Nefelometra y sus

Aplicaciones Clnicas

Nefelometra
Se define como la deteccin de
la energa lumnica dispersa o
reflejada hacia un detector que
no se encuentra en el camino
directo del haz luminoso. Las
mediciones se realizan a
menudo en un determinado
ngulo en relacin con dicho
haz.
Las
mediciones
nefelomtricas
son
ms
adecuadas
para
medir
muestras cuya concentracin
de partculas es baja, lo que da
a lugar a una dbil dispersin
de la luz

Nefelmetro
Es un tipo de instrumento fotomtrico, que puede o no ser
automatizado para la determinacin de protenas especficas en
diferentes fluidos biolgicos.

Esquema General
Cubeta
(Vista
superior)

Fuente

Io

Filtro

Colector de
radiaciones
negro

It

Io: Intensidad de
luz incidente.
It: Intensidad de
luz transmitida.

S
Tubo
Fotomultiplicador

S: Intensidad de
luz dispersada.

Aplicaciones Clnicas
En la prctica clnica, la Nefelometra es utilizada principalmente para:
Contar clulas sanguneas distinguiendo los distintos tipos de clulas

de la sangre.

Contar clulas de un tipo especfico.

Determinar inmunoglobulinas IgE, IgA, IgM, IgG total, complemento C3

y C4, protenas plasmticas, antiestreptolisina O, factor reumatodeo,

Haptoglobina, Alfa1-antitripsina, protena C reactiva y otras protenas
plasmticas.

Medir complejos antgeno anticuerpo.

Determinar algunos frmacos
Efectuar anlisis de enzimas que actan sobre distintos sustratos.

Fuentes de error
Toda medicin est sometida a un porcentaje de error, que principalmente est
dado por:
Cubetas sucias: La suciedad en las cubetas disminuye la Io en el trayecto
de la luz radiante hacia el detector, de este modo se detectarn valores
errneamente bajos de la intensidad de la dispersin.
Interferentes: Su presencia dispersa la energa radiante, tendiendo a

elevar la intensidad de la dispersin.

Limitaciones especificas de la prueba por diferentes interferentes.

Lipemia muy alta
Contaminacin microbiana
Turbidez
Hemlisis
Las muestras pueden no ser apropiadas para el Nefelmetro, y no deben
ser utilizadas a menos que sean centrifugadas o preparadas de alguna
manera apropiada.

Fuentes de error
Compuestos

fluorescentes: Aquellos compuestos que son

fluorescentes son excitados por la radiacin incidente por lo que se
obtienen valores falsamente elevados de intensidad de dispersin

Conservacin de los reactivos: En este aspecto se debe tener

principalmente cuidado con la temperatura y posibles condiciones

adversas que pueden modificarlos (Reactivos turbios o con
precipitados).

Fluctuaciones en la potencia elctrica: Para evitar que este factor

sea una fuente de error se recomienda utilizar estabilizadores de

voltaje.

Visitas a Centros de Salud

de Temuco
Clnica Alemana de Temuco:

Donde en estos momentos no

disponen de un Nefelmetro,
pero que llegara en el mes de
Agosto.

Hospital Clnico de la Frontera:

Donde disponen de un
Nefelmetro modelo
MININEPH.

Hospital Dr. Hernn Henrquez Aravena: En el cual cuentan con

un Nefelmetro modelo
BN ProSpec.

MININEPH
Hospital Clnico De La Frontera
MININEPH

es un nefelmetro
automtico capaz de realizar una
gama de los anlisis cuantitativos
de protenas del suero

Especificaciones:

Fuente de luz:
Temperatura de funcionamiento:
Entrada:
Cubetas:

Diodo de lser (670nm).

18 - 30C.
Tarjetas magnticas
preprogramadas y teclado
numrico.
Cubetas rectangulares de 1cm.

Especificaciones:
Contiene

un
nmero
determinado de programas de
anlisis. Al
seleccionar un
programa
en
especfico,
MININPEH solicita el nmero de
lote, el que es suministrado a
travs de una tarjeta la cual se
desliza en el instrumento.

Las aplicaciones actuales en el MININEPH incluyen las subclases

de IgG, IgA, IgM, IgG y IgA; Haptoglobina, Factor Reumatodeo,
ASO, PCR, C3, C4 y otras protenas del suero.

Siendo para algunas de ellas el siguiente

procedimiento:
Antisuero
Especifico

Ig G 1

Ig G 2

Ig G 3

Ig G 4

F.
Reumatoideo

Rango
Medida

144 2300
mg/dL

80.2 962.5
mg/dL

15.3 245.0
mg/dL

5.3 84.7
mg/dL

31 500
UI/mL

Nmero
Qumico

06

07

08

09

96

Dilucin
Muestra

1/11

1/11

1/1

1/121

1/1

Volumen
Muestra

10 uL

20 uL

10 uL

20 uL

20 uL

Dilucion
Antisuero

40 uL ANTISUERO + 400 uL BUFFER DILUCION

50 uL Antisuero
250 uL Buffer

Aumentada

1/50
20 + 980

1/6
250 + 50

Disminuida
Tiempo
Ensayo

1/55
160
40(1/11)

1/5
160 + 40

1/5
160 + 40
120 seg.

210 seg.

1/11
400 + 40
120 seg.

165 seg.

180 seg.

Procedimiento:
Poner barra de acero en cubeta.
Poner volumen de trabajo muestra diluida

en cubeta.
Ingresar N qumico en MININEPH.
Identificar N de muestra en MININEPH.
Poner cubeta en equipo cuando la pantalla
lo indique.
Agregar volumen de trabajo antisuero en
la cubeta cuando el equipo lo indique.
Comenzar a blanquear.
Pondr timer en retroceso de tiempo total
de lectura.
Se imprime valor en g/dL. Para mg/dL
multiplicar por 100.
Sacar cubeta usada y presionar Enter.

(Fuente: Procedimiento MININEPH Hospital Clnico de la

Frontera)

Accesorios
Impresora

Micropipeta automtica

BN ProSpec
Hospital Dr. Hernn Henrquez Aravena
BN ProSpec es un Nefelmetro
automtico capaz de realizar anlisis
cuantitativos de protenas del suero.
Los reactivos vienen prcticamente
preparados para efectuar anlisis de:
PCR (Proteina C Reactiva)
Factor Reumatodeo
ASO (Antiestreptolisina O)
Complemento C3 y C4
Inmunoglobulinas IgE, IgA, IgM, IgG
total.
Haptoglobina
Alfa1-antitripsina

Especificaciones:
Es manejado mediante:
Un sistema computacional en el cual se
ingresan las muestras seleccionando el
anlisis a determinar, posicin y nmero
de carro. Cuenta con tres carros, los que
a su vez pueden contener hasta 15
muestras, permitiendo el anlisis de 45
muestras simultneamente.

Especificaciones:
Tambin contiene un refrigerador, que conserva los reactivos, y los

mantiene a una temperatura de entre 4 y 8 grados Celsius.

Especificaciones:

A continuacin se encuentran los tubos que contienen la muestra,

las cubetas de pre-dilucin, y por ltimo las cubetas de lecturas
directa, ambas desechables.

Especificaciones:
Utiliza un recipiente de agua destilada, un buffer

de dilucin y uno de reaccin, y un recipiente

de deshechos, estando la totalidad de ellos
conectados al Nefelmetro, siendo este ltimo
de manera automtica, el que selecciona el
reactivo a utilizar.

Fuentes de error
Las mangueras: pueden provocar error si no se tiene cuidado con su

limpieza, es importante realizar lavado con cierta periodicidad, para

prevenir eventuales bloqueos por acumulacin de material.

La temperatura ptima de trabajo es de 30 grados Celsius y a

temperatura ambiente. No posee ventilador, por lo que no funciona en

verano, en estos casos se utiliza un ventilador externo o aplicacin de
hielo.

Gracias por su atencin

Ignacio Aguayo C.
Marlenne Carrasco T.
Marcela Cifuentes M.
Mnica Daz A.
David Olivares N.

Exmenes realizados en Temuco

Hospital Clnico de la Frontera:

Ig G 1
Ig G 2
Ig G 3
Ig G 4
Factor Reumatodeo.

Hospital Dr. Hernn Henrquez Aravena:

PCR
Factor Reumatodeo
ASO
Complemento C3 y C4
Inmunoglobulinas (IgE, IgA, IgM, Bge total)
Haptoglobina
Alfa1-antitripsina

Anlisis y Accesorios MININEPH

Descripcin

Rango

Pack

IgG

2,0 - 32 g/L

50 pruebas

IgG (CSF)

22 - 352 mg/L

25 pruebas

IgA

0,37 - 5,94 g/L

50 pruebas

IgM

0,25 - 4,05 g/L

50 pruebas

C3

0,27 - 4,44 d/L

50 pruebas

C4

0,08 - 1,23 g/L

50 pruebas

Anlisis y Accesorios MININEPH

Descripcin

Rango

Pack

ASO Ltex

50 - 800 lU/mL

50 pruebas

CRP Ltex

3,5 - 112 mg/L @ 1/40

50 pruebas

0,4 - 14 mg/L @ 1/5

0,1 3,03 mg/L

FR

23 - 750 lU/mL

50 pruebas

Anlisis y Accesorios MININEPH

Descripcin

Rango

Pack

IgG1

1440 -23000 mg/L

10 pruebas

IgG2

770 - 12380 mg/L

10 pruebas

IgG3

153 - 2450 mg/L

10 pruebas

IgG4

88 - 1388 mg/L

10 pruebas

IgA1

330 - 5300 mg/L

10 pruebas

IgA2 Ltex

81 - 1300 mg/L

10 pruebas

Anlisis y Accesorios MININEPH

Descripcin

Rango

Pack

Albmina

7,1 - 114 g/L

25 pruebas

1 - AT

0,52 - 8,3 g/L

25 pruebas

C1 inactivador

0,1 - 1,21 g/L

25 pruebas

Caeruloplasmina

0,06 - 1,01 g/L

25 pruebas

Microalbmina

0,24 - 3,89 g/L

25 pruebas

Haptoglobina

15 - 235 mg/L

25 pruebas

Prealbmina

0,05 - 0,48 g/L

25 pruebas

Transferrina

,40 - 6,4 g/L

25 pruebas

ACCESORIOS MININEPH
Descripcin

Pack

Pack accesorio Standard:

(cubetas, barras, diluyente de
muestra y buffer de reaccin)

200

Pack de cubetas (cubetas,

barras y diluyente de muestra,
para anlisis de ltex
solamente)

200

Papel de impresora

10

Cinta de impresora

Cable de impresora

Exmenes realizados en Temuco

Exmenes realizados en Temuco

BIBLIOGRAFIA
Bender, G. (1990). Mtodos Instrumentales de Anlisis en Qumica

Clnica. Editorial Acribia, S. A. Zaragoza, Espaa.

Ministerio de Salud. (1998). Gua Tcnico-Metodolgica de
Laboratorios Clnicos. Volumen I. Manejo de Recursos de Laboratorio
Clnico. Santiago de Chile.
Gonzlez de Buitrago, J. M. (1990) Tecnologa y Mtodos del
Laboratorio Clinico. Salvat Editores.
Tietz, N. (1972). Qumica Clnica Moderna. Nueva editorial
interamericana, Mxico.
Henry, J. B. (1993). Diagnstico y Tratamiento Clnico por el
Laboratorio. Editoral Masson Salvat Medicina. Barcelona, Espaa.
The Binding Site. (2000). MININEPHTM SYSTEM. Operating Manual.
Sitio web
The Binding Site. (2003).
http://www.bindingsite.co.uk/minineph.asp&prev=/search%3Fq%3Dmini
neph%26hl%3Des%26lr%3D%26ie%3DUTF-8