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Biologa del Desarrollo

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Fecundacin Tcnicas de reproduccin asistida

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Dra. Mara Cristina Mrquez Orozco Profesor Titular de Carrera Departamento de Embriologa Facultad de Medicina UNAM

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RESPETE EL DERECHO DE AUTOR APOYE LA CREATIVIDAD Y LA PRODUCCIN DE MATERIAL DIDCTICO

Este fascculo o cualquiera de sus partes no deber reproducirse, ni archivarse en sistemas recuperables, ni transmitirse en ning una forma, ni por ningn medio electrnico, de fotocopiado, grabado o cualquier otro sin permiso escrito del autor.

BIOLOGA DEL DESARROLLO Tercera edicin 2005 4 reimpresin Derechos reservados

Edicin: Amalia Mrquez Orozco

Obra general:ISBN968-7785-00-4 FECUNDACIN TCNICAS DE REPRODUCCIN ASISTIDA:ISBN968-7785-08-X

Impreso en: Gounod 129 Mxico, 06250 D.F. IMPRESO EN MXICO

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Fecundacin Tcnicas de reproduccin asistida

Como te habrs dado cuenta, las dificultades que tienen que superar los espermatozoides para ponerse en contacto con el ovocito son muchas, y en cada parte del aparato reproductor se elimina un gran nmero de estas gametas, lo que es una seleccin natural, ya que entre los que se destruyen y los que no llegan hasta el tercio externo, se encuentran algunas con alteracin morfolgica o fisiolgica. Se ha calculado que un hombre normosprmico expulsa, en una eyaculacin, slo alrededor de 25 millones de espermatozoides competentes para la fecundacin, por eso las personas con teratospermia, oligospermia, astenospermia o discinesis tienen problema de fertilidad. A pesar de que en Mxico hay una sobrepoblacin, y hasta los osos panda se han podido reproducir, existen numerosas parejas que tienen serios problemas para concebir a una criatura, y daran cualquier cosa para lograrlo. De hecho, estas parejas han contribuido al avance de las investigaciones sobre la fertilidad humana, y gracias a ellas, da con da, el xito en la resolucin de este tipo de padecimientos es mayor. Por lo pronto, aprende la informacin de la que se dispone para formar cimientos firmes sobre los que puedas construir con solidez tu carrera. Sigue marcando el texto, modelando, coloreando los esquemas y haciendo tus propios resmenes. C ONTINA AVANZANDO POR EL CAMINO DE LOS TRIUNFADORES !

Transporte del ovocito

Aproximadamente a los 5 minutos de la inseminacin, algunos espermatozoides que se adelantan a millones de sus compaeros de viaje llegan a la ampolla, en el tercio externo de la tuba uterina, en donde se encontrarn con el ovocito secundario, rodeado por la zona pelcida, la corona radiada, clulas del cmulo ovgero, y parte del licor folicular. Estas estructuras son importantes para que el ovocito sea llevado al interior de la tuba. Ovocitos de coneja, desnudos, no pueden ser transportados hacia el tercio externo de la tuba. El ovocito humano, aparentemente, depende menos de estas estructuras para su transporte , pero no se descarta la posibilidad de que contribuyan en el proceso. El ovocito secundario o el embrin tardan en llegar al tero aproximadamente 80 horas (3 a 4 das) de este tiempo se produce un transporte lento (72 horas) de la ampolla hasta antes del istmo y uno rpido en 8 horas determinado por la progesterona que permite la relajacin de la unin las tubas con el tero y la entrada de ste.

Transporte de los espermatozoides

Se considera como el transporte rpido de los espermatozoides al que se presenta desde el depsito del semen en la vagina hasta que llegan a las tubas. Durante este tipo de transporte, los espermatozoides viajan con rapidez durante la eyaculacin desde la cola del epiddimo los conductos deferentes; la uretra se mezclan con el lquido seminal secretado por las vesculas seminales y la prstata; para formar el 90% del semen con pH de 7.2 a 7.8, al que se incorporan las secreciones de las glndulas bulbouretrales o de Cowper para completar su composicin. El semen es depositado en el fondo de la vagina con un pH de 4.3, (con funcin bactericida), en Biologa del Desarrollo 10 segundos se eleva a 7.2 y en unos minutos los amortiguadores del lquido seminal lo estabilizan entre 6.0 y 6.5, que es el adecuado para que los espermatozoides se muevan con vigor y pasen al cervix que los succionan, aunque se mueven en forma helicoidal y en lnea recta. El moco cervical filante o E, formado durante la ovulacin facilita el ascenso de los espermatozoides mientras que el denso, formado en la etapa progestacional o G, lo obstaculiza o impide. El ascenso inicial se debe al peristaltismo del tero y las tubas uterinas y en slo 5 a 20 minutos llegan a la regin ampular de stas. El lento se debe al movimiento flagelar de los espermatozoides, que al entrar a la tuba se Fascculo 8

4 pueden fijar al epitelio del istmo mientras se capacitan y despus se desprenden para seguir al activarse el movimiento del flagelo y es probable que los atraiga alguna sustancia del licor folicular o las estructuras que rodean al ovocito, esto es un efecto de quimiotactismo. Es probable que los espermatozoides sean funcionales por 80 horas despus de ser depositados en tracto genital femenino. Segn

Mrquez-Orozco MC datos recientes, en el momento en que se lleva a cabo la fecundacin, slo alrededor de 200 espermatozoides llegan a la ampolla para encontrarse con el ovocito suspendido en el lquido de la tuba uterina, y una docena lo rodea, aunque despus se localicen entre 2,000 y 3,000 en esta regin tubaria.

Capacitacin
Los espermatozoides deben permanecer en el 2+ medio tubario, rico en Ca , aproximadamente 6 horas para que concluya la capacitacin, de la que no se conoce con precisin cmo se lleva a cabo, pero consiste en la eliminacin del factor descapacitante, formado por las glucoprotenas que adquieren los espermatozoides en el epiddimo. Parecen intervenir algunas enzimas como la amilasa presente en el medio uterino, que tiene un pH alcalino y los componentes del licor folicular que acompaa al ovocito al ser expulsado durante la ovulacin, que rodea a las clulas granulosas de la corona radiada y al cumulus oophorus. Como recordars, el licor folicular contiene aproximadamente 20 enzimas. Durante la capacitacin, la membrana del espermatozoide pierde colesterol, carbohidratos y protenas, despus de lo cual aumenta la movilidad del espermatozoide (figura 1).

FIGURA 1.

CAPACITACIN DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO.

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Paso de los espermatozoides por la corona radiada

Solamente los espermatozoides capacitados tienen probabilidad de pasar libremente entre las clulas que aun persisten del cumulus oophorus y entre las de la corona radiada, para llegar a la zona pelcida. La corona radiada constituida por 2,000 a 3,000 clulas granulosas unidas principalmente por el cido hialurnico y otras glucoprotenas, en un principio slo con aproximadamente 12 espermatozoides que tratan de penetrarla, lo que consiguen gracias a los activos movimientos natatorios de los espermatozoides. La motilidad de los espermatozoides aumenta por la accin de las prostaglandinas del lquido seminal. El movimiento del flagelo de los espermatozoides tambin es necesario para que atraviesen la zona pelcida. Existe la creencia muy difundida, de que el cido hialurnico de las clulas granulosas de la corona radiada es disuelto por la hialuronidasa del acrosoma del espermatozoide, pero esto es falso, ya que la hialuronidasa es liberada despus de que el espermatozoide se une a la zona pelcida y de haber llevado a cabo la reaccin acrosmica. Se ha demostrado experimentalmente que los espermatozoides de gallo sin hialuronidasa, pueden atravesar la corona radiada de los ovocitos de los mamferos. Lo anterior parece suficiente para apoyar que la hialuronidasa, no interviene en el proceso. Reconocimiento de los espermatozoides a nivel de la zona pelcida Por investigaciones realizadas en la zona pelcida del ratn, se sabe que est compuesta por glucoprotenas de tres tipos, que son: La ZP1, con peso molecular de 200 kDa. La ZP2, de 120 kDa. La ZP3, de 83 kDa. Las molculas de ZP2 alternan con las de ZP3, lo que significa que hay una molcula de ZP3 entre dos de ZP2, en los filamentos. Las molculas de ZP1 forman puentes entre estos filamentos y estabilizan las molculas de la zona pelcida (figura 2). La ZP3 tiene tres componentes especficos que se acoplan uno a uno con tres sustancias localizadas en la cabeza del espermatozoide; lo que equivale a que un antgeno se una a su anticuerpo o a que una llave abra una cerradura. En el espermatozoide de ratn y probablemente en el humano, las tres sustancias que forman una especie de tripletas son: Un receptor de galactosa de 56 kDa, que se une a la galactosa de la ZP3 (figura 2). Una enzima llamada galactosiltransferasa, de 60 kDa, que reconoce y se une al azcar Nacetilglucosamina de la ZP3 (figura 2). Una protena transmembranal de 95 kDa, que en el interior de la clula tiene una tirosina cinasa fosforilada y hacia el exterior se une a la ZP3 (figura 2).

Reaccin acrosmica
Una vez que se lleva a cabo el acoplamiento del espermatozoide con la ZP3, se produce la reaccin acrosmica (figura 3), la cual se lleva a cabo de la siguiente manera: Entran grandes cantidades de Ca y Na y + sale H , lo que provoca un aumento del pH intracelular. S e f us ion a l a m em br a n a p l as m tic a d e l es p erm at o zo i d e a l a m em br an a ex ter n a d el ac ros om a. En los sitios en que unen las membranas , se forman numerosos orificios, como los de una coladera, por los que se libera la hialuronidasa hacia la parte externa de la zona pelcida. Biologa del Desarrollo
2+ +

Desaparecen por completo estas dos membranas en la parte anterior de la cabeza del espermatozoide. En el interior de la zona pelcida, se produce la liberacin de dos proteasas o enzimas proteolticas, la acrosina, similar a la tripsina y la neuraminidasa, que estn en la parte ms profunda del acrosoma, cerca de la membrana interna de ste, la cual se localiza sobre la membrana nuclear. Protenas de la membrana interna del acrosoma se unen secundariamente a la ZP2. De esta manera, el espermatozoide cambia la unin de la ZP3 a la ZP2.

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6 El acrosoma intacto es incapaz de unirse a la ZP2. No se sabe con precisin cmo se une el espermatozoide de ratn a la ZP2. En el cerdo, una proteasa, la acrosina o la proacrosina, mantiene la reaccin acrosmica. En el cuy, la unin a la ZP2 es mediada por una protena denominada PH-20, que est en la membrana interna del acrosoma. Es probable que en el espermatozoide humano exista una protena parecida a la PH-20, y que la reaccin acrosmica sea semejante en la especie humana. En los mamferos superiores se han encontrado muchos tipos de enzimas acosmicas, como: Proteinasa cida. Acrosina. Arilaminidasa. Colagenasa. Esterasa. -galactosidasa. -glucuronidasa. Hialuronidasa. Neuraminidasa. Fosfolipasa C. Proacrosina. Cuando se completa la reaccin acrosmica, el espermatozoide atraviesa la zona pelcida, ayudado por las enzimas, principalmente por la acrosina, y por los movimientos del flagelo, favorecidos por las prostaglandinas del lquido seminal; que lo impulsan hasta el espacio perivitelino, localizado entre la zona pelcida y la membrana ovular (figura 3). En este momento, la parte anterior del espermatozoide, que conserva la membrana interna del acrosoma, se contina con la membrana citoplasmtica postacrosomal.

Mrquez-Orozco MC Fusin del espermatozoide con el ovocito Una vez que atraviesa el espacio perivitelino, por accin enzimtica, el ecuador de ambas se pone en contacto con la membrana del ovocito, se fusionan por medio de protenas fusognicas, semejantes a las de los virus que favorecen la fusin celular (figura 3). Cuando ya se fusionaron las membranas, penetran en el citoplasma ovular: La cabeza del espermatozoide. El centriolo proximal. La pieza intermedia con las mitocondrias. El flagelo. El proceso es mediado por Ca . La membrana plasmtica del ovocito conserva un "parche" formado por la membrana del espermatozoide (figura 4). La fusin del espermatozoide del criseto o hmster al ovocito, se ha observado en el microscopio fotnico y en el electrnico, y se ha comprobado la participacin de las microvellosidades del ovocito, en la penetracin del espermatozoide. Bloqueo rpido de la polispermia Tan pronto como entra el espermatozoide al ovocito, cambia el potencial de la membrana + ovular, debido a la entrada de Na y a la salida + de H , y en uno a tres segundos se produce el bloqueo rpido de la polispermia (figura 4), que evita la entrada de otro espermatozoide; pero, si dos penetran al mismo tiempo, el ovocito no puede evitar la polispermia, y en este caso se produce una dispermia. En la especie humana, la dispermia provoca el desarrollo de una mola hidatiforme o un aborto y, en pocas ocasiones, el desarrollo de un nio anormal que ha llegado al trmino de la gestacin.
2+

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FIGURA 2.

COMPONENTES DE LA ZONA PELCIDA Y DE LA SUPERFICIE DEL ESPERMATOZOIDE QUE INTERVIENEN EN EL RECONOCIMIENTO DE LAS GAMETAS DE LOS MAMFEROS.

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FIGURA 3.

REACCIN ACROSMICA, PENETRACIN DEL ESPERMATOZOIDE AL ESPACIO PERIVITELINO Y FUSIN DE SU MEMBRANA CON LA DEL OVOCITO, EN MAMFEROS.

En el erizo de mar, que es un modelo experimental muy utilizado en el estudio de la fecundacin, en el que se forman vulos que han eliminado los dos glbulos polares, se ha medido el potencial de reposo de la membrana, que es de -70 mV y cambia a +10 mV o +2O mV, lo que Biologa del Desarrollo

indica que se produce una despolarizacin. El bloqueo rpido dura aproximadament e un minuto. En los mamferos probablemente se produce un cambio de potencial similar, que determina el bloqueo rpido de la polispermia (figura 4).

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FIGURA 4.

FECUNDACIN DE UN OVOCITO SECUNDARIO DE UN MAMFERO.

Reaccin cortical y bloqueo lento de la polispermia

Despus del bloqueo rpido se inicia el bloqueo lento de la polispermia, que se debe a la reaccin cortical. Durante est, los grnulos corticales, que contienen enzimas proteolticas y mucopolisacridos y estn localizados por dentro de la membrana ovular, se vacan hacia fuera de la membrana ovular por exocitosis. En el erizo de mar forman una membrana de fecundacin. En este animal los grnulos liberan: primero proteasas, despus mucopolisacridos y protenas que provocan la salida de agua y forman la membrana de fecundacin; a continuacin, se libera peroxidasa que endurece la membrana de fecundacin, al unirse a protenas con residuos de tirosina; y, por ltimo sale hialina, que origina una cubierta alrededor del huevo; ste forma microvellosidades que se interior de una capa hialina. proyectan en el

La reaccin cortical es mediada por una 2+ corriente de Ca que se produce dentro del ovocito, cuando este in sale del retculo endoplsmico y se propaga, desde el punto en el que penetra el espermatozoide, hasta el polo contrario del ovocito, como las ondas que se producen al caer una piedra al agua. En el huevo del erizo de mar, en el de la medusa y en el de otros animales marinos, se ha observado con precisin esta corriente, que es suficiente para impedir definitivamente la entrada de otro espermatozoide. La reaccin cortical y 2+ la propagacin de la corriente de Ca se llevan a cabo en un tiempo que vara entre 30 y 120 segundos (figura 4).

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Mrquez-Orozco MC En los mamferos, la reaccin cortical no es tan compleja como en el erizo de mar, pero es igualmente importante (figura 5); tambin se inicia en el sitio de entrada del espermatozoide y sigue los siguientes pasos: Fusin de la membrana de los grnulos corticales a la membrana del ovocito (figura 5). La fusin de los grnulos corticales a la membrana del ovocito provoca la liberacin, por exocitosis de las enzimas y polisacridos de los grnulos corticales al espacio perivitelino (figura 5). Se desencadena la reaccin de zona por la adherencia de estas sustancias a la zona pelcida, que cambian su naturaleza, se endurecen e impiden la entrada de otros espermatozoides (figura 5).

11 La reaccin de zona, tpica de los mamferos, se ha observado en el huevo humano fecundado in vitro, y parece ser suficiente para impedir la polispermia, ya que no se forma una membrana de fecundacin. La reaccin cortical tiene una duracin similar a la del erizo de mar, que vara entre 30 y 120 segundos. En el ratn, los grnulos corticales tienen dos tipos de enzimas: Las N-acetilglucosaminidasas, que impiden que la N-acetilgalactosamina de la ZP3 se una a la galactosiltransferasa del espermatozoide. Las proteasas, que fragmentan la ZP2, y cambian su estructura, la endurecen y esto impide que se le unan otros espermatozoides.

FIGURA 5.

REACCIN CORTICAL Y REACCIN DE ZONA EN UN OVOCITO DE MAMFERO.

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Activacin metablica del huevo

El pH intracelular del ovocito aumenta : Por la entrada de Na , la salida de H . Por la formacin de una corriente de iones Ca , liberados del retculo endoplsmico. Los cambios inicos provocan la salida de agua del ovocito que, por lo tanto, se deshidrata. El espacio perivitelino se hace ms amplio. Se recupera la relacin nucleocitoplsmica necesaria para que se divida el cigoto recin formado, despus de que se activa su metabolismo. La relacin nucleocitoplsmica se pierde durante el crecimiento rpido del ovocito, por la expresin gnica que se da en la subfase diplotena, en la que se sintetizan los grnulos corticales y una cantidad mayor de citoplasma y de vitelo que le impide dividirse como las otras clulas del cuerpo. Al concluir la reaccin cortical y la de zona algunos espermatozoides quedan atrapados en la zona pelcida o en el espacio perivitelino. En el huevo de los mamferos y en el del erizo 2+ de mar, la liberacin intracelular de Ca provoca que aumente: El pH.
2+ + +

El consumo de oxgeno. La sntesis de protenas. La sntesis de ADN. Induce la activacin de la enzima nicotinamida + adenindinucleotidocinasa o NAD cinasa que convierte a la nicotinamida adenindinucletido + + + o NAD en fosfato del NAD o NADP , que intervienen en el metabolismo de los lpidos y en particular en la biosntesis de la membrana de las clulas que derivan del huevo en segmentacin. En los mamferos, el espermatozoide entra en un ovocito secundario, y los cambios intracelulares que produce son: Eliminacin de la accin del factor citosttico, que mantena la segunda detencin meitica, en metafase II (figura 6). Que complete la segunda divisin meitica o meiosis II (figura 6). La expulsin del segundo glbulo polar al espacio perivitelino (figura 6). Que el ncleo del vulo fecundado forme el llamado proncleo femenino, haploide. En el humano su frmula cromosmica es 23,X y tiene cromosomas monovalentes (figura 6).

Expulsin del segundo glbulo polar y cambio de posicin del centriolo proximal del espermatozoide
Mientras el ovocito elimina el segundo glbulo polar hacia el espacio perivitelino, en el citoplasma ovular, la cabeza del espermatozoide, gira 180, dirigido por el ster, el cual es organizado por el centriolo proximal. Debido a este cambio de posicin, el centriolo proximal del espermatozoide se coloca entre el ncleo haploide con cromosomas monovalentes del vulo, que es el proncleo femenino y la cabeza del espermatozoide, que posteriormente origina el proncleo masculino, de sta manera los microtbulos del huso acromtico podrn atrae a los cromosomas de ambos proncleos (figura 6).

Descondensacin de la cromatina del espermatozoide, formacin del proncleo masculino y del cigoto
En el interior del ovocito: La membrana nuclear del espermatozoide desaparece, y la cromatina se pone en contacto con el citoplasma ovular. Las protaminas, que por sus puentes disulfuro compactaron la cromatina durante la Biologa del Desarrollo espermiognesis, cuando se prepara para "viajar", son sustituidas por histonas, que de nuevo la descondensan. El proceso equivaldra a desempacar. Cuando termina la sustitucin de protaminas, se reintegra la membrana nuclear, a partir del retculo endoplsmico del ovocito. El ncleo Fascculo 8

Mrquez-Orozco MC recin formado recibe el nombre de proncleo masculino, y morfolgicamente es igual al femenino (figura 6). En los dos proncleos, por separado, se lleva a cabo la sntesis de ADN, de manera que los cromosomas, se vuelven bivalentes. Mientras se sintetiza el ADN, los proncleos migran al centro del cigoto, se acercan y cada uno realiza de manera independiente la profase. Al final de sta, desaparecen las membranas nucleares y se diferencia el huso acrosmico (figura 6).

13 En la metafase, los cromosomas bivalentes de los dos proncleos se colocan en el centro del huso acromtico, y forman la placa metafsica o ecuatorial, en la que no se distingue qu cromosomas provienen de cada proncleo, y se origina un verdadero cigoto, aproximadamente a las 12 horas de la penetracin del espermatozoide (figura 6). En la anafase, migran a cada polo del huso acromtico 46 cromosomas monovalentes.

Formacin de los dos primeros blastmeros

En la telofase se produce la divisin del citoplasma del huevo o citodiresis, y se forma la membrana nuclear de las nuevas clulas, que ahora tienen ncleos diploides por primera vez desde que se inici la penetracin del espermatozoide al ovocito (figura 6). Las clulas derivadas de la divisin de un cigoto o huevo reciben el nombre de blastmeros (figura 6). Los microtbulos del flagelo y casi todas las mitocondrias del espermatozoide se desintegran en el citoplasma ovular, por lo que se considera que las mitocondrias del embrin son maternas u ovulares, ya que cuando mucho una de cada 10,000 es paterna.

Consecuencias inmediatas de la fecundacin

La fecundacin, despus de activar al ovocito para que complete la segunda divisin meitica, tiene como consecuencias: El restablecimiento del nmero diploide de cromosomas en el nuevo individuo, pues al reunirse las gametas haploides (N) con cromosomas monovalentes, la frmula cromosmica de los blastmeros es 46,XX o 46,XY. La determinacin del sexo gentico cromosmico del nuevo embrin. o La formacin de un cigoto que tiene cromosomas paternos y maternos determina el inicio del desarrollo de un individuo nico e irrepetible, que permite la conservacin de la especie. La activacin del metabolismo del huevo induce el inicio de la segmentacin, que es la divisin de un cigoto o huevo en clulas pequeas llamadas blastmeros. Puede existir una consecuencia ms, que se presenta cuando algunas de las gametas que originan el nuevo embrin son anormales y ser el inicio del desarrollo de un embrin anormal , que segn las alteraciones que presente sobrevivir o no.

Si penetra un espermatozoide con frmula cromosmica 23,X se desarrollar un embrin femenino con 46,XX cromosomas. Si el espermatozoide que penetra tiene frmula cromosmica 23,Y el embrin ser masculino y tendr frmula 46,XY.

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FIGURA 6.

FECUNDACIN DE UN VULO DE UN MAMFERO, DIVISIN DEL CIGOTO Y FORMACIN DE LOS DOS PRIMEROS BLASTMEROS.

Fecundacin externa
En numerosos invertebrados, como el erizo de mar, en los peces y en muchos de los anfibios, la fecundacin es externa, lo que determina que el nmero de huevos y espermatozoides liberados al medio sea mucho mayor que el producido por los vertebrados, cuya fecundacin es interna. En los animales con fecundacin externa, las gametas estn expuestas a un ambiente que puede resultar adverso, debido a la presencia de sustancias txicas, como: cloro, pesticidas, detergentes, metales pesados (Pb, Hg o Cr), fertilizantes, entre otros, o la ausencia de otros, como el Ca o el Na. En animales como el erizo de mar, los peces y los anfibios, se desarrollan procesos especiales de atraccin qumica de las gametas o quimiotactismo y otros, para evitar tanto la polispermia como el que se forme una membrana de fecundacin y una capa hialina. Lo anterior asegura que slo se renan los espermatozoides y vulos de la misma especie.

Fecundacin interna entre dos especies

En cambio, en los animales de fecundacin interna, los espermatozoides de especies cercanas pueden fecundar y originar hbridos Biologa del Desarrollo interespecficos, como las mulas o los mulos que se originan de la cruza de un burro y una yegua. Las hembras son frtiles si se aparean Fascculo 8

Mrquez-Orozco MC con el burro. En la cruza de un caballo con una burra nace el burdgano, que es estril. Mientras ms cercanas son las especies que se aparean, hay mayor posibilidad de que las cras sean frtiles; por ejemplo, el perro y el lobo. En la naturaleza, la hibridacin interespecfica es un proceso que ha permitido la evolucin de las especies.

15 Hasta aqu el tema correspondiente a la fecundacin, que es en verdad impresionante, por la forma tan perfecta en que se encadena la secuencia de un proceso con otro para garantizar la supervivencia de las especies que tienen reproduccin sexual.

Tcnicas de reproduccin asistida

Son los procedimientos que el hom bre ha diseado para que las parejas que tienen problemas de fertilidad logren procrear. Todos se han basado en los resultados de la investigacin que se hace en animales y en humanos. Entre las tcnicas de reproduccin asistida que se practican en la actualidad, se encuentran: La inseminacin artificial. La fecundacin in vitro, IVF o transferencia de embriones o FIV-TE. FIV y La transferencia intratubaria de gametas, GIFT o TITG. La transferencia intratubaria de cigotos, ZIFT o TITC. La microinyeccin de espacio perivitelino. espermatozoides de al un

La microinyeccin directa espermatozoide en el ovocito.

Inseminacin artificial
Este procedimiento se practic por primera vez en el ganado vacuno, con semen fresco y posteriormente con semen congelado en nitrgeno lquido. Esta tcnica facilit la reproduccin del ganado, pues con semen de un semental de muy buena raza se insemina a un nmero mucho mayor de hembras, que las que se fertilizan de manera natural, sin necesidad de comprar al macho ni mantenerlo, pues el semen se vende en ampolletas o pajillas, en los bancos de semen, en donde las conservan durante aos. La inseminacin artificial ha sido utilizada adems del ganado, en otro tipo de animales, como perros de raza fina, variedades exticas como cocodrilos, el cndor y un gran nmero de especies que estn en vas de extincin. Tambin es posible que alguna vez hayas odo hablar de cmo la inseminacin artificial en humanos, en la actualidad, es un procedimiento que se practica en parejas con problemas de infertilidad, debida, por ejemplo, a: Que el depsito del semen no puede realizarse de manera natural; como sucede en los hombres que padecen epispadias o hipospadias, anomalas en que la uretra est hendida. Otras deformaciones fibrosis. peneanas, como la La eyaculacin precoz, en la que el semen no logra depositarse en la vagina. Alteraciones del semen, como la oligospermia. Anomalas del tracto genital femenino, como la estenosis vaginal o cervical (disminucin del calibre de la luz). Que el medio vaginal aglutine el semen. La produccin escasa de moco cervical. En estas parejas, la inseminacin se puede practicar con el semen del esposo, despus de pasar todas las pruebas de espermatobioscopia, nombre que se da al tipo de exmenes por los que el mdico se cerciora de que el semen tiene un nmero suficiente de espermatozoides, con las caractersticas normales requeridas para que se lleve a cabo la fecundacin. El semen preparado en medios de cultivo adecuados para capacitar a los espermatozoides, con una jeringa y un catter diseado especialmente para este fin, se introduce, ya sea en el tero o en las tubas uterinas, en el momento ms cercano a la ovulacin, con lo que se trata de favorecer la fecundacin. Aunque la inseminacin se practica durante varios das, antes, durante y despus de la Fascculo 8

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16 ovulacin, no siempre se logra en el primer intento que la mujer se embarace, pero con frecuencia el procedimiento termina de manera exitosa. En otro tipo de parejas estriles, en las que no se logra obtener semen con la cantidad suficiente de espermatozoides aptos para la fecundacin, como es en personas con: Teratospermia. Astenospermia. Discinesis. Azoospermia. La inseminacin se puede practicar con el semen de un donador annimo, que debe: Estar sano. Ser menor de 40 aos. Haber engendrado hijos sin antecedentes de malformaciones congnitas, que pudieran heredarse. Comprobar que el donador no padece infecciones que pongan en peligro la salud del embrin, la de la madre o la de ambos. En Estados Unidos, hay bancos de semen que conservan congelado en nitrgeno lquido a 100C; de esta manera, los espermatozoides

Mrquez-Orozco MC cri preservados*, permanecen viables por tiempo tericamente indefinido, y la persona en la que se practicar la inseminacin artificial puede elegir las caractersticas fsicas del donador; que se guardan en los archivos confidenciales del banco de semen.
*(de kryos, fro, y preservacin).

Tambin se hace la cri preservacin del semen de personas que se practicarn la vasectoma o se sometern a quimioterapia (tratamiento contra el cncer) u otro tipo de terapia que dae a los espermatozoides, con lo que se conserva la posibilidad de engendrar a un hijo, aunque la persona ya no sea frtil o haya muerto. En Mxico se pueden conservar muestras cri preservadas de semen, la inseminacin artificial, en general, se lleva a cabo con semen recin obtenido de donadores annimos, ya que no existen bancos de semen como en otros pases, probablemente porque no es muy aceptado este tipo de procedimiento por algunas par ejas estriles que, en ocasiones, prefieren adoptar un nio, debido a principios ticos, morales y religiosos, o porque la demanda no es muy grande y no se justifica la inversin que se requiere para montar este tipo de bancos o centros de estudio y conser vacin de esperma (CECOES).

Fecundacin in vitro IVF o FIV y transferencia de embriones FIV-TE

En otras parejas, la esterilidad se debe a que no se pueden reunir las gametas por diferentes problemas; por ejemplo: La agenesia o atresia de las tubas uterinas o anomalas uterinas congnitas. Padecimiento de infecciones que traen como consecuencia inflamacin y obstruccin de las tubas. En pacientes que despus de una salpingotoma o una histerectoma desean volver a concebir un hijo. En hombres que padecen de oligospermia, astenospermia, discinesis o teratospermia severa, de los que slo es posible obtener pocos espermatozoides viables. En dichas parejas estriles, lo que se hace es estimular una superovulacin en la mujer, mediante una de las siguientes opciones: Gonadotropina hipofisiaria humana obtenidas de mujeres menopasicas (hMG) quienes, Biologa del Desarrollo Fascculo 8 como recordars, la eliminan en la orina en cantidades muy altas, ya que los ovarios no responden a su accin. El tratamiento se hace ms eficaz si se agrega HFE, lo que resulta muy costoso. Pulsos de una sustancia similar a la GnRH que provoca una ovulacin ms fisiolgica, aunque tambin es costosa. El citrato de clomifeno, un antiestrgeno que, al bloquear el efecto de los estrgenos, induce un aumento en la produccin de la HFE y de la HL. Aun cuando ste es el menos costoso de los mtodos mencionados, con frecuencia sus efectos secundarios son indeseables, por causar ovarios poliqusticos o con muchos folculos, que crecen en exceso y que pueden producir inflamaciones tan serias, que llegan a poner en peligro la vida de la paciente. En ocasiones se combina con hMG, que es costosa.

Mrquez-Orozco MC Despus de que se da cualquiera de estos tratamientos, se vigila el crecimiento folicular, por medio de ultrasonido y determinacin en suero de la HL y de estradiol, y antes de que se produzca, de manera espontnea, la ovulacin, se obtienen los ovocitos al menos de dos a tres folculos preovulatorios que deben medir entre 17 y 20 mm. El procedimiento se lleva a cabo con un aparato tubular llamado laparoscopio, que se introduce por una pequea incisin en la cavidad abdominal o por el fondo de la vagina, se localizan los ovarios, que se iluminan con una fibra de vidrio, se ven directamente y, con una aguja guiada desde afuera, se puncionan dos, tres y en ocasiones hasta 20 folculos que han madurado, se succionan los ovocitos y se colectan en una caja de Petri pequea, que contiene medio de cultivo, en el que se mantienen a la temperatura corporal (36.5 a 37 C). Una tcnica alternativa que se utiliza en lugar de la laparoscopia para detectar el crecimiento folicular es el ultrasonido, que es ms caro. Los ovocitos se examinan con un microscopio, para observar cuntos son secundarios, ya que stos son fecundados aproximadamente en 5 horas; en cambio, los primarios, antes de intentar la fecundacin, tienen que permanecer en medio de cultivo hasta 36 horas, y muchas veces no expulsan el primer glbulo polar, por lo que no son tiles para la FIV-TE. A cada ovocito se le agregan de 10,000 a 500,000 espermatozoides, que previamente se han obtenido por masturbacin o de semen cri preservado, se han lavado y se han capacitado 2+ en un medio especial, rico en Ca . Los tubos o las cajas de Petri se mantienen en un medio de cultivo F-10 de Ham, a temperatura entre 36.5 y 37C, y en una atmsfera que contenga 5% de CO 2 o 5% de oxgeno puro, o 20% de oxgeno atmosfrico, y se observa si los espermatozoides penetraron en los ovocitos, lo que se comprueba cuando son visibles los proncleos masculino y femenino. Entre las 18 y las 24 horas posteriores a la penetracin del espermatozoide al ovocito se forman los dos primeros blastmeros, y de las 48 a las 72 horas se forman de cuatro a ocho. En este momento se introduce el o los embriones con una jeringa y un catter especial hasta el fondo del tero, a travs de la vagina, y se recomienda a la paciente que repose.

17 En esta etapa del desarrollo del nuevo organismo, algunos investigadores denominan al embrin pre-embrin, lo cual no es adecuado, pues desde la formacin de los dos primeros blastmeros es un embrin bicelular. Para tratar de asegurar que por lo menos un embrin sobreviva, se depositaban tres a cuatro embriones en el tero de la mujer, en la que se van a desarrollar; sta puede ser la persona de la que se obtuvieron los ovocitos u otra mujer que por un tratamiento hormonal se ha preparado para que est en la misma etapa del ciclo sexual que la primera. Si los vulos no fueron obtenidos de la persona en la que se implantan, se trata de una madre subrogada. En ocasiones, estas mujeres han sido familiares directos de la donadora de los ovocitos; una hermana e inclusive la mam; pero en otros casos se trata de mujeres contratadas para este fin y ha sucedido que a veces no han querido entregar al recin nacido por haberse despertado en ellas el instinto maternal, y han deseado conservarlo, lo que ha dado origen a problemas legales, ticos y sociales. Sea uno u otro el tipo de madre, se vigila estrechamente el embarazo por medio de ultrasonido, y, mediante la tecnologa adecuada, se pueden detectar sustancias como el factor temprano del embarazo (EPF) producido por el blastocisto, que acta sobre el tero como inmunosupresor y favorece la implantacin. El EPF interacta con una hormona hipofisiaria llamada prolactina que tambin influye en los ovarios y en las tubas uterinas. El factor activador de plaquetas (PAF) y el factor activador de histamina (HAF) son dos indicadores ms de que el embrin est vivo. Ambos se producen en la etapa de ocho clulas, cuando el genoma se activa e influye sobre el crecimiento de un embrin normal. Entre ocho y nueve das despus de la ovulacin el trofoblasto del embrin produce una hormona llamada gonadotropina corinica o HGC, que unos das despus se puede medir en el suero sanguneo, lo mismo que los niveles de progesterona y estrgenos, que poco a poco se incrementan. De todos modos, el xito de la FIV-TE o IVF es limitado y de acuerdo con la literatura mundial vara entre 10 y 25%, aunque existen laboratorios con resultados casi nulos. Tambin se ha llegado a implantar y a desarrollar gemelos, triates y cudruples, por lo cual, en la actualidad, algunos gineclogos prefieren intentar la Fascculo 8

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18 implantacin de uno o dos embriones como mximo, y cro preservar los dems, ya sea para utilizarlos en embarazos futuros, donarlos a otras parejas infrtiles o, si no se implantaron, volver a intentar el procedimiento despus de un tiempo. En la Gran Bretaa est permitido utilizarlos para investigacin. Aunque el tratamiento hormonal y el procedimiento son muy costosos, pues vara entre 3,000 a 5,000 dlares, lo es an ms si, en lugar de tener embriones congelados, es necesario empezar por obtener los ovocitos, que a veces se pueden ovular prematuramente y perderse o ser ovocitos primarios qu e nunca llegan a madurar, por lo que ni siquiera se intenta fecundarlos. La congelacin y la descongelacin de los embriones no garantizan el procedimiento, por lo

Mrquez-Orozco MC que an debe perfeccionarse y, de hacerlo as, en un futuro podran implantarse durante un c iclo uterino normal, lo que aumentara el xito, ya que el endometrio hiperestimulado no siempre es muy hospitalario para el trofoblasto del blastocisto. En la Gran Bretaa el nmero de embriones que se mantuvieron congelados durante varios aos fue tan grande, que lleg el momento en que su almacenamiento fue problemtico y en vista de que no iban a ser implantados en ninguna persona, las autoridades correspondientes decidieron destruirlos o utilizarlos para experimentacin, actos que tienen implicaciones ticas y morales, si se toma en cuenta que eran seres humanos en los que se haba detenido el desarrollo.

Transferencia intratubaria de gametas, GIFT o TITG

Otro tipo de tcnica de reproduccin asistida es la transferencia intratubaria de gametas, TITG (en ingls gamete intrafallopian transfer, o GIFT), que consiste en obtener ovocitos de los ovarios estimulados para que se produzca la superovulacin, y espermatozoides obtenidos de una eyaculacin inducida. Una vez capacitados los espermatozoides se colocan con los ovocitos en un medio de cultivo y, sin esperar a que se lleve a cabo la fecundacin, se depositan en las tubas uterinas por medio de un catter especial; por lo general, uno o dos en cada una. Despus se deja a la paciente en reposo y se espera a que los pre-embriones lleguen al tero de manera natural.

Transferencia intratubaria de cigotos, ZIFT o TITC

Una variante del procedimiento es la transferencia intratubaria de cigotos, TITC (en ingls zigote intrafallopian transfer, o ZIFT), la cual consiste en hacer la fecundacin in vitro y depositar a los pre-embriones de dos clulas en las tubas, de la misma manera que se hace en el TITG o GIFT. Con estas dos ltimas tcnicas, el xito es un poco mayor, ya que es de 20 a 30%, porque, en general, las mujeres en las que se aplican tienen problemas menos graves, como son los relacionados con: El medio vaginal. La produccin del moco uterino. Anomalas del crvix o del tero. Alteraciones que no impiden la implantacin ni el desarrollo del embrin.

Riesgo del FIV-TE (IVF), del TITG (GIFT) y del TITC (ZIFT)
Tanto en el FIV-TE (IVF) como en el TITG (GIFT) y en el TITC (ZIFT) hay riesgo de que se presente el sndrome de hiperestimulacin ovrica que, si no se controla a tiempo, llega a causar la muerte de la paciente. El crecimiento excesivo de los ovarios es una de las manifestaciones del sndrome, y causa dolor abdominal, nusea, vmito y acumulacin de lquido en la cavidad abdominal y en la torcica. La anestesia, que se aplica durante la laparoscopia, a pesar de ser un riesgo calculado, en ocasiones produce problemas a la paciente. El desarrollo de un embarazo ectpico, llega a presentarse aproximadamente en un 5%. Adems de lo anterior, cerca de la tercera parte de los embriones implantados se abortan en el primer trimestre. En algunos lugares de Estados Unidos, para tener la seguridad de que los pre-embriones Fascculo 8

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Mrquez-Orozco MC que se van a implantar son normales, sobre todo en las pacientes con antecedentes de malformaciones congnitas o portadores de ellas, en la etapa de cuatro blastmeros se toma una de estas clulas, se cultiva y se analiza su cariotipo o el genoma directamente, y slo si se comprueba que son normales, se contina el procedimiento. Cuando no hay antecedentes que ameriten este tipo de estudios, se considera que el riesgo de malformaciones congnitas es el mismo que existe en la poblacin general. Se han donado pre-embriones a mujeres con: Adherencias plvicas severas. Ausencia de ovarios funcionales por disgenesia gonadal o por extirpacin quirrgica, en las que el tero es normal.

19 Las pacientes son tratadas con estrgenos y progesterona, para que el endometrio pueda recibir al embrin, y con progesterona durante las primeras 10 semanas del embarazo, mientras la placenta elabora la cantidad adecuada de estas hormonas, para mantener la gestacin. Introduccin de espermatozoides en el espacio perivitelino En pacientes con una oligospermia o una teratospermia muy severas, en la actualidad se han llegado a introducir varios espermatozoides en el espacio perivitelino, aunque se puede causar polispermia, al eliminar las barreras naturales que regulan la entrada normal del espermatozoide.

Introduccin de un espermatozoide en el ovocito

Una tcnica ms moderna consiste en depositar directamente un espermatozoide en el citoplasma del ovocito, por medio de un aparato especial que se llama micromanipulador, que es un microscopio que tiene agujas y pipetas muy finas, y, por medio de palancas de precisin, se dirigen al sitio que se desea (figura 7).

FIGURA 7.

MICROINYECCIN DE ESPERMATOZOIDES EN EL ESPACIO PERIVITELINO O EN EL CITOPLASMA DE OVOCITOS SECUNDARIOS.

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FIGURA 8.

RATN TRANSGNICO PORTADOR DEL GENE MT-1, ALIMENTADO CON UNA DIETA RICA EN ZINC. EL RATN TRANSGNICO DUPLICA SU PESO CORPORAL.

Desarrollo de animales transgnicos

Otro tipo de manipulaciones de embriones de ratn o rata se ha desarrollado inyectando el llamado ADN recombinante, a uno de los proncleos del cigoto; de esta manera, las cras, al nacer, son portadoras de genes, que pueden ser investigados en sus funciones, ya sea durante el desarrollo intrauterino o postnatalmente. A estos animales se les llama transgnicos. Un ejemplo de lo anterior es el inyectar a los ratones genes de la hormona de crecimiento de rata, acoplados a una regin promotora de metalotionena (MT-I). Cuando estos ratones Biologa del Desarrollo transgnicos se alimentan con una dieta rica en zinc, se estimula la MT-I, que activa la hormona de crecimiento, y el ratn llega a pesar 41 g, en lugar de 21 g, que es el peso normal (figura 8). Hasta la fecha, el desarrollo de ratones transgnicos es una tcnica experimental, pero en un futuro cercano permitir hacer una terapia gnica para corregir algunas enfermedades causadas por genes anormales. Por principios ticos en humanos no se ha permitido introducir genes en cigotos, pero si en nios, jvenes y adultos. La terapia gnica se Fascculo 8

Mrquez-Orozco MC ha aplicado introduciendo los genes por medio de un vector, que es un agente por el cul se hace que penetre en determinadas clulas un gene especfico, para que al llegar hasta el ncleo, en donde transcribe un mensaje, al ser traducido se sintetice la protena que se requieren para que el organismo funcione normalmente o para producir sustancias determinadas. Por ejemplo una enzima de la que un individuo carece, como la hidroxilasa de la fenilalanina necesaria para que la fenilalanina se transforme en tirosina. La ausencia de esta enzima provoca la idiocia fenilpirvica o fenilcetonuria. Los nios que padecen esta enfermedad, y no son tratados oportunamente tienen retardo mental. Los vectores utilizados son, por lo general, virus de diferente naturaleza, principalmente retrovirus, adenovirus y virus del herpes. Se ha intentado usar como vectores: Protenas especiales que tienen receptores de membrana.

21 Los liposomas catinicos que son partculas coloidales con doble capa lipdica en la que se encapsula ADN o se une al lpido por interaccin electrosttica. Los dendrmeros que son polmeros basados en hidrocarburos, con los que se introduce el ADN. Una pistola con la que disparan genes que penetran la pared de la clula con pequeas partculas de oro que se detiene con una rejilla. En el tema sobre gentica ampliare la informacin sobre las experiencias en humanos. Hasta 1995 se haba utilizado esta tcnica aproximadamente en 600 pacientes, 20 ensayos en enfermedades metablicas monognicas (determinadas por un slo gene) y 80 ensayos con cncer y SIDA. Por lo anterior no est muy lejano el da en que se pueda aplicar una terapia gnica en lugar de emplear medicamentos y es probable, que a ti te toque aplicarla con xito y seguridad.

No equivalencia de los proncleos por impronta genmica o parental

Gracias al desarrollo de un tipo de tecnologa descrita, como es el uso de micromanipuladores para la microinyeccin, tambin se han podido hacer, en los ratones, experimentos de transplantes de proncleos, por los que se ha comprobado que cuando el huevo tiene otra hoja dos proncleos femeninos o dos masculinos el embrin se empieza a desarrollar, pero no crece de manera normal. Cuando tiene dos proncleos masculinos, la placenta y el saco vitelino tienen un desarrollo ms o menos normal, pero el embrin es muy pequeo y muere. En cambio, si el huevo tiene dos proncleos femeninos, la placenta y el saco vitelino estn mal desarrollados, el embrin es pequeo, con apariencia semejante a la tampoco concluye su desarrollo. normal, pero

Slo cuando el huevo tiene un proncleo femenino y uno masculino, el desarrollo embrionario, el placentario y el del saco vitelino son normales (figura 9); lo que se debe a que, en algunos tejidos, permanecen activos genes de origen materno, y en otros, los de origen paterno. Ejemplo de lo anterior es el gene del factor II de crecimiento similar a la insulina (IGF-II), que promueve el crecimiento embrionario y el de los rganos fetales. De estos genes, el de origen materno se inactiva en el embrin, excepto en algunas clulas neurales, y el gene paterno permanece activo en el embrin.

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FIGURA 9.

TRANSPLANTE EXPERIMENTAL DE PRONCLEOS, COMPRUEBA LA NO EQUIVALENCIA DEL PRONCLEO MASCULINO Y DEL FEMENINO.

Por lo anterior, si el gene IGF-II materno es anormal, las cras se desarrollan normalmente, pues no lo necesita para crecer; en cambio, si el paterno es anormal, las cras casi no crecen y terminan por morir. Tambin la X paterna se inactiva selectivamente en el trofoblasto y en el hipoblasto del embrin de ratn, y permanece activo por un tiempo mayor en las clulas del macizo celular interno o botn embrionario, hasta que, en las clulas derivadas de sta estructura, se inactiva al azar la X materna o la paterna, y slo durante la ovognesis se reactivan las dos Xs. Otra prueba de la no equivalencia de los proncleos masculino y femenino es la formacin de una mola hidatiforme, a partir de un ovocito

anucleado (sin ncleo), por un espermatozoide que duplica su ADN y restituye el nmero diploide de cromosomas, pero el embrin no se desarrolla correctamente, y se reabsorbe, quedando como un saco anembrinico (sin embrin), y el corion forma vesculas, como uvas, en lugar de vellosidades normales, que no son capaces de nutrir al embrin (figura 10). La mola hidatiforme tambin se forma de un vulo fecundado por dos espermatozoides que, por lo tanto, origina un cigoto que tiene un nmero triploide de cromosomas o 3N, y su frmula cromosmica puede ser 69,XXX, 69,XXY o 69,XYY (figura 10).

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FIGURA 10.

DOS POSIBILIDADES DEL ORIGEN DE UNA MOLA HIDATIFORME.

Clonacin
Algo ms que se ha podido hacer por medio de los micromanipuladores y la microinyeccin es trasplantar un ncleo diploide o 2n, obtenido del intestino de un renacuajo de l sapo de garras, de la especie Xenopus laevis, en un ovocito al que se le extrae o destruye el ncleo del mismo animal; mtodo por el que se han obtenido sapos genticamente idnticos al donador del ncleo, que, por lo tanto, son clones de ste (figura 11). Para probar que de verdad es un clon, se han utilizado ovocitos de un sapo con pigmentacin Biologa del Desarrollo normal y los ncleos de uno albino, y se han obtenido sapos albinos (figura 11). La enucleacin se hace extrayendo el ncleo del ovocito o destruyndolo con rayos ultravioleta. Con este experimento se prueba que slo estn activos algunos de los genes del ncleo diploide de una clula diferenciada y funcional, y los dems permanecen inactivos o reprimidos, como si estuvieran dormidos, pero cuando se colocan en un citoplasma distinto, como el ovular, se pueden reactivar. En este caso funcionan como si fueran los del huevo. Fascculo 8

24 Los experimentos realizados en mamferos como Dolly la oveja clonada fue genticamente idntica al donador del ncleo diploide, aunque el ADN aparentemente se ha tenido xito y en el hombre, tericamente, no es aceptado por razones ticas, ya que en el caso de Dolly envejeci prematuramente y tuvo problemas pulmonares. Dolly se form del ovocito enucleado de una oveja de cara negra escocesa (Scottish blackface) y la fusin por un choque elctrico de una clula somtica de la glndula mam aria al ovocito. Esta clula fue cultivada y se obtuvo de otra oveja de raza blanca de la cepa Finn-Dorset. El embrin de Dolly se cultiv hasta los siete das y se implant en el tero de una hembra subrogada de cara negra. Dolly tena las caractersticas genticas de la donadora del ncleo Finn-Dorset. Dolly se reprodujo por mtodos naturales y naci Bonnie una hembra de la cepa Finn-Dorset, sana. Se han clonado otros mamferos como la gata CC, monos, ratones y vacas. Esta tcnica en manos de gente sin escrpulos se podra prestar a manipulaciones deshonestas,

Mrquez-Orozco MC como el desarrollo de personas con caractersticas genticas especiales, elegidas para fines especficos, pero sobre todo con anomalas congnitas o enfermedades degenerativas. En la actualidad no se acepta la clonacin reproductiva humana. Otro tipo de clonacin es la teraputica que se hace con clulas madre o troncales, que son los primeros blastmeros de un embrin, o las obtenidas del cordn umbilical o de la mdula sea. En todos los casos la tcnica de enucleacin de una clula y el tr ansplante nuclear de una clula 2n humana o de algn animal al que se transplantan las clulas clonadas es la misma que se emplea en la clonacin reproductiva. El mtodo se ha aplicado de manera experimental en ratas u otros animales con lesiones de la mdula espinal u otros padecimientos y quiz en un futuro se emplee de manera exitosa en el hombre. Como te puedes dar cuenta, el avance de la ciencia y la tecnologa es enorme, y ofrece amplias posibilidades en cuanto a sus aplicaciones teraputicas, pero el mdico est obligado a utilizarlas con responsabilidad y tica para no desequilibrar la naturaleza.

Partenognesis
La partenognesis es el desarrollo de un ovocito sin la penetracin de un espermatozoide, por lo que tambin se le llama desarrollo virginal. Este fenmeno es un sistema natural de reproduccin en insectos como las abejas o el pulgn del rosal. En los anfibios, desde principio del siglo se logr la partenognesis artificial del vulo, por la introduccin de una aguja mojada en sangre. G. Pincus, entre 1936 y 1940, por enfriamiento de ovocitos secundarios dentro de las tubas uterinas de una coneja, logr que naciera una coneja viva, pero nadie ha podido reproducir el experimento. En la actualidad, se considera que en los mamferos es poco probable que exista la partenognesis natural.

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FIGURA 11. CLONACIN DEL SAPO Xenopus laevis ALBINO EN UN OVOCITO DE UN SAPO PIGMENTADO.

El avance de la ciencia y de la tecnologa es tan espectacular en los ltimos aos, que lo que, hasta hace poco tiempo pareca fantasa o una parte de la ciencia-ficcin, ahora es realidad, por esta razn, mientras ms profundices en el estudio de los misteriosos fenmenos biolgicos, mayor ser la posibilidad que tendrs de controlarlos a voluntad y aplicarlos en beneficio de la humanidad, de acuerdo con

la tica mdica. R ECUERDA QUE T ERES EL PRINCIPAL ARQUITECTO DE TU FUTURO ! AVANZA CON ENTUSIASMO ! Las referencias bibliogrficas son muy en este campo, por lo que slo incluyo algunas de las bsicas y te invito a consultarlas, al igual que otras que estn en la biblioteca y en internet.

Bibliografa
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Ejercicios de autoevaluacin
Escribe los nombres de las estructuras o procesos que se han omitido en los esquemas y contesta las preguntas. Recuerda que tu mismo te vas a calificar. E SPERO QUE TE SAQUES 10 CON MENCIN HONORFICA!

CAPACITACIN DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO.

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REACCIN ACROSMICA.

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FECUNDACIN.

CONSECUENCIA DE LA PENETRACIN DE UN ESPERMATOZOIDE A UN OVOCITO.

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Mrquez-Orozco MC Cunto tiempo tardan en llegar los espermatozoides al sitio en el que se renen con el ovocito? Cuantos llegan? Cul es ese sitio? En qu consiste la capacitacin? y Cuanto tiempo tarda? A qu se debe el paso de los espermatozoides por la corona radiada? Cules son las tres glucoprotenas que constituyen la zona pelcida? Cul de stas interviene en el reconocimiento y acoplamiento de los espermatozoides? Por medio de qu sustancias lo hacen? En qu consiste la reaccin acrosmica? En dnde se lleva a cabo? Al llegar el espermatozoide al espacio perivitelino Por medio de qu se une al ovocito? Qu estructuras del espermatozoide penetran a ste? Cmo se lleva a cabo el bloqueo rpido de la polispermia? En qu momento se produce? En cunto tiempo? Qu es la reaccin cortical? Qu la induce? Cul es su funcin? Qu es la reaccin de zona? Qu funcin tiene? Cundo? y Cmo femenino? se forma el proncleo las el

29 Qu otros cambios intracelulares se producen en el ovocito al entrar el espermatozoide? Explica las consecuencias fecundacin. inmediatas de la

En qu tipo de problemas de infertilidad se recomienda practicar la inseminacin artificial con semen del esposo? Cundo se usa el semen de un donador? Qu caractersticas debe tener ste? Qu es la criopreservacin del semen? En qu casos se recomienda hacerla? En qu consiste la IVF o FIV-TE? En qu tipo de parejas se puede practicar? Explica cmo se realiza el procedimiento de la FIV-TE. Qu es una madre subrogada? Qu tipo de problemas han causado este tipo de madres? Qu tipo de factores son indicadores de que un embrin est vivo? En qu etapa se secretan? Qu proporcin de xito tiene el FIV-TE? Qu es el GIFT o TITG y el ZIFT o TITC? En qu caso se intenta? Qu xito tiene? Por qu? Qu tipo de tcnicas se aplican en la actualidad cuando se logra obtener un nmero muy reducido de espermatozoides? Qu son los animales transgnicos? Da un ejemplo. Cmo se demuestra la no equivalencia de los proncleos masculino y femenino? Explica los dos orgenes de la mola hidatiforme. Qu es un clon? Da un ejemplo. Qu es la partenognesis?

Explica los cambios que experimentan estructuras del espermatozoide en citoplasma del ovocito.

A qu se debe la formacin del proncleo masculino? Qu funcin tiene el ster fecundacin? De dnde deriva? durante la
2+

Qu consecuencia tiene la liberacin de Ca intracelular en el citoplasma del ovocito durante la fecundacin?

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