cabe destacar que la tensin superficial vara en funcin del disolvente y por este
motivo el electrospinning no siempre es ptimo a tensiones superficiales bajas.
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El control sobre estas variables determina la estabilidad del sistema y la calidad del material
fabricado. Una descripcin de las variables se menciona a continuacin:

Distancia de inyeccin: Es la distancia de recorrido del jet entre el inyector y el


colector conectado a tierra; se mide desde la punta de la aguja hasta la plataforma
recolectora.

Velocidad de recoleccin de las fibras: El colector de fibras, puede ser fijo o puede
tener movilidad dependiendo del grosor requerido de las fibras. Si es mvil, la velocidad
de recoleccin de fibras debe ser cuidadosamente seleccionada para no romper las
fibras y para evitar la acumulacin de grumos.

Variacin del potencial elctrico: Para esta aplicacin, se requiere de una fuente que
proporcione una variacin de voltaje entre los 0 y +/- 50kV.
El voltaje que se aplica va ligado a la distancia entre la punta de la aguja y la
superficie del colector o de la placa metlica.
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A mayor potencial elctrico las fibras son ms delgadas y ligeras, proporcionalmente a


la distancia de inyeccin.

Velocidad de flujo aplicado: es la velocidad escogida que es aplicada durante los


experimentos y que se mantiene constante durante todo el proceso.

Humedad: Es una variable muy importante en la creacin de fibras, ya que a un


porcentaje relativamente alto de humedad generara un ambiente propicio para la
ionizacin de partculas del biopolmero, la reaccin temprana de las soluciones y
retardo de la evaporacin de los solventes, produciendo goteo y mal formacin de
fibras.
Un porcentaje ptimo de humedad relativa est entre el 10 % y el 40 %.

Variables mecnicas del sistema: Las variables mecnicas de las fibras como son la
resistencia, elasticidad y grosor, dependen fuertemente de las condiciones iniciales del
sistema, es decir, la clase de polmero, las caractersticas del solvente, los clculos de
energa potencial y el voltaje aplicado.

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CAPTULO 6:
ANALISIS DE SEGURIDAD
ELECTRICA
En este captulo, se realizo el estudio de la seguridad elctrica del equipo, realizando dos
pruebas, de rigidez dielctrica del aire y riesgo de choque elctrico.

6.1. Prueba de rigidez dielctrica del aire en continua


Se denomina rigidez dielctrica de un aislante a la intensidad del campo elctrico
mxima que puede soportar el aislante sin que se produzca su perforacin. Es decir,
cuando la intensidad del campo elctrico en el interior del material aislante supera a su
rigidez dielctrica, este deja de ser aislante y se convierte en conductor.
Esta magnitud se determina experimentalmente mediante ensayos en
los que se aplica una tensin entre dos electrodos colocados en caras opuestas de una
muestra del aislante. La tensin se va aumentando gradualmente hasta
provocar la perforacin del aislante.
La rigidez dielctrica se expresa como cociente entre la tensin de perforacin del
material y el espesor de la pieza aislante y se mide en kV/cm.
El aire limpio, a 20C de temperatura y presin atmosfrica tiene una rigidez
dielctrica de 30 kV/cm. [15]

Para poder estudiar la rigidez elctrica del aire que asla la diferencia de potencial entre la
aguja-colector de la caja de proteccin y chasis del equipo, se realizo un ensayo en el
Laboratorio de Alta Tensin de la Facultad de Ciencias Exactas y Tecnologa de Tucumn a
cargo del Dr. Daz.
El ensayo fue realizado con una fuente de alta tensin que alcanza un valor mximo de 40 kv.
En el ensayo se genero una diferencia de potencial de 0-40 kv, en pasos de 10kv (un 10% ms
de lo que el equipo trabaja) entre la aguja y el colector (que estaba unido al chasis del equipo
para generar que el chasis tambin este a esa diferencia de potencial) la distancia entre la
aguja y el colector fue de 10 cm, se eligi esta distancia por qu sera el caso ms desfavorable
ya que los procesos de electrospinning por lo general no utilizan distancias menores a esta.
El ensayo fue realizado a una temperatura de 25 C, una humedad de 40%, condiciones de
presin atmosfrica 1010,2 hpa = 0,99 atmosfera y tiempo de duracin de 3 minutos

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No se observo durante el ensayo ningn tipo de ruptura de la rigidez dielctrica del aire.
A continuacin se muestra (Figura 56) la distribucin de las lneas de campo generadas en la
prueba, la simulacin se realizo con el programa Quickfield, para realizarla se tuvieron en
cuenta los parmetros utilizados en la prueba.
Parmetros:
Tensin Aguja : 40 kv
Tensin colector: 0 kv
Distancia aguja-colector : 10 cm

Aguja

(Figura 56) Simulacin lneas de campo

Se observa en la figura 56 que el campo elctrico en los bordes del equipo es suficientemente
bajo y el riesgo de ruptura dielctrica del aire dentro de la cmara es bajo.
El campo elctrico no excede los 30 kV/cm en ninguna parte del sistema.
En el ensayo, tambin se puedo medir una corriente de fuga a tierra menor a 10 micro
Amperes, este valor cumple con lo establecido en la norma IRAM 4220-2-7 (Generadores de
alta tensin para equipo de Rayos X). Donde establece que para generadores de alta tension la
corriente de fuga a tierra tiene que ser menor o igual a 2 mili Amperes.
Se utilizo esta norma como referencia, ya que no existen normativas para la aplicacin de alta
tensin en equipos de elctrospinning
Por estas razones se concluye que el equipo es seguro para el usuario mientras se est
produciendo el proceso de electrospinning.

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Caractersticas de la fuente:

Marca: Protonics
Tensin de salida: 0-40kv Dc
Tensin de alimentacin : 220 v
Positivo a tierra
Medidor analgico de tensin de
salida
Medidor analgico de corriente de
salida

(Figura 57) Fuente utilizada

La fuente (Figura 57) tiene su positivo conectado a tierra, lo que implico conectar todo el chasis
a tierra.
Por razones de seguridad no se poda acercar a menos de 2 metros, ya que poda realizarse
una descarga elctrica.

(Figura 58) Valor mximo de tensin alcanzado

( Figura 59) Prueba de rigidez dielctrica del aire

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6.2. Anlisis de proteccin contra los riesgos de choque elctrico


Este anlisis se realiza para comprobar que el equipo fue diseado para evitar el riesgo de
choque elctrico, cuando fuera posible, en uso normal y en condicin de primer defecto.
Los equipo elctromedicos pueden clasificarse de acuerdo a la proteccin utlizada.
En este caso el equipo es un clase I, la cual se define de la siguiente manera:
Clase I : Aquellos equipos en los que la proteccin no se obtiene slo del aislamiento bsico,
sino que se incluyen precauciones auxiliares, de forma que se dispone de una conexin de las
partes conductoras accesibles al conductor de tierra de forma permanente, para que no
puedan, estar a tensin elevada en caso de fallo de aislamiento.
Para realizar el anlisis se utilizo un dispositivo especial para realizar estos test Fluke ESA612
(Figura 60) , el equipo fue prestado por el Departamento de Ingeniera Clnica de la Facultad de
ciencias Exactas y Tecnologa.
Analizador de seguridad elctrica ESA612 Fluke Biomedical

(Figura 60) Analizador Fluke ESA612

Es un analizador compacto y porttil, diseado para la verificacin de la seguridad elctrica de


los aparatos electromdicos de acuerdo a las normas IEC 60601-1//IRAM 4220-1, siendo capaz
de medir resistencia de aislacin y distintas corrientes de fugas.

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6.2.1 Pruebas realizadas


1- Resistencia elctrica de la tierra de proteccin (captulo 18f) de la norma IRAM
4220-1:1999)

Se debe seleccionar en el analizador la funcin para medir resistencia y


posteriormente se deber poner a cero la resistencia del conductor de prueba
para que la misma no afecte a la medicin.
Finalmente se debe conectar el extremo del conductor de prueba a alguna parte
metlica de la envoltura del equipo, la cual debe estar protegida por puesta a
tierra.
La resistencia medida se presentar en el visualizador del analizador.

2- Corriente de fuga a tierra (captulo 19 de la norma IRAM 4220-1:1999)

Se debe acceder al men principal de corriente de fuga del equipo analizador y


seleccionar la funcin Ground Wire (Lnea de tierra) para que el analizador
realice la medicin de la corriente de fuga a tierra.
Posteriormente se utiliza las funciones del analizador para generar condiciones de
primer defecto (abrir o cerrar conductor neutro) y se realizaran las mediciones de
corriente de fuga a tierra en polaridad normal e invertida para dichas condiciones.

3- Corriente de fuga a tierra a travs de la envoltorio (captulo 19 de la norma IRAM


4220-1:1999)

Se debe acceder al men principal de corriente de fuga del equipo analizador y


seleccionar la funcin Chassis (Chasis) para que el analizador realice la medicin
de la corriente de fuga a tierra a travs de la envoltura.
Posteriormente se utiliza las funciones del analizador para generar condiciones de
primer defecto (abrir o cerrar conductor neutro), conexin de tierra del receptculo
(abrir o cerrar) y se realizaran las mediciones de corriente de fuga a tierra a
travs de la envoltura.

4- Prueba de resistencia del aislamiento

La prueba de resistencia de aislamiento se mide entre la red y la tierra de


proteccin. Para realizar la prueba se debe conectar el equipo bajo ensayo con el
analizador como est indicado en la Figura 61 obtenida del manual de usuario del
analizador y luego se debe acceder al men de pruebas de resistencia del
aislamiento del mismo.
Seleccione el voltaje con el que se realizara la prueba. Una vez finalizado esto se
debe seleccionar la prueba que se desea realizar presionando la tecla
programable que corresponde a dicho ensayo y finalmente la tecla test para

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aplicar el voltaje seleccionado al dispositivo bajo prueba y tomar la medicin de


resistencia del aislamiento.

(Figura 61) Esquema de la prueba de resistencia del aislamiento de la red a la tierra de proteccin

(Figura 62) Conexin del equipo analizador

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6.2.2 Resultados obtenidos


Todas las pruebas fueron realizadas con una tensin de lnea de 222,5 v y una
temperatura de 23 C

Valor obtenido

(A)

Corriente de fuga a tierra


Corriente de fuga a tierra a
travs de la envoltorio

C.N

C.P.D

12,4
0,6

30,8
0,9

Norma IRAM
4220-1
(mA)
C.P.D
C.N
0,5
0,1

Valor obtenido
(ohms)
Resistencia elctrica de la
tierra de proteccin

0,130

1
0,9

Norma IRAM
4220-1
(ohms)
0,2

C.N.: Condicin Normal


C.P.D.: Condicin de Primer Defecto

Todos los valores obtenidos en las pruebas fueron menor a los valores mximos establecidos
por la norma IRAM 4220-1
La prueba de resistencia del aislamiento se realizo a una tensin de 250v, el equipo analizador
acus en su display el mensaje OL M (Figura 63), el cual indica que la aislacin del equipo es
del orden de los Mega ohm, este es orden de aislacin que establece la norma.
En el caso de que la aislacin sea menor a lo establecido por la norma el equipo analizador
indica un valor cuantitativo.

(Figura 63) Mensaje de resistencia de aislamiento

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CAPTULO 7:
PUESTA EN MARCHA DEL
EQUIPO
A continuacin se describen las experiencias realizadas con el equipo y sus respectivos
resultados obtenidos.

7.1.1 Experiencia N 1:
Se realizo la primea experiencia del equipo para poder comprobar el correcto funcionamiento.
Para realizar el ensayo se utilizo una fuente de alta tensin cuyo rango es de 0-40kv, que nos
facilito el Laboratorio de Alta Tensin de la Facultad de Ciencias Exactas y Tecnologa de
Tucuman a cargo del Dr. Daz.
El polmero utilizado para realizar la experiencia fue el alcohol polivinilico (PVA), este nos
proporciona la conductividad necesaria para el proceso de electrospininng.

Velocidad de flujo
Distancia punta de la aguja-colector
Tensin aplicada
Concentracin PVA
Velocidad de recoleccin
Aguja utilizada

8 ml/h
10 cm
20 kv
8 % peso/volumen
10 RPS (600 RPM )
Punta roma, dimetro interno 18G
Longitud 51 mm

(Figura 64) Parmetros utilizados para la experiencia

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( Figura 65)Foto del proceso en marcha

7.1.2 Resultados Obtenidos


Observando a simple vista se puede diferenciar el colector la formacin de una pelcula
delgada de fibra polimerica (Figura 66).
Se procedi a retirar cuidadosamente dicha fibra para poder observa lo obtenido en un
microscopio ptico (Figura 67,68 y 69), de tal manera que se pueda corroborar la formacin de
fibras.

(Figura 66) Foto del colector, con la formacin de fibra

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La escasa deposicin de fibras sobre el colector (Figura 65), fue debido a que el proceso duro
solo 30 minutos ya que se produjo un problema tcnico en la fuente de tensin, lo que llevo a
tener que detener el proceso.

Fibra

(Figura 67)Foto obtenida en microscopio ptico x100

(Figura 68)Foto obtenida en microscopio x400

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(Figura 69)Foto obtenida en microscopio x1000

Al visualizar los resultado con un aumento de 100 veces (Figura 67) se puede observa que se
obtuvo deposicin de fibras en el cilindro, para estudiar mejor la morfologa de la fibra obtenida
se visualiza con aumentos de 400 y 1000, en el de 400 (Figura 68) veces mayor se observa la
fibra pero la resolucin todava no permite distinguir bien la morfologa ya que se observa
mucho las imperfecciones de la superficie del colector. En el aumento 1000 veces (Figura 70),
se puede distinguir que se produjo un fenmeno denominado electrospraying, el cual consiste
en la formacin de micro gotas del orden de 100 micrmetros, si bien se obtuvo electrospraying
se puede observar que algunos sectores existe la tendencia a la formacin de hilos
micromtricos (Figura 71) .

Electrospraying

(Figura 70) Foto obtenida en microscopio x1000

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Leve tendencia a
formacin de fibras

(Figura 71)Foto obtenida en microscopio x1000

7.2.1 Experiencia N2:

En la experiencia anterior no se pudo observar de cerca el proceso durante su ejecucin. Por


cuestiones de seguridad no se poda acerca a mas de 2 metros de distancia del equipo, esto se
debido a que la fuente utilizada tiene su positivo a tierra, por lo que el chasis del equipo tena
que estar a tierra y cualquier acercamiento poda implicar una descarga.
Teniendo en cuenta esto se busco la manera de conseguir una fuente de menor voltaje, que
nos permita observa lo que sucede el proceso cuando se varia la tensin, la distancia punta de
la aguja-colector y la velocidad de flujo.
El Laboratorio de Fsica del Solido de la Facultad de Ciencias Exactas y Tecnologa a cargo
del Dr. Nieva nos presto una fuente de alta tensin cuyo rango es 0-5kv,para poder realizar
esta experiencia.

(Figura 72)Fuente utilizada

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Caractersticas de la fuente:

Marca: Arion
Tensin de salida: 0-5 kv Dc
Corriente mxima de salida: 2 mA
Medidor analgico de tensin
Salida flotante de tensin
Tension de alimentacin 220 v

Velocidad de flujo
Distancia punta de la aguja-colector
Tensin aplicada
Concentracin PVA
Velocidad de recoleccin
Aguja utilizada

8 ml/h, 4ml/h, 2.5ml/h


5 cm, 2 cm, 1 cm
5 kv
8 % peso/volumen, 8/10% peso/volumen
10 RPS (600 RPM )
Punta roma, dimetro interno 18G
Longitud 51 mm

( Figura 73) Parmetros utilizados para la experiencia

(Figura 74)Foto del sistema completo

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7.2.2 Resultados Obtenidos


En esta experiencia se realizaron 18 pruebas. En la cuales no se pudo obtener formacin de
fibra, solo se obtuvo goteo.
Se observo que al aumentar el potencial y disminuir la distancia aguja-colector, se produce la
disminucin del dimetro de la gota que se forma en la punta de la aguja.
Esto da el indicio que la fsica del proceso se est realizando.
Lo que se necesita para poder obtener la formacin del cono de Taylor es someter a la
solucin a un campo elctrico mayor.
Se intento aumentar la intensidad del campo disminuyendo la distancia aguja-colector, de tal
manera poder obtener la formacin de dicho cono, estos intentos fueron en vanos ya que no se
tuvo xito.
Al disminuir la distancia menor a un 1 cm se producan arcos elctricos entre la punta de la
aguja y el colector.

Prueba 1: [8]% - 5 cm 5 kv 8 ml/h


Prueba 2: [8]% - 5 cm 5 kv 4 ml/h
Prueba 3: [8]% - 5 cm 5 kv 2.5 ml/h

En estas tres primeras pruebas no se observaron cambio en las dimensiones de la gota que se
forma en la punta de la aguja a medida que se aumenta el potencial desde cero(Figura 75)
hasta alcanzar el valor mximo de 5 kv (Figura 76).

(Figura 75)Tamao de la gota a 0 kv y 5 cm de distancia

(Figura 76) Tamao de la gota a 5 kv y 5 cm de distancia

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Prueba 4: [8]% - 2 cm 5 kv 8 ml/h


Prueba 5: [8]% - 2 cm 5 kv 4 ml/h
Prueba 6: [8]% - 2 cm 5 kv 2 ml/h

Al disminuir la distancia aguja-colector se puede empezar a observar que se empieza a


producir una deformacin en el dimetro de la gota a medida que se aumenta la tensin desde
ceros (Figura 77) hasta alcanzar el valor mximo de 5 kv (Figura 78), al aumentar la velocidad
del infusin se observa que el goteo es de mayor frecuencia pero el dimetro de la gota no se
modifica.

(Figura 77) Tamao de la gota a 0 kv y 2 cm de distancia

(Figura 78) Tamao de la gota a 5 kv y 2 cm de distancia

Prueba 7: [8]% - 1 cm 5 kv 8 ml/h


Prueba 8: [8]% - 1 cm 5 kv 4 ml/h
Prueba 9: [8]% - 1 cm 5 kv 2.5 ml/h

Al disminuir la distancia a 1 cm e ir aumentando el potencial de cero hasta 5 kv se observa que


el dimetro de la gota disminuye a un ms que en las pruebas anteriores (Figuras 79 y 80), el
aumento de la velocidad de flujo no modifica el dimetro de la gota, solo aumenta la frecuencia
del goteo.

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(Figura 79)Tamao de la gota a 0 kv y 1 cm de distancia

(Figura 80) Tamao de la gota a 5 kv y 1 cm de distancia

Las otras nueves pruebas que se realizaron son iguales a las anteriores solo que se cambio la
concentracin de la solucin a 8/10 % peso/volumen.
No se observaron cambios en el comportamiento del proceso fue igual al de las pruebas con la
concentracin inicial.

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CAPTULO 8:
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el presente proyecto se ha realizado el diseo, fabricacin y estudio del comportamiento de
una mquina de electrospinning que crea micro o nano fibras a partir de una disolucin de
polmero. El equipo permite variar el tamao de la fibra en funcin de variables tales como la
concentracin del polmero en la disolucin, el voltaje del campo elctrico, la velocidad de flujo
del polmero, velocidad de recoleccin y la distancia aguja-colector.
Se sometido a electrospinning una solucin del polmero Alcohol Ponivinilico (PVA). Si bien las
fibras obtenidas no tuvieron la morfologa deseada, se puede concluir que el funcionamiento de
la maquina es correcto.
La obtencin de nano o micro fibras est relacionado con un mejor manejo de las variables que
intervienen en el proceso de electrospinning.
El proyecto consta principalmente de dos partes:
a. El diseo, compra, montaje del equipo y su puesta en marcha. Para ello, fue necesario
buscar en catlogos internacionales e iniciar trmites de compra en EEUU.
El trmite de compra de la fuente se encuentra por el momento en anlisis, debido a la
restricciones de importacin que sufre el pas en estos momentos (noviembre del 2012).
b. Prueba de electrospinning con el equipo diseado de un polmero comercial (PVA)
Del trabajo realizado se deducen las siguientes conclusiones:
1. Se diseo y fabrico un equipo de electrospinning que consta de los siguientes
componentes: Bomba de infusin, colector rotacional, generador de alta tensin, chasis y
caja protectora.
2. Se realizo prueba de rigidez elctrica del aire, utilizando para el ensayo un 10% ms
tensin de uso y distancia ms desfavorable entre aguja-colector. No observndose
ruptura de la rigidez elctrica
3. Se realizo pruebas de seguridad elctrica con el analizador FLUKE ESA 612, obteniendo
resultados satisfactorios de acuerdo los establecidos por la norma IRAM 4220-1
4. Se ha sometido a electrospinning un polmero biocompatible, Alcohol Polinilico (PVA)
disuelto en agua
5. Se ha realizado una experiencia con una fuente de alta tensin de 20 kv a parmetros
constantes, en el cual se pudo obtener resultados que corroboran el buen funcionamiento
del equipo.

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Equipo de Electrospinning

6. No se consigui que las fibras obtenidas tuvieran la formacin deseada, sin embargo
para ser la primera prueba realizada con el quipo se puede estar conforme con su
funcionamiento, ya que el comportamiento del equipo fue satisfactorio en todos sus
aspectos, la obtencin de fibra con una morfologa aceptable requiere de experiencia en
el manejo de los parmetros del proceso de electrospinning.
7. Se han realizado 18 experiencias con una fuente de tensin mxima de 5 kv en las
cuales se han variado sistemticamente los parmetros siguientes: concentracin del
polmero en la disolucin, velocidad de inyeccin de fluido y distancia aguja-colector.
8. Si bien en estas experiencias no se puedo obtener fibras, debido a la complejidad del
proceso y limitada experiencia en el mismo. Se puedo observar cmo se produce
parcialmente la fsica del proceso.
9. El equipo queda disponible para su uso en el laboratorio de Ingeniera de Tejidos de la
Facultad de Ciencias Exactas y Tecnologa de Tucumn, para realizar futuros trabajos de
investigacin.

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CAPTULO 9:
PERSPECTIVAS FUTURAS
Si bien en la actualidad el electrospinning es una tcnica utilizada solamente en el rea de la
investigacin.
En un futuro podra aplicarse de la siguiente manera:

(Figura 81) tecnologa futura de electrospinning

En un futuro el electrospinning podra resolver problema clnicos, como la ruptura de algn


hueso, de manera rpida y segura.
Este ejemplo se observa en la (Figura 81) donde:
Mediante una tomografa computada se estudia el problema seo del paciente (a), luego se
extrapola la tomografa a una PC que contiene un programa el cual puede disear el scaffolds
necesario para ser colocado en el paciente (b y c), una vez realizado el diseo se lo enva a la
maquina que fabrica el scaffolds exactamente como es diseo (d y e) para su posterior
implantacin y verificacin que no hayan defectos (f y g).

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Para mejoras del equipo fabricado en este proyecto:

Digitalizar toda la electrnica, de tal manera de manejar por medio un tablero la


velocidad del rotor, la distancia aguja-colector.

Incorporar la fuente de alta tensin y la bomba de infusin, a todo el sistema y manejar


todo desde un solo tablero de mando.

En un futuro se podra estudiar la manera de poder realizar el proceso con niveles de tensin
menores.
Esto eliminara la limitacin de adquirir fuentes de alta tensin, cuyo costos son elevado y
difciles de conseguir, solo existen tres fbricas de fuentes para electrospinning en el mundo.

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CAPITULO 10:
REFERENCIAS
10.1 Referencias bibliogracias
[1] Anton Formhals , Artificiald Thread and Method of Producing Same , U.S. Patent 2187306, July 28, 1937
[2] R.Lanza, R. Langer, J. Vacanti , Principles of Tissue Engineering, third edition 2007
[3] IRAM Seguridad en Equipos Electromedicos, IRAM 4220-1
[4] IRAM Generadores de alta tensin para equipos de Rayos X, IRAM 4220-2-7
[5] P. C. Caracciolo, F. A. Buffa y G. A. Abraham, Matrices poliuretanas nanofibrosas obtenidas por el proceso
de electrospininng, Divisin Polmeros, INTEMA (Universidad Nacional de Mar del Plata CONICET) Mar del
Plata, Pcia. de Buenos Aires.2008
[6] T. Andric, A.C. Sampson, J.W. Freeman, T. Andric, A.C. Sampson, J.W. Freeman, Fabrication and
characterization of electrospun osteon mimicking scaffolds for bone tissue engineering. Virginia Polytechnic
Institute and State University, Blacksburg, , USA , 2010
[7] Marcos A. Sabino G, Modificacin de superficies de biomateriales polimricos y estudio de
biocompatibilidad, Departamento de Qumica, Universidad Simn Bolvar, Apdo. Postal. 89000. Venezuela, 2007
[8] Michelle K. Leach, Zhang-Qi Feng, Samuel J. Tuck, Joseph M. Corey,
Electrospinning Fundamentals: Optimizing Solution and Apparatus, Department of Biomedical Engineering,
University of Michigan,2011
[9] Amparo Lpez-Rubio, Ester Sanchez, Sabina Wilkanowicz, Yolanda Sanz, Jose Maria Lagaron,
Electrospinning as a useful technique for the encapsulation of living bifidobacteria in food hydrocolloids, Novel
Materials and Nanotechnology Group, IATA-CSIC, Avda. Agustin Escardino , Paterna (Valencia), Spain, 2012
[10] Zheng-Ming Huanga,, Y.-Z. Zhang, M. Kotaki, S. Ramakrishna, A review on polymer nanofibers by
electrospinning and their applications in nanocomposites. Ed Covent Garden, London, 2005

[11] W. Gamboa, O. Mantilla, V. Castillo, Produccin de micro y nano fibras a partir de la tcnica de
electrospininng para uso farmacolgico, Fundacin Cardiovascular de Colombia , Grupo de Bioingenieria, 2007
[12] C. Cardozo, M. Sabino, J. Ramrez, J. C. Rodrguez, M. Martnez., Dispositivo para la obtencin de
nanofibras polimricas por accin de fuerzas electrostticas, Universidad e Simn Bolvar, 2007
[13] Prevencin del riesgo en el laboratorio. Instalaciones, material de laboratorio y equipos. INSHT,
NTP433,2009.
[14] AKER PREVENCIN (2009,feb,1) Formacin en prevencin de riesgos Laborales [Online]. Available FTP:
www.ucm.es/info/inmuno/personal/ File:MANUAL%20PERS.LABOR.pdf

[15] Burgos J. C., Circuitos Magnticos y Transformadores as, Universidad Carlos III de Madrid, 2007

Pgina 80

Masino, Luis Marcelo

Equipo de Electrospinning

10.2 Pginas web consultadas


[1] R. I. Blanco, Ingeniera en Tejido [Online]. Available: http://www.eis.uva.es/~macromol/curso0506/medicina/ingenieria_de_tejidos.htm. Fecha de acceso: 15/11/2012.
[2] S. Ramakrishna, K. Fujihara, Z Ma, Electrospinning and nanofibers [Online]. Available:
http://books.google.com.ar/books?id=QHkyRdb2TicC&printsec=frontcover&hl=es&source=gbs_ge_summary_r&c
ad=0#v=onepage&q&f=. Fecha de acceso: 15/11/2012.

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