CARACTERIZACIÓN DE GRASAS Trabajando con grasas El termino grasa se refiere a los lípidos que son sólidos a la temperatura ambiente, mientras que los términos aceites se usan para los que son líquidos. Para términos de etiquetado el termino de grasa total se refiere a la cantidad total de ácidos grasos y es expresado como trigliceridos Grasa saturada es definida como la suma (en gramos) de todos los ácidos grasos sin doble enlace. Grasa poliinsaturada definida como cis, cis-metileno, poliinsaturada interrumpida Grasa monoinsaturada definida como la monoinsaturada cis acido graso Caracterización de la grasa
Medir la estabilidad del producto, lo que tiene importantes consideraciones
desde lo que es la vida en anaquel y el determinar aspectos de toxicidad del producto como óxidos del colesterol, malonaldehido, etc. Las pruebas de caracterización permite pro ejemplo, analizar la composición de los ácidos grasos a fin de determinar los posibles impactos en la salud del consumidor como en los niveles de colesterol, etc. La caracterización también permite evaluar la inclusión de productos no lipidicos como Olestra u otros sustitutos de lípidos que no contribuyan con las nueve calorías típicas de los otros lípidos. Determinación del índice de Peróxido Metodo de la A.O.A.C. 48,1965 Definido como el numero de miliequivalentes(mEq) de peroxido o grupos hidroperoxidos, los productos inicciales de la oxidacion de lipidos. Reactivos Acido acetico( 3 volumenes) cloroformo(2 volumenes) Solucion de ioduro de potasio saturada. Disolver un exceso de solido debera ser probada diariamente adicionando 0,5 ml de esta solucion a 30 mL de acido acetico, cloroformo,luego adicionar 2 gotas de la solucion del indicador de almidon al 1 %. Se eliminara la solucion si se necesita mas de una gota de 0,1 N Na S2O3 para eliminar el color del almidon. Solucion de Tiosulfato d sodio 0,1N preparada recientemente con agua hervida fria y estandarizada. Fundamento
La grasa de un aceite o alimento es disuelta en acido acético glacial-
isooctano (3:2). Después de adicionar un exceso de ioduro de potasio el cual reacciona con los peróxidos, liberando ioduro. La solución es entonces titulada con una solución estandarizada de tiosulfato de sodio usando un indicador de almidón. Índice de cloro para análisis en mantequilla Para el caso de margarinas fundir la muestra por calentamiento con constante agitación en una plancha de calentamiento a baja temperatura en un horno de aire a 60-70ºC. Evitar el excesivo calor y la exposición por tiempo muy largo a temperaturas superiores a los 40ºC. Cuando este completamente fundida dejar reposar en un lugar tibio hasta que la mayor parte de los sólidos han precipitado. Decantar el aceite en un vaso y filtrar con whatman Nº4. No recaliente a menos que sea necesario obtener un filtrado claro. Proceder a determinar el índice de cloro. Determinación del índice de Iodo El índice de Iodo es definido como el grado de instauración, el numero de dobles enlaces carbono carbono en relación con la cantidad de grasa o aceite. El índice de iodo es definido como los gramos de iodo que son absorbidos por 100 g de muestra. Cuando mas alto sea el grado de instauración, mayor cantidad de iodo sera absorbido, de esta manera cuando mas alto sea su valor de iodo, mas alto sera su grado de instauración. Determinación del índice de Saponificación
Se define como la cantidad de alcali necesaria para saponificar una
cantidad fija de grasa o aceite. Se expresa como los miligramos de KOH requeridos para saponificar 1g de muestra: P.M.Triglicerido = PM. Promedio de acido graso A menor I.S. mayor el PM promedio de los ácidos grasos El valor calculado de I.S no es aplicable para grasas y aceites que contengan una gran cantidad de material insaponificable tal como ácidos grasos libres y mono y di gliceridos Principio del Índice de Saponificación
La saponificación es el proceso d ruptura o degradación de una grasa
neutra como un triacilglicerol en glicerol y ácidos grasos, por tratamiento de la grasa con el álcali La muestra es tratada con un exceso de solución alcohólica de hidróxido de potasio, luego se determina la cantidad de hidróxido que no reacciona con la muestra mediante una titulación con HCl en presencia de fenoltaleina. Calculo del Índice de saponificación Siempre correr un blanco B: titulación del blanco, ml S: titulación de la muestra, ml N: normalidad del HCl 56,1 P.M. del KOH I.S. = (B-S)+N+56,1 Peso de muestra (g) Prueba de acido Tiobarbiturico Es unmetodo indirecto que requiere destilacion del producto alimenticio previo a la determinacion de sustancias reactivas al TBA. Durante la destilacion (a pH 1,2) se elimina sustancias interferentes. Luego el destilado se hace reaccionar con el acido TBA en baño maria en ebullicion por 35 minutos.Las determinaciones espectrofotometricas se realizan a 530nm. Se construye la curva de calibracion con malonaldehido Principio del Acido Tiobarbiturico Esta prueba esta orientada a cuantificar un producto secundario de la oxidación de lípidos. El acido malonaldehido y productos relacionados. Estos componentes reaccionan con el TBA formando compuestos coloreados que son determinados en un espectrofotómetro. Los resultados son reportados como TBARS(sustancia reactiva al acido tiobarbiturico). Características de los resultados TBARS Los resultados correlacionan bien con los de las evaluaciones sensoriales Sin embargo la presencia de acido malonaldehido en los productos enranciados también es temporal pues con el tiempo esta sustancia va reaccionando con otros componentes del alimentos y desapareciendo. Generalmente usa cantidades de muestra un poco grandes y es frecuente su uso en la evaluaciones de productos cárnicos. Métodos alternativos
Un método alternativo para determinar el malonaldehido del destilado de
la muestra es utilizar técnicas cromatografías como las de un HPLC. Técnicas de Separación de Lípidos Usando cromatografía de capa fina TLC
El material absorbente para la capa fina de la placa para CCF/TLC puede
ser silica gel G y la fase móvil (solvente de elución) una mezcla de solvente tales como: hexano, eter dietílico, acido fórmico (80:20:2 por volumen). Después de la corrida cromatografía las placas son salpicadas con una sustancia reveladora tal como 2´,7`-dihidrofluorosceina en metanol y colocadas bajo una luz ultravioleta para identificar unas bandas amarillas en un fondo oscuro.