Universidad Autnoma del Estado de Mxico

Facultad de Medicina
Licenciatura en Medico Cirujano



Manual de prcticas de gentica mdica
bsica

Q.F.B. Conrado Emilio Ura Gmez

Alumna:
Filorio Campos Yessica Patricia 0712400
1 periodo Grupo: 4



Toluca, Mxico. Noviembre del 2011.

PRACTICA 8 CROMOSOMAS HUMANOS

1.Defina cariotipo cariotipo:
Es la presentacin de los cromosomas ordenados por tamaos, 22
pares de autosomas colocando los cromosomas sexuales en la esquina
derecha. Tambin llamado complemento cromosmico, se consigue al
microfotografiar una clula en metafase y ordenar posteriormente los
cromosomas segn criterios establecidos por el International System for
Human Cytogenetics Nomenclatures.
El cariotipo humano est formado por 23 pares de cromosomas:
44 autosomas + 2 gonosomas o cromosomas sexuales, XX en la mujer y
XY en el varn. Los 23 pares se disponen en 7 grupos de tamao
decreciente A, B, C, D, E, F, G.

2.- Frecuencia de las anomalas cromosmicas:
Las cromosomopatas se observan en alrededor de 1/150 nacidos
vivos y constituyen la principal causa de retraso mental y aborto.
















Sndrome Autosmico
Trisoma 21 1/800
Trisoma 18 1/6000
Trisoma 13 1/10000
Reordenamientos no balanceados 1/17000
Reordenamientos balanceados
Translocacion robertsoniana 1/1000
Translocacion recproca 1/11000
Anomalas en cromosomas sexuales
47, XXY 1/1000 nacidos varones
47, XYY 1/1000 nacidos varones
45, X 1/5000 nacidas mujeres
47, XXX 1/1000 nacidas mujeres



Anomala
Prevalencia
4.- Indicaciones clnicas para anlisis cromosmicos:
Personas en las que se sospecha un sndrome cromosmico
identificable (sndrome de Down).
Patrones no identificables de dos o varias malformaciones
principales.
Genitales ambiguos.
Retraso mental o retraso en el desarrollo de nios o con mltiples
anomalas fsicas.
Padres e hijos de personas con translocaciones, deleciones o
duplicaciones.
Nacidos muertos con malformaciones, causa de muerte fetal no
identificable.
Mujeres con estatura baja proporcionada y amenorrea primaria.
Varones con testculos pequeos o ginecomastia significativa.

4. Escriba cariotipos humanos normales:
46, XX Mujer
46, XY Hombre
Grupo 1-3 (A): cromosomas grandes, que se distinguen entre s por
su tamao y la posicin del centrmero.
Grupo 4-5 (B): submetacntricos grandes, difciles de distinguir
entre s.
Grupo 6-12-X (C): de tamao mediano, difciles de distinguir entre
s.
Grupo 13-15 (D): acrocntricos de tamao mediano, con satlites.
Grupo 16-18 (E): relativamente cortos metacntricos (N 16) o
submetacntricos (Nos. 17 y 18).
Grupo 19-20 (F): metacntricos cortos.
Grupo 21-22-Y (G): acrocntricos cortos con satlites (el
cromosoma Y es de tamao similar pero no tiene satlites).

5. Mencione la utilidad de las tcnicas de bandeo y los tipos de bandas:
Ayudan enormemente a detectar deleciones, duplicaciones y
otras anomalas estructurales y facilitan la correcta identificacin de los
cromosomas individuales.
Producen patrones de bandas en los cromosomas metafsicos.
La banda es la parte de un cromosoma claramente distinguible
de los segmentos adyacentes, por aparecer ms clara o ms oscura
con una o ms tcnicas de bandeo. Las bandas que se tien oscuras
con un mtodo, pueden aparecer claras con otro.
Tincin G (Giemsa)
Utiliza el reactivo de Giemsa. Es el mtodo ms frecuente de
tincin.
Def.: Idiograma = representacin esquemtica del patrn de
bandas G de un cariotipo (se numeran los segmentos o bandas
segn la nomenclatura estndar).
Bandas G plidas: DNA rico en GC, replicacin temprana,
muchos genes
Bandas G oscuras: DNA rico en AT, replicacin tarda, pocos
genes
Bandeo inverso o R (de reverse)
Su resultado es opuesto al del bandeo G.
Es til para teir los extremos distales de los cromosomas
(deleciones o reorganizaciones distales).
Bandeo Q (con quinacrina)
Fue el primer mtodo de tincin desarrollado.
Requiere un microscopio de fluorescencia para su observacin.
Las bandas Q brillantes coinciden con las bandas G oscuras.
Tincin NOR (nucleolar organizing region, regin organizadora del
nucleolo)
Tie los genes de RNA ribosmico situados cerca de las regiones
tallo y satlite de los cromosomas acrocntricos.
Nivel de bandeo
Vara dependiendo del origen y calidad de la preparacin
cromosmica. Por ejemplo:
o mdula sea: 350 bandas
o lquido amnitico: 450-550 bandas
o sangre perifrica: 550-750 bandas
o prometafase: 750-850 bandas
Banda C:
Extraccin de DNA/protenas, tincin con Giemsa
Resaltan las regiones centromricas.
Cromatina del X y del Y: los cromosomas X inactivos, as como los
cromosomas Y, pueden mediante tinciones adecuadas, verse como
corpsculos bien definidos en el ncleo en interfase. Es lo que se conoce
como cromatina del X y cromatina del Y.

6. En qu consiste la tcnica FISH:
La hibridacin in situ fluorescente es una tcnica en la que un
fragmento marcado de DNA especfico de un cromosoma (sonda) se
expone a cromosomas desnaturalizados en metafase, profase o
interfase.
La tcnica FISH puede utilizarse para detectar la existencia de una
delacin en una regin cormosomtica de un paciente, proporciona
una resolucin considerablemente superior a la de las tcnicas de
bandas de alta resolucin, puede detectar deleciones de tamao tan
pequeo como 1 milln de pares de bases (1Mb).

7. En que consiste la cariotipificacin multifish de espectro (sky) y su
utilidad.
Visualizacin de cromosomas en la cual se emplean
combinaciones de sondas fluorescentes, con cmaras especiales y
programas de procesamiento de imagen de modo que cada
cromosoma presente un nico color.
El cariotipo espectral (SKY-FISH) y el multi-FISH (M-FISH) son tcnicas
de citogentica molecular desarrolladas recientemente, y de momento
slo se utilizan en el campo de la investigacin. Su fundamento tcnico
es sencillo. El espectro de emisin de cada cromosoma sea nico y
diferenciable de los dems. Con el "cocktail" de 24 sondas de pintado
cromosmico obtenido tras el marcaje, se hibrida sobre los cromosomas
de las metafases del tumor, el cromosoma anmalo aparecer no
uniforme, sino con los colores de los cromosomas que intervienen en la
translocacin. Por tanto, es una forma de realizar un cariotipo, pero
teido no con bandas G sino con colores, de forma que podamos
clasificar las alteraciones de forma unvoca.

El cariotipo multicolor se ha mostrado muy til en neoplasias
hematolgicas, donde no es difcil obtener metafases tumorales. Se han
podido caracterizar correctamente translocaciones complejas, y
tambin detectar alteraciones cromosmicas crpticas en cariotipos
aparentemente normales. Esto ha permitido identificar un gran nmero
de nuevas alteraciones cromosmicas, lo que ha facilitado la bsqueda
de nuevos genes implicados.















PRCTICA 9 ANOMALAS CROMOSMICAS

1. Defina Aneuploidia y su causa.
Son las clulas que contienen un nmero de cromosomas no mltiplo de
23. Su causa ms frecuente es por la ausencia de disyuncin.

2. Mencione 5 ejemplos de aneuploidias
Sndrome de Down, Sndrome de Turner, Sndrome de Edwards, Sndrome
de Patau, Sndrome de Klinefelter.

3. La no disyuncin mittica, a qu da origen.
Da como resultado a un gameto con ausencia de un cromosma o dos
copias del mismo, produciendo un cigoto monosdico o trisdico,
respectivamente.

4. Cul es la causa de las alteraciones cromosmicas
estructurales?
Una mala alineacin de los cromosomas durante la mitosis.

5. Menciona los tipos de anomalas estructurales y realice un
esquema de cada uno de ellos.

Translocaciones:

Recprocas





















Robertsonianas




6. Escriba los siguientes cariotipos, de acuerdo a la nomenclatura
internacional.
Nia con sndrome de Down por trisoma libre: 46, XX+21
Nio con trisoma 13: 46, XY+13
Nia con trisoma 18: 46, XX+18
Sndrome de Klinefelter: 47, XXY
Sndrome de Tuner: 45, X


7. Mencione la causa del sndrome de Down por trisoma
Por ausencia de disyuncin materna, debido a su edad. (95%)
Mencione la causa del sndrome de Down por translocacin
En el sndrome de Down por translocacin, el cromosoma 21
adicional puede adherirse al cromosoma 14, o al 13, 15 o 22.
En algunos casos, dos cromosomas 21 pueden adherirse uno a
otro.
Mencione la causa del sndrome de Down por mosaico
Fecundacin trismica, seguida de de la prdida del
cromosoma adicional en alguna clula durante la mitosis
embrionaria.


8. Describa brevemente el cuadro clnico del sndrome de Down
Estos nios presentan defectos cardacos, sordera de conduccin o
neurosensorial, hipotiroidismo, alteraciones oculares, esterilidad
principalmente en varones, algunos presentan obstruccin del duodeno
o atresia esofgica, duodenal o anal.


9. Describa brevemente el cuadro clnico del sndrome de Tuner
Incluyen facies triangular, pabellones auriculares rotados hacia fuera y
cuello ancho y con pliegues caractersticos, trax ancho y en coraza,
presentan defectos cardiacos congnitos, defectos estructurales
renales.




10. Describa brevemente el cuadro clnico del sndrome de Klinefelter
Incluyen hipotrofia testicular bilateral, ginecomastia y signos de
hipoandrogenismo moderado, testculos anormalmente pequeos,
pene es hipoplsico, ginecomastia bilateral, disminucin de fuerza
muscular, disminucin de libido y la disfuncin erctil, hipertrofia de
clulas de Leydig, dficit moderado del desarrollo intelectual y
frecuencia aumentada de trastornos del carcter.


11. Observe los cariotipos, anomalas cromosmicas y ejemplos de
FISH e imprima 2 de cada uno.




























PRCTICA 10 CROMOSOMAS SEXUALES

1. Defina cromatina sexual.

Es el cromosoma X inactivo de las mujeres que se observa como una
masa de cromatina densamente teida en clulas somticas
denominados corpsculos de Barr.


2. Investigue por que se lleva a cabo la in inactivacin de un
cromosoma X en mujeres.

La regin del promotor de muchos genes del X inactivo esta
codificada por la adicin de un grupo metilo a la citosina,
mediante la enzima DNA metil-transferasa, esta metilacin solo se
produce en dinucletidos C y G, contribuyen a la formacin de
cromatina inactiva.
La variante de histona macro 1+2 es muy abundante en la
cromatina X inactiva.
El centro de inactivacin del cromosoma X y el gen XIST en la
parte proximal de Xq, en la banda Xq13. El gen XIST (inactive X, X1,
specific transcript) posee la caracterstica peculiar de solo
expresarse en el alelo del X inactivo. Este produce un RNA no
codificante necesario para la transcripcin.


3. Describa las bases bioqumicas de la in inactivacin del
cromosoma X

El gen XIST se localiza en el centro de la inactivacin del cromosoma X y
es necesario para ello. Codifica un producto de RNA que cubre al
cromosoma X inactivo. La inactivacin de X tambin se asocia con la
metilacin de X inactivo, para asegurar la estabilidad de la inactivacin
a largo plazo.


4. Describa en qu consiste la hiptesis de la Dra. Mary Lyon

Los corpsculos de Barr, que son cromosomas X inactivos, slo se
observan en clulas con dos o ms cromosomas X.


5. Investigue la morfologa de la cromatina sexual en clulas
descamadas y leucocitos neutrofilos, dibjelos.










Clulas descamadas
Leucocitos neutrfilos



6. Realice un cuadro con los cariotipos de diferentes individuos de
acuerdo al nmero de cromatinas sexuales que pueden haber
continuamente.

Ninguna Una Dos Tres Cuatro
45, X 46, XX 47, XXX 48, XXXX 49, XXXXX
46, XY 47, XXY 48, XXXY 49, XXXXY
47, XYY 48, XXYY 49, XXXYY


7. Investigue en que porcentaje de clulas normalmente se
encuentra la cromatina sexual en mujeres.
Se ha demostrado que se encuentra en un 90% en mujeres.


8. Observe al microscopio clulas de la mucosa bucal, identifique la
cromatina sexual y dibjelas.











9. Investigue algunas enfermedades que presentan cromatina
sexual anormal.
Sndrome de Turner
Sndrome de Klinefelter (clsico y modificado)
Sper hembra

10. En una laminilla con tincin especial para cromatina sexual,
cuente 25 clulas y saque el porcentaje de las que presentan en
corpsculo de Barr.

De 50 clulas solo 5 contienen corpsculo de Barr, 10% tienen
cromatina X


11. Qu funcin desempea el gen determinante del testculo (SRY),
en la diferenciacin sexual?

El gen RSY es la va regulatoria para la determinacin del sexo
masculino. La protena del gen SRY es el factor determinante testicular
que se encuentra en el cromosoma Y (especficamente EN Yp11).



















PRCTICA 11 DIAGNOSTICO PRENATAL

1. Mencione las indicaciones de Diagnstico Prenatal

Edad materna mayor de 35 aos, un hijo anterior con anomala
cromosmica, antecedentes de anomala cromosmica estructural en
uno de los progenitores, riesgo del defecto del tubo neural.

2. Defina el Consejo Gentico en el Diagnstico Prenatal.

Es informar a las parejas acerca de los riesgos de un embarazo de alto
riesgo o de malformaciones congnitas en el producto, enfermedades
hereditarias, etc.


3. Mencione 3 ejemplos de pruebas no invasivas.

Ultrasonido.
fetoprotena en suero materno.
Clulas fetales en sangre materna.

4. Mencione 3 ejemplos de pruebas invasivas.

Amniocentesis.
Cordocentesis.
Biopsia de vellosidades corinicas.

5. Investigue las caractersticas ecogrficas (marcadores
ultrasonograficos) de las anomalas cromosmicas del primer
trimestre y las del segundo trimestre de gestacin.

Retraso de crecimiento intrauterino: El beb no est creciendo a
la velocidad normal dentro del tero. Estos bebs por lo general
tienen un peso bajo al nacer.
Polihidramnios: Es la presencia excesiva de
lquido amnitico rodeando al beb antes de nacer.
Oligohidramnios: Alteracin fisiopatolgica que se caracteriza por
la disminucin en la cantidad del lquido amnitico.
Gastrosquisis: Es un defecto congnito en el cual los intestinos del
beb protruyen o se salen por fuera del cuerpo a travs de un
defecto en un lado del cordn umbilical.
Labio leporino o fisura labial: Es el defecto congnito que consiste
en una hendidura o separacin en el labio superior. El labio
leporino se origina por fusin incompleta de los procesos maxilar y
nasolateral del embrin y es uno de los defectos de nacimiento
ms frecuentes.

6. Investigue las leyes del aborto en Mxico y el Aborto en los
Cdigos Penales de las entidades Federativas. Consulte: Grupo
de Informacin en reproduccin Elegida A.C. (GIRE)
www.gire.org.mx

En medio de protestas a favor y en contra de la despenalizacin del
aborto, el pasado 24 de abril se aprob la reforma para permitir y no
castigar penalmente la interrupcin del embarazo hasta la semana 12
en la Ciudad de Mxico.
Con esta nueva ley se espera disminuir las cifras de muertes de mujeres
que se practican abortos en todo el pas. Los nmeros, hasta el
momento, son escalofriantes: al ao, se practican casi un milln de
abortos y ms de cien mujeres mueren por realizar esta prctica en
condiciones insalubres.
7. Consulte el sitio: Gua Practica de Diagnstico Prenatal:
www.encolombia.com, o bsquela en Google
Las tendencias tcnicas van a introducir nuevas decisiones ticas en el
diagnstico prenatal que van a involucrar cada vez ms los intereses de
la sociedad. Se acepta que las tendencias tcnicas van a introducir
nuevas y ms complejas posibilidades de eleccin para los mdicos,
padres y personal que desarrolla las polticas, necesitando cada vez
ms expresar los intereses de la sociedad. Algunas de estas tendencias
son :
Mtodos ms tempranos y seguros de diagnstico prenatal.

Posibilidades de tamizaje para todos los embarazos.

Terapia fetal.

Terapia de genes con clulas somticas humanas.

Investigacin sobre la pre-implantacin del embrin humano.

Terapia gnica en la lnea germinal humana.

Eleccin del sexo fetal.


8. Imprima las imgenes de ultrasonido gentico de las
cromosopatias: trisoma 21, trisoma 18 y trisoma 13

Trisomia 21 (sndrome de Down)



Fig. 56. - (a). Hallazgos ecogrficos
en feto con trisoma 21. Aumento
significativo de tejido celular
subcutneo en la regin retronucal.
Fig. 56. - (b). Imagen de "Doble
Burbuja" caracterstica de la atresia
duodenal.



Fig. 56. - (c). Separacin anormal
del grueso artejo del siguiente
dedo. Signo de la sandalia (Sandal-
Gap).
Fig. 56.- (d). Quistes placentarios
asociados a fetos
cromosmicamente anormales.


Trisomia 18 (sindrome de Edwars)


Fig. 57. - (a). Hallazgos ecogrficos
en feto con trisoma 18. Perfil que
ilustra microretrognatia .
Fig. 57.- (b). Disminucin en la
distancia interorbitaria
correspondiente a un hipotelorismo

Fig. 57. - (c). Ausencia de cmara
gstrica en el corte transversal a
nivel del abdomen que en el
estudio post-mortem se
correlacion con una atresia
esofgica.
Fig. 57. - (d). Pies en mecedora.

Fig. Fig. 57.- (e). Manos en garra.
Trisomia 13(sndrome de Patau)


Fig. 58. - (a). Hallazgos ecogrficos
en feto con trosoma 13. Onfalocele
con contenido heptico y ascitis.
Fig. 58. - (b). Pie equinovaro.


















PRCTICA 12 GENTICA DEL CNCER

1. Defina Protoncogenes

Genes que codifican protenas que controlan el crecimiento y la
diferenciacin celular y cuando mutan pueden transformarse en
oncogenes que causan cncer.


2. Defina oncogenes.

Un oncogn es la mutacin de un protooncogen que son los
responsables de desarrollar clulas cancerigenas.


3. Defina Genes Supresores de Tumor.

Es un gen que reduce la probabilidad de que una clula en un
organismo multicelular se transforme en una clula cancergena. Los
genes supresores de tumores se encuentran en las clulas normales y
normalmente inhiben la proliferacin celular excesiva. Una mutacin o
una delecin de un gen supresor tumoral, aumentar la probabilidad
de que se produzca un tumor, al perder su funcin. De esa manera, un
gen supresor tumoral alterado es similar a un oncogn.


4. Haga un mapa de las etapas de evolucin del cncer.

















5. Mencione 5 ejemplos de cncer familiar con herencia
mendeliana.
Cncer de colon hereditario no poliposo.
La poliposis adenomatosa familiar.
Cncer ovrico.
Cncer de mama.
Neurofibromatosis de tipo 1.
6. Mencione 5 ejemplos de translocaciones cromosmicas
caractersticas en canceres humanos y mencione el protoncogen
afectado.
Leucemia mieloide crnica t(9;22) (q34; q11)

Leucemia aguda mieloblstica t(8;21) (q22; q22)

Leucemia aguda linfoblstica t(12;21) (p13; q22)

Linfoma de Burkitt t(8;14) (9q24; q32)

Sarcoma de Ewing t(11;22) (q24; q12)


7. Mencione 5 ejemplos de cncer con H. multifactorial
Cncer de mama, de prstata, de ovario, crvico uterino y de testculo.


8. Investigue los sitios frgiles cromosmicos (hot spots) y su relacin
con el cncer.

Son puntos especficos de los cromosomas con mayor susceptibilidad a
rupturas y ordenamientos cromosmicos y en las clulas somticas. Aqu
se encuentran los principales genes que producen la mayora de los
canceres.


9. Mencione 3 sndromes de inestabilidad cromosmica.
Sndrome de Bloom, xeroderma pigmentoso, anemia de Fanconi.


10. Mencione 3 ejemplos de mutaciones con prdida de genes
suspensores de tumores en el cncer espordico.
El osteosarcoma, Sndrome de Li, Tumor de Wilms.


11. Investigue sobre factores ambientales y cncer.
Se sabe que los factores ambientales desempean un importante papel
en la carcinognesis, alterando la frecuencia y las consecuencias de las
mutaciones. Hay una serie de agentes ambientales con propiedades
carcinognicas como el tabaco, uranio y asbesto.

























PRACTICA 13 ASPECTOS GENTICOS DEL DESARROLLO

1. Defina Biologa del desarrollo y su relacin con la enfermedad
humana.
Es el estudio del proceso por el cual los organismos crecen y se
convierten. La biologa de desarrollo moderna estudia el control
gentico de crecimiento de la clula, diferenciacin y morphogenesis,
que es el proceso que da lugar tejidos finos, rganos y anatoma.
2. Mencione la importancia del modelo de los genes Homeoticos
(Hox) de la Drosophila Melanogaster (mosca de la fruta) en la
gentica del desarrollo humano.

Los genes de homeodominio conforman un complejo de genes que se
aislaron en la Drosophila e identificaron mutaciones. El eje
anteroposterior de un embrin de mamfero en desarrollo se define por
la lnea primitiva y sus patrones se establecen mediante combinaciones
de genes HOX.

3. Describa el gen PAX6 como un regulador conservado del
desarrollo ocular.

Las mutaciones en el gen humano PAX6 producen determinadas
alteraciones oculares como cataratas y aniridia.

4. Mencione 3 ejemplos de genes homlogos a los de control de
desarrollo en Drosophila que causan anomalas en seres humanos.

La aniridia, el coloboma, cataratas.

5. Defina la expresin gnica durante el desarrollo (diferenciacin
celular).

La expresin gnica es el proceso por medio del cual todos los
organismos procariotas y eucariotas transforman la informacin
codificada en los cidos nucleicos en las protenas necesarias para su
desarrollo y funcionamiento. En todos los organismos, inclusive los
eucariotas, el contenido del ADN de todas sus clulas es idntico.

6. Defina regulacin epigenetica.
La formacin de rganos implica interacciones recciprocas entre
epitelio y mesnquima. Las interacciones estn medidas por las
molculas de transmisin de seales secretadas que se unen a
receptores, se transcriben y estimulan o reprimen la transcripcin de
DNA.
Una vez que una clula especializada de un rgano termina de
diferenciarse varias protenas activan su maquinaria molecular para que
puedan desarrollar su funcin prevista.

7. Defina morfognesis: programas morfogenticos autnomos y no
autnomos.
Morfognesis: Proceso de desarrollo de clulas, rganos u
organismos.
Autnomos: Gobernados por cambios intrnsecos.
No autnomos: Gobernados por cambios extrnsecos.

8. Investigue las mutaciones en HOXD13 y polidactilia
Comprende todos los procesos que afectan los genes activndolos o
desactivndolos.La polidactilia est producida por mutaciones en
HOXD13, que producen la expansin de una regin polialanina en el
extremo amino de la protena HOXD13.

9. Defina las clulas madre embrionarias, pluripotentes o estaminales
y sus aplicaciones potenciales.
Las clulas madre embrionarias derivan de la masa celular interna del
embrin, (en estadio de blastocisto) y son capaces de generar todos los
diferentes tipos de clulas del cuerpo, por eso se llaman
pluripotenciales. Aplicaciones: trasplantes de clulas para pacientes
con cncer despus de una quimioterapia.




















BIBLIOGRAFA

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Elsevier Masson, 7 Edicin
Biologa, la dinmica de la vida, Biggs, Kapicka y Lundgren,
Editorial Mc Graw-Hill, 1 Edicin en espaol
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Ejercicios de Biologa general, 625 problemas resueltos, Francisco
Teixido, Editorial Paraninfo, 1 Edicin.