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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR

DE SAN MARCOS
FACULTAD DE QUIMICA E ING.
QUIMICA
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL
DE QUIMICA
DEPARTAMENTO ACADEMICO
DE QUIMICA ORGANICA
CURSO : Laboratrio de
io!"#$i%a
Laboratrio : N& '(
Pra%ti%a: E)tra%%i* de %o+e,tero+
de+ %erebro
-ORARIO: Vier*e, ./'01$
PROFESOR: 2"a* Car+o, 3oo+%ott
Fe%4a de e*tre5a: 6(7'6708
I*te5ra*te,:
E5",!"i9a: 2o,; Car+o,
err": Mi5"e+
N"<e9: C+a"dia
F+ore, Va+deo*: Y"ri

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1. Introduccin
Los lpidos son molculas con grandes diferencias estructurales de
unas a otras. Tienen caractersticas comunes de insolubilidad en
agua. Tienen 2 funciones preferentes:
- Componentes esenciales de membrana (fosfolpidos).
- Depsito de energa ms importante de la clula (triglicridos). Los
triacilgliceroles son los principales sustratos energticos!
almacenados en el citosol de las clulas del te"ido adiposo. #l $gado
es mu% importante en el metabolismo de lpidos % sntesis de cidos
grasos. Cuando sobra energa sinteti&a lpidos. Los cidos grasos
suelen tener un n'mero par de tomos de C. (e diferencian en la
longitud de la cadena % el n'mero de insaturaciones.
#n la sntesis de una grasa se une ) glicerol con * cidos grasos para
dar triacilglicerol:
CH2O
HCOH
CH2O
glicerol
esterificacin

CH2O - CH2 - CH2 - COO

-

HCO - CH2 - CH2 - COO
-
CH2O - CH2 - CH2 - COO
-

triacilglicerol
La ruptura es por $idrlisis mediante una lipasa. Los cidos grasos se
degradarn dando C
2
+ue es el acetil-Co, +ue entrar en el C.,.C.
dando C-
2
. #l glicerol mediante glicolisis da piru.ato % ste acetil-
Co, +ue sigue el mismo proceso. #l glicerol .iene de la glucosa por
medio de la ruta glicoltica. /ara sinteti&ar grasas $acen falta
$idratos de carbono por+ue la glucosa es necesaria para formar C
*
.
Tambin a partir de acetil-Co,.
Las grasas son un buen almacn de energa! me"or +ue el glucgeno
por+ue los componentes de los triacilgliceroles estn mu% reducidos!
se obtiene ms energa al o0idarlos. Las grasas son insolubles en
agua % el glucgeno es soluble! por lo +ue puede estar en forma
$idratada. #sto es importante a la $ora de almacenar por+ue con el
mismo pero del glucgeno se obtiene menos energa por+ue est
menos reducido % parte es agua. -btenemos 1 .eces ms energa de
la grasa.
2
2. Resumen
/rimero preparamos la muestra! para ello re+uerimos de un
cerebro! par esta ocasin el de un a.e! es el indicado. Lo
molemos cuidadosamente! lo distribuimos en una placa de
.idrio luego se seca cuidadosamente en la estufa! una .e& seco
lo pul.eri&amos! agregndole Cloroformo. 2iltramos la solucin %
conser.amos el e0tracto para las reacciones de coloracin
sobre colesterol.

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3. Parte Teorica
Los componentes tpicos del sistema ner.ioso (cerebro) son los
lpidos! +ue estn contenidos principalmente en los cilindroe"es de los
ner.ios. La sustancia blanca contiene proporcionalmente ms lpidos
+ue la gris. El contenido total alcanza del 12 al 15% del peso
fresco! apro0imadamente la mitad del peso seco. /ara los distintos
grupos de lpidos se $an obtenido los siguientes .alores (tanto por
ciento del peso en fresco):
2osftidos 13
Cerebrsidos 23
#steroles 43 (sustancia blanca: 53! 43! )-23!
respecti.amente)
(ustancia gris: 43! )3! )-23! respecti.amente.
La .aina de mielina de los ner.ios es birrefringente. (e supone +ue
esta formada por capas coa0iales de protenas % lpidos! % de tal
manera! +ue siempre entre dos capas de protenas esta intercalada
una laminilla bimolecular de lpidos.
La neuroglia! o te"ido de sostn del te"ido ner.ioso! contiene una
protena esencial! la neuro+ueratina. /robablemente esta es tambin
un componente de las propias clulas ner.iosas (dendritas %
cilindroe"es). #s igual a la +ueratina! si bien la proporcin de
aminocidos bsicos es algo diferente. (#l parentesco +umico con la
+ueratina es interesante por+ue las clulas de neuroglia son tambin
de origen ectodrmico).
#l colesterol es +ui& el esteroide me"or conocido debido a su
relacin con la arteriosclerosis. (e encuentra ampliamente distribuido
en todas las clulas del organismo! pero especialmente en las del
te"ido ner.ioso. #s el constitu%ente de ma%or importancia en las
membranas celulares % de las lipoprotenas plasmticas. , menudo se
encuentra combinado con cidos grasos como ester de colesterico.
#0isten en las grasas animales pero no es las .egetales. #l nombre
+umico es *-$idro0i-6!1 colesteno. #l colesterol tambin es
identi7cado como un grupo principal de lipoprotenas para transportar
a los lpidos en el plasma. ,pro0imadamente la mitad del colesterol
4
del organismo se origina de su sntesis % el resto es proporcionado por
una alimentacin promedio. #l $gado sinteti&a ms o menos )83 del
total en los seres $umanos! el intestino cerca de )63 % la piel una
gran porcin del resto. /rcticamente los te"idos +ue contienen
clulas nucleadas son capaces de sinteti&ar colesterol. La fraccin
microsomica % el citosol son responsables de su sntesis.
Los fosfolpidos son lpidos comple"os! un lpidos +ue contiene
adems de cidos grasos % un alco$ol! un residuo de cido fosfrico!
con frecuencia tiene bases nitrogenadas % otros sustitu%entes.
9licerofosfolpidos: el alco$ol es el glicerol
#s7ngofosfolpidos: el alco$ol es la es7ngosina.
Los fosfolpidos son los principales constitu%entes lipidicos de la
membranas. #l cido fosfatidico es mu% importante como intermedio
en la sntesis de triacilgliceroles % fosfolpidos. Los lpidos son
transportados en el plasma como lipoprotenas % un grupo
identi7cado como tal es el grupo de los fosfolpidos. Tanto los
fosfolpidos como la apolipoproteina C-::: se re+uieren como
cofactores para la acti.idad de la lipoprotena lipasa. La
apolipoproteina C-:: contiene un sitio espec7co de 7"acin de
fosfolpido a tra.s del cual se ad$iere a la lipoprotena.
Los glucolpidos! son lpidos comple"os! l+uidos +ue contienen un
cido graso! es7ngosina % carbo$idratos. Los glucolpidos estn
distribuidos ampliamente cada te"ido del cuerpo! en particular en el
te"ido ner.ioso (como el cerebro). #n especial se encuentran en la
capa e0terna de la membrana plasmtica donde forman parte de los
carbo$idratos de la super7cie celular.
Los glucolpidos principales en te"idos animales son los
glucoes7ngolpidos; contienen ceramida % uno o ms a&ucares. Los
dos ms sencillos son la galactosilceramida % glucosilceramida. La
galactosilceramida es un glucoes7ngolpido ma%oritario del cerebro %
otros te"idos ner.iosos % ba"o en el resto del cuerpo; contiene cierto
numero de cidos grasos C24 caractersticos.
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La glucosilceramida es el glucoes7ngolpido sencillo predominante en
los te"idos e0traneurales! pero tambin e0isten en el cerebro en
cantidades pe+ue<as.
3. etalles e!perimentales
i" E!traccin del colesterol del cere#ro$
=oler cuidadosamente en un mortero * g de cerebro con una
cantidad doble de %eso. #l $omogeinado espeso lo distribuimos
uniformemente con una esptula de madera! sobre la lmina de .idrio
% luego se seca cuidadosamente a 18>C en la estufa. La masa seca se
raspa de la lmina sobre un mortero seco con la a%uda de un bistur!
se muele bien % luego lo pasan a un tubo de ensa%o seco. ,gregamos
"unto con el pol.o seco 6 ? 1 mL de Cloroformo % agitar durante 6 a )8
minutos. 2iltrar el e0tracto cloroformico obtenido en un tubo de
ensa%o seco a tra.s de un papel de 7ltro seco. Conser.ar el e0tracto
para las reacciones de coloracin sobre colesterol.
ii" Reaccin de %uppert & 'al(o)s(i$
#n un tubo se toma ) mL del e0tracto cloroformico del cerebro %
cuidadosamente! por las paredes del tubo se agregan ) mL de acido
sulf'rico concentrado. #l tubo dbilmente se agita. #n el lmite de los
dos l+uidos aparece un anillo de color ro"o! luego todo el l+uido toma
el color ro"o! anaran"ado % ro"o ? .ioleta.
iii" Reaccin de *ie#ermann & +uc,ard$
#n un tubo de ensa%o seco se agregan 2 mL de e0tracto
cloroformico % se a<aden )8 gotas de an$drido actico % dos gotas
de acido sulf'rico concentrado. ,parece al comien&o un color ro"o +ue
despus pasa a .erde.
6
-. RE.//I01E' 23I4I/.'
i" Reaccin de %uppert 5 'al(o)s(i$
ii" Reaccin de *ie#ermann & +uc,ard$
7
O H
CH
3
CH
3
CH
3
C H
3
H
C H
3
H
2
S O
4
- H
2
O
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
H
C H
3
Colesterol
Colesterileno
OH
H
H
H
O H
H
H
H
- 2 H
2
O
Bicolestadieno
-. Resultados
i" E!traccin de colesterol del cere#ro$
(e obser.a el pol.o 7no contenido los *g de cerebro de una a.e!
luego de secarlo en la estufa. /ar despus tratarlo con cloroformo!
7ltrarlo % tener un e0tracto par el posterior anlisis.
ii" Reaccin de %uppert 5 'al(o)s(i$
(e forma el colesterileno! lo notamos por la formacin de la
colaboracin ro"a de la solucin.
8
iii" Reaccin de *ie#ermann & +uc,ard$
(e forma el bicolestadieno! al inicio la solucin es de color ro"a! al
adicionarle an$drido actico % acido sulf'rico la solucin se torna un
color .erde.
5. iscusin de Resultados
#l color ro"o obtenido en la reaccin de 9uppert ? (al@oAs@i se
debe a la des$idratacin de la molcula de colesterol! +ue da
como resultado la molcula de colesterileno.
La reaccin de de Liebermann ? Buc$ard se basa en la
des$idratacin % o0idacin de la molcula de colesterol
formando el bicolestadieno +ue en presencia de an$drido
actico % sulfoacido da un deri.ado sulfonado de color .erde.
La e0traccin del colesterol se debe efectuar con un sol.ente de
ba"a polaridad como lo es el cloroformo! %a +ue por la
estructura del colesterol! este tiene una ba"a polaridad debido a
la presencia de 2 grupos o0idrilo (--C)! es por eso +ue no se
puede usar un sol.ente polar como el agua.
La masa se debe colocar sobre una placa de .idrio para poder
retirarla fcilmente cuando %a este seca! % el secado debe ser a
18>C para e.itar cual+uier reaccin ad.ersa con la molcula a
anali&ar.
6. /onclusiones
La molcula de colesterol es soluble en compuestos poco
polares como el cloroformo! e insolubles en compuestos polares
como el agua.
9
Las reacciones de identi7cacin del colesterol se basan en la
reaccin de sus dos grupos o0idrilo! dando reacciones de
des$idratacin % o0idacin.
#l colesterol es considerado un esteroide! %a +ue su estructura
se basa en un sistema tetraciclico de ,ndrostano! +ue es
relati.amente inerte.
#l colesterol tambin es soluble en sol.entes como el ter!
benceno % alco$ol caliente.
7. Recomendaciones
#l uso de %eso es importante %a +ue nos a%uda a separar el
colesterol de la fase slida! % con el posterior agregado de
cloroformo lo podemos obtener en fase l+uida como un
e0tracto.
#n el momento de a<adir el acido sulf'rico en el tubo de
ensa%o! se debe reali&ar por las paredes de este % con muc$o
cuidado %a +ue el reacti.o es mu% corrosi.o.
La manipulacin de los reacti.os necesarios para las reacciones
de identi7cacin se deben reali&ar en la campana
8. +i#liografa
(te.ens! ,lan! Te0to % ,tlas de Cistologa. editorial
=osb%DDo%ma Libros! )556.
=at$eAs % Ean Colde. Bio+umica. #dit. =c9raA Cill-
:nteramericana! 2a. edicin! 288).
(taunton! F.! Bio+umica medica. editorial :nteramericana!
)515.
Eoet! D. % Eoet! G.! Bio+umica. -mega! #spa<a! )552.
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