Rev. Per. Qum. Ing. Qum. Vol. 12 N. 2, 2009. Pgs.

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CARACTERIZACIN QUMICA DE LA STEVIA REBAUDIANA

M. Bravo A.1, N. Ale B.2, D. Rivera C.3, J. Huamn M.4, D. Delms R.5,
M. Rodrguez B.6, M. Polo S.7, M. Bautista C8.

RESUMEN
Se realizaron extracciones acuosas, controlando el pH con CaCO3 e Ca(OH)2, se utilizaron como clarificantes
carbn activado y arcillas activadas en soluciones fras y calientes; de ello se obtuvo los mejores resultados
con bentonita en fro, arcilla activada y carbn activado en caliente. Los resultados analticos se comparan
con una muestra de Stevia comercial.
Palabras clave: Extraccin, clarificante, edulcorante, intercambio inico, estevisido.
CHEMICAL CHARACTERIZATION OF THE STEVIA REBAUDIANA
ABSTRACT
Aqueous extractions were performed controlling the pH with CaCO3 and Ca (OH)2, using as clarifiers
activated coal and activated clays in cold and warm solutions to obtain best results with cold bentonite,
warm activated clay and warm activated coal. Analytical results were compared with a commercial sample
of stevia.
Keywords: Extraction, clarifier, sweetener, ion exchange, stevioside.

I. INTRODUCCIN
En el momento actual, en el que todo el
mundo mira a los productos naturales como
una alternativa de alimentacin sana, nos
vemos en la necesidad de estudiar las hojas de esta planta. La Stevia rebaudiana
crece en ceja de selva del Per, as como
en las regiones de Cajamarca y Arequipa.
Esta planta es usada como edulcorante
natural no calrico, recomendada para personas diabticas y personas obesas. Por
referencias bibliogrficas se conoce que
tiene muchas propiedades beneficiosas: digestiva, antibacteriana, diurtica, anticida
y cardiotnica, antioxidante, desintoxicante, cosmtica y antidiabtica.
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Es usada como infusin, en extracto y

como cristales solubles, para estas dos ltimos es necesario hacer una purificacin y
clarificacin.

Figura N. 1. Estructura del estevisido.

Departamento de Qumica Analtica, FQIQ, UNMSM, mmbravoa@hotmail.com

Departamento de Qumica Analtica, FQIQ, UNMSM, alesbunmsm@yahoo.es
Departamento de Qumica Analtica, FQIQ, UNMSM, riverl@hotmail.com
Departamento de Qumica Orgnica, FQIQ, UNMSM, jmariah25@hotmail.com
Departamento de Qumica Analtica, FQIQ, UNMSM, dines_13delmas@yahoo.com
Departamento de Qumica Analtica, FQIQ, UNMSM, angelrodbest@yahoo.com
Departamento de Qumica Inorgnica, FQIQ, UNMSM, aproinsac@yahoo.com
Departamento de Procesos, FQIQ, UNMSM, mabutistac@unmsm.edu.pe

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En el presente trabajo se enfatiz en la

extraccin del estevisido, identificando al
metabolito primario responsable del poder
edulcorante. Figura N. 1.
II. PARTE EXPERIMENTAL
Material biolgico. Las hojas de Stevia
rebaudiana fueron adquiridas en Lima pero
proceden de la regin de Cajamarca.
Los anlisis se realizaron con muestras
deshidratadas.
Las muestras para la extraccin del estevisido se prepararon segn Figura N. 2.
Etapas del proceso
1era etapa: Seleccin, molienda y tamizado en malla 200.
2da etapa: Extraccin acuosa con CaCO3
por 24 horas, posterior filtracin cuidadosa.

cuada del extracto para eliminar impurezas

realizando mltiples filtraciones (Extracto 3)
y luego precipitndolo a un pH de 10 con
H3PO4 al 2% para eliminar interferentes persistentes (Extracto 4). Se procede a la clarificacin, usando carbn activado y en otros
casos arcilla activada (Extracto clarificado)
con un pH 7,5 regulando con una temperatura mxima de 45 C para los procesos
en caliente. Finalmente, se purifica usando
resinas de intercambio inico, para su posterior cristalizacin.
EXTRACCIN
H2O
CACO3 - Agitacin

EXTRACTO BRUTO (1)

Filtracin
gruesas - finas

H2O

EXTRACTO (2)
CA(OH)2
Agitacin 30 minutos

EXTRACTO (3)

4ta etapa: Regular el pH del extracto 10 12 y posterior filtracin.

EXTRACTO (4)

6ta etapa: Purificacin usando resinas de

intercambio inico y obtencin de cristales.
Procedimiento experimental
Seleccin, molienda y tamizado en malla
200, posterior extraccin acuosa regulando
el pH con CaCO3 por 24 horas con agitacin
constante. (Extracto Bruto 1). Se filtra el extracto obtenido separando los gruesos de
los finos (Extracto 2), se adiciona Ca (OH)2
regulando el pH. Se realiza la filtracin ade-

Lavados

Filtracin fina

3ra etapa: Extraccin regulando el pH con

Ca (OH)2 en fro y en caliente para definir
el mtodo ms ptimo y posterior filtracin
cuidadosa.

5ta etapa: Clarificacin usando en unos

casos carbn activado y en otras arcillas
activadas. Regulando a un pH 7,5.

Lavados

pH = 10 12
Clarificantes - Agitacin

Filtracin fina

Filtracin fina

Lavados

Lavados

EXTRACTO CLARIFICADO
pH = 7,5

Intercambio inico
Eluyente
Fluido en mezcla
hidroalcohlica
Evaporacin 45 - 50 C

Cristalizacin
(ESTEVISIDO)

Figura N. 2. Diagrama de flujo para la obtencin del estevisido.

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III. RESULTADOS

Cuadro N. 5. Bandas caractersticas de la muestra de referencia (FTIR).

Cuadro N. 1. Anlisis cualitativo de iones: Ca2+

y PO43- , en extractos y cristales.
Muestra

Ca2+
X

X (solucin verde)

XX

No hay

No hay

Referencia
Extracto acuoso

PO43-

Cristales

Cuadro N. 2. Pruebas cualitativas en el extracto acuoso.

Reactivo
Reactivo de Fehling
Reactivo de Cloruro Frrico
Reactivo de Molisch

Resultado
Positivo ( ++)
Positivo (++)
Positivo (+)

(++) : Buena cantidad

(+) : Poco

Cuadro N. 3. Estudio de la clarificacin-efecto

del pH.
Mtodo de
extraccin

pH

Clarificante

pH (despus de
clarificacin)

M1

Fro

10,0 Bentonita + Gelatina

7,5

M2

Caliente

10,0 Bentonita + Gelatina

7,5

M3

Fro

10,0 A A + Gelatina

7,5

M4

Caliente

10,0 Carbn activado

7,5

M5

Caliente

12,0 A A + Gelatina + C A

7,5

M6

Caliente

10,0 A A + Gelatina

7,5

Fro: Temperatura ambiente.

A A: Arcilla activada
Clarificante: 2%

Caliente: T = 40 - 45 C
C A: Carbn activado
Gelatina: 0,1%

Cuadro N. 4. Estudio cromatogrfico del estevisido.

Muestras: Extractos clarificados y producto

cristalino.

M1
M2
M3
M4
M5
M6
C

Rf (Muestra)
0,64
0,63
0,63
0,64
0,63
0,64
0,67

Grupos Funcionales

3350,07
2929,98
1727,99
1447,90
1074,52

O-H
C-H
C=O
C-H
C-O-C

Cuadro N. 6. Bandas caractersticas de la muestra (cristales obtenidos) (FTIR).

Donde: X: enturbiamiento.
XX:
precipitacin.

Muestra
(molida)

Bandas (cm-1),

Rf: Referencia
0,65
0,64
0,63
0,64
0,63
0,64
0,67

Bandas (cm-1),

Grupos Funcionales

3377,21

O-H

2935,53

C-H

1726,56

C=O

1447,81

C-H

1073,74

C-O-C

IV. DISCUSIN
De los resultados obtenidos mostrados
en el Cuadro N. 2, con las reacciones de
Fehling, cloruro frrico y reactivo de Molisch
se determina la presencia de grupos OH,
grupos C=O y azcares.
El mtodo ptimo para la extraccin del
estevisido comprende varias etapas entre las ms importantes: extraccin acuosa
(temperatura de extraccin), filtracin, clarificacin, purificacin, precipitacin, recristalizacin y secado del estevisido.
De acuerdo a los espectros IR, se nota la
presencia de los grupos funcionales caractersticos, tanto en la muestra de referencia
como la de los cristales obtenidos.
V. CONCLUSIONES
Segn las pruebas analticas cualitativas,
los extractos finales presentan calcio y un
pH promedio de 7,5; mientras que en los
extractos purificados por cromatografa de
intercambio inico disminuye la presencia
de calcio y el pH promedio es 6. La muestra
utilizada como referencia presenta calcio
en menor proporcin y un pH 6,5.

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Los Rf de la muestra de referencia y de las

muestras de trabajo extractos clarificados
tienen valores entre 0,63 y 0,67, lo que indica la presencia del estevisido.
En cuanto al barrido de longitudes de onda
por espectrofotometra visible, podemos notar que la muestra utilizada como referencia
y todas las muestras trabajadas tienen un
mximo de absorbencia de 660 nm, en tanto que sus menores absorbencias se encuentran entre 620-625 nm.

gaciones (CSI) de la Universidad Nacional

Mayor de San Marcos.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] Lock de Ugaz O. Investigacin fitoqumica, 2da. ed. Lima: Fondo Editorial
PUCP, 1994; pp. 255-279.
[2] Gibaja Oviedo S. Pigmentos naturales.
Lima: Fondo Editorial UNMSM, 1998;
pp. 145-149.

Las muestras clarificadas con bentonita en

fro y con arcilla activada y carbn activado en caliente presentan los mayores niveles de absorcin en 660 nm al igual que la
muestra utilizada como referencia.

[3] Soto A, Del Val S. Revista de Ciencias

Agrarias y Tecnologa de los alimentos.
2002 20: 5-9.

El espectro FTIR de la muestra de referencia muestra bandas caractersticas de la

molcula de estudio obtenida. La muestra
aislada presenta bandas similares que confirman la presencia del estevisido.

[5] Tanaka O. Trends in Analytical Chemistry

1982 1 (11):246-248.

VI. AGRADECIMIENTO
Los autores agradecen la financiacin otorgada por el Consejo Superior de Investi-

[4] Mosetting E. et al. J. Am. Chem. Soc.

1963 85: 2305.

[6] Kobayashi, M. et al. Phytochemistry

1977 16: 1405.
[7] United Status Patent, Patent. Number:
5, 962,678, Oct. 5, 1999.
[8] www.miski/perusac.com
[9] www.paraguayvende.com.py