Concepto de Microbiologa.

Historia : Desde la antigedad hasta nuestros das

Definicin de Microbiologa
Ciencia que estudia los seres vivos celulares o acelulares

que no se pueden ver a simple vista La definicin implica que su objeto de estudio est determinado por la metodologa:
Microscopio

Tcnicas de cultivo puro en laboratorio

Distribucin de los microorganismos

Suelo Agua Aire Alimentos Plantas Animales Petrleo Crteres

UBICUOS

Importancia de los microorganismos

Industrial Biotecnolgica Micologa Alimentos Produccin de biolgicos Farmacutica Agrcola Mdica Veterinaria Ecologa Etc.

Relacin de la microbiologa con otras actividades del hombre

Fisicoqumica Matemticas Fsica

Religin

Microbiologa

Qumica

Historia Inmunologa

Bioqumica

De acuerdo a Collard (1976)

1. Periodo especulativo, microscopistas.

desde

la

antigedad

hasta

los

primeros

2. Periodo de lenta acumulacin de observaciones (desde l675 aproximadamente hasta la mitad del siglo XIX), que arranca con el descubrimiento de los microorganismos por Leeuwenhoek (l675). 3. Periodo de cultivo de microorganismos, que llega hasta finales del siglo XIX, donde las figuras de Pasteur y Koch encabezan el logro de cristalizar a la Microbiologa como ciencia experimental bien asentada. 4. Cuarto periodo (desde principios del siglo XX hasta nuestros das), en el que los microorganismos se estudian en toda su complejidad fisiolgica, bioqumica, gentica, ecolgica, etc., y que supone un extraordinario crecimiento de la Microbiologa, el surgimiento de disciplinas microbiolgicas especializadas (Virologa, Inmunologa, etc)

Eras en la historia de la Microbiologa

I. II. III. IV.

Era emprico especulativa: desde la antigedad (5000 a C) hasta los primeros microscopios (1675) Era de la observacin: Primeros microscopistas (1675 mediados del siglo XIX) Era del cultivo de los microorganismos (finales del siglo XIX hasta principios del siglo XX) Era de la fisiolgica y molecular: Hasta nuestros das; diversos enfoques en el estudio microbiano. Ciencias emancipadas (Virologa, Inmunologa)

Empirismo

Las artes de la fermentacin y conservacin de alimentos experimentaron un gran desarrollo

Fsiles de bacterias
Los microorganismos fueron probablemente las primeras cosas vivas sobre la tierra.

Los estudios de los fsiles nos permiten inferir que las enfermedades infecciosas existieron hace miles de aos

Evidencias histricas

Egipto Mesopotamia India China. Donde se conocen sus obras de ingeniera en el drenaje de terrenos fangosos, irrigacin, control de inundaciones y la construccin de grandes edificios y estructuras. Pero los primeros que sometieron estos conocimientos al anlisis racional y trataron de establecer las relaciones causales que los enlazaban, y los que crearon ciencia, fueron los Griegos, en concreto los filsofos de Jonia.

Filsofos naturalistas
Tales de Mileto (639-547 aC.), la filosofa de los elementos

bsicos: aire, tierra y agua, que circulan cclicamente a travs de los cuerpos de plantas y animales, repitindose indefinidamente.
Anaxmenes (585- 524 aC.), los primeros animales nacieron

de lo hmedo, envueltos en una cscara espinosa, con el progreso del tiempo, subieron a lo seco y rompindose la cscara, cambiaron de forma de vida.
Empdocles (490-430 aC.), la primera materia o elemento

del mundo fue el aire, el cual se convierte en fuego al enrarecer, y al condensarse se hace primero agua y despus tierra.

Filsofos naturalistas
Pitgoras de Samos (582-507 aC.) fue el hombre que ms

practic la investigacin y la observacin. "Pitgoras y sus discpulos renunciaron a la idea de un nico elemento. Sostuvieron que la materia se compona de tierra, agua, aire y fuego. Suponan que estos elementos procedan de la combinacin binaria de cuatro cualidades subyacentes: calor y fro, humedad y sequedad; as, el agua por ejemplo, era hmeda y fra, mientras que el fuego era caliente y seco. Aristteles (384-322 aC.), padre de la biologa, De generatione animalum. Las larvas no provienen de la cpula previa, si no de la descomposicin de la materia.

Era especulativa

Era especulativa
La humanidad conoce las actividades microbianas sin saber nada de los microorganismos:
Enfermedades infecciosas miasmas Lucrecio (siglo I a. C.): semillas de enfermedad Cicern (46 a.C.): asoci las fiebres con el agua contaminada Fracastorius (1546 d.C.): grmenes vivos Alimentos

y bebidas fermentados (quesos, leches fermentadas, vino, cerveza, etc.)

Era especulativa

Lucrecio: semillas de enfermedad

(Marcus Tullius Cicero) (- 106 a - 43)

Las fiebres son provocadas por la multiplicacin de pequeos animales DE REPVBLICA Impuesto cloacarum

Era especulativa

Girolamo Fracastorius: padre de la Epidemiologa

Pensador del Renacimiento

Syphilis sive de morbo gallico (1530) De contagione et contagiosis morbis (1546)

Las enfermedades se transmiten por contacto directo, aire o fomites:

contagium vivum
Girolamo Fracastro (Hieronimus

Fracastorius)
(1478 - 1553)

La peste

Era de la observacin: Primeros microscopistas

Robert Hooke: fsico, matemtico y bilogo ingls Dise el primer Microscopio compuesto Describi algunos hongos filamentosos (1667) Acu el trmino de Clula.

Renacimiento
Toms de Aquino (S XIII). Suma contra gentiles,

objecin 5, a propsito de la creacin del mundo, dice; ciertos animales son generados por la putrefaccin, que es un tipo de corrupcin.

Robert Hooke

Era de la observacin
Antony van Leeuwenhoek: Microscopio simple Descubrimiento de los microorganismos (animculos en gotas de estanque, sarro de los dientes, caldos 1675) Describe bacterias (1683) Describe espermatozoides Describe protozoarios

Microscopio simple de Leeuwenhoek

Era de la observacin

Antony van Leeuwenhoek

Fue la primera persona en observar a los epermatozoides: Homunculus Cualidad de dador de vida

Los hallazgos quedaron en ms de 200 cartas escritas a la Sociedad Real de Londres de 1673 a 1723

Francesco Redi (1668) publica su trabajo sobre la generacin espontnea y concluye que la generacin de las larvas en la carne se producen por los huevos de moscas. Omnia ex ovo

Generacin espontnea
La disputa entre Joseph Needham (1748) y Lzaro

Spallanzani (1765) Los experimentos se interpretan errneamente (Needham) como que al calentar los frascos el aire pierde su fuerza vital (vitalismo)
Enfriar Incubar

Caldo hervido

Frasco abierto

Contaminado

Incubar

Frasco abierto

Caldo hervido

Frasco sellado

No Contaminado

Contaminado

1837 Theodore Schwann. Demostr que las bacterias llegaban a los materiales a travs del aire.
Aire caliente

Incubar

Matraz no contaminado

Caldo estril

Aire fro Incubar

Matraz contaminado

Caldo estril

Filtro de algodn
1854 Schreder y von Dusch. Introdujeron el uso del algodn como filtro para evitar la contaminacin del material de vidrio empleado en el laboratorio de microbiologa (Schwann)

1798 Edward Jenner

Primer Nio (hurfano) vacunado contra la viruela

Detalle de The Cowpock donde se muestra los peores miedos del pueblo ingls a la vacuna de Jenner.

Esterilizacin
Siglo XVIII. Se us la ebullicin y el flameado.
1801 Nicholas Appert. El arte de conservacin de substancias animales y vegetales por varios aos 1861 Los hongos filamentosos mueren a 121 C en calor hmedo pero sobreviven a 120 C en calor seco 1881 Robert Koch:
Calor seco a 160 C por 1 hora Calor hmedo a 120 C por 30 minutos

Esterilizacin
1884 Weisnegg. Fabric la primera autoclave de laboratorio
1887 John Tyndall:
Bacterias lbiles al calor Bacterias resistentes al calor

1887 Cohen. Describe la endospora bacteriana 1898 Ingeniera alemana. Produccin de autoclaves para uso hospitalario

Esterilizacin
1933-1958 Knox y Penikett. Introducen el prevaco en

esterilizadores de alta presin Dos desarrollos recientes:

Material de plstico, esterilizacin con radiaciones

generadas por bombas de Co60 Esterilizacin con gas (xido de etileno)

El debate sobre los fermentos

Las dos teoras sobre el origen de las fermentaciones: qumica y biolgica Louis Pasteur (1857) es llamado a resolver un problema de las destileras de Lille
1857: las bacterias que producen fermentacin lctica
1860: las levaduras producen fermentacin alcohlica Descubre la fermentacin butrica y la vida en ausencia

de aire (anaerobiosis)

Reconciliacin de las dos teoras: Buchner asla un preparado libre de clulas (zimasa) de levaduras.

Pasteur pone fin a la polmica sobre la generacin espontnea

Experimentos

con frascos abiertos al aire dotados de largos cuellos curvados (cuellos de cisne). Una vez llevados a ebullicin, no aparecen microorganismos si el frasco no se mueve Aparecen microorganismos si el lquido alcanza el cuello curvo Trampas para capturar microorganismos 1864 Se pone fin a la controversia de la generacin espontnea

Papel de los microorganismos en las enfermedades infecciosas

Louis Pasteur es llamado a Provenza para resolver la

enfermedad del gusano de seda (pebrina) En 1869 identifica al protozoario Nosema bombycis como el responsable Davaine (1863-1868): la sangre de ganado afectado por carbunco contiene grandes cantidades de microorganismos

Era del cultivo

1867 Joseph Lister. Principios antispticos en ciruga 1872 Ferdinand Cohn. Disea medios de cultivo con

sales + extracto de levadura + diferentes azcares 1878 Abb von Zeiss. Disea la lente de inmersin en aceite

Joseph Lister introduce la antisepsia

Avances tcnicos: el cultivo puro

Las dos teoras sobre forma de microorganismos: pleomorfismo y monomorfismo 1881 Su resolucin dependi de los cultivos puros (laboratorio de Robert Koch)
Medios slidos a base de rodajas de papa Medios slidos a base de gelatina Medios slidos a base de agar-agar

1887 Julius Richard Petri (en el laboratorio de

Koch) disea la placa que lleva su nombre 1889 Medios de enriquecimiento y medios diferenciales (Beijerink, Winogradsky)

Avances tcnicos: microscopios y tcnicas de tincin

Robert Koch colabora con la industria alemana del

vidrio (Schott) y pide ayuda a expertos en ptica (Abb, Zeiss)

Lentes acromticas mejoradas Iluminacin inferior con condensador Objetivo de inmersin (1878)

Iluminacin del microscopio, fruto de la colaboracin entre Koch y Abb Objetivo de inmersin, fruto de la colaboracin entre Koch y la Industria ptica Carl Zeiss

 Koch colabora con la industria qumica BASF:

Tinciones para observar bacterias (azul de metileno,

fucsina, violeta de genciana, etc), 1877 y siguientes

Ziehl y Neelsen: tincin diferencial AAR (1883) Hans Christian Joachim Gram: tincin diferencial Gram (1884)

Papel de los microorganismos en las enfermedades infecciosas

Robert Koch (1876): con su tcnica de cultivo puro aisla y propaga experimentalmente por primera vez una bacteria patgena (la responsable del

carbunco o ntrax) Primeras microfotografas de Bacillus anthracis teido con azul de metileno Confirma que esta bacteria presenta una fase resistente (endosporas) La enfermedad se puede reproducir experimentalmente al reinocular bacilos a animales de laboratorio

Postulados de Koch (1882)

El agente etiolgico (patgeno) debe estar presente en los individuos enfermos II. El microorganismo debe aislarse del husped enfermo en cultivo puro (axnico) III. El microorganismo crecido en cultivo puro, al inocularse en animales sanos, induce en ellos la enfermedad IV. De estos animales experimentales inoculados y ya enfermos, se vuelve a aislar al microorganismo
I.

Figure: 01-12b

Caption:

Postulados de Koch

Kochs postulates for proving that a specific microorganism causes a specific disease. Note how it is essential that following isolation of a pure culture of the suspected pathogen, a laboratory culture of the organism should both initiate the disease and be recovered from the diseased animal. Establishing the correct conditions for growing the pathogen is essential, otherwise it will be missed.

Koch y colaboradores aislaron numerosos agentes patgenos

Diferenciacin (1878)

Staphylococcus
Inmunizacin (1881)

Anthrax Tuberculosis (1882) Clera (1883) Difteria (1884) Ttanos (1885) Neumona (1886) Meningitis (1887) Peste (1894) Sfilis (1905)

Robert Koch. Premio Nobel 1905

Auge de la microbiologa general: litotrofa y autotrofa

Sergei Winogradsky
1888: Bacterias del hierro crecen

en medios minerales 1889: Bacterias del azufre oxidan sulfuros o S y obtienen energa de ello quimiolitotrofa 1890: Bacterias nitrificantes fijan CO2 con la energa de la oxidacin del amonio o nitrato quimiolito-autotrofa

En 1890 Loeffler logra visualizar flagelos bacterianos por medio de su tcnica de impregnacin argntica.

Asepsia, quimioterapia
La introduccin de anestesia (mediados siglo XIX) trae

como consecuencia infecciones quirrgicas Lister introduce el uso del fenol y de sales de mercurio (asepsia en quirfano) Paul Ehrlich: idea de las balas mgicas
Colabora con la industria qumica y descubre el salvarsn (606),

contra la sfilis Quimioterapia

Domagk (1935): rojo de prontosilo contra neumococos

poca de las sulfamidas

Auge de la microbiologa general: bacterias fijadoras de nitrgeno

Sergei Winogradsky:
Primer aislamiento de una bacteria fijadora de nitrgeno

(Clostridium pasteurianum) Explica el ciclo del N en la biosfera

Beijerink:
descubre Azotobacter (1901) Demuestra que incorpora el N de atmsfera (1909)

Hellriegel

& Willfahrt y Beijerink 1888. Determinaron el papel de Rhizobium en la simbiosis fijadora de las leguminosas
Incorporacin de la Microbiologa Agrcola a las

universidades y estaciones experimentales

Era fisiolgica y molecular Paul Ehrlich: Padre de la quimioterapia

Quimioterapia
Fleming (1929): Obtencin del extracto crudo de penicilina (del hongo Penicillium notatum) Chain y Florey (1940): Purificacin de la penicilina. Uso en 2 Guerra Mundial Waksman (1944) Descubrimiento de la estreptomicina de Streptomyces griseus Tras la Guerra, se descubren numerosos antibiticos, producidos sobre todo por Actinomicetos

Experimento de Griffith

1944 Oswald Avery, Colin Mc Cleod y Maclyn Mc Carty. Explicaron el trabajo de F. Griffith. El DNA es el material gentico

Oswald Avery

1953 James Watson y Francis Crick. Estructura del DNA

1959 Arthur Pardee, Fraois Jacob y Jakes Monod. Regulacin gentica por protenas represoras

1959 Rodney Porter. Estructura de la inmunoglobulinas

1959 F. Macfarlane Burnet. Teora de la seleccin clonal

1960 Franois Jacob y Jacques Monod. Propone el modelo del opern

1975 Georges Khler y Csar Milstein Proponen la teora de los anticuerpos monoclonales

1976 Susumu Tonegawa Determin la diversidad gentica de los anticuerpos

1977 Fred Sanger, Steven Niklen y Alan Coulson. Mtodos de secuenciacin del DNA

1983 Jean Luc Montagnier. Identificacin del VHI

1983 Kary Mullis. PCR

1990 Carl Woese. Tres dominios

1995 Craig Venter. Primera secuenciacin del genoma (Haemophilus influenzae)

Objeto material de la Microbiologa

Abarca todos los organismos no visibles a simple vista Enorme heterogeneidad de los microorganismos Entidades subcelulares (ej: virus Virologa) Procariotes ( Bacteriologa) Protozoarios ( Protozoologa) Parte de los hongos ( Micologa) Parte de las algas ( Ficologa)

Definicin de microorganismos
Seres vivos de tamao microscpico... Organizacin biolgica sencilla Acelular (virus)

Celular pero sin diferenciacin de tejidos Unicelulares Cenocticos Coloniales Pluricelulares

Objeto formal de la Microbiologa

Bsico:
Estructura y funcin Fisiologa Gentica Taxonoma

Ecologa, etc
Aplicado (relacin con intereses humanos) Todo lo relacionado con microorganismos patgenos

Efectos benficos: biotecnologa microbiana

Tcnicas de estudio, manejo y control de los microorganismos

Sistemas de clasificacin
LA TAXONOMA: Del griego taxis, estructura u orden y nomos, nombre, o nemein, distribuir, gobernar). Se define como la ciencia de la clasificacin biolgica. Se divide en tres partes:
La clasificacin, La nomenclatura La identificacin. (La caracterizacin)

El trmino sistemtica a menudo se hace sinnimo de taxonoma, pero se define de manera ms general como el estudio cientfico de

los organismos cuyo fin es caracterizarlos y agruparlos en forma ordenada.

Los microorganismos dentro de la clasificacin de los seres vivos

A finales del siglo XVIII, los microorganismos se distribuyeron entre los dos reinos conocidos: al reino Plantae: algas y hongos al reino Animalia: grupo Infusoria (Lamarck)

Pero esta clasificacin presentaba muchas paradojas Haeckel: rbol filogentico darwiniano (1866). Propone un tercer reino: Protista: todos los seres vivos sencillos: protozoos, algas, hongos y moneras (=bacterias)

Clasificacin de los Microorganismos

1. SISTEMA DE DOS REINOS Animal: Mviles, Hetertrofos e Ingestivos. Vegetal: No Mviles, Fotosintticos, su nutricin es por Absorcin y por Fotosntesis.

Carolus von Linneaus(Meidados S XVIII)

NOTA: Los organismos unicelulares no tenan una ubicacin en ste sistema ya que ellos pueden ser fototrficos, no fotrficos, mviles, inmviles y la composicin estructural.

Sistema de Tres Reinos: Ernest Haeckel, 1866.

Animal Vegetal Protista: esto sera exclusivo para los organismos inferiores, incluyendo aquellos que forman colonias. Adems de carecer de grado de diferenciacin de tejidos, caractersticas de animales y plantas superiores. El reino protista inclua: Bacterias Protozoarios Hongos Algas

Stanier. 1957
Protista Inferior: Incluye a los organismos Procariotes (Chaton 1937) menos desarrollados como bacterias y algas azul-verdes. Protista Superior: Incluye a los organismos Eucariticos ms desarrollados como los protozoarios, hongos y la mayora de las algas

Sistema de Cuatro Reinos: Copeland

Monera: Organismos Procariticos, unicelulares u organizacin colonial; bacterias y algas azul-verdes Protista. Organismos Eucariticos inferiores con organizacin unicelular o unicelular-colonial o multcelulares sin diferenciacin de tejidos. Sin caractersticas de plantas ni animales; protozoarios, algas superiores caf-rojas y hongos
Plantae: Organismos Eucariticos multicelulares con pared celular rgida y plstidos verdes (pigmento de clorofila A, B, carotina y no otros). Plantas terrestres y acuticas. Animalia: Organismos Eucariticos sin pared celular y sin plstidos, con cavidad digestiva interna, tienen tejidos con diferenciacin celular, que pasan durante su desarrollo a travs de los estadios de blstula y gstrula. Incluye organismos tpicamente predatorios y tienen una alta complejidad estructural y funcional

Sistema de Cinco Reinos: Whittaker. 1969

Monera: incluye clulas procariticas unicelulares a veces coloniales, son organismos principalmente absortivos, aunque algunos son fotosintticos; bacterias y algas azul-verdes Protista: consiste fundamentalmente en formas unicelulares o coloniales, pero estas son eucariticas y sus modos de nutricin son diversos; fotosintticos, absortivos, ingestivos y combinaciones diversas de ellos. Protozoarios y la mayora de las algas
Fungi: comprende organismos multinucleados, eucariticos que poseen paredes rgidas a veces divididas por paredes cruzadas constituyendo una estructura multicelular. Su nutricin es absortiva; hongos filamentosos (mohos), levaduras, setas, hongos musilaginosos y basidiomicetos. Plantae: organismos multicelulares, eucariticos, fotosintticos con pared celular rgida. Incluye la mayor parte de las algas, briofitas y plantas vasculares. Animalia: organismos multicelulares eucariticos, carecen de pared celular, su modo de nutricin es ingestiva y algunas formas absortivas. Incluye desde mesozoarios hasta cordados

Sistema de Cinco Reinos

Criterios de Clasificacin de Whittaker

A. Tipo de Nutricin: Fotosntesis, Absorcin e Ingestin B. Distincin entre formas Eucariticas y Procariticas C. Tipo de Organizacin Celular: Unicelular, Unicelular Colonial, Multinuclear y Multicelular

Lynn Margulis
Segn su teora, varios organismos procariotes independientes se unieron entre si, primero de manera casual y despus de manera estable. Esto dio origen a los organelos caractersticos de las clulas eucariticas: las mitocondrias y los cloroplastos. Este conjunto hizo surgir la primera clula eucaritica

De acuerdo con Margulis, tres tipos de organelos eucariotes existieron anteriormente como organismos procarioticos independientes.

A) Las Mitocondrias, B) Los Plstidos C) Los Flagelos (Undulipodia)

El Origen de las Mitocondrias

Quiz la asociacin entre el organismo aerbico y el anaerbico fue semejante a la establecida entre un depredador bacteriano y su presa tambin bacteriana, tal como sucede entre Bdellovibrio y sus bacterias huspedes (Gram-negativas).

Cloroplastos
Si los plstidos se originaron por simbiosis y no del interior de las algas primitivas, se podra esperar qu, como en el caso de las mitocondrias, los plstidos conservaran rasgos de sus antepasados. Algunas pruebas nos indican que as es. As, se pueden manejar los siguientes argumentos.

Bacterias en proceso de reproduccin

Bacterias simbiticas

La teora simbitica del origen de los plstidos propone que la fotosntesis fue adquirida muchas veces, y en forma ya desarrollada y refinada por varios tipos de clulas heterotrficas eucariticas, es decir, los protozoos. Estos protozoos se transformaron en algas mviles o no mviles dependiendo si el protozoos lo era o no. Estos organismos primitivos tenan la doble ventaja de generar su ATP mediante las reacciones luminosas de la fotosntesis y mediante la respiracin lo qu asegur su supervivencia y proliferacin hasta llegar a formar el actual fitoplancton.

Tres Dominios
Basndose en la secuencia de nucletidos de los cronmetros moleculares mRNA 16S y 18S principalmente, CARL WOESE desarroll un trabajo taxonmico revolucionario y extraordinariamente importante que considera, segn sus propias palabras una nueva forma de vida. En el sistema de Woese quedan considerados representantes de todas las formas de vida, de modo que l propone un sistema de TRES DOMINIOS.

Los microorganismos dentro de la clasificacin de los seres vivos

Mitad del s. XX: la organizacin celular de las bacterias y algas verdeazules es muy diferente al del resto de seres vivos
8 edicin del Manual Bergeys (1974) Reino Prokaryotae, dividido en Cyanobacteria (antiguas cianofceas) Bacteria

Reino Eukaryotae
En los aos 70 se descubre que los procariotes constan

de dos grupos muy distintos (C. Woese y G. E. Fox): Eubacterias (hoy Bacteria) Arqueobacterias (hoy Archaea)

Organismos microscpicos y macroscpicos

Hay microorganismos procariticos y eucariticos,

pero no hay macroorganismos procariticos

Los tres grandes Dominios de la vida

Diferencia entre Procariotes y Eucariotes

PROCARIOTES
Genforo un slo cromosoma ADN c.d., C.C.C no membrana nuclear (no hay ncleo autntico) no histonas

EUCARIOTES

Nucleoplasma varios cromosomas ADN cadena doble lineal

Replicacin: no mitosis Organizacin del citoplasma

no orgnulos de tipo

Replicacin: mitosis Organizacin del citoplasma

orgnulos (mitocondrias,

(terminado en telmeros) existe membrana nuclear (hay ncleo autntico) histonas

eucaritico no citoesqueleto ribosomas de tipo 70S

cloroplastos, retculo endoplsmico, aparato de Golgi, lisosomas... existe citoesqueleto, corrientes citoplmcias ribosomas de tipo 80S

Clula Procaritica y Eucaritica

Procariote Eucariote