Metabolismo Oxidativo

Comprende un conjunto de procesos oxidativos mediante los cuales se catabolizan todos los combustibles metablicos (carbohidratos, lpidos y protenas) en los organismos y tejidos aerobios

Descarboxilacin oxidativa del piruvato Ciclo del cido ctrico Cadena de transporte de electrones Fosforilacin oxidativa

Origen y destinos del piruvato: glucosa

gluclisis gluconeognesis

aminocidos

piruvato
Descarboxilacin oxidativa

Acetil CoA

Origen y destinos del Acetil CoA: glucosa

gluclisis gluconeognesis

Acidos grasos

piruvato
Descarboxilacin oxidativa

F-oxidacin

Lipognesis

Acetil CoA

aminocidos Cuerpos cetnicos colesterol Ciclo del cido ctrico

Descarboxilacin Oxidativa del Piruvato

Ocurre dentro de las mitocondrias Reaccin general: CH3-C-COOpiruvato Complejo de la piruvato deshidrogenasa CH3-C-CoA Acetil CoA UG = -33.5 Kj/mol + NADH+H+ + CO2 + NAD+ + CoASH

Complejo de la Piruvato Deshidrogenasa

Est formado por tres enzimas: cadenas polipeptdicas Piruvato descarboxilasa (E1) Coenzima: Pirofosfato de tiamina 24

Dihidrolipoamida transacetilasa (E2) Coenzimas: cido lipoico y CoASH Dihidrolipoamida Deshidrogenasa (E3) Coenzimas: FAD, NAD+

24

12

Coenzimas que intervienen en la Oxidacin del Piruvato

Participan 5 coenzimas Pirofosfato de tiamina cido lipoico Coenzima A FAD NADH+H+

Funciones:
Descarboxilacin y transferencia de grupos aldehdos

Transportador de grupos acetilo o hidrgenos Transportador de grupos acetilo Transportador electrnico Transportador electrnico

Accin del Complejo Piruvato Deshidrogenasa

Ocurren 6 reacciones:
1. Piruvato + PPT
E1

Hidroxietil-PPT + CO2
PPT + acetil-lipoamida

2. Hidroxietil-PPT + Lip.oxidada E2

3. acetil-lipoamida + CoA-SH E2 Acetil-CoA + Lipoamida red.

4. LipSHSH + FAD 5. FADH2 + NAD+

E3

E3

LipSS + FADH2 FAD+ + NADH+H+

Pirofosfato hidroxietilamina Acetil lipoamida Acetil CoA

Regulacin de la actividad del Complejo Piruvato Deshidrogenasa

Est regulada por 2 mecanismos: Inhibicin por los productos sobre E2:
Acetil CoA NADH+H+ ATP

Modificacin Covalente Reversible de E1:

Regulacin por Modificacin Covalente Reversible

Complejo PDHasa Pi fosfatasa Activo

ATP PDH cinasa

H2O

P
Complejo PDHasa

ADP

Ca2+ y Mg2+ insulina

Menos activo

ATP
NADH+H+ Acetil CoA

La actividad del complejo PDH aumenta en el msculo del sujeto que desarrolla ejercicio fsico intenso. Ello se debe a altas concentraciones de ADP y piruvato, que inhiben la PDH cinasa, y a un incremento de Ca+2, que estimula la PDH fosfatasa. Como consecuencia del efecto sobre ambas enzimas controladoras se registra un gran incremento de la concentracin de PDH activa, es decir, DESFOSFORILADA.

En trminos estrictos, el complejo de la PDH no forma parte del Ciclo de Krebs, Pero su regulacin potencia la sensibilidad Del mecanismo de regulacin del Ciclo.

Ciclo del cido Ctrico

(Ciclo de los cidos tricarboxlicos) (Ciclo de Krebs) Es un conjunto de reacciones bioqumicas que utilizan los organismos aerobios para liberar la energa qumica almacenada en el grupo acetilo de 2 carbonos del Acetil CoA Reaccin general: Ocurre dentro de las mitocondrias CH3-C-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O Acetil CoA 3 NADH+H+ + FADH2 + GTP + CoASH + 2CO2

Importancia
1.- Sirve como va final comn de la oxidacin de carbohidratos, lpidos y protenas

2.- Desempea un papel principal en la gluconeognesis, transaminacin, desaminacin y lipognesis. (Carcter Anfiblico)

3.- Las enzimas del ciclo se localizan en la matrz mitocondrial , lo cual facilita la transferencia de equivalente reductores a las enzimas adyacentes a la cadena respiratoria que tambin estn situadas en memb. mitocondrial

4.- Este proceso es aerobio , por tanto, la ausencia (anoxia) o deficiencia (hipoxia) de oxgeno causa la inhibicin total o parcial del ciclo.

Catabolismo de los residuos acetilos

Acetil CoA

Acetil CoA

G=+6.3 Kj/m G=+29.7 Kj/m G=-3.8 Kj/m G=-20.9 Kj/m G=0 Kj/m

G=-2.9 Kj/m

Gneto =-57.3 Kj/m

H2O

NAD+

NAD+ Malato DHasa

NAD+

CoASH

H2O

GDP+Pi FAD

GTP

+
GTP+ADP

GDP

CH3-C-CoA

Ciclo del cido Ctrico

Acetil CoA

G=+6.3 Kj/m G=+29.7 Kj/m G=-3.8 Kj/m G=-20.9 Kj/m G=0 Kj/m

G=-2.9 Kj/m

Gneto =-57.3 Kj/m

3 ATP

3 ATP

2 ATP 3 ATP 1 ATP

BALANCE ENERGETICO DEL CICLO DEL ACIDO CITRICO En general: 1 NADH+H+ 1 FADH2 1 GTP 3 NADH+H+ 1 FADH2 1 GTP

Al reoxidarse en la cadena de electrones: Al reoxidarse en la cadena de electrones: Fosforilacin a nivel de sustrato:

3 ATP 2 ATP 1 ATP

En el Ciclo del cido ctrico: 9 ATP 2 ATP 1 ATP 12 ATP

BALANCE ENERGETICO DEL CICLO DEL ACIDO CITRICO

Por cada molcula de Acetil CoA que ingresa al ciclo se producen 12 molculas de ATP

CARCTER ANFIBLICO DEL CICLO DEL ACIDO CITRICO

Las rutas anfiblicas pueden actuar como procesos Catablicos Anablicos El Ciclo del cido ctrico es CATABLICO por que los grupos acetilo de las molculas de AcetilCoA se oxidan para formar CO2 y energa libre almacenada en molculas de coenzimas reducidas y GTP

CARCTER ANFIBLICO DEL CICLO DEL ACIDO CITRICO

El Ciclo del cido ctrico tambin es ANABLICO por que algunos de sus intermediarios son precursores en rutas de biosntesis

Aspartato Glucosa

Acetil CoA

Acidos grasos colesterol Acetil CoA

Pirimidinas

Oxalacetato Malato Fumarato

Citrato Isocitrato
glutamato

E-Cetoglutarato Succinato Succinil CoA

catabolismo Anabolismo

porfirinas

Reacciones Anaplerticas

Son reacciones que permiten formar intermediarios del Ciclo del cido Ctrico

Aspartato Glucosa

Piruvato

Acetil CoA

Acidos grasos colesterol Acetil CoA

Pirimidinas

Oxalacetato Malato

Citrato Isocitrato
glutamato

Tirosina Fenilalanina

Fumarato E-Cetoglutarato Succinato

catabolismo Anabolismo Reacciones anaplerticas

Succinil CoA
porfirinas cidos grasos Algunos aminocidos

Piruvato Aspartato

Acetil CoA

Oxalacetato Malato
Tirosina Aspartato

Citrato Isocitrato
glutamato

Fumarato E-Cetoglutarato Succinato Succinil CoA

Reacciones anaplerticas

cidos grasos Algunos aminocidos

Conversin de Piruvato a Oxalacetato

(Reaccin anaplertica) acetilCoA CH3 C=O + HCO3 COOpiruvato
-

COO+ ATP + CH2 C=O COOoxalacetato + ADP + Pi + H+

Enzima: Piruvato carboxilasa Coenzima: Biotina

UG= -2.1 Kjmol

Regulacin del Ciclo del cido Ctrico

Regulacin alostrica de enzimas clave:

Citrato sintasa Isocitrato Deshidrogenasa E-Cetoglutarato Deshidrogenasa

Regulacin del Ciclo del cido Ctrico

Regulacin alostrica de la enzima Citrato sintasa:
Acetil CoA y Oxalacetato +

Citrato sintasa
-

NADH+H+ y ATP

Succinil CoA y citrato

Regulacin del Ciclo del cido Ctrico

Regulacin alostrica de la enzima Isocitrato Isocitrato Deshidrogenasa:
NAD+ y ADP

Isocitrato Isocitrato Deshidrogenasa:

+ NADH+H+ y ATP

Regulacin del Ciclo del cido Ctrico

Regulacin alostrica de la enzima E-Cetoglutarato Deshidrogenasa:

NAD+

E-Cetoglutarato Deshidrogenasa:

+ Succinil CoA y NADH+H+

Mitocondria

Cadena de transporte de Electrones

(Cadena respiratoria)

Es un conjunto de complejos protenicos enclavados en la membrana interna mitocondrial, que funcionan como acarreadores de electrones, desde las coenzimas reducidas hasta el receptor terminal de electrones del metabolismo aerobio: el oxgeno.

Cadena de transporte de Electrones

(Cadena respiratoria)

dnde se ubican los componentes de la cadena de electrones?

Membrana externa Membrana interna

Mitocondria

UE= +0.42 v UG= -80.3 Kj m

UE= +0.18 v UG= -34.7 Kj m

UE= +0.52 v UG= -102.5 Kj m

2.4.- Cadena respiratoria: hiptesis quimiosmtica.

Cuando los electrones se mueven por la cadena transportadora salen a niveles energticos inferiores y van liberando energa. Esta energa se emplea para fabricar ATP, a partir de ADP, en el proceso de fosforilacin oxidativa.

Los electrones procedentes de la gluclisis, de la oxidacin del cido pirvico y del ciclo de Krebs se encuentran en un nivel energtico an muy alto. En el transporte de electrones stos son conducidos a travs de una cadena con mltiples y sucesivos aceptores. Cada uno de los cuales es capaz de aceptar electrones a un nivel ligeramente inferior al precedente. Los transportadores pueden existir en dos estados de oxidacin prximos, pasando del uno al otro segn acepten o desprendan electrones.

Cada par redox slo puede recibir electrones de otro par que tenga potencial de reduccin ms negativo y solo puede cederlos al par que lo tenga menos negativo. El potencial mas negativo de la cadena respiratoria es el NAD+ con -0,32 voltios. En el otro extremo est el agua con +0,82 voltios.

Cules son los componentes de la cadena de electrones?

Complejo I NADH deshidrogenasa Contiene: 25 cadenas polipeptdicas 1 FMN 22 a 24 Centros Hierro-Azufre NADH+H+ FMN Fe2+S Fe2+S Fe3+S CoQ

CoQH2 Fe3+S NAD+ FMNH2 Transporta electrones desde el NADH+H+ Hacia la Coenzima Q Bombea protones dentro del espacio intermembranal

.............Cules son los componentes de la cadena de electrones?

ComplejoII

Succinato-CoenzimaQ reductasa

Contiene: 4 cadenas polipeptdicas 1 FAD 7 a 8 Centros Hierro-Azufre Citocromo b560 Transporta electrones desde el Succinato Hacia la Coenzima Q Fe2+S Fe3+S

.............Cules son los componentes de la cadena de electrones?

Coenzima Q

Ubiquinona

Es una molcula de naturaleza lipdica Es un acarreador mvil Transporte electrones desde el NADH+H+ desde el FADH2 Hacia el Complejo III

.............Cules son los componentes de la cadena de electrones?

Ubiquinol-Citocromo C reductasa

Contiene: 8 cadenas polipeptdicas 2 Centros Hierro-Azufre Citocromo b560 Citocromo b566 Citocromo c1 Transporta electrones desde la Coenzima Q Hacia el Citocromo c Bombea protones dentro del espacio intermembranal Fe2+S Fe3+S

.............Cules son los componentes de la cadena de electrones?

Citocromos

Son un grupo de protenas que contienen en su estructura un grupo prosttico hemo

Se clasifican como: Citocromo b Citocromo c Citocromo a b560 c1 a c a3 b562

Transportan 1 electrn a la vez

.............Cules son los componentes de la cadena de electrones?

Complejo IV

Citocromo C oxidasa

Contiene: 12 cadenas polipeptdicas Citocromo a Citocromo a3 2 iones de cobre Cu2+ Cu+

Transporta electrones desde el citocromo c Hacia el oxgeno Bombea protones dentro del espacio intermembranal

.............Cules son los componentes de la cadena de electrones?

Complejo V

ATP sintasa

Contiene: 12 14 cadenas polipeptdicas 2 sub unidades Fo F1

Cataliza la sntesis de ATP a partir de ADP + Pi (Fosforilacin oxidativa)

Complejo I Coenzima Q

ComplejoII

Citocromo c

Complejo V ADP + Pi ATP

Complejo IV

O2

H 2O

NADH+H+ FMN Fe-S I CoQ Fe-S Cit b Cit c1 III Cit c Cit a Fe-S Cit b FAD

succinato

-0.33 -0.30

+0.04

II
+0.07 +0.23 +0.25 +0.29

Cit a3 IV O2

+0.55 +0.82

UE= +0.42 v UG= -80.3 Kj m

UE= +0.18 v UG= -34.7 Kj m

UE= +0.52 v UG= -102.5 Kj m

FOSFORILACION

OXIDATIVA

Proceso por el cual la energa generada por la Cadena de Transporte de Electrones (CTE) se conserva mediante la fosforilacin del ADP para dar ATP ATP ADP+ Pi ADP + Pi ATP G = -30.5 Kj/mol G = +30.5 Kj/mol

La fosforilacin oxidativa es un proceso endergnico que ocurre acoplado a un proceso exergnico ( CTE)

E NADH+H+ FMN Fe-S I CoQ Fe-S Cit b Cit c1 III

Complejo V ADP + Pi ATP Complejo V ADP + Pi ATP

succinato Fe-S Cit b FAD

-0.33 -0.30

+0.04

+0.07 +0.23 +0.25

Complejo V ADP + Pi ATP

Cit c Cit a Cit a3 IV O2

+0.29 +0.55 +0.82

EFICIENCIA DE LA FOSFORILACIN OXIDATIVA

Relacin Fsforo  Oxgeno

Relacin PO

Es el nmero de molculas de ATP sintetizadas por cada par de electrones transportados a travs de la Cadena de transporte de Electrones

Potencial de Reduccin resultante del flujo de electrones Desde NADH + H+ hasta 02 NADH+H 02 + 2H+ + 2e NADH+H + O2 NAD+ + 2H+ + 2e H2O NAD+ + 0.32 v 0.82 v H2O 1.14 v

(Go =-n F (Eo n=2 F= 23.06 Kcal/v/mol (Go = -2x 23.06x 1.14 = -52.58 Kcal/mol

Para sintetizar ATP a partir de ADP + Pi se necesita una Cantidad de 7Kcal/mol Si la eficiencia fuera de 100% 52.58/7 = 7.5 moles de ATP/NADH Pero la eficiencia real es de 35 a 40% 7.5 x 0.35 o 0.40 = 2.6 o 3.0 moles de ATP / NADH + H

En el caso del FADH2

FADH2 O2 + 2H + 2e FADH2 + O2 (Go =-n F (Eo n=2 2e + 2H+ H2O FAD + H2O + FAD 0.00 v 0.82v 0.82v

F= 23.06 Kcal/v/mol

(Go = -2x 23.06x 0.82 = -37.82 Kcal/mol Eficiencia 35-45% 0.4x37.82/7 = 2.16 moles = 2 moles

Cuando la oxidacin de las coenzimas procede por la va de las Deshidrogenasas ligadas al NAD+, se incorporan 3 moles de fosfato inorgnico al ADP para formar 3 moles de ATP por cada tomo de oxgeno consumido, es decir, la relacin P:O = 3

Cuando la oxidacin de las coenzimas procede por la va de las Deshidrogenasas ligadas a FAD+, se incorporan 2 moles de fosfato inorgnico al ADP para formar 2 moles de ATP por cada tomo de oxgeno consumido, es decir, la relacin P:O = 2

Mecanismos de la fosforilacin oxidativa Teora quimiosmtica de acoplamiento

La energa del transporte electrnico impulsa un sistema de transporte activo que bombea protones desde la matriz mitocondrial hacia el espacio intermembranal estableciendo un gradiente electroqumico que impulsa la sntesis de ATP

.Teora quimiosmtica de acoplamiento

1. Al pasar los electrones a travs de la Cadena de Transporte de Electrones, se transportan protones desde la matrz mitocondrial y se liberan en el espacio intermembranal.

2. Como consecuencia se crea un potencial elctrico (=) y un (= gradiente de protones (UpH) a travs de la (U membrana interna mitocondrial

.....Teora quimiosmtica de acoplamiento

3. La membrana interna es impermeable tanto a los iones como a los protones 4. Los protones, que se encuentran en exceso en el espacio intermembranal, pueden pasar a travs de la membrana interna y volver a la matrz a travs de canales especiales. 5. Al producirse el flujo de protones a travs de un Canal que contine actividad ATPsintasa, se produce la Sntesis de ATP

Membrana externa
Cit c

Espacio intermembranal

Componentes de la cadena de electrones

Fumarato Succinato Matriz Potencial qumico (pH (interior alcalino) Sntesis de ATP guiada por fuerza protn-motriz Potencial electrico (] (interior negativo)

Membrana interna

El bombeo de protones y la creacin del Potencial elctrico Se puede mantener si : 1.- Existe disponibilidad de sustratos 2.- Membrana interna se conserva intacta (no se ha Hecho permeable con agentes fsicos o qumicos

Se ha estudiado que al menos tres (3) protones deben pasar a traves de la membrana para generar 1 ATP lo que significa que : Por cada NADH + H que genera tres ATP necesitaria entonces que pasen 9 protones a traves de la membrana

Inhibidores de la cadena respiratoria

FAD FeFe-S

Complejo II Complejo III Complejo IV

Complejo I

NADH p FMN p Fe-S p CoQ p cit b p Fe-S p cit c1 p cit c p cit a p cit a3 p O2 FeFe-

Rotenona Amobarbital

Antimicina A

Cianuro, CO H2S

Inhibidores de la Fosforilacin Oxidativa:

Oligomicina: Se une al complejo Fo de la ATP sintasa, bloqueando el flujo de protones a travs de sta, inhibiendo la Fosforilacin oxidativa Atractilsido: Inhibe al transportador de nucletidos de adenina a travs de la cadena respiratoria. respiratoria.

Desacoplamiento entre la Cadena de Electrones y la Fosforilacin Oxidativa:

Los desacopladores, al difundir a travs de la membrana, colapsan el gradiente de protones, tomando los protones de un lado y liberndolos en el otro, igualando la concentracin de protones a ambos lados de la membrana Por ejemplo:

Dinitrofenol Trifluorocarbonilcianuro fenilhidrazona (FCCP)

Bloquean la sntesis de ATP Permiten que contine la CTE

Transporte Electrnico desacoplado y Generacin de calor:

Espacio intermembranal Matriz

Recin nacidos Animales que hibernan Animales de climas muy fros

Protena desacoplante (Termogenina)

Calor

Control de Fosforilacin Oxidativa: El control de la Fosforilacin Oxidativa permite a la clula producir slo la cantidad de ATP que se requiere de inmediato para mantener sus actividades La enzima ATP sintasa (complejo V) se inhibe por una alta concentracin de su producto (ATP) Y se activa cuando las concentraciones de ADP y Pi son elevadas

Aminocidos

cidos grasos

Glucosa

ePiruvato CO2

e-

Acetil-CoA

e-

Ciclo de Krebs
e-

NADH, FADH2
(Transportadores e- reducidos)

Cadena respiratoria
(Transferencia e-)

2H+ + O2 H2O

ADP + Pi

ATP

Gracias !!!