1

Bioqumica inmunolgica
2. Las inmunoglobulinas. Estructura, 2. Las inmunoglobulinas. Estructura,
propiedades y funciones biol propiedades y funciones biol gicas. gicas.
Albmina
Protenas
IgG
IgA
IgM
IgD
- - + +
Movilidad electrofortica
P
r
o
t
e

n
a

(
D
e
n
s
i
t
o
m
e
t
r

a
)
Las inmunoglobulinas se encuentran en la regin de las gammaglobulinas
2
Anticuerpos = inmunoglobulinas Anticuerpos = inmunoglobulinas globulinas globulinas
Protenas de estructura globular sintetizadas por clulas del sistema inmune
(Linfocitos B y clulas plasmticas derivadas de ellos.
Presentes en la sangre (plasma) y otros fluidos biolgicos (saliva, lgrimas,
secrecin mucosa intestinal, lquido sinovial, lquido intersticial etc.)
En el plasma se detectan dentro de la fraccin de las globulinas.
Capaces de reconocer a otras molculas (antgenos) de manera muy especfica,
y formar complejos estables con ellos (inmunocomplejos).
Su aparicin en plasma forma parte de la respuesta inmunolgica adaptativa,
en lo que se conoce como respuesta humoral especfica.
Los anticuerpos tienen una vida media en el organismo relativamente larga
(varias semanas).
Constituyen una defensa muy eficaz contra agentes patgenos.
N
N
N
N
C
C
C
C
Cadena pesada Cadena pesada
Cadena ligera Cadena ligera
La estructura b La estructura b sica de las inmunoglobulinas sica de las inmunoglobulinas
Dos cadenas pesadas (50 KDa), idnticas entre s
Dos cadenas ligeras (25 KDa), idnticas entre s
Las cadenas estn unidas por
uno o varios puentes disulfuro
Glicoprotenas
Eje de Eje de
simetr simetr a a
3
Tipos de inmunoglobulinas Tipos de inmunoglobulinas
Existen 5 tipos b 5 tipos b sicos sicos de inmunoglobulinas: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
Son sintetizadas por los linfocitos B (IgM, IgD) y por las clulas plasmticas
derivadas de ellos (IgG, IgA, IgE).
IgM e IgG se detectan principalmente en el plasma sanguneo y en el lquido
intersticial
Las IgA aparecen fundamentalmente en secreciones (saliva, lgrimas, secrecin
intestinal, etc.), recubriendo mucosas expuestas al ataque de agentes patgenos
externos.
La IgD es una inmunoglobulina asociada a la membrana de los linfocitos B. Su
funcin primaria de las es la de servir como detectores de antgenos para las
clulas B. Se detecta marginalmente en el plasma.
Las IgE son anticuerpos que, si bien inicialmente se liberan al plasma por las
clulas plasmticas, son integrados en la membrana de otras clulas (mastocitos),
participando en las reacciones de hipersensibilidad.
Tipo
Caracter Caracter sticas estructurales sticas estructurales
Cadena
pesada
(H)
55.000
Cadena ligera (L)
(MG 22.500)
IgG
IgA
(SIgA)
IgM
IgD
IgE
extended compact
SC SC
SIgA
SC
SC
Formas polimerizadas que aparecen en el hombre
SC =Componente secretor (60.000 Da)
J =Protena de unin(J : join; 20.000 Da)

= =
=
=
=
=
=
4
Inmunoglobulinas Inmunoglobulinas monom monom ricas ricas
En soluci En soluci n en el n en el
plasma y otros plasma y otros
fluidos biol fluidos biol gicos gicos
Asociada a membrana Asociada a membrana
de las c de las c lulas cebadas lulas cebadas
Asociadas a Asociadas a
membrana de membrana de
linfocitos B linfocitos B
Inmunoglobulinas Inmunoglobulinas multim multim ricas ricas
5
Cadena ligera
Cadena ligera
Cadena pesada
Cadena pesada
Polisacrido
Estructura tridimensional de la Inmunoglobulina G
Estructura en Estructura en dominios dominios de las inmunoglobulinas de las inmunoglobulinas
Regi Regi n n
constante constante
Regi Regi n n
variable variable
Dos dominios variables (V
H
, V
L
) y cuatro
dominios constantes (C
L
, C
H1
, C
H2
, C
H3
)
6
Reconocimiento ant Reconocimiento ant geno geno- -anticuerpo anticuerpo
Digestin con
bromelana
Identificaci Identificaci n del dominio de n del dominio de
uni uni n a los ant n a los ant genos genos
F(ab)
2
2 x Fab
Fc
Digestin con
papana
Fab Fab, , F(ab F(ab) )
2 2
: antigen binding fragment: zona de unin a antgenos
Fc Fc: : crystaline fragment: zona constante que interacciona con
receptores celulares
7
Experimento que permiti Experimento que permiti visualizar visualizar las estructuras de los las estructuras de los
complejos ant complejos ant geno anticuerpo geno anticuerpo
Sntesis qumica de una molcula que contiene dos veces
el mismo determinante antgenico
Molcula orgnica de pequeo tamao (antgeno), que es
administrado a un conejo con el fin de producir anticuerpos
especficos contra l
Anticuerpos que reconocen a la molcula orgnica
Estructuras que se observan al microscopio electr Estructuras que se observan al microscopio electr nico al incubar nico al incubar
ant ant genos y anticuerpos genos y anticuerpos
Antgeno con dos determinantes
antignicos iguales
+
8
Radical ( R ) Radical ( R ) sulfonato sulfonato
arsenato arsenato carboxilato carboxilato
Los anticuerpos muestran una extraordinaria especificidad por lo Los anticuerpos muestran una extraordinaria especificidad por los ant s ant genos... genos...
Tipo de
antgeno
Respuesta que se obtiene cuando se evala la respuesta de Igsproducidas
al inmunizar con cido 3-aminobenzeno sulfnico, frente a anlogos
Los anticuerpos muestran una extraordinaria especificidad por lo Los anticuerpos muestran una extraordinaria especificidad por los ant s ant genos... genos...
9
Por qu Por qu son tan espec son tan espec ficos los anticuerpos...? ficos los anticuerpos...?
1) Porque el antgeno encaja en el locus de reconocimiento del anticuerpo
El reconocimiento del antgeno por el anticuerpo tiene lugar en un locus
especfico constituido por los extremos de la cadena ligera y pesada, en la que
encaja el antgeno y que permite se ponga de manifiesto toda una serie de
fuerzas que mantendrn unidos antgeno y anticuerpo. La zona de
reconocimiento por parte del Ac es de tamao limitado (10 aa)
10
Inmunocomplejo Inmunocomplejo
estable si estable si
atraccin > > repulsin
Inmunocomplejo Inmunocomplejo no no
estable si estable si
atraccin < < repulsin
2) El reconocimiento eficaz (y con ello la especificidad) se basan en que
exista entre antgeno y anticuerpo una interaccin tal que las fuerzas de
atraccin superen a las de repulsin, de manera que el complejo que se forme
sea estable
Qu Qu fuerzas mantienen juntos al ant fuerzas mantienen juntos al ant geno y a los anticuerpos? geno y a los anticuerpos?
11
Distancia relativa a la que act Distancia relativa a la que act an estas fuerzas an estas fuerzas
Puentes hidr Puentes hidr geno geno
Electrost Electrost ticas ticas
Van Van der der Waals Waals
Hidrof Hidrof bicas bicas
La interacci La interacci n entre ant n entre ant geno y anticuerpo es un equilibrio qu geno y anticuerpo es un equilibrio qu mico mico
al que puede aplicarse la Ley de Acci al que puede aplicarse la Ley de Acci n de Masas n de Masas
Las constantes de afinidad son del orden de 10
10
12
Cuando el anticuerpo es multivalente, la Ke global puede ser mayor que la del
fragmento Fab; de esta manera, incluso con una afinidad baja, una IgM puede ser
eficaz para unirse a antgenos.
Reacciones de precipitaci Reacciones de precipitaci n n
ant ant geno geno- -anticuerpo anticuerpo
13
Ant Ant genos: genos: mol mol culas capaces de provocar una respuesta del sistema inmune, culas capaces de provocar una respuesta del sistema inmune,
Si la respuesta es de tipo Si la respuesta es de tipo humoral humoral resultar resultar en la producci en la producci n de anticuerpos n de anticuerpos
contra contra l l
Cuando el ant Cuando el ant geno es grande, el anticuerpo solo geno es grande, el anticuerpo solo
puede reconocer una parte de puede reconocer una parte de l ( l (determinante determinante
antig antig nico o nico o epitopo epitopo) )
La naturaleza de los inmunocomplejos formados depende La naturaleza de los inmunocomplejos formados depende
de la proporci de la proporci n relativa de ant n relativa de ant geno y de anticuerpo geno y de anticuerpo
1. 1. En exceso de anticuerpo se forman En exceso de anticuerpo se forman
inmunocomplejos de tama inmunocomplejos de tama o moderado o moderado
2. En exceso de ant 2. En exceso de ant geno, los inmunocomplejos geno, los inmunocomplejos
son tambi son tambi n de tama n de tama o moderado o moderado
3. Cuando ant 3. Cuando ant geno y anticuerpo se encuentran en geno y anticuerpo se encuentran en
una proporci una proporci n adecuada,los complejos n adecuada,los complejos
formados son de gran tama formados son de gran tama o, y por tanto o, y por tanto
insolubles insolubles
14
c
a
n
t
i
d
a
d

d
e

p
r
e
c
i
p
i
t
a
d
o
cantidad de antgeno aadida a una cantidad fija de anticuerpo
exceso de anticuerpo (no se forma precipitado) exceso de anticuerpo (no se forma precipitado)
precipitado visible precipitado visible
exceso de ant exceso de ant geno (no se forma precipitado) geno (no se forma precipitado)
Inmunoprecipitaci Inmunoprecipitaci n n: : Las concentraciones relativas de anticuerpo y de ant Las concentraciones relativas de anticuerpo y de ant geno geno
influyen en el tama influyen en el tama o de los complejos ant o de los complejos ant geno geno- -anticuerpo que se forman. anticuerpo que se forman.
punto de equivalencia punto de equivalencia
Cualitativos: Cualitativos:
Doble inmunodifusi Doble inmunodifusi n n
Inmunoelectroforesis en contracorriente Inmunoelectroforesis en contracorriente
Cuantitativos Cuantitativos
Inmunodifusi Inmunodifusi n radial n radial
Inmunoelectroforesis Inmunoelectroforesis rocket rocket
M M todos anal todos anal ticos basados en la ticos basados en la inmunoprecipitaci inmunoprecipitaci n n
15
Fundamento de la doble Fundamento de la doble
inmunodifusi inmunodifusi n n
Antgeno Anticuerpo
Inmunoprecipitado
16
Inmunodifusi Inmunodifusi n nradial radial
Patr Patr n 1 n 1
Patr Patr n 2 n 2
Patr Patr n 3 n 3
Patr Patr n 4 n 4
Patr Patr n 5 n 5
Problema Problema
Inmunoelectroforesis Inmunoelectroforesis
+
-
+
-
rocket rocket
contracorriente contracorriente
17
Funciones biol Funciones biol gicas de los gicas de los
anticuerpos anticuerpos
1. Neutralizacin
Principales funciones efectoras de los anticuerpos: Principales funciones efectoras de los anticuerpos:
2. Opsonizacin
3. Fijacin y activacin
del complemento
18
1. Neutralizaci 1. Neutralizaci n: n:
Toxinas Toxinas
Bacterias Bacterias
Virus Virus
Anticuerpos neutralizantes
Anticuerpos neutralizantes,
que bloquean su infectividad
Aglutinndolas y
bloqueando su movilidad
Las bacterias que poseen
cpsula o envoltorio se
resisten a ser fagocitadas
por los neutrfilos
La unin de anticuerpos anticuerpos a la
cpside bacteriana permite se
una al anticuerpo (regin Fc) la
protena del complemento C3b
2. 2. Opsonizaci Opsonizaci n n: : facilitan la fagocitosis facilitan la fagocitosis
19
Las bacterias as
sealizadas son
fagocitadas por los
neutrfilos e
incorporadas a los
fagolisosomas
La generacin de especies
reactivas de O
2
en el
interior del fagolisosoma
lleva a la destruccin de la
bacteria
Generacin de ROS por sistemas
enzimticos (NADPH oxidasa)
que reducen el O
2
Fagocitosis de bacterias Fagocitosis de bacterias
20
3. Fijaci 3. Fijaci n y activaci n y activaci n del complemento: n del complemento:
C3 C3
C5 C5
C5b C5b
C5a C5a
C3b C3b
Lisis de un paramecio mediada por anticuerpos y complemento Lisis de un paramecio mediada por anticuerpos y complemento
21
Principales funciones efectoras de los anticuerpos
IgG
Distribuci Distribuci n de las inmunoglobulinas en el organismo n de las inmunoglobulinas en el organismo
IgM
IgA
IgG, IgE
22
IgE
0,03mg/100ml
IgG
1250mg/100ml
IgA
210mg/100ml
IgM
150mg/100ml
IgD
3mg/100ml
IgG IgG 1000 1000- -1500 1500 mg mg/dl /dl
IgA IgA 250 250- -300 300 mg mg/dl /dl
IgM IgM 100 100- -150 150 mg mg/dl /dl
IgD IgD 0,3 0,3- -30 30 mg mg/dl /dl
IgE IgE 1,5 1,5- -200 200 g/dl g/dl
Abundancia relativa de las inmunoglobulinas en el plasma humano Abundancia relativa de las inmunoglobulinas en el plasma humano
Extravasaci Extravasaci n de las inmunoglobulinas a otros fluidos biol n de las inmunoglobulinas a otros fluidos biol gicos gicos
Transporte a Transporte a
trav trav s de epitelios s de epitelios
Transporte a Transporte a
trav trav s de placenta s de placenta
Difusi Difusi n al espacio n al espacio
extravasal extravasal
23
IgA
Receptor
poli-Ig
Superficie
luminal
Vescula
de transporte
Superficie
luminal
Componente
secretor
IgA secretada
Transporte de Transporte de
las las IgA IgA a trav a trav s s
de epitelios de epitelios