GLUCOSILACIN NO

ENZIMATICA DE
PROTEINAS
QFB BENJAMIN MALDONADO
DEL MORAL
DIPLOMADO DE QUIMICA
CLINICA
Glucosilacin
Desde el punto de vista qumico, la
glucosilacin se define como la reaccin de
GRUPOS AMINO PRIMARIOS de
aminocidos, pptidos y protenas con el
GRUPO CARBONILO de los azcares
reductores
A lo largo de la reaccin
Se conocen tres etapas:
Asociacin del azcar con la protena.
Formando un compuesto denominado base de Schiff
La estructura de este compuesto se reordena hacia
una forma ms estable producto de Amadori
Esto sufre una serie de transformaciones que
conduce a la formacin de compuestos coloreados y/o
fluorescentes
Reaccin de glucosilacin
La aparicin de estos compuestos esta
determinada por la concentracin de azcares
reductores.
Por el tiempo de exposicin de la protena a
los mismos.
Vida media de las protenas
En protenas de recambio rpido, el proceso de
glucosilacin no supera la la formacin de la
base de Schiff
Vida media larga de las protenas
Se forman productos de glucosilacin
avanzada.
A.-Formacin de bases de Schiff
B.- Reordenamiento de Amadori
C.- Formacin de derivados con estructurales
imidazlica
C.- Formacin de estructuras pirrlica
D.- Diversas ( iminas, furanos, piridinas etc .)
Caractersticas de las especies
reactivas
La glucosa es el azcar reductor ms
abundante en el organismo.
Su concentracin en la sangre est sometido a
un cuidadoso mecanismo de regulacin en
individuos sanos.
En personas que tienen Diabetes aumenta
considerablemente.
Facilita que participe en las reacciones de
glucosilacin no enzimtica
Grupo carbonilo libre
Reacciona con cualquier azcar que posee un grupo
carbonilo libre puede reaccionar con los grupos
AMINO PRIMARIOS de las protenas para formar
las bases de Schiff.

Se sabe que la forma abierta o extendida de los
azcares no es muy estable ( 0.002 % ).

Las molculas de azcar consiguen estabilizarse a
travs de un equilibrio y por lo menos dos formas
cerradas ( enmeros cclicos) el grupo carbonilo ha
desaparecido.
Azcares reductores en el interior de
la clula
Poseen mayor capacidad glucocilante (abierta)

Los aminocidos contienen un grupo amino
primario y un grupo craboxilo as como una
cadena lateral de cada aminocido.

Al formarse una protena se produce la
reaccin entre el grupo carboxilo del primer
aminocido y el grupo amino del siguiente

Azcares reductores en el interior de
la clula
En la glucosilacin no enzimtica el grupo
amino terminal es el ms reactivo.
Seguido de grupo amino de la cadena lateral de
la lisina.
Menor reactividad el grupo guanidinio de los
residuos de arginina.

( Okitani et al, 1984 )
Equilibrio termodinmico
Una vez que el azcar reductor se pone en
contacto con los grupos amino primario de las
protenas.
Se forma la base de Shiff transcurre
rpidamente en pocas horas alcaza el
equilibrio termodinmico.
Mientras que para los productos de Amadori,
el equilibrio se alcanza entre 2 y 4 semanas.
( Lee y Cerami,1992)
Protenas de bajo recambio
( vida media larga)
Ejemplo el colgeno, origina una serie de
productos denominados productos de
glucosilacin avanzada ( AGE ) .

AGE por advanced Glycosylation End-
products ).

( Vlasssara et al., 1984 )
Productos de glucosilacin avanzada
Se ha confirmado la presencia de AGEs in
vivo:
Protenas plasmticas
Tejido conectivo
Se utilizan anticuerpos especficos dirigidos
contra estos productos
( Mikita et al 1992 )
Disminucin de la actividad biolgica de algunos sistemas
enzimticos donde grupos amino participan en el proceso de
ctalisis.

Kowluru et al 1989 ( calmodulina )

Taniguchi et, al., 1989 ( la superoxido dismutasa )
.
Srivastava et, al., 1989 la aldolasa reductasa se observ que la
glicacin produce aumento de su actividad.

Gonzalez Flecha 1999 estudio la bomba de Ca 2+ en
eritrocitos humanos
Modificaciones de la actividad
enzimtica
Su concentracin
Inducen diversos estmulos y provocar alteraciones de
procesos importantes:
Procesos de contraccin muscular
Expresin gnetica
Diferenciacin celular
Secrecin
Varias funciones neuronales
( Carafoli y Kee, 1999 )
La calmodulina
Se reconoce como principal mediador a los
estmulos regulados por Ca2+.


Su alteracin traira graves consecuencias en la
clulas
La superxido dismutasa
Que desempea un papel importe en los
mecanismos de defensa frente a los radicales
libres del oxgeno.


Al inhibirse por glicacin podra incrementar
el efecto nocivo de los radicales libres.
Diabticos descompensados
Glucosa elevada
Falta insulina o de sensibilidad de los receptores celulares para
esta hormona

Hace que las clulas musculares y del tejido adiposo, que son
las que consumen la glucosa.

El resto de las clulas que no necesitan insulina para que la
glucosa ingrese a la clula se encuentran con niveles
intracelulares de glucosa esto favorece la GLUCOSILACIN
de protenas intra y extracelulares ( Brownlee , 1995 )
Protenas de vida media corta
Protenas plasmticas y las presentes en las
clulas que son rpidamente reemplazadas
como los glbulos rojos.
Alcanzan a formar bases de Shiff o productos
de Amadori.
Se ha encontrado que estos compuestos estn
asociados al desarrollo de patologas
vasculares y renales
( Cohen et al., 1995 y 1996 )
Protenas de bajo recambio
Colgeno
Mielina
La protena del cristalino ocular

Pueden llegar a transformarse en productos de
glucosilacin avanzada (AGEs ).

( Brownlle 1995 )

AGEs diversas patologas
Tres mecanismos generales.
1.- La modificacin de protenas estructurales
que se encuentran fuera de la clula.
2.- El desencadenamiento de procesos
intracelulares a travs de la unin de
receptores extracelulares.
3.- La alteracin de protenas intracelulares
(Brwnlee 1995 )
Algunos ejemplos que permiten
visualizar estos mecanismos
El componente fundamental de la matriz extracelular
es el COLAGENO.
Localizada en las paredes arteriales y las membranas
basales de los capilares tienen contacto con protenas
plasmticas de vida media corta, albumina,
Inmunoglobulinas y las lipoprotenas de baja
densidad producen el engrosamiento, disminuyen la
flexibilidad y permeabilidad ( involucradas en el
desarrollo de enfermedades vasculares )
( Wautier y Guillausseau , 1998 )
Efecto de los AGEs
La deteccin de glucosilacin avanzada en
cerebros de individuos con enfermedad de
Alzheimer y otras patologas
neurodegenerativas , mediante anticuerpos
especficos permiti su localizacin
preferencial en placas seniles.
Postula que los AGEs inducen estrs oxidativo
con consecuente dao cerebral
( Sasaki et.al,1998 )

Efecto deletreo de los AGEs
Serian mediadores por la unin a molculas
aceptoras especficas ( familia de las
inmunoglobulinas ).
Localizadas en la superficie celular de clulas
endoteliales, monocitos, macrfagos y clulas
de msculo liso vascular.
La unin de los AGEs a estos receptores
desencadena la generacin de radicales libres
de oxgeno ( Scmidt et. al 1996 )
Efecto deletreo de los AGEs
Que modularan la funcin celular induciendo:
Procesos inflamatorios
La activacin de sistemas de eliminacin de la
protena AGE-modificada.
Los efectos de los AGEs no se restringen
exclusivamente a personas diabticas o de
edad avanzada
( Miyata et al., 1999)
Efecto deletreo de los AGEs
En personas no diabticas con deficiencia renal
se observa acumulacin plasmatica de
protenas AGE- modificadas debido a la
falla de los mecanismos responsables de la
transformacin y eliminacin de compuestos
carbonlicos altamente reactivos
( estrs carbonlico )
Miyata et al., 1999 .
Usando la aminoguanidina
Se une preferentemente a los compuestos
carbonlicos dando lugar a productos
sustituidos que no permiten el avance de la
reaccin.
La aminoguadina inhibe invitro la formacin
de productos de Glucosilacin avanzada en
colgeno.
Prevencin de la formacin de AGEs
Prevencin de la formacin de AGEs
Se administro aminoguanidina en ratas
diabticas:
Inhibe la acumulacin de productos de
glucosilacin avanzada.
As como el entrecruzamiento en el tejido
conectivo de la pared arterial
( Brownlee et al 1986 )
Prevencin de la formacin de AGEs
Actualmente la aminoguanidina se encuentra
en la tercera fase de ensayos clnicos para su
utilizacin en el tratamiento de complicaciones
renales asociadas a la diabetes
(Khalifah et al., 1999 )
Prevencin de la formacin de AGEs
Nuevas sustancias que bloquean la conversin de
productos de Amadori en AGEs
Se encuentra la amadorinas
Mecanismo diferente a la aminoguanidina.
( Khalifah etal 1999 ).
La ms potente de estas sustancias es un anlogo de
la vitamina B6 , la pirodonina los resultados son
alentadores para el tratamiento y prevencin de las
complicaciones de las personas diabticas
Glucosilacin no enzimtica de las
protenas
Es una consecuencia de mayor trascendencia
metablica que comporta la hiperglucemia
mantenida en la Diabetes mellitus.
Afecta a todas las protenas del organismo:
Mielina
Tubulina
Clulas nerviosas lo cual contribuye al
desarrollo de la neuropata