BIOPELICULAS MICROBIANAS

Dr. OMLS
11 de junio de 2021
 Microbiota de la piel
• Piel del adulto= 2-6x106 bacterias/cm2
• Principales MO:
– Staphylococcus
– Micrococcus
– Corynobacterium
– Propiobacterium
– Malassezia
– Dermabacter hominis
• Distribución selectiva
– Zonas húmedas
 Mecanismos de defensa de la piel

• Contenido bajo de • 20 tipos de peptidos

humedad antimicrobianos
– Catelicidinas
– Inmunoglobulinas
• pH acido (5.5)
– Dermicidina

• Descamación continua de
estrato corneo • Ácidos grasos
– 9 gr de piel / día
 Biopeliculas o Biofilm
• Comunidad de microorganismos que se encuentran
adheridos a una superficie viva o inerte formando un
agregado, quedando envueltas en una matriz
extracelular de exopolisacáridos.
 Fases de formación
1. Adhesión reversible

2. EPS / Adhesión
irreversible

3. Desarrollo de
microcolonias

4. Crecimiento y proliferación

5. Dispersión de células

Annu. Rev. Microbiol. 2002. 56:187–209

 Propiedades de biofilm

• Bacterias: • Hibernación (subpoblación)

– Planctonicas (1%) vs Sésiles – Metabolicamente quiescente
(99%)
• Determinan el 80% de las
– Fenotipo alterado
infecciones humanas
• Prevalencia en las heridas
– 60% crónicas
• Protección contra sist.
– 6% agudas inmune y ATB
• Transferencia genética • 100 – 1000 veces mas
– Virulencia resistentes a los ATB.
– Resistencia
– Adaptación
Composición de biofilm

Componentes % total
Agua > 95%
Flora microbiana 2-5%
Polisacáridos 1-2%
Proteínas < 1-2%
DNA y RNA < 1-2%
Iones ?
 Biofilm: Ventajas esenciales
• Mas del 99% de todos los microorganismos
prefieren vivir en biofilm.

¿Por que?
4 Causas de la buena vida en biofilm
 # 1 Exopolisacaridos – La casa
• EPS
Polimeros de alto peso molecular integrados por
proteinas, acidos nucleicos, lipidos,
carbohidratos y otras macromoleculas.
• ¿Cual es su función?
Envolver a las células incrementando resistencia
ambiental y al sistema inmune.
 # 2 Gradientes de oxigeno
• 50% o más del volumen en el biofilm

• Flujo de oxigeno en el biofilm no es simplemente plano

– Flujo a través de espacios vacios
– Flujo a través de los canales

• Heterogenicidad en la distribución del O2 permite un desarrollo de

diversas bacterias
# 3 Resistencia a los antimicrobianos
# 3 Resistencia
# 4 Gran disponibilidad de nutrientes
Perfil de resistencia de Gram (+) de pie
diabético con y sin biofilm

A. Malik et al. / Diabetes 104 & Metabolic Syndrome: Clinical Research & Reviews 7 (2013) 101–107
Perfil de resistencia de Gram (-) de pie
diabético con y sin biofilm

A. Malik et al. / Diabetes 104 & Metabolic Syndrome: Clinical Research & Reviews 7 (2013) 101–107
 Fases de formación
1. Adhesión reversible

2. EPS / Adhesión
irreversible

3. Desarrollo de
microcolonias

4. Crecimiento y proliferación

5. Dispersión de células

Annu. Rev. Microbiol. 2002. 56:187–209

Infecciones asociadas a biopeliculas
 Biofilm en heridas

• Retrasa cicatrización
• 60% de las heridas crónicas = biofilm
• Solo 6% en heridas agudas
• Requieren dosis supraoptimas de ATB
 Marcadores clínicos
• Lecho descolorido o pálido
• Secreción o residuo amarillo
• Tejido necrótico esfacelado
• Olor ofensivo
• Fluido viscoso, pegajoso y transparente
• Tejido de granulación friable
 Diagnostico

• Clínico
– Signos y síntomas: Eritema, edema, hipertermia,
induración o secreción purulenta y dolor.

• Hiperglucemia, BHC, VSG y PCR alteradas.

• Radiografías.
Clasificación
 Biopsias de tejidos blandos
• Solo a lesión infectada
• Después de limpiar y desbridar ulceras
• Antes de iniciar Tx ATB
• Muestra del centro de la base de la ulcera
 Biopsia por punch
• Ligero, hoja de acero
extremadamente afilada.
• Estéril
• Fácil manejo
• Proporciona muestras
uniformes
• Diam: 2,3,3.5,4,5,6,8
mm
• Profundidad: 7 mm
Biopsia por punch
Biopsia con bisturi
 Osteomielitis
• Microorganismo llega a hueso vía hematógena
o invasión directa (Punción, Cx, Fractura Exp)

• Factores que afectan en su desarrollo

– Virulencia del agente etiológico
– Factores del huésped (Edad, comorbilidades,
inmunidad)
– Factores locales (Sitio afectado, cuerpo extraño,
vascularidad.
• Puede clasificarse en base al agente etiologico,
la ruta y duración.
• Acorde a la duración: Aguda, Subaguda o crónica.

• Niños: Afecta con mayor frecuencia los huesos

largos.

• Adultos: El sitio mas comúnmente afectado es la

columna vertebral.

• Diabéticos: Osteomielitis en miembros inferiores.

 Diagnóstico de OM
1. Sospecha clínica

2. Estudios de laboratorio
– BHC: Leucocitosis
– Elevación de VSG y PCR
– Hemocultivos
– Cultivo

3. Radiologia
– Rayos X
– Gamagrama
– RMN
– TAC

4. Anatomía patológica (Gold estándar)

– Biopsia / Cultivo
 Diagnóstico de OM
• Signos clínicos y de laboratorio
– Tamaño > 2 cms2
– Profundidad > 3 mm
– VSG > 70 mm/ hr
 Diagnóstico de OM
• Radiografías
• Muestran cambios 2 semanas después
– Limitado valor dx al inicio de la enfermedad.
– Después de14-21 días cambios evidentes ( del 30-
50% en la densidad osea)
• Sen 55%, Esp 75%
• Reacción periostial, erosiones corticales, osteopenia
focal, esclerosis, secuestro óseo.
 Cambios radiologicos

• Reacción
periostial
• Erosiones
• Osteopenia
• Esclerosis
• Secuestro oseo
 Diagnóstico de OM
• Escaneo óseo con Tc 99
– Permite localización temprana del proceso infeccioso (48
hrs)
– Gran utilidad en sitios de difícil acceso (Cadera, pelvis,
vertebras)
– Sen 85%, Esp 45%

• Escaneo con Leucocitos

– Sen 85%, Esp 75%
– In 111
 Diagnóstico de OM
• IRM
– Sen 90%, Esp 80%
– Útil para diferenciar infección de hueso Vs ITB
– Prótesis metálicas ocasionan interferencia
– Falso (+) con tumores o fracturas consolidadas.
 Diagnóstico de OM
• Probe-to-bone test
• Sen 87%, Esp 91%
• Introducir sonda esteril con punta roma, a
través de trayecto fistuloso y si se toca hueso
es positiva.
Criterios para biopsia de hueso.
 Diagnóstico OM
• Biopsia / Cultivo
• No cultivar heridas no infectadas
• Evitar hisopados (Sen49%, Esp 62%)
• Obtener muestras después de limpiar y desbridar
ulceras
• Antes de iniciar Tx ATB
• Agujas para hueso del No. 11
 Diagnóstico OM

• Microbiologia: Gram y cultivo

• Histopatología: 3 posibles cuadros.
 Diagnóstico OM
• OMA: Necrosis e infiltración de PMN en
cortical y medula, así como congestión o
trombosis de vasos.

• OMC: Destrucción ósea, infiltración de

linfocitos, células plasmáticas o histiocitos

• OMCA: Datos de OMC + Infiltrado de PMN

Concordancia cultivos Herida/fistula Vs
hueso
 MICROBIOLOGIA

S. Aureus: 93.5%
Enterococo F: 71.%
Pseudomona: 52.2%
SCN: 45.7%
Proteus SP 41.3
Anaerobios 39.1%

Biofilms in wounds: a review of present knowledge. J Wound Care. 2014;23(11):570

 Microbiología
• Flora microbiana en las ulceras parece cambiar a
través del tiempo.

• Ulceras agudas ó naive a tratamiento: predomina

flora normal de la piel.

• S. Aureus y Streptococo agalactie, pyogenes y

SCN (epidermidis, haemolitycus, saprophiticus,
lungdunensis, hominis).
 Microbiología
• Después de 4 semanas:
• Bacilos Gram (-)
– Proteus s.p, E. coli y Klebsiella (Pseudomona)

• Si las ulceras progresan y las estructuras

profundas son afectadas:
– Polimicrobianas
– Anaerobios son comunes
 Microbiología
• Ulceras crónicas

– Mas anaerobios que aerobios.

– Otros bacilos Gram (-) se adquieren de superficies
ambientales (baños y hospitales)
• Pesudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas
• Asociados a un marcado deterioro debido a
endotoxinas, enzimas y exotoxinas
 Microbiología
• En resumen: Ulceras tempranas,
principalmente organismos Gram +.

• Ulceras crónicas de varios meses de evolución

con afección de estructuras profundas, puede
tener un promedio de 4-5 patogenos,
incluyendo anaerobios.
 Manejo

• Mas que buscar elegir el mejor antibiotico, estas

lesiones deben desbridarse amplia y rápidamente.
• Controlar los factores predisponentes y propicios
para una infección (Hiperglucemia, nutrición,
deformidades óseas, hidratación, etc), por lo que
el manejo multidisciplinario siempre será el mas
adecuado (Med Int, Cirugia, T y O, Infectologia,
nutrición, etc).
 Como elegir el antibiótico

• ¿Existe evidencia de infección?

• Determinar la severidad
• Existe antibioticoterapia reciente
• Factores de riesgo para SARM
• Factores de riego para Pseudomona
 Tratamiento
Datos clínicos de infección
NO SI
No requiere ATB ni Obtener muestra(s)
Cultivos. representativa(s) para Cx.

Infección severa

NO SI
Cobertura contra Gram
Cobertura contra cocos
negativos, pseudomona
Gram positivos
y SARM (Valorar)

Ajustar tratamiento acorde a Cx , patrón Ciprofloxacino

de sensibilidad en ATB y respuesta clínica
Dicloxacilina Levofloxacino
Cefalexina Ceftriaxona
Clindamicina Ertapenem
Amoxiclav Cefepime
Metronidazol / Clindamicina Pipe/Tazob
Meropenem
 Tratamiento
Severidad Tx empirico Dosis Activo Vs SARM Duración

Dicloxacilina 500 x 4 NO
Cefalexina 500 x 3 NO
LEVE 7-14 días
Clindamicina 300-600x 3 SI
Amoxiclav 500x 3 NO
Ciprofloxacino* 500 -750**x 2 NO
Levofloxacino* 500-750**x 1 NO
Ceftriaxona* 1-2 gr x 1 NO
MODERADA 14-21 días
Clindamicina 600x 3 SI
Metronidazol 500x 3 NO
Ertapenem 1 gr x 1 NO
Ertapenem 1 gr x 1 NO
Ceftazidima*/*** 1-2 gr x 3 NO
SEVERA Cefepime*/*** 1-2 gr x 3 NO 14-21 días
Pip/Tazobac 4.5 gr x 3 NO
Meropenem 1 gr x 3 NO

En infecciones moderadas o severas si existe sospecha o evidencia de SARM agregar Vancomicina.

*En combinación con clindamicina o metronidazol
**Dosis para pseudomona
***2 grs cada 8 hrs dosis para pseudomona
Tratamiento
• Intervención durante los primeros 2 días.
– Disminución de la mortalidad. OR 0.87%
– Disminución en reingresos. OR 0.97%
– Disminución de los días de estancia
intrahospitalaria
– Disminución en los costos.

Impact of ID Specialty Interventions Cilinical Infectious Disease 2014:58 (1 January)

• Impact of an infectious diseases consultation service on the
quality of care and the survival of patients with infectious
diseases.

• BACTERIEMIAS POR S. AUREUS:

– Disminuye la estancia hospitalaria y la mortalidad a 30 dias en cerca del 40%.

• UCIA , POST TRANSPLANTADOS, NEUMONIA, BACTERIEMIAS

– Tratamiento empirico y dirigido apropiado.
– Identificacion exitosa del agente etiologico
– Des escalamiento oportuno del tratamiento antimicrobiano
• Disminuye costos y la generacion de resistencias
Z. Evid. Fortbild. Qual. Gesundh. wesen (ZEFQ) (2015) 109, 500—510
 Conclusiones
• Comunidades ubicuas de MO en constante cambio.
• Se encuentra en heridas crónicas retrasando la
cicatrización
• Marcada resistencia al estrés ambiental, respuesta
inmune y ATB
• 80% de la enfermedades se relacionan con biofilm
• Microscopia electrónica y técnicas moleculares
• Desbridamiento periódico piedra angular.
 Desbridamiento
• Ocasiona eliminación mecánica del biofilm.
• Suprime transitoriamente la formación de colonias.
• Incrementa su vulnerabilidad a la acción de los agentes
antibacterianos y a los mecanismos inmunológicos de
defensa.
• Genera condiciones óptimas en el lecho de la herida, al
eliminar el tejido mal perfundido y desvitalizado. (El lecho de
la herida a nivel y con buena perfusión contribuye a evitar la
adhesión del biofilm).
• Necesaria la repetición del procedimiento, con la finalidad de
mantener el biofilm en estado debilitado y susceptible