Conceptos Generales

Un poco de historia
Friedrich Miescher (1844-1895). En 1869. Estudia la composicin qumica del pus: encuentra una fraccin precipitable por cido diludo que denomina Nuclena.

Encuentra un material parecido a la nuclena en la esperma de salmn, y lo fracciona en un componente proteico (protamina) y un componente que contiene fosforo, de carcter cido, que Richard Altmann (1852-1900) denomina cido nucleico.

Estudios posteriores a Miescher demuestran la existencia de dos tipos de cido nucleico: uno abundante en la levadura, que recibe el nombre de cido zimonucleico y otro, abundante en el timo, llamado cido timonucleico. Posteriormente se comprueba que en la composicin del llamado zimonucleico entra la ribosa, y por eso pasa a llamarse cido ribonucleico (ARN), mientras que el timonucleico contiene desoxirribosa, por lo que pasa a llamarse cido desoxirribonucleico (ADN)

Protenas como material gentico?

1940. Investigadores pensaban que las protenas funcionaban como biomolculas del material gentico. La abundante variedad y cantidad de protenas existentes en la clula, y las propuestas sobre la estructura qumica del ADN.

vs

Las pruebas decisivas a favor del ADN

Frederick Griffiht (1878-1939)
Experimentos con la bacteria

Diplococcus pneumoniae

Inicio de investigaciones para designar

cual de las dos biomolculas era el material gentico. 1928.

Observaciones de Griffith
La cepa S produca infeccin letal en los ratones de su laboratorio y los de la cepa R, no lo hacan. Las cepas S muertas por calor son tambin inofensivas, excepto cuando se las mezcla con cepa R vivas. En este ltimo caso, se puede producir una infeccin fatal y en los ratones infectados se encuentran clulas vivas con cpsulas caractersticas de la cepa S. Este experimento permite inferir que algn factor de la cepa S muerta pasa a las cepas R vivas y las transforma en cepas infecciosas letales. Griffith no supo cual era ese factor.

Experimento de Avery, McLeod y

McCarthy (1944)

El neumococo tipo R (rough, rugoso) (colonias a la izda.) puede ser transformado en neumococo tipo S (smooth, liso) (colonias a la dcha.) por el DNA del neumococo S. Esta transformacin se transmite a la descendencia.

E x p e r i m e n t o

E x p e r i m e n t o

En los aos 40 (19..), Oswald Avery, Colin MacLeod, y Maclyn McCarty revisaron el experimento de Griffith y concluyeron que el factor de transformacin era el ADN. Oswald Avery repitiendo el trabajo de Griffith con el agregado de una enzima que destrua el ADN, demostr que el factor de transformacin era el ADN. Cuando Avery agregaba esta enzima, no observaba la transformacin obtenida por Griffith. El concluy que el material hereditario era ADN y no una protena. Su evidencia era fuerte pero no totalmente concluyente, para esa poca el "candidato principal" para ser el material hereditario eran una protena.

 En los aos 40, Oswald Avery, Colin MacLeod, y Maclyn McCarty revisaron el experimento de Griffith y concluyeron que el factor de transformacin era el ADN. Oswald Avery repitiendo el trabajo de Griffith con el agregado de una enzima que destrua el ADN, demostr que el factor de transformacin era el ADN. Cuando Avery agregaba esta enzima, no observaba la transformacin obtenida por Griffith. Concluy que el material hereditario era ADN y no una protena. Su evidencia era fuerte pero no totalmente concluyente, para esa poca el "candidato principal" para ser el material hereditario eran una protena.

Erwin Chargaff (1929-1992).

En 1949 observ que todos los ADN tenan tantas molculas de adenina (A) como de timina (T), y tantas de citosina (C) como de guanina (G).

Experimentos de Hershey y Chase (1952)

El ADN introducido en la bacteria contiene la informacin necesaria para generar nuevos virus; es decir, el ADN es el portador de la informacin gentica.

La determinacin estructural del ADN: sus protagonistas.

Watson

Crick

Wilkins

Franklin

Pauling

 Crick y Watson En 1953. Proponen la estructura de doble hlice del ADN. Maurice Wilkins: mostr fotos de difraccin de rayos X del ADN. Orient el inters de Watson hacia la qumica estructural de los cidos nucleicos y las protenas. Rosalind Franklin: especialista en tcnicas de difraccin de rayos X. Publica las dos formas del ADN, la cristalina A y la para cristalina B. Linus Carl Pauling: investigacin sobre la naturaleza del enlace qumico.

La doble hlice
James Watson Y Francis Crick

James Watson (izquierda) y Francis Crick junto a la primera estructura ensamblada de doble hlice en el Laboratorio Cavendish de Cambridge (Reino Unido)

Modelo de Watson y Crick de la estructura del DNA

0.34 nm Surco Menor

Surco Mayor

3.6 nm

2.0 nm

Estructura general de nucletidos

Base Prica Pirimdica
O5'

Fosfato O-

P O

CH
4'

O H H 1' H
2'

Pentosa

H
3'

OH

OH

Estructura de la Purina y de la Pirimidina

H C N 3 4 5 CH HC 2 1 6 CH N H C N
7 8 CH 9

N1

HC2 3 N

5C 4C

N H

Pirimidina

Purina

Bases Pricas
NH2
C H1
6 7 5C

O N C H2N1
6 5C 4C

N
7 8 CH 9

HC2 3 4 C N

8 CH 9

N H

C2 3 N H2N

N H

Adenina

Guanina

Bases Pirimdicas

O C HN 3 4 5 C C2 1 6 CH O N H CH3

NH2 C N 3 4 5 CH C2 1 6 CH O N H

O C HN3 4 5 CH C 2 1 6 CH O N H

Timina

Citosina

Uracilo

El azcar

Los cidos nucleicos estn formados por cadenas de nucletidos, unidos por enlaces covalentes entre la molcula de azcar de un nucletido (el carbono 3 de la ribosa o de la desoxirribosa) y la molcula de fosfato del siguiente nucletido que a su vez est unido al carbono 5 de la pentosa.

Estos enlaces son llamados uniones o puentes fosfodister, porque el fosfato est unido por una unin ster fosfato al azcar del nucletido y por otra unin equivalente al azcar del nucletido que lo precede.

25

Polinucletido
NH2 N O P O CH2 O
-

N N NH2 N

OH O P O CH2 O
-

N N NH2 N

Enlace fosfodister

OH O P O CH2 O
-

N N

Enlace -glicosdico
O OH

27

NH2 N O
-

N N

O P O CH2 OH OH H

O H

OH Base

Pentosa Fosfato

Nuclesido Nucletido

Extremo 5

Enlace fosfodister

Extremo 3

......