Biotecnología reproductiva equina

Ana María Patiño Rodríguez

Christian Fernando Torres Angulo
Viviana Alejandra Góngora Guarnizo
 Introducción
Serie de biotécnicas que
permiten aumentar la
eficiencia reproductiva y
las tasas de
mejoramiento genético
de los animales
contribuyendo de esta
forma a desarrollar la
producción del sector.
 Criopreservación
Proceso de congelar muestras para
reducir su actividad metabólica y
mantenerlas a temperaturas muy
bajas durante tiempos prolongados
Posibilita almacenar espermatozoides, ovocitos
y embriones de una amplia variedad de especies
animales, domésticas y silvestres, sin que
pierdan su capacidad de desarrollar y nacer
vivos (Cabodevila & Teruel, 2001).

Reducir considerablemente
el número de individuos
necesarios para mantener
una población viable y, por
lo tanto, reducir las
necesidades de espacio que
se requieren para el
manejo reproductivo de
una especie.
Materiales
 Inseminación artificial
Introducción del semen en el
tracto genital de una hembra

Este sistema ha sido de gran

ayuda en diversas especies
domésticas

Se ha perfeccionado y simplificado
para usarse en caballos y, es así,
que numerosas razas lo han
adoptado en todo el mundo.
 Inseminación artificial con semen fresco

Recolectar y
Dividirlo en Inseminar a
evaluar el
dosis las yeguas
eyaculado
 Inseminación artificial con semen
refrigerado
Dependiente de la calidad y respuesta seminal

Se refrigera a 4°-5°C por 24 a 48 hrs.

La logística es importante en la implementación de este

sistema

Los resultados son muy variables entre reproductores

Los índices son muy semejantes a la monta natural

Inseminación artificial con semen
congelado
Ventajas Desventajas

Seguro, económico y practico Desinformación

Actividades normales Tasa de concepciones bajas

Reducción del no. de reproductores

Selección de los mejores

reproductores

Preservación por varios años

Técnica de inseminación artificial en
yeguas
IA Profunda
• Se deposita el semen en el
cuerno uterino ovulado

IA Transcervical
• Se deposita el semen en el cérvix
Materiales
Preparación de la yegua para la
inseminación
 Preparación del médico veterinario
Deberá utilizar un guante
de palpación estéril,
después sujetara una
pipeta de inseminación
con el dedo índice y la
palma de la mano para
asegurarse que la punta
de la pipeta este
protegida por un
ambiente estéril.
 Preparación del semen
El semen utilizado para
inseminar a la yegua deberá
estar en una jeringa no
espermicida y protegido
(mediante la mano no estéril del
operador) de condiciones
adversas del ambiente como los
rayos ultravioleta o temperatura
ambiental extremadamente fría
o caliente.
Tratamiento médico que consta de procedimientos
médicos y biológicos

Durante la fertilización in vitro, se recolectan

óvulos maduros de los ovarios y se los fecunda con
espermatozoides en un laboratorio

Después, el óvulo o los óvulos fecundados (embrión

o embriones) se implantan en un útero. 

FERTILIZACION IN VITRO
 FERTILIZACION IN VITRO

Biotecnología que ha Utilizada para la obtención de

venido tomando fuerza a descendencia de animales de
nivel mundial en los muy alto valor genético y
últimas dos década comercial

Puede utilizarse en yeguas sub fértiles,

yeguas de edad avanzada o yeguas con
problemas en la ovulación
 OBTENCION DE OVOCITOS

Matadero cuando Aspiración

las hembras son folicular
sacrificadas transvaginal

Existe variabilidad en el Es guiada por ecógrafo, la

tiempo de obtención de cual permite obtener los
los ovocitos folículos pre ovulatorios

De folículos inmaduros
provenientes de yeguas
Al llevarla al laboratorio
vivas,igualmente se
puede afectar su posterior
pueden obtener ovocitos
maduración
mediante la
superovulacion
 Los gametos femeninos
recuperados por las diferentes
PROCEDIMIENTO
técnicas
de recolección se someten a
fertilización in vitro mediante la
técnica de ICSI (inyección
intracitoplasmatica
de espermatozoides)

Producción (cultivo in vitro)
del embrión hasta etapa de
blastocito para
luego ser transferido
directamente al útero de la
yegua receptora.
Esta producción de
embriones in vitro está
compuesta por las 3 etapas
previamente mencionadas
que pueden ser desarrolladas
por diferentes técnicas, pero
siempre manteniendo la
temperatura, pH y CO2
requerido para cada
procedimiento (3)(4).
 Se destaca la trasferencia de
Estas técnicas se han optimizado dado que la
ovocitos, y la inyección
fertilización in
intracitoplasmatica de
vitro estándar se considera muy ineficiente,
espermatozoides (ICSI)
considerándose el endurecimiento de la zona
pelucida

En general la ICSI es una alternativa

Los factores que pueden
afectar el éxito de la FIV son
los asociados al semen, en
donde el contenido de
colesterol del plasma
seminal puede afectar la
tasa de capacitación al
alterar la orientación, la
fluidez y el
grosor de la membrana
plasmática
exitosa para la fertilización in vitro
comercial, tratando incluso
problemas de infertilidad en el macho
como en la hembra para la obtención
de embriones
Otro aspecto
importante señalado, es que el semen de los
reproductores se puede descongelar, diluir en
menor
concentración y volver a congelar sin afectar el
desarrollo del embrión después de la ICSI
recuperación de ovocitos de
folículos maduros e
inmaduros de yeguas vivas o
postmortem
mediante técnicas como:
laparotomía o laparoscopia, punción
mediante el flanco con aguja larga o
la aspiración folicular intravaginal
guiada con ecógrafo
para una posterior
Estos ovocitos pueden ser
maduración de los ovocitos
transferidos directamente
obtenidos in
al oviducto de una yegua
vitro
receptora o puede llevarse
el embrión hasta una etapa
de mórula compacta o
blastocito temprano (8 días
una vez que este alcanza una fase después) (cultivo in vitro)
óptima de metafase II son para ser transferido vía
fertilizados mediante ICSI transcervical al útero de la
yegua receptora.
Esta técnica consiste en inyectar un
espermatozoide en el citoplasma del
ovocito con la ayuda de microscopio y
micromanipuladores
 Aspiración folicular

Permite aumentar el número de crías de

yeguas donantes con alto valor genético

Esta técnica abre la posibilidad del uso de

diferentes técnicas como transferencia de
ovocitos, ICSI y en menor medida
fertilización in vitro
 Semen sexado
Es una técnica que detecta diferencias en el contenido de ADN del
cromosoma entre los espermatozoide, por medio de la citometria de
flujo (Beltsville)

El cromosoma Y El cromosoma X

Machos Hembras

Esto es posible gracias a la relativa diferencia existente en el tamaño

entre ambos cromosomas, ya que el cromosoma X contiene mas ADN
que el cromosoma Y.
Identificar el cromosoma
de los espermatozoides,
promedio de un
colorante especifico que
tiñe el ADN denominado
Hoechst 33342 a 34°c.
Una vez teñidos, se
introducen en el
citómetro de flujo
alineados en el fluido
envolvente (solución
salina tamponada)
Un laser ultravioleta
incide sobre el
espermatozoide excitando
el Hoechst 33342
induciendo la máxima
fluorescencia del ADN.

Cada una de estas Una vez el ADN Se recogen en

gotas se carga analizado, un cristal
detectores de 0°
eléctricamente, para piezoeléctrico
pasar por una placa interrumpe el flujo para (orientación) y
deflector. crear gotas individuales. 90° (ADN).

Espermatozoides X
(carga +)
Espermatozoides Y
(carga -)
• Procedimiento de separación
FACS (Fluorescence-Activated
Cell Separation).
• Citómetro de flujo (“Cell
Sorter”)
• Hoechst 33342 se une a
regiones ricas en Adenina y
Timina.
• La incubación requiere de al
menos 90 min.
• Un problema es la turbidez de
los diluyentes del semen
• La concentración de
espermatozoides sexados en
promedio 8 x 10⁵
Representación de diferentes cabezas de espermatozoides de distintas
especies lo cual influye en la capacidad de división de las mientras.
Aquellos espermatozoides con cabeza más aplanada y ovalada serán más
fáciles de orientar en el “ Cell sorter”.

Sorting
Según el diagrama anterior, tanto los espermatozoides del caballo como los del
hombre tendrían los índices de divisibilidad más bajos de todos.
 Ventajas
• La capacidad de programar la producción hacia un sexo determinado.
• La capacidad de las empresas de selección para desviar sus
producciones a líneas macho o hembras según la programación
comercial de sus actividades.
• La posibilidad de acelerar y mejorar los programas de mejora
genética.
El 6 de agosto de 1998
nació la primera cría
equina producto de
espermatozoides sexados.
 Transferencia de embriones
Es una técnica por el cual se recolecta uno o más embriones a través de un lavaje
uterino transcervical de una yegua donante inseminada o servida por monta natural, 6
a 10 días post-ovulación, y se transfiere al útero de otra yegua receptora sincronizada
previamente.
Factores importantes:
Fertilidad de semental
Edad y condición reproductiva de la donante
Correcta detección de la ovulación
Condición reproductiva/nutricional/sanitaria y edad de la receptora
Entrenamiento del operador
Tipo de semen a utilizer
Condicion reproductive actual
 • Realizar examen completo de evaluación reproductiva.
• Durante el celo es examinada contantemente para
Yegua evaluar crecimiento folicular y momento exacto de la
ovulación.
donante • Ovulación es inducida GCH (5UI/Kg EV o IM) o Acetato
de deslorelin 2.2 mg pellet

• Deben tener ciclos estrales normales y libres de

anormalidades uterinas y ováricas.
Yegua • Edad optima de 3 a 10 años.
• La sincronización de la yegua receptora prostaglandina
receptora F2α PGF2α
 Los embriones son
Los embriones debe El embrión es contenido
selectivamente
en un pequeño volumen
transportados a través estar en estadio de
de medio (< 250 µl) en
del oviducto hacia el mórula compacta a una pajuela o en otro
útero entre los día 7-8 blastocito temprano tipo de capilar
post-ovulación.

Se deposita el embrión
Se introduce la pistola en el cuerpo uterino o en
inseminación. alguno de los cuernos
uterinos.
Lo embriones pueden ser:
Refrigerados
Congelados
Vitrificados
 Ventajas
• Históricamente la transferencia embrionaria ha dado los mejores y
mas consistentes resultados de preñez.
• El transporte de los embriones permite que mas veterinarios ofrezcan
el servicio de transferencia a los clientes.
• La obtención de un mayor numero de potrillos por año y por yegua

Reportada por
primera vez en 1972
en Gran Bretaña por
Oguri y Tsutsumi
 Clonación
• Es la proceso por la cual se consiguen, de forma asexual, copias
idénticas de un organismo, célula o molécula ya desarrollado,
mediante una técnica de micromanipulacion llamada transferencia
Nuclear.
 Ventajas
• Preservación de especies.
• Posibilidad de clonar órganos.
• La solución al problema del hambre: clonación de animales, plantas
en cantidades necesarias.
 Bibliografía
• http://www.urp.edu.pe/pdf/biologia/BIOTECNOLOGIA.pdf
• https://
repository.ucc.edu.co/bitstream/20.500.12494/11305/2/2019_consideraciones_aspiraci
on_folicular.pdf
• http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1900-96072011000100006
• http://www.urp.edu.pe/pdf/biologia/BIOTECNOLOGIA.pdf
• http://
www.produccion-animal.com.ar/produccion_equinos/produccion_equina_en_general/8
5-clonacion.pdf
• http://
www.produccion-animal.com.ar/produccion_equinos/curso_equinos_I/14-reproduccion
_y_biotecnologias.pdf
• https://
ddd.uab.cat/pub/trerecpro/2012/103206/Transferencia_embrionaria_en_equidos.pdf
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