INSTITUTO DE SALUD PBLICA DE CHILE SUBDEPARTAMENTO LABORATORIOS DEL

AMBIENTE

SECCIN QUMICA DE ALIMENTOS

DETERMINACIN DE ACIDOS GRASOS SATURADOS,

MONOINSATURADOS, POLIINSATURADOS Y ACIDOS GRASOS TRANS
Mtodo Cromatografa Gaseosa (GC-FID)

PRT: 701.04-154
Rev. 0
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1.0 OBJETIVO
Determinar el perfil de los cidos grasos, incluidos los ismeros trans en grasas y aceites de origen
vegetal y animal.
2.0 CAMPO DE APLICACION
El mtodo est diseado para evaluar el perfil de cidos grasos en aceites y grasas vegetales y
animales
3.0 FUNDAMENTO
Los cidos grasos metilados de las muestras son separados y cuantificados por cromatografa
gaseosa con detector FID en columna capilar de fase reversa.
4.0 REFERENCIAS
ISO 15304 Animal and vegetable fats and oils Determination of the content of trans fatty acid
isomers of vegetable fats and oils Gas chromatographic method.
5.0 TERMINOLOGA
Acidos grasos trans: ismeros de configuracin trans de todos aquellos cidos grasos que
contienen dobles enlaces.
6.0 MATERIALES INSUMOS Y EQUIPOS
6.1 MATERIALES Y EQUIPOS
6.1.1 Cromatgrafo de gases equipado con detector FID, muestreador automtico e hidrgeno como
gas carrier.
6.1.2 Balanza de precisin 0.001 g
6.1.3 Agitador mecnico de tubos
6.1.4 Micropipetas de 1000 L
6.1.5 Viales con tapa de 2 mL para autosampler
6.1.6 Columna capilar DB-23 fase reversa, 60 m, 0.25 mm i.d., 0.25 m de film.
6.1.7 Tubo de vidrio tapa rosca de 10 mL

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REACTIVOS

6.2.1 ter de petrleo p.a.

6.2.2 Solucin de hidrxido de potasio en metanol 2 M
6.2.3 Estndar Supelco, mezcla de 37 steres metlicos de cidos grasos.
7
7.1

DESARROLLO DEL PROCESO

Preparacin de las muestras
Antes de tomar la muestra, mezclar completamente. Fundir las muestras slidas para asegurar
una buena homogeneizacin, a no ms de 60 C.

7.2 Preparacin de los steres metlicos:

Pesar 250 mg de muestra en un tubo de vidrio con tapa rosca.
Agregar 500 L de hidrxido de potasio en metanol 2 M.
Agregar 5 mL de ter de petrleo.
Agitar 2 min en vortex, reposar 1 hora.
Trasvasijar a los viales del muestreador automtico .
Inyectar.
7.3

Determinacin

7.3.1 Condiciones cromatogrficas

T detector: 250 C
T inyector: 250 C
Programa de temperatura del horno: 120 C por 5 min, aumentar la temperatura a razn
de 10 C/min hasta 180 C, mantener por 30 min. Aumentar nuevamente a razn de 10
C/min hasta 210 C y mantener por 21 min. (total 65 min).
Flujo gas carrier: 15 psi
Split: 1:100
Volumen de inyeccin: 1 L
7.4

Expresin de resultados
Para cuantificar los trans, hacer zoom en la zona de los C18, entre los 26 a 38 min.
Considerar una altura de 33.000 a 55.000 volt.

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La fraccin de masa relativa de cada cido graso se calcula determinando el rea corregida del
peak correspondiente dividindola por la suma de las reas de todos los peaks.
Aceites y grasas refinadas a alta temperatura: Calcular los ismeros trans como la suma de las
fracciones de masa relativa de los esteres metlicos de C18:1 trans, C18:2 trans y C18:3 trans,
relativos a todos los steres metlicos de los acidos grasos. El maximo de peaks posibles de
encontrar son C18:1 trans (1 peak), C18:2 trans (2 peak) y C18:3 trans (4 peak). Se expresa con
2 decimales.
Aceites y grasas parcialmente hidrogenadas: Calcular los ismeros trans como la suma de todas
las fracciones de masa relativa de todos los esteres metlicos de los cidos grasos que contienen
dobles enlaces con configuracin trans, relativo a la suma de los esteres metlicos de todos los
cidos grasos. Se expresan con 1 decimal.