CONTROL BIOLOGICO

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Director del captulo Robert Lauwerys

27
27. CONTROL BIOLOGICO 27.1

Sumario
SUMARIO

Vito Fo y Lorenzo Alessio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27.2 Garanta de calidad David Gompertz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27.6 Metales y compuestos organometlicos P. Hoet y Robert Lauwerys . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27.8 Disolventes orgnicos Masayuki Ikeda . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27.13 Sustancias qumicas genotxicas Marja Sorsa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27.15 Pesticidas Marco Maroni y Adalberto Ferioli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27.20

Principios generales

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27.1

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

PRINCIPIOS GENERALES
PRINCIPIOS GENERALES

Vito Fo y Lorenzo Alessio

Conceptos bsicos y definiciones

En el lugar de trabajo, los mtodos de higiene industrial slo permiten determinar y controlar las sustancias qumicas aerotransportadas, mientras que otros aspectos de los problemas causados por posibles agentes ambientales nocivos para los trabajadores, como la absorcin cutnea, la ingestin y la exposicin no relacionada con el trabajo, permanecen sin detectar y, por tanto, incontrolados. El control biolgico ayuda a llenar esta laguna. El control biolgico se defini en 1980 en un seminario, patrocinado conjuntamente por la Comunidad Econmica Europea (CEE), el National Institute for Occupational Safety and Health, NIOSH y la Occupational Safety and Health Association, OSHA (Berln, Yodaiken y Henman 1984) y celebrado en Luxemburgo, como la determinacin y evaluacin de los agentes o de sus metabolitos presentes en tejidos, secreciones, excretas, aire espirado o cualquier combinacin de los mismos con objeto de evaluar la exposicin y el riesgo para la salud en comparacin con una referencia adecuada. Se trata de una actividad repetitiva, regular y preventiva destinada a la adopcin, en caso necesario, de medidas correctoras; no se debe confundir con los mtodos diagnsticos. El control biolgico es una de las tres herramientas importantes para la prevencin de enfermedades debidas a agentes txicos en el medio ambiente general o en el medio ambiente de trabajo, siendo las otras dos el control ambiental y la vigilancia de la salud. La secuencia en el posible desarrollo de estas enfermedades se puede representar esquemticamente de la forma siguiente: exposicin al agente qumico dosis interna efecto bioqumico o celular (reversible) efectos sobre la salud enfermedad. Las relaciones entre control ambiental, control biolgico, control de la exposicin y vigilancia de la salud se muestran en la Figura 27.1. Cuando una sustancia txica (una sustancia qumica industrial, por ejemplo) est presente en el ambiente de trabajo, contamina el aire, el agua, los alimentos o las superficies en contacto con la piel; la cantidad de agente txico en estos medios se evala mediante el control ambiental.

Como consecuencia de la absorcin, distribucin, metabolismo y excrecin, una cierta dosis interna del agente txico (la cantidad neta de un contaminante absorbida o que pasa a travs del organismo en un intervalo de tiempo especfico) pasa al organismo y puede detectarse en los fluidos corporales. Como consecuencia de su interaccin con un receptor situado en el rgano crtico (el rgano que, en condiciones especficas de exposicin, muestra el efecto adverso primero o ms importante), se producen acontecimientos bioqumicos y celulares. Tanto la dosis interna como los acontecimientos bioqumicos y celulares desencadenados se pueden determinar mediante el control biolgico. La vigilancia de la salud fue definida en el citado seminario de la CEE/NIOSH/OSHA de 1980 como la exploracin mdico-fisiolgica peridica de los trabajadores expuestos con objeto de proteger la salud y prevenir la enfermedad. El control biolgico y la vigilancia de la salud forman parte de un todo que puede abarcar desde la determinacin de agentes o de sus metabolitos en el organismo mediante la evaluacin de sus efectos bioqumicos o celulares, hasta la deteccin de signos de alteracin precoz y reversible del rgano crtico. La deteccin de la enfermedad establecida queda fuera del alcance de estas evaluaciones. El control biolgico se puede dividir en: (a) control de la exposicin y (b) control del efecto, para lo cual se utilizan, respectivamente, indicadores de dosis interna y de efecto. El objetivo del control biolgico de la exposicin es la evaluacin del riesgo para la salud mediante la valoracin de la dosis interna, realizando un clculo de la cantidad corporal biolgicamente activa de la sustancia qumica en cuestin. Trata de garantizar, pues, que la exposicin del trabajador no alcanza niveles que puedan desencadenar efectos adversos. Un efecto se denomina adverso si existe una alteracin de la capacidad funcional, una disminucin de la capacidad para compensar problemas adicionales, una disminucin de la capacidad para mantener la homeostasis (un estado estable de equilibrio) o un aumento de la sensibilidad a otros factores ambientales. Dependiendo de la sustancia qumica y del parmetro biolgico analizado, el trmino dosis interna puede tener diferentes significados (Bernard y Lauwerys 1987). En primer lugar, puede significar la cantidad de una sustancia qumica recientemente absorbida, por ejemplo, durante un solo turno de trabajo. A tal

Objetivos del control biolgico

Figura 27.1 Relacin entre control medioambiental, biolgico y de la exposicin y vigilancia de la salud.

Fuente

Medio expuesto CONTROL MEDIOAMBIENTAL

Dosis interna

Dosis diana

Efecto bioqumico o celular

Efecto adverso (reversible) sobre la salud

Enfermedad

CONTROL BIOLOGICO

CONTROL DE LA EXPOSICION VIGILANCIA DE LA SALUD

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Principales mtodos de control

El control biolgico de la exposicin se basa en la determinacin de indicadores de dosis interna mediante la medida de: la cantidad de sustancia qumica a la que est expuesto el trabajador en sangre u orina (raramente en leche, saliva o grasa); la cantidad de uno o ms metabolitos de la sustancia qumica en los mismos lquidos corporales; la concentracin de compuestos orgnicos voltiles (disolventes) en el aire alveolar; la dosis biolgicamente eficaz de los compuestos que han formado aductos con el ADN o con otras grandes molculas y que, por tanto, poseen un efecto genotxico potencial; Se comentan seguidamente los factores que afectan a la concentracin de la sustancia qumica y de sus metabolitos en sangre y en orina. En lo que se refiere a la concentracin en el aire alveolar, adems del nivel de exposicin ambiental, los factores implicados ms importantes son la solubilidad y el metabolismo de la sustancia inhalada, la ventilacin alveolar, el gasto cardaco y la duracin de la exposicin (Brugnone y cols. 1980). La utilizacin de aductos de ADN y hemoglobina para el control de la exposicin humana a sustancias con potencial cancergeno es una tcnica muy prometedora para la determinacin de exposiciones de bajo nivel. (Es preciso sealar, no obstante, que no todas las sustancias qumicas que se unen a macromolculas del organismo humano son genotxicas, es decir, potencialmente cancergenas.) La formacin de aductos slo es un paso en el complejo proceso de la carcinognesis. Otros acontecimientos celulares, como la promocin de la reparacin del ADN y la progresin, modifican sin lugar a dudas el riesgo de desarrollo de enfermedades como el cncer. Por tanto, en el momento actual, las determinaciones de aductos se deben considerar limitadas al control de la exposicin a sustancias qumicas. Esto se examina

la exposicin durante un perodo prolongado; la exposicin como consecuencia de la movilidad del trabajador en el medio ambiente de trabajo; la absorcin de una sustancia por varias vas, incluida la cutnea; la exposicin global como consecuencia de diferentes fuentes de contaminacin, tanto en el trabajo como fuera de l; la cantidad de sustancia absorbida por el sujeto dependiendo de factores distintos del grado de exposicin, como son el esfuerzo fsico requerido por el trabajo, la ventilacin o el clima la cantidad de sustancia absorbida por el sujeto depe;ndiendo de factores individuales que pueden influir en la farmacocintica del agente txico en el organismo, como la edad, el sexo, las caractersticas genticas o el estado funcional de los rganos en que la sustancia txica experimenta biotransformacin y eliminacin. A pesar de estas ventajas, el control biolgico todava presenta en la actualidad considerables limitaciones, las ms significativas de las cuales son las siguientes: El nmero de sustancias que se pueden controlar biolgicamente es bastante pequeo. En caso de exposicin aguda, el control biolgico slo ofrece informacin til sobre la exposicin a sustancias que se metabolizan rpidamente, por ejemplo disolventes aromticos. El significado de los indicadores biolgicos no se ha definido claramente; por ejemplo, no siempre se sabe si los niveles de una sustancia medidos en material biolgico reflejan una exposicin actual o acumulativa (p. ej., cadmio y mercurio urinarios). En general, los indicadores biolgicos de dosis interna permiten evaluar el grado de exposicin, pero no proporcionan datos determinantes de la cantidad real presente en el rgano crtico. A menudo no se conocen las interferencias que en el metabolismo de la sustancia controlada puedan ejercer otras

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27. CONTROL BIOLOGICO

efecto, se puede determinar la concentracin del contaminante en el aire alveolar o en la sangre durante el propio turno de trabajo o al da siguiente (las muestras de sangre o de aire alveolar se pueden tomar hasta 16 horas despus de terminado el perodo de exposicin). En segundo lugar, en caso de que la sustancia qumica tenga un semiperodo biolgico prolongado por ejemplo, metales en el torrente sanguneo, la dosis interna puede significar la cantidad absorbida durante un perodo de varios meses. En tercer lugar, el trmino puede significar tambin la cantidad de sustancia qumica almacenada. En este caso representa un indicador de acumulacin que estima la concentracin de la sustancia qumica en rganos o tejidos de los que, una vez depositado, se libera lentamente. Por ejemplo, las determinaciones de DDT o de PCB en sangre pueden ofrecer esa estimacin. Por ltimo, la dosis interna puede indicar la cantidad de sustancia qumica existente en el lugar donde sta ejerce sus efectos, ofreciendo as informacin sobre la dosis biolgica eficaz. En este sentido, una de sus utilidades ms prometedoras e importantes es, por ejemplo, la determinacin de aductos formados por sustancias qumicas txicas con la protena de la hemoglobina o con el ADN. El control biolgico de los efectos trata de identificar las alteraciones precoces y reversibles que aparecen en el rgano crtico y que, al mismo tiempo, permiten identificar a los sujetos con signos de efectos secundarios adversos. En este sentido, representa la principal herramienta para la vigilancia de la salud de los trabajadores.

con mayor detenimiento en el artculo Sustancias qumicas genotxicas, dentro de este mismo captulo. El control biolgico de los efectos se realiza mediante la determinacin de indicadores de efecto, es decir, aqullos que pueden identificar alteraciones precoces y reversibles. Con este mtodo se obtiene una estimacin indirecta de la cantidad de sustancia qumica unida a los puntos de accin y se pueden evaluar las alteraciones funcionales en el rgano crtico en una fase precoz. Por desgracia, slo cabe resear algunos ejemplos de aplicacin de este mtodo, a saber: (1) la inhibicin de la pseudocolinesterasa por los insecticidas rganofosforados, (2) la inhibicin de la -dehidratasa del cido aminolevulnico (ALA-D) por el plomo inorgnico, y (3) el aumento de la excrecin urinaria de cido d-glucrico y de las porfirinas en los sujetos expuestos a sustancias qumicas inductoras de enzimas microsomales y/o a agentes porfirognicos (p. ej., hidrocarburos clorados).

Ventajas y limitaciones del control biolgico

En relacin con las sustancias que producen el efecto txico despus de penetrar en el organismo humano, el control biolgico permite una evaluacin ms centrada y focalizada del riesgo para la salud que el control ambiental. Un parmetro biolgico que refleje la dosis interna permite comprender los efectos adversos sistmicos un poco mejor que cualquier determinacin ambiental. El control biolgico ofrece numerosas ventajas sobre el control ambiental y, en particular, permite la evaluacin de:

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sustancias exgenas a las que el organismo est expuesto simultneamente en el medio ambiente general y de trabajo. No siempre se conocen suficientemente las relaciones existentes entre los niveles de exposicin ambiental y los niveles de los indicadores biolgicos, por una parte, y entre los niveles de los indicadores biolgicos y sus posibles efectos sobre la salud, por otra. El nmero de indicadores biolgicos para los que existen ndices biolgicos de exposicin (BEI) es bastante limitado. Se precisa informacin de seguimiento para determinar si una sustancia que actualmente se considera incapaz de producir un efecto adverso puede ser considerada como peligrosa en el futuro. El BEI suele corresponder al nivel de agente que comunmente puede obtenerse en un especimen tomado en un trabajador sano, que haya estado expuesto a niveles ambientales, de dicho agente, iguales al valor TLV-TWA.

Dado que no todos los individuos de un grupo reaccionan de la misma manera, es necesario examinar la relacin dosis-respuesta, en otras palabras, la forma en que el grupo responde a la exposicin, evaluando la aparicin del efecto en comparacin con la dosis interna. El trmino respuesta indica el porcentaje de sujetos del grupo que muestran una variacin cuantitativa especfica en un indicador de efecto para cada dosis.

Aplicaciones prcticas del control biolgico

Informacin requerida para el desarrollo de mtodos y criterios para la seleccin de pruebas biolgicas

Para la programacin del control biolgico se requieren las siguientes condiciones bsicas: conocimiento del metabolismo de una sustancia exgena en el organismo humano (toxicocintica); conocimiento de las alteraciones que se producen en el rgano crtico (toxicodinmica); existencia de indicadores; existencia de mtodos analticos suficientemente exactos; posibilidad de empleo de muestras biolgicas de fcil obtencin en las que se puedan medir los indicadores; existencia de relaciones dosis-efecto y dosis-respuesta y conocimiento de las mismas; validez de prediccin de los indicadores. En este contexto, la validez de una prueba es el grado en que el parmetro considerado predice la situacin tal como realmente es (es decir, tal como la mostraran instrumentos de medicin ms exactos). La validez est determinada por la combinacin de dos propiedades: sensibilidad y especificidad. Si una prueba posee una elevada sensibilidad, proporcionar pocos falsos negativos; si posee una especificidad elevada, proporcionar pocos falsos positivos (CCE 1985-1989).

La aplicacin prctica de un programa de control biolgico requiere informacin sobre: (1) el comportamiento de los indicadores utilizados en relacin con la exposicin, especialmente de los relativos al grado, la continuidad y la duracin de la exposicin, (2) el intervalo entre el fin de la exposicin y la medicin de los indicadores, y (3) los factores fisiolgicos y patolgicos distintos a la exposicin que pueden alterar los niveles de los indicadores. En los artculos siguientes se describe el comportamiento de diversos indicadores biolgicos de dosis y efecto utilizados para controlar la exposicin profesional a sustancias ampliamente utilizadas en la industria. Se evalan la utilidad prctica y los lmites de cada sustancia, prestando particular atencin al momento del muestreo y a los factores de interferencia. Tales consideraciones sern tiles al establecer criterios para la seleccin de una prueba biolgica.

Momento del muestreo

Para seleccionar el momento del muestreo es preciso tener en cuenta los diferentes aspectos cinticos de la sustancia qumica; en particular, hay que conocer su absorcin por los pulmones, el tracto gastrointestinal y la piel, su distribucin posterior a los distintos compartimientos del organismo, su biotransformacin y, finalmente, su eliminacin. Tambin es importante saber en qu lugares del organismo se puede acumular. Con respecto a la exposicin a sustancias orgnicas, el momento de recogida de las muestras biolgicas es lo ms importante, dada la diferente velocidad de los procesos metablicos implicados y, en consecuencia, la excrecin ms o menos rpida de la dosis absorbida.

Factores de interferencia

Relacin entre exposicin, dosis interna y efectos

El estudio de la concentracin de una sustancia en el medio ambiente de trabajo y la determinacin simultnea de los indicadores de dosis y efecto en los sujetos expuestos permite obtener informacin acerca de la relacin entre exposicin en el trabajo y concentracin de la sustancia en muestras biolgicas, y entre esta ltima y los efectos precoces de la exposicin. El conocimiento de las relaciones entre la dosis de una sustancia y el efecto que produce es un requisito esencial para poner en marcha un programa de control biolgico. La evaluacin de esta relacin dosis-efecto est basada en el anlisis del grado de asociacin existente entre el indicador de dosis y el indicador de efecto, y en el estudio de las variaciones cuantitativas de este ltimo ante cualquier variacin del indicador de dosis. (Vase tambin el captulo Toxicologa, donde se debaten con mayor detenimiento las relaciones vinculadas con la dosis.) Mediante el estudio de la relacin dosis-efecto es posible identificar la concentracin de la sustancia txica para la que el indicador de efecto supera los valores considerados actualmente como no nocivos. Adems, de esta forma tambin sera posible determinar el nivel sin efecto.
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La utilizacin correcta de los indicadores biolgicos requiere un conocimiento exhaustivo de aquellos factores que, aunque independientes de la exposicin, pueden afectar a los niveles de los indicadores biolgicos. Los tipos ms importantes de factores de interferencia son los siguientes.(Alessio, Berlin y Fo 1987). Factores fisiolgicos, tales como la dieta, el sexo, y la edad, por ejemplo, pueden influir en los resultados. El consumo de pescado y mariscos puede aumentar los niveles de arsnico en orina y de mercurio en sangre. Los valores de la protoporfirina eritrocitaria son significativamente mayores en las mujeres que en los varones con los mismos niveles sanguneos de plomo. Los niveles de cadmio urinario aumentan con la edad. Entre los hbitos personales que pueden distorsionar los niveles de los indicadores son particularmente importantes el consumo de tabaco y el de alcohol. El tabaquismo puede ocasionar la absorcin directa de sustancias presentes de forma natural en las hojas del tabaco (p. ej., cadmio), o de contaminantes presentes en el medio ambiente de trabajo que se han depositado en los cigarrillos (p. ej., plomo), o de productos de combustin (p. ej., monxido de carbono). El consumo de alcohol puede influir en los niveles de los indicadores biolgicos, ya que en las bebidas alcohlicas estn presentes de forma natural sustancias como el plomo. Los grandes bebedores, por ejemplo, muestran niveles sanguneos de plomo superiores a los de sujetos control. La ingestin de alcohol puede interferir con la biotransformacin y la eliminacin de

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compuestos industriales txicos; con una dosis nica, el alcohol puede inhibir el metabolismo de numerosos disolventes, como el tricloroetileno, el xileno, el estireno y el tolueno, por su competitividad con las enzimas esenciales tanto para la metabolizacin del etanol como de los disolventes. La ingestin regular de alcohol puede afectar tambin al metabolismo de los disolventes en forma totalmente distinta, acelerando el metabolismo de los mismos, posiblemente por induccin del sistema oxidante de los microsomas. Dado que el etanol es la principal sustancia capaz de producir interferencia metablica, es aconsejable determinar los indicadores de exposicin a disolventes slo en aquellos das en los que no se ha consumido alcohol. Se dispone de menos datos acerca de los posibles efectos de los frmacos sobre los niveles de los indicadores biolgicos. Se ha demostrado que la aspirina puede interferir en la transformacin biolgica de xileno en cido metilhiprico, y que el fenilsalicilato, frmaco muy utilizado como analgsico, puede aumentar de forma significativa los niveles urinarios de los fenoles. El consumo de anticidos con aluminio puede elevar los niveles plasmticos y urinarios de este metal. Se han observado diferencias marcadas en distintos grupos tnicos en cuanto al metabolismo de disolventes muy utilizados, como el tolueno, el xileno, el tricloroetileno, el tetracloroetileno y el metilcloroformo. Estados patolgicos adquiridos pueden modificar los niveles de los indicadores biolgicos. El rgano crtico puede comportarse de forma anmala con respecto a las pruebas de control biolgico, debido tanto a la accin especfica del agente txico como a otras razones. Un ejemplo de situaciones del primer tipo es el comportamiento de los niveles urinarios de cadmio: cuando se produce una enfermedad tubular causada por el cadmio, la excrecin urinaria aumenta mucho y los niveles de la prueba ya no reflejan el grado de exposicin. Un ejemplo del segundo tipo de situacin es el aumento de los niveles de protoporfirina eritrocitaria observado en los sujetos con dficit de hierro y sin absorcin anormal de plomo. Modificaciones fisiolgicas de los medios biolgicos la orina, por ejemplo, en los que se basan las determinaciones de los indicadores biolgicos, pueden modificar los valores de la prueba. Con fines prcticos, slo es posible obtener muestras puntuales de orina de los individuos durante el trabajo, y dado que la densidad de estas muestras puede variar, significa que los niveles del indicador pueden fluctuar mucho en el curso de un slo da. Para obviar esta dificultad es aconsejable eliminar las muestras excesivamente diluidas o concentradas, segn unos valores de densidad relativa o de creatinina seleccionados. En particular, se debe desechar la orina con una densidad relativa inferior a 1.010 o superior a 1.030, o con una concentracin de creatinina inferior a 0,5 g/l o superior a 3,0 g/l. Diversos autores proponen tambin ajustar los valores de los indicadores de acuerdo con la densidad relativa o expresar esos valores de acuerdo con el contenido urinario de creatinina. Los cambios patolgicos en los medios biolgicos tambin afectan considerablemente a los valores de los indicadores biolgicos. Por ejemplo, en los sujetos anmicos expuestos a metales (mercurio, cadmio, plomo, etc.), los niveles sanguneos del metal pueden ser inferiores a los que seran de esperar de acuerdo con la exposicin; ello es debido al bajo nmero de eritrocitos existentes para transportar el metal txico por la circulacin sangunea. Por tanto, cuando las determinaciones de sustancias txicas o de sus metabolitos unidos a los eritrocitos se realizan en sangre total, siempre es aconsejable determinar el hematcrito, que proporciona una medida del porcentaje de clulas sanguneas en la sangre total.

Exposicin combinada a varias sustancias txicas presentes en el lugar de trabajo

Utilizacin prctica de los indicadores biolgicos

Los indicadores biolgicos se pueden utilizar en la prctica de la salud en el trabajo, con varios fines: (1) el control peridico de trabajadores individuales, (2) el anlisis de la exposicin de un grupo de trabajadores y (3) evaluaciones epidemiolgicas. Las pruebas utilizadas deben presentar las caractersticas de precisin, exactitud, buena sensibilidad y especificidad, a fin de reducir el posible nmero de falsas interpretaciones.

Valores de referencia y grupos de referencia

Un valor de referencia es el nivel de un indicador biolgico en la poblacin general no expuesta profesionalmente a la sustancia txica en estudio. Es necesario referirse a estos valores para comparar los datos obtenidos mediante los programas de control biolgico en una poblacin supuestamente expuesta. Los valores de referencia no se deben confundir con los valores lmites, que en general son los valores legales o directrices de exposicin profesional y ambiental (Alessio y cols. 1992). Cuando hay que comparar los resultados de los anlisis de grupos, es preciso conocer la distribucin de los valores en el grupo de referencia y en el grupo de estudio, porque slo entonces es posible hacer una comparacin estadstica. En estos casos, resulta esencial conseguir que la poblacin general (grupo de referencia) y el grupo expuesto sean homogeneos, con caractersticas similares en cuanto al sexo, edad, forma de vida y hbitos alimenticios. Para obtener valores de referencia fiables, es preciso asegurarse de que los sujetos que constituyen el grupo de referencia nunca hayan estado expuestos a las sustancias txicas, ya sea profesionalmente o debido a condiciones particulares de contaminacin ambiental. Al evaluar la exposicin a sustancias txicas se ha de tener cuidado para no incluir sujetos que, aunque no estn expuestos directamente a ellas, trabajen en el mismo lugar de trabajo, puesto que si, de hecho, tales sujetos estn sometidos en realidad a una exposicin indirecta, existe la posibilidad de que se infravalore la exposicin del grupo.
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27. CONTROL BIOLOGICO

En el caso de exposicin combinada a varias sustancias txicas presentes en el lugar de trabajo, se pueden producir interferencias metablicas que alteren el comportamiento de los indicadores biolgicos, creando as graves problemas de interpretacin. En los estudios en seres humanos se han demostrado interferencias, por ejemplo, en la exposicin combinada a tolueno y xileno, xileno y etilbenceno, tolueno y benceno, hexano y metil etil cetona, y tetracloroetileno y tricloroetileno. En particular, es preciso sealar que, cuando est inhibida la biotransformacin de un disolvente, la excrecin urinaria de su metabolito est reducida (posible infravaloracin del riesgo), mientras que los niveles del disolvente en sangre y en aire espirado aumentan (posible sobrevaloracin del riesgo). Por tanto, en las situaciones en que es posible medir simultneamente las sustancias y sus metabolitos para determinar el grado de interferencia inhibitoria, sera til comprobar si los niveles de los metabolitos urinarios son inferiores a lo esperado y, al mismo tiempo, si la concentracin de los disolventes en sangre y/o aire espirado es superior. Se han descrito interferencias metablicas para exposiciones combinadas en que las sustancias individualmente estn presentes en niveles prximos, y en ocasiones inferiores, a los valores lmites habitualmente aceptados. Sin embargo, no suelen ocurrir estas interferencias cuando los niveles de exposicin a cada sustancia presente en el lugar de trabajo es baja.

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Otra prctica que se ha de evitar, aunque todava est muy extendida, es la utilizacin, con fines de referencia, de valores descritos en la literatura procedentes de listas de casos de otros pases y que pueden haber sido recogidos en regiones en las que existen diferentes situaciones de contaminacin ambiental.

Control peridico de trabajadores individuales

Es obligatorio el control peridico de trabajadores individuales cuando los niveles de la sustancia txica en la atmsfera del medio ambiente de trabajo se aproximan al valor lmite. Siempre que sea posible, es aconsejable comprobar simultneamente un indicador de exposicin y un indicador de efecto. Los datos as obtenidos deben compararse con los valores de referencia y con los valores lmites propuestos para la sustancia en estudio (ACGIH 1993).

Anlisis de un grupo de trabajadores

Es obligatorio el anlisis de un grupo cuando los resultados de los indicadores biolgicos utilizados pueden acusar el efecto de factores independientes de la exposicin (dieta, concentracin o dilucin de la orina, etc.) y para los que existe una amplia gama de valores normales. Para que el estudio del grupo proporcione resultados tiles, ste debe ser lo bastante numeroso y homogneo en cuanto a la exposicin, el sexo y, en el caso de algunos agentes txicos, la antigedad en el trabajo. Cuanto ms constantes sean los niveles de exposicin a lo largo del tiempo, ms fiables sern los datos. Una investigacin realizada en un lugar de trabajo donde los trabajadores cambien permanentemente de departamento o de trabajo tiene poco valor. Para la evaluacin correcta de un estudio de grupo no basta con expresar los datos slo como valores medios y valores lmites. Tambin es preciso tener en cuenta la distribucin por frecuencia de los valores del indicador biolgico en cuestin.

indeseable; en ausencia de datos suficientes, cualquier perturbacin ser considerada indeseable. Es preciso valorar las implicaciones legales y reglamentarias de este tipo de informacin. Por tanto, hay que buscar el debate y el consenso sociales acerca del modo de utilizar los indicadores biolgicos. En otras palabras, hay que educar a los trabajadores, las empresas, las comunidades y los responsables de la formulacin de polticas acerca del significado de los resultados obtenidos por el control biolgico, para que nadie se sienta indebidamente alarmado o satisfecho. Debe mantenerse una comunicacin adecuada con el individuo al que se ha realizado la prueba en lo que respecta a los resultados y a su interpretacin. Adems, hay que comunicar claramente a todos los participantes si la utilizacin de algunos indicadores es experimental o no. El Cdigo internacional de tica para los profesionales de la salud en el trabajo, presentado por la Comisin Internacional de Medicina del Trabajo en 1992, establece que las pruebas biolgicas y las dems investigaciones deben elegirse desde el punto de vista de su validez para la proteccin de la salud del trabajador implicado, teniendo en cuenta debidamente su sensibilidad, su especificidad y su valor predictivo. No deben realizarse pruebas que no sean fiables o que no posean un valor predictivo suficiente en relacin con los requisitos de la tarea del trabajador. (Vase el captulo Aspectos ticos, que profundiza en el debate y recoge el texto del Cdigo.)

Tendencias normativas y prcticas

Evaluaciones epidemiolgicas

Los datos obtenidos del control biolgico de grupos de trabajadores se pueden utilizar tambin en estudios epidemiolgicos transversales o prospectivos. Los estudios transversales permiten comparar las situaciones existentes en diversos departamentos de la fbrica o en diferentes industrias y trazar mapas de riesgo de los procesos de fabricacin. Hay que contar con la dificultad derivada de que los controles de calidad entre laboratorios no estn todava lo suficientemente extendidos; por tanto, no es posible garantizar que todos ellos den resultados comparables. Los estudios prospectivos permiten evaluar el comportamiento de los niveles de exposicin a lo largo del tiempo, a fin de comprobar, por ejemplo, la eficacia de las mejoras ambientales, o correlacionar el comportamiento de los indicadores biolgicos a lo largo de los aos con el estado de salud de los sujetos sometidos al control. Los resultados de tales estudios a largo plazo son muy tiles para resolver problemas que implican cambios en el tiempo. En el momento actual, el control biolgico se utiliza principalmente para evaluar si la exposicin actual se considera segura, pero no para evaluar situaciones a lo largo del tiempo. Un nivel dado de exposicin, considerado seguro en el momento actual, puede no tener este carcter en algn momento del futuro.

El control biolgico slo se puede llevar a cabo en relacin con un nmero limitado de contaminantes ambientales, dada la limitada disponibilidad de datos de referencia adecuados. Existen, pues, importantes limitaciones a su uso para la evaluacin de la exposicin. La Organizacin Mundial de la Salud (OMS), por ejemplo, slo ha propuesto valores de referencia para el plomo, el mercurio y el cadmio, considerndolos como aquellos niveles en sangre y orina que no se acompaan de ningn efecto adverso detectable. La American Conference of Governmental Industrial Hygienists (ACGIH) ha establecido ndices biolgicos de exposicin (BEI) para 26 compuestos; los BEI se definen como valores de determinantes que son indicativos del grado de exposicin integral a las sustancias qumicas industriales (ACGIH 1995).

GARANTIA DE CALIDAD
GARANTIA DE CALIDAD

David Gompertz

Aspectos ticos

El empleo del control biolgico para la evaluacin de una potencial toxicidad plantea algunas consideraciones ticas. Uno de los objetivos que se persiguen con l es reunir suficiente informacin para decidir qu nivel de un efecto dado constituye un efecto

Tanto las decisiones que afectan a la salud, el bienestar y la capacidad de empleo de los trabajadores como el enfoque empresarial de los temas referentes a la salud y la seguridad de los mismos deben basarse en datos de buena calidad. Esta afirmacin adquiere una importancia especial en relacin con los datos de control biolgico y, por tanto, corresponde a todo laboratorio que lleve a cabo determinaciones analticas en muestras biolgicas procedentes del mundo del trabajo garantizar la fiabilidad, exactitud y precisin de sus resultados. Tal responsabilidad se extiende al empleo de mtodos adecuados para la recogida de muestras, de forma que los resultados lleguen adecuadamente al profesional sanitario responsable de la atencin al trabajador. Todas estas actividades quedan comprendidas en la expresin genrica de garanta de calidad. La actividad central en un programa de garanta de calidad es el control y mantenimiento de la exactitud y la precisin analticas. Los laboratorios de control biolgico se han desarrollado a

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menudo en un ambiente clnico y han tomado las tcnicas y los principios de la garanta de calidad de la disciplina de la qumica clnica. De hecho, las determinaciones de sustancias qumicas txicas y de los indicadores de efecto biolgico en sangre y orina no difieren en esencia de las realizadas en la qumica clnica y en los laboratorios de farmacologa clnica existentes en cualquier gran hospital. Todo programa de garanta de calidad comienza con la seleccin y el establecimiento de un mtodo adecuado. El paso siguiente es la elaboracin de un mtodo de control de calidad interno para mantener la precisin; el laboratorio necesita adems estar seguro de la exactitud del anlisis, lo que acaso exija una evaluacin externa de la calidad (vase ms adelante). Es importante advertir, con todo, que la garanta de calidad va ms all de estos aspectos de control de la calidad analtica.

Seleccin del mtodo

Existen varios textos que presentan los mtodos analticos disponibles para el control biolgico. Aunque constituyen una gua til, el analista tiene ante s un intenso trabajo si quiere conseguir datos de calidad adecuada. En cualquier programa de garanta de calidad es fundamental la elaboracin de un protocolo de laboratorio en el que se especifique con detalle todo lo relacionado con la fiabilidad, la exactitud y la precisin. De hecho, la acreditacin nacional de los laboratorios de qumica clnica, toxicologa y medicina legal suele depender de la calidad de sus protocolos. La preparacin de un protocolo adecuado exige mucho tiempo. Al establecer un mtodo nuevo, a menudo es ms rentable obtener de otro laboratorio existente un protocolo que haya demostrado ya su vala, por ejemplo, mediante validacin en un programa internacional establecido de garanta de calidad. Para aplicar una tcnica analtica especfica, como la cromatografa en fase gaseosa en lugar de la cromatografa lquida de alta resolucin, puede ser recomendable buscar otro laboratorio con un buen historial y que utilice ese mismo mtodo. Para ello puede acudirse a publicaciones existentes o a los organizadores de distintos planes nacionales de evaluacin de la calidad.

la aplicacin de la garanta de calidad. Hay que resaltar que estas tcnicas dependen de la preparacin y el anlisis de muestras de control de calidad, independientemente de las muestras de calibracin utilizadas en cada proceso analtico. Este mtodo se puede adaptar a una gama de ensayos de control biolgico o de control del efecto biolgico. Los lotes de muestras de sangre o de orina se pueden preparar aadiendo el txico o el metabolito a medir. Tambin se pueden preparar fracciones de sangre, suero, plasma u orina y conservarlas congeladas o liofilizadas para la determinacin de enzimas o de protenas. En todo caso, hay que evitar el riesgo de infeccin del analista por muestras de sangre humana. El seguimiento estricto de un protocolo concreto y de las reglas de aceptabilidad es un primer paso fundamental en cualquier programa de garanta de calidad. Todo laboratorio debe estar preparado para comentar su actuacin en cuanto al control de calidad y a la evaluacin de la calidad con los profesionales sanitarios que lo utilizan, as como para investigar los hallazgos sorprendentes o inusuales.

Evaluacin de calidad externa

Control de calidad interno

La calidad de los resultados analticos depende de la precisin del mtodo seguido en la prctica, la cual depende a su vez del seguimiento estricto de un protocolo concreto. Lo mejor para evaluar la precisin es incluir muestras de control de calidad a intervalos regulares durante una serie analtica. Si se estn practicando anlisis de plomo en sangre, por ejemplo, pueden introducirse esas muestras cada seis u ocho muestras reales de los trabajadores. Cuando los mtodos analticos son ms estables, puede reducirse el nmero de las muestras de control. En el caso del anlisis de plomo en sangre, dichas muestras se preparan a partir de 500 ml de sangre (humana o bovina), a la que se aade plomo inorgnico; luego se almacenan en fracciones individuales a baja temperatura (Bullock, Smith y Whitehead 1986). Antes de utilizar cada lote, se analizan 20 fracciones en series separadas en diferentes ocasiones para establecer el resultado medio de ese lote, as como su desviacin estndar (Whitehead 1977). Con los dos valores obtenidos se traza un diagrama de control de Shewhart (Figura 27.2). En l se representan luego los resultados del anlisis de las muestras de control de calidad incluidas en las siguientes series. El analista utiliza entonces reglas de aceptacin o de rechazo de una serie analtica, segn que los resultados de las muestras se siten dentro de dos o tres desviaciones estndar (DE) de la media. Westgard y cols. (1981) han propuesto una secuencia de reglas, validadas mediante aplicaciones informticas, para su aplicacin a las muestras de control. Este mtodo de control de calidad se describe en los libros de texto de qumica clnica; en Whitehead (1977) se muestra un mtodo sencillo para

Una vez que el laboratorio ha dejado claro que puede obtener resultados con la precisin adecuada, el siguiente paso consiste en confirmar la exactitud de los valores medidos, es decir, la aproximacin de estos con el valor real de la muestra. Resulta difcil realizarlo por los propios medios, aunque puede conseguirse participando en un plan externo de evaluacin de la calidad. Se trata de algo habitual en la prctica qumica clnica desde hace tiempo, si bien todava no se ha extendido en relacin con el control biolgico, salvo en el caso del anlisis de plomo en sangre, para el que existen planes desde el decenio de 1970 (p. ej., Bullock, Smith y Whitehead 1986). La comparacin de los resultados analticos propios con los procedentes de otros laboratorios, que hayan analizado muestras del mismo lote, permite evaluar la exactitud conseguida. Se dispone de diversos planes nacionales e internacionales de evaluacin de la calidad. Muchos de ellos acogen favorablemente la participacin de nuevos laboratorios, ya que la validez de la media de los resultados (tomada como medida de la concentracin real) aumenta con el nmero de participantes. Cuando stos son muchos, aumenta adems la capacidad para analizar la actuacin de cualquiera de ellos en relacin con su mtodo analtico y puede advertirse, por tanto, sobre posibles alternativas. En algunos pases se exige la participacin en un plan de este tipo para obtener la acreditacin como laboratorio. La OMS (1981) ha publicado directrices para el Figura 27.2 Diagrama de control de Shewhart para muestras de control de calidad.
Valor observado del control en suero + 3 SD + 2 SD

MEDIA - 2 SD - 3 SD Das

10

15

20

25

30

- +1+

2-,1) ,- 5) 7, ; 5-/741,), - - 64)*)

27.7

/)4) 61) ,- +) 1,),

27.7

27. CONTROL BIOLOGICO

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

diseo y la realizacin de planes de evaluacin de calidad externa. En ausencia de planes de ese tipo, se puede comprobar la exactitud utilizando materiales certificados de referencia, que existen en el mercado para determinados anlisis. Las muestras distribuidas por los planes de evaluacin de calidad externa tienen las ventajas siguientes: (1) el analista no conoce previamente el resultado, (2) se presentan diversas concentraciones, y (3) al no tenerse que emplear mtodos analticos definitivos, los materiales utilizados son ms baratos.

Control de calidad preanaltico

El esfuerzo dedicado a conseguir una buena exactitud y precisin en el laboratorio se pierde si las muestras no han sido recogidas en el momento adecuado, han sufrido contaminacin, se han deteriorado durante el transporte o han sido etiquetadas de forma inadecuada o incorrecta. Es rechazable asimismo la toma de muestras invasiva sin el cuidado adecuado de los materiales necesarios. Aunque la toma de muestras no suele estar bajo el control directo del analista del laboratorio, un programa completo de calidad del control biolgico debe tener en cuenta estos factores, y el laboratorio ha de cuidar de que las jeringas y los envases de muestras estn libres de contaminacin y se tengan instrucciones claras acerca de la tcnica de muestreo y la conservacin y transporte de las propias muestras. Actualmente se reconoce la importancia del momento correcto de la toma de muestras dentro del turno o de la semana de trabajo en funcin de la toxicocintica del agente evaluado y su dependencia de la toxicocintica del material (ACGIH 1993; HSE 1992); esta informacin se debe poner a disposicin de los profesionales sanitarios responsables de la recogida de las muestras.

biolgicos basados en consideraciones de salud (vase la Tabla 27.1). Uno de los problemas que plantea la determinacin precisa y exacta de los metales en los materiales biolgicos consiste en que las sustancias metlicas de inters suelen estar presentes en concentraciones muy bajas. Cuando el control biolgico adopta la forma de toma de muestras y anlisis de orina, como ocurre a menudo, se suele realizar en muestras puntuales; por tanto, suele ser aconsejable la correccin de los resultados segn la dilucin de la orina. La expresin de los resultados por gramo de creatinina es el mtodo de estandarizacin ms utilizado. Los anlisis realizados en muestras de orina demasiado diluida o demasiado concentrada no son fiables y se deben repetir.

Control de calidad postanaltico

Unos resultados analticos de buena calidad pueden tener poca utilidad para el individuo o para el profesional sanitario si no se comunican de forma interpretable y en el momento adecuado. Todo laboratorio de control biolgico debe desarrollar mtodos de informacin para alertar al profesional de atencin a la salud que haya enviado las muestras acerca de posibles resultados anormales, inesperados o sorprendentes con suficiente antelacin para que pueda emprender las acciones adecuadas. La interpretacin de los resultados, especialmente los cambios en la concentracin entre muestras sucesivas, depende a menudo del conocimiento de la precisin del ensayo. Dentro de las tareas de control de calidad global, desde la recogida de muestras hasta el envo de los resultados, los profesionales sanitarios deben recibir informacin relativa a la precisin y exactitud del laboratorio de control biolgico, as como lmites de referencia y lmites de consulta y legales, que les ayuden a interpretar los resultados.

METALES Y COMPUESTOS
ORGANOMETALICOS
METALES Y COMPUESTOS ORGANOMETALICOS

P. Hoet y Robert Lauwerys Desde hace algn tiempo se sabe que los metales y los compuestos organometlicos txicos, como el aluminio, antimonio, arsnico inorgnico, berilio, cadmio, cromo, cobalto, plomo, alquil plomo, mercurio metlico y sus sales, compuestos de mercurio orgnico, nquel, selenio y vanadio, presentan riesgos potenciales para la salud de las personas expuestas. En algunos casos se han realizado estudios epidemiolgicos sobre las relaciones existentes entre dosis interna y efecto/respuesta resultante en los trabajadores expuestos profesionalmente, lo que ha permitido proponer valores lmite
27.8

En la industria, los trabajadores pueden verse expuestos a compuestos de aluminio inorgnico por inhalacin y, posiblemente, tambin por ingestin de polvo que lo contenga. El aluminio se absorbe mal por va oral, pero su absorcin aumenta con la ingesta simultnea de citrato. La tasa de absorcin del aluminio depositado en el pulmn es desconocida; la biodisponibilidad probablemente dependa de las caractersticas fisicoqumicas de la partcula. La orina es la principal va de excrecin del aluminio absorbido. La concentracin de aluminio en el suero y en la orina est determinada tanto por la intensidad de una exposicin reciente como por la cantidad total de aluminio corporal. En las personas no expuestas por su trabajo, la concentracin srica de aluminio suele ser inferior a 1 g/100 ml y en la orina rara vez supera los 30 g/g de creatinina. En los sujetos con funcin renal normal, la excrecin urinaria de aluminio es un indicador ms sensible de exposicin que su concentracin en suero/plasma. Datos en soldadores sugieren que la cintica de la excrecin de aluminio por la orina implica un mecanismo de dos pasos, el primero con un semiperodo biolgico de unas ocho horas. En los trabajadores que han estado expuestos durante varios aos se produce una cierta acumulacin del metal en el organismo; las concentraciones de aluminio en suero y en orina son sensibles tambin a la cantidad total de aluminio corporal. El aluminio se almacena en varios compartimientos del organismo y se excreta de ellos a diferentes velocidades a lo largo de muchos aos. Tambin se ha encontrado una elevada acumulacin de aluminio en el organismo (hueso, hgado, cerebro) de pacientes con insuficiencia renal. Los pacientes sometidos a dilisis presentan riesgo de toxicidad sea y/o de encefalopata cuando su concentracin srica de aluminio supera crnicamente los 20 g/100 ml, aunque es posible detectar signos de toxicidad a concentraciones an ms bajas. La Comisin de las Comunidades Europeas ha recomendado que, para prevenir la toxicidad por aluminio, la concentracin plasmtica del mismo nunca supere los 20 g/100 ml; una cifra superior a 10 g/100 ml hace aconsejables un control y una vigilancia de la salud ms frecuentes, y una concentracin superior a 6 g/100 ml ha de ser considerada como signo de aumento excesivo de la cantidad de aluminio corporal.

Aluminio

Antimonio

El antimonio inorgnico puede penetrar en el organismo por ingestin o por inhalacin, si bien la tasa de absorcin es desconocida. Los compuestos pentavalentes absorbidos se excretan principalmente por la orina, y los compuestos trivalentes por las heces. Es posible la retencin de algunos de ellos despus de una exposicin prolongada. Las concentraciones normales de antimonio en el suero y en la orina probablemente sean inferiores a 0,1 g/100 ml y 1 g/g de creatinina, respectivamente.

-6) -5 ; +

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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Tabla 27.1 Metales: Valores de referencia y lmites biolgicos propuestos por la American Conference of Governmental Industrial Hygienists (ACGIH), Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) y Lauwerys y Hoet (L y H). Metal Aluminio Muestra Suero/plasma Orina Antimonio Arsnico Orina Orina (suma de arsnico inorgnico y metabolitos metilados) Orina Sangre Orina Cromo (compuestos solubles) Suero/plasma Orina Valores de referencia1 *
<1 g/100 ml

Lmite ACGIH (BEI) 2

Lmite DFG (BAT) 3

Lmites L y H4 (TMPC)

<30 g/g <1 g/g <10 g/g 50 g/g (fin de la semana)

200 g/l (fin de la jornada)

150 g/g (fin de la jornada) 35 g/g (fin de la jornada) 50 g/g (si TWA: 0,05 mg/m3); 30 g/g (si TWA: 0,01 mg/m3) (fin de la jornada)

Berilio Cadmio

<2 g/g <0,5 g/100 ml <2 g/g <0,05 g/100 ml <5 g/g 30 g/g (fin de la jornada, fin de la semana laboral); 10 g/g (aumenta durante el turno) 0,1 g/100 ml (fin de la jornada, fin de la semana laboral) 15 g/l (fin de la jornada laboral, fin de la semana laboral) 30 g/100 ml (no crtico) 0,5 g/100 ml (EKA)** 60 g/l (EKA)** 30 g/g (fin de la jornada laboral, fin de la semana laboral) 40 g/100 ml 30 g/g (fin de la jornada) 0,5 g/100 ml 5 g/g 1,5 g/100 ml 15 g/l 0,5 g/100 ml 5 g/g

Cobalto

Suero/plasma Sangre

<0,05 g/100 ml <0,2 g/100 ml <2 g/g <25 g/100 ml

Orina

Plomo

Sangre (plomo)

mujer <45 aos: 30 g/100 ml varn: 70 g/100 ml

ZPP en sangre

<40 g/100 ml de sangre <2,5g/g Hb <50 g/g <4,5 mg/g mujer <45 aos: 6 mg/l; varn: 15 mg/l

40 g/100 ml de sangre 3 g/g Hb 50 g/g 5 mg/g

Orina (plomo) ALA en orina

Manganeso Mercurio inorgnico

Sangre Orina Sangre

<1 g/100 ml <3 g/g <1 g/100 ml <5 g/g <0,05 g/100 ml <2 g/g <15 g/100 ml <25 g/g <0,2 g/100 ml <0,1 g/100 ml <1 g/g
3

1,5 g/100 ml (fin de la jornada, al trmino de la semana laboral) 35 g/g (previo al turno)

5 g/100 ml 200 g/l 45 g/l (EKA)**

2 g/100 ml (fin de la jornada) 50 g/g (fin de la jornada) 30 g/g

Orina Nquel (compuestos solubles) Selenio Vanadio Suero/plasma Orina Suero/plasma Orina Suero/plasma Sangre Orina

70 g/g creatinina
De DFG 1996.

50 g/g

* Los valores de orina son por gramo de creatitina. ** EKA = Equivalentes de exposicin para materiales cancergenos. 1 Los valores de referencia se han tomado con algunas modificaciones de Lauwerys y Hoet 1993. 2 De ACGIH 1996-97. 4 Concentraciones m ximas permisibles provisionales (TMPCs) tomado de Lauwerys y Hoet 1993.

- +1+

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27.9

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27.9

27. CONTROL BIOLOGICO

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Un estudio preliminar en trabajadores expuestos a antimonio pentavalente indic que una exposicin promedio ponderada en el tiempo de hasta 0,5 mg/m3 daba lugar a un aumento de la concentracin urinaria de antimonio de 35 g/g de creatinina durante el turno. El arsnico inorgnico puede penetrar en el organismo por los tractos gastrointestinal y respiratorio. El arsnico absorbido se elimina principalmente por el rin, sin modificar o tras metilacin. Tambin se excreta por la bilis en forma de complejo con glutacin. Despus de una nica exposicin oral a una dosis baja de arsenato, el 25 % y el 45 % de la dosis administrada se excreta por la orina en uno y cuatro das respectivamente. Despus de la exposicin a arsnico trivalente o pentavalente inorgnico, la excrecin urinaria est constituida en un 10 a un 20 % por arsnico inorgnico, en un 10 a un 20 % por cido monometilarsnico, y en un 60 a un 80 % por cido cacodlico. Despus de la exposicin profesional a arsnico inorgnico, la proporcin de sustancias arsenicales en la orina depende del momento del muestreo. Los rganoarsenicales presentes en los organismos marinos tambin son absorbidos fcilmente por el tracto gastrointestinal, pero se excretan sin modificar en su mayor parte. Los efectos txicos a largo plazo del arsnico (incluidos los que se producen sobre los genes) son consecuencia principalmente de la exposicin a arsnico inorgnico. Por tanto, el control biolgico pretende evaluar la exposicin a los compuestos de ste. A tal efecto, el mtodo de eleccin es la determinacin especfica de arsnico inorgnico (Asi), cido monometilarsnico (MMA) y cido cacodlico (DMA) en la orina. Con todo, puesto que el consumo de alimentos marinos podra influir en la tasa de excrecin de DMA, los trabajadores sometidos a control deben abstenerse de tomar alimentos de origen marino durante las 48 horas previas a la recogida de orina. En las personas no expuestas profesionalmente al arsnico inorgnico y que no han consumido recientemente alimentos de origen marino, la suma de estas tres sustancias arsenicales no suele superar los 10 g/g de creatinina urinaria. Es posible encontrar valores ms elevados en zonas geogrficas en las que el agua de mesa contiene cantidades importantes de arsnico. Se ha calculado que, en ausencia de consumo de alimentos marinos, una exposicin promedio ponderada en el tiempo a 50 y a 200 g/m3 de arsnico inorgnico da lugar a concentraciones urinarias medias de la suma de metabolitos (Asi, MMA, DMA) en las muestras de orina posturno de 54 y 88 g/g de creatinina, respectivamente. En el caso de exposicin a compuestos de arsnico inorgnico menos solubles (p. ej., arseniuro de galio), la determinacin de arsnico en orina reflejar la cantidad absorbida, pero no la dosis total aportada al organismo (pulmn, tracto gastrointestinal). El arsnico en el cabello es un buen indicador de la cantidad de arsnico inorgnico absorbida durante el perodo de crecimiento capilar. El arsnico orgnico de origen marino no parece ser captado por el cabello en el mismo grado que el arsnico inorgnico. La determinacin de la concentracin de arsnico a lo largo del cabello puede proporcionar informacin valiosa acerca del tiempo de exposicin y la duracin del perodo de exposicin. Sin embargo, la determinacin de arsnico en el cabello no se recomienda cuando el aire ambiente est contaminado por este compuesto, ya que no sera posible distinguir entre el arsnico endgeno y el depositado externamente. Los niveles de arsnico en los cabellos suelen ser inferiores a 1 mg/kg. El arsnico en las uas posee el mismo significado.
27.10

Al igual que con los niveles urinarios, los niveles sanguneos de arsnico pueden reflejar la cantidad de arsnico absorbida recientemente, pero todava no se ha evaluado la relacin entre la intensidad de la exposicin al arsnico y su concentracin en sangre. La va principal de captacin de berilio en las personas expuestas profesionalmente es la inhalacin. La exposicin prolongada puede dar lugar al almacenamiento de cantidades apreciables en los tejidos pulmonares y en el esqueleto, este ltimo punto de almacenamiento. La eliminacin del berilio absorbido se produce principalmente por la orina, y slo en menor cantidad por las heces. Los niveles de berilio se pueden determinar en sangre y en orina, aunque en el momento actual estos anlisis slo se utilizan como pruebas cualitativas para confirmar la exposicin al metal, ya que no se sabe hasta qu punto la concentracin de berilio en sangre y en orina puede estar influida por la exposicin reciente y por la cantidad ya almacenada en el organismo. Adems, es difcil interpretar los escasos datos publicados sobre la excrecin de berilio en los trabajadores expuestos, ya que por lo general no se ha determinado adecuadamente la exposicin externa y los mtodos analticos poseen sensibilidades y precisin diferentes. Los niveles urinarios y sricos normales de berilio probablemente sean inferiores a 2 g/g de creatinina y a 0,03 g/100 ml, respectivamente. Sin embargo, el hallazgo de una concentracin normal de berilio en la orina no es suficiente para excluir la posible exposicin al metal en el pasado. De hecho, no siempre se ha encontrado un aumento de la excrecin urinaria de berilio en los trabajadores expuestos al metal en el pasado y que posteriormente han desarrollado una granulomatosis pulmonar, enfermedad caracterizada por granulomas mltiples, es decir, ndulos de tejido inflamatorio, en los pulmones. En el ambiente laboral, la absorcin de cadmio tiene lugar principalmente por inhalacin. Sin embargo, la absorcin gastrointestinal puede contribuir tambin de forma significativa a la dosis interna de cadmio. Una caracterstica importante del cadmio es su largo semiperodo biolgico en el organismo, que supera los 10 aos. En los tejidos, se une principalmente a metaltionena. En la sangre, se une sobre todo a los eritrocitos. A la vista de la propiedad del cadmio de acumularse, todo programa de control biolgico de grupos de poblacin expuestos crnicamente a este elemento debe intentar evaluar tanto la exposicin actual como la total. Mediante activacin neutrnica, es posible actualmente realizar determinaciones in vivo de la cantidad de cadmio acumulada en los principales puntos de almacenamiento, el rin y el hgado. Sin embargo, estas tcnicas no son de utilizacin habitual. Hasta ahora, en la vigilancia de la salud de los trabajadores industriales o en los estudios a gran escala realizados en la poblacin general, la exposicin al cadmio se ha evaluado de forma indirecta mediante su determinacin en orina y en sangre. Todava no se ha elucidado por completo la cintica detallada de la accin del cadmio en los seres humanos, aunque, con fines prcticos, se pueden formular algunas conclusiones relativas al significado de su presencia en sangre y en orina. En los trabajadores recientemente expuestos, los niveles de cadmio en sangre aumentan progresivamente y, transcurridos de cuatro a seis meses, alcanzan una concentracin correspondiente a la intensidad de la exposicin. En las personas con exposicin mantenida durante un largo perodo, la concentracin en la sangre

Arsnico inorgnico

Berilio

Cadmio

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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

refleja principalmente la absorcin promedio durante los ltimos meses. La influencia relativa de la cantidad corporal total de cadmio sobre el nivel sanguneo del mismo puede ser ms importante en las personas que hayan acumulado una gran cantidad del elemento y hayan dejado de estar expuestas. Una vez cesada la exposicin, el nivel sanguneo de cadmio desciende con relativa rapidez, con un semiperodo inicial de dos a tres meses. Dependiendo de la cantidad en el organismo, el nivel puede, no obstante, permanecer ms alto que en los sujetos control. Diversos estudios en seres humanos y en animales han indicado que el nivel de cadmio en la orina se puede interpretar de la forma siguiente: en ausencia de una sobreexposicin aguda, y mientras no se supere la capacidad de almacenaje del rin o no se produzca una nefropata inducida por cadmio, el nivel de cadmio en la orina aumenta progresivamente con la cantidad almacenada en los riones. En tales condiciones, que son las prevalentes sobre todo en la poblacin general y en los trabajadores con una exposicin moderada, existe una correlacin significativa entre el cadmio urinario y el presente en los riones. Si la exposicin ha sido excesiva, los puntos de unin del cadmio en el organismo se ven progresivamente saturados y, a pesar de la exposicin continua, la concentracin del mismo en la corteza renal se estabiliza. A partir de esta fase, el cadmio absorbido ya no puede ser retenido en ese rgano y se excreta rpidamente por la orina. Desde ese momento, la concentracin de cadmio en orina depende tanto de la cantidad total de cadmio en el organismo como de la absorcin reciente. Si la exposicin contina, algunos sujetos pueden presentar lesin renal, que da lugar a un mayor aumento del cadmio urinario como consecuencia de la liberacin del cadmio almacenado en el rin y la disminucin de la reabsorcin del cadmio circulante. Sin embargo, despus de un episodio de exposicin aguda, los niveles urinarios de cadmio pueden aumentar de forma rpida y breve, sin que ello refleje un aumento de la cantidad total en el organismo. Estudios recientes indican que la metaltiolena en orina posee el mismo significado biolgico. Se han observado buenas correlaciones entre la concentracin urinaria de metaltiolena y de cadmio, independientemente de la intensidad de la exposicin y del estado de la funcin renal. Los niveles normales de cadmio en sangre y en orina suelen ser inferiores a 0,5 g/100 ml y a 2 g/g de creatinina, respectivamente. Son ms elevados en fumadores que en no fumadores. En los trabajadores expuestos crnicamente, el riesgo de afectacin renal es despreciable siempre que los niveles urinarios no superen los 10 g/g de creatinina. Debe evitarse toda acumulacin de cadmio que pudiera dar lugar a una excrecin urinaria superior a dicha cifra. Sin embargo, algunos datos indican que ciertos marcadores renales (cuyo significado en cuanto a la salud todava es desconocido) pueden alterarse con valores urinarios de cadmio entre 3 y 5 g/g de creatinina, por lo que parece razonable proponer un valor lmite biolgico inferior a 5 g/g de creatinina. Para la sangre se ha propuesto un lmite biolgico de 0,5 g/100 ml en caso de exposicin prolongada. Es posible, no obstante, que, en el caso de la poblacin general expuesta al cadmio a travs de los alimentos o el tabaco, o bien en el caso de los ancianos, que normalmente sufren un declinar de la funcin renal, el nivel crtico en la corteza renal sea menor.

La exposicin reciente a sales solubles de cromo hexavalente (p. ej., en los galvanizadores y en los soldadores de acero inoxidable) se puede evaluar controlando el nivel de cromo en la orina al trmino de la jornada laboral. Estudios realizados por varios autores proponen la siguiente relacin: una exposicin promedio ponderada en el tiempo de 0,025 0,05 mg/m3 de cromo hexavalente se asocia a una concentracin promedio de 15 30 g/g de creatinina al trmino del perodo de exposicin, respectivamente. (Esta relacin slo es vlida para grupos.) Despus de la exposicin a 0,025 mg/m3 de cromo hexavalente, el valor inferior del lmite de confianza del 95 % es de unos 5 g/g de creatinina. Otro estudio en soldadores de acero inoxidable hall que una concentracin urinaria de cromo del orden de 40 g/l corresponde a una exposicin promedio de 0,1 mg/m3 de trixido de cromo. El cromo hexavalente atraviesa con rapidez las membranas celulares pero, una vez en el interior de la clula, es reducido a cromo trivalente. La concentracin de cromo en los eritrocitos podra ser un indicador de la intensidad de la exposicin al cromo hexavalente durante la vida de los eritrocitos, pero ello no se aplica al cromo trivalente. Todava no se ha evaluado la utilidad del control del cromo en orina para la estimacin del riesgo para la salud. Una vez absorbido, por inhalacin y en cierto grado por va oral, el cobalto (que tiene un semiperodo biolgico de unos pocos das) se elimina principalmente por la orina. La exposicin a compuestos solubles de cobalto da lugar a un aumento de la concentracin de este metal en la sangre y en la orina. Las concentraciones de cobalto en sangre y en orina dependen principalmente de la exposicin reciente. En los sujetos sin exposicin profesional, el cobalto urinario suele ser inferior a 2 g/g de creatinina y el cobalto srico/plasmtico es inferior a 0,05 g/100 ml. Con exposiciones TWA de 0,1 mg/m3 y 0,05 mg/m3, se han descrito respectivamente niveles urinarios medios que oscilan desde 30 a 75 g/l y desde 30 a 40 g/l (utilizando muestras recogidas al trmino de la jornada laboral). El momento del muestreo es importante, ya que existe un aumento progresivo de los niveles urinarios de cobalto durante la semana laboral. En los trabajadores expuestos a xido de cobalto, sales de cobalto o polvo de metal cobalto en una refinera, se hall que una concentracin TWA de 0,05 mg/m3 daba lugar a una concentracin promedio de cobalto de 33 y de 46 g/g de creatinina en la orina recogida al trmino de la jornada del lunes y del viernes, respectivamente.
27. CONTROL BIOLOGICO 27.11

Cobalto

Plomo

Cromo

La toxicidad del cromo es atribuible principalmente a los compuestos hexavalentes, cuya absorcin es relativamente mayor que la de los compuestos trivalentes. La eliminacin se produce principalmente por va urinaria. En las personas sin exposicin profesional al cromo, la concentracin de este metal en suero y en orina no suele superar los 0,05 g/100 ml y los 2 g/g de creatinina, respectivamente.

El plomo inorgnico, un txico acumulativo absorbido por los pulmones y por el tracto gastrointestinal, es sin duda el metal ms estudiado; por ello, la fiabilidad de los mtodos para evaluar la exposicin reciente o la cantidad corporal de plomo por mtodos biolgicos es la mayor registrada entre todos los contaminantes metlicos. En una situacin de exposicin estable, el plomo en sangre total se considera como el mejor indicador de la concentracin de este metal en los tejidos blandos y, por tanto, de exposicin reciente. Sin embargo, el incremento de los niveles sanguneos de plomo (Pb-S) decrece progresivamente al aumentar los niveles de exposicin al mismo. Cuando la exposicin profesional ha sido prolongada, el cese de la misma no se asocia necesariamente a un retorno del Pb-S al valor previo a la exposicin (basal), debido a la continua liberacin de plomo procedente de los depsitos tisulares. Los niveles sanguneo y urinario normales de plomo son inferiores en general a 20 g/100 ml y 50 g/g
27.11

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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

de creatinina, respectivamente. Estos niveles pueden variar en funcin de los hbitos dietticos y del lugar de residencia de los sujetos. La OMS ha propuesto 40 g/100 ml como concentracin tolerable mxima de plomo en sangre para los trabajadores varones adultos, y de 30 g/100 ml para las mujeres en edad frtil. En los nios, concentraciones ms bajas se han asociado a efectos adversos sobre el sistema nervioso central. El nivel de plomo en la orina aumenta de forma exponencial con el aumento del Pb-S y, en situacin estable, es principalmente reflejo de una exposicin reciente. La cantidad de plomo excretada por la orina despus de la administracin de un agente quelante (p. ej., CaEDTA) refleja las reservas movilizables de plomo. En sujetos control, la cantidad excretada por orina en 24 horas despus de la administracin intravenosa de un gramo de EDTA no suele superar los 600 g. Parece que, bajo exposicin constante, los valores de plomo capaces de experimentar quelacin reflejan sobre todo la suma total de plomo en sangre y tejidos blandos, con slo una pequea fraccin derivada de los huesos. Se ha desarrollado una tcnica de fluorescencia por rayos-X para determinar la concentracin de plomo en los huesos (falanges, tibia, calcneo, vrtebras) pero, en la actualidad, el lmite de deteccin de la misma limita su utilizacin a las personas con exposicin profesional. Se ha propuesto la determinacin de plomo en el cabello como mtodo para evaluar la reserva movilizable de este metal. Sin embargo, en el mbito profesional, resulta difcil distinguir entre el plomo de incorporacin endgena al cabello y el simplemente adsorbido sobre su superficie. Se ha utilizado la determinacin de la concentracin de plomo en la dentina que rodea la pulpa de los dientes de leche para calcular la exposicin al plomo durante la primera infancia. Para evaluar la intensidad de la exposicin al plomo se pueden utilizar tambin parmetros que reflejen la interferencia de este metal en los procesos biolgicos. Los parmetros biolgicos empleados en la actualidad son la coproporfirina en orina (COPRO-U), el cido delta-aminolevulnico en orina (ALA-U), la protoporfirina eritrocitaria (EP, o protoporfirina zinc), el cido delta-aminolevulnico dehidratasa (ALAD), y la pirimidina-5-nucleotidasa (P5N) en los eritrocitos. En situaciones estables, los cambios en estos parmetros tienen una correlacin positiva (COPRO-U, ALA-U, EP) o negativa (ALAD, P5N) con los niveles sanguneos de plomo. La excrecin urinaria de COPRO (sobre todo, el ismero III) y de ALA comienza a aumentar cuando la concentracin sangunea de plomo alcanza unos 40 g/100 ml. La protoporfirina eritrocitaria comienza a aumentar significativamente a niveles sanguneos de plomo de unos 35 g/100 ml en varones y de 25 g/100 ml en mujeres. Una vez terminada la exposicin profesional al plomo, permanece elevada de forma desproporcionada con relacin a los niveles reales de plomo en sangre. En este caso, el nivel de EP tiene una mejor correlacin con la cantidad de plomo susceptible de quelacin excretado por la orina que con el plomo en sangre. El dficit ligero de hierro tambin produce una concentracin elevada de protoporfirina en los eritrocitos. Las enzimas de dichos eritrocitos, ALAD y P5N, son muy sensibles a la accin inhibitoria del plomo. Dentro del rango de niveles sanguneos de plomo de 10 a 40 g/100 ml, existe una estrecha correlacin negativa entre la actividad de ambas enzimas y el plomo en sangre.

exposicin al alquil plomo, mientras que el plomo en orina parece ser til para evaluar el riesgo de sobreexposicin.

En el contexto laboral, el manganeso penetra en el organismo principalmente a travs de los pulmones; la absorcin por va gastrointestinal es pequea y probablemente dependa de un mecanismo homeosttico. La eliminacin tiene lugar principalmente por la bilis, mientras que por la orina slo se excretan pequeas cantidades. Las concentraciones normales de manganeso en orina, sangre y suero o plasma suelen ser inferiores a 3 g/g de creatinina, 1 g/100 ml y 0,1 g/100 ml, respectivamente. Parece que, en el plano individual, ni el manganeso en sangre ni el manganeso en orina tienen correlacin con los parmetros de exposicin externa. No parece haber una relacin directa entre la concentracin de manganeso en el material biolgico y la gravedad de la intoxicacin crnica por este metal. Es posible que, despus de la exposicin profesional al mismo, se pudieran detectar ya efectos adversos sobre el sistema nervioso central a niveles biolgicos prximos a los valores normales.

Manganeso

Alquil plomo

En algunos pases se utilizan el tetraetil plomo y el tetrametil plomo como agentes antidetonantes en los combustibles para automviles. El plomo en sangre no es un buen indicador de
27.12

La principal ruta de captacin del mercurio metlico es la inhalacin. La absorcin gastrointestinal es despreciable. Las sales de mercurio inorgnico pueden ser absorbidas a travs de los pulmones (inhalacin de aerosol de mercurio inorgnico), o por el tracto gastrointestinal. Es posible la absorcin cutnea de mercurio metlico y de sus sales inorgnicas. El semiperodo biolgico del mercurio es del orden de dos meses en el rin, pero mucho ms prolongado en el sistema nervioso central. El mercurio inorgnico se excreta principalmente por las heces y la orina. Tambin se excretan pequeas cantidades por las glndulas salivares, lacrimales y sudorparas. En condiciones de exposicin crnica existe, al menos a nivel de grupo, una relacin entre la intensidad de la exposicin reciente al vapor de mercurio y la concentracin de mercurio en sangre u orina. Las primeras investigaciones, durante las cuales se utilizaron muestras estticas para controlar el aire de las salas de trabajo en general, demostraron que una concentracin promedio de mercurio-aire (Hg-aire) de 100 g/m3 corresponde a unos niveles promedio de mercurio en sangre (Hg-S) y en orina (Hg-U) de 6 g Hg/100 ml y de 200 a 260 g/l, respectivamente. Observaciones ms recientes, en particular las que evalan la contribucin del microambiente externo prximo a las vas respiratorias de los trabajadores, indican que la relacin de mercurio en aire (g/m3)/orina (g/g creatinina)/sangre (g/100 ml) es de aproximadamente 1/1,2/0,045. Diversos estudios epidemiolgicos en trabajadores expuestos a vapor de mercurio han demostrado que, para la exposicin prolongada, los niveles de efecto crtico de Hg-U y de Hg-S son de unos 50 g/g de creatinina y de 2 g/100 ml, respectivamente. Sin embargo, algunos estudios recientes parecen indicar que ya es posible observar signos de efectos adversos sobre el sistema nervioso central o sobre el rin con un nivel urinario de mercurio inferior a 50 g/g de creatinina. Los niveles normales en orina y en sangre suelen ser inferiores a 5 g/g de creatinina y a 1 g/100 ml, respectivamente. Estos valores pueden variar en funcin del consumo de pescado y del nmero de empastes dentarios con amalgama de mercurio.

Mercurio metlico y sus sales inorgnicas

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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Compuestos orgnicos de mercurio

Los compuestos orgnicos de mercurio se absorben fcilmente por todas las vas. En la sangre, se encuentran principalmente en los eritrocitos (alrededor del 90 %). Es preciso hacer una distincin, no obstante, entre los compuestos alqulicos de cadena corta (principalmente metil mercurio), que son muy estables y resistentes a la biotransformacin, y los derivados aril o alcoxialquil, que liberan mercurio inorgnico in vivo. Para estos ltimos compuestos, la concentracin de mercurio, tanto en sangre como en orina, posiblemente sea indicativa de la intensidad de la exposicin. En condiciones estables, el mercurio en sangre total y en el cabello tiene una buena correlacin con la cantidad corporal total de metil mercurio y con el riesgo de que aparezcan signos de intoxicacin por este compuesto. En las personas expuestas crnicamente a alquil mercurio, los signos ms precoces de intoxicacin (parestesias, alteraciones sensoriales) pueden aparecer cuando el nivel de mercurio en sangre y en el cabello supera los 20 g/100 ml y los 50 g/g, respectivamente.

La determinacin de selenio en sangre u orina proporciona cierta informacin sobre la situacin de este metal. En la actualidad, se suele utilizar ms para detectar un dficit que una sobreexposicin. Puesto que los datos existentes relativos al riesgo para la salud de la exposicin prolongada al selenio y a la relacin entre riesgo potencial para la salud y niveles en medios biolgicos son muy limitados, no se puede proponer un valor umbral biolgico.

Vanadio

Nquel

El nquel no es un txico acumulativo y casi toda la cantidad absorbida se excreta principalmente por la orina, con un semiperodo biolgico de 17 a 39 horas. En los sujetos no sometidos a exposicin profesional, las concentraciones urinarias y plasmticas de nquel suelen ser inferiores a 2 g/g de creatinina y a 0,05 g/100 ml, respectivamente. Las concentraciones de nquel en plasma y en orina son buenos indicadores de exposicin reciente al nquel metlico y a sus compuestos solubles (p. ej., durante la galvanizacin de nquel o la produccin de bateras de nquel). Los valores dentro de los lmites normales suelen indicar una exposicin no significativa, mientras que los valores aumentados indican sobreexposicin. Para los trabajadores expuestos a compuestos solubles de nquel, se ha intentado proponer un valor lmite biolgico de 30 g/g de creatinina (al final de la jornada) en orina. En los trabajadores expuestos a compuestos de nquel ligeramente solubles o insolubles, los niveles elevados en los fluidos corporales suelen indicar una absorcin significativa o una liberacin progresiva de la cantidad almacenada en los pulmones; no obstante, se pueden depositar cantidades significativas de nquel en el tracto respiratorio (cavidades nasales, pulmones) sin una elevacin significativa de su concentracin plasmtica o urinaria. Por tanto, los valores normales se deben interpretar con precaucin y no indican necesariamente la ausencia de riesgos para la salud.

DISOLVENTES ORGANICOS
DISOLVENTES ORGANICOS

Masayuki Ikeda

Introduccin

El selenio es un oligoelemento esencial. Sus compuestos solubles parecen absorberse fcilmente por los pulmones y por el tracto gastrointestinal. El selenio se excreta principalmente por la orina, pero cuando la exposicin es muy alta se puede excretar tambin en el aire exhalado, en forma de vapor de dimetilselenuro. Las concentraciones normales en suero y en orina dependen de la ingesta diaria, que puede variar considerablemente en las diferentes partes del mundo, pero en general son inferiores a 15 g/100 ml y a 25 g/g de creatinina, respectivamente. La concentracin en orina es sobre todo reflejo de exposicin reciente. Todava no se ha establecido la relacin entre la intensidad de la exposicin y la concentracin de selenio en orina. Parece que la concentracin en plasma (o suero) y orina refleja principalmente una exposicin a corto plazo, mientras que el contenido en selenio de los eritrocitos refleja una exposicin ms prolongada.

Selenio

Los disolventes orgnicos son voltiles y generalmente solubles en las grasas corporales (lipoflicos), aunque algunos, como el metanol y la acetona, son asimismo hidrosolubles (hidroflicos). Se utilizan mucho, no slo en la industria, sino tambin en productos de consumo, como pinturas, tintas, diluyentes, desengrasantes, agentes de limpieza en seco, quitamanchas, repelentes y similares. Aunque en relacin con ellos es posible aplicar el control biolgico para detectar posibles efectos sobre la salud, como los que afectan al hgado y al rin, desde el punto de vista de la vigilancia de la salud de los trabajadores expuestos profesionalmente es preferible utilizar el mencionado control biolgico para controlar la exposicin, no para proteger la salud, dado que se trata de un mtodo lo bastante sensible para alertar mucho antes de que se produzcan tales efectos. Tambin la exploracin selectiva de los trabajadores para la deteccin de los que presentan una sensibilidad elevada (vase la seccin sobre los marcadores de sensibilidad) a la toxicidad por disolventes puede contribuir a la proteccin de su salud.

Resumen de toxicocintica

Los disolventes orgnicos son en general voltiles en condiciones normales, aunque la volatilidad vare de unos a otros. Por tanto, la principal va de exposicin en el mbito industrial es la inhalacin. La tasa de absorcin por la pared alveolar pulmonar es mucho ms alta que por la pared del tracto gastrointestinal; para muchos disolventes habituales, como el tolueno, se considera normal una tasa de absorcin pulmonar de un 50 %. Algunos, como el disulfuro de carbono y la N,N-dimetilformamida en estado lquido, pueden atravesar la piel intacta del ser humano en cantidades suficientes para ser txicas. Cuando se absorben estos disolventes, una parte se exhala con la respiracin sin sufrir biotransformacin alguna, pero la mayor
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27. CONTROL BIOLOGICO

En la industria, el vanadio se absorbe principalmente por va pulmonar. La absorcin oral parece baja (menos del 1 %). Se excreta por la orina, con un semiperodo biolgico de unas 20 a 40 horas, y en menor grado por las heces. El vanadio urinario parece ser un buen indicador de exposicin reciente, pero todava no se ha establecido suficientemente la relacin entre su captacin y los niveles en orina. Se ha sealado que la diferencia entre las concentraciones urinarias antes del turno y despus de ste permite evaluar la exposicin durante la jornada de trabajo, mientras que el vanadio urinario determinado dos das despus del cese de la exposicin (lunes por la maana) reflejara la acumulacin del metal en el organismo. En las personas no sometidas a exposicin profesional, la concentracin urinaria suele ser inferior a 1 g/g de creatinina. Se ha propuesto un valor lmite biolgico provisional de 50 g/g de creatinina (al trmino de la jornada) para el vanadio en orina.

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

parte se distribuye por los rganos y tejidos ricos en lpidos como consecuencia de su lipofilia. La biotransformacin tiene lugar principalmente en el hgado (y, en menor grado, en otros rganos), hacindose la molcula de disolvente ms hidrfila, normalmente por un proceso de oxidacin seguido de conjugacin, y siendo excretada por los riones a la orina en forma de metabolitos. Una pequea parte se puede eliminar sin cambios por la orina. Por tanto, desde un punto de vista prctico se dispone de tres materiales biolgicos, orina, sangre y aire exhalado, para el control de la exposicin a los disolventes. Otro factor relevante para la seleccin del material biolgico es la velocidad de desaparicin de la sustancia absorbida, medida por el semiperodo biolgico, es decir, el tiempo que necesita una sustancia para disminuir a la mitad su concentracin original, es un parmetro cuantitativo. As, los disolventes desaparecen del aire exhalado mucho antes que sus correspondientes metabolitos de la orina, lo que significa que tienen una semivida mucho ms corta. Dentro de los metabolitos urinarios, el semiperodo biolgico vara dependiendo de la rapidez con que se metabolice el compuesto original, de modo que, con frecuencia, el momento del muestreo en relacin con la exposicin tiene una importancia crtica (vase ms adelante). Un tercer aspecto que se ha de tener en cuenta al elegir un material biolgico es la especificidad de la sustancia qumica objeto del anlisis en relacin con la exposicin. Por ejemplo, el cido hiprico es un marcador de exposicin al tolueno utilizado desde hace mucho tiempo, pero no slo se forma naturalmente en el organismo, sino que tambin puede proceder de fuentes no laborales, como algunos aditivos de los alimentos, por lo cual ya no se considera como un marcador fiable cuando la exposicin al tolueno es baja (inferior a 50 cm3/m3). En trminos generales, los metabolitos urinarios han sido los ms utilizados como indicadores de exposicin a diversos disolventes orgnicos. El disolvente en la sangre se analiza como medida cualitativa de exposicin, porque suele permanecer menos tiempo en la misma y refleja mejor la exposicin aguda, mientras que el disolvente en el aire exhalado es difcil de utilizar para calcular la exposicin promedio, ya que su concentracin en el aliento disminuye con mucha rapidez una vez concluida la exposicin. El disolvente en la orina resulta prometedor como medida de la exposicin, pero necesita su validacin.

Tabla 27.2 Algunos ejemplos de sustancias qumicas diana para el control biolgico y momentos de muestreo. Disolvente Disulfuro de carbono N,N-dimetilformamida 2-etoxietanol y su acetato Hexano Sustancia qumica diana Orina/ sangre Momento del muestreo1 JV LMXJV J V (final del ltimo turno) LMXJV confirmacin de la exposicin LJXJV JV JV confirmacin de la exposicin MXJV MXJV confirmacin de la exposicin MXJV JV JV

Acido 2-tiazolidn-4-carboxlico Orina

N-metilformamida
Acido etoxiactico 2,4-hexanodiona Hexano

Orina Orina Orina Sangre Orina Orina Orina Sangre Orina Orina Sangre Orina Orina

Metanol Estireno

Metanol Acido mandlico Acido fenilglicoxlico Estireno

Tolueno

Acido hiprico

o-cresol Tolueno
Tolueno Tricloroetileno Acido tricloroactico (TCA)

Total de compuestos tricloOrina rados (suma de TCA y tricloroetanol libre y conjugado) Tricloroetileno Xilenos2
1

Sangre Orina Sangre

confirmacin de la exposicin MXJV MXJV

Acidos metilhipricos Xilenos

Final del turno de trabajo salvo indicacin en contrario; los das de la semana indican los das de muestreo preferibles. 2 Tres is meros, por separado o en cualquier combinaci n. Fuente: Resumido de OMS 1996.

Pruebas de exposicin biolgica para disolventes orgnicos

Para aplicar el control biolgico a la exposicin a disolventes, es importante el momento del muestreo, como ya se ha indicado. En la Tabla 27.2 se muestran los momentos de muestreo recomendados para los disolventes habituales en los controles de exposicin diaria en el trabajo. Cuando se va a analizar el propio disolvente, es preciso estar atento para evitar las posibles prdidas (p. ej., evaporacin en el aire ambiente), as como la contaminacin (p. ej., disolucin del aire ambiente en el interior de la muestra) durante el proceso de manipulacin de la muestra. En caso de que se precise transportar la muestra a un laboratorio distante o se haya de almacenar antes del anlisis, se ha de tener cuidado para evitar prdidas. Para los metabolitos se recomienda la congelacin, mientras que para el anlisis del disolvente se recomienda la refrigeracin (pero no la congelacin) en un envase hermtico sin espacio areo (o, preferiblemente, en un vial de espacio de cabeza). En el anlisis qumico, el control de calidad es esencial para obtener resultados fiables (para ms detalles, vase el artculo Garanta de calidad en este mismo captulo). La informacin sobre los resultados debe hacerse respetando la tica (vase el captulo Aspectos ticos en esta Enciclopedia).

Para muchos disolventes existen varios mtodos analticos establecidos. Estos varan segn la sustancia qumica, aunque en casi todos los desarrollados recientemente se utiliza para la separacin por cromatografa gaseosa (CG) o cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC). Se recomienda utilizar un muestreador automtico y un procesador de datos para obtener un buen control de calidad en el anlisis qumico. Cuando se va a analizar el propio disolvente en sangre o en orina, es muy conveniente la aplicacin de una tcnica de espacio de cabeza en la CG (CG de espacio de cabeza), sobre todo si el disolvente es bastante voltil. En la Tabla 27.3 se presentan algunos ejemplos de los mtodos establecidos para los disolventes habituales.

Evaluacin

Se puede establecer una relacin lineal de los indicadores de exposicin (reseados en la Tabla 27.3) con la intensidad de la misma para los correspondientes disolventes, ya sea realizando una encuesta entre los trabajadores expuestos profesionalmente a ellos, ya sea mediante la exposicin experimental de voluntarios humanos. En este sentido, la ACGIH (1994) y la DFG (1994), por ejemplo, han establecido el ndice biolgico de exposicin (BEI) y

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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Tabla 27.3 Algunos ejemplos de mtodos analticos para el control biolgico de la exposicin a disolventes orgnicos. Disolvente Disulfuro de carbono Sustancia qumica diana Sangre/ orina Mtodo analtico Cromatografa lquida de alta resolucin con deteccin ultravioleta (UV-HPLC) Cromatografa de gases con deteccin termoinica de llama (FTD-GC) Extraccin, derivacin y cromatografa de gases con deteccin por ionizacin de llama (FID-GC) Extraccin, (hidrlisis) y FID-GC FID-GC con muestreo automtico GC-FID con muestreo automtico Desalado y UV-HPLC Desalado y UV-HPLC CG-FID con muestreo automtico Desalado y HPLC-UV Hidrlisis, extraccin y CG-FID CG-FID con muestreo automtico CG-FID con muestreo automtico Colorimetra o esterificacin y cromatografa de gases con deteccin de captura electrnica (ECD-GC) Oxidacin y colorimetra, o hidrlisis, oxidacin, esterificacin y ECD-GC

2-TiotiazolidinaOrina cido 4-carboxlico

N,N-dimetilformamida

N-metilformamida

Orina

2-etoxietanol y su acetato

Acido etoxiactico

Orina

no obstante, que el nivel de la sustancia qumica diana en las muestras obtenidas en personas no expuestas puede variar en funcin, por ejemplo, de costumbres locales (p. ej., dieta) y que puede haber diferencias tnicas en el metabolismo del disolvente. Por tanto, es aconsejable establecer valores lmite mediante el estudio de la poblacin local implicada. Al evaluar los resultados es preciso excluir cuidadosamente la existencia de exposicin no profesional al disolvente (p. ej., por utilizacin de productos de consumo que lo contengan, o por inhalacin intencionada) y la exposicin a sustancias qumicas que den origen a los mismos metabolitos (p. ej., algunos aditivos alimentarios). En caso de que exista una gran falta de correspondencia entre la intensidad de la exposicin al vapor y los resultados del control biolgico, la diferencia puede indicar la posibilidad de absorcin cutnea. El consumo de cigarrillos inhibe el metabolismo de algunos disolventes (p. ej., tolueno), mientras que la ingesta aguda de etanol puede inhibir de forma competitiva el metabolismo del metanol.

Hexano

2,4-hexanodiona Hexano

Orina Sangre Orina Orina Orina Sangre Orina Orina Sangre Orina Orina

SUSTANCIAS QUIMICAS GENOTOXICAS

SUSTANCIAS QUIMICAS GENOTOXICAS

27. CONTROL BIOLOGICO 27.15

Marja Sorsa Para el control biolgico en el ser humano se utilizan muestras de fluidos corporales o de otro material biolgico de fcil obtencin, bien para la determinacin de la exposicin a sustancias especficas o inespecficas y/o de sus metabolitos, o bien para la determinacin de los efectos biolgicos de esa exposicin. El control biolgico permite calcular la exposicin individual total a travs de diferentes vas (pulmones, piel, aparato digestivo) y fuentes (aire, dieta, forma de vida, u ocupacin). Tambin se sabe que, en situaciones de exposicin compleja, presentes a menudo en los lugares de trabajo, diferentes agentes de exposicin pueden interactuar unos con otros, aumentando o inhibiendo los efectos de los distintos compuestos. Adems, dado que los individuos difieren en su constitucin gentica, muestran variabilidad en su respuesta a las exposiciones qumicas. Por tanto, quiz sea ms razonable buscar los efectos precoces directamente en los individuos o grupos expuestos que tratar de predecir los peligros potenciales de los complejos patrones de exposicin a partir de datos pertenecientes a los distintos compuestos. Esta es una ventaja del biocontrol gentico de los efectos precoces, mtodo que emplea tcnicas centradas en la lesin citogentica, mutaciones puntuales o aductos del ADN en tejidos humanos (vase el artculo Principios generales, en este mismo captulo).

Metanol Estireno

Metanol Acido mandlico Acido feniglioxlico Estireno

Tolueno

Acido hiprico

o-cresol
Tolueno Tolueno Tricloroetileno Acido tricloroetileno (TCA)

Total de compuestos Orina triclorados (suma de TCA y tricloroetanol libre y conjugado) Tricloroetileno Xilenos Sangre

Qu es la genotoxicidad?

ECD-GC con muestreo automtico GC-FID con muestreo automtico

Acidos metilhipricos Orina (tres ismeros, por separado o combinados)

Fuente: Resumido de OMS 1996.

el valor biolgico de tolerancia (BTV), respectivamente, como los valores de las muestras biolgicas que son equivalentes al lmite de exposicin profesional para las sustancias qumicas aerotransportadas, es decir, el valor lmite umbral (TLV) y la concentracin mxima en el lugar de trabajo (MAK), respectivamente. Se sabe,

La genotoxicidad de los agentes qumicos es una caracterstica qumica intrnseca, basada en el potencial electroflico del agente para unirse con puntos nucleoflicos de macromolculas celulares tales como el cido desoxirribonucleico, ADN, el portador de la informacin hereditaria. La genotoxicidad es, por tanto, la toxicidad que se manifiesta en el material gentico de las clulas. La definicin de genotoxicidad, tal como se coment en un informe de consenso (IARC 1992), es amplia, e incluye efectos tanto directos como indirectos sobre el ADN: (1) la induccin de mutaciones (genticas, cromosmicas, genmicas, recombinantes), que a nivel molecular son similares a los acontecimientos que se sabe estn implicados en la carcinognesis, (2) acontecimientos vicarios indirectos asociados a la mutagnesis (p. ej., sntesis de ADN no pautada (UDS), e intercambio de cromtidas hermanas (SCE), o (3) lesin del ADN (p. ej., la formacin de aductos), que pueden dar lugar finalmente a mutaciones.
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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Las mutaciones son cambios hereditarios permanentes en las lneas celulares, ya sea horizontalmente en las clulas somticas o verticalmente en las clulas germinales (sexuales) del organismo. Pueden afectar, pues, al propio organismo a travs de cambios en las clulas corporales, o bien pasar a otras generaciones a travs de la alteracin de las clulas sexuales. La genotoxicidad, por tanto, precede a la mutagenicidad, aunque en su mayor parte se repara y no llega a expresarse en forma de mutaciones. Las mutaciones somticas estn inducidas a nivel celular y, en el acontecimiento que puede llevar a la muerte celular o a la aparicin de procesos malignos, pueden manifestarse como diversos trastornos de los tejidos o del propio organismo. Se cree que estn relacionadas con los efectos del envejecimiento o con la produccin de placas aterosclerticas (vase la Figura 27.3 y el captulo sobre Cncer). Las mutaciones en la lnea celular germinal pueden transferirse al cigoto, el huevo fertilizado, y expresarse en la generacin hija (vase tambin el captulo Sistema reproductor). Los trastornos mutacionales ms importantes encontrados en el recin nacido estn producidos por la malsegregacin de cromosomas durante la gametognesis (desarrollo de las clulas germinales) y dan lugar a graves sndromes cromosmicos (p. ej., trisoma 21 o sndrome de Down, y monosoma X o sndrome de Turner). El paradigma de genotoxicologa por exposicin a efectos previstos se puede simplificar tal como se muestra en la Figura 27.3. La relacin entre genotoxicidad y carcinogenicidad est bien demostrada por diversos datos indirectos de investigacin, tal como se muestra en la Figura 27.4. Esta correlacin proporciona la base para la aplicacin de los biomarcadores de genotoxicidad al control biolgico como indicadores del peligro de cncer.

Genotoxicidad, mutagenicidad y carcinogenicidad

Figura 27.4 Interrelaciones entre genotoxicidad y carcinogenicidad.

. UCE N D N I S O N E I G R N CE HOS CA MUC Mutaciones genticas Amplificacin gentica Reorganizaciones cromosmicas Aneuploida
AN E RIG E N O S H U M C N A C S HO MUC
Son genotxicos segn los controles sistemticos

..

O S.

..

ENESIS IMPLICA M CINOG R A C LA Las mutaciones puntuales y las reorganizaciones cromosmicas activan protooncogenes o inactivan genes supresores de los tumores
C E R SE A S O C I A C EL CAN

IO UTAC

NE

O N ...

Toxicidad gentica en la identificacin del peligro

El papel de los cambios genticos en la carcinognesis subraya la importancia de las pruebas de toxicidad gentica en la Figura 27.3 Representacin esquemtica del paradigma cientfico de la toxicologa gentica y el efecto sobre la salud humana.
Exposicin

Sndromes de inestabilidad

ERA ERIGENOS GEN C N A C S HO MUC

N ...

Intermedios electrfilos que se enlazan de forma covalente con el ADN en los puntos diana de los tumores

Daos del ADN

CTOS DEL A LOS ADU

Muerte celular Nivel germinal

D N ...

Reparacin Nivel somtico

Mutacin

Inducen errores de codificacin y pueden favorecer las mutaciones

identificacin de cancergenos potenciales. Se han desarrollado diversos mtodos de prueba a corto plazo que permiten detectar algunos de los criterios de valoracin de genotoxicidad supuestamente relacionados con la carcinognesis. Se han llevado a cabo varios estudios para comparar la carcinogenicidad de sustancias qumicas con los resultados obtenidos al examinarlas en pruebas a corto plazo. La conclusin general ha sido que, a falta de una prueba nica validada que proporcione informacin sobre todos los criterios de evaluacin

Aterosclerosis Envejecimiento Proliferacin maligna Prdida reproductiva

Alteracin heredable

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.. .
S

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Tabla 27.4 Genotoxicidad de los compuestos qumicos evaluados en los Suplementos 6 y 7 de las monografas IARC (1986). Relacin entre evidencia de genotoxicidad/ carcinogenicidad 24/30 14/20 72/128 19/66

Clasificacin de la carcinogenicidad 1: cancergenos humanos 2A: probables cancergenos humanos 2B: posibles cancergenos humanos 3: no clasificable

% 80 70 56 29

Biocontrol citogentico

Biocontrol gentico

El control gentico utiliza mtodos de toxicologa gentica para el control biolgico de los efectos genticos o para la evaluacin de la exposicin genotxica en un grupo de individuos con exposicin definida en el lugar de trabajo, en el ambiente o en la forma de vida. Por tanto, tiene la posibilidad de identificar precozmente las exposiciones genotxicas de un grupo de personas y permite la identificacin de poblaciones de alto riesgo y, por tanto, de prioridades de intervencin. La utilizacin de biomarcadores de prediccin en una poblacin expuesta est justificada para ahorrar tiempo (en comparacin con las tcnicas Tabla 27.5 Biomarcadores utilizados en el control gentico de exposiciones genotxicas y muestras de clulas y tejidos ms utilizadas. Marcador de control gentico Aberraciones cromosmicas (CA) Intercambio de cromtidas hermanas (SCE) Microncleos (MN) Mutaciones puntuales (p. ej., gen HPRT) Aductos del ADN Aductos de protenas Roturas de cadenas de ADN Activacin de oncogenes Mutaciones/oncoprotenas Reparador de ADN Muestras celulares/tisulares Linfocitos Linfocitos Linfocitos Linfocitos y otros tejidos ADN aislado de clulas/tejidos Hemoglobina, albmina ADN aislado de clulas/tejidos ADN o proteinas especficas aisladas Diversas clulas y tejidos Clulas aisladas de muestras de sangre

Existe una relacin terica y emprica del cncer con la lesin cromosmica. Los acontecimientos mutgenos que alteran la actividad o la expresin de los genes del factor de crecimiento son pasos clave de la carcinognesis. Numerosos tipos de cncer se han asociado a aberraciones cromosmicas especficas o inespecficas. En varias enfermedades hereditarias humanas, la inestabilidad cromosmica se asocia a una mayor sensibilidad al cncer. El examen citogentico de las personas expuestas a sustancias qumicas o a radiaciones cancergenas y/o mutagnicas puede mostrar efectos sobre su material gentico. Los estudios de aberracin cromosmica en las personas expuestas a radiaciones Figura 27.5 La predictividad de los biomarcadores permite adoptar medidas preventivas para reducir el riesgo para la salud de las poblaciones humanas.

USO DE BIOMARCADORES

Indicadores de exposicin

TIEMPO

Indicadores de efecto

Exposicin

TIEMPO

Cncer

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6 :1+)5

27.17

27. CONTROL BIOLOGICO

genticos antes mencionados, es preciso comprobar cada sustancia qumica en ms de un ensayo. Asimismo, el valor de las pruebas de toxicidad gentica a corto plazo para la prediccin de carcinogenicidad qumica ha sido debatido y revisado en repetidas ocasiones. De acuerdo con tales revisiones, un grupo de trabajo de la Agencia Internacional para la Investigacin sobre el Cncer (IARC) lleg a la conclusin de que la mayor parte de los cancergenos humanos dan resultados positivos en las pruebas a corto plazo utilizadas habitualmente, tales como el anlisis de Salmonella y los ensayos de aberracin cromosmica (Tabla 27.4). Sin embargo, es preciso tener en cuenta que los cancergenos epigenticos como son los compuestos hormonalmente activos que pueden aumentar la actividad genotxica sin ser ellos mismos genotxicos no se pueden detectar mediante las pruebas a corto plazo, las cuales slo miden la actividad genotxica intrnseca de una sustancia.

epidemiolgicas) y para evitar efectos finales innecesarios, como el cncer (Figura 27.5). Los mtodos utilizados actualmente para el biocontrol de la exposicin genotxica y de los efectos biolgicos precoces se resean en la Tabla 27.5. Las muestras empleadas deben cumplir varios criterios, entre ellos la facilidad de obtencin y su comparabilidad con el tejido diana. Los tipos de lesin del ADN identificables a escala molecular son la formacin de aductos del ADN y la reorganizacin de la secuencia de ADN. Ambas lesiones se pueden detectar mediante mediciones de los aductos de ADN por diversas tcnicas, como el posmarcado con 32P o la deteccin de anticuerpos monoclonales frente a los aductos de ADN. La medicin de las roturas de la cadena de ADN se realiza convencionalmente utilizando elucin alcalina o anlisis de desovillado. Las mutaciones se pueden detectar obteniendo la secuencia de ADN de un gen especfico, como el gen HPRT. Han aparecido diversos informes metodolgicos en los que se comentan con detalle las tcnicas de la Tabla 27.5 (CCE 1987; IARC 1987, 1992, 1993). La genotoxicidad tambin se puede controlar indirectamente mediante la medicin de aductos de protenas, es decir, en hemoglobina en lugar del ADN, o mediante el control de la actividad reparadora del ADN. En todos los casos, los resultados se deben aplicar al desarrollo de condiciones laborales seguras.

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Figura 27.6 Cromosomas linfocticos humanos en metafase; se observa una mutacin cromosmica inducida (fragmento acntrico indicado por la flecha).

ionizantes se han aplicado a la dosimetra biolgica durante decenios, pero hasta ahora slo se dispone de resultados positivos bien documentados para un nmero limitado de cancergenos qumicos. Entre las lesiones cromosmicas identificables al microscopio se encuentran las aberraciones cromosmicas (CA) estructurales, en las que se ha producido un cambio importante de la morfologa (forma) de un cromosoma, y los intercambios de cromtidas hermanas (SCE), o intercambio simtrico de material cromosmico entre dos cromtidas hermanas; los microncleos (MN) pueden derivarse de fragmentos de cromosoma acntricos o de la falta de cromosomas completos. Estos tipos de cambios se ilustran en la Figura 27.6. Los linfocitos humanos en sangre perifrica son clulas adecuadas para los estudios de vigilancia, debido a su fcil obtencin y a su capacidad de integrar la exposicin durante una vida relativamente prolongada. La exposicin a diversos mutgenos qumicos puede dar lugar a una mayor frecuencia de CA y/o SCE en los linfocitos de la sangre de los individuos expuestos. Asimismo, la extensin de la lesin tiene una relacin aproximada con la exposicin, aunque esto slo se ha demostrado para algunas sustancias qumicas. Cuando las pruebas citogenticas en los linfocitos de sangre perifrica demuestran que el material gentico se ha lesionado, los resultados se pueden utilizar para calcular el riesgo, aunque slo a nivel de poblacin. Una mayor frecuencia de aberraciones cromosmicas en una poblacin debe ser considerada como indicativa de un mayor riesgo de cncer, si bien las pruebas citogenticas como tales no permiten una prediccin del riesgo individual de cncer. El significado para la salud de la lesin gentica somtica, tal como se observa a travs de la estrecha ventana de una muestra de linfocitos de sangre perifrica, posee poco o ningn significado, dado que la mayor parte de los linfocitos portadores de una lesin gentica mueren y son reemplazados.

importante una cuidadosa planificacin previa. Para realizar estudios citogenticos en seres humanos, un requisito previo ha de ser siempre la confirmacin experimental del potencial de lesin cromosmica de los agentes causantes de la exposicin. En los estudios de biocontrol citogentico se han demostrado dos tipos principales de variaciones. La primera comprende factores tcnicos asociados a discrepancias en la lectura de las preparaciones y a las condiciones del cultivo, en especial el tipo de medio, la temperatura y la concentracin de sustancias qumicas (como bromodesoxiuridina o citochalasina-B). Tambin el momento del muestreo puede alterar la produccin de aberraciones cromosmicas y, posiblemente, los hallazgos en cuanto a incidencia de SCE, en virtud de cambios en las subpoblaciones de linfocitos T y B. En los anlisis de microncleos, las diferencias metodolgicas (p. ej., el empleo de clulas binucleadas inducidas por citochalasina-B) afectan de forma bastante evidente a los resultados. Las lesiones inducidas en el ADN de los linfocitos por la exposicin qumica que da lugar a la formacin de aberraciones cromosmicas estructurales, intercambio de cromtidas hermanas y microncleos, debe persistir in vivo hasta que se extrae la sangre y posteriormente in vitro hasta que el linfocito cultivado comienza la sntesis de ADN. Es importante, por tanto, puntuar directamente las clulas despus de la primera divisin (en el caso de aberraciones cromosmicas o de microncleos) o despus de la segunda divisin (intercambio de cromtidas hermanas), a fin de obtener el mejor clculo posible de la lesin inducida. La puntuacin constituye un elemento extremadamente importante en el biocontrol citogentico. Las preparaciones se deben asignar aleatoriamente y codificar para evitar en lo posible el sesgo debido al puntuador. Hay que mantener criterios de puntuacin constantes y un control de la calidad y es preciso hacer anlisis estadsticos y elaborar informes estandarizados. La segunda categora de variabilidad abarca condiciones asociadas a los sujetos, tales como la edad, el sexo, la medicacin y las infecciones. Las variaciones individuales tambin pueden deberse a una sensibilidad gentica a los agentes ambientales. Es fundamental obtener un grupo control concurrente, lo ms semejante posible en factores internos como el sexo y la edad, y asimismo en factores tales como el consumo de tabaco, las infecciones virales y vacunaciones, el consumo de alcohol y de drogas y la exposicin radiolgica. Adems, es necesario obtener clculos cualitativos (categora en el trabajo, aos de exposicin) y cuantitativos (p. ej., muestras de aire de la zona de respiracin para la realizacin de anlisis qumicos y de metabolitos especficos, si es posible) o datos de exposicin al posible agente o agentes genotxicos en el lugar de trabajo. Se debe prestar atencin especial al adecuado tratamiento estadstico de los resultados.

Aplicabilidad del biocontrol gentico a la evaluacin del riesgo de cncer

Problemas de los estudios de biocontrol en seres humanos y su control

Para la aplicacin de cualquier mtodo de biocontrol en seres humanos es necesario un riguroso diseo del estudio, ya que son muchos los factores interindividuales no relacionados con la exposicin a las sustancias qumicas especficas de inters que pueden afectar a las respuestas biolgicas estudiadas. Dado que estos estudios son tediosos y difciles en muchos aspectos, es muy

El nmero de agentes que se han demostrado repetidamente como inductores de cambios citogenticos en el ser humano es relativamente limitado, aunque la mayor parte de los cancergenos conocidos inducen lesiones en los cromosomas de los linfocitos. El grado de lesin depende del nivel de exposicin, como se ha demostrado, por ejemplo, con el cloruro de vinilo, el benceno, el xido de etileno y los agentes anticancerosos alquilantes. Aun cuando los criterios de evaluacin citogentica no sean muy sensibles o especficos en lo que se refiere a la deteccin de exposiciones en los ambientes industriales, los resultados positivos de tales pruebas han promovido la implantacin de controles higinicos incluso en ausencia de pruebas directas que

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HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

relacionen las lesiones cromosmicas somticas con resultados adversos para la salud. Casi todas las experiencias en la aplicacin del biocontrol citogentico procede de situaciones laborales de alta exposicin. Muy pocas exposiciones han sido confirmadas por varios estudios independientes, en su mayor parte realizadas mediante biocontrol de las aberraciones cromosmicas. La base de datos de la Agencia Internacional para la Investigacin sobre el Cncer resea, en sus volmenes actualizados 43-50 de las monografas IARC, un total de 14 cancergenos profesionales en los grupos 1, 2A o 2B, para los que existen datos citogenticos humanos positivos, en su mayor parte apoyados por la correspondiente citogentica en animales (Tabla 27.6). Esta limitada base de datos da a entender que las sustancias qumicas cancergenas tienen tendencia a ser clastognicas y que la clastogenicidad tiende a asociarse a los cancergenos humanos conocidos. Est bastante claro, no obstante, que no todos los cancergenos producen lesiones citogenticas en los seres humanos o en los animales de experimentacin in vivo. Los casos en que los datos en animales son positivos y los hallazgos en seres humanos son negativos pueden responder a diferencias en los niveles de exposicin. Asimismo, las complejas y prolongadas exposiciones de los seres humanos en los lugares de trabajo quiz no sean comparables con los experimentos a corto plazo en animales. Los estudios de genotoxicidad en seres humanos expuestos abarcan varios criterios de evaluacin distintos de los criterios de evaluacin cromosmicos, como la lesin del ADN, la actividad reparadora del ADN y los aductos del ADN y de las protenas. Algunos de estos criterios pueden ser ms adecuados que otros para la prediccin del peligro cancergeno. Los cambios genticos estables (p. ej., redistribuciones cromosmicas, deleciones y mutaciones puntuales) son muy adecuados, ya que estos tipos de lesiones se sabe que estn relacionados con la carcinognesis. La significacin de los aductos del ADN depende de su identificacin qumica y de la prueba de que proceden de la exposicin. Algunos criterios de valoracin, como el SCE, la UDS, la SSB o la rotura de la cadena de ADN, son indicadores y/o marcadores potenciales de acontecimientos genticos; sin embargo, su valor es reducido en ausencia de un conocimiento mecnico de su capacidad para dar lugar a acontecimientos genticos. Est claro que el marcador gentico ms adecuado en los seres humanos sera la induccin de una mutacin especfica que haya estado directamente asociada a carcinogenicidad del agente del estudio en roedores (Figura 27.7). Figura 27.7 Aplicabilidad de distintos tipos de biocontrol gentico a la evaluacin del riesgo de cncer.
RIESGO DE n gnesis CANCER mutaci con la carcino les: de una s estab da

Tabla 27.6 Cancergenos humanos demostrados, probables y posibles para los cuales hay exposicin profesional y para los cuales se han medido criterios citogenticos en el hombre y en animales de experimentacin. Hallazgos citogenticos1 Seres humanos Agente/exposicin GRUPO 1, Cancergenos humanos Arsnico y compuestos de arsnico Amianto Benzeno Bis(clorometil)ter y clorometil metil ter (calidad tcnica) Ciclofosfamida Compuestos de cromo hexavalente Melfaln Compuestos de nquel Radn Humo del tabaco Cloruro de vinilo CA ? + (+) + + + + + + + + + + + ? SCE ? ? MN Animales CA + + + + + ? + SCE MN + +

+ +

+ +

+ +

GRUPO 2A, Probables cancergenos humanos Acrilonitrilo Adriamicina + + Cadmio y compuestos de cadmio () Cisplatino + Epiclorohidrina + Dibromuro de etileno Oxido de etileno + + Formaldehdo ? ? GRUPO 2B, Posibles cancergenos humanos Clorofenoxi herbicidas (2,4-D y 2,4,5-T) DDT ? Dimetilformamida (+) Compuestos de plomo ? Estireno + ? 2,3,7,8-Tetraclorodibenzopara-dioxina Humos de soldadura +
1

+ + ? +

+ + + + +

+ +

? +

? ?

? ?

o ocia ccin gentic Indu especfica as ambios cromosmicas c e d n ci es Induc organizacion es s - re minacion as untuale li -e osmic iones p seala ras crom - mutac tu ro o SSB as e d S n D U i c , c E u ti C d S de ciones gen c In recer duccin ra desapa La in posibles alte Pueden mediante . N D A ente o son muy tos del ro Aduc espontneam in, pe s cuando se c ra a p re te n a rt o imp tifican y se iden ionan con relac os rgan diana

CA, aberraciones cromosmicas; SCE, intercambio de cromtidas hermanas; MN, microncleos. () = relacin negativa para un estudio; = relacin negativa; (+) = relacin positiva para un estudio; + = relacin positiva; ? = no se pueden extraer conclusiones; casillas en blanco = no se ha estudiado Fuente: IARC, 1987; actualizado en los volmenes 4350 de las monografas IARC.

Aspectos ticos del biocontrol gentico

Los rpidos avances en las tcnicas de gentica molecular, la creciente rapidez de conocimiento de la secuencia del genoma humano y la identificacin del papel de los genes supresores tumorales y de los protooncogenes en la carcinognesis humana

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27. CONTROL BIOLOGICO

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

suscitan problemas ticos en la interpretacin, comunicacin y utilizacin de este tipo de informacin personal. El rpido avance de las tcnicas de anlisis de los genes humanos pronto permitir la identificacin de ms genes de sensibilidad hereditaria en individuos sanos asintomticos (US Office of Technology Assessment, 1990), lo que llevar a su utilizacin en la exploracin gentica selectiva. Surgirn muchas preguntas de contenido social y tico si la aplicacin de la exploracin gentica selectiva se convierte pronto en una realidad. Ya en el momento actual se sospecha la existencia de unos 50 rasgos genticos metablicos, de polimorfismo enzimtico y de reparacin de ADN en las sensibilidades a enfermedades especficas, y existe una prueba diagnstica con ADN para unas 300 enfermedades genticas. Debe procederse a una exploracin gentica selectiva en el lugar de trabajo? Quin decide las personas que se han de someter a ella? Cmo se utilizar la informacin en la toma de decisiones referentes al empleo? Quin tendr acceso a la informacin obtenida? Cmo se comunicarn los resultados a la persona o personas afectadas? Muchas de estas preguntas estn estrechamente relacionadas con las normas sociales y con los valores ticos vigentes. El principal objetivo debe ser la prevencin de la enfermedad y del sufrimiento humano, pero se ha de mantener el respeto a la voluntad y a las premisas ticas del individuo. En la Tabla 27.7 se presentan algunas de las cuestiones ticas pertinentes que se deben responder adecuadamente antes de iniciar cualquier estudio de biocontrol en el lugar de trabajo, y que se analizan tambin en el captulo Aspectos ticos. Es preciso dedicar tiempo y esfuerzos a la fase de planificacin de cualquier estudio de biocontrol gentico, y hay que conseguir que todas las partes implicadas trabajadores, empresas, y personal mdico del lugar de trabajo estn bien informadas con carcter previo y conozcan tambin los resultados a la conclusin del estudio. Con una atencin adecuada y unos resultados fiables, el biocontrol gentico contribuir a garantizar unos lugares de trabajo ms seguros y a mejorar la salud de los trabajadores.

Tabla 27.7 Algunos principios ticos relacionados con la necesidad de saber en estudios de biocontrol gentico profesional. Grupos a los que se proporciona informacin Informacin proporcionada Lo que se est estudiando Por qu se realiza el estudio Posibles riesgos asociados Cofidencialidad Preparacin para posibles mejoras de higiene, se sugieren reducciones de la exposicin Sujetos estudiados G G G G Servicio de salud Empresa profesional G G G G G G G G G

(drmica) subraya la importancia del empleo de indicadores biolgicos para evaluar el grado de exposicin.

Insecticidas organofosforados
Indicadores biolgicos de efecto. Las colinesterasas son las enzimas diana que explican la accin txica que los organofosforados (OP) ejercen sobre especies de insectos y mamferos. En el organismo humano hay dos tipos principales de colinesterasas: la acetilcolinesterasa (ACHE) y la colinesterasa plasmtica (PCHE). Los OP causan efectos txicos en el hombre mediante la inhibicin de la acetilcolinesterasa sinptica del sistema nervioso. Tambin hay acetilcolinesterasa en los eritrocitos, pero se desconoce la funcin que desempean en estas clulas. La colinesterasa plasmtica es la denominacin genrica de un grupo no homogneo de enzimas presentes en las clulas gliales, el plasma, el hgado y algunos otros rganos. Los OP inhiben tambin la PCHE, pero esta inhibicin no provoca trastornos funcionales conocidos. La inhibicin de las ACHE y PCHE hemticas tiene una estrecha correlacin con la intensidad y la duracin de la exposicin a los OP. Por tratarse de la misma diana molecular responsable de la toxicidad aguda de los OP en el sistema nervioso, la Tabla 27.8 Comparacin de peculiaridades de la exposicin durante la fabricacin y el uso de pesticidas. Exposicin durante la produccin Duracin de la exposicin Grado de exposicin Tipo de exposicin Absorcin a travs de la piel Control ambiental Control biolgico Continua y prolongada Bastante constante A uno o unos pocos compuestos Fcil de controlar Util Complementa el control ambiental Exposicin durante el uso Variable e intermitente Extremadamente variable A numerosos compuestos Variable, en funcin de los mtodos de trabajo Rara vez informativo Muy til cuando lo hay

PESTICIDAS
PESTICIDAS

Marco Maroni y Adalberto Ferioli

Introduccin

La exposicin humana a los pesticidas presenta diferentes caractersticas segn que tenga lugar durante la produccin industrial o durante el uso de stos (Tabla 27.8). La formulacin de productos comerciales (mediante la mezcla de principios activos con otros coformulantes) presenta ciertas caractersticas de exposicin comunes con el uso de pesticidas en la agricultura. De hecho, como la formulacin tiene lugar habitualmente en pequeas industrias que fabrican muchos productos distintos en operaciones sucesivas, los trabajadores quedan expuestos a cada uno de tales pesticidas durante un perodo breve. En salud pblica y agricultura, el uso de cierta variedad de compuestos suele ser la norma, aunque en aplicaciones particulares (por ejemplo, los programas de defoliacin del algodn o de control de la malaria) puede utilizarse un nico producto. La medicin de indicadores biolgicos de exposicin es particularmente til para los usuarios de pesticidas en los casos en que las tcnicas convencionales de evaluacin de exposicin por medio del control del aire ambiental sean poco aplicables. Casi todos los pesticidas son sustancias liposolubles que penetran a travs de la piel. En estas circunstancias, la absorcin percutnea
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Fuente: OMS 1982a, modificado.

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Tabla 27.9 Gravedad y pronstico de la toxicidad aguda por compuestos OP a distintos grados de inhibicin de la ACHE. Inhibicin ACHE (%) 5060 6090 Grado de intoxicacin Leve Moderado Sntomas clnicos Debilidad, cefalea, vahdos, nuseas, salivacin, lagrimeo, miosis, espasmo bronquial moderado Debilitamiento brusco, alteraciones visuales, salivacin excesiva, sudoracin, vmitos, diarrea, bradicardia, hipertonia, temblores de las manos y la cabeza, alteraciones de la marcha, miosis, dolor torcico, cianosis de las membranas mucosas Temblor brusco, convulsiones generalizadas, trastornos psquicos, cianosis intensiva, edema pulmonar, coma Pronstico Convalecencia en 1-3 das Convalecencia en 1-2 semanas

90100

Grave

Muerte por insuficiencia respiratoria o cardiaca

Tabla 27.10 Variaciones de las actividades de ACHE y PCHE en sujetos sanos y en determinados estados fisiopatolgicos. Estado Variacin interindividual1 Variacin intraindividual1 Diferencia entre sexos Edad Peso Colesterol srico Variacin estacional Variacin circadiana Menstruacin Embarazo Menor actividad Actividad de ACHE 1018 % 37 % No Reducida hasta 6 meses de edad Correlacin positiva Correlacin positiva No No Menor Menor Actividad de PCHE Personas sanas 1525 % 6% 1015 % superior en varones

Indicadores biolgicos de exposicin. Para controlar la exposicin a OP se ha utilizado la determinacin en orina de metabolitos derivados de la porcin alquilfosfato de la molcula OP o de residuos generados por hidrlisis del enlace P-X (Figura 27.8). Metabolitos alquilfosfato. Los metabolitos alquilfosfato detectables en orina y el compuesto parental principal del que pueden originarse se recogen en la Tabla 27.12. Los alquilfosfatos de la orina son indicadores sensibles de exposicin a compuestos Tabla 27.11 Actividades de la colinesterasa en sujetos sanos sin exposicin a OP medidas por mtodos seleccionados. Mtodo Michel1 (pH/h) Sexo Hombre Mujer Titulometra1 (mol/min ml) Ellman modificado2 (UI/ml) ACHE* 0,77 0,08 0,75 0,08 PCHE* 0,95 0,19 0,82 0,19 4,90 0,02 3,03 0,66 3,03 0,68

No No

Mayor actividad

Estados patolgicos Leucemia, neoplasia Hepatopata; uremia; cncer; insuficiencia cardaca; reacciones alrgicas Policitemia; talasemia; Hipertiroidismo; otros otras discrasias hemestados de ritmo ticas congnitas metablico elevado

Hombre/mujer 13,2 0,31 Hombre Mujer 4,01 0,65 3,45 0,61

Fuente: Augustinsson 1955 y Gage 1967.

* resultado medio, desviacin estndar. Fuente: 1 Laws 1991. 2 Alcini y cols. 1988.

- +1+

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2-561+1,)5

27.21

27. CONTROL BIOLOGICO

ACHE hemtica es un indicador ms especfico que la PCHE. Sin embargo, la sensibilidad de las ACHE y PCHE hemticas a la inhibicin por parte de los OP vara en funcin de estos compuestos; a igualdad de concentracin en sangre, unos compuestos inhiben ms la ACHE y otros inhiben ms la PCHE. Hay una correlacin razonable entre la actividad hemtica de ACHE y los signos clnicos de toxicidad aguda (Tabla 27.9). La correlacin tiende a ser mejor cuando la tasa de inhibicin es ms rpida. Cuando la inhibicin es lenta, como ocurre en casos de exposicin crnica a bajas concentraciones, la correlacin con la enfermedad puede ser baja o nula. Hay que sealar que la inhibicin de la ACHE hemtica no predice efectos crnicos o retardados.

Se han observado variaciones de las actividades de ACHE y PCHE en sujetos sanos y en condiciones fisiopatolgicas determinadas (Tabla 27.10). Por tanto, la sensibilidad de estas pruebas como medio de control de la exposicin a OP puede elevarse adoptando como referencia valores individuales previos a la exposicin; a continuacin se comparan las actividades de la colinesterasa despus de la exposicin con los valores basales individuales. Los valores de referencia de actividad de la colinesterasa en la poblacin deben usarse slo cuando no se conocen los niveles de la enzima previos a la exposicin (Tabla 27.11). A ser posible, las muestras de sangre se tomarn en el curso de las dos horas siguientes a la exposicin; es preferible la venipuncin a la extraccin de sangre capilar del dedo o el lbulo de la oreja, porque el punto de muestreo podra estar contaminado por restos de pesticida acumulados en la piel de los sujetos expuestos. Es recomendable tomar tres muestras secuenciales para establecer un valor basal normal para cada trabajador antes de la exposicin (OMS 1982b). Se conocen varios mtodos analticos para determinar los valores hemticos de ACHE y PCHE. Segn la OMS, el mtodo espectrofotomtrico de Ellman (Ellman y cols. 1961) debe utilizarse como mtodo de referencia.

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Figura 27.8 Hidrlisis de insecticidas OP.

R R

O P O(S) X

Tabla 27.13 Ejemplos de concentraciones urinarias de alquilfosfatos medidas en distintas condiciones de exposicin a OP. Compuesto Paratin2 Condiciones Va de de exposicin exposicin Intoxicacin oral no mortal Formuladores Oral Concentraciones de metabolitos1 (mg/l) DEP = 0,5 DETP = 3,9 DEP = 0,01-4,40 DETP = 0,01-1,57 DEDTP = <0,01-0,05 DEP = 0,02-5,14 DETP = 0,08-4,08 DEDTP = <0,01-0,43 DMDTP = <0,01 DMP = 0,01-0,42 DMTP = 0,02-0,49 DMP = <0,04-6,3/24 h

H2 O
Hidrlisis

R R

P OH + H O(S) X
Alquilfosfato + Alcohol

Ester organofosforado
X = grupo alquilo

Disulfotn2

Drmica/ inhalacin Drmica/ inhalacin

OP; la excrecin urinaria de estos metabolitos suele ser detectable a un nivel de exposicin al cual no puede detectarse la inhibicin de colinesterasa plasmtica o eritroctica. Se ha medido la excrecin urinaria de alquilfosfatos para distintas condiciones de exposicin y para varios compuestos OP (Tabla 27.13). En unos pocos estudios se ha establecido una relacin entre dosis externas de OP y concentraciones urinarias de alquilfosfatos; en algunos se ha demostrado tambin que hay una relacin significativa entre actividad de colinesterasa y concentraciones urinarias de alquilfosfatos. Los alquilfosfatos suelen excretarse con la orina en poco tiempo. Las muestras recogidas poco despus de la jornada laboral son adecuadas para la determinacin de metabolitos. La medicin de los alquilfosfatos en orina exige una tcnica analtica bastante refinada, basada en la derivacin de compuestos y la deteccin mediante cromatografa de gas-lquido (Shafik y cols. 1973a; Reid y Watts 1981). Residuos hidrolticos. El p-nitrofenol (PNP) es el metabolito fenlico del paratin, metilparatin y etilparatin, EPN. La medicin del PNP en la orina (Cranmer 1970) se ha utilizado ampliamente y ha demostrado buenos resultados para evaluar la exposicin al paratin. El PNP urinario tiene una buena correlacin con la dosis de paratin absorbida. Con concentraciones urinarias de PNP de hasta 2 mg/l, la absorcin de paratin no provoca sntomas y la reduccin de actividad de colinesterasa observada es escasa o nula. La excrecin del PNP es rpida, y las concentraciones urinarias de este compuesto son muy pequeas 48 horas despus de la exposicin. Por tanto, las muestras de orina deben recogerse poco tiempo despus de aqulla.

Forato2

Formuladores

Malatin3 Fenitrotin3 Monocrotofos4

1 2 3 4

Pulverizadores Drmica Pulverizadores Drmica Pulverizadores Drmica/ inhalacin

Vanse las abreviaturas en la Tabla 27.12. Dillon y Ho 1987. Richter 1993. Van Sittert y Dumas 1990.

Carbamatos
Indicadores biolgicos de efecto. Los carbamatos comprenden insecticidas, fungicidas y herbicidas. La toxicidad de los insecticidas carbmicos se debe a la inhibicin de la ACHE sinptica; los herbicidas y fungicidas carbmicos actan segn un mecanismo de toxicidad distinto. Por tanto, la valoracin de la actividad de la colinesterasa en eritrocitos (ACHE) o plasma (PCHE) permite controlar nicamente los insecticidas carbmicos. La ACHE suele ser ms sensible a los inhibidores de carbamato que la PCHE. Normalmente, es posible observar sntomas colinrgicos en trabajadores expuestos a carbamatos con una actividad de ACHE en sangre inferior al 70 % del nivel individual basal (OMS 1982a). La inhibicin de las colinesterasas por los carbamatos es rpidamente reversible. Por tanto, pueden obtenerse resultados negativos falsos si transcurre demasiado tiempo entre la exposicin y el muestreo biolgico o entre ste y el anlisis. Para evitar estos problemas, se recomienda recoger muestras de sangre y analizarlas en el curso de las cuatro horas siguientes a la exposicin. Deben preferirse los mtodos analticos que permiten determinar la actividad colinestersica inmediatamente despus de recoger las muestras de sangre, tal como se ha descrito para los organofosforados. Indicadores biolgicos de exposicin. La medida de la excrecin urinaria de metabolitos de carbamatos como mtodo para controlar la exposicin humana se ha aplicado hasta la fecha slo a unos pocos compuestos y en estudios limitados; la Tabla 27.14 resume los datos relevantes. Como los carbamatos se excretan rpidamente con la orina, las muestras recogidas poco despus del trmino de la exposicin son las adecuadas para la determinacin de metabolitos. Han documentado mtodos analticos para medir metabolitos de carbamato en orina Dawson y cols. (1964); DeBernardinis y Wargin (1982); y Verbek y cols. (1990).

Tabla 27.12 Alquilfosfatos detectables en orina como metabolitos de pesticidas OP. Metabolito Monometilfosfato Dimetilfosfato Dietilfosfato Dimetiltiofosfato Dietiltiofosfato Dimetilditiofosfato Dietilditiofosfato Acido fenilfosfrico Abreviatura MMP DMP DEP DMTP DETP DMDTP DEDTP Principales compuestos parentales Malatin, paratin Diclorvos, triclorfn, mevinfos, malaoxn, dimetoato, fenclorfos Paraoxn, demetn-oxn, diazinn-oxn, diclorfentin Fenitrotin, fenclorfos, malatin, dimetoato Diazinn, demetn, paratin, fenclorfos Malatin, dimetoato, azinfos-metilo Disulfotn, forato Leptofos, EPN

27.22

2-561+1,)5

- +1+

2-,1) ,- 5) 7, ; 5-/741,), - - 64)*)

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Tabla 27.14 Concentraciones urinarias de metabolitos del carbamato medidas en estudios de campo. Indice biolgico -naftol -naftol -naftol Pirimicarb
1 3

Compuesto Carbaril

Condiciones de exposicin formuladores mezcladores/aplicadores poblacin no expuesta I2 y V3 aplicadores

2

Concentraciones medioambientales 0,230,31 mg/m3

Resultados x = 18,5 mg/l1, tasa de excrecin mx. = 80 mg/da x = 8,9 mg/l, intervalo = 0,265 mg/l intervalo = 1,54 mg/l intervalo = 1100 g/l

Referencias OMS 1982a

metabolitos

Verberk y cols. 1990

Ocasionalmente aparecen en la documentacin intoxicaciones sistmicas. 2-metilamino-4-hydroxy-5,6-dimetilpirimidina. x = desviacin estndar.

2-dimetilamino-4-hidroxi-5,6-dimetilpirimidina.

Ditiocarbamatos
Indicadores biolgicos de exposicin. Los ditiocarbamatos (DTC) se usan ampliamente en fungicidas, y se agrupan en tres clases: tiuranos, dimetilditiocarbamatos y etileno-bis-ditiocarbamatos. El disulfuro de carbono (CS2) y su principal metabolito, el cido 2-tiotiazolidina-4-carboxlico (TTCA), son metabolitos comunes a casi todos los DTC. Se ha observado un aumento significativo de las concentraciones urinarias de estos compuestos en distintos estados de exposicin y para varios pesticidas DTC. La etilen tiourea (ETU) es un importante metabolito urinario de los etilen-bis-ditiocarbamatos. Tambin puede estar presente como impureza en formulaciones comerciales. Como se ha determinado que la ETU es un compuesto teratognico y carcinognico para ratas y otras especies y se ha asociado adems con toxicidad tiroidea, se utiliza de forma generalizada para controlar la exposicin al etilen-bis-ditiocarbamato. La ETU no es especfica de ningn compuesto, y puede originarse a partir del maneb, mancozeb o zineb. Se ha propuesto medir los metales presentes en los DTC como alternativa para controlar la exposicin a estos compuestos. Se ha observado que la excrecin urinaria de manganeso aumenta en trabajadores expuestos al mancozeb (Tabla 27.15). El CS2, el TTCA y el manganeso se hallan normalmente en la orina de sujetos no expuestos. Por tanto, se recomienda medir las concentraciones urinarias de los mismos antes de la

exposicin. Las muestras de orina deben recogerse en la maana siguiente al trmino de la exposicin. Maroni y cols. (1992) han publicado mtodos analticos de medicin del CS2, el TTCA y la ETU.

Piretroides sintticos
Indicadores biolgicos de exposicin. Los piretroides sintticos son insecticidas similares a las piretrinas naturales. Estudios con voluntarios han permitido identificar metabolitos urinarios apropiados para el control biolgico de la exposicin. Excretan el metabolito cido 3-(2,2-dicloro-vinil)-2,2-dimetil-ciclopropano carboxlico (Cl2CA) sujetos a los que se ha administrado permetrina o cipermetrina por va oral; el anlogo bromado (Br2CA) lo excretan sujetos tratados con deltametrina. En los voluntarios tratados con cipermetrina se ha identificado tambin un metabolito fenoxi, el cido 4-hidroxi fenoxi benzoico (4-HPBA). Sin embargo, estos ensayos no se han aplicado muy a menudo al control de exposiciones profesionales debido a la complejidad de las tcnicas analticas necesarias (Eadsforth, Bragt y van Sittert 1988; Kolmodin-Hedman y cols. 1982). En fumigadores expuestos a cipermetrina, se han detectado concentraciones urinarias de Cl2CA comprendidas entre 0,05 y 0,18 mg/l; en formuladores expuestos a -cipermetrina, las concentraciones urinarias de 4-HPBA han resultado inferiores a 0,02 mg/l. Para la determinacin de metabolitos se recomienda la recogida de orina de 24 horas, a partir de la exposicin.
27. CONTROL BIOLOGICO 27.23

Tabla 27.15 Concentraciones urinarias de metabolitos del ditiocarbamato medidas en estudios de campo. Concentraciones medioambientales* desviacin estndar 1,03 0,62 mg/m3

Compuesto Ziram

Indice biolgico Disulfuro de carbono (CS2) TTCA1 ETU2 Manganeso

Condiciones de exposicin formuladores

Resultados desviacin estndar 3,80 3,70 g/l 0,45 0,37 g/l intervalo = <0,211,8 g/l

Referencias Maroni y cols. 1992

formuladores aplicadores aplicadores 57,2 g/m3

Maneb/Mancozeb Mancozeb

Kurttio y cols. 1990 Canossa y cols. 1993

antes de la exposicin: 0,32 0,23 g/g creatinina; despus de la exposicin: 0,53 0,34 g/g creatinina
2

* Media segn Maroni y cols. 1992.

TTCA = cido 2-tiotiazolidina-4-carbonlico.

ETU = etilentiourea.

- +1+

2-,1) ,- 5) 7, ; 5-/741,), - - 64)*)

27.23

2-561+1,)5

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Organoclorados
Indicadores biolgicos de exposicin. Los insecticidas organoclorados (OC) se utilizaron mucho en los decenios de 1950 y 1960. Posteriormente, su uso se abandon en muchos pases por su persistencia y la consiguiente contaminacin del medio ambiente. El control biolgico de la exposicin a los OC puede hacerse por la determinacin de pesticidas intactos o de sus metabolitos en sangre o en suero (Dale, Curley y Cueto 1966; Barquet, Morgade y Pfaffenberger 1981). Despus de la absorcin, el aldrn se metaboliza rpidamente en dieldrn, y puede medirse como tal en sangre. El endrn tiene un semiperodo en sangre muy breve; por tanto, la concentracin hemtica de este compuesto slo es til para determinar niveles de exposicin recientes. La determinacin del metabolito urinario anti-12-hidroxi-endrn ha demostrado tambin su utilidad para controlar la exposicin al endrn (van Sittert y Tordoir 1987). Para algunos compuestos OC, se han demostrado correlaciones significativas entre la concentracin de indicadores biolgicos y el inicio de los efectos txicos. Se han relacionado casos de toxicidad por exposicin a aldrn y dieldrn con niveles en sangre de este ltimo superiores a 200 g/l. Se ha sealado una concentracin en sangre de lindano de 20 g/l como nivel crtico superior en cuanto a los sntomas neurolgicos. No se han documentado efectos adversos agudos en trabajadores con concentraciones hemticas de endrn inferiores a 50 g/l. La ausencia de efectos adversos precoces (induccin de enzimas hepticas microsomiales) se ha demostrado en exposiciones repetidas a endrn con concentraciones urinarias de anti-12-hidroxi-endrn inferiores a 130 /g de creatinina; y en exposiciones repetidas a DDT con concentraciones sricas de DDT o DDE inferiores a 250 g/l. Pueden encontrarse bajas concentraciones de OC en la sangre o la orina de la poblacin general. He aqu algunos ejemplos de valores observados: concentraciones hemticas de lindano de hasta 1 g/l; de dieldrn de hasta 10 g/l; de DDT o DDE de hasta 100 g/l; y de anti-12-hidroxi-endrn de hasta 1 g/g de creatinina. Por tanto, se recomienda hacer una evaluacin de los valores basales antes de la exposicin. Las muestras de sangre de los sujetos expuestos deben tomarse inmediatamente despus del final de una sola exposicin. En condiciones de exposicin a largo plazo, el momento de recogida de las muestras de sangre no es crtico. Al final de la exposicin deben recogerse muestras puntuales de orina para determinar metabolitos urinarios.

Figura 27.9 Perfiles de excrecin urinaria de los metabolitos de la atrazina.

concentracin
2,0

Micromoles, M

1,5 1,0 0,5 0,0 6

turnos de trabajo Atrazina bidealquilada

14 22

14 22

14 22

14 22

hora del da

concentracin
0,3

Micromoles, M

0,2

Atrazina desisopropilada Atrazina desetilada

0,1

Atrazina sin metabolizar

6 14 22 6 14 22 6 14 22 6 14 22 6

0,0

hora del da

orina durante un perodo de 24 horas a partir del inicio de la exposicin. Recientemente, utilizando tcnicas de enzimoinmunoensayo (prueba ELISA), se ha identificado un conjugado cido mercaptrico de la atrazina como principal metabolito urinario de sta en trabajadores expuestos. Este compuesto se ha hallado en concentraciones al menos 10 veces superiores a las de cualesquiera otros productos desalquilados. Se ha observado una relacin entre exposicin acumulativa drmica y por inhalacin y la cantidad total del conjugado cido mercaptrico excretada a lo largo de un perodo de 10 das (Lucas y cols. 1993).

Triazinas
Indicadores biolgicos de exposicin. La medicin de la excrecin urinaria de metabolitos triaznicos y del compuesto parental sin modificar se ha aplicado a sujetos expuestos a atrazina en estudios limitados. La Figura 27.9 representa los perfiles de excrecin urinaria de metabolitos atraznicos de un trabajador industrial expuesto a concentraciones de atrazina comprendidas entre 174 y 275 mol/turno de trabajo (Catenacci y cols. 1993). Como otras clorotriazinas (simazina, propazina, terbutilazina) siguen la misma ruta de biotransformacin de la atrazina, pueden determinarse las concentraciones de metabolitos triaznicos desalquilados para controlar la exposicin a todos los herbicidas clorotriaznicos. La determinacin de compuestos sin modificar en la orina puede ser til como medio de confirmacin cualitativa de la naturaleza del compuesto que ha dado lugar a la exposicin. Para la determinacin de metabolitos se recomienda recoger la

Derivados cumarnicos
Indicadores biolgicos de efecto. Los rodenticidas cumarnicos inhiben la actividad de las enzimas del ciclo de la vitamina K en el hgado de los mamferos, incluido el hombre (Figura 27.10), y causan una reduccin proporcional a la dosis de la sntesis de los factores coagulantes, en particular de los factores II (protrombina), VII, IX y X. Los efectos anticoagulantes se manifiestan cuando las concentraciones plasmticas de factores coagulantes disminuyen por debajo de aproximadamente el 20 % de lo normal. Estos antagonistas de la vitamina K se han agrupado en compuestos llamados de primera generacin (por ejemplo, warfarina) y de segunda generacin (por ejemplo, brodifacoum, difenacoum); stos ltimos se caracterizan por un semiperodo biolgico muy prolongado (100 a 120 das). La determinacin del tiempo de protrombina se usa de forma generalizada en el control de la exposicin a las cumarinas. Sin embargo, esta prueba slo es sensible a reducciones del factor de

27.24

2-561+1,)5

- +1+

2-,1) ,- 5) 7, ; 5-/741,), - - 64)*)

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Figura 27.10 Ciclo de la vitamina K.

KH2

Reductasa de la vitamina K
K KO

carboxilasa

carboxilacin de factores precursores de la coagulacin (PIVKA)

Expxido-reductasa de la vitamina K
K = vitamina K KO = epxido de la vitamina K KH2 = forma activa de la vitamina K

coagulacin de aproximadamente el 20 % de los valores plasmticos normales, y no sirve para detectar los efectos precoces de la exposicin. Para este fin se recomienda determinar la concentracin plasmtica de protrombina. En el futuro, estas pruebas pueden ser reemplazadas por la determinacin de precursores del factor de coagulacin (PIVKA), que son sustancias detectables en la sangre slo en caso de bloqueo por cumarinas del ciclo de la vitamina K. En condiciones de exposicin prolongada, el momento de recogida de la sangre no es crtico. En casos de sobreexposicin aguda, el control biolgico debe mantenerse durante al menos cinco das despus del episodio, dada la latencia del efecto anticoagulante. Para aumentar la sensibilidad de estas pruebas se recomienda hacer lecturas de valores basales antes de la exposicin. Indicadores biolgicos de exposicin. Se ha propuesto la medida de cumarinas no modificadas en sangre para controlar la exposicin humana. Sin embargo, la experiencia de aplicacin de estos ndices es muy limitada, debido en especial a que las tcnicas analticas son mucho ms complejas (y estn menos normalizadas) que las necesarias para controlar los efectos sobre el sistema de coagulacin (Chalermchaikit, Felice y Murphy 1993).

humano. Debido a su elevada solubilidad en agua, se excretan rpidamente y sin sufrir alteraciones con la orina. Con frecuencia se han observado concentraciones urinarias inferiores al lmite analtico de deteccin (0,01 g/l) en trabajadores expuestos al paraquat; en pases tropicales, se han observado concentraciones de hasta 0,73 g/l despus de la manipulacin incorrecta de paraquat. Se han documentado concentraciones urinarias de diquat inferiores al lmite analtico de deteccin (0,047 g/l) en sujetos con exposiciones drmicas de 0,17 a 1,82 g/h y con exposiciones por inhalacin inferiores a 0,01 g/h. Lo ideal es utilizar para el anlisis muestras de orina de 24 horas tomadas a partir del final de la exposicin. Si esto no es posible, puede utilizarse una muestra puntual tomada al final de la jornada. La determinacin de las concentraciones sricas de paraquat es til con fines de pronstico en caso de intoxicacin aguda; los pacientes con concentraciones sricas de paraquat de hasta 0,1 g/l 24 horas despus de la ingestin tienen probabilidades de sobrevivir. Summers (1980) ha revisado los mtodos analticos de determinacin de paraquat y diquat.

Pesticidas diversos
4,6-dinitro-o-cresol (DNOC). El DNOC es un herbicida lanzado en 1925, pero su utilizacin ha ido disminuyendo poco a poco por sus elevada toxicidad para plantas y animales. Como sus concentraciones en sangre tienen correlacin, dentro de ciertos lmites, con la gravedad de los efectos adversos para la salud, se ha propuesto medir el DNOC en sangre para controlar exposiciones profesionales y para evaluar el curso clnico en casos de intoxicacin. Pentaclorofenol. El pentaclorofenol (PCP) es un biocida de amplio espectro con accin pesticida contra malas hierbas, insectos y hongos. Se ha recomendado la medicin del PCP inalterado en sangre o en orina como ndice adecuado de control de exposicin profesional (Colosio y cols. 1993), ya que estos Tabla 27.16 Otros ndices propuestos en la bibliografa para el control biolgico de exposicin a pesticidas. Compuesto Bromofos Captn Carbofurano Clordimeform Clorobenzilato Dicloropropeno Fenitrotin Ferbam Fluazifop-butilo Flufenoxurona Glifosato Malatin Compuestos organoestannicos Trifenomorf Ziram Indice biolgico Orina Bromofos Tetrahidroftalimida 3-hidroxicarbofurano Derivados de 4-cloro-o-toluidina p-p-1-Diclorobenzofenona Metabolitos del cido mercaptrico p-nitrocresol Fluazifop Flufenoxurona Glifosato Malatin Sn Trifenilcarbinol, morfolina Malatin Sn Tiram Sangre Bromofos

Herbicidas fenxicos
Indicadores biolgicos de exposicin. Los herbicidas de fenoxiacetato apenas sufren biotransformacin en los mamferos. En el hombre, ms del 95 % de una dosis de cido 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D) se excreta inalterada en la orina en el curso de cinco das; tambin los cidos 2,4,5-triclorofeno-oxiactico (2,4,5-T) y metilfenoxiactico (MCPA) se excretan en su mayor parte inalterados con la orina pocos das despus de su absorcin oral. Se ha aplicado la medida de compuestos inalterados en orina para controlar la exposicin profesional a estos herbicidas. En estudios de campo se ha observado que las concentraciones urinarias de trabajadores expuestos oscilan entre 0,10 y 8 g/l para el 2,4-D; entre 0,05 y 4,5 g/l para el 2,4,5-T; y entre menos de 0,1 y 15 g/l para el MCPA. Se recomienda recoger la orina de 24 horas, empezando en el momento en que termine la exposicin, para determinar compuestos inalterados. Draper (1982) ha documentado mtodos analticos para medir herbicidas fenxicos en orina.

Tiram

Compuestos de amonio cuaternario

Indicadores biolgicos de exposicin. El diquat y el paraquat son herbicidas escasamente transformados por el organismo

- +1+

2-,1) ,- 5) 7, ; 5-/741,), - - 64)*)

27.25

2-561+1,)5

27.25

27. CONTROL BIOLOGICO

HERRAMIENTAS Y ENFOQUES

Tabla 27.17 Valores biolgicos lmite recomendados (en 1996). Compuesto Inhibidores de ACHE DNOC Lindano Paratin Pentaclorofenol (PCP) Dieldrn/Aldrn Endrn DDT Cumarinas MCPA 2,4-D
1 2

Indice biolgico ACHE en sangre DNOC en sangre Lindano en sangre PNP en orina PCP en orina PCP en plasma Dieldrn en sangre Anti-12-hidroxiendrn en orina DDT y DDE en suero Tiempo de protrombina en plasma Concentracin de protrombina en plasma MCPA en orina 2,4-D en orina

BEI1 70 %

VBT2 70 % 0,02 mg/l

LBBS3 70 % 20 mg/l 0,02 mg/l

VLB4

0,5 mg/l 2 mg/l 5 mg/l

0,5 mg/l 0,3 mg/l 1 mg/l 100 g/l 130 g/l 250 g/l 10 % por encima del valor basal 60 % del valor basal 0,5 g/l 0,5 g/l

Los ndices biolgicos de exposicin (BEI) estn recomendados por la American Conference of Governmental Industrial Hygienists (ACGIH 1995). Los valores biolgicos de tolerancia (VBT) estn recomendados por la Investigacin de Riesgos para la Salud de los Compuestos Qumicos en el Area de Trabajo (DFG 1992). 3 Los l mites biol gicos (LBBS) est n recomendados por un grupo de estudio de la OMS (OMS 1982a). 4 Los valores l mite biol gicos (VLB) son una propuesta de un grupo de estudio del Comit Cient fico de Pesticidas de la Comisi n Internacional de Salud en el Trabajo (Tordoir y cols. 1994). Si se sobrepasa este valor, es necesario volver a evaluar las condiciones de trabajo.

parmetros mantienen una correlacin significativa con la carga orgnica de PCP. En trabajadores con exposicin prolongada al PCP, el momento de recogida de muestras de sangre no es crtico; las muestras puntuales de orina deben tomarse la maana siguiente a la exposicin. Shafik y cols. (1973b) han descrito un mtodo multirresiduo para medir pesticidas halogenados y nitrofenlicos. En la Tabla 27.16 se recogen otras pruebas propuestas para el control de la exposicin a pesticidas.

Conclusiones

Se han aplicado indicadores biolgicos para controlar la exposicin a pesticidas en diversos estudios experimentales y de campo.

Algunas pruebas, como las de colinesterasa en sangre o las de determinacin de ciertos pesticidas inalterados en orina o sangre, han sido validadas por una amplia experiencia. Para estas pruebas se han propuesto lmites biolgicos de exposicin (Tabla 27.17). Otras pruebas, en particular las de metabolitos en sangre o en orina, adolecen de mayores limitaciones, sea por dificultades analticas o por limitaciones en la interpretacin de los resultados. Este campo de estudio se encuentra en rpida evolucin y, dada la enorme importancia del empleo de indicadores biolgicos para evaluar la exposicin a estas sustancias, se desarrollarn y validarn continuamente nuevas pruebas.
REFERENCIAS

Referencias
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27.26

4-.-4- +1)5

- +1+

2-,1) ,- 5) 7, ; 5-/741,), - - 64)*)

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Otras lecturas recomendadas

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