Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Prefacio
ndice de Contenidos
Resumen
.......................................................................................................................................
5
Captulo I: Introduccin general
...................................................................................................
6
Captulo II: Fijacin Biolgica de Nitrgeno en Leguminosas
...................................................
12
Introduccin
............................................................................................................................
12
Descripcin del gnero Rhizobium
.........................................................................................
14
Descripcin del gnero Bradyrhizobium
.................................................................................
15
Descripcin breve del cultivo de Soja
.....................................................................................
17
Clasificacin taxonmica
........................................................................................................
17
Etapas de Desarrollo
...............................................................................................................
17
Estados de Desarrollo
..............................................................................................................
19
Factores que afectan el desarrollo
...........................................................................................
26
Crecimiento
.............................................................................................................................
28
Factores que afectan el crecimiento
........................................................................................
29
Rendimiento
............................................................................................................................
30
Perodo Crtico Ubicacin e importancia
.............................................................................
32
Manejo del cultivo de Soja
......................................................................................................
32
Interaccin Soja-Bradyrhizobium
...........................................................................................
36
Inoculacin
..............................................................................................................................
36
Infeccin y formacin del ndulo
...........................................................................................
37
Estructura y diferenciacin del simbiosoma
...........................................................................
41
Fijacin biolgica de nitrgeno por el bacteroide
...................................................................
42
Ndulos activos y no activos Senescencia nodular
..............................................................
43
Factores que afectan la simbiosis
............................................................................................
44
Inoculantes
..............................................................................................................................
47
Tipos de Inoculantes
...............................................................................................................
47
Seleccin y preparacin de un soporte para inoculante
...........................................................
48
Mtodos de Inoculacin
..........................................................................................................
55
Evaluacin de inoculantes por SENASA
................................................................................
56
Actualidad y perspectivas en la Argentina
..............................................................................
57
Inoculacin Soja-Bradyrhizobium - Actualidad
......................................................................
57
Rendimiento de soja con y sin inoculacin con Bradyrhizobium
...........................................
59
Captulo III: Fijacin Biolgica de Nitrgeno en Gramneas
......................................................
61
Introduccin
............................................................................................................................
61
Descripcin del Familia Azospirilliceae y la gnero Azospirillum
.........................................
62
Descripcin breve del cultivo de Maz
....................................................................................
63
Clasificacin taxonmica
........................................................................................................
63
Crecimiento
.............................................................................................................................
71
Factores que controlan el crecimiento
.....................................................................................
75
Rendimiento y periodo crtico
.................................................................................................
77
Manejo del cultivo de Maz
....................................................................................................
79
Interaccin Azospirillum - Maz
.............................................................................................
85
Asociacin bacteria-planta - Quimiotaxis
...............................................................................
85
Produccin de fitohormonas - Biosntesis
...............................................................................
87
Interaccin de las fitohormonas y su efecto sobre el crecimiento de la planta
........................
92
Fijacin biolgica de nitrgeno por Azospirillum brasilense
..................................................
92
Algunos factores que afectan a la interaccin planta-Azospirillum
.........................................
93
Inoculantes
..............................................................................................................................
93
Tipos de Inoculantes
...............................................................................................................
93
Seleccin y preparacin de cultivos y soportes
.......................................................................
95
Mtodos de inoculacin
..........................................................................................................
97
Actualidad y perspectivas en Argentina
..................................................................................
98
Biofertilizantes en Maz-Azospirillum - Actualidad
................................................................
98
Rendimientos de maces con y sin inoculacin con Azospirillum
..........................................
99
Captulo IV: Conclusin
...........................................................................................................
101
Bibliografa
...............................................................................................................................
105
Resumen
Al inicio de la dcada del '70, se retomaron los estudios de los microorganismos que se
asocian a las races de los vegetales. El desarrollo de estas prcticas, crearon el concepto
de biofertilizacin, que es la manera de suministrar a las plantas algn nutriente que
ellas necesitan para su crecimiento, mediante un proceso biolgico en el que intervienen
diferentes microorganismos. En la actualidad existen diferentes tratamientos para lograr
la biofertilizacin:
1. La inoculacin de leguminosas con bacteria endosimbiticas fijadoras de nitrgeno
atmosfrico; estos son microorganismos del gnero, Rhizobium, Bradyrhizobium, etc.
que efectan una asociacin simbitica con la planta, mediante la formacin de ndulos.
2. La inoculacin de gramneas con bacteria diaztrofas fijadoras de nitrgeno
atmosfrico; estos microorganismos del gnero Azospirillum, Azotobacter, etc., no
forman una asociacin simbitica, sino que su accionar, se produce alrededor del rea
de las races (rizsfera), produciendo sustancias promotoras del desarrollo radicular
(fitohormonas).
Estas asociaciones permiten mantener la sustentabilidad de los sistemas agrcolas,
beneficiando, no slo a los rendimientos de los cultivos, sino tambin a las condiciones
fsico qumicas de los suelos cultivados. En el siguiente trabajo, se presentarn los casos
de asociacin simbitica en leguminosas y gramneas, tomando como ejemplo a los
cultivos de soja y maz respectivamente.
El nitrgeno en el suelo
El ciclo del nitrgeno en el suelo representa solamente una parte del ciclo total del
nitrgeno en la naturaleza. La disponibilidad de este elemento es de gran importancia
para las plantas, las que absorben nitratos y amonio que utilizan en la sntesis de las
protenas y de otros compuestos orgnicos vegetales. Cuando los restos vegetales y
animales regresan al suelo, son objeto de numerosas transformaciones, en su mayora de
carcter biolgico. Todos estos procesos son muy dinmicos.
Las reservas de nitrgeno existentes en la biosfera son muy pequeas.
Aproximadamente el 98% del N total de la tierra se presenta en la litosfera (suelos,
rocas, sedimentos, materiales fsiles). El resto del N se encuentra casi en su totalidad en
el aire, del que constituye el 78%, presentndose en forma molecular (N2).
El contenido de nitrgeno en el suelo est asociado con el desarrollo y evolucin de las
rocas parentales a largo plazo.
La transformacin del nitrgeno molecular atmosfrico en nitrgeno del suelo utilizable
actual o potencialmente por las plantas, se realiza principalmente segn dos procesos: 1)
El nitrgeno puede oxidarse y pasar a la forma de xidos, por accin de las descargas
elctricas, y stos compuestos, a su vez, son trasladados al suelo por la lluvia y
depositados en l como cido nitroso o ntrico. La magnitud de ste proceso es pequea
en comparacin a las cantidades de nitrgeno molecular que se convierte en orgnico
por medio de dicho proceso. 2) Fijacin biolgica por medio del conjunto de reacciones
gracias a las cuales los organismos vivos integran el nitrgeno molecular en sus
estructuras como componente de diversos compuestos. Ciertos microorganismos que
viven libremente en el suelo, y otros que viven simbiticamente con determinadas
plantas (principalmente leguminosas), son capaces de realizar esta incorporacin, ambos
grupos son los principales responsables de que se mantenga a un cierto nivel el
nitrgeno contenido en el suelo.
El nitrgeno del suelo es el elemento esencial que ms vara en cantidad y puede ser
absorbido por el suelo. El contenido de nitrgeno del suelo vara segn las condiciones
de drenaje, vegetacin, material parental, topografa, cantidad de materia orgnica,
textura del suelo, actividad del hombre etc.
En el perfil del suelo, se observa que las cantidades de nitrgeno disminuyen a medida
que aumenta la profundidad debido a la influencia de factores anteriormente nombrados
como vegetacin, topografa y clima.
El clima tiene una influencia determinante sobre el nivel de N en los suelos a travs del
efecto de la temperatura y las condiciones de humedad (rgimen de lluvias) sobre el
desarrollo de las plantas y microorganismos. Las condiciones climticas influyen
notablemente sobre el contenido de nitrgeno en los suelos. El aumento de temperatura
disminuye el contenido de nitrgeno, debido a que aumenta la velocidad de
mineralizacin de la materia orgnica, apareciendo compuestos simples que son
fcilmente lixiviados. Al aumentar la humedad, por efecto de las precipitaciones o riego
(a temperatura constante), el contenido de N en el suelo aumenta. Esto se debe al cese
de la actividad microbiana y a la aparicin de una mayor cantidad de vegetacin bajo
stas condiciones.
Los suelos arenosos, de texturas gruesas poseen menor cantidad de materia orgnica por
lo que contienen menor cantidad de nitrgeno que aquellos de textura ms fina. En
suelos con una misma textura, topografa y drenaje, el contenido de nitrgeno puede
variar segn las prcticas de manejo de los cultivos.
En el suelo el nitrgeno se encuentra en diferentes formas. El nitrgeno del suelo se
puede clasificar en orgnico e inorgnico.
La forma predominante es el nitrgeno orgnico en forma protenica, nucleica, azcares
aminados, etc. El nitrgeno orgnico representa entre el 85 y 95% del nitrgeno total del
suelo. El nitrgeno inorgnico del suelo incluye las formas: NH4+, NO3-, N2O y NO,
representado entre el 5 a 15% del nitrgeno total del suelo. Las formas de nitrito y
nitrato se encuentran casi exclusivamente como iones libres en la solucin del suelo. El
amonio, mayormente se encuentra como amonio cambiable y no cambiable (nativo fijo)
y una pequea porcin en la solucin del suelo. El amonio cambiable, los nitratos y
nitritos slo constituyen el 2% del nitrgeno total del suelo. Estas son las formas
utilizadas por las plantas.
En el suelo, el nitrgeno est asociado al C, en funcin de la relacin C/N. Esta relacin
en condiciones de suelo normal tiene un valor entre 10 y 20, en casos extremos puede
tomar un valor de 30. En suelos con alto contenido de materia orgnica, el contenido de
N es alto. En cambio, valores de C/N bajos, indican la presencia de mayores cantidades
de N inorgnico, especialmente de NH4+ fijado en los coloides. La relacin C/N y el pH
se encuentran inversamente relacionados.
El ciclo de nitrgeno en el suelo (Figura N 1) es parte del ciclo integral del nitrgeno
en la naturaleza.
Dentro de los ecosistemas, el nitrgeno sufre varias transformaciones:
Mineralizacin de nitrgeno orgnico (fertilizantes, desechos vegetales, rastrojos
de cosechas, carcasas y heces de animales, etc.) a amonio. Este proceso recibe el
nombre de amonificacin y es realizado por la microflora del suelo. Es un proceso
muy lento. Se considera que solamente el 2% del nitrgeno total del suelo es
mineralizado (en condiciones de clima templado).
Oxidacin de amonio a nitrito y luego a nitrato, proceso que recibe el nombre de
nitrificacin. Microflora especfica del suelo es la encargada de este proceso como
nlos Nitrosomas y Nitrobacter entre otros.
Absorcin de nitrato y amonio por las races de las plantas.
NO2- + 0,5 O2
NO3- (Nitrobacter)
Figura N 1 El Nitrgeno
en el Suelo
Metabolizados
por m.o.
Adsorbidos
por arcillas
Incorporados
al humus
Utilizados por
las plantas
Seguir siendo
mineralizados
Aminocidos
Desaminacin
Decarboxilacin
AMONIFICACION
NH4+
y c. grasos
NH4+
y comp. aromticos
pueden ser
Absorbido por
las plantas
Adsorbido por
minerales o
mat. org.
Adsorbido por
minerales 2:1
no expandibles
Inmovilizados
por m.o.
Lixiviado a
travs del
perfil
Oxidados a
nivel de
nitratos
9
10
11
Cianobacterias
Anabaena
Nostoc
Angiospermas
Gimnospermas:
Cycas, Bowenia
Lquenes
Musgos
Helechos
2 a 5 Kg N/ha/ao
13
Rhizobium fredii
Bradyrhizobium
japonicum
Azorhizobium
cautinodans
Glycine max
Glycine max
Lento
Lento
Sesbania rostrata
Lento
16
Etapa Senil
La etapa senil se da con la fructificacin. Se modifica la particin de los fotoasimilados
y se desencadenan una serie de mecanismos que llevan a la muerte de la planta, llamado
senescencia monocrpica.
18
Estados de Desarrollo
Para describir las etapas de desarrollo del cultivo de soja, generalmente se utiliza la
clasificacin de Fehr y Caviness, que emplea dos escalas: una para estados vegetativos
y otra para reproductivos (como muestra la Tabla N 7).
Los estados vegetativos (V) son identificados con nmeros, con excepcin de los dos
primeros, que caracterizan a la emergencia (VE) y a la etapa cotiledonar (VC).
Luego del estado VC, los estados se identifican con el nmero del nudo, sobre el tallo
principal, que presenta la hoja recientemente desarrollada, es decir el nudo que tiene las
hojas totalmente expandidas y el superior posee hojas cuyos bordes de los foliolos no se
tocan entre s.
Los cotiledones y las hojas unifoliadas se presentan de a pares en el primer y segundo
nudo del tallo principal en posicin opuesta. El resto de las hojas son todas trifoliadas y
se presentan una por nudo, en posicin alterna.
El estado VE corresponde a la emergencia de los cotiledones (como indica la Figuras
N 2); VC, cotiledones desplegados (como indican las Figuras N 3 y 4); V1, hojas
unifoliadas totalmente expandidas (Figura N 5); V2, segundo nudo, primer hoja
trifoliada totalmente expandida y as sucesivamente (Figura N 6 y 7); Vn, nmero de
nudos sobre el tallo principal con hojas totalmente expandidas. Cuando se quiere
determinar el estado fenolgico de una parcela o lote, se considera que ha alcanzado un
determinado estado cuando el mismo se ha manifestado en el 50% de las plantas.
19
con ste estado en aquellos cultivares de ciclo corto e intermedio, pero se adelanta el
cultivares de crecimiento determinado. Mientras ms largo es el ciclo de un cultivar,
ms se anticipa el inicio de sta etapa.
Figura N 8:
Planta en V3
Figura N 7: Planta
en V2
Estadios
Siembra a VE
VE a VC
VC a V1
V1 a V2
V2 a V3
V3 a V4
V4 a V5
V5 a V6
> a V6
R1 a R2
R2 a R3
R3 a R4
R4 a R5
R5 a R6
R6 a R7
R7 a R8
Das
promedio
de duracin
10
5
5
5
5
5
5
3
3
0-3
10
9
9
15
18
9
21
Figura N 10:
Planta en R1.
22
peso seco. Durante el llenado de granos, la semilla acumula la mitad del nitrgeno,
fsforo y potasio por redistribucin de los rganos vegetativos de la planta y la otra
mitad la toma del suelo. En el caso del nitrgeno, la actividad de los ndulos
complementa la provisin del suelo.
Estado R6 Una vaina que contiene una semilla que ocupa toda la cavidad de la
misma, en uno de los cuatro nudos superiores, con hojas totalmente expandidas (Figura
N 18). La planta posee semillas de todos los tamaos. Se alcanza el mximo peso de
vainas. Las tasas de crecimiento de la semilla y de la planta entera an son altas. La tasa
de acumulacin de materia seca comienza a declinar poco despus de R6 en la planta
entera y poco despus de R6,5 en la semilla. El peso seco y la acumulacin de nutrientes
de hacen mximos en la planta entera poco despus de R6,5 y en la semilla en R7. El
amarillamiento rpido de las hojas empieza poco despus de R6 y contina rpidamente
hasta R8. El amarillamiento y cada de las hojas empieza en los nudos basales y
progresa hacia los superiores. La velocidad de ste proceso est ligada a la cantidad de
granos y al grado de desarrollo que han adquirido los mismos. Un bajo nmero de
granos determinan la retencin de una masa importante de hojas verdes hasta el
momento de las primeras heladas. La deficiencia de potasio y la presencia de ciertas
virosis pueden provocar retencin foliar.
Figura N 15: Detalle de floracin en
R5.
R7 Una vaina normal ha alcanzado su color de madurez, en cualquier nudo del tallo
principal. Se considera que una semilla que ha alcanzado la madurez fisiolgica cuando
cesa su acumulacin de materia seca. Se produce cuando la semilla y la vaina se tornan
amarillas. En ste estado no todas las vainas han perdido el color verde. Se considera a
24
ste estado como la madurez fisiolgica. En este momento, la semilla posee 60% de
humedad.
25
26
Ciclo MEDIO
Fechas
de
siembra
intermedias.
Menor stand de plantas.
Suelo con ms limitaciones
fsico-qumicas.
Menor control de plagas y
malezas.
Mayor plasticidad en la poca
y densidad de siembra.
Mayor
estabilidad
de
rendimiento, al retrasar su
llenado de granos hacia
perodo
con
menor
probabilidad de ocurrencia de
estrs hdrico.
Mayor tendencia al vuelco.
Mayor predisposicin a ser
afectados por la podredumbre
hmeda del tallo (Sclerotinia
sclerotiorum).
Mejor calidad de semilla.
Ciclo LARGO
Fechas de siembra tardas.
Menor stand de plantas.
Suelo con ms limitaciones
fsico-qumicas.
Menor control de plagas y
malezas.
Mayor susceptibilidad al
vuelco.
Mejor comportamiento en
suelos con limitaciones fsicas
y/o qumicas.
Mayor competencia con las
malezas por su mayor
crecimiento.
Mejor comportamiento ante
deficiencias en el manejo del
cultivo.
Temperatura
Las temperaturas bajo las cuales los procesos ocurren con mayor velocidad oscilan entre
26 y 34C de da y 22 a 30C de noche. Las bajas temperaturas disminuyen el nmero
de primordios reproductivos y su tasa de desarrollo, estimulndose el crecimiento
vegetativo.
Otro factor que afecta al cultivo es el estrs hdrico, que reduce el nmero de estructuras
reproductivas y modifica la tasa de desarrollo hasta antesis. La magnitud de ste efecto
vara con el momento, la extensin y la intensidad del estrs.
La deficiencia de nutrientes, la humedad u otras condiciones de estrs en general
alargan la duracin de las etapas vegetativas y acortan la duracin de las etapas
reproductivas.
27
GM IV al IX
GM IV al IX
GM IV al VIII
GM III al VII
GM III al V
GM II al IV
GM I al III
29
R: Nr . Ng . Pg
Dnde:
RENDIMIENTO
PESO DE GRANOS
N DE GRANOS
Nudos/m2
Plantas
/ m2
Nudos/
Planta
Granos/Nudo
Granos
/Vaina
Tasa
Duracin
Vainas/
Nudo
Los componentes del rendimiento pueden ser modificados por el genotipo, el ambiente
y el manejo.
El grado de sensibilidad de cada componente a los factores ambientales vara con el
estado de desarrollo del cultivo. La soja tiene la capacidad de compensar (dentro de
ciertos lmites) reducciones en un componente del rendimiento debidas a factores de
estrs.
El componente ms asociado con variaciones en el rendimiento es el nmero de
semillas por unidad de rea de suelo. Hay que tener en cuenta que no todo los perodos
son igualmente importantes en la determinacin del nmero final de semillas, existen
etapas ms crticas que otras. Por lo tanto, es de suma importancia determinar qu
etapas del ciclo deben estar sometidas a las mejores condiciones ambientales y de
prcticas de manejo para que haya una ptima disponibilidad de recursos y una buena
capacidad de las plantas para capturarlos y utilizarlos. Las estructuras responsables de
que haya ms o menos nmero de semillas por unidad de superficie se generan desde
emergencia hasta mediados del estado R5. El nmero de semillas por m2 es funcin de
la fotosntesis o la tasa de crecimiento del cultivo entre R2 y R5, siendo particularmente
importante el perodo entre R4 y R5. A medida que disminuye la tasa de crecimiento del
cultivo entre R2 y R5, es menor el nmero de destinos reproductivos fijados. El nmero
de semillas por unidad de rea de suelo queda determinado durante el perodo R2-R5 y
su disminucin slo puede ser compensada parcialmente por el aumento de peso
unitario de las semillas.
Se debe tener en cuenta que es normal que el aborto de estructuras que podran dar
semillas, supere el 40-60% de las flores generadas. Es importante determinar si la
31
33
Densidad de siembra
La soja es un cultivo que posee gran plasticidad a la densidad de siembra ya que posee
una gran capacidad de compensacin a travs del nmero de ramas y frutos por planta.
La densidad de plantas ptima es aquella que: permite un buen crecimiento evitando el
vuelco, reduce la incidencia de enfermedades y asegura una adecuada insercin de las
vainas inferiores para facilitar la cosecha y evitar prdidas.
La densidad ptima de plantas depende de la fecha se siembra, latitud, condiciones
ambientales, caractersticas del cultivar y del espaciamiento entre surcos.
En siembras tardas o muy tempranas conviene aumentar las densidades de siembra. A
mayor latitud, las densidades de siembra tienden a ser mayores, reduciendo el espacio
entre surcos, como se ha descrito en el punto anterior, y de sta manera lograr una
rpida cobertura e incrementar la eficiencia de uso de la radiacin.
Cuando el ambiente posiblemente limite el crecimiento del cultivo, es conveniente
incrementar la densidad de siembra para lograr una mejor cobertura.
Existen casos en los que se reduce la densidad de siembra para disminuir la incidencia
de enfermedades como Sclerotinia sclerotiorum.
Generalmente se recomienda aumentar la densidad de siembra a menor longitud de ciclo
y para un mismo cultivar a medida que se modifica la fecha de siembra con respecto al
mes de noviembre.
Requerimientos nutricionales
La demanda de nutrientes vara proporcionalmente con los niveles de produccin
logrados y el ndice de cosecha nutricional.
A continuacin se describir los requerimientos de los nutrientes ms importantes:
Nitrgeno:
La demanda de nitrgeno es alta, llegando a 80 Kg./Tn de grano. Es el elemento
limitante en los cultivos de alta produccin.
Las deficiencias de ste nutriente se evidencian por reducciones en el crecimiento y
amarillamiento de las plantas. La aparicin de los primeros sntomas se da en las hojas
inferiores de las plantas.
Como ya se ha nombrado, la soja obtiene ste nutriente de dos modos diferentes:
absorcin desde el suelo y por fijacin biolgica de nitrgeno.
Ms adelante se describir con detenimiento la importancia del nitrgeno en el cultivo
de soja.
Fsforo:
El fsforo es el segundo elemento en importancia, considerndose el segundo limitante
para la produccin. La demanda del cultivo es de 8 Kg./Tn de grano. Este nutriente es
de suma importancia para la nodulacin y la FBN.
Los requerimientos de P son mximos a los 30 das de la emergencia de las plntulas. El
diagnstico y las correcciones de P deben realizarse al momento de la siembra o con
anterioridad. Para realizar el diagnstico de P, se recomienda calcular el contenido de P
extractable en los primeros 20 cm. de suelo mediante el mtodo de Bray y Kurtz I.
Dada la escasa movilidad del P, es recomendable la aplicacin de la fertilizacin
fosfatada en un lugar cercano a las races, para que las mismas puedan alcanzarlos
34
35
36
Cuando se produjo la expansin del cultivo de soja, en la dcada del 70, en nuestros
suelos no existan las bacterias B. japonicum y B. elkanii, por lo que se consider
necesario introducirlas al suelo mediante la incorporacin de las mismas a las semillas a
sembrar, es decir inoculando las semillas (Pacheco Basurco, 1983). En los comienzos,
la mayor parte de los productos inoculantes eran importados (EE.UU.).
Debido a la amplia difusin del cultivo y la repetida inoculacin anual, los rizobios se
han naturalizado en la mayora de los suelos sojeros. Por sta razn es posible observar,
al examinar las races de soja no inoculada, la presencia de ndulos en suelos donde se
implant un cultivo de soja sin inocular.
Para seleccionar una cepa de bacteria, aparte de la especificidad, se deben tener algunas
consideraciones bsicas como: capacidad de formar ndulos (infectividad), para fijar N
(efectividad), la sobrevivencia en las semillas y en el suelo, la adaptacin o tolerancia a
situaciones de estrs, la estabilidad gentica y la capacidad de crecimiento en las
condiciones de produccin.
El producto inoculante que es adicionado a la semilla debe ser capaz de dejar en el
exterior de la semilla, una carga bacteriana no menor a 80.000 rizobios por semilla. Las
bacterias sern encargadas de infectar las races de las plantas, alcanzar un desarrollo
especfico (bacteroide) en el interior de un ndulo para luego comenzar a fijar nitrgeno
derivado del aire del suelo. Ms adelante se desarrollar con mayor detenimiento el
tema de inoculantes.
Los estudios comienzan en laboratorio, donde se evala la capacidad de nodulacin.
Con las cepas preseleccionadas, se inician estudios de invernculo a fin de determinar la
capacidad de nodulacin y de FBN. Finalmente, se realizan ensayos en condiciones de
campo en diferentes reas cultivadas con soja.
Infeccin y formacin del ndulo
La simbiosis de la soja con los rizobios no es cclica, ya que las bacterias no se
encuentran dentro de las semillas. Para que se de las simbiosis las semillas se debe
producir la infeccin. Cuando dos miembros de una simbiosis entran en contacto se da
el reconocimiento.
La comunicacin entre los simbiontes comienza con la liberacin de metabolitos
secundarios contenidos en exudados de semilla y de la raz de la leguminosa (soja). Los
compuestos liberados son de naturaleza flavonoides como la naringenina, genitena y
daidzena, cidos aldlicos y betana. Las sustancias secretadas hacen que los rizobios
sean atrados qumicamente hacia la regin apical de los pelos radicales. Estos
flavonoides son considerados la primera molcula seal.
Al momento que los rizobios reconocen la seal enviada por la planta, mediante los
metabolitos secundarios, se inicia la transcripcin (proceso mediante el cual un gen o
genes codificados en el ADN se copian a ARN mensajero) de los genes de nodulacin
denominados genes nod. El proceso de transcripcin de los genes nod de la bacteria,
involucra a una protena de origen bacteriano llamada NodD. Cuando entra en contacto
con los flavonoides secretados por la planta, los genes nod de la bacteria modifican su
conformacin permitiendo que la enzima encargada de llevar a cabo la transcripcin de
los genes nod (ARN polimerasa) realice su funcin. La traduccin de los genes nod
(proceso mediante el cual los ARN mensajeros son traducidos a protenas), da como
resultado la produccin de un conjunto de enzimas encargadas de la sntesis y secrecin
de los denominados factores de nodulacin (factores Nod).
Los factores Nod secretados a la rizsfera por los rizobios son reconocidos por la planta
husped. Las concentraciones necesarias de los factores Nod para poder producir las
37
respuestas en los pelos radicales de la planta van de 10-6 a 10-15 M. Esta concentracin
vara en funcin de la respuesta inducida y de la interaccin rizobio-leguminosa. Las
plantas poseen receptores tipos cinasas para los factores Nod. Los receptores cinasas
tienen una regin transmembranal y una regin citoplasmtica, sta ltima con actividad
especfica de cinasa con capacidad de transferir un grupo fosfato.
Al ser reconocidos se suceden una serie de cambios morfolgicos y fisiolgicos en los
pelos radicales de la planta. Dentro de las respuestas inducidas por los factores Nod
encontramos cambios en los niveles del influjo y eflujo de iones calcio, cloro, potasio y
protones y cambios en el pH intracelular que se convierte ms alcalino. Estas
modificaciones en los niveles inicos de la clula son los responsables de inducir la
despolarizacin de la membrana de los pelos radicales. Debido a la despolarizacin de
las membranas se activan canales de calcio, lo que hace oscilar la concentracin de ste
in a nivel citoplasmtico y en la regin perinuclear. Los cambios de concentracin de
calcio son oscilatorios y son claves para disparar cascadas de sealizacin. Debido a la
cascada de seales, se activan las protenas sensibles a este in y capaces de fragmentar
y reorganizar el citoesqueleto y se activan cinasas que fosforilan protenas de una
familia de factores transcripcionales llamadas protenas GRAS.
Aparte de los cambios ya descriptos, se producen modificaciones de los
microfilamentos de actina y de los microtbulos de las clulas de los pelos radicales.
Hay un incremento en la expresin de un gran nmero de genes de la planta, entre los
que se incluyen aquellos que codifican protenas llamadas nodulinas. Las nodulinas
estn involucradas en el desarrollo y funcionamiento del ndulo. Hay nodulinas
tempranas y tardas. Las nodulinas tempranas se expresan en las primeras etapas de la
interaccin simbitica, antes de la FBN. Las nodulinas tardas, como su nombre lo
indica, son aquellas trascritas en etapas ms tardas, una vez que se ha iniciado la FBN.
Los genes que codifican las nodulinas tempranas participan en la organognesis del
ndulo iniciando con la formacin de primordios.
El primordio es el resultado de la divisin continua de las clulas del crtex, dando
lugar a la formacin de un grupo de clulas a las cuales se les ha llamado primordio de
ndulo. Todas estas respuestas enumeradas ocurren en ausencia del rizobio.
Para que la bacteria se adentre en el pelo radical y llegue al crtex de la raz se requiere
de la formacin de una nueva estructura conocida como hilo de infeccin. La formacin
del camino de infeccin est dirigida por la planta por la deformacin del
citoesqueleto que induce una invaginacin en la vacuola generando los llamados puntes
citoplasmticos. El hilo se forma mediante el estmulo continuo del rizobio y los
factores Nod que se producen. El hilo de infeccin es una estructura tubular que se
forma con material de la pared del pelo radical previniendo de esta manera el contacto
directo entre el citoplasma de la clula vegetal y el rizobio. Los puntes citoplasmticos
permiten la comunicacin de una clula con otra y por all ir creciendo la bacteria. La
formacin del hilo de infeccin hace que las clulas de las races dejen de crecer de
forma polar (crecimiento hacia su parte apical). Previo a la formacin del hilo, el primer
efecto morfolgico producido por los factores Nod es un hinchamiento en la zona apical
del pelo. Por parte de la bacteria, se secretan glcidos cclicos, lipopolisacridos (LPS),
fundamentales para una correcta infeccin; succinoglucano y EPS, cruciales para la
iniciacin y posterior elongacin del canal de infeccin. La planta, a travs de los pelos
radicales y las clulas del crtex, libera hacia el canal de infeccin, arabinogalactanos y
protenas ricas en prolina como ENOD12 y glucoprotena matriz (MGP). Los
compuestos son almacenados en los espacios intercelulares de clulas no infectadas. La
MGP es una glucoprotenas constitutiva cuya expresin en el proceso de infeccin se ve
incrementada y cuya presencia es necesaria para el desarrollo del hilo de infeccin.
38
39
40
N2 + 8 H+ + 8 e- + 16 Mg-ATP
2 NH3 + H2 + 16 Mg-ADP + 16 Pi
43
siembra, y/o importantes tasas de mineralizacin durante el ciclo del cultivo, afectan al
establecimiento de la simbiosis ya que retardan el inicio de la nodulacin y/o inhiben el
funcionamiento del sistema fijador.
El fertilizante nitrogenado puede tener un efecto beneficioso o detrimental sobre la
FBN, dependiendo de la cantidad y del momento en que se aplique. En la soja, la
absorcin del NO3- ocurre antes de floracin, mientras que la fijacin simbitica se
inicia luego de la absorcin de nitratos y alcanza su pico de mxima fijacin durante el
llenado de las semillas. En ste caso, la aplicacin de nitrgeno al momento de la
siembra, estimula el desarrollo vegetativo y permite que la planta alcance una buena
interceptacin de la radiacin solar y una alta capacidad de produccin de asimilados
fotosintticos durante la fase reproductiva, que es indispensable para lograr una fijacin
eficiente de nitrgeno.
Fsforo
Falta de Oxgeno
La falta de oxgeno resulta una limitante importante tanto para la planta husped como
para la FBN. Esta limitante empeora en suelos pesados, produciendo efectos ms
severos y prolongados que en el caso de cultivos en suelitos arenosos. La falta de
oxgeno induce a la respiracin anaerbica (fermentacin), y por consecuencia a la
reduccin energtica, induciendo al cierre de estomas y posterior reduccin de la
fotosntesis.
Dficit Hdrico
El estrs hdrico determina una cada en la FBN, cuyo impacto sobre el rendimiento
depende de la intensidad y momento de ocurrencia. En casos extremos ste tipo de
estrs puede llegar a anular la FBN. Las siembras en condiciones secas provocan la
mortandad de bacterias y disminuyen la posibilidad de lograr una nodulacin apropiada.
La falta de agua en etapas tempranas, retrasa la aparicin de los ndulos y la falta de
agua en etapas reproductivas limita la FBN restringiendo el rendimiento. La simbiosis
es sensible a condiciones de anegamiento, ya que con slo 2-3 das de inundacin se
puede provocar una alta mortandad de ndulos.
Acidez del suelo
Valores bajos de pH afectan la infeccin, la nodulacin y la FBN. Los suelos cidos
pueden causar toxicidad de aluminio y manganeso y deficiencias de Ca, Mo y P.
Textura del suelo
Los suelos con textura extrema (arenosa o arcillosa) afectan la sobrevivencia de las
bacterias fijadoras. Las bacterias sobreviven mejor en suelos franco arenosos, franco
limosos o franco arcillo limosos.
La FBN en soja puede verse afectada en suelos arenosos de baja humedad en climas
clidos. Puede conseguirse una disminucin de la temperatura del suelo y aumento de la
nodulacin mediante riego o cubierta orgnica.
La mayor cantidad de ndulos y su ubicacin ms profunda en el perfil se da en suelos
sin laboreo o labranza mnima, no as en aquellos en los cuales se practica labranza
convencional.
Temperatura
El metabolismo de los ndulos aumenta con la temperatura. Cuando la temperatura
sobrepasa el ptimo se ve afectada la sobrevivencia de las bacterias en el inoculante y
en el suelo, la infeccin de los pelos radicales, la diferenciacin en la forma de
bacteroide, la nodulacin, la estructura de los ndulos y su funcionamiento y la fijacin
de nitrgeno.
Con temperaturas cercanas a 15C se retrasa el proceso de infeccin y la nodulacin.
Compatibilidad con plaguicidas
El tratamiento directo de la semilla con fungicidas u otros plaguicidas puede matar
muchas clulas de Bradyrhizobium del inoculante.
46
Los fungicidas compuestos por metales pesados como mercurio, zinc, cobre o plomo no
deben ser usados conjunto con inoculantes debido a su alta toxicidad. Algunos
plaguicidas como el Captan80 Carboxin, Ceresan, Cloranil y Tiran pueden disminuir la
nodulacin y la FBN. Para que esto no ocurra, se practica la inoculacin del suelo o la
siembra de semillas no tratadas, inviables e inoculadas, o utilizando partculas inertes de
peso y tamao similar al de las semillas de soja junto con las tratadas.
Los herbicidas generalmente son menos txicos que los fungicidas, aunque el cido
tricloroactico, Dalapon, Dinitramina y Nitralin reducen la supervivencia de las
bacterias y la nodulacin.
La mayora de los insecticidas organoclorados y algunos organofosforados tambin
afectan la nodulacin, en contraposicin a los nematicidas que no producen problemas
en la inoculacin.
Inoculantes
Un inoculante es un concentrado de bacterias especficas, que aplicado
convenientemente a la semilla poco antes de su sembrado.
El inoculante debe contener un nmero alto de bacterias viables especficas para la
leguminosa a ser cultivada. Los estndares mnimos de calidad de inoculantes varan
segn el pas.
Inoculantes con concentraciones de por lo menos mil millones de bacterias por gramo
de producto fresco. La produccin de los inoculantes se realiza por mtodos
industriales, resultando importante que el mismo no sea expuesto a temperaturas
mayores de 30-35C durante el transporte y manipuleo.
La bacteria debe ser especfica para la planta considerada para que se puedan formar
buenos ndulos que sean efectivos en la FBN.
Tipos de Inoculantes
Existen diferentes tipos de inoculantes, los cuales se pueden agrupar en las siguientes
categoras:
Inoculantes en polvo
Esta formulacin ha cado casi en completo desuso. Las bacterias tienen un bajo nivel
de sobrevivencia.
Semilla preinoculada
Aeracin
El aire, que entra desde un compresor (12) o desde una bomba electromagntica,
activa un medidor de flujo (13) y pasa primero a travs de un cartucho desecante
(14) y luego a travs de un prefiltro (15). Luego fluye a travs de un filtro de
esterilizacin autoclavado con el fermentador. El aire esterilizado (16) llega al
bulbo poroso (4) desde donde se difunde al medio.
El aire que sale del fermentador entra en un frasco de vaco donde burbujea en una
solucin antisptica (cloruro de mercurio al 1% o lquido blanqueador apenas
diluido).
2)
3)
Regulacin de temperatura
51
4)
Agitacin
52
54
Si hay un nmero suficiente de rizobios vivos en el paquete (mnimo 107 por gramo)
para asegurar por lo menos 1000 rizobios vivos en semillas pequeas y 105 106 en
semillas grandes.
Si la cepa de bacteria est adaptada al cultivar a inocular.
Mtodos de Inoculacin
La eleccin del mtodo de inoculacin apropiado, ya sea con soporte pulverulento o
lquido, es bsica para incorporar el nmero adecuado de bacterias por simiente y para
disminuir la mortandad de las mismas.
Es de suma importancia leer y respetar las condiciones de uso descriptas en el producto
inoculante a utilizar. Siempre se debe controlar la fecha de vencimiento, la inscripcin
en SENASA y el nmero de lote.
Se debe lograr que todas las semillas queden cubiertas con el inoculante, a fin de que
cada una de ellas disponga del nmero de rizobios adecuado.
Los mtodos de inoculacin son los siguientes:
Inoculantes en polvo
Aplicacin en suspensin (hmedo o en pasta):
Consiste en la mezcla del inoculante con 10 a 25% de una solucin de azcar
para producir una suspensin. La semilla se mezcla con la suspensin hasta
obtener un revestimiento homogneo, y luego se deja secar. Aunque la
inoculacin y la siembra se realizan el mismo da, cuando se deben sembrar
superficies extensas, la preinoculacin de las semillas con una suspensin de
azcar al 25% permite su almacenamiento por ms de cuatro das sin que
disminuya el nmero de clulas vivas por semilla y el nmero de ndulos por
planta. Con frecuencia se utilizan otros adherentes para reemplazar el azcar
como goma arbiga libre de fungicidas y bactericidas, metiletil celulosa y la
metilhidroxipropil celulosa. El uso de aceite combustible diesel, aceite mineral o
queroseno en lugar del agua ha dado resultados deficientes.
Aplicacin por aspersin (semihmedo o salpicado)
Las semillas son asperjadas inicialmente con agua azucarada y seguidamente
espolvoreadas con un inoculante seco. Como el agua es absorbida rpidamente
por la semilla, el inoculante termina por no adherirse bien. ste mtodo es
considerado un poco mejor que el seco, el cual se explicar a continuacin.
Aplicacin en seco o en polvo
Es el mtodo menos eficaz de todos. Consiste en mezclar el inoculante seco con
la semilla en la tolva sembradora. Slo una pequea porcin de inculo puede
adherirse a la cobertura de la semilla, pero la mayor parte permanece como
polvo libre y no ser distribuido uniformemente en la siembra.
Inoculantes lquidos
55
57
59
60
61
Las proteobacterias son uno de los principales grupos de bacterias patgenas de vida
libre, e incluyen muchas de las bacterias responsables de la FBN. Son Gram negativas,
con pared celular formada principalmente de lipopolisacridos. Muchas se mueven
utilizando flagelos. La mayora de las proteobacterias son anaerobias, pero hay algunas
excepciones. La nutricin es usualmente hetertrofa, pero existen algunos grupos que
pueden realizar fotosntesis. Las proteobacterias se clasifican en cinco grupos,
usualmente considerados clases, los cuales se diferencian por sus secuencias de ARNr.
Las clases se denominan segn las letras griegas que van desde alpha a psilon.
Segn lo expuesto en el cuadro anterior pasaremos a describir algunos rasgos de cada
una de las clases nombradas:
Alfaproteobacterias: abarcan la mayora de los gneros fottrofos, pero tambin varios
gneros que metabolizan componentes C1, simbiontes de plantas y de animales y un
grupo de patgenos peligrosos como Rickettsiaceae.
Betaprotobacterias: abarcan varios grupos de bacterias aerobias o facultativas que son
altamente verstiles en sus capacidades de degradacin. Tambin contienen gneros
quimiolitrficos y algunos fottrofos.
Gammaproteobacterias: abarcan varios grupos de bacterias importantes para la ciencia
y la medicina tales como Enterobacteriaceae, Vibrionaceae y Pseudomonadaceae. Este
grupo incluye patgenos importantes como Salmonella, Yersina, Vibrio, Pseudomonas
aeruginosa.
Las principales bacterias de vida libre que realizan FBN incluyen a Azotobacter,
Azospirillum y Beijerinckia. Como se ha descripto con anterioridad, las bacterias
fijadoras de nitrgeno de vida libre tienen una baja eficiencia en la fijacin de nitrgeno
(0,5 a 1 Kg N/ha/ao). En cambio cuando se asocian con plantas su capacidad fijadora
aumenta (hasta 30 Kg N/ha/ao).
La alfa proteobacteria Azospirillum brasilense es un microorganismo diazotrfico del
suelo capaz de colonizar la rizsfera de muchos cereales y gramneas econmicamente
importantes. Inicialmente, slo se consideraba el beneficio que aportaba a ciertas
gramneas inoculadas se deba nicamente a su capacidad de fijar nitrgeno
atmosfrico, luego de diversas experimentaciones se llega a la conclusin que el mayor
beneficio aportado a los cultivos es por la mayor captacin de nutrimentos minerales
presentes en el suelo como consecuencia de un incremento del sistema radical de las
plantas infectadas. El mecanismo que produce ste efecto es la liberacin de ciertas
fitohormonas por parte de la bacteria en cuestin, principalmente el AIA (cido indol-3actico).
Descripcin del Familia Azospirilliceae y la gnero Azospirillum
El Familia Azospirilliceae constituye un importante grupo de organismos aerobios que
se comportan como microaeroflicos, es decir que pueden vivir en un ambiente con baja
concentracin de oxgeno, cuando fijan nitrgeno.
Fueron descriptos por Beijerinck desde 1922, pero recibieron poca atencin hasta 1976,
cuando se aislaron en races de pasturas tropicales.
Son bacterias Gram negativas, con forma de vibrio o espirilo, de 1 micrn de dimetro,
con flagelos pertricos de corta longitud de onda, empleados para desplazarse en
superficies slidas o un flagelo polar para nadar.
62
Divisin: Magnoleophyta
Subdivisin: Angiospermae
Clase: Liliopsida
Subclase: Commelinidae
Orden: Poales
Suborden: Poaceae
Familia: Poaceae
Subfamilia: Panicoideae
Tribu: Andropogoneae
Gnero: Zea
Especie: Zea mays
El maz (Zea mays) es una especie perteneciente a la familia de las gramneas que no se
encuentra en estado silvestre. Segn Galinat (1988), el maz deriva del teosinte y fue
domesticado, cambiando su genotipo, en un periodo entre 7.000 y 10.000 aos atrs en
el sur de Mxico. A partir del descubrimiento de Amrica, el cultivo de maz fue
introducido en el viejo mundo, donde rpidamente se convirti en un factor clave de la
alimentacin humana y animal.
Posee una gran productividad, excelente palatabilidad y alto contenido nutricional. El
maz ha ido reemplazando a otros cereales en la alimentacin animal. Este cultivo tiene
una gran cantidad de usos industriales como la produccin de almidn, edulcorantes,
alcohol, jarabes, acetona, aceites, etc.
El maz es el tercer cultivo en importancia en el mundo, despus del trigo y del arroz en
cuanto a volumen de produccin.
La planta de maz es muy eficiente en cuanto a produccin de biomasa. De una semilla
que pesa alrededor de 300 mg se obtiene, en un lapso de 2,5 meses, una planta de ms
63
DAS*
5
9
12
R0
57
Caractersticas de importancia
El coleoptilo emerge de la superficie del suelo.
Es visible el cuello de la primera hoja.
Es visible el cuello de la segunda hoja.
Es visible el cuello de la hoja nmero n (n es el nmero definitivo
de hojas que tiene la planta, generalmente flucta entre 16 y 22, pero
para la floracin se habrn perdido las 4 a 5 hojas de ms abajo)
Antesis o floracin masculina. El polen se comienza a liberar.
64
R1
R2
59
71
65
V3: Los pelos radicales estn creciendo de las races nodales y el crecimiento del
sistema radicular seminal ha cesado su crecimiento (Figura N 24 y N 25). Todas las
hojas y primordios de mazorcas que la planta producir eventualmente se han iniciado.
Alrededor de V5, la iniciacin del primordio de la mazorca se completa y una
inflorescencia pequea se inicia en el pice del tallo. La iniciacin de la punta del pice
del tallo est justo arriba de la superficie del suelo.
Figura N 24: Planta de maz en estado V3.
V9: Las mazorcas potenciales son visibles con la diseccin de la planta (Figura N 27).
Se desarrolla una mazorca en cada uno de los nudos que se encuentran por encima de la
superficie del suelo, excepto en los ltimos seis a ocho nudos debajo de la panoja. Slo
66
V18: Los vulos de los pelos de la mazorca comienzan a diferenciarse desde la base de
la mazorca hacia arriba (Figura N 31 y N 32). Las races de anclaje comienzan a
crecer de los nudos que se encuentran sobre la superficie del suelo. stas ayudan al
anclaje de la planta y a soportar el peso de la mazorca. Las races nodales nutren a la
planta durante los estadios reproductivos.
68
R2: Los granos presentan una coloracin blanca por fuera y tienen forma de ampolla
(Figura N 36). El endosperma contiene abundante fluido interno de color claro y un
69
70
Crecimiento
La semilla y el embrin
El grano de maz maduro est compuesto por tres partes principales:
La cubierta de la semilla o pericarpio
El endosperma amilceo
El embrin.
Cada una de las tres partes del grano cumple una funcin definida. El pericarpio protege
la semilla, tanto antes como despus de la siembra, limitando o impidiendo la entrada de
hongos o bacterias que podran invadir el grano. Si el pericarpio resulta daado, puede
ocurrir que la germinacin se retrase debido a que organismos patgenos invadan el
interior de la semilla.
El endosperma es la principal reserva de energa del grano. ste ocupa el 80% del
volumen del grano. Est compuesto por: 90% de almidn, 7% de protenas y pequeas
cantidades de aceites, minerales y otros qumicos. Su funcin principal es proporcionar
energa a la planta joven hasta que sus races estn bien afianzadas y sus hojas puedas
realizar fotosntesis en cantidad suficiente para satisfacer los requerimientos de la
plntula.
El embrin est formado por dos partes principales: el eje embrionario y el escutelo
(cotiledn). En el grano maduro, el eje embrionario se convierte en plmula (parte
foliar), un esbozo de 5 a 6 hojas y una radcula.
La germinacin
El grano de maz se debe sembrar en suelo hmedo y clido. Cuando la semilla se pone
en contacto con la humedad, absorbe agua a travs de su cubierta y el grano comienza a
hincharse. Los cambios qumicos activan el crecimiento en el eje embrionario, la
radcula se alarga y sale de la cubierta en dos o tres das. Poco despus, la plmula
comienza a alargarse y se inicia la formacin de nuevas hojas dentro de la plntula.
Luego de la aparicin de la primera raz, comienzan a aparecer otras races ms
pequeas llamadas seminales, que sirven para afirmar la plntula y absorber agua y
sustancias nutritivas. Estas races no son permanentes, sino que son reemplazadas por
las races definitivas dando origen la corona de la planta.
Entre el punto de insercin de la semilla y la corona aparece un trozo tubular, de color
blanco, semejante a un tallo llamado mesoctilo. Para que se forme la plntula, es de
suma importancia que el mesoctilo se alargue. Cuando se siembra a una profundidad
de 5 a 8 centmetros, el mesoctilo se alarga hasta llegar ms o menos a la mitad de la
distancia que lo separa de la superficie. El alargamiento del coleptilo cubre la distancia
restante y hace que las partes foliares salgan de la tierra.
El coleptilo es firme y puntiagudo y puede abrirse camino a travs del suelo. Cuando
ste se rompe a mayor profundidad de 3 cm. desde la superficie del suelo, la hoja
expuesta es muy ancha y sin rigidez, lo que impide que la plntula aparezca por sobre la
superficie del suelo, provocando la muerte de la misma.
La Emergencia
El coleptilo brota entre seis y ocho das despus de la siembra. A penas inciden rayos
de sol sobre el coleptilo, el mismo se rompe y se despliegan dos hojas verdaderas.
71
panoja. Al igual que para el meristema apical, una vez que la yema axilar es inducida a
diferenciar rganos florales, cesa la diferenciacin de estructuras vegetativas (en este
caso las chalas), comenzando la formacin de espiguillas con flores pistiladas. La
diferenciacin reproductiva de las yemas axilares contina en sentido baspeto pudiendo
haber simultneamente hasta siete yemas en estado de diferenciacin floral. Las yemas
correspondientes a las cuatro a cinco hojas basales, cuyos entrenudos nunca se elongan,
permanecen en estado vegetativo y pueden dar lugar a ramificaciones (macollos), segn
el genotipo, el ambiente y la densidad de siembra. Las hojas ubicadas por encima de la
correspondiente a la espiga superior, no presentan yemas axilares visibles.
Dentro de cada yema axilar que ha entrado en fase reproductiva, queda determinado
tempranamente el nmero de hileras de espiguillas de la futura espiga, mientras que la
diferenciacin de espiguillas procede acrpetamente sobre cada hilera.
La diferenciacin de espiguillas sobre hileras contina hasta una o dos semanas antes de
la aparicin de los estigmas, fuera de la envoltura de las chalas. La finalizacin de la
diferenciacin se manifiesta por un cambio en el aspecto del domo apical. Esto suele
coincidir con el comienzo de la elongacin de los estigmas de las espiguillas del tercio
inferior de la espiga. En ese momento queda determinado el total de espiguillas
diferenciadas, y con ello el nmero potencial de granos que puede tener la planta.
La elongacin de los entrenudos contina hasta la aparicin de los estigmas. Alrededor
del momento de floracin tambin queda determinado el ndice de rea foliar mximo y
la altura mxima de las plantas. El orden de elongacin de los entrenudos se elongan
simultneamente. A temperatura constante, la duracin del perodo de elongacin de
cada entrenudo aumenta acrpetamente hasta el entrenudo correspondiente a la espiga,
resultando cada entrenudo ms largo que su inmediato anterior, excepto el entrenudo de
la espiga. Este ltimo presenta el mayor perodo de elongacin pero ms corto que los
dos adyacentes al mismo. La longitud de los entrenudos comienza a disminuir
nuevamente a partir del inmediato superior a la espiga, aunque la mxima longitud le
corresponde al pednculo de la panoja.
El panojamiento
El panojamiento consiste en la emergencia de la panoja (inflorescencia masculina), a
travs del cogollo formado por las hojas superiores, y se completa al expandirse la
ltima hoja.
Cuando surge la panoja, y puede verse el pice del vstago correspondiente a la espiga,
comienza a disminuir la velocidad de crecimiento de la planta y se inician las etapas
finales de preparacin para la floracin. Aproximadamente una semana antes de la
liberacin del polen, todos los entrenudos, excepto dos o tres superiores, ya tienen su
largo total y la planta ha alcanzado su altura definitiva.
Luego de la emergencia total de la panoja ocurre la antesis, que se define como la
aparicin de las anteras de las flores en las espiguillas de la panoja y el comienzo de la
liberacin del polen. Este fenmeno no progresa en sentido baspeto: comienza en el eje
principal y finaliza en las ramificaciones basales de la panoja. Esta maduracin
progresiva del desarrollo floral de la panoja resulta en un perodo de varios das de
liberacin de polen, a pesar de que cada flor individual libera polen, generalmente, slo
por un da. La liberacin de polen ocurre exclusivamente durante las horas de luz, con
un mximo entre las 9 y las 11de la maana, para descender rpidamente hasta finalizar
por completo a la puesta del sol.
73
La floracin de la espiga
La espiga diminuta empieza a formarse al costado del punto de crecimiento, apenas una
semana a diez das despus de iniciada la panoja. La floracin femenina consiste en la
emergencia de los estigmas fuera de la envoltura de las chalas. Los estigmas de las
flores que son fecundadas cesan su crecimiento inmediatamente, mientras que los de las
no fecundadas continan creciendo hasta 15 das despus de su aparicin. La
receptividad de los estigmas decae marcadamente a partir de los siete das de su
aparicin, tornndose nula a los 14 das de su emergencia. Los estigmas de las flores no
fecundadas se diferencian de aquellos cuya base ha sido atravesada por el tubo polnico,
porque no se desprenden del ovario aunque muestren sntomas de senescencia. La
emergencia de los estigmas es tambin un proceso progresivo. Los estigmas de una
espiga toman de cuatro a ocho das en emerger, en una secuencia que sigue al patrn
general de diferenciacin y desarrollo de la inflorescencia. En consecuencia, el perodo
de emisin de polen y de aparicin de estigmas en el cultivo se extiende por varios das.
Polinizacin
La polinizacin ocurre cuando el polen de las flores estaminadas de la panoja se adhiere
a los estigmas de las flores pistiladas de la espiga. Dado que tanto la liberacin de polen
como la receptividad de los estigmas son limitadas, cuanto mayor sea la sincrona floral
en el desarrollo de la panoja y la espiga, mayor ser la posibilidad de fecundacin en
condiciones de campo. Si no existen restricciones ambientales, la aparicin de estigmas
ocurre en general poco despus del comienzo de la antesis (uno o dos das despus),
aunque en algunos genotipos el proceso puede invertirse.
Las situaciones de estrs, como sequa, baja irradiacin, deficiencias minerales y alta
densidad, pueden postergar ligeramente la liberacin de polen, pero provocan un
importante retraso de la floracin femenina afectando el nmero final de granos por
espiga.
Fecundacin y formacin de los granos
La unin del ncleo espermtico masculino, proveniente del tubo polnico, con el huevo
femenino y los ncleos polares pone en marcha la formacin del grano embrionario de
maz. Dicha unin se llama fecundacin y tiene lugar en cada una de las estructuras
femeninas.
Debido a sta fecundacin se forman dos partes del grano en formacin: el embrin y el
endosperma amilceo.
El nmero de ovarios fecundados en un cultivo queda determinado al finalizar la
liberacin de polen. El nmero de granos por planta puede disminuir durante el perodo
de cuaje segn la temperatura ambiente, ya que el periodo de cuaje puede extenderse
entre 10 y 20 das despus de la floracin. El nmero de granos por planta, que es el
principal determinante del rendimiento, queda establecido en este momento.
Durante los primeros das posteriores a la fecundacin se producen cambios visibles en
la espiga. Los estilos se marchitan y toman un color castao. A la semana, aparecen
sobre las mazorcas unas vejigas acuosas, que son los granos en formacin. Luego, los
granos crecen rpidamente, el embrin toma forma.
Si bien cada planta pudo haber llegado a diferenciar espiguillas en seis o siete yemas
axilares, slo una a dos espigas por planta dar granos. El nmero de espigas por planta
depende del genotipo y el ambiente.
74
Llenado de granos
El periodo de llenado de granos transcurre desde el momento de la fecundacin hasta la
formacin de una capa de abscisin en la base de los mismos, denominada capa
negra. La capa negra es la necrosis de los haces vasculares que conectan al grano con
los tejidos maternos. El periodo de llenado de grano presenta tres fases diferentes segn
su tasa de acumulacin de materia seca. Las fases son las siguientes:
Primera fase: coincide con el periodo de cuaje de los granos y presenta una muy baja
tasa de llenado. En sta etapa tiene lugar una activa divisin celular, que da lugar a la
formacin de las clulas endospermticas.
Segunda fase: recibe el nombre de llenado efectivo de granos o fase de crecimiento
lineal. Durante sta etapa se realiza la mxima tasa de llenado y suele representar ms
de la mitad del perodo total de llenado. Los granos se llenan de una sustancia lechosa,
casi fluida, con gran cantidad de azcares que contienen cuerpos formadores de almidn
y protenas. Estas sustancias van sufriendo cambios: los azcares desaparecen y son
reemplazados primero por dextrinas gomosas y luego a almidn ms seco. El primer
lugar de depsito del almidn seco es en la parte superior del grano o corona.
Etapa final: es una etapa de crecimiento no lineal. Tiene una duracin de una a dos
semanas. La tasa de llenado declina progresivamente hasta hacerse nula, completndose
el crecimiento del grano alcanzando la madurez fisiolgica.
A medida que pasa el tiempo de maduracin, se puede observar a travs del grano, una
banda definida que separa la zona amilcea en maduracin de la regin lechosa inferior
donde se continan depositando sustancias de reserva. Aumenta la materia seca y
disminuye el porcentaje de humedad.
Al alcanzar la madurez fisiolgica queda determinado el peso final del grano y por lo
tanto el rendimiento en grano del cultivo.
El grano slo alanza el peso seco mximo cuando la humedad llega a un nivel inferior a
28 - 35%. A partir de este momento, la maduracin de la espiga y del grano se da
solamente por la prdida de humedad. Si no se dispone de un buen sistema de secado y
almacenamiento, el grano no est listo para la cosecha, desde el punto de vista
biolgico, no ha completado su maduracin. Con ste contenido de humedad todava se
puede generar un proceso de descomposicin y debe secarse mucho ms, para poder
almacenarlo fuera de riesgo. Los granos se secan al 13% de humedad para evitar el
deterioro microbiano, especialmente el de origen fngico, potencialmente generador de
micotoxinas. En los granos de maz hay alta incidencia de aflatoxinas (toxinas
generadas por la hongo Aspergillus flavus, nomius, parasiticus, etc.). A partir del 15%
de humedad existe el peligro de crecimiento fngico.
La velocidad de prdida de humedad luego de la madurez fisiolgica depende ms de
las condiciones climticas que de cualquier otro factor.
El grano se seca desde la corona hacia abajo, de manera que la parte prxima a la
mazorca es la ms hmeda durante la mayor parte del perodo de secado. Por lo tanto, el
porcentaje de humedad tiende a ser mayor en la espiga completa que en el grano.
El periodo de maduracin no es un perodo crucial para el rendimiento final, aunque
desde el punto de vista prctico el maz no est seguro hasta luego de su cosecha.
Factores que controlan el crecimiento
La duracin de cada una de las etapas de desarrollo puede sufrir una gran variabilidad
debido a distintos factores. El desarrollo del maz est influido por el genotipo,
temperatura y fotoperodo. Las restricciones en la provisin de recursos edafoclimticos
75
78
80
Requerimiento ndice de
Extraccin
(Kg/Ton)
Cosecha
(Kg/Ton)
Nitrgeno
22
0.66
14.5
Fsforo
4
0.75
3.0
Potasio
19
0.21
4.0
Calcio
3
0.07
0.2
Magnesio
3
0.28
0.8
Azufre
4
0.45
1.8
Gr/Ton
Gr/Ton
Boro
20
0.25
5
Cloro
444
0.06
27
Cobre
13
0.29
4
Hierro
125
0.36
45
Manganeso 189
0.17
32
Molibdeno
1
0.63
1
Zinc
53
0.50
27
Tabla N 14: Requerimientos y extraccin de nutrientes para la produccin de una
tonelada de maz (en grano).
Nutriente
Nitrgeno
El nitrgeno es el nutriente ms deficiente para la produccin de maz. El N influye en
el rendimiento y tambin en la calidad, ya que de l depende el contenido en protenas
del grano.
La absorcin del N tiene lugar, especialmente, en las cinco semanas que transcurren
desde diez das antes de la floracin hasta veinticinco o treinta das despus de ella.
Durante estas 5 semanas la planta extrae el 75% de sus necesidades totales. La demanda
de nitrgeno aumenta marcadamente a partir del estado de 5-6 hojas desarrolladas.
La cantidad de nitrgeno a aplicar depende de las necesidades de produccin que se
deseen alcanzar as como el tipo de textura del suelo. La cantidad aplicada va desde 20 a
30 Kg de N por ha.
Cuando la planta padece deficiencias de N, disminuye el vigor y las hojas se tornan
pequeas, las puntas de las hojas toman color amarillo, que poco a poco se va
extendiendo a lo largo de la nervadura central, dando lugar a una especie de dibujo en
forma de V. La deficiencia de nitrgeno no es fcil de detectar en las etapas tempranas
de crecimiento y los sntomas severos para vez aparecen antes que la planta haya
llegado a la altura de la rodilla.
Al acentuarse la carencia de N, la hoja entera amarillea, y paulatinamente van
ponindose amarillas las hojas por encima de la primera. Las mazorcas procedentes de
plantas que han sufrido falta de nitrgeno tienen las puntas vacas de grano.
Fsforo
Como se ha descripto en el cuadro anterior, el cultivo de maz requiere de 4 Kg de
fsforo para poder producir una tonelada de grano. El fsforo es absorbido,
mayormente, en las primeras etapas del ciclo del maz. Por ste motivo, ante un faltante
del nutriente, se recomienda la fertilizacin a la siembra. Para que sea interceptado
fcilmente por las semillas, se recomienda la fertilizacin en bandas al costado y por
debajo de la semilla.
81
82
El maz requiere alrededor de 20 -25 kg/ha de nitrgeno (N) por cada tonelada de grano
producida. La oferta de nitrgeno para cubrir las necesidades nitrogenadas proviene de
varios componentes:
Nitrgeno de nitratos disponible a la siembra (N-NO3- disponibles de 0-60 cm).
Nitrgeno mineralizado de la materia orgnica: la cantidad de nitrgeno mineralizado
durante el ciclo del cultivo vara segn temperatura, humedad y tipo de suelo. A modo
orientativo, se puede considerar alrededor del 2.5% del Nt (nitrgeno total del suelo)
determinado en el estrato de 0-30 cm.
Nitrgeno del fertilizante: en el caso de que el nitrgeno inicial medido por anlisis de
suelos a la siembra (nitratos) y el nitrgeno mineralizado desde la materia orgnica
humificada sean inferiores al requerido por el cultivo se deber fertilizar la diferencia
para mantener el balance en equilibrio (oferta de nitrgeno=demanda de nitrgeno).
En el caso de ser necesaria la fertilizacin, la cantidad de fertilizante a utilizar, calculada
a partir de un procedimiento denominado criterio de balance, deber ser ajustada por
la eficiencia de fertilizacin. La magnitud de la eficiencia, depende del tipo de
fertilizante y del manejo del mismo (fuente, tecnologa de aplicacin, momento de
fertilizacin, etc.) El manejo del fertilizante debera contemplar qu perdidas de
nitrgeno se pueden presentar y disear la estrategia de fertilizacin que minimice la
incidencia global de las mismas. Las prdidas de nitrgeno que deben ser consideradas
para estimar la dosis de fertilizante a agregar se caracterizan brevemente a continuacin:
Volatilizacin de amonaco: Esta prdida se genera en aplicaciones de urea o
fertilizantes que contienen urea en su composicin o aplicaciones de fertilizantes
amoniacales en suelos con pH elevados. Cuando la urea se hidroliza en el suelo, se
incrementa el pH alrededor de los grnulos del fertilizante alcanzando pH de 8.5
desplazando el equilibrio del amonio hacia el amonaco, que se pierde como gas. La
enzima que cataliza la hidrlisis de la urea en el suelo es la ureasa. La concentracin de
esta enzima es muy superior en los rastrojos que en suelo. Por ello, la aplicacin de urea
sobre residuos incrementara la tasa de prdida de nitrgeno por esta va, siempre que el
ambiente sea predisponente. Los otros factores que predisponen la prdida por
volatilizacin son la temperatura (mayores a 15-18 C), dosis de nitrgeno, vientos, pH
del suelo, etc. Una vez incorporado el fertilizante (ya sea por un implemento agrcola o
por las lluvias y/o riego) la magnitud de la prdida se reduce significativamente. En
aplicaciones de fertilizantes en V6 hay que tener en cuenta las condiciones ambientales
mencionadas para decidir la fuente de fertilizante a utilizar y/o la dosis de nutriente a
aplicar.
Lixiviacin de nitratos: Esta prdida es el lavado de nitratos por el agua de percolacin
del suelo por debajo de la zona de aprovechamiento de las races. Para que se genere la
misma es necesario un flujo vertical de agua en el perfil del suelo saturado provocado
por lluvias intensas o el riego. Esta prdida resulta ms importantes en suelos arenosos
por la mayor movilidad vertical de los nitratos. Teniendo en cuenta que estamos frente a
un ciclo climtico hmedo, los pronsticos meteorolgicos de corto plazo a nivel local
deberan considerarse en las decisiones de fertilizacin a campo. Existen varios factores
que inciden en forma integral en la magnitud de las prdidas de nitrgeno por
lixiviacin de nitratos: tipo de suelo (textura, permeabilidad, etc.), cobertura de residuos
o de cultivos; disponibilidad de nitratos en el suelo; intensidad de la lluvia y/o riego;
etc. En trminos generales, un excedente o balance positivo de agua en el sistema sueloplanta determina una salida neta de nitratos fuera del sistema suelo-planta. La estrategia
de manejo del fertilizante debera procurar aplicar el nitrgeno escapando a los eventos
de lluvias intensas o en etapas en donde el cultivo comienza a consumir agua y
83
nutrientes en forma ms intensa. En el caso del maz, a partir de V6-7 comienza una
etapa de crecimiento activo y por ende esta etapa fenolgica resultara un buen
momento para agregar nitrgeno. En aplicaciones a la siembra o de pos-emergencia, de
presentarse eventos de lluvias intensas (comunes en esta poca) podran reducir el
aprovechamiento del nitrgeno fertilizado. En el caso de sistemas bajo riego, la lmina
de agua aplicada no debera superar la demanda real de evapotranspiracin del cultivo
para evitar la migracin de los nitratos fuera de la zona de aprovechamiento radical del
cultivo.
Desnitrificacin: Este proceso es poco relevante en maz. Se presenta en condiciones
de excesos hdricos prolongados en el suelo que generan anaerobiosis que promueven la
reduccin de los nitratos a xidos de nitrgeno y en casos extremos a nitrgeno
molecular (N2). La desnitrificacin es mediada por una serie de bacterias del suelo del
gnero Bacillus sp. y Pseudomonas sp. Las bacterias toman las molculas de nitratos
como aceptores de electrones para su propia respiracin reemplazando al oxgeno.
Situaciones de anegamiento generan condiciones de dficit de oxgeno, promoviendo
entre otros procesos, la actividad bacteriana de desnitrificacin. La reaccin qumica
involucrada es:
NO3-
NO2-
NO
N2O (gas)
N2 (gas)
Los factores que inciden directamente en las cantidades de N perdidas por ste proceso
son:
Disponibilidad de nitratos: a mayor contenido de nitratos en el suelo, la
magnitud de la prdida aumenta. Suelos de mayor fertilidad o fertilizados
previamente a la existencia de condiciones predisponentes promueven el proceso.
Contenido hdrico del suelo: es el principal factor influyente ya que regula las
condiciones de xido-reduccin en el suelo. Con elevados contenidos hdricos
mayores al 70-80% del agua til durante perodos prolongados son predisponentes
a la ocurrencia de desnitrificacin.
Contenido de materia orgnica: est relacionado a la poblacin bacteriana del
suelo, y el contenido de sustrato que provee a las bacterias de la energa
(compuestos de carbono) para su supervivencia. La mayor fertilidad por contenido
de materia orgnica es una condicin predisponente.
Temperatura: todo proceso biolgico est promovido por la temperatura. Son
esperables mayores prdidas en primavera-verano que en otoo invierno.
Textura del suelo: suelos arcillosos poseen mayores prdidas desnitrificacin
que los arenosos, ya que en los primeros, tanto la actividad biolgica como la
fertilidad qumica del suelo suelen ser mayor. En general, suelos ms arcillosos
poseen mayores niveles de materia orgnica y por ende mayor actividad
microbiana (ms sustratos carbonados)
pH: una reaccin del suelo neutra o ligeramente alcalina, promueven la
desnitrificacin por el efecto sobre la actividad biolgica bacteriana del suelo.
El nitrgeno es un nutriente indispensable a considerar en el manejo de nutricin del
cultivo de maz. El anlisis del balance de nitrgeno en el sistema suelo-planta es el
criterio conceptual a tener una primera aproximacin a las necesidades de fertilizacin
nitrogenada del cultivo. De los componentes de este esquema de diagnstico de la
fertilizacin, el nitrgeno mineralizado y la magnitud de las prdidas de nitrgeno son
84
85
Crea una barrera protectora contra hongos y bacterias patgenas en la raz de la planta
Producen enzimas que solubilizan los fosfatos y los hacen ms accesibles a la planta,
de este precursor para la biosntesis del AIA y que se denominada va independiente del
Trp.
Existe un patrn de biosntesis de AIA carcterstico de la interaccin plantamicroorganismo que depende especficamente de rol ecofisiolgico de la especie
bacteriana que interacta. En el caso particular de Azospirillum sp., sintetiza AIA de
manera inducible a travs de la va del IPA.
La magnitud de expresin de cada va depende fundamentalmente de las condiciones de
crecimiento bacteriano. La sntesis depende de la disponibilidad del Trp en el sustrato.
Si el aminocido Trp se encuentra disponible, la va predominante es la del cido indol3-piruvico (IPA) y de manera secundaria la va de la indol 3-acetamida (IAM).
A nivel genoma, el gen bacteriano de mayor importancia en stos procesos es el
llamado ipdC. ste gen es regulado por el nivel de auxinas. El promotor del gen ipdC
contiene un elemento de respuesta a auxinas (AuxRE).
La va de la indol 3-acetamida (IAM) involucra la accin de dos grupos de enzimas:
Trp-monooxigenasas responsables de la oxidacin del Trp a indol 3-acetamida y AIMhidrolasas responsables de la subsecuente hidrlisis del precursor a AIA.
Una tercera va de menor importancia ha sido descripta, es la va de la Triptamina,
donde ocurre la conversin inicial del Trp a triptamina, catalizada por enzimas tipo
Trpdecarboxilasas, seguida de la conversin a indolacetaldehdo por aminaoxidasas.
En el caso de Azospirillum brasilense el 90% de la sntesis de AIA se da por las vas de
IAM, AIP y 10% por la va independiente del Trp.
La respuesta de la planta al AIA exgeno puede variar de benfica a deletrea,
dependiendo de la concentracin incorporada en los tejidos de la planta. En este sentido,
algunos autores consideran que el aumento del contenido endgeno de la hormona por
la actividad microbiana del suelo sobre la planta, podra suplementar transitoriamente
los niveles sub-ptimos del hospedador y modificar parcialmente el metabolismo
celular con la consecuente promocin del crecimiento.
El aumento excesivo del contenido de auxinas, pone en marcha un mecanismo
homeosttico para reducir la concentracin endgena de la hormona. Este mecanismo
involucra la traslocacin xilemtica de conjugados desde la raz a la parte area y un
rpido catabolismo de auxinas mediado por AIA oxidasas.
La interaccin planta-bacteria comienza en la rizsfera, donde la mayora de los
sustratos necesarios para el crecimiento microbiano y el AIA son sintetizados. La
presencia de AIA y compuestos derivados en los exudados vegetales, es suficiente para
que Azospirillum incremente la expresin del gen ipdC con el consecuente aumento de
la sntesis de AIA, siempre que las cantidades de precursores (como el triptofano) sean
suficientes. El resultado, se traducir en un incremento del contenido endgeno de la
hormona que dar inicio a la respuesta celular, que desencadenar una cascada de
sealizacin que tendr como sitio primario de actividad la pared celular y el ncleo.
Desde el punto de vista fisiolgico, la capacidad de Azospirillum sp. para sintetizar
auxinas y transferirlas al tejido vegetal determinara dos tipos de respuesta, dependiendo
del tipo de planta inoculada. Azospirillum sp. es incapz de inducir la formacin de
ndulos como ocurre en el caso de las leguminosas, la aplicacin exgena de auxinas
sintticas en concentraciones superfisiolgicas en races de gramneas, induce la
formacin de estructuras tumorales denominadas parandulos que son efectivamente
colonizadas por Azospirillum. Dentro de stas estructuras, la bacteria fija nitrgeno de
manera eficiente.
En las gramneas, el crecimiento de la raz es uno de los parmetros fisiolgicos de
mayor inters a la hora de caracterizar y seleccionar una cepa promotora del crecimiento
88
89
Citocininas
Son un grupo de compuestos naturales que regulan la divisin y diferenciacin celular
en tejidos no meristemticos de plantas superiores. Qumicamente son purinas, en su
mayora derivadas de la adenina. Estas fitohormonas se han asociado a un gran nmero
de procesos fisiolgicos y celulares entre los que se detallan el retardo de la senescencia
por acumulacin de la clorofila, la formacin de rganos en una gran variedad de
cultivos de tejidos, el desarrollo de la raz, la formacin de pelos radicales, la
elongacin de la raz, la iniciacin del tallo, la expansin de las hojas. Son compuestos
que en presencia de concentraciones ptimas de auxinas, inducen la divisin celular en
cultivos o tejidos vegetales.
Muchos microorganismos de la rizsfera, entre los que se detallan bacterias y hongos,
son capaces de sintetizar citocininas en cultivos definidos. Al menos el 90 % de las
bacterias aisladas de la rizsfera de cultivos de inters agronmico, son capaces de
producir compuestos tipo-citocinas. Como resultado de la ntima relacin entre estos
organismos y la superficie de la raz, la produccin exgena de esta hormona, puede
tener un profundo efecto sobre el crecimiento de la planta. Al igual que las auxinas, la
produccin microbiana de esta hormona, podra el suplementar el contenido endgeno
de la planta y en ciertos casos promover el crecimiento vegetal o resultar fitotxica. La
carencia de informacin a nivel de la sntesis de citocininas en cultivos de Azospirillum
se debi a la complejidad del anlisis de estas hormonas, lo cual ha sido determinante
en la discontinuidad de esta temtica. Desde el punto de vista fisiolgico, existe poca
informacin que pueda relacionar en forma directa el efecto de la inoculacin con
Azospirillum sp., la promocin del crecimiento vegetal y la produccin de citocininas.
La aplicacin exgena de auxinas, citocininas y giberelinas produjo cambios en la
morfologa de la raz comparables a los obtenidos por la inoculacin.
Etileno
Junto con auxinas, giberelinas y citocininas, el etileno es una hormona de composicin
gaseosa, muy importante en el crecimiento y desarrollo de las plantas. El etileno es una
molcula muy simple y simtrica, compuesta por 2 tomos de C (unidos en doble
ligadura) y 4 tomos de H, soluble en agua. Es muy activo y puede ejercer sus efectos
fisiolgicos a concentraciones muy bajas en el tejido vegetal (0.1 ppm). Todos los
tejidos de la planta tienen capacidad de sintetizar esta hormona, pero la magnitud de su
expresin se asocia al estado de crecimiento y desarrollo de los mismos, siendo ms
activa en aquellos tejidos en activa divisin celular, que se encuentran bajo condiciones
de estrs o en estado de senescencia. La capacidad de las plantas de sintetizar etileno,
depende de una gran variedad de compuestos, que incluyen metionina, cido linolnico,
propanol, -alanina, etionina, etanol, glicerol, cidos orgnicos y hasta glucosa y
sacarosa, que son precursoras de la hormona. La metionina era el precursor natural por
exelencia. En el caso de la sntesis microbiana, los precursores son muy variados pero la
L-metionina es el sustrato ms utilizado.
La regulacin de la produccin de etileno tambin depende de las enzimas que catalizan
la biosntesis de esta hormona: S-adenosil-L-metionina (SAM) sintetasa, 1aminociclopropano-1-cido carboxlico (ACC) sintetasa y ACC oxidasa. La SAM
sintasa cataliza la primera reaccin de la biosntesis a partir de metionina, La segunda
reaccin es catalizada por la ACC sintasa y determina la hidrlisis de la SAM para
90
las variaciones del potencial qumico del xilema, que modifican la capacidad de la
hormona de unirse a sus receptores en las clulas blanco de la hoja. El parmetro que
ms vara como resultado de la diferencia en el potencial qumico del xilema es el pH,
ya que la alcalinizacin del xilema, impide el ingreso o salida de la hormona del
simplasto, donde se encuentran los receptores especficos de las clulas guarda del
estoma.
Es muy escasa la informacin documentada sobre la identificacin de ABA en cultivos
qumicamente definidos de Azospirillum y su correlacin al crecimiento de la planta.
Interaccin de las fitohormonas y su efecto sobre el crecimiento de la planta
En lo que se refiere especficamente a Azospirillum sp. existe evidencia de la interaccin
de fitohormonas producidas por el microorganismo con la situacin hormonal de las
plantas inoculadas. Sin embargo, un detallado anlisis de esta interaccin podra revelar
interacciones especficas que tendran como resultado la promocin del crecimiento
vegetal.
Fulchieri et al. (1993) encontraron que plntulas de maz (Zea mays) inoculadas con las
3 cepas de Azospirillum brasilense mejoraron significativamente el crecimiento de la
raz y de la parte area. En estos ensayos GA3 fue identificada en la fraccin cida libre
del extracto vegetal y estos resultados permitieron especular sobre la capacidad
bacteriana de incrementar el pool de giberelinas con actividad biolgica sobre el
crecimiento vegetal en las races de plantas inoculadas. Algunos autores, sugieren que
las auxinas pueden promover, la elongacin del tallo por incrementar los niveles de
endgenos de giberelinas. Las cepas inoculadas producan AIA lo que permite
asociarlo, al aumento en el contenido endgeno de GA3 en la raz, debido al cross-talk
del AIA sobre el pool de GAs de la raz. Parte de la respuesta del crecimiento observado
en parte area y subterrnea se debe al efecto de las GAs producidas por las diferentes
cepas de Azospirillum por las GAs producidas por las plntulas inducidas por el AIA
bacteriano. El aumento en la produccin de etileno fue significativamente superior a los
controles y los cambios morfolgicos fueron acompaados de un aumento de actividad
de la ACC-sintasa tisular. El limitante para la biosntesis de etileno es la conversin de
la Sadenosilmetionina (SAM) a 1-aminociclopropano-1-cido carboxlico (ACC),
catalizada por la ACC sintasa y la expresin como la actividad de esta enzima, as como
la produccin de etileno, incrementa por la adicin de AIA exgeno. Esto indica que el
aumento de etileno, al menos en parte, se debe a un cross-talk entre el AIA producido
por la bacteria en la va de sntesis del etileno.
Fijacin biolgica de nitrgeno por Azospirillum brasilense
Como se ha visto en puntos anteriores, Azospirillum brasilense tiene la capacidad de
producir fitohormonas y fijar nitrgeno. El aporte del nitrgeno a la planta, slo
representa un 30% del N fijado.
La fijacin biolgica de N se realiza a travs de la enzima nitrogenasa, la cual es
sensible a la presencia de oxgeno. La reduccin del nitrgeno a amonio ocurre en tres
pasos:
1. Reduccin de la Fe-protena por transportadores de electrones
2. Transferencia de un nico electrn a partir de la Fe-protena hacia MoFe-protena a
travs de un proceso dependiente de Mg-ATP
92
2H3 + H2 + 16 Mg-ADP + 16 Pi
93
96
Material Soporte
(turba)
Molienda
y
Clasificacin
Secado
Vapor
Almacn
Agua de
Enfriamiento
Bolsas
Esterilizacin
de bolsas
Bolsas
esterilizadas
Envase
Esterilizacin
Enfriamiento
Inoculacin
Licor del
Fermentador
Vapor
PRODUCTO
97
Lo importante es lograr una homognea cobertura de todas las semillas, para lo cual la
cantidad de agua utilizada es de suma importancia. Si bien no se aconseja la utilizacin
de fungicidas junto a la aplicacin de las bacterias.
Actualidad y perspectivas en Argentina
Biofertilizantes en Maz-Azospirillum - Actualidad
Se conoce que el maz juega un papel fundamental en la conservacin de los suelos por
el volumen de residuos producidos y por su composicin que asegura una gran
provisin de energa a la microbiomasa que los metaboliza.
Parte del rastrojo, rico en Carbono, puede ingresar a fracciones precursoras de Materia
Orgnica Estable del Suelo si guarda una adecuada relacin con el Nitrgeno disponible
para la flora microbiana.
El maz tiene una alta capacidad de transformar asimilados en produccin,
removilizando desde la planta una gran proporcin de los nutrientes absorbidos hacia el
grano. As los residuos, despus de la cosecha, son relativamente pobres en Nitrgeno.
Es ese bajo contenido de Nitrgeno, y no el voluminoso residuo carbonado, el que
determina la magnitud del aporte del cultivo a la Materia Orgnica del Suelo. Su
disponibilidad no slo determina en gran medida el nivel de rendimiento, sino que
tambin gobierna la dinmica del rastrojo a travs de la relacin C:N.
Con las mejoras introducidas al paquete tecnolgico en la ltima dcada, el maz ha
incrementado considerablemente su potencial de rendimiento y tambin aument en esa
proporcin la demanda nutricional del cultivo. Con los niveles productivos actuales es
uno de los ms exigentes entre los cultivos de nuestra regin.
Sin embargo la siembra directa, el mejoramiento gentico con el uso de hbridos
simples de alto potencial, los materiales transgnicos tolerantes a Barrenador del Tallo
(maces BT) y la fertilizacin balanceada, aseguran la factibilidad econmica de
competir contra otras alternativas de produccin generalmente ms difundidas.
La fertilizacin necesaria para cubrir las demandas de la planta, suficientes para un alto
rendimiento y para dejar un residuo con adecuada relacin C:N para el suelo, representa
un muy alto porcentaje del costo del cultivo. Por este motivo, todas las tcnicas que
permitan disminuir el aporte externo de nutrientes o que beneficien su balance en el
maz harn ms factible su inclusin en la secuencia agrcola.
Los inoculantes basados en bacterias del gnero Azospirillum sp. son considerados
bioferilizantes y permiten al productor disponer de otra herramienta para complementar
la nutricin del sistema Suelo-Planta, y disminuir as los actuales balances negativos de
la agricultura.
En las ltimas campaas se observa que est incrementndose la utilizacin de la
inoculacin en cultivos donde an es bajo el ndice de aplicacin. En la actualidad son
dos factores bien fuertes los que impulsan el uso de la inoculacin: por un lado, la
caracterstica de producto natural y segundo, el bajo costo por hectrea, que hace muy
sencillo recuperar la inversin. El uso de inoculantes no slo tiene un buen resultado
para cuidar naturalmente los suelos, sino tambin tiene un valor agregado para el cultivo
y mejora la rentabilidad. Con el correr de las campaas, esta tecnologa ir
imponindose en todos los cultivos con el mismo nivel de adhesin que hoy tiene la
soja.
98
99
Figura N 40: Produccin de materia seca promedio (MS) a travs del ciclo fenolgico
del cultivo de maz para maces con y sin inoculacin con Azospirillum.
Se observa un aumento en la materia seca area acumulada para los tratamientos
inoculados en relacin a los sin inocular, a partir de inicio del estadio V6. A madurez
fisiolgica, el cultivo alcanz niveles medios de MS muy elevados (17.5 ton.ha-1), con
diferencias relevante entre tratamientos (18756 y 16326 kg MS.ha-1 para los
tratamientos con y sin Azospirillum respectivamente). El cultivo inoculado con
Azospirillum, a MF, produjo un 15% ms de biomasa promedio.
Para el cultivo inoculado siempre se observa un mayor nivel de acumulacin de
biomasa respeto al sin inocular. Esto nos lleva a la conclusin que la inoculacin con
Azospirillum es beneficiosa, no slo para las condiciones fsico qumicas del suelo y la
sustentabilidad del sistema, sino tambin para el aumento de los rendimientos en Kg de
materia cosechable. La inoculacin de especies vegetales, con Azospirillun brasilense,
produce mayor volumen de races, mayor nmero de plantas por m2, mayor desarrollo
de materia verde y mayor produccin. Las plantas inoculadas absorben mayor cantidad
de nutrientes por unidad de peso.
100
El desgaste del suelo es una de las debilidades que tiene la produccin hoy por su uso
excesivo, la falta de rotacin de cultivos o el factor climtico llevan a la utilizacin de
los biofertilizantes. El productor dispone de herramientas producidas por la naturaleza
para optimizar el rendimiento de las cosechas y conservar la calidad del suelo, por
ejemplo la inoculacin, una prctica relativamente nueva para el sector, al menos en
nuestro pas, que an no lleg a su techo y que se aplica mayormente en las
leguminosas, aunque est creciendo en el resto de los cultivos.
De manera sinttica, se puede decir que los biofertilizantes son productos con base a
microorganismos benficos (bacterias y hongos), que viven asociados o en simbiosis
con las plantas y ayudan a su proceso natural de nutricin, adems de ser regeneradores
de suelo. Estos microorganismos se encuentran de forma natural en suelos que no han
sido afectados por el uso excesivo de fertilizantes qumicos u otros agroqumicos, que
disminuyen o eliminan dicha poblacin. Obviamente, se trata de productos que no
contaminan ni degradan la capacidad productiva del suelo, por el contrario, son
regeneradores de la poblacin microbiana; asimismo, estos productos tienen una
funcin protectora del sistema radicular de la planta contra microorganismos patgenos.
Con el uso de biofertilizantes se incrementa la presencia de microorganismos benficos
que se asocian a las races de las plantas, son excelentes mejoradores de suelo y
contribuyen al combate de microorganismos patgenos.
Las principales funciones de los biofertilizantes son:
1. Fijadores de nitrgeno del medio ambiente para la alimentacin de la planta.
2. Protectores de la planta ante microorganismos patgenos del suelo.
3. Estimulan el crecimiento del sistema radicular de la planta.
4. Mejoradores y regeneradores del suelo.
5. Incrementan la solubilizacin y absorcin de nutrientes, como el fsforo, que de otra
forma no son de fcil asimilacin natural por la planta.
6. Incrementan la tolerancia de la planta a la sequa y la salinidad.
A continuacin se comparan los fertilizantes qumicos contra los biofertilizantes:
Fertilizante QUIMICO vs. BIOFERTILIZANTE
Alto costo y disponibilidad decreciente Bajo costo y fcil reproduccin (menos del
(por incremento de precios)
10 % del costo)
Alto desperdicio, slo 30 40% es No
hay
desperdicio,
mejor
utilizado por la planta
aprovechamiento que el fertilizante
qumico
Contaminacin del aire, suelo y agua
No contamina
Elimina microrganismos del suelo
Estimula el desarrollo de microrganismos
en el suelo
Esteriliza el suelo
Regenera el suelo
Costo de almacenamiento y transporte Fcil almacenamiento y transporte
(flete)
Tabla N 15: Comparacin entre fertilizantes qumicos y fertilizantes biolgicos.
101
104
Bibliografa
Fijacin Biolgica de Nitrgeno
Olivares, J. P., Fijacin Biolgica de Nitrgeno (ltima actualizacin: 08/02/2008),
Paper, Estacin Experimental del Zaidn, SCIC, Granada, Espaa. Febrero 2008.
Baca B. E., L. Sotto Urza, M. P. A. Pardo Ruz, Fijacin Biolgica de Nitrgeno,
Paper. Puebla, Mxico, Julio/Agosto 2000.
Zeiger, E., T. Lincoln Fisiologa Vegetal. Volmen I. Universitat Jaume-I, 2007,
1338 pgs.
Fassbender, H. W., E. Bornemisza Qumica de suelos con nfasis en suelos de
Amrica Latina. Instituto Interamericano de Cooperacin para la Agricultura. 2
Edicin, 1987, 420 pgs.
Fassbender, H. W. Bases Edafolgicas de los sistemas de produccin agroforestales.
Instituto Interamericano de Cooperacin para la Agricultura, 1984, 191 pgs.
Mayz Figueroa J. Fijacin Biolgica de Nitrgeno. Universidad de Oriente, Ncleo
de Monagas, Laboratorio de Rizobiologa, Juanico, Mxico. Paper. 20 pgs.
Rodrguez Barrueco C., Sevillano Garca F., Subramaniam P. La fijacin de
nitrgeno atmosfrico: una biotecnologa en la produccin agraria. Instituto de Recursos
Naturales y Agrobiologa. Temas de divulgacin, 1 Edicin, 1984. 65 pgs.
Leguminosas - Soja
Nadal Moyano S., M. T. Moreno Yaguela, J. I. Cubero Salmeron Las leguminosas
de grano en la agricultura moderna. Grupo Mundi Prensa. Espaa. 2004. 318 pgs.
Vega de los Reyes, R. M. Anlisis funcional de DsbA, una tiol oxirreductasa
periplsmica, de Rhizobium leguminosarum. Trabajo Fin de Carrera. Universidad
Politcnica de Madrid. Escuela Superior de Ingenieros Agrnomos. Departamento de
Biotecnologa. 2009. 70 pgs.
Ferraris, G. N., G. Gonzalez Anta, Daz Zorita M. - Aportes actuales y futuros de
tratamientos biolgicos sobre la nutricin nitrogenada y produccin de soja en el cono
sur. Paper, EEA INTA Pergamino, Argentina. 2006. 4 pgs.
Reca, L. G. Aspectos del desarrollo agropecuario argentino 1875-2005. Publicacin
informativa. Academia Nacional de Agronoma y Veterinaria, Argentina. 2006. 48 pgs.
Izaguirre Mayoral, M.L., C. Labandera, J. Sanjun Biofertilizantes en Iberoamrica:
Una visin tcnica, cientfica y empresarial. Informe de Lage y Ca. S.A. Ministerio de
Agricultura, Ganadera y Pesca de la Repblica Oriental del Uruguay. Uruguay. 2006.
101 pgs.
105
106
107
109
111
INTA Gua prctica para el cultivo de maz. Argentina. INTA, 1 Edicin, 1997. 221
pgs.
Frioni L. Procesos microbianos. Editorial de la Fundacin Nacional de Ro Cuarto,
1 Edicin, 1999. 332 pgs.
Aguilar Piedras J. J., M. L. Xiqui Vsquez, S. Garca Garca, B. E. Baca (2008)
Produccin del cido indol-3-actico en Azospirillum. Revista Latinoamericana de
Microbiologa, Vol. 50, N 1 y 2. Pgs 29-37.
Perotti E. B. R., Pidello A. Evolucin del nitrgeno mineral del suelo en presencia
de Azospirillum. Laboratorio de Qumica Biolgica I. Facultad de Ciencias
Veterinarias. Universidad Nacional de Rosario, Santa Fe. Paper. 1990. 6 pgs.
Driutti A., M. Iglesias, C. O. Traut, N. Mansilla Ensayo de inoculacin con
Azospirillum brasilense en maz cultivado en suelos de corrientes. Universidad Nacional
del Nordeste, Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2005. Paper. 3 pgs.
Faggioli V., C. R. Cazorla, A. Vigna, M. F. Berti Fertilizantes biolgicos en maz,
ensayo de inoculacin con cepas de Azospirillum brasilense y Pseudomonas
fluorescens.
http://scriptusnaturae.8m.com/Articulos/FijN/libre.html - Fijacin del nitrgeno por
microorganismos libres. Enero 2011.
Salazar Genovez S., M. Ferrufino, J. C. Hidalgo (2003) Fijador de Nitrogeno:
Azospirillum sp. Revista FIAGRO, San Salvador, El Salvador. 20 pgs.
Garca F. O. Fsforo y azufre en el cultivo de maz. INPOFOS Cono Sur. Paper.
1999. 5 pgs.
Satorre E. H. Generacin del rendimiento en el cultivo de maz: efectos de la
nutricin nitrogenada. Ctedra de Cereales, Facultad de Agronoma, UBA, Argentina.
Paper. 2002. 5 pgs.
Ferlini Micheli H. A., S. Daz Incidencia de la coinoculacin de soja (Glycine max)
con Azospirillum brasilense y Bradyrhizobium japonicum en la eficiencia de
implantancin. Santa Fe, Argentina. Paper. 4 pgs.
Rodrguez J., R. Surez, J. Caballero, G. Iturriaga (2004) Incremento de la biomasa
y la tolerancia a sequa en maz inoculado con Azospirillum brasilense que sintetiza
trehalosa. VII Simposio Internacional de Produccin de Alcoholes y Levaduras.
Mxico. 1 pgs.
http://www.engormix.com/MA-agricultura/soja/articulos/incrementos-fijacionbiologica-nitrogeno-t1106/p0.htm - Incrementos de la fijacin biolgica del nitrgeno
mediante la inoculacin combinada de bacterias fijadoras de Nitrgeno atmosfrico.
Enero 2011.
112
113
http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=193216156004 - Tecnologa
de produccin de inoculantes de Azospirillum y factibilidad econ{omica de su
aplicacin agrcola en cultivos seleccionados. Junio 2011.
http://www.engormix.com/MA-agricultura/maiz/articulos/uso-bacterias-promotorascrecimiento-t2575/417-p0.htm - Uso de bacterias promotoras del crecimiento vegetal,
inoculantes en el cultivo de maz (Rizofos liq.). Mayo 2011.
Potencial de bioinoculantes microbianos como una alternativa para reducir costos de
fertilizacin en maz de temporal. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales,
Agrcolas y Pecuarias, Campo Experimental Bajo, Universidad de Biotecnologa.
Guanajuato, Mxico. 2008. 58 pgs.
Cassan F., V. Sgroy, D. Perrig, S. Masciarelli, V. Luna Produccin de fitorhomonas
por Azospirillum sp. Aspectos fisiolgicos y tecnolgicos de la promocin del
crecimiento.
Holgun Zehfuss G. - La comunicacin entre bacterias y plantas. 2008. 7 pgs.
114