Cncer mamario canino, marcadores tumorales y antgenos asociados Canine breast cancer, tumors markers and associated antigens

Resumen: Los tumores mamarios caninos por su alta incidencia y potencial maligno son de gran relevancia clnica y diagnstica. Diversos factores de riesgo han sido reconocidos en la tumorignesis mamaria, factores endognos como hormonas y factores de crecimiento, predisposicin gentica; exgenos como nutricin y mltiples carcingenos ambientales parecen estar involucrados. La inmunohistoqumica es para la histopatologa una herramienta con un alto valor pronstico, mejorando la especificidad y sensibilidad que el anlisis logrado con tinciones histoqumicas convencionales; permite una estrecha correlacin con la estratificacin tumoral. Mltiples marcadores tumorales estn ahora disponibles y por su facilidad de aplicacin en secciones fijadas en parafina, son alternativas de bajo costo y gran precisin. Estudios dedicados a su implementacin y validacin se revisten de gran importancia para desarrollo de la histopatologa veterinaria en nuestro contexto. Palabras Claves: Tumores mamarios caninos, inmunohistoqumica,

marcadores tumorales, factores de riesgo Summary Canine mammary tumors by high incidence and malignant potential are of great clinical and diagnostic relevance. Several risk factors have been recognized in mammary tumorigenesis, endogenous factors such as hormones and growth factors, genetic predisposition, carcinogens exogenous appear to and be nutrition and many environmental involved.

Immunohistochemistry for histopathology is a tool with a high prognostic value, improving the specificity and sensitivity analysis achieved conventional histochemical stains, allow a close correlation with tumor stratification. Multiple tumor markers are now available and its ease of use in paraffin-fixed sections are alternative low cost and high accuracy. Studies devoted to its implementation and validation in our context are lined with great importance in

the development of veterinary pathology. Keywords: Canine mammary tumors, inmunochemistry, tumors markers, risk factors Introduccin La prevalencia del cncer en perros ha aumentado en los ltimos aos, debido en parte a los avances en clnica y teraputica que han dado lugar a una mayor longevidad en los caninos y a que las herramientas diagnsticas han facilitado un acercamiento a la incidencia real de las enfermedades, sin embargo las neoplasias siguen siendo un gran reto para la medicina moderna. Los tumores mamarios son la segunda afeccin neoplsica ms frecuente en el perro, siendo superadas solo por las neoplasias de piel; se dice que del 25 al 30 % de todas las neoplasias del perro son tumores mamarios, estos datos estadsticos reflejan la situacin mundial de este padecimiento (1). El perro como modelo preclnico y predictivo es una herramienta fundamental en la investigacin de cncer de mama en humanos; se ha observado que en el perro los tumores espontneos recapitulan muchas caractersticas de los presentados en el humano, as pueden traspolarse las formas clnicas de presentacin, los marcadores moleculares, la histologa, la gentica, el comportamiento biolgico y la respuesta a algunos de los tratamientos convencionales (2), de ah que estudios que validen su utilidad como modelo son de vital importancia en nuestro contexto. La inmunohistoqumica como herramienta diagnstica ha logrado importantes avances en la caracterizacin neoplsica de la glndula mamaria, permitiendo un acercamiento a la biologa tumoral y permite en muchos casos el logro de un diagnostico ms preciso y precoz que el logrado con tinciones histoqumicas convencionales facilitando el anlisis y prediccin de los tumores mamarios caninos, y tal vez el manejo teraputico. Los avances tecnolgicos han permitido la disponibilidad de diversos anticuerpos monoclonales y el desarrollo de diferentes marcadores tumorales que por su valor predictivo del comportamiento tumoral abren un nuevo horizonte en el manejo del cncer; el desarrollo de la histopatologa veterinaria depende en gran parte de la implementacin de estas nuevas herramientas.

Patognesis de los tumores mamarios caninos Como la mayoria de las neoplasias la gnesis de los tumores mamarios es multifactorial y son el resultado de la interaccin entre factores genticos del individuo y el medioambiente, resultando en la produccin de clulas malignas que segn su localizacin y funcionalidad generan diversos efectos en un hospedero. La carcinognesis mamaria depende de la alteracin de los diversos mecanismos de regulacin de crecimiento y muerte celular a traves de estimulos o restricciones en los mecanismos de control, as se reconocen dos tipos de factores: internos y externos para el desarrollo de un proceso tumoral. Los factores internos en el crecimiento de clulas cancerosas incluyen la proliferacin descontrolada de las clulas malignas, cambios de la superficie celular, cambios en la composicin de las enzimas celulares y cambios en las membranas clulares. las clulas malignas, posteriormente, desarrollan la capacidad de metstasis e invasin a su hospedero. los factores externos, se relacionan con la respuesta del husped a las clulas cancergenas incluyendo la alteracin de la respuesta inmunolgica, vascularizacin y la extensin finalmente con el desarrollo de metstasis a distancia. todos cambios biolgicos y de comportamiento celular se producen, bajo la influencia de hormonas, enzimas, antgenos y otros factores. (3) Factores de riesgo Hormonas y factores de crecimiento: La influencia hormonal en el desarrollo del cncer mamario humano y animal ha sido ampliamente estudiada y aunque los mecanismos por los cuales el estmulo hormonal resulta en un proceso tumoral no se han dilucidado claramente, es irrefutable el efecto de diferentes hormonas en la transformacin maligna del tejido mamario. De esta manera se ha demostrado que una temprana ovariectomia en la perra ejerce un efecto protector disminuyendo el riesgo de tumores mamarios, a

dems la presencia de receptores hormonales esteroides en tejidos tumorales indica que factores hormonales pueden estar envueltos en el desarrollo de tumores mamarios caninos. (4) La investigacin de los mecanismos implicados en la regulacin del crecimiento del cncer de mama han cambiado desde el concepto de estimulacin sistmica endocrina de la proliferacin hacia procesos autocrinos y paracrinos en la regulacin del crecimiento de las clulas de cncer de mama (5). En la investigacin sobre estimulacin endocrina, la atencin principal se ha centrado en los estrgenos, cuya produccin es tambien local, en la glndula mamaria. Se ha demostrado que en el cncer de mama humano hay una regulacin autnoma de la concentracin de estradiol en el tejido, que no depende de los niveles plasmticos. (6) Se considera que el Estrgeno y la progesterona endgena tienen un papel central en la etiologa de tumores mamarios. Estos receptores se encuentran en el 50% de los tumores malignos y el 70% de los benignos, as como en el tejido normal de la glndula mamaria (7,8). los tumores que no tienen receptores hormonales tienen un comportamiento ms agresivo y son menos diferenciados que los que expresan estos receptores.(9) Esto es consistente con el concepto de que la desviacin de los mecanismos normales de control se desarrollan progresivamente en tumores mamarios malignos (1,10). La Progestina, participa en el desarrollo cclico de la glndula mamaria, pero puede promover la carcinognesis mamaria mediante la estimulacin de clulas epiteliales mamarias susceptibles y a veces transformadas (11). Algunos factores de crecimiento pueden desempear un papel en el desarrollo de tejidos mamarios normales, pero tambien en algunas condiciones neoplsicas, algunos estudios han evaluado del factor de crecimiento epidrmico (EGF), el Factor transformador del crecimiento (TGF) y factor del crecimiento vascular endotelial (56, 57, 58). Estos factores de crecimiento se asocian con la presencia de receptores de estrgeno y progesterona en los

tumores mamarios caninos. La hormona del crecimiento (GH) se ha vinculado tambin al proceso neoplsico maligno; la expresin de GH se produce en el tejido mamario normal, hiperplsico, y neoplsico del perro. Su produccin es estimulada por la progesterona que ejerce un estimulo mitognico sobre epitelio mamario (5). El papel de la prolactina sigue siendo incierto aunque sus receptores se han encontrado en tumores mamarios (9). Nutricin Los Factores nutricionales pueden ser de importancia etiolgica en el cancer mamario canino, los mecanismos directos de carcinognesis no son an claros, sin embargo indirectamente pueden modificar por ejemplo la concentracin y disponibilidad de hormona sexuales. los factores nutricionales son de especial inters en el desarrollo de cncer de mama humano y ya que el perro comparte frecuentemente hbitos alimenticios con el humano estara sometido a los mismos estmulos carcinognicos, esta hiptesis es sin duda vlida de consideracin. En caninos la obesidad a temprana edad y un ao antes del diagnstico, y la ingesta de alimentos hechos en casa (en comparacin con el de los alimentos comerciales), se han relacionado con una mayor incidencia de tumores y displasias. Factores asociados con la presencia de CMT son un alto consumo de carne de cerdo y una baja ingesta de pollo. Adems, la concentracin srica de retinol ha sido menor en los perros afectados que en los controles. Sin embargo, la proporcin de macronutrientes (grasas, protenas y carbohidratos drates) no parece ser importante. Parece que la obesidad a temprana edad (cuando los acontecimientos se producen a principios de carcinognesis en las glndulas mamarias de caninos) se relaciona con una mayor incidencia de la CMT, pero si se trata de un efecto directo o no an est por establecerse. Adems, la dieta habitual en perros hembra adulta influye en la aparicin de CMT, sin embargo, el papel de retinol, y la ingesta de los componentes de los alimentos, como carne de res y cerdo, an no se ha dilucidado (12). Gentica

El cncer es gentico en el sentido que el desarrollo tumoral requiere la alteracin de secuencias de DNA. (13) La patognesis molecular exacta del desarrollo y metstasis de los tumores mamarios es compleja, y seguramente multifactorial, sin embargo se requiere sin duda de una susceptibilidad gentica del individuo que al interactuar con uno u otro factor carcinognico ambiental resulta en una neoplasia. Existen dos mecanismos por medio de los cuales una clula normal se transforma en una maligna, estos mecanismos involucran mutaciones en los genes implicados en el control homeosttico de la proliferacin y la muerte celular. El primer mecanismo resulta en la activacin de genes que estimulan la proliferacin celular o ejercen un efecto protector contra la senescencia y muerte celular, estos son los llamados oncogenes. El segundo mecanismo implica la inactivacin de los genes que regulan e inhiben la proliferacin celular, los genes supresores de tumores. (14) De esta manera, por una o ambas vas se da el desarrollo tumoral. En humanos, se calcula que cinco a diez por ciento de todos los cnceres de mama se puede atribuir a la herencia de mutaciones altamente penetrantes en genes de susceptibilidad autosmica dominante (13, 15). Varios estudios han descrito en la expresin de mRNA y niveles de protenas de genes como el p53, receptores hormonales, ErbB2, y los genes BRCA1 y su relacin con la carcinognesis y el pronstico de los tumores mamarios caninos (16, 17, 18).

A pesar de que las influencias hormonales son claramente importantes en la gnesis de los tumores mamarios, la incidencia de la enfermedad especialmente elevada en ciertas razas (19, 20) sugiere un componente gentico significativo para la enfermedad que es hereditario. Es ampliamente aceptado que, adems de las mutaciones de la lnea germinal, la transformacin maligna requiere la acumulacin de alteraciones genticas somticas, o lesiones. El papel de las alteraciones adquiridas en oncogenes y

genes supresores de tumores es ampliamente reconocido en la formacin de tumores. (21) Estudios recientes en CMT encontr que 3 de 10 (22) y 6 de 40 (23), los tumores malignos primarios contenidos mutaciones de p53, con un perro portador de una mutacin de la lnea germinal (22,23). En otro estudio, el 17% de 69 carcinomas mamarios caninos analizadas mostr una mutacin en el gen p53, y el anlisis multivariado indic que esta mutacin confiere un mayor riesgo de recurrencia y muerte por tumor mamario (24). Pronstico de Tumores Mamarios Los tumores mamarios caninos (CMT) son heterogneos desde sus aspectos patolgicos a su comportamiento clnico. La demostracin de los parmetros clnicos y patolgicos con significado pronstico y / o teraputicos en estos tumores es un campo importante de estudio en medicina veterinaria. En la determinacin del pronstico y la prediccin del comportamiento tumoral, han sido consideradas mltiples variables teniendo en cuenta que igual al tumor inicial las recidivas y metastsis son resultado de eventos multifactoriales y la evaluacion de un solo factor puede no ser predictivo independientemente. Variables clnicas como el status de linfondulos, la edad al momento de la cirugia, la presencia de metstasis a distancia, DNA ploidia, talla del tumor, tasa de crecimiento y variables histopatolgicas como tipo de tumor, grado nuclear de malignidad y grado histologico de malignidad. (25, 26) Marcadores tumorales y antigenos asociados a tumor Las herramientas para el diagnstico y tratamiento del cncer estn en constante desarrollo y muchos cambios se han logrado en poco tiempo. Con el advenimiento de la tecnologia de los anticuerpos monoclonales y el desarrollo de mltiples marcadores tumorales y de antgenos asociados a tumores se ha logrado importantes avances y un extenso campo de estudio se ha abierto paso. Los marcadores tumorales son sustancias bioqumicas elaboradas por las clulas tumorales ya sea por la causa o el efecto de proceso maligno. Estos

marcadores pueden ser productos endgenos normales que se generan a un ritmo mayor en las clulas cancerosas o productos nuevos generados por la activacin de genes que se mantienen en reposo en las clulas normales. Cuando un marcador tumoral producido por el tumor est presente en cantidades significativas, indica la presencia de un cncer. Ellos pueden estar presentes como sustancias intracelulares en los tejidos o pueden ser liberados a la circulacin y aparecen en el suero (27, 28). El espectro de los marcadores bioqumicos del tumor reportado hasta la fecha es muy amplio. Los marcadores tumorales tienen varios usos posibles para el cancer mamario canino, permitiendo el diagnstico precoz, sensible y especfico en fases clnicas e incluso preclnicas y permiten en muchos casos la vigilancia terapetica, tales como el desarrollo de una recidiva tras la extirpacin quirrgica o el control de la respuesta al tratamiento. Algunos de los marcadores tumorales se han revestido de particular importancia debido a su capacidad de prediccin del comportamiento tumoral y su facilidad de aplicacin en secciones fijadas en parafina, siendo alternativas de bajo costo y gran precisin, en la siguiente revisin se enuncian los mas representativos: Receptores de Estrgeno El receptor de Estrgeno (RE - ) ha sido reconocido como una herramienta til en el pronstico y prediccin de la respuesta a la terapia hormonal en el cncer de mama humano. (29) los mtodos bioqumicos iniciales para su estudio como el carbn cubierto con dextran (DCC), han sido reemplazados por inmunohistoqumica. En tumores mamarios humanos, el rol de RE- como factor pronstico y terapetico es bien conocido. Pacientes con tumores mamarios con expresin de RE- tienen altas tasas de supervivencia y mejor respuesta a tratamiento hormonal que pacientes sin RE- . (30). En la ltima dcada, varios estudios usando diferentes mtodos bioqumicos han revelado la presencia de RE- en tumores mamarios caninos. (31, 32). Estos resultados indican un rol para hormonas esteroides en la promocin del crecimiento de tumores mamarios

caninos y determinan su aplicacin y utilidad como factor pronstico de cancer mamario canino. Ki67 El ki67 es una protena nuclear no histona relacionada con clulas en proliferacin y asociada con las fases G1, S, G2 y M del ciclo celular, la expresin de Ki67 desaparece rpidamente despus de la mitosis (33). Es un parmetro pronstico objetivo en la prediccin del comportamiento postquirrgico de carcinomas mamarios caninos, el ndice Ki-67 puede ser til en el pronostico de metstasis y sobrevida de estos pacientes.(34) Reportes indican que los tumores con ms del 5% de sus clulas positivas a Ki-67 tienen un curso clnico desfavorable. (35,36). Un nuevo anticuerpo (MIB1) desarrollado para la identificacin del antgeno Ki- 67 ha extendido su uso y aplicacin a tejidos incluidos en parafina permitiendo su medicin y uso como parmetro pronstico en tumores mamarios caninos. (37) PCNA PCNA es una protena auxiliar del ADN polimerasa , se expresa en las clulas en divisin durante la fase G1. PCNA aumenta a finales de G1, los picos de la fase S, y se mantiene elevada durante las fases G2 y M debido a su larga vida media. (38). Evaluacin Inmunohistoquimica de PCNA con el anticuerpo PC10 ha sido reportada en tejidos mamarios tumorales caninos y felinos fijados en formalina y embebidos en parafina y parecen estar correlacionados con tipo histolgico (benigno/maligno) y el ndice mittico pero no con el grado nuclear. (30) La expresin de PCNA parece estar restringida al ncleo en clulas no mitticas, pero en clulas mitticas la expresin de PCNA fue citoplasmtica, este patrn puede estar relacionado a su asociacin con elementos del citoesqueleto. Se expresa tambin en clulas acclicas en asociacin con reparacin del DNA, Tiene larga vida media y persiste al final de la mitosis, las clulas mitticas tienen una expresin de PCNA muy bajo, vindose influido por factores desconocidos y perdiendo su uso a plenitud para la cuantificacin de la actividad proliferativa generando falsos positivos y disminuyendo su especificad. (39)

Tanto el Ki67 como el PCNA son correlacionados ampliamente en el pronstico de tumores mamarios caninos, sin embargo, la expresin de PCNA vara de la de Ki-67 en ciertos tipos de tumores estudiados hasta ahora de glndula mamaria y en algunos carcinomas gstricos (35, 36, 40). Esto parece ser debido a una desregulacin de la sntesis de PCNA en ciertas clulas neoplsicas adyacentes a la clula estroma no neoplsica (35). P53 Es un gen que codifica una protena de 53k que hace parte de las denominadas protenas supresoras tumorales; es decir, que esta protena es capaz de inducir apoptosis celular en aquellas situaciones que le sean biolgicamente favorables. Numerosos estudios han sido enfocados en la investigacin del papel del gen supresor de tumores P53 en la tumorgnesis del cncer mamario canino y humano. La mutacin del gen P53 es la alteracin gentica ms comn en varios tipos de cncer, entre ellos el cncer de mama (41). Existen aproximadamente unas 200 copias de este gen en el cromosoma 17 del genoma humano y su alteracin es uno de los defectos de ocurrencia ms frecuente en los canceres del hombre, presentndose en ms del 50% de los mismos, principalmente los de seno, pulmn, colon y esfago (2, 42, 43). Al mutar el gen deja de ejercer su efecto protector por lo que esas clulas cuyo ADN suele estar daado, en lugar de destruirse por Apoptosis se dividen sin control, mutan rpidamente sus genes y al final se malignizan. Hay a la fecha ms de 500 mutaciones clasificadas para el p53 (2, 42). Los tejidos cancergenos sobreexpresan la protena P53 mutante, dos anticuerpos monoclonales han sido ampliamente utilizados para su reconocimiento el PAB240 y el PAB421, Identificando eptopos diferentes del P53, Se ha confirmado reaccin cruzada entre anticuerpos humanos y animales y aplicables a tejidos fijados en parafina.(44) Estudios sugieren que las mutaciones del gen p53 y sobreexpresin de la protena usando el anticuerpo anti-p53 PAb240 fueron tiles en la prediccin del posible aumento del potencial maligno y un peor pronstico en los tumores mamarios caninos (44, 45).

C-erb2 o Her 2 (Human epidermal growth factor receptor type 2) La protena Her2 es el producto de un protooncogen especfico, un gen que tiene el potencial de producir cncer. En condiciones normales la protena Her2 desempea un papel importante en el crecimiento y el desarrollo de una amplia variedad de clulas epiteliales estas clulas componen el revestimiento tisular externo e interno del organismo, as como el tejido glandular (36, 46, 47). Es una protena que influye en la proliferacin celular, la diferenciacin morfolgica y la motilidad celular, la sobreexpresin de Her2 ha demostrado promover el crecimiento la invasin de las celulas neoplsicas, pacientes con sobreexpresin de her2 tuvieron ms bajo tiempo de supervivencia (48) Si el gen Her2 esta amplificado dndose lugar a la generacin de mltiples copias del mismo y la consecuente produccin de una cantidad excesiva de protena Her2, induce a las clulas a que se dividan, multipliquen y crezcan a mayor velocidad que las clulas normales contribuyendo a la aparicin del cncer (47) Las clulas cancergenas presentan en su superficie un numero entre 10 y 100 veces ms receptores Her2, por lo que su crecimiento y multiplicacin es 10 a 100 veces ms rpida que el de las clulas normales (47). Un estatus Her2 positivo se determina al analizar la magnitud de receptores Her2 en una muestra de tejido tumoral. Esto puede hacerse mediante dos tcnicas, una se conoce con el nombre de mtodo FISH (Fluorescense in situ hybridisation) la cual detecta la amplificacin del gen Her2, el resultado es considerado positivo cuando al menos el 10% de las clulas del tumor presentan una tincin completa e intensa de sus membranas. Tener una prueba para Her2 positiva en las clulas de un tumor mamario, representa un nuevo indicador pronstico, ya que permite al medico programar un tratamiento adecuado. Los pacientes Her2 positivos tienen un porcentaje menor de respuesta al tratamiento estndar (quimioterapia y terapia hormonal) que los pacientes que son negativos (36,47). Estos resultados sugieren que el c-erbB-2 la expresin se asocia con el crecimiento celular y / o la divisin celular, tanto en los carcinomas mamarios caninos y en el carcinoma de mama humano (36, 47, 49, 50). Determinando el valor de la c-erbB-2 como un factor predictivo de cncer de mama.

COX2 El sistema de ciclooxigenasas esta compuesto de 2 isoenzimas distintas, la COX1 y COX2 que Juegan un importante papel en la formacin de prostaglandinas. Las dos isoenzimas son sustancialmente diferentes en patrones de expresin y biologa. COX1 es una enzima constitutiva, expresada por la mayora de los tejidos y esta envuelta en actividades fisiolgicas (proteccin de la mucosa gstrica, regulacin del flujo sanguneo renal, agregacin plaquetaria) (51) y COX2 se induce rpidamente en respuesta a factores de crecimiento, promotores tumorales, hormonas, endotoxinas bacterianas, citoquinas y stress (52). La cox2 parece afectar la proliferacin celular, la mitosis, la adhesin celular, la apoptosis, la vigilancia epidemiolgica y la angiognesis, cada vez hay mas pruebas que el efecto cancergeno de la cox2 es en relacin con HER2 y con el factor de crecimiento vascular endotelial de ah su aparente asociacin con la angiognesis (34). A nivel celular el aumento de la actividad de cox2 ayuda a promover la invasin de tumor que es mediado a travs de una alta actividad de metaloprotenas 2 y 9. Cox2 promueve la expresin de una protena antiapoptticas bcl-2 inhibiendo la senescencia celular (53). La asociacin entre los niveles de expresin cox2 y el subtipo histolgico tumoral evidenci que tumores pobremente diferenciados expresan cox2 con mayor intensidad y frecuencia que esos tumores ms diferenciados tales como adenocarcinomas (54). La expresin de cox2 induce a la progresin del cncer mediante la promocin de la invasin, angiognesis y metstasis y la inhibicin de la apoptosis (33). Estudios en humanos en pacientes con largas terapias de AINE mostraron una baja incidencia de neoplasias, dando lugar a numerosos estudios con inhibidores Cox selectivos y no selectivos como quimioterapeticos y quimiopreventivos. Cox2 es entonces una variable pronstica respecto al tiempo libre de enfermedad y tiempo de supervivencia, los estudios epidemiolgicos han llevado al uso de AINES selectivos en pacientes de alto riesgo (33).

E-cad Molcula de adhesin celular epitelial calcio dependiente. La evidencia sugiere que juega un papel importante en la sealizacin del crecimiento y diferenciacin celular. Se implica aparentemente en la tumorignesis y la invasin neoplsica, el E-cad acta como un supresor de la invasin previniendo que clulas tumorales migren de su lugar primario, la baja E-cad repercute en la cohesin celular normal favoreciendo la invasin y metstasis. (55) Conclusin De las mltiples neoplasias que afectan al perro el estudio de los tumores mamarios caninos se reviste de particular importancia debido a su alta incidencia y a su estrecha semejanza en mltiples aspectos con los tumores mamarios humanos, notndose un especial inters en el perro como un modelo clnico y predictivo para el humano. La carcinognesis mamaria canina es un rea en la que se enfocan innumerables estudios, y las herramientas para el diagnstico estn cambiando rpidamente en la bsqueda de elucidar la patognesis concreta de su presentacin y acceder a un diagnstico precoz y tratamiento oportuno. La inmunohistoqumica es una herramienta que progresivamente ha mostrado su pertinencia en el logro de estos objetivos y su implementacin es significativa en el desarrollo de la histopatologa y deteccin de la enfermedad maligna, diferentes marcadores tumorales estn ahora disponibles y su uso debe validarse en nuestro contexto. Los tumores mamarios caninos como evento multifactorial y dependiente de la interaccin de mltiples factores de riesgo genticos, hormonales y medioambientales requieren la evaluacin simultnea de varios marcadores tumorales, un anlisis de un solo marcador parece no ser suficiente en el conocimiento concreto de la naturaleza y comportamiento tumoral. El estudio de parmetros que reflejan las fases del ciclo celular de las clulas neoplsicas ha mostrado ser til y muy aproximado al comportamiento biolgico de los tumores, la correlacin entre Ki67 y PCNA, marcadores representativos del ciclo celular pueden cumplir con este objetivo.

Las mutaciones de P53 son conocidas como la alteracin gentica ms comn en tumores mamarios humanos y un comportamiento similar parece darse en tumores mamarios caninos, puede ser un indicador interesante de la progresin tumoral. El Her2, como producto de un protooncogen est muy relacionado con el desarrollo tumoral y su sobreexpresin ha demostrado estar correlacionada con el crecimiento e invasin de las clulas neoplsicas. Los receptores estrognicos parecen ser representativos del grado de diferenciacin tumoral, y son una variable pronostica importante considerando que tumores poco diferenciados y de peor pronstico evidencian pocos receptores de estrgenos. A dems el perro puede ser un modelo til para estudios hormonales y para el desarrollo de modelos de terapia endocrina para cncer de mama humano. La cox2 promueve la progresin del cncer a travs de la alteracin de diferentes mecanismos biolgicos y en humanos es una variable pronostica de gran utilidad y aunque su uso en histopatologa veterinaria no es muy extendida su implementacin como tcnica sera de vital importancia no slo por sus efectos en la carcinognesis mamaria sino tambin por la posibilidad de uso de inhibidores cox selectivos como teraputicos y quimiopreventivos. La importancia de la e-cad radica en su estrecha relacin con el potencial maligno y capacidad de invasin de las clulas neoplsicas, como molcula importante en la adhesin celular su evaluacin es un indicador de metstasis en tumores mamarios caninos. Muchos otros marcadores tumorales se encuentran en estudio, su uso se dificulta ya que no son aplicables a tejidos fijados en parafina y requieren de tcnicas de mayor complejidad y costo, sin embargo, el horizonte esta abierto y los avances en genmica han permitido que el estudio de genes como el BRCA1, BRCA2, LSPI, MAP351 entre otros aparentemente relacionados con el desarrollo tumoral este disponible, y en un futuro cercano hagan parte del diagnstico rutinario en histopatologa veterinaria.

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