PRACTICA N°08:

AISLAMIENTO Y CULTIVO MG. MARIEL V. ALVAREZ.

DE BACTERIAS LACTICAS
OBJETIVOS:
 
 Conocer los medios utilizados para cultivar las bacterias lácticas
 Aislar bacterias lácticas.

MG. MARIEL ALVAREZ R.

REVISION BIBLIOGRAFICA

BACTERIAS ÁCIDO-LÁCTICAS
Gram +, inmóviles, no esporulantes, anaeróbias facultativas o microaerófilas,
pueden ser mesófilos o termófilos. pH óptimo de crecimiento entre 4 y 4,5.
Son microorganismos auxótrofos.

GÉNERO MORFOLOGÍA TEMPERATURA DE TIPO DE

CRECIMIENTO FERMENTACIÓN
Streptococcus Cocos Mesófilos Homofermentativa
Leuconostoc spp Cocos Mesófilos Heterofermentativa
Lactobacillus spp Bacilos Mesófilos o Homofermentativa
termófilos Heterofermentativa
Lactococcus spp Cocos Mesófilos Homofermentativa
Pediococcus spp Cocos Mesófilos Homofermemtativa
Heterofermentativa
REVISION BIBLIOGRAFICA

Streptococcus lácticos: su reservorio natural es la leche, vegetales, y

del rumen, se pueden aislar utilizando los medios MRS (DE MAN y col;
1960), el medio M17 (TERZAGHI y SANDINE, 1775), que tiene un pH
de 7,15; aquí el crecimiento es rápido y las colonias son de gran
tamaño.

Agar Man Rogosa y Sharpe (M.R.S.) 

 REVISION BIBLIOGRAFICA

Streptococcus thermophylus, se aísla de leche calentada a 45-50ºC o leche

pasteurizada, yogurt. Se puede utilizar el medio M17 a un pH de 6,8.

Agar M17 
 REVISION BIBLIOGRAFICA

Genero leuconosctoc: Son cocos o en cadenas, heterofermentativos, producen D

(-) lá ctico, etanol, CO2 El medio mas utilizado es el MRS, pero puede utilizarse el
medio KCA (NICKEL Y LEESMENT) con citrato de calcio se mejora con la adició n
de Mn 2+ (10 mM).

Leuconostoc en MRS 
 REVISION BIBLIOGRAFICA

Genero lactobacillus: Se aíslan del queso, kefir, choucroute, ensilados, carnes frescas o
fermentadas y del intestino humano. El más utilizado es el MRS con acetato, citrato y Tween 80
como fuente de oleato; su pH esta ajustado a 6,5; pero con frecuencia se utiliza a 5,5 para
seleccionar mejor este grupo.
Para aislar L. acidophilus intestinal se utiliza el medio Rogosa, con la adición de una sal biliar como
el oxgall (bilis de ternero deshidratado) al 5%
El medio MRS con 0,2% de oxgall al 0,2% se obtiene un mejor crecimiento de L. acidophilus.

Lactobacillus en MRS 
 REVISION BIBLIOGRAFICA

Pediococcus: Se desarrollan en el medio MRS con un pH de 6,2 o en presencia de ácido sórbico o

acetato de talio, no son selectivos. Otro medio es el ATP o medio Elliker. Estas bacterias pueden
liofilizarse o mejor congelarse en presencia de diversos crioprotectores.

Pediococcus en MRS 
 REVISION BIBLIOGRAFICA

Bifidobacterium. B. longun se desarrolla mejor en el medio LSD con sal de

tetrazoleo. El á cido propionico añ adido en proporció n de 5 g/L al medio
comercial Columbia (Pasteur Production) acidificado hasta 5,0; no inhibe las
distintas especies de Bifidobacterium y permite aislar en presencia de otros
géneros. Las colonias aparecen a los 3 días a una temperatura de 37ºC.
Para el aislamiento de cepas a partir de material fecal es preferible el á cido
propionico a una concentració n de 10 g /L.

B. longum 
MATERIALES Y EQUIPOS

Medio MRS (de MAN ROGOSA)

Cultivo de Lactobacillus acidophylus
Incubadora bacteriológica.
Asa de Kholle
Mechero
 

MG. MARIEL ALVAREZ R.

PROCEDIMIENTO

Realizar la coloración de Gram, para reconocer el L. acidophylus y luego

sembrar en estrías en una placa que contenga el medio MRS, colocar
las placas en la incubadora a 37ºC por 48 horas.

MG. MARIEL ALVAREZ R.

V.- RESULTADOS
Realizar las características culturales de las colonias.
 
VI.- CUESTIONARIO
Cuáles son las bacterias lácticas consideradas como probióticas y porque?
Que bacterias lácticas son usadas en los productos cárnicos, productos vegetales y
productos lácteos?
Describa la metodología para obtener bacterias lácticas.
Cómo pueden afectar los bacteriófagos a las bacterias ácido lácticas?
 

MG. MARIEL ALVAREZ R.

BACTAERIAS LACTICAS
https://www.youtube.com/watch?v=OTTdvIXkHcA

MG. MARIEL ALVAREZ R.