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 INTRODUCCIÓN
 La hemoglobina es la sustancia de más importancia que contiene el eritrocito, ya
que es una proteína y que le da el color rojo. A través de ella se acarrea oxigeno
desde los pulmones a todos los tejidos del organismo. La hemoglobina también
transporta bióxido de carbono, que es le producto de deshecho del proceso de
producción de energía, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aie.
 Sus cifras normales dependen de varios factores como son la edad, sexo, la
ubicación geográfica, etc.
 La hemoglobina se mide en gramos por decilitro (g/dl), y representan la
cantidad de esta proteína por unidad de volumen. Este parámetro debe ser uno
de los cuales puede definir si hay o no anemia, es decir, solo si las cifras de
hemoglobina son inferiores a los valores normales puede asegurar que existe
una anemia.
 Ester parámetro que se va a determinar normalmente en el estudio completo de
la biometría hemática, de la serie roja.

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 FUNDAMENTO
Consiste en hacer reaccionar la sangre con un reactivo
que contiene cianuro y ferrocianuro potásico (reactivo de
Drabkin), que oxida la hemoglobina a metahemoglobina
la cual a su vez pasa a cianometahemoglobina. La
intensidad de color de este compuesto se mide
fotocolorimétricamente. Los resultados se llevan a una
curva estándar realizada con soluciones de
cianometahemoglobina comercial, de donde se
extrapolan las concentraciones de hemoglobina de las
muestras problema.

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 PROCEDIMEINTO
1. Desinfectar la yema del dedo con alcohol, secándola
posteriormente con algodón. Utilizar siempre guantes y
lancetas estériles.

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Punción venosa

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 PROCEDIMIENTO
2. Punzar la yema del dedo con la lanceta y presionar el
mismo para que salga sangre.

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 PROCEDIMIENTO
3. Se obtiene la sangre por punción capilar, de la que se toman
directamente 0.02 ml con una pipeta SALLI de hemoglobina.

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 PROCEDIMIENTO
4. Se llevan los 20 µl de sangre a un tubo de ensayo
que contiene 5ml de reactivo Drabkin. Agitar por
inversión varias veces y dejarlo reposar durante 10
minutos.

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 PROCEDIMIENTO
5. Ajustar el espectrofotómetro a 540 nm, calibrar con el
blanco llevando a “cero“ la absorbancia, y la
transmitancia a 100 presionar MODE. Y saldra 1.999 en
la pantalla.

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7.- Posteriormente ajustando el 100 por ciento de
transmisión con otro tubo de ensayo que solo
contenga 5ml de reactivo Drabkin (tubo de la derecha
de la foto adjunta)..

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REPORTE DE RESULTADOS.
DENSIDAD OPTICA DEL PROBLEMA factor 36.77=HEMOGLOBINA g/dl

DENSIDAD OPTICA DEL PROBLEMA

__________________________________X CONC. DEL ESTANDAR= Hb gr/dl
DENSIDAD OPTICA DEL ESTANDAR
 EL RESULTADO DE LA CONCENTRACION DE LA HEMOGLOBINA
UTILIZANDO LA CURVA DE CALIBRACION.

VALORES NORMALES DE HEMOGLOBINA

 R/N 13.5 – 19.5 gr/dl
 3 meses 9.5 – 12.5 gr/dl
 1ª 11 – 13 gr/dl
 3-5 a 12 – 14 gr/dl
 5-51 a 11.5 – 15 gr/dl
 Hombre adulto 13 – 16 gr/dl
 Mujer adulta 11.5 – 14.5 gr/dl

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Construcción de la curva a estándar.-    De un
estándar comercial de cianometahemoglobina (que
contiene 20g/100ml) tomar 1, 2, 3, 4 y 5 ml y ponerlos
respectivamente en 5 tubos de ensayo. Añadir a cada
tubo reactivo de Drabkins hasta completar un
volumen total de 5ml. Los tubos estándar así
preparados representan 4, 8, 12, 16 y 20g de
hemoglobina/100ml de sangre respectivamente. Se
leen a 540 nm frente a un tubo que solo contenga
reactivo Drabkin. Se construye la curva estándar como
se indica en la página siguiente. Esta curva nos servirá
mientras estamos utilizando los mismos reactivos.
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!! GRACIAS !!

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