Laboratorio de Qumica II.

Qumica Analtica

PRCTICA 5 CROMATOGRAFA DE GASES A) SIMULACIN DE UNA SEPARACIN

I. INTRODUCCIN

La cromatografa de gases es una tcnica de separacin en la que la fase mvil es un gas (denominado gas portador). En cromatografa gas/lquido la fase estacionaria es un lquido retenido o inmovilizado sobre un soporte slido. La separacin de los componentes de una muestra se produce debido a sus diferencias de retencin por la fase estacionaria, reflejadas en sus constantes de distribucin, K=Cestacionaria/Cmvil, al ser arrastradas por el gas portador a lo largo de la columna. Las interacciones de los analitos con el gas portador son despreciables debido a la baja densidad de ste; en consecuencia, para una determinada fase estacionaria, las concentraciones de estos analitos en ambas fases estn determinadas por la temperatura. Por lo tanto, la optimizacin de una separacin en cromatografa de gases se centra en optimizar el programa de temperatura del horno en el que se encuentra la columna que contiene la fase estacionaria. 1. Descripcin de un cromatgrafo de gases. El cromatgrafo de gases consta, esencialmente, de los siguientes componentes: Sistema de suministro del gas portador. Se dispone de botellas cilndricas de acero que suministran el gas portador de elevada pureza. La presin del gas en estas botellas es tpicamente de 200 atm. Un manmetro de alta presin reduce esta presin hasta unas 5-10 atm, que es ms adecuada para el cromatgrafo. Inyector. Pequea cmara cerrada con un tapn, o septum, de tipo goma de silicona, que se puede someter a temperatura relativamente alta (200C). En esta cmara se introduce la muestra mediante una microjeringa que tiene un volumen de unos pocos L. La muestra normalmente est disuelta en un disolvente orgnico; a la temperatura del inyector, se produce una volatilizacin rpida del disolvente y de los analitos disueltos, que son arrastrados por el gas portador a lo largo de la columna. Columna. Es el componente ms importante del cromatgrafo; contiene la fase estacionaria. Las ms utilizadas son las capilares, que son tubos de slice de pequeo dimetro, tpicamente 0.53 mm. La fase estacionaria lquida, con un espesor del orden de micras, se encuentra inmovilizada recubriendo la pared interior del tubo de slice. Se dispone de fases estacionarias con diferentes polaridades, desde no-polares, como en el caso de las columnas de dimetilpolisiloxano, hasta relativamente polares, tales como las columnas de cianopropilpolisiloxano. Mayor polaridad poseen las fases estacionarias de polietilenglicol. La columna se encuentra en el interior de un horno. Horno. El horno permite aplicar a la columna una temperatura de hasta unos 300C, limitada por la estabilidad trmica de la fase estacionaria. Se puede trabajar en condiciones isotrmicas, es decir, a temperatura constante a lo largo del tiempo, o bien a temperatura programada, de forma que la temperatura aumenta con el tiempo de acuerdo con diferentes tipos de funciones (T-t), normalmente lineales o rampas de temperatura; en esta modalidad se obtienen picos cromatogrficos ms estrechos. Detector. Los analitos separados se detectan a la salida de la columna. El detector ms utilizado es el FID (detector de ionizacin de llama). Se trata de un pequeo mechero con llama de difusin hidrgeno/aire. Todos los compuestos orgnicos que contienen tomos de carbono en forma no oxidada originan iones CHO+ en esta llama;
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al aplicar una diferencia de potencial entre el propio mechero y un electrodo, se obtiene una seal elctrica. II. DESCRIPCIN DEL PROGRAMA DE SIMULACIN

El programa simula las operaciones esenciales propias de un anlisis cromatogrfico. Estas operaciones incluyen, por una parte, las realizadas en el laboratorio, tales como preparacin de muestra y seleccin de la columna; y por otra parte, las operaciones realizadas sobre el cromatgrafo de gases, tales como seleccin de la temperatura del horno y de la presin del gas portador, as como la inyeccin de la muestra. Todas estas operaciones comienzan a partir del men de inicio. 1. Muestras La preparacin de la muestra, en este caso, se limita a seleccionar una serie de compuestos, entre los 60 disponibles. 2. Columna Se utilizan columnas capilares y se pueden elegir entre los siguientes parmetros: Fase estacionaria. Se dispone de tres fases estacionarias: OV-1: Dimetilpolisiloxano Ciano: 14% cianopropil-86% dimetilpolisiloxano FFAP: Polietilenglicol Espesor de la fase estacionaria. Se pueden elegir valores entre 0.1 y 5 m (los valores ms usuales oscilan entre 0.1 y 1.5 m) Longitud de la columna. Pueden escogerse longitudes entre 10 y 100 m (los valores usuales son 15, 30 y 60 m) Dimetro interno de la columna. Puede variar entre 0.2 y 1.0 mm ( los valores tpicos son 0.25, 0.32 y 0.53 mm) 3. Temperatura del horno El programa permite trabajar en condiciones isotrmicas o bien a temperatura programada. Se admiten hasta tres rampas de temperatura, es decir, tres relaciones lineales de temperatura en funcin del tiempo (T=kxt). La temperatura mxima del horno est limitada por la estabilidad trmica de la fase estacionaria y no suele rebasar los 300 C. 4. Gas portador y presin en el inyector El programa de simulacin permite seleccionar entre tres gases; nitrgeno, helio e hidrgeno, y aplicar diferentes presiones en el inyector y, por tanto, en cabeza de columna. Esta presin no suele ser superior a 1-2 atmsferas sobre la presin atmosfrica. 5. Mtodo actual La muestra seleccionada y las condiciones cromatogrficas de trabajo aparecen reflejadas en el men del mtodo actual. Mientras no se modifique el mtodo, se est trabajando en las condiciones del mtodo actual. Dicho mtodo se puede modificar utilizando muestras o columnas actuales adems de otras almacenadas o nuevas. Tambin se pueden modificar las temperaturas y presiones actuales.

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III.

PROCEDIMIENTO En la prctica se va a optimizar la separacin de una mezcla de hidrocarburos.

1. Muestra Para preparar la mezcla de hidrocarburos en la pantalla de inicio (Figura 1) se hace clic en MUESTRA y aparece en pantalla la figura 2. En esta pantalla se selecciona la opcin NUEVA y se pulsa SEGUIR. Aparece en pantalla la figura 3. Se marcan con el cursor (pulsando simultneamente la tecla de maysculas) los nueve hidrocarburos que aparecen al principio de la lista, desde el decano hasta el octadecano, adems del metano. El metano no se retiene apenas en las columnas usuales y su tiempo de retencin puede considerarse prcticamente como tiempo muerto. Se hace clic sucesivamente en AADIR y SEGUIR y se vuelve a la pantalla que aparece en la figura 1. 2. Columna En la pantalla que aparece en la figura 1 se selecciona COLUMNA y en la pantalla aparece la figura 4. Se selecciona la opcin NUEVA y se pulsa SEGUIR. Aparece en pantalla la figura 5. Se selecciona la fase apolar OV-1, puesto que la muestra contiene compuestos de naturaleza apolar. Se selecciona la longitud de la columna, para lo cual se escribe la longitud seleccionada en la casilla situada a la derecha de LONGITUD. Escribir 30. Se selecciona el dimetro interno de la columna, para lo cual se escribe el dimetro interno en la casilla situada a la derecha de DIMETRO INT. Escribir 0.5. Por ltimo se selecciona el espesor de la pelcula de fase estacionaria, para lo cual se escribe el espesor en la casilla situada a la derecha de CAPA DE FASE. Escribir 2. Para terminar con la seleccin de los diferentes parmetros que caracterizan la columna, se pulsa ACEPTAR y GUARDAR. Se da un nombre al archivo, se pulsa ACEPTAR y SALIR y se vuelve al men que aparece en la figura 1. 3. Temperatura En la pantalla de la figura 1 seleccionar temperatura y tendremos en pantalla la figura 6. a. Modalidad isotrmica Aplicar una Temperatura inicial de 100C durante un tiempo inicial de 60 minutos. Aparece en pantalla el programa de temperatura seleccionado. b. Modalidad temperatura programada Aplicar una Temperatura inicial de 100C durante un tiempo inicial" de 1 minuto. Seleccionar en rampa 1 un aumento de temperatura de 10C/min hasta 150C, manteniendo esta temperatura 1 min. Seleccionar en rampa 2 un aumento de temperatura de 20C/min hasta 200C, manteniendo esta temperatura 2 min. Seleccionar en rampa 3 un aumento de temperatura de 30C/min hasta 250C, manteniendo esta temperatura 3 min. Hacer clic en ACEPTAR. Aparece en pantalla la representacin grfica del programa de temperatura seleccionado. Hacer clic en SEGUIR. Aparece en pantalla el men de inicio de la figura 1.

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4. Gas portador En la pantalla de la figura 1 seleccionar la opcin PRESIN. Aparece en la pantalla la figura 7. Seleccionar gas NITRGENO y PRESIN en kg/cm2 (unidad tcnica que equivale prcticamente a atm). 5. Mtodo actual Pulsar MTODO en la pantalla de la figura 1. Aparecen en pantalla las especificaciones del mtodo seleccionado (figura 8). Comprobar el mtodo. Cerrar pantalla. 6. Inyeccin a. En condiciones isotrmicas Pulsar INYECCIN en la pantalla de la figura 1. Aparece en pantalla el cromatograma obtenido en las condiciones experimentales seleccionadas (figura 9). Pulsar INFORME, aparece en pantalla INFORME CROMATOGRAMA (figura 10). Seleccionar: tiempo de retencin (tr), anchura de pico cromatgrafico a mitad de altura (w1/2), altura de plato y resolucin. Pulsar SEGUIR. Aparece en pantalla INFORME CROMATOGRAMA (figura 11). Pulsar IMPRIMIR. Aparece en pantalla IMPRESIN (figura 12). Seleccionar mtodo, cromatograma y resultados. Pulsar IMPRIMIR. Pulsar SALIR, SEGUIR y CERRAR. Aparece en pantalla el men de la figura 1, en el que se puede modificar el mtodo en cualquiera de sus apartados, siguiendo los pasos descritos anteriormente. b. En condiciones de temperatura programada Repetir los pasos especificados en el apartado anterior para condiciones isotrmicas, previa seleccin del programa de temperatura especificado en el apartado HORNO. IV. RESULTADOS

1. Determinar la eficacia de la columna, en los casos de condiciones isotrmicas y gradiente de temperatura, utilizando el pico de mayor retencin, y comparar los resultados obtenidos. La eficacia de la columna se determina calculando el nmero de platos tericos, N=16(tr/wbase)2. 2. Modificar la longitud de la columna (50 m). Determinar su eficacia y comparar el resultado con el obtenido en el apartado 1. 3. Modificar el espesor de la fase estacionaria (4 m), determinar su eficacia y comparar el resultado con el obtenido en 1 y en 2. 4. Predecir tericamente el factor de retencin del undecano, por interpolacin en la representacin grfica de log tr para el decano y dodecano en funcin del nmero de tomos de carbono del hidrocarburo.

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Figura 1

Figura 2

Figura 3
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Figura 4

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Figura 6

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