ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA Y VISIBLE,
ESPECTROFLUORIMETRÍA, INFRARROJA,
ABSORCIÓN ATÓMICA Y DE MASAS.
Julieth Ximena Bonilla Rodríguez 02200171022
Jesús David Bonilla Ortiz
Elfar Tellez Moreno 0200171033
Toxicología Y Farmacología
Febrero 21 Del 2023ª
CONTENIDO
ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA Y VISIBLE
ESPECTROFLUORIMETRÍA
INFRARROJA
ABSORCIÓN ATÓMICA Y DE MASAS
ESPECTROMETRÍA
ULTRAVIOLETA Y VISIBLE
La espectroscopia UV-Vis es una técnica analítica que mide la cantidad de longitudes de onda
discretas de luz UV o visible que son absorbidas o transmitidas a través de una muestra en
comparación con una muestra de referencia o en blanco.
La luz ultravioleta tiene longitudes de onda más cortas que las de la luz visible hasta
aproximadamente 100 nm. Por lo tanto, la luz se puede describir por su longitud de onda, lo
que puede ser útil en la espectroscopia UV-Vis para analizar o identificar diferentes sustancias
localizando las longitudes de onda específicas correspondientes a la máxima absorbancia.
En la espectroscopia UV-Vis, se elige para el análisis la longitud de onda correspondiente a la
absorbancia máxima de la sustancia objetivo. Esta elección garantiza la máxima sensibilidad
porque la mayor respuesta se obtiene para una determinada concentración de analito.
COMPONENTES Y FUNCIONAMIENTO
Esquema simplificado de los componentes
principales de un espectrofotómetro UV-Vis.
Crédito: Dr. Justin Tom.
Diagrama esquemático de un Diagrama esquemático de un
sistema de espectroscopia sistema de espectroscopia UV-
UV-Vis sin cubetas. Vis basado en cubetas.
BENEFICIOS
• La técnica no es destructiva , lo que
permite reutilizar la muestra o proceder a su
posterior procesamiento o análisis.
• Las mediciones se pueden realizar
rápidamente , lo que permite una fácil
integración en los protocolos experimentales.
• Los instrumentos son fáciles de usar y
requieren poca capacitación del usuario antes
de usarlos.
• El análisis de datos generalmente requiere un
procesamiento mínimo , lo que
nuevamente significa que se requiere poca
capacitación del usuario.
• El instrumento es generalmente económico
de adquirir y operar, lo que lo hace accesible
para muchos laboratorios.
APLICACIONES
• El análisis cualitativo y cuantitativo del
espectrofotómetro UV visible se utiliza para
analizar el nivel de compuestos que están
presentes en el medicamento. Esto ayuda a
cuantificar y calificar los compuestos farmacéuticos y
garantiza la seguridad del compuesto
• La aplicación de la en el análisis de drogas farmacéutico para la salud humana.
en fluidos biológicos es analizada y adaptada
en especial para la toxicología clínica. Es un • La propiedad de absorción de cada compuesto
proceso rápido, adecuado para análisis de difiere de forma única. El espectrofotómetro UV
emergencia. visible mide la intensidad de la luz que pasa a
través de la muestra.
ESPECTROFLUORIMETRÍA
Espectroscopia de fluorescencia o fluorimetría o
espectrofluorimetría. Es una técnica para detectar y analizar la
fluorescencia en la muestra.
La fluorescencia es la emisión de luz por un sustancia (flúor) que ha absorbido
luz u otra radiación electromagnética. En este fenómeno de emisión, un haz de
luz (generalmente luz ultravioleta) excita el electrón en una molécula que pasa
del estado fundamental al estado excitado de mayor energía; cuando el
electrón vuelve al estado fundamental, emite fluorescencia.
La espectroscopia de fluorescencia se ocupa principalmente
de la electrónica (estado fundamental y estado excitado) y
vibracional estados.
COMPONENTES
• Fuente de luz, el selector de onda, la celda para la
muestra, un segundo selector de onda para aislar la
fluorescencia emitida y el detector.
1. La fuente de la luz debe de producir una salida de
fotones constantes a todas las longitudes de onda.
2. El monocromador debe de pasar fotones de todas
las longitudes de onda con la misma eficiencia.
3. La eficiencia del monocromador debe de ser
independiente de la polarización.
4. El detector (tubo fotomultiplicador) debe de
detectar los fotones de todas las longitudes de onda
con la misma eficiencia.
FUNCIONAMIENTO
APLICACIONES
Investigación de la fotoquímica de sistemas biológicos
(clorofila fluorescente).
Estudio de cinética de reacciones.
Estudio de interacciones lípidos-proteínas.
• Análisis de sustancias químicas en muestras de sustancias ilícitas,
como drogas de abuso, para determinar su pureza y composición.
• Análisis de sustancias químicas en muestras de tejidos o fluidos
corporales para determinar la causa de la muerte o para identificar
drogas o sustancias tóxicas en el cuerpo.
INFRARROJA
La espectroscopia IR se ocupa de la región infrarroja
del espectro electromagnético, es decir, la luz que
tiene una longitud de onda más larga y una frecuencia
más baja que la luz visible.
El principal uso de la espectroscopia infrarroja es Esta técnica permite la identificación de los
determinar los grupos funcionales de las moléculas, grupos funcionales de un compuesto. Esto
relevantes tanto para la química orgánica como para debido a que cuando una molécula absorbe
la inorgánica. radiación infrarroja, la vibración
intramolecular con frecuencia igual a la de
la radiación, aumenta en intensidad, lo que
El concepto de espectroscopia IR generalmente se genera señales con frecuencias que
puede analizar de tres maneras: midiendo la reflexión, corresponden a la vibración de un enlace
la emisión y la absorción. específico
COMPONENTES
• Las moléculas absorben la luz en la
región infrarroja del espectro
electromagnético, convirtiéndola en
vibración molecular. Esta absorción es
característica de la naturaleza de los
enlaces químicos presentes en una
muestra.
• La espectrofotometría infrarroja es un
método de medida de la absorción de la
radiación en un rango de longitudes de
onda, cuando ésta pasa a través de una
capa delgada de sustancia.
El espectrómetro de IR permite la obtención de espectros de
forma rápida, precisa y con relaciones Señal/Ruido (S/N)
elevadas.
FUNCIONAMIENTO
APLICACIONES
– Explosivos
• El análisis de las muestras en muchos de los casos
– Drogas ilícitas puede realizarse por medios no destructivos / sin
apenas manipulación.
– Huellas digitales • Permite tanto ensayos de identificación como
análisis cuantitativo.
– Materiales biológicos • Análisis a nivel macroscópico como microscópico
Es una de las técnicas espectroscópicas más
versátiles y de mayor aplicación en la
caracterización e identificación de materiales,
análisis de productos farmacéuticos y de
síntesis, análisis de contaminantes, ciencia
forense, biomedicina, agricultura, alimentos,
adhesivos y polímeros entre otros.
ABSORCIÓN ATÓMICA Y DE
MASAS
La espectometría de absorción atómica analiza los
electrones de los átomos en el atomizador, los cuales son
promovidos a orbitales más altos por un instante,
mediante la absorción de luz de una determinada
longitud de onda.
COMPONENTES
Fuente radiante • Es una lámpara de cátodo hueco, que consiste en un cilindro
relleno con un gas inerte dentro del cual se encuentra un
cátodo (construido del metal a analizar) y un ánodo.
• Al aplicar un cierto potencial a través de los electrodos esta
fuente emite el espectro atómico del metal del cual está
construido el cátodo.
Atomizador Se utilizan atomizadores con y sin llama para producir átomos
libres del metal en el haz de la radiación.
Monocromador Permiten aislar una línea de resonancia del espectro emitido
por la lámpara de cátodo hueco.
Detector Se emplea un fotomultiplicador que produce una corriente
eléctrica, la cual es proporcional a la intensidad de la línea
aislada por el monocromador.
Amplificador Amplifica la señal pasando luego a un dispositivo de lectura
que puede ser un voltímetro digital o un registrador u otros.
FUNCIONAMIENTO
VENTAJAS/
APLICACIONES DESVENTAJAS
Ventajas
Bajo costo por análisis
Analizar trazas de muestras
Fácil de operar
geológicas, biológicas, Alta sensibilidad detección de hasta ppb
metalúrgicas, vítreas, Alta precisión
cementos, aceites para Mayormente libre de interferencia entre elementos
maquinaria, sedimentos Desventajas
marinos, farmacéuticas y El equipo nuevo es bastante caro
atmosféricas. Más orientado al análisis de líquidos
La muestra se destruye
No se pueden detectar no metales
