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  • Extracción de Adn A Partir de Células Del Epitelio Bucal PDF

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    victor0u2
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    El resumen describe los pasos para extraer ácidos nucleicos como ADN y ARN a partir de células epiteliales de la cavidad bucal. Primero, se obtienen las células epiteliales mediante un frotis bucal. Luego, las células se rompen en un tampón acuoso para liberar las moléculas nucleares. Posteriormente, se añade lavavajillas para separar algunas proteínas del ADN, y etanol frío para formar dos fases con el ADN en la interfase.

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    Título original

    EXTRACCIÓN DE ADN A PARTIR DE CÉLULAS DEL EPITELIO BUCAL.pdf

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    © Attribution Non-Commercial (BY-NC)

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    EXTRACCIN DE ACIDOS NUCLEICOS A PARTIR DE CLULAS DEL EPITELIO BUCAL

    MATERIAL:

    Tubo de vidrio. Agua mineral. Agua destilada o miliQ muy fra. Lavavajillas tipo Fairy. Etanol 96 muy frio. Una varilla de vidrio o un espagueti.

    PROTOCOLO: Paso previo: Preparar un tampn con los siguientes ingredientes y guardar a 4C o en un bao de hielo triturado: 120 ml de agua destilada. 1,5 g de ClNa. 5 g de Bicarbonato sdico. 1.- Partiremos de clulas epiteliales. Las obtendremos realizando un frotis (con un bastoncillo) de la cavidad bucal interna (mucosa). Introducir el bastoncillo en 2 ml de tampn. 2.- El lquido obtenido se mezclar con 2 ml de agua muy fra, de esta forma se rompern las clulas por osmosis y se liberarn las molculas nucleares. Agitaremos suavemente.

    3.- Para separar algunas protenas de la molcula de ADN, aadiremos un poco de lavavajillas tipo Fairy. Agitar suavemente para homogeneizar la mezcla. Ojo! no formar mucha espuma.

    4.- Aadiremos 1/3 del volumen de etanol de 96 muy frio (mantenedlo a -20C un da antes) resbalando por las paredes del tubo lentamente, se formarn dos fases.

    5.-Observaremos que en la interfase, se forman pequeas burbujas que quedan adheridas a finos filamentos que podremos arrastrar, enrollar y recoger con ayuda de una varilla de vidrio (un pinchito moruno, un espaguetti, ....). Esos filamentos son cidos Nucleicos, en su mayora ADN con fragmentos de ARN y algunos restos de otras molculas.

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