Prueba de la Desoxirribonucleasa DNAsa

La actividad desoxirribonucleasa (DNAsa) se ha demostrado fundamentalmente en los gneros Staphylococcus y Serratia y consiste en la propiedad de degradar el ADN a fracciones de menor peso molecular. Esta caracterstica se ha utilizado para identificar las especies de Serratia marcescens y Staphylococcus aureus. Weckman y Catlin demostraron la estrecha correlacin entre la produccin de DNAsa de los cultivos de Staphylococcus aureus con la produccin de coagulasa. Fundamento: Se basa en la presencia de la enzima termoestable DNAsa que es capaz de romper los enlaces fosfodiester internos de la molcula de DNA. Se utiliza un medio slido que contiene verde de metilo o TSA los cuales se combinan con DNA altamente polimerizado. Cuando la combinacin no ocurre, por accin de la enzima DNAsa, se produce una decoloracin del medio. Resultado:

S. aureus

Produccin de hidrlisis por la enzima DNasa

Hay hidrlisis del cido nucleico

Interpretacin: La placa de agar DNasa, posteriormente incubado a 37 C por un perodo de 48 horas, se observ el crecimiento del microorganismo y al ser inundando la placa con HCl 0,1 N se evidencia la formacin de un halo transparente alrededor del crecimiento de colonias bacterianas lo cual nos indica que el microorganismo tiene la enzima termoestable DNAsa. La cual es caracterstica de S. aureus.

Discusin. La prueba de DNAsa con el Estafilococos aureus presentan formacin de una zona traslucida alrededor del crecimiento de colonias bacterianas. Indicndonos que tienen la propiedad de degradar el ADN a fracciones de menor peso molecular. Esto se debe a la presencia de la enzima termoestable DNAsa. La placa se inunda con cido clorhdrico, que causa la precipitacin del ADN polimerizado y hace al medio opaco.

Conclusin. La prueba de DNasa, se utiliza para diferenciar los microorganismos basados en la actividad de desoxirribonucleasa (DNasa). El microorganismo aislado en el agar DNasa, tiene la enzima termoestable DNAsa.

Referencias bibliogrficas: 1. Matthew h. Fusillo and Daniel l. Weiss. Qualitative estimation of staphylococcal Deoxyribonuclease. Laboratory Section for Infectious Diseases, D. C. General Hospital, and Department of Pathology, The George Washington University School of Medicine, Washington, D. C; J Bacteriol. 1959 October; 78(4): 520522. [DISPONIBLE EN ] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC290579/?page=1 2. BD. DNase Test Agar. Instrucciones de uso, medios en placa listos para usar. Rev.: Junio de 2003. [DISPONIBLE EN] http://www.gpjasociados.com/edukatics/file.php/54/DNAsa.pdf