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Revista Sistemas Ambientales, Vol. 4, No 2, 2011, p.

45-54

APLICACIONES BIOTECNOLGICAS DE MICROORGANISMOS


HALFILOS
Laura Castillo-Carvajal, Blanca E. Barragn-Huerta, B*.
Laboratorio de Residuos Peligrosos. Departamento de Ingeniera en Sistemas Ambientales. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas.
Instituto Politcnico Nacional. Av. Wilfrido Massieu s/n, Unidad Profesional Adolfo Lpez Mateos. CP 07738. DF. Mxico
e-mail: bbarraganh@ipn.mx

RESUMEN
Los microorganismos tienen mltiples aplicaciones industriales; en el caso de los microorganismos halfilos su uso biotecnolgico se ve orientada a diferentes campos, por ejemplo
en la industria alimentaria en donde se requiere preservar y conservar las caractersticas
sensoriales de los alimentos, en la industria de plsticos en la que se busca generar nuevas
tecnologas amigables con el ambiente y en la industria farmacutica con la incorporacin
de principios activos que originan nuevos productos. Se ha demostrado que los microorganismos halfilos presentan una alta capacidad de bioremediacin, ya que pueden ser empleados como catalizadores en diversos procesos en donde se requieren condiciones extremas para poder recuperar eficientemente un ambiente contaminado.
Palabras clave: Halfilas, Biotecnologa, Bioremediacin.
ABSTRACT
Microorganisms have several industrial applications; in case of halophilic microorganisms
their biotechnological use is oriented to different fields, for example in food industry where
it needs to preserve and maintain the sensory characteristics of the food, in the plastics industry which looks for new friendly environmental technologies and in the pharmaceutical
industry with the incorporation of active principles that are the base of new products. It has
shown that the halophilic microorganisms have a high capability of bioremediation, due to
they can be used as catalysts in different process in which need extreme conditions to recuperate efficiently polluted environments.
Key words: Halophilic, Biotechnology, Bioremediation.

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INTRODUCCIN
Los ambientes hipersalinos acuticos en los que la
concentracin de sal supera la del agua de mar
(3.5% de sales totales) pueden ser de origen natural, pero tambin pueden ser de origen artificial
como las salinas construidas por el hombre para la
obtencin de sal. Por otra parte, la mayora de las
salinas estn ubicadas en la costa, ya que la sal se
obtiene por la evaporacin del agua de mar, tal es
el caso de las salinas de Bras del Port en Santa
Pola, Alicante (Espaa); existen tambin salinas
terrestres en las que las salmueras o aguas saladas
proceden ros o lagos, un ejemplo de este tipo son
las salinas de Maras de la provincia de Urubamba,
Cusco (Per), las cuales son denominadas estanque mltiple, debido a que las salmueras se distribuyen en un conjunto de balas de evaporacin.
Este tipo de salinas son tiles para realizar estudios sobre la diversidad de los microorganismos
halfilos, ya que en ellas se encuentran multitud
de ambientes con distintos grados de salinidad
(Meseguer-Soria, 2004).
El salar de Uyuni en Bolivia y el de Atacama en
Chile son ejemplos muy conocidos por su gran
extensin y alto contenido de litio.
En Mxico existen algunas salinas que han sido
utilizadas desde tiempos prehispnicos para la
obtencin de sal (Figura 1). Estos ambientes son
ricos en microorganismos halfilos con gran potencial biotecnolgico poco explorado. Las aplicaciones biotecnolgicas de los microorganismos
extremfilos halfilos son diversas entre las cuales
se pueden citar: produccin de alimentos fermentados, produccin de salsa de soya, colorantes,
extremozimas resistentes a altas concentraciones
de sal (amilasas, proteasas, etc.), aditivos utilizados en cosmticos, plsticos biodegradables y
produccin de agentes gelificantes como exopolisacridos
(EPS).
(http://cbt.fcyt.umss.edu.bo/trabajo/verarticulo.ph
p?cod_art=5

Figura 1. Ambientes Salinos. Salar de Atacama,


Chile (A). Zapotitln de las Salinas, Mxico (B).
En la actualidad est creciendo el inters por conocer mejor la diversidad de microorganismos
halfilos y cada vez es mayor el nmero de investigaciones relacionadas con el tema ya que estos
organismos producen una amplia variedad de
metabolitos secundarios estables que pueden tener
aplicaciones prcticas (Gonzlez-Hernndez y
Pea, 2002; Podar y Reysenbach, 2006).
Generalidades de los Microor-ganismos Halfilos
Los microorganismos pertenecientes a la familia
Halobacteriaceae abundan en salinas y lagos
hipersalinos, ambientes bajo los cuales muy pocos
seres vivos pueden crecer. Una caracterstica fundamental de los miembros de esta familia es que
son halfilos obligados, necesitando concentraciones de NaCl mayores de 1.5 M para crecer,
adems, toleran bastante bien las temperaturas
elevadas, ya que los ambientes que habitan, por la
posicin geogrfica y por tratarse de aguas estancadas, suelen ser lugares muy clidos con temperaturas que pueden llegar a mas de 50C
(http://www.lluisvives.com/servlet/SirveObras/01
593741546702713008813/012969_2.pdf). Algunos estudios han demostrado que los microorganismos halfilos cuentan con estrategias que les
permiten enfrentar el estrs osmtico manteniendo
altas concentraciones intracelulares de sal y sinte-

Aplicaciones biotecnolgicas de microorganismos halfilos

tizando solutos compatibles que les permiten


balancear su presin osmtica (GonzlezHernndez y Pea, 2002).Las arqueas halfilas
son bsicamente hetertrofas aerobias, muchas de
estas especies pueden crecer en medios inorgnicos con un solo compuesto orgnico como fuente
de carbono. Debido a las altas concentraciones de
sal y a las elevadas temperaturas de las salinas, la
solubilidad de oxgeno es muy baja convirtindose

Castillo y Barragn

en un factor limitante para el desarrollo de estos


microorganismos. Un detalle importante que se
debe resaltar es que aunque los halfilos son organismos quimiohetertrofos, se han descrito casos
de fijacin de CO2 (Oren, 2002).
En la tabla 1 se presentan algunos de los gneros
de los microorganismos considerados como halfilos.

TABLA 1. MICROORGANISMOS HALFILOS


Dominio
Arquea

Bacteria

Gnero
Halobacterium sp.
Methanohalobium sp.
Methanohalophilus sp.
Acetohalobium sp.
Halorhodospira sp.
Actinopolyspora sp.
Salinibacter sp.
Halanaerobium sp.
Halothermothrix sp.
Halocella sp.
Halobacteroides sp.
Haloanaerobacter sp.
Salibacillus sp.
Halobacillus sp.
Marinococcus sp.
Salinococcus sp.
Tetragenococcus sp.
Halomonas sp.
Chromohalobacter sp.
Salipiger sp.
Palleronia sp.

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Rainey et al., 1995
Rainey et al., 1995
Rainey et al., 1995
Rainey et al., 1995
Rainey et al., 1995
Mota et al., 1997
Mota et al., 1997
Mota et al., 1997
Mota et al., 1997
Mota et al., 1997
Vreeland et al., 1980
Ventosa et al., 1989
Martnez-Cnovas et al., 2004
Martnez-Checa et al., 2005

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Produccin de Enzimas
Los biotecnlogos han explotado a los extremfilos como fuente de enzimas denominadas extremoenzimas (Hendry, 2006), las cuales ofrecen
nuevas oportunidades para biocatlisis y biotransformaciones como resultado de su extrema estabilidad (Hough y Danson, 1999). Las bacterias halfilas moderadas crecen ptimamente en un rango
de salinidad de 0.5 a 2.5 M; adems producen una
serie de enzimas hidrolticas extracelulares tales
como: amilasas, proteasas, lipasas, nucleasas y
esterasas (Margesin and Schinner, 2001; Ventosa
et al., 2005). En los ltimos aos, el inters por el
estudio de estas enzimas se ha incrementado debido a sus propiedades catalticas y potencial de
aplicacin industrial en la formulacin de detergentes, elaboracin de productos dietticos, procesamiento de cuero, papel y alimentos crnicos, as
como tambin en la sntesis de enantimeros puros de frmacos, biodegradacin de residuos txicos y contaminantes industriales, entre otros (Ventosa et al., 2005; Snchez-Porro et al., 2003).
Aunque el potencial de las halobacterias para
catalizar reacciones bajo condiciones extremas de
sal es bien conocido, hasta ahora no hay muchos
reportes de su aplicacin en forma inmovilizada,
debido a que estas clulas son muy frgiles y se
lisan con la disminucin de sal en el medio externo; sin embargo, se ha observado que la produccin de -amilasa por parte de microorganismos
halfilos se ha logrado mantener durante 45 das,
inmovilizando los microorganismos en perlas de
alginato y pelculas de alcohol polivinlico (Bagai
and Madamwar, 1996).
Las hidrolasas producidas por microorganismos
halfilos han sido usadas en la industria farmacutica para la elaboracin de algunos medicamentos
como antibiticos, hormonas y pesticidas (Joshi et
al., 2000: Sudge et al., 1998), tambin han sido
usadas para el tratamiento de superficies marinas
contaminadas con petrleo (Stosz et al., 1995).
Algunas celulasas haloestables han sido aisladas
de Salinovibrio sp. (Wang, et al, 2009). Por otro
lado, se han caracterizado isomerasas termoestables que permiten que la manipulacin del DNA
sea ms conveniente y eficiente; la Peptidil prolil
cis-trans isomerasa (PPIasa) ha sido usada para la

regeneracin de protenas desnaturalizadas, para la


estabilizacin de protenas, para la produccin de
protenas recombinantes y para la produccin de
importantes sustancias inmunosupresoras y fisiolgicamente activas (Margesin and Schinner,
2001).
Produccin de Biopolmeros
Los microorganismos halfilos tienen la capacidad de producir biopolmeros de diferentes clases
ente los cuales encontramos: exopolisacridos,
biosurfactantes, liposomas, lectinas y bioplsticos.
Los exopolisacridos (EPS) son biopolmeros
producidos extracelularmente por bacterias halfilas, teniendo aplicaciones en la industria alimentaria, farmacutica y en procesos de biodegradacin
(http://cbt.fcyt.umss.edu.bo/trabajo/verarticulo.ph
p?cod_art=5). Los exopolisacridos sulfatados son
poco frecuentes entre los exopolisacridos de
origen microbiano, sin embargo, algunos microorganismos halfilos estudiados sintetizan polmeros en cuya composicin se detectan grupos sulfato. Una de las ventajas de estos exopolisacridos
es que tienen actividad moduladora de la proliferacin de distintos tipos celulares, entre ellos
clulas tumorales y bloquea la entrada de clulas
virales en clulas hospederas, adems, los exopolisacridos le dan la capacidad a las clulas bacterianas de formar biofilms permitindoles la adhesin a diferentes superficies.
Otras de las ventajas que le conceden los exopolisacridos a las bacterias halfilas es la capacidad
de captar metales pesados, su actividad viscozante
y emulgente, adicionalmente algunos exopolisacridos pueden ser fuentes de oligosacridos ricos en
fucosa, presentando potenciales aplicaciones en
cosmtica y medicina (Mata-Gmez, 2006).
El exopolmero poli(-D-cido glutmico) (PGA)
puede ser usado como un espesante, humectante,
material de liberacin sostenida, o portador de
medicamentos biodegradable en la industria farmacutica o alimentaria (Kunioka, 1997).
Los biosurfactantes mejoran la remediacin de
suelo y agua contaminados con aceite, disminuyen
la tensin superficial, incrementan la solubilidad y
movilidad de hidrocarburos hidrofbicos, promo-

Aplicaciones biotecnolgicas de microorganismos halfilos

viendo la degradacin (Figura 2). Los microorganismos halfilos o halotolerantes productores de


biosurfactantes podran jugar un papel importante
en la acelerada remediacin de medios ambientes
salinos contaminados con aceite (Margesin and
Schinner, 2001).

Figura 2. Produccin de emulsificantes del petrleo por bacterias halfilas aisladas en el Departamento de ISA-ENCB (Foto: Mnica Bentez)
Se ha aplicado la gelificacin de exopolisacridos
bajo condiciones alcalinas para remover colorantes de efluentes textiles (Margesin and Schinner,
2001).
Los liposomas son usados en medicina y cosmticos para el transporte de compuestos a sitios especficos en el cuerpo. Lpidos vinculados al ter
de arqueas halfilas tienen una alta estabilidad
qumica y resistencia contra las esterasas y por lo
tanto ms alto rango de supervivencia que los
liposomas basados en derivados de cidos grasos
(Margesin and Schinner, 2001).

Castillo y Barragn

Biotecnologa Alimentaria
Los microorganismos halfilos juegan un importante papel en los procesos de fermentacin que
ocurren en presencia de sal; estos microorganismos catalizan la fermentacin y generan los compuestos encargados de dar caractersticas de sabor,
consistencia y aroma a los productos resultantes,
adicionalmente los microorganismos halfilos
producen compuestos que pueden servir como
control de microorganismos no deseados (Margesin and Schinner, 2001).
Los microorganismos halfilos han sido usados
para la produccin de suplementos alimenticios y
colorantes para alimentos; una alternativa promisoria para la produccin de cidos grasos poliinsaturados de cadena larga, son las bacterias marinas,
las cuales permiten procesos de purificacin convencionales, rpidos rangos de produccin y
buena consistencia del producto y rendimiento. En
el caso de los colorantes, los -carotenos son usados en la industria de alimentos como colorantes
naturales, como precursores de la vitamina A,
como aditivos en cosmticos, preparaciones multivitamnicas, y productos saludables.
Se ha reportado que las bacterias halfilas extremas tienen un ptimo crecimiento y un buen rendimiento en la produccin de carotenoides en
presencia de 25% de NaCl (Margesin and Schinner, 2001).

Las lectinas, protenas selectivas unidas a azcar,


son herramientas tiles para la investigacin de la
superficie celular y marcadores celular.
Son usadas como marcadores de las modificaciones de la superficie celular para la deteccin de
clulas malignas (Margesin and Schinner, 2001).
Las bacterias halfilas tambin han sido usadas
para la produccin de bioplsticos, los polihidroxialcanoatos (PHA) son compuestos bacterianos acumulados intracelularmente.
Como plsticos biodegradables podran reemplazar termoplsticos derivados del aceite en algunos
campos (Margesin and Schinner, 2001).

Figura 3. Pigmentos naturales en los alimentos


Bioremediacin

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La presencia de sodio y condiciones salinas en los


suelos, interfiere en el crecimiento adecuado de la
mayora de los cultivos y por lo tanto constituye
uno de los problemas ms serios que enfrenta la
agricultura sostenible en todo el planeta. La FAO
y la UNESCO calculan que el rea total de suelos
salinos en el mundo es de 397 millones de hectreas y los suelos sdicos corresponden a 434 millones de hectreas (Oldeman, 1991; Brandt and
Thornes, 1996; FAO, 2000; FAO, 2002). La recuperacin de los suelos sdicos se ha hecho principalmente cambiando el sodio en complejo coloidal
por otro catin, aplicando principalmente sales
solubles de calcio sales de calcio con baja solubilidad (cal agrcola), siendo esta una opcin costosa, Snchez-Leal y Arguello- Arias, (2006)
proponen una alternativa en la cual algunas bacterias halfilas son capaces de capturar sodio in
vitro y pueden ser posiblemente utilizadas en un
biorreactor para la bioremediacin de suelos sdicos y salinos, formando un consorcio entre bacterias autctonas y bacterias a las cuales se les ha
comprobado su capacidad de capturar sodio.
Se han aprovechado la habilidad de microorganismos halfilos/ halotolerantes de utilizar aminas
aromticas como una fuente de carbono y energa
( Li et al, 2010) y se ha comprobado que crecen
sobre compuestos aromticos (Cuadros- Orellana
et al, 2006; Arulazhagan and Vasudevan, 2009; Li
et al 2006; Peyton et al, 2006 ). Asimismo se han
desarrollado procesos para el tratamiento biolgico eficiente de ecosistemas contaminados con
productos del petrleo en presencia de sal (Betancur-Galvis et al, 2006).
Existen algunos reportes sobre la capacidad de los
microorganismos halfilos para degradar colorantes textiles (Kolekar et al, 2008). En el Laboratorio de Residuos Peligrosos hemos realizado el
aislamiento de microorganismos halfilos a partir
de ambientes salinos ubicados en Chile y Mxico
(Figura 4).

Figura 4. Degradacin de Naranja II por halfilos


aislados en el Departamento de ISA-ENCB (Foto:
Laura Castillo).
Se han aislado bacterias halfilas capaces de degradar compuestos orgnicos halogenados como
tricloroetileno, los cuales son de gran importancia
debido a su persistencia y toxicidad (Fuse, 1998).
Algunos autores han aislado bacterias halfilas
capaces de degradar lindano, DDT y 2,4-D (Oesterhelt et al., 1998; Maltseva et al., 1996).
Conclusiones.
Los microorganismos halfilos presentan un gran
potencial de aplicacin en diferentes campos de la
biotecnologa, el uso de microorganismos para la
degradacin de contaminantes es un campo de
investigacin en desarrollo. El uso de microorganismo para la obtencin de metabolitos o enzimas
presenta ventajas biotecnolgicas debido a que las
condiciones extremas requeridas para su crecimiento impiden los problemas de contaminacin
inherentes a los procesos fermentativos.
Agradecimientos.
Este trabajo forma parte de las actividades enmarcadas en el proyecto SIP 20110775 del Instituto
Politcnico Nacional.

Aplicaciones biotecnolgicas de microorganismos halfilos

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93741546702713008813/012969_2.pdf <consulta
16 de Agosto de 2011>.

Castillo y Barragn

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