CRITERIOS PARA EVALUAR LA

CALIDAD DEL AGUA

• PARÁMETROS OPERATIVOS
• DESINFECTANTE RESIDUAL
• TURBIEDAD
• INDICADORES MICROBIANOS
• BIOESTABILIDAD
• EFICACIA DE REMOCIÓN
• INVESTIGACIÓN DE
MICROORGANISMOS PATÓGENOS
• INDICADORES DE CONTAMINACIÓN
SIGNIFICADO DE LOS MICROORGANISMOS
EN EN UN SISTEMA DE ABASTECIMIENTO
DE AGUA

• ASPECTOS SANITARIOS
» Infecciones hídricas

• ASPECTOS OPERATIVOS
» CORROSIÓN BACTERIANA
» BIOPELICULAS

• ASPECTOS ORGANOLEPTICOS
» ACTINOMYCES
» CIANOBACTERIAS
» BACTERIAS DEL HIERRO
 Indicadores microbianos

• INDICADORES BACTERIANOS

• INDICADORES VIRALES

• INDICADORES DE PARASITOS
INDICADORES MICROBIANOS
• DEFINICIÓN DE UN INDICADOR IDEAL

• CLASIFICACIÓN
» DE origen de la CONTAMINACIÓN
» OPERATIVOS
» DE EFICIENCIA DE TRATAMIENTO
» DE RECRECIMIENTO BACTERIANO

• LIMITACIONES
INDICADORES BACTERIANOS
• BACTERIAS COLIFORMES
• BACTERIAS COLIFORMES
TERMOTOLERANTES
• ESCHERICHIA COLI
• ENTEROCOCOS
• BACTERIAS ANAEROBICAS SULFITO
REDUCTORAS
• BACTERIAS AEROBICAS HETEROTROFAS
MESÓFILAS
• PSEUDOMONAS AERUGINOSA
 METODOLOGÍA
• TUBOS MULTIPLES
• MEMBRANA FILTRANTE
• PRESENCIA-AUSENCIA
• MÉTODOS RÁPIDOS
• SUSTRATOS FLUOROGÉNICOS
• SUSTRATOS CROMOGENICOS
 INDICADORES VIRALES

• BACTERIOFAGOS
• COLIFAGOS
» SOMÁTICOS
» F-RNA
• DE BACTEROIDES FRAGILIS
 Densidades tipicas de microorganismos
INDICADORES en líquidos cloacales
Liquido cloacal Efluente secundario
Microorganismo (NUMERO/LITRO) (NUMERO/LITRO)

Bacterias coliformes 107 - 109

Coliformes 106 - 108
termotolerantes/E.coli
Enterococos 106 -107

Clostridium perfringens 105 - 106

Fagos F RNA 106 - 107

Colifagos somaticos 106 - 107
Fagos de Bacteroides fragilis 106 -105
Densidades tipicas (?) de microorganismos
enteropatogenas en líquidos cloacales

Microorganism Liquido Efluente

o cloacal secundario
(NUMERO/LITRO) (NUMERO/LITRO)

Cryptosporidium 1000-10000 10-1000

Giardia 5000-50000 50-500

Norovirus 10-1000 1-100

Rotavirus 10-100 1-10

Salmonella SPP. 100-10000 10-10000

 NIVELES DE INDICADORES DE
CONTAMINACIÓN EN EL LÍQUIDO CLOACAL
DE LA CIUDAD DE BUENOS AIRES
DENSIDAD MICROBIANA

BACTERIAS BACTERIAS COLÍFAGOS FAGOS DE

BACTERIAS COLÍFAGOS
COLIFORMES ENTEROCOCOS ANAEROBIAS RNA – F BACTEROIDES
ORÍGEN DE LA MUESTRA COLIFORMES
FECALES /100ml SULFITO RED
SOMÁTICOS
específicos FRAGILIS
TOTALES /100ml /100ml
/100ml /100ml /100ml /100ml

Líquido cloacal Cdad. de Bs. As 3480000 240000 460000 610000 58000 15000

Líquido cloacal Cdad. de Bs. As 9180000 2400000 100000 470000 22000 13000

Líquido cloacal Cdad. de Bs. As 348000 27800 230000 1388888 82000 9000
 CARACTERISTICAS DE INDICADORES DE
CONTAMINACION
PARAMETRO Asociacion Rapidez Costo Complejidad Sobrev. Resistencia al
INDICADOR con origen analítica tratamiento
fecal

Coliformes M b MB M M
totales
Coliformes M M b MB M B
termotolerantes
Escherichia coli A A/M M MB M/B B

Enterococo M M M MB M

Recuento Total A M M
(microscopico)

Recuento viable A M M
(microscopico)
 CARACTERISTICAS DE INDICADORES DE
CONTAMINACION
PARAMETRO Asociacion Riesgo Rapidez Costo Complejidad Sobreviv. Resistencia
INDICADOR con origen para el analítica en el al
fecal analista ambiente tratamiento

Bacterias B M M M A A
heterótrofas

Bacterias B M M M A A
aerobias
esporuladas

Colifagos II M H M M A M
somáticos

Fagos F RNA II M H M M II A
específicos

Clostridios B M M M MA MA
sulfito
reductores

Clostridium A B M M M MA MA
perfringens
 TECNICAS PARA LA CUANTIFICACION DE
BACTERIAS EN AGUA
TECNICA VENTAJAS DESVENTAJAS
Numero mas •Aplicable a todo tipo de •Necesidad de etapas de
probable en muestras confirmacion (tiempo y costo)
medio liquido •Permite resucitacion y •Posibilidad de
(tubos crecimiento de microorganismos enmascaramiento del
múltiples) injuriados indicador por
•Los medios son generalmente sobrecrecimiento de otros
de bajo costo microorganismos

•Facil interpretacion •Inhibicion del crecimiento

•Facilidad de implementacion de
la técnica
•Posibilidad de elección dela
precision , sensibilidad y rango
de medicion
•Cuantitativa
por inhibidores en el medio
de cultivo
•Para aislar un cultivo puro
es necesario subcultivo en
medios solidos.
•Costo elevado para grandes
volumenes de agua
 TECNICAS PARA LA CUANTIFICACION DE
BACTERIAS EN AGUA
TECNICA VENTAJAS
Filtración por •Puede aumentarse su sensibilidad
membrana aumentado el volumen a filtrar
•Se eliminan al filtrar posibles
sustancias inhibitorias o
interferentes
•Buena precicisión si el número de
colonias es adecuado
•Resultados cuantitativos
•A veces no requiere etapas de
confirmación disminuyendo el
costo y tiempo de análisis
•La confirmación o identificación de
las bacterias es realizada facilment
a partir de las colonias aisladas
sobre la membrana
DESVENTAJAS
•Variabilidad en la calidad de
las membranas
•La adsorcion de particulas
solidas y sustancias quimicas
a la membrana al filtrar puede
interferir el crecimiento del
indicador
•No se puede aplicar a agua
turbias
•La identificacion de las
colonias de indicadores no
siempre es facil
 TECNICAS PARA DETECCION DE
BACTERIAS EN AGUA
TECNICA VENTAJAS DESVENTAJAS
PRESENCIA •Similares a la de técnica del •Similares a la de técnica
número más probable del número más probable
/AUSENCIA •Sencillez •No aporta resultados
•La incubación puede iniciarse cuantitativos
desde el momento del muestreo
reduciendo el tiempo de
obtención de resultados
Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológicos de agua de bebida
MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO, INCUBACION
ISO
Bacterias 9308-2 Cultivo en medio líquido selectivo
coliformes, Incubación a 36°C por 2 días
coliformes Confirmación
termotolerante
•de coliformes por producción de gas a
s , E.coli
partir de lactosa en medio BLBV por
dos días a 36°C
•de colif. Termotolerantes por
producción de gas a partir de lactosa
en medio EC por un día a 44°C
• de E.coli por prueba de Indol a 44°C
•Test de oxidasa
 Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológicos de agua de bebida

MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO, INCUBACION

ISO
Enterococos 7899-2 •Membrana filtrante en medio m-
enteroccoccus
•Incubación a 36°C pro dos días
•Prueba de esculina “in situ” en medio
Bilis esculina azida agar a 44°C en dos
horas
Enterococos 7899-1 •Cultivo en medio líquido (caldo azida
dextrosa)
•Incubación a 36°C por 1 a 2 días
•Prueba de esculina “in situ” en medio
Bilis esculina azida agar a 44°C en dos
horas
 Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida

MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO, INCUBACION

ISO

Esporas de 6461-2 •Membrana filtrante en Medio

clostridios Sulfito-Fe o Sulfito triptosa
sulfito •Incubac ión anaerobica a 37°C por
reductores uno a dos días

Esporas de 6461-1 •Cultivo en medio liquido DRCM

clostridios •Incubac ión anaerobica a 37°C por a
sulfito dos días
reductores
 Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida
MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO, INCUBACION
ISO

Pseudomonas 8360-2 •Membrana filtrante en Medio Drake

aeruginosa 19
•Incubación a 37°c por dos días
•Confirmación por subcultivo en agar
leche a 42°C por un día (crecimiento,
hidrólisis de caseina, fluorescencia y
piocianina)
Pseudomonas 8360-1 •Clultivo en medio liquido de Drake 10 a
aeruginosa •Incubación a 37°C por 2 días
•Confirmación en agar leche a 42°C por
un día
 Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida

MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO, INCUBACION

ISO
Legionella 11731 •Inoculación en medio GVPC con
antibioticos
•Incubación por 10 días a 37°C
•Subcultivo en medio BCYE y BCYE-
cys
•Identificación por Aglutinación con
anticuerpos
•Inmunofluorescencia o ELISA
•Quinonas, isoprenoides , acidos
grasos
LEGIONELLA 11731-2 •Método de screening en membrana
filtrante
 Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida
MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO, INCUBACION
ISO
Salmonella 6340 •Pre enriqueimiento en agua peptonada
tamponada a 36°C por 1 día
•Enriquecimiento en caldo Rappaport-
Vassiliadis modificado a 42°C por 1 día
•Aislamiento selectivo en agar XLD y
LVBRF incubando a 36 °C por un día
•Identificación de colonias tipicas por
metodos bioquímicos y serológicos

Microorganismo 6222 •Técnica de siembra en profundidad en

s cultivables placa en medio YEA
•Incubación a 36°C por 2 días y a 22°C
por 2 días
Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida

MICROORGANISMO STANDARD TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO,

INCUBACION
ISO

Fagos F RNA 10705-1 •Agar bicapa TYGB y TYGA a

37°C por distintos períodos de
tiempo
•Cepa huesped E.coli K12 Hfr
(ATCC 23631) o Salmonella
typhimurium WG49 fago tipo Nair
3
Colifagos 10705-2 •Agar bicapa MSB y MSA a 37°C
somáticos •Cepa huesped E.coli ATCC 13706

Fagos de 10705-4 •Agar bicapa BPRM a 37°C

Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida

MICROORGANISMO STANDA TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO,

INCUBACION
RD ISO

Enterovirus CEN/ •Cultivo en monocapa de células

TC23 BGLM a 37°C por 7 días en
atmosfera de CO” al 5%
0
Evaluacion de 7704
membrana
filtrante
Evaluación de 9998
medios para
recuento en
placa
Estandarizacion internacional de métodos para
el análisis microbiológico de agua de bebida

MICROORGANISMO STANDA TÉCNICA, MEDIO DE CULTIVO,

INCUBACION
RD ISO

Validación de ISO TR
métodos 13843
microbiológico
por cultivo
Prueba de 17994
equivalencia de
metodos
microbiologicos
por cultivo
 Origen animal
no
MICROORGANISMOS PATOGENOS TRANSMISIÓN HÍDRICA

Baja

Reisitencia a la desinfección
Moder
Baja a
Persistencia en el agua
Relalcion con indicadores

SI
convencionales

Evident
Transmisión hídrica

e
BACTERIA

Patógenos
clásicos
Legionella
Legionella
Legionella
Legionella
 Relalcion con indicadores
convencionales
MICROORGANISMOS PATOGENOS

Origen animal
TRANSMISIÓN HÍDRICA

Moderada
Reisitencia a la desinfección
Persistencia en el agua
Transmisió
n hídrica
VIRUS
Virus Bacteriofago
Fago filamentoso
VIRUS EN CULTIVO CELULAR
 Origen animal
Reisitencia a la desinfección
MICROORGANISMOS PATOGENOS
TRANSMISIÓN HÍDRICA

Persistencia en el agua
Relalcion con indicadores
convencionales
Transmisión hídrica
PROTOZOOS
 Origen animal
Reisitencia a la desinfección
MICROORGANISMOS PATOGENOS
TRANSMISIÓN HÍDRICA

Persistencia en el agua
Relalcion con indicadores
convencionales
Transmisión hídrica

PROTOZOOS
Isospora belli
 CALCULO DE LA CALIDAD MICROBIOLOGICA (en cuanto al
contenido detres patogenos representativos) DEL AGUA y DEL
NIVEL DE TRATAMIENTO NECESARIO PARA ELIMINARLOS del
AGUA CRUDA, EN BASE A LOS RIESGOS TOLERABALES
ESTIPULADOS

Agua de rio con Cryptosporidium Campylobacter Rotavirus

contaminacion
humana y animal
Calidad del agua de Organismos- 10 100 10
rio litro

Nivel de tratamiento Reduccion 99,994% 99,9998% 99,99968%

necesario en base porcentual
al riesgo tolerable
Calidad del agua Organismos 6,3.10-4 1,3.10-4 3,2.10-5
abastecida por ligtro
(exposicion)
Dosis/respuesta Probab.de 4.10-3 1,8.10-2 2,7.10-1
infeccion por
organismo
Riesgo de infeccion Por dia 2,5.10-6 2,3.10-6 8,5.10-6

Riesgo de infeccion Por año 9,2.10-4 8,3.10-4 3,1.10-3

 CALCULO DE LA CALIDAD MICROBIOLOGICA (en cuanto al
contenido detres patogenos representataivos) DEL AGUA y DEL
NIVEL DE TRATAMIENTO NECESARIO PARA ELIMINARLOS del
AGUA CRUDA, EN BASE A LOS RIESGOS TOLERABALES
ESTIPULADOS

Agua de rio con Cryptosporidium Campylobacter Rotavirus

contaminacion
humana y animal

Riesgo de diarrea 0,7 0,3 0,5

por infeccion

Riesgo de diarrea Por año 6,4.10-4 2,5.10-4 1,6.10-3

Carga de DALY por 1,5.10-3 4,6.10-3 1,4.10-3

enfermedad caso

Fraccion de Porcentaje de 100% 100% 6%

susceptibles la poblaciòn

Carga de DALY por 1.10-6 1.10-6 1.10-6

enfermedad año
 OBJETIVOS DE SALUD (casos de diarrea, calidad
de agua y eficiencia de tratamiento) de un SISTEMA
DE AGUA para tres MICROORGANISMOS

Agua de rio con Cryptosporidium Campylobacter Rotavirus

contaminacion
humana y animal

Organismos en Por litro 10 100 10

agua

Resultado de DALY Por 10-6 10-6 10-6

objetivos de salud persona y por
año
Riesgo de diarrea Por año 1 por 1600 1 por 4000 1 Por 11000

Calidad de agua 0rganimos/ 1 por 1600 1 por 8000 1 por 32000

Litro

Objetivo de Reduccion 4,2 5,9 5,5

eficiencia de log
tratamiento
 REMOCION DE MICROORGANISMOS POR
PROCESOS DE TRATAMIENTO

Proceso de tratamiento Tipo de Remocio Remocio

microorganismo
Coag/flocul/sedi s n minima n màxima
ment. tipica
Clarificaciòn Bacteria 30% 90%
convencional Virus 30% 70%
Protozoos 30% 90%
Clarificacion ràpida Bacteria + de 30%
Virus + de 30%
Protozoos 95% 99,99%
Flotaciòn por aire Bacteria -
disuelto Virus -
Protozoos 95% 99,9%
 REMOCION DE MICROORGANISMOS POR
PROCESOS DE TRATAMIENTO
Proceso de tratamiento Tipo de Remocio Remocio
FILTRACION microorganismo
s n minima n màxima
tipica
Ràpida granular Bacteria 99%
Virus 99,9%
Protozoos 70% 99,9%
Lenta por arena Bacteria 50% 99,5%
Virus 20% 99%
Protozoos 50% 99%
Tierra de diatomeas Bacteria 30-50% 96-99%
Virus 90% 98%
Protozoos 99,9% 99,9%
 REMOCION DE MICROORGANISMOS POR
PROCESOS DE TRATAMIENTO
Proceso de tratamiento Tipo de Remocion Remocio
FILTRACION por microorganism
MEMBRANAS os minima n màxima
tipica
MICROFILTRACION Bacteria 99,9-99,99% 99%
Virus 90% 99,9%
Protozoos 99,9-99,99% 99,9%
ULTRAFILTRACION, Bacteria
NANOFILTRACION Y
Remocion
OSMOSIS INVERSA Virus completa
Protozoos
 REMOCION DE MICROORGANISMOS POR
PROCESOS DE TRATAMIENTO
Proceso de Tipo de Remocion
tratamiento microorganismos minima (CxT)
DESINFECCION
CLORO Bacteria 0,08 mg:min/l
Virus 12
Giardia 230
Cryptosporidu Inactivo
m
DIOXIDO DE Bacteria 0,13 mg:min/l
CLORO Virus 8,4
Giardia 42
Cryptosporidu 40
m
 REMOCION DE MICROORGANISMOS POR
PROCESOS DE TRATAMIENTO
Proceso de Tipo de Remocion
tratamiento microorganismos minima (CxT)
DESINFECCION
OZONO Bacteria 0,02 mg:min/l
Virus 0,9
Giardia 1,9
Cryptosporidu 40
m
UV Bacteria 99% -7 mJ/cm2
Virus 99%- 59
mj/cm2
Giardia
Cryptosporidu 99%- 5mj/cm2
m 99,9%-
 Resistencia de microorganismos
a la desinfección (por orden
descendente)
Priones (ACJ, AEE)
Ooquistes de Coccidios (Cryptosporidium)

Esporas (Bacillus, Clostridium Difficile)

Mycobacterias (M. Tuberculosis, M. Avium)

Quistes de Protozoos (Giardia)

Virus pequeños sin cobertura (Poliovirus)

Trofozoitos (Acanthamoeba)
Bacterias Gram Negativas No Esporuladas
(Pseudomonas, E. Coli)

Hongos (Cándida, Aspergillus)

Virus grandes sin cobertura (Entero virus, Adenovirus)

Bacterias Gram Positivas (S. Aureus, Enterococos)

Virus con cobertura lipídica (HIV, HBV)

 Eficiencia comparativa de desinfectantes de
agua; valor C.T (mg/l.min) para el 99% de
inactivación

Tipo de Desinfectante
Cloro Dióxido de
Microorganismos
libre Cloraminas Ozono Ultravioleta cloro
5°C/pH 6-7 5°C/pH 8-9 5°C/pH 6-7 5°C/pH 6-7
E. Coli 0,034-0,05 95-180 0,006 360-2400 0,4-0,75
Poliovirus 1 1,1-2,5 767-3740 0,075 780 0,2-6,7
Rotavirus 0,01-0,05 3806-6476 0,006-0,06 0,2-2,1
Quistes de Giardia 47-150 2200 0,27 60000-100000 6-10
Cryptosporidium 7200 5-10
 LIMITACIONES DEL CONTROL
MICROBIOLOGICO

• RECUPERACION DE BACTERIAS
INJURIADAS
• TIEMPO DE RESPUESTA
• INESPECIFICIDAD
• ALTERACION DE LA RELACION
INDICADOR / PATOGENO
(RECRECIMIENTO BACTERIANO)
• MONITOREO ( REPRESENTATIVIDAD)
 CONCLUSIONES

• No existen actualmente parámetros

indicadores confiables que aseguren la
ausencia de todos los microorganismos
patógenos
 CONCLUSIONES

• Por lo tanto además del monitoreo del

agua de consumo, cobran hoy
relevancia los estudios de
contaminación de
las fuentes
 CONCLUSIONES

• ES NECESARIO REEVALUAR LA
EFICIENCIA Y SEGURIDAD DE LOS
TRATAMIENTOS Y sistemas de
DISTRIBUCIÓN DE AGUA RESPECTO DE
LA REMOCIÓN DE MICROORGANISMOS
PATÓGENOS
 CONCLUSIONES

• DEBE IMPLEMENTARSE ESTUDIOS

PARASITOLÓGICOS Y VIROLÓGICOS
DE FUENTES DE CAPTACIÓN
 CONCLUSIONES
• EL PAÍS DEBE CONTAR CON
LABORATORIOS DE REFERENCIA
CON CAPACIDAD PARA INVESTIGAR
EN AGUA TODOS LOS
MICROORGANISMOS PATÓGENOS
QUE SE HAN MENCIONADO
• SE DEBE ENTRENAR A LOS
PROFESIONALES INVOLUCRADOS EN
EL TEMA EN LA DETECCIÓN DE
MICROORGANISMOS PATÓGENOS